愛德華氏菌課件

愛德華氏菌屬

Edwardsiella愛德華氏菌分類地位1994年出版的第九版《伯杰氏鑒定細菌手冊》中,愛德華氏菌屬被歸屬于腸桿菌科(Enterobacteriaceae),記述有遲鈍愛德華氏菌(E.tarda)、鲇魚愛德華氏菌(E.ictaluri)和?？茞鄣氯A氏菌(E.hoshinae)共3個種。愛德華氏菌遲鈍愛德華氏菌：在許多資料中也被記為遲緩愛德華氏菌或緩慢愛德華氏菌,該菌于1959年由日本的Sakazaki和Murata首先分離到,美國疾病控制中心(CDC)的Ewing等曾將其稱為桿菌1483-59(Bacterium1483-59),1962年Sakazaki等根據(jù)對256株的生物學特性研究后將其取名為Asakusa菌群,1964年King和Adler將其稱為Bartholomew菌群,1965年Ewing等在對其進一步研究的基礎(chǔ)上,建議將此菌正式命名為遲鈍愛德華氏菌(E.tardaEwingandMcWhorter1965)。鲇魚愛德華氏菌：曾被稱為愛德華氏菌“GA7752”群(Hawke,1979),在有的書籍中也將其稱為鮰愛德華氏菌或鮰魚愛德華氏菌。此菌分離于美國東南部池塘養(yǎng)的鲇魚中,尤其是養(yǎng)鲇魚比較集中的密西西比河口區(qū)域。?？茞鄣氯A氏菌：在有的書籍中也被記作霍欣愛德華氏菌或浩辛愛德華氏菌。愛德華氏菌生物學特性屬的共同特性：小直桿菌,革蘭氏染色陰性,兼性厭氧,具周生鞭毛，無莢膜，鹽度為0-40，pH為5.5-9.0，有運動性，最適生長溫度為31℃，鲇魚愛德華氏菌(E.ictaluri)喜歡較低的溫度。發(fā)酵D-葡萄糖及其他一些碳水化合物產(chǎn)酸產(chǎn)氣,但與腸桿菌科中大多數(shù)其他種類相比其活性差得多;氧化酶陰性,接觸酶陽性,賴氨酸及鳥氨酸脫羧酶陽性,還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,發(fā)酵麥芽糖和D-甘露糖。時常被分離于冷血動物腸道及其他環(huán)境尤其是淡水中,在溫血動物和人也可被分離到;對鰻鱺、鲇魚和其他動物致病,對人屬罕見的機會致病菌。愛德華氏菌

愛德華氏菌電鏡圖革蘭氏染色陰性愛德華氏菌遲鈍愛德華氏菌

遲鈍愛德華氏菌屬于腸桿菌科，愛德華氏菌，革蘭氏陰性，桿菌，可在NaCL濃度0-40g/L的培養(yǎng)基上生長，菌落直徑0.5-1mm，菌落圓形，邊緣整齊，灰白色，濕潤。

4-10℃能夠生長，最適生長溫度25-32℃，42℃以上不生長。在血瓊脂平板上能在菌落周圍形成狹窄的β型溶血環(huán),在麥康凱瓊脂、膽鹽硫化氫乳糖瓊脂（DHL）、SS瓊脂等腸道菌選擇性培養(yǎng)基上可形成較小菌落,因其產(chǎn)生H2S能使菌落中央為黑色。在亞硫酸鉍瓊脂（BSA）培養(yǎng)基上形成灰色、帶棕色光暈和金屬光澤的菌落。在胰胨大豆瓊脂（TSA）培養(yǎng)基上,可形成圓形、光滑、濕潤、半透明的灰白色小菌落。在乳糖膽鹽（LB）培養(yǎng)基上也能很好的生長。又稱遲緩愛德華氏菌或緩慢愛德華氏菌，是愛德華氏菌屬細菌家族中較早發(fā)現(xiàn)的成員之一，該菌是愛德華氏菌屬的模式種。愛德華氏菌麥康凱瓊脂培養(yǎng)基：選擇性生長革蘭氏陰性菌，含膽鹽及龍膽紫，加了乳糖和中性紅來辨別乳糖發(fā)酵菌，如果可發(fā)酵乳糖，菌落為粉紅色；不發(fā)酵為透明。膽鹽硫化氫乳糖瓊脂（DHL）培養(yǎng)基：用于沙門氏菌和志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。SS瓊脂培養(yǎng)基：沙門氏菌屬、志賀氏菌屬選擇瓊脂培養(yǎng)基，它對沙門氏菌和志賀氏菌都具有選擇性。亞硫酸鉍瓊脂（BSA）培養(yǎng)基：用于沙門氏菌的選擇性培養(yǎng)。愛德華氏菌

