人教版高中生物選修1專題2課題2土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)（練）（教師版）

選修1專題2課題2土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)（練）1.在分解尿素菌的分離和鑒定中，對先后用到的兩種培養(yǎng)基，敘述正確的是（）A.加入酚紅指示劑作為選擇培養(yǎng)基，再加入唯一碳源作為鑒別培養(yǎng)基B.加入唯一氮源作為選擇培養(yǎng)基，再加入酚紅指示劑作為鑒別培養(yǎng)基C.加入唯一氮源作為鑒別培養(yǎng)基，再加入酚紅指示劑作為選擇培養(yǎng)基D.加入唯一碳源作為選擇培養(yǎng)基，再加入酚紅指示劑作為鑒別培養(yǎng)基【答案】B【解析】在分解尿素菌的分離和鑒定中，應(yīng)該先加入尿素作為分解尿素菌的唯一氮源，分解尿素菌合成的脲酶，能分解尿素，產(chǎn)生氨，氨呈堿性；然后加入酚紅指示劑培養(yǎng)細菌，指示劑將變?yōu)榧t色。2.測定土壤中細菌的數(shù)量一般選104、105和106倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)；而真菌的數(shù)量一般選用102、103和104倍稀釋，其原因是（）A.細菌個體小，真菌個體大B.細菌易稀釋，真菌不易稀釋C.細菌在土壤中的含量比真菌高D.隨機的，沒有原因【答案】C【解析】在土壤中的微生物，大約70%～90%是細菌，比真菌多，所以為了確保獲得的菌落數(shù)在30～300之間，測土壤中細菌的數(shù)量一般選用104、105和106倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)，而測定真菌的數(shù)量一般選用102、103和104倍稀釋，故選C。3.分離土壤中分解尿素的細菌，對培養(yǎng)基的要求是()①加尿素②不加尿素③加瓊脂④不加瓊脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸鹽⑧不加硝酸鹽A．①③⑤⑦B．①③⑤⑧C．②④⑥⑧D．①④⑥⑦【答案】B【解析】要分離分解尿素的細菌應(yīng)以尿素為唯一氮源，故1需要2錯誤，故C錯誤。需要用固體培養(yǎng)基必須加入瓊脂，故3正確，4錯誤，D錯誤。需要加碳源即葡萄糖，故5正確，6錯誤。不需要氮源，故不需要甲硝酸眼，故7錯誤，8正確，因此A錯誤，B正確。4.從土壤中分離以尿素為氮源的細菌，下列實驗操作不正確的（）A.將土壤用無菌水稀釋，制備10﹣3～1O﹣5土壤稀釋液B.將不同濃度的土壤稀釋液涂布于不同平板上C.用加入剛果紅指示劑的選擇培養(yǎng)基篩選分解尿素的細菌D.從周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶的菌落中挑取能夠分泌脲酶的菌株【答案】C【解析】A、將土壤用無菌水稀釋，然后經(jīng)過系列稀釋，制備10﹣3～1O﹣5土壤稀釋液；A正確．B、將不同濃度的土壤稀釋液涂布于不同平板上；B正確．C、用加入酚紅指示劑的選擇培養(yǎng)基篩選分解尿素的細菌，剛果紅指示劑是用于分離分解纖維素的菌；C錯誤．D、分解尿素的菌在分解尿素時產(chǎn)生氨氣，氨氣能使酚紅指示劑顯紅色，從周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶的菌落中挑取能夠分泌脲酶的菌株；D正確．5.下圖表示從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程。下列與該實驗相關(guān)內(nèi)容的敘述中不正確的是（）A．實驗中所用的培養(yǎng)基①②③④均屬于選擇培養(yǎng)基B．通過圖中I、Ⅱ過程目的是增加目標微生物的數(shù)量C．統(tǒng)計⑤處培養(yǎng)基中的菌落數(shù)并不一定代表接種到④上的活菌數(shù)【答案】D【解析】從混合物中分離某種微生物要用選擇培養(yǎng)基，需要在培養(yǎng)基中加入特定的物質(zhì)，如羥基苯甲酸，在該培養(yǎng)基中所需要的微生物能大量繁殖，故AB正確；稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目的原理，當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活細菌。為了保證結(jié)果準確，一般設(shè)置3～5個平板，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)，并取平均值。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，因此，統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示，故C正確；有些微生物可以利用其它微生物的代謝產(chǎn)物來進行生長繁殖，所以在選擇培養(yǎng)基上生長的微生物不一定是所選擇的微生物，故D錯誤。6.下列敘述不正確的是()A．因為土壤中各類微生物的數(shù)量不同，所以，為獲得不同類型的微生物，要按不同的稀釋倍數(shù)進行分離B．測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍不同C．如果得到了多個菌落數(shù)目在30—300的平板，則說明稀釋操作比較成功D．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目明顯少于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細菌菌落【答案】D【解析】牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細菌菌落，D錯誤。7.選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)σ恍┪锢?、化學抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基。利用這種培養(yǎng)基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分離出來。為選擇酵母菌和硝化細菌，應(yīng)選用的培養(yǎng)基分別為()A.伊紅美藍培養(yǎng)基、含青霉素培養(yǎng)基B.含青霉素培養(yǎng)基、含氨的無機培養(yǎng)基C.含氨的無機培養(yǎng)基、含青霉素培養(yǎng)基D.含青霉素培養(yǎng)基、伊紅美藍培養(yǎng)基【答案】B【解析】酵母菌是真菌，通?？梢杂煤嗝顾氐呐囵B(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)，因為青霉素抑制細菌生長，但不能抑制真菌生長。硝化細菌為自養(yǎng)型生物，能夠利用氨轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯跛岷拖跛崴尫诺哪芰浚褵o機物轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C物以維持自身生命活動，利用含氨的無機培養(yǎng)基可進行選擇培養(yǎng)。8.用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè)置的對照是()A.