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41I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件起草單位:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)、河南省畜牧總站王賽賽、楊慧霞、徐澤君、王獻(xiàn)偉、程關(guān)勝、康紹華、肖瑩瑩、張繼文、劉旭樂、馬慧、李1多胎綿羊妊娠酮血癥防治技術(shù)規(guī)程本文件適用于綿羊養(yǎng)殖場以及獸醫(yī)工作者對(duì)多胎綿羊妊娠酮血癥的診WS/T350血清葡萄糖測(cè)定參考方法綿羊妊娠酮血癥OvinePregnancyketo又叫綿羊妊娠毒血癥(OvinePregnancyToxemia),是妊娠后期母羊代謝紊亂、胎兒營養(yǎng)需求與母體營養(yǎng)供應(yīng)失高酮體(酮血、酮尿)、代謝性酸中毒、肝臟脂肪浸潤以及臨床上脂肪酸在肝臟中氧化分解產(chǎn)生的中間產(chǎn)物β-羥基丁酸、乙酰4.1群體因素OPK常見于懷雙羔或多羔的綿羊。群體性營養(yǎng)不良可能誘發(fā)該病,飼養(yǎng)方式改變也會(huì)使該病發(fā)病率升高。肝片吸蟲等寄生蟲感染嚴(yán)重時(shí)會(huì)引起母羊肝功能損壞,可能誘發(fā)OPK。其它應(yīng)激因素,如惡劣的天氣條件、抓羊、接種疫苗、突然更換日糧、群體性營養(yǎng)過剩等,都可能是該病的4.2個(gè)體因素2低血鈣等,都可能影響母羊食欲,誘導(dǎo)OPKOPK主要危害飼養(yǎng)管理不當(dāng)?shù)娜焉锖笃冢?10d~145d)母羊。發(fā)病羊一般均為懷雙羔或多羔者,的酮臭味。神經(jīng)肌肉功能紊亂包括頭部肌肉微微顫抖、耳和主要根據(jù)妊娠母羊的病史和臨床表現(xiàn)進(jìn)行診尿樣采集:待病羊排尿時(shí),立即用潔凈青揮素小瓶接取3mL~5mL,保血樣采集與血清制備:在病羊頸靜脈中1/3區(qū)域,用75%酒精棉球消毒皮膚,使用10mL一次性注射器采取血樣5mL。將采集的血樣加入無抗凝劑的玻璃試管中,將采血管傾斜靜置30液完全凝固后,用移液器將血清移入儲(chǔ)存管,暫存于4℃冰箱,在4h~48h內(nèi)完成測(cè)3檢查方法:取亞硝酸鐵氰化鈉3g、硫酸銨100g、無水碳酸銨50g,混勻,研細(xì),備用。檢查時(shí),取混合粉末少許放在玻片上,加血清或尿液2滴~3滴,立即出現(xiàn)紫紅色即為酮體陽性反應(yīng)。在定性后,可按、進(jìn)行定量檢測(cè)。試紙條法尿酮定性/半定量檢查牛尿酮用試紙條(urineketoneteststripsforcow,哈羅德(北京)科技有限公司),主要檢查尿液中乙酰乙酸。采集尿液,手持試紙條終端,將試紙條浸入在尿液樣本中1s。然后將試紙條從容器中取出,用吸水紙除去多余的尿液,放置60s。最后將出現(xiàn)的顏色與比色卡進(jìn)行比較,讀取結(jié)果。不含酮的正常尿液呈陰性,即測(cè)試結(jié)果顯示負(fù)號(hào)陰性(Neg.)。如果尿中有酮體,試紙的顏色會(huì)逐漸變成紫色,顏色越深說明尿酮含量越高(圖1)。在5mg/d1尿酮(約0.5mmol/L)時(shí),對(duì)應(yīng)于血液β-羥丁酸1.4mmol/L。尿酮檢測(cè)試紙條達(dá)到4mmol/L時(shí)(深紅色陽性結(jié)果),其對(duì)應(yīng)血液β-羥丁酸3.0圖1尿酮測(cè)定比色卡試條法血酮定量檢測(cè)試條法血酮(β-羥丁酸)定量檢測(cè)操作步驟見附錄A。