DB12T 946-2020 飼料中氨基酸的測(cè)定 離子交換色譜法　

DB12Determinationofaminoacidsinfeeds-Ionexchangechromatography天津市市場(chǎng)監(jiān)督管理委員會(huì)發(fā)布I本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)GB/T1.1-2009給本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：楊鴻雁、梁世岳、李玉鵬、陳龍賓、范寰、1飼料中氨基酸的測(cè)定離子交換色譜法本標(biāo)準(zhǔn)適用于飼料原料、配合飼料及濃縮飼料中氨基酸含量GB/T603化學(xué)試劑試驗(yàn)方法中所用制劑及制品GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格測(cè)定。水解中，色氨酸全部被破壞，不能測(cè)量，4試劑和材料4.1本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水，在沒有注）：4.5pH系列緩沖液、再生液：按儀器說(shuō)明書配制2）：4.11氫溴酸（48%）：分析純。4.14磺基丙氨酸-蛋氨酸砜標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取磺基丙氨酸（純度≥99.0%）105.7（純度≥99.0%）113.3mg，用水溶解并定容至250mL,濃度均為2.50μmol/mL，2℃~8℃保存，有效4.15色氨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取色氨酸標(biāo)準(zhǔn)品（色譜純）127.5mg，加少許水和數(shù)滴0.1氫氧化鈉溶液使之溶解，用水定容至250ml，濃度為2.50μmol/mL，2℃~8℃保存，有效期1年。4.16混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確吸取氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液、磺基丙氨酸-蛋氨酸砜標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和為100nmol/mL，2℃~8℃保存，有效期3個(gè)月。5.1樣品粉碎機(jī)。5.4恒溫鼓風(fēng)干燥箱。5.5氮吹儀。5.6旋渦混合儀。mL鹽酸溶液，充氮?dú)饧s1min后擰緊瓶蓋，將水解管放入110℃±1℃恒溫干燥箱，水解22h～24h。冷卻至室溫，混勻。3稱取試樣50mg～100mg（約含蛋白質(zhì)7.5mg～25mg，精確至0.1mg）于25mL水解管中，冰水浴4℃冰箱中，反應(yīng)16h，加入0.3mL氫溴酸，振搖后放回冰浴靜置30min，取出鹽酸溶液，充氮?dú)饧s1min后擰緊瓶蓋，將水解管放入110℃±1℃恒溫干燥箱，水解22h～24h。冷卻至室溫，用水將內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到25mL容量瓶，定稱取試樣50mg～100mg（約含蛋白質(zhì)7.5mg～25mg，精確至0.1mg）于10mL聚四氟乙烯水解管冷卻至室溫，用水將內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到25mL容量瓶中，用鹽酸溶液中和至pH值為6～7將上述水解液過(guò)濾，取0.5mL濾液于小試管中，置于氮吹儀，65℃吹干，必要時(shí)加少許水重復(fù)蒸干2次～3次。準(zhǔn)確加入2mL～5mL檸檬酸鈉緩沖液，旋渦混合儀混勻，用0.2按照儀器使用說(shuō)明書放置茚三酮溶液與pH系列緩沖液、再生液，設(shè)置儀器色譜條件，將混合氨基準(zhǔn)品峰面積對(duì)比，計(jì)算分析，得出各氨基酸的含量4W——某氨基酸的含量，%；M——試樣質(zhì)量，mg。0.5%時(shí)，相對(duì)偏差不大