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文檔簡介
ICS65.020
CCSB15CI
團體標準
T/CIXXX—2023
甘蔗赤腐病抗病性鑒定技術(shù)規(guī)程
Technicalregulationsfordiseaseresistanceidentificationofsugarcanered
rotdisease
(征求意見稿)
2023-X-X發(fā)布2023-X-X實施
中國國際科技促進會發(fā)布I
T/CIXXX—2023
甘蔗赤腐病抗病性鑒定技術(shù)規(guī)程
1適用范圍
本文件規(guī)定了甘蔗赤腐病抗病性鑒定的術(shù)語和定義、癥狀及流行特點、材料準備與種植、
接種病原、接種液制備、接種方法、病情調(diào)查、抗病性評價。
本文件適用于甘蔗屬及其近緣屬中的種質(zhì)資源、甘蔗屬種間雜交種對甘蔗赤腐病抗病性
的人工接種鑒定與評價。
2規(guī)范性應用文件
本文件沒有規(guī)范性引用文件。
3術(shù)語和定義
甘蔗赤腐病sugarcaneredrotdisease
由鐮孢炭疽菌Colletotrichumfalcatum侵染甘蔗葉片中脈、蔗莖、蔗頭引起葉片中脈、
蔗莖、蔗頭腐爛壞死的一種流行性真菌病害。
4癥狀及流行特點
甘蔗赤腐病的癥狀及流行特點參見附錄A。
5材料與種植
5.1材料選擇
選擇無病的健壯蔗株。
5.2對照材料
鑒定材料中加入甘蔗品種粵糖93-159、新臺糖1號作感病對照,粵糖86-368、柳城
05-136作抗病對照。
5.3材料處理
分別切成雙芽段,共80個芽,用70%噻蟲嗪水分散劑和50%多菌靈可濕性粉劑1:800
液浸種5min~10min。
5.4材料種植
種植時間為2月~3月,以完全隨機區(qū)組設計種植,每份材料各種植4行,4次重
復,行距1m、行長5m,每行20個芽,共80個芽,常規(guī)栽培管理。
2
T/CIXXX—2024
6接種病原
在超凈臺中將帶有赤腐病癥狀葉片于病健相間部位切下長寬5mm葉組織,用75%酒精
浸泡20s消毒,再將其浸泡于0.2%次氯酸鈉中,搖動使其充分接觸消毒液1min,用無菌水
沖洗3遍,放置于無菌濾紙上吸干表面水分,然后將葉組織平放在加有50mg/mL氯霉素
PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂粉20g,蒸餾水定容至1000mL)表面,將
培養(yǎng)皿倒置,放于29℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2~3d。菌落長出后,用接種針挑取菌落邊緣菌絲
接種于PDA培養(yǎng)基于28℃恒溫培養(yǎng)10~14d。
7接種液制備
取5培養(yǎng)的接種病原加入滅菌雙蒸水稀釋混勻,用雙層紗布過濾,濾液即為孢子懸浮
液。攪拌均勻后用血球計數(shù)板計數(shù)法配制成1×106個孢子/mL用于接種,現(xiàn)配現(xiàn)用。
8接種方法
8.1接種方法選擇
接種方法可選用田間鉆孔接種法或可控條件接種法。
8.2田間鉆孔接種
供試材料5~6月株齡,選擇健康蔗株進行田間鉆孔接種。用直徑8mm鉆孔器在地面上
第2或第3節(jié)間中部鉆孔(直徑8mm,深12mm),用移液槍將100μL接種液滴入鉆孔中,
取厚濕無菌脫脂棉封孔,再用無菌保鮮膜包裹住,每份材料每重復(每行)接種5株共20
株。接種期間,每天噴水保持相對濕度在75%~90%。
8.3可控條件接種
供試材料8~10月株齡,選擇未開花健康蔗株置于可控溫室中用于接種。每份材料每重
復(每行)選擇5株共20株,從田間取上部2/3蔗莖,保留頂部功能葉葉片、葉鞘完整,
用滅菌刀剔除老葉及葉鞘、修剪頂部葉片、不損傷節(jié)間。將處理好的蔗莖垂直排列在裝有
10~15cm高潮濕沙床中,并確保最底部節(jié)在沙床表面以下。選擇頂部完整葉鞘下第1和第
2個節(jié)進行接種。取長10cm寬3cm無菌脫脂棉條浸泡在接種液中,然后把棉條纏繞在選
擇的接種節(jié)上,再用無菌保鮮膜將整個節(jié)包裹住。接種期間保持相對濕度90%,溫度32℃;
