2025年魯人新版選擇性必修3生物上冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年魯人新版選擇性必修3生物上冊月考試卷932考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、下列關(guān)于發(fā)酵的做法合理的是（）A.從傳統(tǒng)作坊中分離和篩選優(yōu)良菌種用于大規(guī)模工廠化生產(chǎn)腐乳B.在發(fā)酵罐中加入剛果紅促進纖維素分解菌分解秸稈中的纖維素C.將葡萄汁煮沸冷卻后灌入約2/3瓶，密閉發(fā)酵即可自制葡萄酒D.每日從泡菜壇中取少量泡菜品嘗，以確定自制泡菜是否可以食用2、研究人員利用農(nóng)桿菌侵染水稻葉片；經(jīng)組培；篩選最終獲得了一株水稻突變體。利用不同的限制酶處理突變體的總DNA、電泳；并與野生型的處理結(jié)果對比，得到圖所示放射性檢測結(jié)果。（注：T-DNA上沒有所用限制酶的酶切位點）對該實驗的分析錯誤的是（）

A.檢測結(jié)果時使用了放射性標(biāo)記的T-DNA片段做探針B.該突變體產(chǎn)生的根本原因是由于T-DNA插入到水稻核DNA中C.不同酶切顯示的雜交帶位置不同，說明T-DNA有不同的插入位置D.若野生型也出現(xiàn)雜交帶，則實驗樣本可能被污染，檢測結(jié)果不準(zhǔn)確3、某同學(xué)在家用帶蓋玻璃瓶嘗試制作果酒和果醋，他的做法中錯誤的是（）A.選擇新鮮的葡萄略加沖洗，除去枝梗后榨汁B.酒精發(fā)酵期間，根據(jù)發(fā)酵進程適時打開瓶蓋放氣C.將玻璃瓶用酒精消毒后，裝入葡萄汁并預(yù)留一定的空間D.酒精發(fā)酵后去除瓶蓋，蓋一層紗布，再進行醋酸發(fā)酵4、下列有關(guān)生物工程的敘述；不正確的有（）

①基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達載體。

②蛋白質(zhì)工程可通過直接改造蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)從而改變其功能。

③克隆羊的培育涉及細(xì)胞核移植；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。

④PCR技術(shù)需要利用限制性核酸內(nèi)切酶打開DNA雙鏈。

⑤利用核移植技術(shù)可以培育試管嬰兒。

⑥牛胚胎發(fā)育的歷程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體。

⑦利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和細(xì)胞融合技術(shù)可以制備單克隆抗體。

⑧利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗時，全程都需要光照A.一項B.兩項C.三項D.四項5、花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。為培育抗黑腐病雜植株，研究者設(shè)計如下流程。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.過程①需要使用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶來處理兩種細(xì)胞B.過程②后，顯微鏡下觀察到有葉綠體的細(xì)胞即為融合細(xì)胞C.過程③的培養(yǎng)基中需加入植物激素來誘導(dǎo)脫分化和再分化D.可借助黑腐病菌接種實驗對雜種植株進行鑒定評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)6、2020年7月20日，國際醫(yī)學(xué)權(quán)威期刊《柳葉刀》上發(fā)表了新冠病毒疫苗II期臨床試驗的成果。該試驗是由陳薇院士等人領(lǐng)銜的團隊開展的研究，試驗中使用的疫苗是一種腺病毒載體重組新冠病毒疫苗(基因重組疫苗)。試驗結(jié)果表明，單次接種疫苗28天后，99．5%的受試者產(chǎn)生了特異性抗體，95．3%受試者產(chǎn)生了中和抗體，89%的受試者產(chǎn)生了特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)。這表明，陳薇團隊研發(fā)的新冠疫苗可為健康人群提供“三重保護”，將新冠病毒“拒之門外”。下列敘述正確的是（）A.該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B.受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后，體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的效應(yīng)T細(xì)胞C.主要通過檢測受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來評價試驗的有效性D.新冠肺炎康復(fù)患者可以不注射該疫苗7、生物技術(shù)安全性和倫理問題是社會關(guān)注的熱點。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.應(yīng)嚴(yán)格選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因，避免產(chǎn)生對人類有害的物質(zhì)B.當(dāng)今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗，但不反對治療性克隆C.反對設(shè)計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒D.生物武器用微生物、毒素，干擾素及重組致病菌等來形成殺傷力8、下列關(guān)于生物技術(shù)與倫理問題的正確觀點是（）A.利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別，設(shè)計試管嬰兒B.基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題C.當(dāng)今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗，但不反對治療性克隆D.大量引入國外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交9、北方白犀牛目前僅剩兩頭雌性個體，科研人員嘗試通過現(xiàn)代生物技術(shù)，利用實驗室冷凍保藏的少量北方白犀牛精子拯救該物種。下列說法正確的是（）A.科研人員可以使用體外受精、胚胎移植等技術(shù)繁育北方白犀牛的試管動物B.若利用體細(xì)胞核移植技術(shù)培育出北方白犀牛的克隆動物，該動物一定是雌性C.為了繁育更多子代，可以選擇人工繁育技術(shù)得到的原腸胚期的胚胎進行分割D.進行胚胎移植時，經(jīng)同期發(fā)情處理過的雌性北方白犀牛不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)10、如圖是科研人員構(gòu)建的類精子單倍體胚胎干細(xì)胞，以及利用該種細(xì)胞獲得半克隆小鼠的過程（圖中序號表示過程）。下列敘述正確的是（）