未接種的選擇培養(yǎng)基B.未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C.接種了的選擇培養(yǎng)基D.接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基【答案】D【解析】選擇的目的是為了分離、篩選，對照遵循的原則是單一變量，因此用接種了的普通培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基進行對照，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目。9.下面從土壤中篩選纖維素分解菌的實驗步驟，正確的是()①土壤取樣②稱取10g土壤加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中③吸取0.1mL進行平板涂布④依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度A.①→②→③→④ B.①→③→②→④C.①→②→④→③ D.①→④→②→③【答案】C【解析】在分離土壤中某細菌時，應(yīng)先選取土樣(10g)，然后加無菌水獲得土壤浸出液，并進行不同倍數(shù)稀釋，最后將稀釋液涂布到培養(yǎng)基表面進行培養(yǎng)，并分離和計數(shù)。10.關(guān)于統(tǒng)計微生物數(shù)目，說法錯誤的是()A.因為土壤中各類微生物的數(shù)量不同，所以為獲得不同類型的微生物，要按不同的稀釋倍數(shù)進行分離B.測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數(shù)量，選用的稀釋度范圍不同C.只有得到了3個或3個以上菌落數(shù)目在30?300的平板，才說明系列稀釋操作成功D.每次統(tǒng)計菌落數(shù)目，應(yīng)選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果【答案】C【解析】土壤中各種微生物數(shù)量不同，細菌大約為70%～90%，其次是放線菌，真菌最少，故不同類型微生物，要按不同稀釋倍數(shù)進行，A正確；根據(jù)選項A可知，土壤中各類微生物的數(shù)量不同，因此測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數(shù)量，需要選用的稀釋范圍不同，B正確；在同一稀釋度下只要得到兩個或兩個以上的菌落數(shù)目在30～300的平板，就說明稀釋操作比較成功，并能夠進行菌落的計數(shù)，C錯誤；每次統(tǒng)計菌落數(shù)目，應(yīng)選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，D正確。11.自生固氮菌能獨立完成固氮作用，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有廣泛的用途，研究人員欲從土壤中篩選出自身固氮菌菌株。請回答下列問題：（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中，一般都含有水、________________、氮源和無機鹽。對培養(yǎng)基進行滅菌的常用方法是________________，要從土壤樣品中分離出自身固氮菌，在獲得土壤浸出懸液后，可以采用稀釋涂布平板法將菌液涂布于缺________________的培養(yǎng)基上進行篩選。（2）在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌液量不易過多的原因是________________，涂布培養(yǎng)四天后，可通過觀察________________的形態(tài)特征來統(tǒng)計土壤中自生固氮菌的種類。（3）純化自身固氮菌培養(yǎng)的接種方法主要有稀釋涂布平板法和________________法兩種。（4）實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行________________處理后，才能扔掉?！敬鸢浮浚?）碳源高壓蒸汽滅菌法氮（2）培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果菌落（3）平板劃線（4）滅菌【解析】（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中，一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽。對培養(yǎng)基進行滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌法，自生固氮菌可以從空氣中的氮氣獲取氮源，要從土壤樣品中分離出自生固氮菌，在獲得土壤浸出懸液后，可以采用稀釋涂布平板法將菌液涂布于缺氮的培養(yǎng)基上進行篩選。（2）在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌液量不易過多的原因是避免培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果，涂布培養(yǎng)四天后，可通過觀察菌落的形態(tài)特征（大小、形狀、顏色、光澤等）來統(tǒng)計土壤中自生固氮菌的種類。（3）純化自身固氮菌培養(yǎng)的接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法兩種。12.生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，為從土壤中微生物篩選到能分解尿素的細菌。培養(yǎng)基成分如下表所示，實驗步驟如圖1所示。回答下列問題KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂1.4g2.1g0.2g10g1g15g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL，調(diào)pH為7.2（1）分解尿素的細菌能分泌________酶，能將尿素分解成__________。（2）培養(yǎng)基中為“目的菌”生長提供氮源和碳源的物質(zhì)分別來自________和_________。為了滿足圖示錐形瓶中目的菌對氧氣的需求，在培養(yǎng)時應(yīng)采用的操作方法是_______________________。（3）圖中將細菌轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上時，應(yīng)采用________法接種以獲得單個菌落。初步篩選出來的菌種還需要用生化的方法作進一步的鑒定，鑒定方法是檢測初步篩選目的菌種培養(yǎng)基的pH，若pH_______（降低/不變/升高），說明該菌種能夠分解尿素。（4）A同學從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落。有同學認為造成A同學實驗結(jié)果的原因是培養(yǎng)基被雜菌污染。為了證實該說法，則進一步實驗的操作思路是________________。【答案】(1)脲氨（2）尿素葡萄糖振蕩培養(yǎng)（3）稀釋涂布升高（4）將A同學的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下