遲鈍愛德華氏菌宿主種類

到目前（2003）遲鈍愛德華氏菌已經(jīng)在二十多種魚類中引起了病害,包括淡水魚類和海水魚類,如鰻鱺（Anguillajapanica)、牙鲆（Paralichthysolivaceus）、真鯛（Pagyrusmajor）、虹鱒（Ocorhynchusmykiss）、羅非魚（Tilapianilotica）、斑點叉尾鮰（Ictaluruspunctatus）等。除此外,該菌還可感染兩棲類動物如牛蛙（Ranacatesbeiana）和爬行類動物如中華鱉（Trionyxsinensis）。Regalla（1982）還報道了由該菌引起的海豹的發(fā)病。愛德華氏菌

遲鈍愛德華氏菌宿主種類

更為重要的是,遲鈍愛德華氏菌還是一種重要的人畜共患病的病原菌,是愛德華氏菌屬中唯一感染人的成員。人們通過接觸帶有遲鈍愛德華氏菌的動物或水產(chǎn)品甚至觀賞性魚類都有可能受到感染。

Brady&Vinitnantharat在-20℃凍存60天的斑點叉尾鮰當中仍能分離到該菌。在熱帶國家,如印度、馬來西亞和巴拿馬的流行性腹瀉中,該菌也是重要的病原菌。而且它更易感染本來已患有某種疾病尤其是肝炎和腫瘤疾病的人群。另外遲鈍愛德華氏菌還可引起人的腦膜炎、肝膿腫、蜂窩組織炎、骨髓炎和敗血癥等。愛德華氏菌

遲鈍愛德華氏菌致病作用

1.粘附和侵襲鞭毛作為一種粘附素，協(xié)助細菌黏附到細胞表面，并通過誘發(fā)微絲重排而侵入到細胞內(nèi)部致病相關(guān)因子：血溶素、溶血素、鐵載體、粘附素和侵襲素等，細胞外產(chǎn)物和菌體成分均含有毒素。通過口腔灌注、肌肉注射和腹腔注射等方法均可使牙鲆感染遲緩愛德華氏菌,說明其可以通過食物和體表的傷口多種途徑感染。遲緩愛德華氏菌作用的靶器官主要是肝臟和腎臟。愛德華氏菌2.抗宿主免疫機制巨噬細胞介導的殺傷是細菌細胞進入宿主體內(nèi)所遇到的第一道防線。病原菌進入宿主后首先必須克服宿主的防御機制，才能在宿主體內(nèi)存活和繁殖，同時具備在宿主非吞噬細胞和吞噬細胞中存活和復制的能力，才能對宿主進行系統(tǒng)的感染。3.分泌毒素遲鈍愛德華氏菌UllahArai發(fā)現(xiàn)遲鈍愛德華氏菌中含有兩種外毒素，它們可引起兔皮膚紅斑和兔浮腫和潰瘍性紅斑。Chung發(fā)現(xiàn)對磷脂酞乙酰胺、磷脂酞膽堿和鞘磷脂有特異活性的外毒素。葛艷等發(fā)現(xiàn)遲鈍愛德華菌的外毒素能致HEp-2細胞產(chǎn)生病變,變圓,脫落等。愛德華氏菌

遲鈍愛德華氏菌

細菌學：分離培養(yǎng)、形態(tài)特征檢查、生理生化特性檢查免疫學：間接熒光抗體技術(shù)：一種免疫標記技術(shù)。即應(yīng)用熒光標記的二抗,通過與第一抗體結(jié)合而檢測未知抗原?？惯t鈍愛德華菌的單克隆抗體建立起免疫組織化學的酶染色檢驗方法FITC（異硫氰酸熒光素）標記兔抗遲鈍愛德華菌抗體檢驗方法愛德華氏菌