A.過程①使受精卵中的遺傳物質(zhì)減少一半B.過程②需在培養(yǎng)液中添加抗生素和血清C.過程③獲得的干細(xì)胞只有一條性染色體D.半克隆小鼠為雌性且與受體遺傳特性不同11、下列有關(guān)微生物的分離與培養(yǎng)實驗的敘述，正確的是（）A.倒平板前，為了防止雜菌污染，需要將錐形瓶口通過酒精燈火焰B.倒平板時，應(yīng)將培養(yǎng)皿打開一條略大于瓶口的縫隙，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌后應(yīng)立即挑取菌落D.用移液器吸取相應(yīng)的菌液前，需要將樣液充分搖勻12、DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團呈離子狀態(tài)，不同相對分子質(zhì)量DNA進行瓊脂糖凝膠電泳時可分開成不同條帶，相同分子量的為一條帶。用某種限制性核酸內(nèi)切酶完全酶切質(zhì)粒后，電泳后出現(xiàn)3條帶。下列敘述正確的是（）A.該質(zhì)粒上只有3個酶切位點B.瓊脂糖凝膠電泳可以用來分離DNAC.外加電場時，DNA向正極泳動D.瓊脂糖帶負(fù)電荷，有利于DNA的泳動評卷人得分三、填空題(共8題，共16分)13、下圖表示哺乳動物精子和卵細(xì)胞發(fā)生和成熟的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）③過程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來的；④過程在__________內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶。為了阻止多精入卵，會發(fā)生__________反應(yīng)和__________反應(yīng)。

（3）精子的發(fā)生開始的時期是__________；雌性動物卵泡的形成的時期是__________。

（4）初級卵母細(xì)胞進行Ⅰ過程是在__________時期完成的，Ⅱ過程是在__________過程中完成的。14、哺乳動物核移植可以分為______核移植（比較容易）和______核移植（比較難）。15、最常用的載體是______，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細(xì)菌染色體之外，并具有______能力的_____。16、原核基因采取______獲得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。17、在____________的溫度范圍內(nèi)，DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)解體，雙鏈分開，這過程成為__________。18、請回答有關(guān)植物細(xì)胞工程的問題：

（1）在植物中，一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過________的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其__________而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養(yǎng)。一段時間后，將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到_________培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到__________的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。19、在我國市場上究竟有多少種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品呢？一位同學(xué)帶著這樣的問題，進行了調(diào)查并將結(jié)果歸納成下圖?

對該同學(xué)的調(diào)查和歸納結(jié)果，有人表示認(rèn)同，有人提出質(zhì)疑?質(zhì)疑者認(rèn)為：目前我國市場上根本沒有大豆?玉米或甜菜的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?我們的觀點是什么_____？20、基因工程是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵技術(shù)；蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸。有人對基因工程和蛋白質(zhì)工程的關(guān)系進行了比較，并歸納為下表。

基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較。比較項目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程原理中心法則中心法則區(qū)別過程獲取目的基因→構(gòu)建表達載體→導(dǎo)入受體細(xì)胞→目的基因的檢測與鑒定預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測氨基酸序列→合成DNA→表達出蛋白質(zhì)實質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需要的生物類型或生物產(chǎn)品（基因的異體表達）定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)結(jié)果生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是第二代基因工程

上表的比較是否正確？如果有不妥之處，嘗試進行修改。_________評卷人得分四、判斷題(共4題，共8分)21、釀酒酵母的最適生長溫度為30度。()A.正確B.錯誤22、蛋白質(zhì)工程原則上只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋白質(zhì)。（選擇性必修3P93）()A.正確B.錯誤23、治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達到治療疾病的目的。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯誤24、生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)的區(qū)別。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共9分)25、為生產(chǎn)具有特定性能的α-淀粉酶；研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656個堿基對），利用基因工程大量制備琢α-淀粉酶，實驗流程見下圖。請回答下列問題：

