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課時訓(xùn)練37基因工程一、選擇題(共10小題)1.下列關(guān)于基因工程的敘述,錯誤的是()A.目的基因和受體細(xì)胞均可來自動、植物或微生物B.限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原無生物活性D.載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進目的基因的表達答案:D2.eq\a\vs4\al(2021·海淀模擬)下列關(guān)于基因工程中有關(guān)酶的敘述不正確的是()A.限制酶水解相鄰核苷酸間的化學(xué)鍵打斷DNAB.DNA連接酶可將末端堿基互補的兩個DNA片段連接C.DNA聚合酶能夠從引物末端延長DNA或RNAD.逆轉(zhuǎn)錄酶以一條RNA為模板合成互補的DNA答案:C3.下列信息中能為我們從基因文庫中獵取目的基因供應(yīng)依據(jù)的是()①基因的核苷酸序列②基因的功能③基因在染色體上的位置④基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA⑤基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)A.①②③④⑤ B.②③④⑤C.①④⑤ D.①②⑤解析:本題考查基因工程中目的基因的獵取的相關(guān)問題。要從基因文庫中得到我們需要的目的基因,需要依據(jù)目的基因的有關(guān)信息,例如,依據(jù)基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色體上的位置、基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA,以及基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性來獵取目的基因。答案:A4.下列有關(guān)基因表達載體的構(gòu)建的說法中,不正確的是()A.需要限制酶和DNA連接酶參與B.任何基因表達載體的構(gòu)建都是一樣的,沒有差別C.可用抗生素基因作為標(biāo)記基因D.基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟解析:構(gòu)建基因表達載體時需要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和載體,以產(chǎn)生相同的黏性末端,然后用DNA連接酶連接;由于受體細(xì)胞有植物、動物和微生物之分,以及目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不同,因此,基因表達載體的構(gòu)建也會有所差別,不行能是千篇一律的;抗生素基因的作用是作為標(biāo)記基因,鑒別受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來;基因表達載體的構(gòu)建是整個基因工程的核心環(huán)節(jié)。答案:B5.下列技術(shù)依據(jù)DNA分子雜交原理的是()①用DNA分子探針診斷疾病②受精卵的形成③快速靈敏地檢測飲用水中病毒的含量④目的基因與載體結(jié)合成重組DNA分子A.②③B.①③C.③④D.①④答案:B6.eq\a\vs4\al(2021·長沙模擬)下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程和基因工程的比較,不合理的是()A.基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì),而蛋白質(zhì)工程可以對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造,從而制造一種新的蛋白質(zhì)B.蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上進展起來的,蛋白質(zhì)工程最終還是要通過基因修飾或基因合成來完成C.當(dāng)?shù)玫娇梢栽冢?0℃D.基因工程和蛋白質(zhì)工程產(chǎn)生的變異都是可遺傳的答案:C7.如圖為基因表達載體模式圖,下列相關(guān)敘述正確的是()A.甲表示啟動子,位于基因的首端,它是DNA聚合酶識別、結(jié)合的部位B.乙表示終止密碼子,位于基因的尾端,作用是使轉(zhuǎn)錄過程停止C.丙表示目的基因,其作用是獲得人們所需要的性狀D.復(fù)制原點的存在有利于目的基因在宿主細(xì)胞中擴增解析:甲表示啟動子,位于基因的首端,它是RNA聚合酶識別、結(jié)合的部位,A項錯誤;乙表示終止子,位于基因的尾端,作用是使轉(zhuǎn)錄過程停止,B項錯誤;丙表示標(biāo)記基因,其作用是鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因,C項錯誤。答案:D8.eq\a\vs4\al(2021·東城模擬)基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC-。依據(jù)圖示推斷下列操作正確的是()A.