DB3715T 11-2022 德州驢鮮精生產(chǎn)與保存技術(shù)規(guī)程

3715ThetechnicalprotocolofproductionandpreservationforfreshsemenofdezhouI本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定術(shù)推廣服務(wù)中心、聊城市東昌府區(qū)畜牧獸醫(yī)事業(yè)傳良、于杰、李玉華、王守山、劉文強(qiáng)、王濤、1德州驢鮮精生產(chǎn)與保存技術(shù)規(guī)程精液離心液semencentrifugat24基本要求4.1供精公驢4.3采精頻率4.4采精時(shí)間4.5采精場(chǎng)所4.6處理室設(shè)置有精液質(zhì)檢區(qū)、平衡稀釋區(qū)、分裝區(qū)、鮮精保存區(qū)，室內(nèi)溫度22℃~25℃,避免光線直4.7器材設(shè)備4.8工作人員37.4采精員右手持假陰道，假陰道外口端斜朝向地面，站在公驢右前側(cè)。待公驢爬跨時(shí)，左手輕扳陰4），離心10min～15min。去除上清液，將各離心管中的粥狀精液用保存液進(jìn)行最后稀釋。精液稀釋按兩步 X··························V0——采精量mL；C——精子密度，單位為108個(gè)每毫升m——精子快速前進(jìn)活力%；0.7——精液離心后精子的回收系數(shù)；V1——每頭份的體積，單位為毫升（mL）9精液分裝9.2裝精液用的瓶或管選用對(duì)精子無(wú)毒9.4標(biāo)明公驢號(hào)、生產(chǎn)日期、生產(chǎn)單位和有效保存時(shí)間。5A.1精液離心液A液配方成份A.2精液離心液配制方法A.2.1A液：用校準(zhǔn)的電子天平依次稱取所需藥品，用滅菌超純水定容至100mL，配置完成后經(jīng)0.22A.3精液保存液配方及配制方法A.3.1選取新鮮無(wú)疫病雞蛋，用75%酒精進(jìn)行表面消毒，待酒精揮發(fā)完畢后抽取內(nèi)部卵黃；A.3.2卵黃與離心液1:4混合，2800rpm/min離心A.3.3C液：離心液=1:3~1:7混合，得精液保存液，4℃保存，保存時(shí)間不超過14d。67取稀釋后精液一小滴，滴于潔凈載玻片(B)一端，用另一邊緣光滑的蓋玻片(A)與有樣品的載玻片呈35°夾角，將樣品均勻地涂布于載玻片上，自然風(fēng)干，每樣品制作二個(gè)抹片。C.2固定在已風(fēng)干的抹片上滴上1.0mL～2.0mL中性福爾馬林(濃度3.2%)固定液(也可將風(fēng)干后的抹片反扣在帶有平槽的有機(jī)玻璃面上，把固定液滴于槽和抹片之間，讓其充滿平槽并使抹片接觸固定液),C.3染色槽并使抹片接觸染液，染色1.5h后用清水緩緩沖去染液，晾干待檢。C.4鏡檢將制備好的抹片在顯微鏡(400X~600X)下觀察，每個(gè)抹片觀察200個(gè)以上的精子(分左、右二個(gè)區(qū)),取二片的平均值，二片的變異系數(shù)不得大于20%,