（1）利用PCR技術(shù)擴增α-淀粉酶基因前；需先獲得細(xì)菌的_________。

（2）為了便于擴增的DNA片段與表達載體連接；需在引物的____端加上限制性酶切位點，且常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制性酶切位點，主要目的是________________。

（3）進行擴增時；反應(yīng)的溫度和時間需根據(jù)具體情況進行設(shè)定，下列選項中_______的設(shè)定與引物有關(guān)，________的設(shè)定與擴增片段的長度有關(guān)。（填序號）

①變性溫度②退火溫度③延伸溫度④變性時間⑤退火時間⑥延伸時間。

（4）下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼α-淀粉酶的mRNA的部分堿基序列：

圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含___個密碼子；如虛線框后的序列未知，預(yù)測虛線框后的第一個密碼子最多有__種。

（5）獲得工程菌表達的α-淀粉酶后；為探究影響酶活性的因素，以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測定酶活性，結(jié)果如下：

。緩沖液。

50mmol/LNa2HPO4-KH2PO4

50mmol/LTris-HCl

50mmol/LGly-NaOH

pH

6．0

6．5

7．0

7．5

7．5

8．0

8．5

9．0

9．0

9．5

10．0

10．5

酶相對活性%

25．4

40．2

49．8

63．2

70．1

95．5

99．5

85．3

68．1

63．7

41．5

20．8

根據(jù)上述實驗結(jié)果，初步判斷該α-淀粉酶活性最高的條件為______。26、餐廚垃圾廢液中的淀粉；蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì)可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物數(shù)量相對較少，存在發(fā)酵周期長、效率低等缺點，極易對環(huán)境造成污染。為探究用圓褐固氮菌、巨大芽孢桿菌處理某餐廚垃圾廢液時，單獨接種和混合接種的效果差異及最佳接種量比，以制備微生物菌劑，研究者做了如下實驗：

（1）將兩種菌液進行不同配比分組處理如下表所示：。編號R0R1R2R3圓褐固氮菌：巨大芽孢桿菌1：00：11：12：1

將上表菌液分別接種于l00mL________________中進行振蕩培養(yǎng)。本實驗還需設(shè)置空白對照，對照組接種________________。

（2）培養(yǎng)3天后測定活菌數(shù)，取一定量菌液用_____________法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)，該方法包括_____________和____________兩個操作。進行計數(shù)時，可依據(jù)______________對兩種菌進行區(qū)分，并選取菌落數(shù)在__________內(nèi)的平板。實驗結(jié)果如下圖所示，由實驗結(jié)果可知___________________。

27、炭疽；是一種由炭疽芽孢桿菌引起的人獸共患性傳染病，也是我國規(guī)定的乙類傳染病?；卮鹣铝杏嘘P(guān)問題：

(1)人通常是通過接觸患炭疽的動物或動物制品被感染，皮膚炭疽病在人類炭疽病中最為常見，這類患者的皮膚滲出物中含有炭疽芽孢桿菌。皮膚炭疽病疑似患者就醫(yī)時，醫(yī)生先要取患者的皮膚滲出物稀釋后涂布到固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)獲得的平板可能是_____。A．B．C．D．(2)挑取上述培養(yǎng)基上的菌落進行如圖所示實驗（注：實驗組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽芽孢桿菌）。

①該實驗的目的是_____。

②對照組試管中應(yīng)加入_____，實驗過程中為避免雜菌污染進行的操作包括_____（至少寫出兩點）。

③實驗結(jié)果為_____時；表明該疑似患者被炭疽芽孢桿菌感染。

④實驗過程中需將錐形瓶固定在搖床上，在35℃下振蕩培養(yǎng)24h，直至液體培養(yǎng)基變渾濁。振蕩培養(yǎng)說明炭疽芽孢桿菌的代謝類型是_____，振蕩培養(yǎng)的目的是_____。液體培養(yǎng)基變渾濁的原因是_____。

(3)對炭疽芽孢桿菌進行計數(shù)時，選用10-4、10-5、10-6三個稀釋度的菌液，各取0．2mL涂布，每個稀釋度作三次重復(fù)，經(jīng)24h恒溫培養(yǎng)后結(jié)果如表。稀釋度10-410-510-6平板編號A1A2A3B1B2B3C1C2C3菌落數(shù)31529830245535112911