目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅱ切割B.目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅰ切割C.質(zhì)粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割D.質(zhì)粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割解析:目的基因若用限制酶Ⅰ切割時,只能在目的基因的一側(cè)切開,而不能將其切下;質(zhì)粒若用限制酶Ⅱ切割,兩種標(biāo)記基因均將被破壞,所以只能用限制酶Ⅰ切割質(zhì)粒。答案:D9.MstⅡ是一種限制性內(nèi)切酶,它總是在CCTGAGG的堿基序列中切斷DNA。下圖顯示用MstⅡ處理后的突變型β血紅蛋白基因片段。鐮刀型細(xì)胞貧血癥的根本緣由是β血紅蛋白發(fā)生基因突變,使某一處CCTGAGG突變?yōu)镃CTGTGG。下列有關(guān)敘述錯誤的是()A.利用MstⅡ酶進行基因診斷,該過程是在細(xì)胞外進行的B.將MstⅡ酶用于基因診斷,若產(chǎn)生4個DNA片段,則β血紅蛋白基因是正常的C.在起初的正常β血紅蛋白基因中有4個CCTGAGG序列D.鐮刀型細(xì)胞貧血癥患者的成熟紅細(xì)胞中沒有MstⅡ酶的識別序列解析:基因診斷是具有放射性標(biāo)記的DNA片段作為基因探針和提取的DNA片段進行分子雜交來推斷基因是否正常的過程,這一過程是在體外進行的;含有3個CCTGAGG序列的正常β血紅蛋白基因,若用MstⅡ酶切割,可產(chǎn)生4個DNA片段;鐮刀型細(xì)胞貧血癥患者的成熟紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核,沒有DNA,因此也就沒有MstⅡ酶的識別序列。答案:C10.下表為常用的限制性核酸內(nèi)切酶及其識別序列和切割位點(注:表中Y為C或T,R為A或G)。據(jù)表分析,可以得到的結(jié)論是()限制酶名稱識別序列和切割位點限制酶名稱識別序列和切割位點BamHⅠG↓GATCCKpnⅠGGTAC↓CEcoRⅠG↓AATTCSau3AⅠ↓GATCHindⅡGTY↓RACSmaⅠCCC↓GGGA.限制酶的切割位點在識別序列的中間B.限制酶切割后都形成黏性末端C.不同限制酶切割后形成的黏性末端都相同D.一種限制酶可能識別多種核苷酸序列解析:限制酶的切割位點有的在識別序列的中間,有的在兩端,故A錯;限制酶切割后,有的形成了黏性末端,有的形成了平末端,故B錯;不同限制酶切割后形成的黏性末端不肯定相同,故C錯;從表中的識別序列來看,HindⅡ可以識別多種核苷酸序列,故D正確。答案:D二、非選擇題(共4小題)11.如圖表示基因工程中目的基因的獵取示意圖,請據(jù)圖回答下列問題:(1)圖中①表示__________,②表示用__________切割,③表示__________。(2)構(gòu)建基因文庫時,需要將cDNA或肯定大小范圍的DNA片段分別與__________連接起來,導(dǎo)入__________儲存。(3)若獵取的目的基因相同,則圖中基因組文庫__________(填“小于”、“等于”或“大于”)cDNA文庫。(4)除圖中所示方法外,目的基因還可以通過____________________________的方法獵取。解析:(1)mRNA是通過反轉(zhuǎn)錄形成cDNA的。切割DNA的酶是限制性核酸內(nèi)切酶。無論是cDNA還是從生物材料中獵取的DNA分子都可以通過PCR技術(shù)獲得大量的目的基因。(2)將某生物的cDNA或肯定大小范圍的DNA分子分別與載體連接起來,導(dǎo)入受體菌的群體中儲存,各個受體菌中含有這種生物的不同基因,這個受體菌群體組成了基因文庫。(3)由圖示可知,mRNA是DNA上的基因選擇性轉(zhuǎn)錄獲得的產(chǎn)物,因此二者對應(yīng)的文庫大小狀況是基因組文庫大于cDNA文庫。(4)目的基因可以從自然界已有的物種中分別出來,也可以通過人工合成的方法獵取。答案:(1)反轉(zhuǎn)錄限制性核酸內(nèi)切酶(或限制酶)PCR擴增(2)載體受體菌的群體中(3)大于(4)人工合成12.如圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過程,據(jù)圖回答:(1)在基因工程中,A→B為________技術(shù),利用的原理是________,其中①為________過程。(2)加熱至94℃(3)當(dāng)溫度降低時,引物與模板末端結(jié)合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板鏈延長,最終合成兩條DNA分子,此過程中原料是______________,遵循的原則是________________。(4)目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞常用________________技術(shù)。(5)B→D為抗蟲棉的培育過程,其中④過程常用的方法是________,要確定目的基因(抗蟲基因)導(dǎo)入受體細(xì)胞后,是否能穩(wěn)定遺傳并表達,需進行檢測和鑒定工作,請寫出在個體生物學(xué)水平上的鑒定過程:________________________________________________________________________。