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飼料中喹烯酮的測(cè)定高效液相色譜法2015-07-20發(fā)布2015-09-20實(shí)施前言 Ⅱ 3原理 1 15儀器與設(shè)備 1 2 28結(jié)果計(jì)算 2 3 4Ⅱ本標(biāo)準(zhǔn)按GB/T1.1—2009的規(guī)則編制。本標(biāo)準(zhǔn)某些內(nèi)容可能涉及專利,本標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任。本標(biāo)準(zhǔn)由湖南省畜牧水產(chǎn)局提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:湖南省獸藥飼料監(jiān)察所、湖南省畜禽水產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)檢測(cè)中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:歐陽(yáng)龍、匡光偉、肖安東、徐麗枚、譚美英、陳啟友、隆雪明、鄧昉、魏群、張俊波、周玉潔、江燕、鄧均紅。1飼料中喹烯酮的測(cè)定高效液相色譜法凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T20195動(dòng)物飼料試樣的制備采用乙腈提取試樣中的喹烯酮,固相萃取小柱凈化,高效液相色譜-紫外4試劑與材料除另有說(shuō)明外,所用試劑均為分析純,實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T6682一級(jí)水的規(guī)定。4.1甲醇色譜純。4.2乙腈色譜純。4.3乙腈。4.6喹烯酮標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:稱取喹烯酮標(biāo)準(zhǔn)品25mg(精確到0.01mg)于25mL的容量瓶中,用乙腈溶4.8微孔濾膜:0.22μm.有機(jī)膜。5.1高效液相色譜儀:配置二極管陣列檢測(cè)器或紫外檢測(cè)器。26采樣與試樣制備6.2試樣制備按GB/T20195的規(guī)定執(zhí)行。7測(cè)定步驟7.1提取稱取試樣2.5g(精確到0.001g),置于100mL具塞錐形瓶中,準(zhǔn)確加入25.0mL乙腈,超聲提取10min,靜置,液體轉(zhuǎn)入50mL離心管中10000r/min離心5min,上清液備用。上清液過(guò)中性氧化鋁柱,棄除初濾液,收集濾液過(guò)微孔濾膜,待測(cè)。7.3高效液相色譜參數(shù)流動(dòng)相:甲醇:水(V:V=60:40)。7.4試樣測(cè)定取試樣溶液和相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)樣,以組分的保留時(shí)間定性,以色譜峰面積積分值做單點(diǎn)或多點(diǎn)校準(zhǔn),外標(biāo)法定量。標(biāo)準(zhǔn)工作液和試樣溶液中喹烯酮的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)的線性范圍內(nèi)。喹烯酮高效液相色譜圖參見(jiàn)附錄A,喹烯酮標(biāo)準(zhǔn)工作液色譜圖參見(jiàn)附錄A中圖A.1,配合飼料中添加喹烯酮標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖參見(jiàn)附錄A中圖A.2。8結(jié)果計(jì)算試樣中喹烯酮的含量由色譜數(shù)據(jù)處理軟件或按下式計(jì)算獲得:x——試樣中喹烯酮的含量,單位為毫克每千克(mg/kg);A——試樣中喹烯酮的峰面積;Cs——標(biāo)準(zhǔn)工作液中喹烯酮的濃度,單位為微克每毫升(μg/mL);As——標(biāo)準(zhǔn)工作液中喹烯酮的峰面積;V——提取用溶液的體積,單位為毫升(mL);m——試樣質(zhì)量,單位為克(g);f——稀釋倍數(shù)。測(cè)定結(jié)果用兩次平行測(cè)定的算術(shù)平
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