由表可知，最適合計數(shù)的稀釋度為_____，原因是_____。評卷人得分六、綜合題(共3題，共9分)28、如圖為通過現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)快速繁育優(yōu)良品種牛甲的過程；A至E代表胚胎或細(xì)胞，其中A為成纖維細(xì)胞，數(shù)字代表操作過程。請據(jù)圖回答問題：

（1）上述過程①細(xì)胞培養(yǎng)時，通常要在培養(yǎng)液中加入一定量的________，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，還應(yīng)________；以便清除細(xì)胞代謝產(chǎn)物可能的危害。

（2）B細(xì)胞通常是處于________（時期）的卵母細(xì)胞。用A細(xì)胞作為核供體比胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)困難，原因是________________________。

（3）該過程核心技術(shù)的最后一道程序是________，其實質(zhì)是_________________。

（4）丁的遺傳性狀主要與________（填“甲”“乙”或“丙”）相同。29、胰蛋白酶抑制劑能干擾昆蟲的代謝；引起昆蟲死亡，但對人體無害。科學(xué)家將馬鈴薯胰蛋白酶抑制劑基因（Pin－Ⅱ）通過農(nóng)桿菌導(dǎo)入楊樹細(xì)胞，培育成了抗蟲楊樹。

注：左圖表示含目的基因的DNA分子，下圖表示質(zhì)粒，圖中Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因；復(fù)制原點是質(zhì)粒DNA復(fù)制的起點。箭頭表示識別序列完全不同的4種限制酶的酶切位點。

回答下列問題：

(1)要獲得大量的目的基因，通常采用PCR擴增技術(shù)，在PCR擴增儀中已加入了一定的緩沖溶液、含目的基因的DNA分子、Mg2＋，還需要加入的物質(zhì)有_________。通過PCR技術(shù)擴增Pin－Ⅱ基因片段，反應(yīng)過程一般由95℃熱變性、55～60℃引物和模板配對、72℃延伸三個步驟，經(jīng)過多次循環(huán)完成。延伸階段選用72℃而非95℃綜合考慮了兩個因素，這兩個因素是________和________。

(2)圖中的質(zhì)粒在基因工程操作中通常用作載體，能在受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在，除含有Ampr，Neor和多個限制酶切位點外，質(zhì)粒還具有的主要特點是________。

(3)依據(jù)圖中信息，寫出高效構(gòu)建含Pin－Ⅱ基因片段的重組質(zhì)粒的簡要操作方法：_________。

(4)用轉(zhuǎn)基因楊樹葉片喂養(yǎng)某種楊樹害蟲，發(fā)現(xiàn)害蟲死亡率顯著增加，與非轉(zhuǎn)基因的楊樹細(xì)胞相比較，此轉(zhuǎn)基因楊樹的葉片細(xì)胞中，可以檢測到的物質(zhì)有_____、____、____。（寫3項）30、近年來；靈武市按照自治區(qū)第十三次黨代會“六新六特六優(yōu)”產(chǎn)業(yè)布局，聚焦打造“高端奶之鄉(xiāng)”目標(biāo)，在靈武養(yǎng)殖基地打造奶牛良種繁育核心種群，基地優(yōu)化良種選育技術(shù)，集成體外胚胎生產(chǎn)﹑基因組檢測等技術(shù)，實施高產(chǎn)奶牛的培育?；卮鹣铝袉栴}。

(1)體外胚胎生產(chǎn)包括對實驗動物采用__________激素處理，使其排出更多的卵子，然后從__________中沖取卵子，直接與__________的精子在體外受精，再將受精卵移入__________液中繼續(xù)培養(yǎng)。

(2)為獲得高產(chǎn)奶牛，一般選取胚胎的__________取樣做DNA分析及性別鑒定，將性別為__________的胚胎移植到受體母牛子宮中；并對受體母牛進行是否妊娠的檢查。

(3)傳統(tǒng)改良技術(shù)是讓本地母牛與西門塔爾公牛雜交獲得改良牛。與傳統(tǒng)改良技術(shù)相比，胚胎移植技術(shù)的優(yōu)勢是__________。

(4)若將外源基因?qū)肱Ｊ芫?，則外源基因可能隨機插入牛受精卵DNA中，這種受精卵有的可發(fā)育成轉(zhuǎn)基因牛，有的死亡。請分析外源基因插入導(dǎo)致受精卵死亡的可能原因是__________。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、A【分析】【分析】