解析:(1)A→B為體外DNA復(fù)制即PCR技術(shù),與體內(nèi)DNA復(fù)制原理相同,解旋方式不同,PCR技術(shù)是用高溫變性使其解旋。(2)94℃答案:(1)PCRDNA復(fù)制DNA解旋(2)氫解旋酶(3)4種脫氧核苷酸堿基互補配對原則(4)顯微注射(5)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法讓害蟲吞食轉(zhuǎn)基因棉花的葉子,觀看害蟲的存活狀況,以確定性狀13.抗草胺磷(一種除草劑)轉(zhuǎn)基因大豆的培育過程如圖所示。(1)用________處理,獲得上圖中的來自矮牽牛的抗草胺磷基因、含有抗四環(huán)素基因的質(zhì)粒。其中質(zhì)粒上“抗四環(huán)素基因”的作用是________________________。(2)圖中①應(yīng)為________________________________________________________________________。(3)部分農(nóng)桿菌不能在培育基(含四環(huán)素)上生長的緣由是________________________________________________________________________。(4)在A→D過程中,A→B過程中恒溫箱中________(填“避光”或“光照”)培育,留意觀看、記錄________________的生長狀況。(5)轉(zhuǎn)抗草胺磷基因成功的大豆植株內(nèi),抗草胺磷基因能夠高效表達,其高效表達的觀看指標(biāo)是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(6)(多選)從某種蛋白質(zhì)的氨基酸序列動身,利用________方法獲得目的基因,通過基因工程可以生產(chǎn)自然界中不存在的蛋白質(zhì)。下列有關(guān)基因工程中運載體的描述,正確的是________。A.能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存是運載體的必備條件之一B.一種運載體只能運載一種目的基因C.使用的運載體有質(zhì)粒、λ噬菌體衍生物和動植物病毒等D.基因表達載體的構(gòu)建是一樣的,不因受體細(xì)胞種類、目的基因?qū)敕椒ǖ牟煌兴町惔鸢福?1)同一種限制酶供重組質(zhì)粒的鑒定和選擇(2)重組質(zhì)粒(3)重組質(zhì)粒未導(dǎo)入農(nóng)桿菌(4)避光愈傷組織(5)大豆植株對草胺磷有抗性(6)人工合成AC14.eq\a\vs4\al(2022·天津卷)嗜熱土壤芽孢桿菌產(chǎn)生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶,為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用,開展了以下試驗:Ⅰ.利用大腸桿菌表達BglB酶(1)PCR擴增bglB基因時,選用________________基因組DNA作模板。(2)下圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜bglB基因不含圖中限制酶識別序列。為使PCR擴增的bglB基因重組進該質(zhì)粒,擴增的bglB基因兩端需分別引入________和________不同限制酶的識別序列。(3)大腸桿菌不能降解纖維素,但轉(zhuǎn)入上述構(gòu)建好的表達載體后則獲得了降解纖維素的力量,這是由于________________________________________________________________________。Ⅱ.溫度對BglB酶活性的影響(4)據(jù)圖1、2可知,80℃A.50℃ B.60C.70℃ D.Ⅲ.利用分子育種技術(shù)提高BglB酶的熱穩(wěn)定性在PCR擴增bglB基因的過程中,加入誘變劑可提高bglB基因的突變率,經(jīng)過篩選,可獲得能表達熱穩(wěn)定性高的BglB酶的基因。(5)(多選)與用誘變劑直接處理嗜熱土壤芽孢桿菌相比,上述育種技術(shù)獲得熱穩(wěn)定性高的BglB酶基因的效率更高,其緣由是在PCR過程中________。A.僅針對bglB基因進行誘變B.bglB基因產(chǎn)生了定向突變C.bglB基因可快速積累突變D.bglB基因突變不會導(dǎo)致酶的氨基酸數(shù)目轉(zhuǎn)變解析:Ⅰ.考查基因工程和現(xiàn)代生物技術(shù)在實踐中的應(yīng)用。(1)bglB基因存在于嗜熱土壤芽孢桿菌基因組中,故應(yīng)以該菌的基因組DNA為模板進行基因擴增,就可從中選出bglB基因。(2)目的基因與質(zhì)粒進行重組時,需將目的基因插入到啟動子和終止子之間,且應(yīng)靠近啟動子和終止子,結(jié)合題圖可知,應(yīng)在擴增的bglB基因兩端分別引入NdeⅠ和BamHⅠ兩種限制酶的識別序列,使目的基因插入到啟動子和終止子之間。(3
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