每天用日照燈照明8h,總光能輸出320瓦。
9病情調(diào)查
田間鉆孔法接種60d和可控條件法接種10d后,用鋒利刀刮擦接種節(jié)點和節(jié)間區(qū)域并
縱剖蔗莖,觀察記錄接種節(jié)點和節(jié)間病斑特征,病斑顏色及擴展,組織病變、腐爛,病原菌
孢子形成,芽壞死和葉片干枯等發(fā)病情況。
10抗病性評價
3
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按以下分級標準進行抗病性評價,見表1。
表1甘蔗赤腐病抗性評價標準
抗性等級抗病性癥狀特征
1抗病(R)無癥狀或極少深褐色斑點狀病斑;內(nèi)部組織僅在1個節(jié)間形成紅
色病斑。
2中抗僅在節(jié)點區(qū)域出現(xiàn)少量暗紅褐色病斑;內(nèi)部組織形成紅色連片貫
(MR)穿2~3個節(jié)間病斑。
3中感生長帶、葉痕中等程度壞死,部分根點和蔗芽壞死;表皮內(nèi)部紅
(MS)褐色病斑、不擴展;內(nèi)部組織形成紅色連片貫穿3~4個節(jié)間病斑。
4感病(S)生長帶、根點、葉痕和蔗芽壞死;無表皮消解和組織液滲出,表
皮內(nèi)部病變;內(nèi)部組織形成紅色連片貫穿5個節(jié)間或整個蔗莖病
斑。
5高感生長帶、根點、葉痕和蔗芽嚴重壞死;表皮消解、組織液滲出,
(HS)表皮內(nèi)部褐色病變;內(nèi)部組織節(jié)和節(jié)間上形成大量紅色連片貫穿
整個蔗莖病斑。
抗病中抗中感感病高感
圖1-1甘蔗赤腐病抗性評價縱剖蔗莖病斑特征
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T/CIXXX—2024
附錄A
(資料性附錄)
甘蔗赤腐病癥狀及流行特點
A.1甘蔗赤腐病癥狀
甘蔗赤腐病以為害蔗莖和葉片中脈為主,也為害葉鞘和宿根蔗樁。為害蔗葉中脈,初生
紅色小點,進而沿中脈上下擴展成紡錘形或長條形赤色斑,中央枯白色,并生出黑色小點,
為病菌分生孢子盤,一條中脈上常有多個病斑,病部后期破裂,葉片常因此而折斷。受害蔗
莖,初期外表癥狀不明顯,但內(nèi)部組織變紅并上下擴展,可貫穿幾個節(jié)間,變色部分常夾雜
圓形或長圓形的白色斑塊,若為長圓形時則與蔗莖垂直,嗅之有淀粉發(fā)酵的酸味。后期病莖
的表皮皺縮、無光澤、有明顯的紅色斑痕,其上著生褐色分生孢子盤,髓部中空,充滿灰白
色菌絲,莖內(nèi)組織腐敗干枯,上部葉片失水凋萎,嚴重時整株枯死。宿根蔗樁受害易引起腐
爛,影響萌發(fā)。發(fā)病嚴重時常使甘蔗生長不齊和嚴重缺株,有效莖數(shù)減少,造成減產(chǎn),見圖
A.1
ABCD
圖A.1甘蔗赤腐病癥狀
A:病葉(中脈赤腐);B:病株(蔗莖赤腐);C:病莖縱剖面;D:蔗頭赤腐
A.2甘蔗赤腐病流行特點
甘蔗赤腐病又名紅腐病,由一種真菌引起,病原菌的無性階段是Colletotrichum
falcatumWent(鐮形刺盤孢)屬半知菌,黑盤孢目;有性階段為Physalosporatucumanensis
Spe.(圖庫曼囊孢殼)。寄主主要有甘蔗、高粱、石茅等。赤腐病是中國分布發(fā)生較普遍的
病害,各植蔗省份均有報道,甘蔗整個生長期都能發(fā)生為害。本病以為害蔗莖和葉片中脈
為主,也為害葉鞘和宿根蔗樁。葉中脈染病,一般對產(chǎn)量的影響不大。但由于病部產(chǎn)生大
量分生孢子,因此,成為蔗莖赤腐病的接種體的主要來源。蔗莖受害后,病菌分泌蔗糖
轉(zhuǎn)化酶,使蔗汁重力純度降低和蔗糖分減少,此外病部的紅色素還給蔗糖生產(chǎn)工藝帶來難
度。發(fā)病率高時對產(chǎn)量造成影響,若蔗種帶病則常使蔗芽不能萌發(fā)造成嚴重缺株。
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以菌絲、分生孢子和厚垣孢子在蔗種、病株和土壤里越冬,第二年進行初次侵染。病葉
上病菌的分生孢子或厚坦孢子借風雨、昆蟲等傳播進行重復侵染。幼苗的發(fā)病與蔗種的
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