1；果酒發(fā)酵是利用葡萄皮表面的野生酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精；

2；果醋發(fā)酵是利用醋酸菌在有氧條件下將糖分解成醋酸；

3；泡菜是乳酸菌在無氧條件下無氧呼吸產(chǎn)生乳酸。

【詳解】

A；從傳統(tǒng)作坊中分離和篩選優(yōu)良菌種用于大規(guī)模工廠化生產(chǎn)腐乳；因為工廠大規(guī)模的工廠化生產(chǎn)需要保證菌種的優(yōu)良，保證產(chǎn)品質(zhì)量，A正確；

B；剛果紅可以鑒別纖維素是否被分解；不能促進纖維素分解菌分解纖維素，B錯誤；

C；發(fā)酵果酒的葡萄汁不能煮沸；會殺死葡萄皮表面的野生酵母菌，C錯誤；

D；泡菜過程是乳酸菌的無氧呼吸；不能每天打開泡菜壇，會導(dǎo)致發(fā)酵失敗，D錯誤。

故選A。2、C【分析】【分析】

將目的基因插入到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA上；通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以使目的基因進入植物細(xì)胞，并將其插入到植物細(xì)胞中染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。它是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法。

放射性標(biāo)記的T-DNA片段做探針的目的是檢測受體細(xì)胞的DNA中有無目的基因。均顯示一條雜交帶；說明在這一突變體中，T-DNA插入位置是唯一的。

【詳解】

A；圖示結(jié)果突變體中出現(xiàn)放射性；說明使用了放射性標(biāo)記的T-DNA片段做探針對目的基因進行檢測，A正確；

B；該突變體產(chǎn)生的根本原因是T-DNA攜帶目的基因插入到水稻的DNA中；B正確；

C；不同酶切雜交帶位置不同；說明不同酶切后帶有T-DNA的片段長度不同（即：不同的酶切位點距離T-DNA的遠(yuǎn)近不同），C錯誤；

D；由圖所示放射性檢測結(jié)果可知；野生型無放射性雜交條帶，若野生型也出現(xiàn)雜交帶，則實驗樣本可能被污染，檢測結(jié)果不準(zhǔn)確，D正確。

故選C。

【點睛】

本題通過放射性同位素標(biāo)記方法檢測目的基因的方法，考查對基礎(chǔ)知識的運用，以及對實驗結(jié)果的分析和判斷能力。3、B【分析】【分析】

果酒和果醋制作過程中的相關(guān)實驗操作：（1）材料的選擇與處理：選擇新鮮的葡萄；榨汁前先將葡萄進行沖洗，除去枝梗。（2）滅菌：①榨汁機要清洗干凈，并晾干。②發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒。（3）榨汁：將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機榨取葡萄汁。（4）發(fā)酵：①將葡萄汁裝人發(fā)酵瓶，要留要大約1/3的空間，并封閉充氣口。②制葡萄酒的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在18℃～25℃，時間控制在10～12d左右，可通過出料口對發(fā)酵的情況進行。及時的監(jiān)測。③制葡萄醋的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在30℃～35℃，時間控制在前7～8d左右，并注意適時通過充氣口充氣。

【詳解】

A；選擇新鮮的葡萄；榨汁前先將葡萄沖洗，并除去枝梗，但沖洗的次數(shù)不能太多，防止去掉葡萄皮上野生型酵母菌，A正確；

B；酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳；則發(fā)酵過程密閉，但經(jīng)常擰松瓶蓋（不能打開）排除發(fā)酵產(chǎn)生的氣體，B錯誤；

C；將葡萄汁灌入已消過毒的發(fā)酵瓶中并留有1/3空間；目的是有利于酵母菌有氧呼吸從而快速繁殖，防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的二氧化碳造成酵母液溢出，C正確；

D；因為醋酸菌是好氧型細(xì)菌；當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)生酒精后，再將瓶蓋打開，蓋上一層紗布，再進行醋酸發(fā)酵，D正確。

故選B。4、D【分析】【分析】

1.將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體．用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。

2.植物組織培養(yǎng)的過程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進一步發(fā)育植株（新植體）。

3.植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。

4.基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲?。虎诨虮磉_載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

①基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的第二步；也是基因工程的核心步驟，①正確；

②蛋白質(zhì)工程是通過直接改造基因的結(jié)構(gòu)從而實現(xiàn)了對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)的改造；②錯誤；

③克隆羊的培育涉及細(xì)胞核移植；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)；屬于無性繁殖，③正確；

④PCR技術(shù)需要利用高溫打開DNA雙鏈；④錯誤；

⑤利用體外受精；胚胎移植技術(shù)可以培育試管嬰兒；⑤錯誤；

⑥哺乳動物胚胎發(fā)育的歷程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體；牛也不例外，⑥正確；

⑦制備單克隆抗體的過程利用了動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和細(xì)胞融合技術(shù)；⑦正確；

