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DB21DB21/T2743—2017動物源細菌抗菌藥物敏感性檢測Bacterialantimicrobialsusceptibilitytestingofanimalorigin遼寧省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布IDB21/T2743—2017本標準起草單位:遼寧省獸藥飼料畜產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中心、中國獸請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別這些1DB21/T2743—2017本標準規(guī)定了動物源細菌常見藥物的微量肉湯稀釋法藥物敏感性試驗所需的試劑和材料、儀器設(shè)本標準適用于動物源非苛氧菌常見抗菌藥物的微量肉湯稀釋法件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗試劑和材料稱取8.50g(精確到0.01g)分析純氯化鈉,加入1L蒸餾水溶解后121℃2DB21/T2743—2017使用標準品或?qū)φ掌?,參照中華人民共和國獸藥典或CLSI的M07-A10、M37-A3和M45-A3進行溶解。4.7藥敏檢測板按產(chǎn)品說明進行操作使用。4.8質(zhì)控菌株應選用來自國家級微生物菌種保藏中心的標準菌株或具有資質(zhì)的菌種保藏機構(gòu)提供的分類明確的菌株。質(zhì)控菌株的使用代次為3~5代,質(zhì)控菌株應至少30天更換一次,由凍干或超低溫冷凍保存菌種移種或購買新菌種。5儀器設(shè)備5.1恒溫培養(yǎng)箱:精度36±1℃。5.2分析天平:感量為0.01g和0.00001g。5.3無菌操作臺:可滿足無菌要求的生物安全柜、超凈臺或無菌室等。5.4多道移液器:量程20~200μL、100~15.5麥氏比濁儀:量程0~5MCF。5.6自動加樣器。5.7藥敏結(jié)果判定儀。6測定程序動物源細菌抗菌藥物敏感性檢測程序見圖1。圖1動物源細菌抗菌藥物敏感性檢測程序圖3DB21/T2743—2017用接種環(huán)挑取瓊脂平板上培養(yǎng)16~18小時的3~5個單菌落,用0.85%無菌生理鹽水或M-H肉用于制備抗菌藥物儲備液的溶劑和稀釋液,除蒸餾水可高壓滅菌外,其余應采用0.22μm微孔濾膜將加有菌液和抗菌藥物的板,置36±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16~1在質(zhì)控菌株的最低抑菌濃度符合規(guī)定范圍的前提下,按判斷標準判斷被檢菌株的敏感性-敏感(S)、中度敏感(I)或耐藥(R)。對于只給出敏感判斷標4DB21/T2743—2017考美國臨床實驗室標準化委員會CLSI的M07-A10、M37-A3和M45-A3的要求進行質(zhì)量控制,按CLSI的M100-S26和M31-A3的臨床折點判斷標準進行耐藥性判讀和結(jié)果分5DB21/T2743—2017除非特殊注明,所用試劑均為分析純;實驗用水應符A.1瓊脂培養(yǎng)基A.1.1成分A.1.2制法熱煮沸,使瓊脂溶化。分裝三角瓶,121℃高壓滅菌20min。有特殊生長要求的細菌應添加輔助生長試A.2Mueller-Hinton肉湯(M-H肉A.2.1成分A.2.2制法121℃高壓滅菌15mi

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