試劑盒法血酮定量檢測(cè)試劑盒法血酮(β-羥丁酸)定量檢測(cè)操作步驟見附錄B。血酮生理性/病理性參考值健康妊娠后期(110d~145d)母羊血液β-羥丁酸濃度為0.15mmol/L±0.16mmol/L,95%生理性參考值范圍為≤0.46mmol/L。妊娠后期(110d~145d)發(fā)病母綿羊血液β-羥丁酸為4.63mmol/L±1.26mmol/L,95%病理性參考值范圍為2.16mmol/L~7.10mmol/L。8.2.2其它病理生化指標(biāo)測(cè)定血樣采集及制備同。血清生化指標(biāo)測(cè)定方法.1血清GLU:血清葡萄糖含量按WS/T350規(guī)定的方法進(jìn)行測(cè)定。.2血清Ca:血清鈣含量按世界衛(wèi)生組織推薦的鄰甲酚酞絡(luò)合銅法測(cè)定。.3血清AST:血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性采用試劑盒(IFCC法)進(jìn)行測(cè)定。.4血清ALT:血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性采用試劑盒(IFCC法)進(jìn)行測(cè)定。生理性常值與病理性參考值生理性常值與病理性參考值見表1。4或定量檢測(cè)血酮≥2.16mmol/L,或者試紙條法尿酮定性/半定量檢查結(jié)果達(dá)到4mmol/L定量檢測(cè)血酮在2.16mmol/L~0.46mmol/L,或按血酮檢測(cè)結(jié)果為陽性,或按8防治總原則是“以防為主,治療為輔”。OPK主要見于母羊妊娠后期,預(yù)防重后期的營養(yǎng)、合理分群、加強(qiáng)運(yùn)動(dòng)、盡量減少各種應(yīng)激等方面。但是,即使能做到早期診斷,OPK的治療效果一般也不很理想。目前主要是對(duì)癥治療,即補(bǔ)糖、保肝、9.2預(yù)防方法9.2.1維持妊娠后期營養(yǎng)均衡9.2.2加強(qiáng)妊娠后期管理5),喂。對(duì)于中等飼養(yǎng)管理?xiàng)l件下的多胎母羊群,單獨(dú)補(bǔ)飼RPC可使母羊群體OPK發(fā)病率降低13在妊娠110d至分娩前,給每只妊娠母羊補(bǔ)飼RPC(膽堿有效含量為50%,過瘤胃率≥85%)6g/d和RPM(過瘤胃率≥85%,小腸吸收率95%)2g/d9.3治療方法每天2次靜脈注射50%葡萄糖,用量為1mL/kg體重~2mL/kg體重;或靜脈注射20%葡萄萄10mL/kg肌內(nèi)注射0.2mg/kg體重~0.4mg/kg體重的醋酸可的松或靜脈注射氫化可的松0.mg/kg體重,也可肌肉注射氫化潑尼松1.5mg/kg體重,輔之以靜脈注射葡萄糖及鈣、磷、鎂制劑。為糾正酸中毒,可靜脈注射碳酸氫鈉。若胎在139d妊娠至分娩前,可注射0.4mL/kg~0.5mL/kg體重的地塞米松,24h左右可誘導(dǎo)母綿羊分9.4治愈標(biāo)準(zhǔn)母羊臨床癥狀消失,采食量恢復(fù)正常水平;生理指標(biāo)恢復(fù)正常,即定量檢測(cè)結(jié)果血酮含量<6A.1檢測(cè)原理綿羊血酮包括三種化合物,其中丙酮占2%,乙酰乙酸占20%,β-羥丁酸占78%。本法主要是通過檢測(cè)血液中β-羥丁酸的含量來表示其酮體含量。試條表面的β-羥丁酸脫氫酶可催化血液中β-羥丁酸與A.2材料和方法A.2.1材料A.2.2方法A.2.2.1血樣采集A.使用EDTA作為抗凝劑制備抗凝血采血管,加入血樣后抗凝劑終濃度在3.7μmA.加入血樣占抗凝管的4/5,使血
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