⑧利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗時；誘導(dǎo)芽形成的過程需要光照，其他過程中未必需要光，⑧錯誤。

共四項錯誤。

故選D。

【點睛】5、D【分析】【分析】

1；植物的體細(xì)胞雜交就是將同種或不同種的細(xì)胞經(jīng)過一定的誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)融合形成一個細(xì)胞；再將細(xì)胞培育成植株的過程。

2；雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁是植物原生質(zhì)體融合的標(biāo)志；細(xì)胞中高爾基體與細(xì)胞壁的形成有關(guān)。

3；植物體細(xì)胞雜交的優(yōu)點是：克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙；培育遠(yuǎn)緣雜種植株。

4；雜種細(xì)胞經(jīng)過植物組織培養(yǎng)的再分化過程；可選擇性表達出親本細(xì)胞的相應(yīng)性狀。

5；分析題圖：圖示為采用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得抗黑腐病雜種植株的流程圖；其中①表示采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細(xì)胞壁的過程；②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過程；③是脫分化形成愈傷組織的過程。

【詳解】

A；過程①是去除細(xì)胞壁；可用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，A錯誤；

B；過程②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過程；顯微鏡下觀察有無葉綠體作為初步篩選的標(biāo)志，還需要鑒定是否具有抗黑腐病特性來確定融合細(xì)胞，B錯誤；

C；過程③是脫分化形成愈傷組織的過程；沒有再分化，C錯誤；

D；在分子水平上可通過PCR技術(shù)對雜種植株進行鑒定；在個體水平上可以通過對雜種植株進行黑腐病菌接種實驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株，D正確。

故選D。二、多選題(共7題，共14分)6、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已經(jīng)發(fā)展了三代：

第一代疫苗指的是滅活疫苗和減毒活疫苗；通過體外培養(yǎng)病毒，然后用滅活的病毒刺激人體產(chǎn)生抗體，它是使用最為廣泛的傳統(tǒng)疫苗；

第二代疫苗又稱為亞單位疫苗；是通過基因工程原理獲得的具有免疫活性的病原特異性結(jié)構(gòu)蛋白，刺激人體產(chǎn)生抗體；

第三代疫苗是核酸疫苗；又稱基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是將編碼某一抗原蛋白的基因作為疫苗，注射到人體中，通過正常的人體生理活動產(chǎn)生抗原蛋白，誘導(dǎo)機體持續(xù)作出免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體。

【詳解】

A；該疫苗是基因重組疫苗；需要將腺病毒載體和新冠病毒的基因進行連接，所以該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，A正確；

B；受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后；體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的漿細(xì)胞，B錯誤；

C；主要通過檢測受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來評價試驗的有效性；C正確；

D；新冠肺炎康復(fù)患者體內(nèi)產(chǎn)生了新冠病毒抗體和和相應(yīng)的記憶細(xì)胞；可以不注射該疫苗，D正確。

故選ACD。7、A:B:C【分析】【分析】

（1）生物技術(shù)安全性問題包括食物安全；生物安全、環(huán)境安全三個方面。

（2）倫理問題主要在克隆人的問題上出現(xiàn)爭議。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因植物合成的某些新蛋白質(zhì)；可能會成為過敏原而引起少數(shù)人過敏，A正確；

B；治療性克隆是為了從胚胎中取出干細(xì)胞用于醫(yī)學(xué)研究和治療；生殖性克隆就是將人的體細(xì)胞移植到去核的卵中，然后將其在體外形成的胚胎移植到母體子言中，最終經(jīng)足懷胎后生下的嬰兒就是克隆人，當(dāng)今社會的大多數(shù)人對克隆人的研究持否定態(tài)度，但不反對治療性克隆，B正確；

C；反對設(shè)計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒；C正確；

D；生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過基因重組的致病菌等，這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷效果，干擾是動物或人體細(xì)胞受到病毒侵染后產(chǎn)生的一種糖蛋白，它是一種抗病毒的特效藥，D錯誤。

故選ABC。8、B:C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

我國反對以克隆人為目的任何實驗和舉動；主要是基于以下四方面的倫理考慮：

1；克隆人是對人權(quán)和人的尊嚴(yán)的挑戰(zhàn)；

2；克隆人違反生物進化的自然發(fā)展規(guī)律；

3；克隆人將擾亂社會家庭的正常倫理定位；

4；克隆人的安全性在倫理上也難以確認(rèn)。

【詳解】

A；設(shè)計試管嬰兒性別會引起性別比例失調(diào)；違背倫理道德，我國不允許利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別，A錯誤；

