DB41∕T 2607-2024 藍(lán)莓組培快繁技術(shù)規(guī)程

41I 2 2 3 4本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件起草單位：平頂山市農(nóng)業(yè)科學(xué)院魯山縣瑞祥種植農(nóng)民專業(yè)合作社平頂山市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局平栗苗苗、張九林、李蘊(yùn)瑩、王新蘭、郭克歌、馮曉藝、蔣欽群、肖婉露、法1藍(lán)莓組培快繁技術(shù)規(guī)程4培養(yǎng)基的選擇與改良將改良WPM培養(yǎng)基的化學(xué)成份按附錄A所示的五大類分別用蒸餾水溶解后，配制成質(zhì)量比為1:20、標(biāo)注名稱、配制倍數(shù)和日期，置于2℃~4℃冰箱保存，鐵鹽應(yīng)存放在棕色容器中。將實(shí)驗(yàn)所需的玉米素(zeatin，ZT)、萘乙酸((1-naphtahaleneacetinacid，NAA)、吲哚丁酸(indole-3-butyric，IBA)用1mol/L的HCl或95％酒精溶解，再用蒸餾水稀釋后分別配制成100mg/L的母液，裝入棕色廣口瓶中，置于2℃~4℃冰箱保存。按所需容量的70％加蒸餾水，再加入0.65％的瓊脂，加熱攪拌融化瓊脂。瓊脂融化后，加入3％蔗4.4.2添加母液糖溶解后，按培養(yǎng)基的配方及所需數(shù)量，依次加入改良WP24.4.3定容、調(diào)pH值增殖培養(yǎng)基：改良WPM+ZT1.0mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂粉6.5g/L。生根培養(yǎng)基：1/2改良WPM+IBA0.1mg/L+蔗糖25g/L,瓊脂粉6.5g/L。5外植體的選擇與接種5.1外植體的選擇裝入潔凈的塑料袋封口帶回實(shí)驗(yàn)室，2℃~4℃冰箱保濕存放，所取材料2d內(nèi)使用完畢。5.1.2外植體預(yù)處理用剪刀將嫩枝上的葉片剪下，用洗滌劑刷洗后，經(jīng)自來水沖洗30min~40min,無菌濾紙吸干水分在用酒精消毒過的超凈工作臺面上，將清洗后的葉片一起先放入75%乙醇溶液中振蕩浸潤30s~40s,無菌水沖洗4次，無菌濾紙吸干水分后，用0.1%的升汞消毒6min~8min,再用無菌水沖洗5次~66苗木培養(yǎng)6.1芽誘導(dǎo)培養(yǎng)及方法將外植體葉片接種到滅菌過的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25℃±2℃,光照強(qiáng)度60μmol·m-2·s-1~100μmol·m-2·s-1、光照時(shí)間12h/d~16h/d,初代誘導(dǎo)培養(yǎng)6.2增殖培養(yǎng)及方法3.0cm長的莖段，接種在增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25℃±2℃、光照強(qiáng)度60μmol·m-2·s-1~6.3生根培養(yǎng)及方法3-2·-2·-1、光照時(shí)間12h/d～16h/d。經(jīng)3周～4周培養(yǎng)，苗子長到6cm～8cm高-2·基質(zhì)一般由泥碳土、珍珠巖、蛭石按3：1：1的比例混合而成，或用粗粒蛭石與沙以3:1的比例混合，裝入50孔黑色PS標(biāo)準(zhǔn)穴盤，并稍壓緊，用0.5g/L的多菌靈（80％可濕性粉劑）溶液噴穴盤栽滿后用600倍的百菌清或多