遲鈍愛德華氏菌防治化學治療法：慶大霉素、氨芐青霉素、新霉素、土霉素、氯霉素、四環(huán)素、鏈霉素及磺胺類藥物疫苗防治：滅火疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗生物防治：Patilet等從海洋底質(zhì)分離到了有抗遲鈍愛德華菌作用的鏈霉菌。WuChao發(fā)現(xiàn)了一種針對遲鈍愛德華菌的噬菌體PhiET-1,對該菌有很強的殺滅作用。微生態(tài)制劑防治：KwonSR（2007）等用遲鈍愛德華菌菌體（ETG）做為口服制劑飼喂牙鲆，能有效的抵抗遲鈍愛德華菌的感染。PiraratN（2006）等分離出了屬于乳酸桿菌的鼠李糖乳酸桿菌，它能夠增強羅非魚的補體系統(tǒng)，使噬菌體細胞積聚，增強噬菌體細胞的殺菌力，能有效的防治感染遲鈍愛德華氏菌感染引起的的敗血病。愛德華氏菌

鲇魚愛德華氏菌1.鲇魚愛德華氏菌是愛德華氏菌屬細菌中較難養(yǎng)的,在培養(yǎng)基平板上生長較緩慢,常需培養(yǎng)約48h才能形成直徑1-2mm、圓形光滑、邊緣整齊、稍隆起的無色小菌落;2.鲇魚愛德華氏菌更喜歡較低的溫度,其最適一般為25～30℃,在37℃時生長緩慢或完全不能生長,尤其是運動力只有在約28℃時才能表現(xiàn)出來且是微弱的;3.該菌為愛德華氏菌中生化活性最低的一個種培養(yǎng)特征愛德華氏菌鲇魚愛德華氏菌主要入侵對象：斑點叉尾鮰癥狀：早期食欲減退；嚴重時呈“吊水”狀，即頭朝水面，尾垂；當收到刺激時，作螺旋狀快速翻轉(zhuǎn)或不規(guī)則游動，這是瀕死征兆。病魚變化：主要是有血樣或清水樣腹水；脂肪組織、肝、腸、肌、體腔壁有紫斑樣出血，腎、肝和脾臟腫大，脾呈深紅色，肝組織有白色壞死灶。愛德華氏菌鲇魚愛德華氏菌檢測方法

對于斑點叉尾鮰的這種疾病可以根據(jù)病魚規(guī)格、癥狀、病變和流行季節(jié)的特點可做出初步診斷。將病魚臟器與肌肉做成除菌勻漿液，經(jīng)注射途徑接種健康魚種可使之發(fā)病死亡；或者將該液接種敏感細胞，接種后2d左右出現(xiàn)細胞病變效應(yīng)（CPE）;或者利用電子顯微鏡觀察到CCHV粒子，就可以對該疾病作出準確診斷。從患病或?qū)⒁赖聂~體中分離致病菌，以血漿瓊脂在30下℃純培養(yǎng)24小時后，可以分辨出這種菌。這種致病菌的主要理化特性如下：為G細胞色素氧化酶陰性，在葡萄糖O/F培養(yǎng)基中可以發(fā)酵產(chǎn)氣，在30℃條件下，經(jīng)三糖鐵（triplesugariron，TSI）培養(yǎng)基中不產(chǎn)生硫化氫和吲哚，在25℃下可以活動，而在37℃下失去活動性，幾乎所有的E.ictaluri都具有血清學的同源性，因此，一些血清學的手段，如熒光抗體和免疫酶技術(shù)均可以用于ESC的診斷。愛德華氏菌鲇魚愛德華氏菌防治策略引進魚苗和魚種時嚴格實施檢疫，避免引進帶有病毒的斑點叉尾鮰加強飼養(yǎng)管理，保持良好的水質(zhì)，控制斑點叉尾鮰苗種的放養(yǎng)密度在水溫較高時，