B；基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題；B正確；

C；當(dāng)今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗；但不反對治療性克隆，C正確；

D；大量引入國外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交；可能造成基因污染和環(huán)境安全，D錯誤。

故選BC。9、A:B:D【分析】【分析】

胚胎移植：（1）概念：是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的；生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)，其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體稱為“受體”；

（2）胚胎移植的基本程序主要包括：①對供；受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查。

【詳解】

A；因為有兩頭雌性個體和少量北方白犀牛精子；所以科研人員可以使用體外受精、胚胎移植等技術(shù)繁育北方白犀牛的試管動物，拯救北方白犀牛物種，A正確；

B；目前只有雌性個體；即體細(xì)胞只有雌性動物的體細(xì)胞，若利用體細(xì)胞核移植技術(shù)培育出北方白犀牛的克隆動物，該動物一定是雌性，B正確；

C；為了繁育更多子代；可以選擇人工繁育技術(shù)得到的桑椹胚或囊胚時期的胚胎進行分割，C錯誤；

D；在進行胚胎移植時；要用激素進行同期發(fā)情處理，為胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境，經(jīng)同期發(fā)情處理過的雌性北方白犀牛不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選ABD。10、B:C:D【分析】【分析】

“人造精子”是一種可以替代精子使卵細(xì)胞“受精”的單倍體胚胎干細(xì)胞。目前構(gòu)建成功的單倍體胚胎干細(xì)胞系；其細(xì)胞核內(nèi)包含的性染色體全部都是X染色體，而無包含Y染色體的細(xì)胞。單倍體胚胎干細(xì)胞在培養(yǎng)過程中可能會成為二倍體細(xì)胞，原因是有一部分單倍體細(xì)胞在分裂期時發(fā)生異常，跳過分裂期重新進入分裂間期，導(dǎo)致DNA含量加倍。

【詳解】

A；過程①只是去掉雌原核遺傳物質(zhì)（核遺傳物質(zhì)）；受精卵中還有卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)，A錯誤；

B；過程②需保證培養(yǎng)過程無菌；因而可添加抗生素，由于人們對細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)尚未全部研究清楚，因此在使用合成培養(yǎng)基時，通常需要添加血清等天然成分，B正確；

C；孤雌單倍體胚胎細(xì)胞只含有精子的染色體；而精子只含1條性染色體，因而過程③獲得的干細(xì)胞只有一條性染色體，C正確；

D；卵母細(xì)胞的性染色體是X；類精子單倍體胚胎干細(xì)胞的性染色體也是X，因而半克隆小鼠的性染色體是X，發(fā)育成雌性，受體只為胚胎提供營養(yǎng)物質(zhì)，不影響胚胎的遺傳物質(zhì)，D正確。

故選BCD。11、A:D【分析】【分析】

平板劃線的操作的基本步驟是：(1)右手持接種環(huán)；經(jīng)火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口過火焰，將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口過火焰并塞上棉塞。(2)左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基表面。(3)燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線，重復(fù)以上操作，在第三四五區(qū)內(nèi)劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。(4)將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

【詳解】

A；倒平板前；需要將錐形瓶口通過酒精燈火焰，通過灼燒滅菌防止雜菌污染，A正確；

B；倒平板時；應(yīng)將培養(yǎng)皿打開一條略大于瓶口的縫隙，以免雜菌進入，而不是為了防濺，B錯誤；

C；接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌后應(yīng)等到冷卻后再挑取菌落；否則高溫會使菌落死亡，C錯誤；

D；用移液器吸取相應(yīng)的菌液前；需要將樣液充分搖勻，保證菌液中微生物均勻分布，提高實驗的準(zhǔn)確性，D正確。

故選AD。12、B:C:D【分析】【分析】

分析題干：質(zhì)粒上的DNA分子為環(huán)狀；某種限制性內(nèi)切酶完全酶切環(huán)狀質(zhì)粒后，出現(xiàn)3條帶（相同分子量的為一條帶），即3種不同分子量DNA（至少被切割成3條DNA片段），因此環(huán)狀質(zhì)粒上至少有3個酶切位點。

【詳解】

A；由分析可知；該質(zhì)粒上至少含有3個酶切位點，A錯誤；

B；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團呈離子狀態(tài)；帶負(fù)電，DNA在一定的電場力作用下，在凝膠中向正極泳動，DNA分子越大，泳動越慢，因此瓊脂糖凝膠電泳可以用來分離DNA，B正確；

C；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團呈離子狀態(tài)；帶負(fù)電，因此外加電場時，DNA向正極泳動，C正確；

D；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團呈離子狀態(tài)；帶負(fù)電，若瓊脂糖帶負(fù)電荷，使得電場力增強，有利于DNA向正極泳動，D正確。

故選BCD。三、填空題(共8題，共16分)13、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復(fù)制；②是減數(shù)分裂，③是精細(xì)胞變形為精子過程，④是受精作用；

2；哺乳動物精子和卵子發(fā)生的不同點：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場所唯一（MⅠ和MⅡ的場所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場所不唯一，（MⅠ場所在卵巢，MⅡ場所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機能衰退；多數(shù)哺乳動物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來的；④過程是受精過程，在輸卵管內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶，透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動物精子產(chǎn)生的時期是初情期；雌性動物卵泡細(xì)胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級卵母細(xì)胞進行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過程中完成的。

【點睛】

本題考查卵細(xì)胞的形成過程和受精作用等相關(guān)知識，意在考查學(xué)生識記相關(guān)細(xì)節(jié)和解決問題的能力?！窘馕觥扛郀柣w輸卵管透明帶反應(yīng)卵細(xì)胞膜反應(yīng)初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用14、略

【解析】①.胚胎細(xì)胞②.體細(xì)胞15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】質(zhì)粒自我復(fù)制雙鏈環(huán)狀DNA分子16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】直接分離人工合成反轉(zhuǎn)錄法化學(xué)合成法17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】80—100℃變性18、略

【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細(xì)胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過激素的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養(yǎng)。一段時間后，將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中；由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。

【點睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記植物組織培養(yǎng)的過程、原理及條件，掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確分析，屬于考綱識記和理解層次的考查。【解析】①.激素②.特有的結(jié)構(gòu)和功能③.黑暗④.分化⑤.培養(yǎng)條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽19、略

【分析】【詳解】

目前我國市場上的轉(zhuǎn)基因食品，從原料來源看，進口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜，故我國市場上有大豆等的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品。【解析】目前我國市場上的轉(zhuǎn)基因食品，從原料來源看，進口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜。20、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，其結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)。【解析】蛋白質(zhì)工程的結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)四、判斷題(共4題，共8分)21、B【分析】【詳解】

釀酒酵母的最適生長溫度是28℃；但在發(fā)酵過程中，一般將溫度控制在18-30℃，這是因為果皮表面附著的野生酵母菌可能有多種（有多種酵母菌參與了發(fā)酵過程），從實踐的角度看，大致控制溫度范圍比較簡單易行。

故本說法錯誤。22、B【分析】【詳解】

基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程，通過改造和合成基因來改造現(xiàn)有的蛋白質(zhì)或制造出一種新的蛋白質(zhì)，可見蛋白質(zhì)工程可以制造出自然界不存在的、但是能符合人類生產(chǎn)和生活需求的蛋白質(zhì)，故說法錯誤。23、A【分析】【詳解】

治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達到治療疾病的目的。本說法正確。24、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)區(qū)別；最重要的體現(xiàn)在目的不同。

【詳解】

治療性克?。菏侵赴芽寺〕鰜淼慕M織和器官用于治療疾病，這種用于醫(yī)療目的的使用克隆技術(shù)制造胚胎稱為治療性克隆。生殖性克隆：處于生殖的目的使用克隆技術(shù)在實驗室制造人類胚胎。治療性克隆和生殖性克隆最重要的差別是目的不同。五、實驗題(共3題，共9分)25、略

【分析】【分析】據(jù)圖分析；圖示為利用基因工程大量制備α-淀粉酶的過程，目的基因是α-淀粉酶基因，與體構(gòu)建基因表達載體，然后將目的基因?qū)氪竽c桿菌，接著對目的基因進行檢測與鑒定，最后利用工程菌培養(yǎng)獲得大量的α-淀粉酶產(chǎn)品。

【詳解】（1）α-淀粉酶基因來自于海洋細(xì)菌；因此為了利用PCR技術(shù)擴增α-淀粉酶基因，必須先獲得細(xì)菌的基因組DNA。

（2）目的基因與運載體結(jié)合前需要用限制酶對兩者進行切割；延伸是在引物的3’端延伸，為了保證目的基因的完整性，因此需在引物的5’端加上限制性酶切位點，且為了使DNA片段能定向插入表達載體，減少自連，常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制性酶切位點。

（3）進行擴增時；退火溫度的設(shè)定與引物有關(guān)，延伸時間的設(shè)定與擴增片段的長度有關(guān)。

（4）根據(jù)題意分析；虛線框內(nèi)mRNA片段內(nèi)含有24個堿基，每3個堿基構(gòu)成一個密碼子，因此包含24÷3=8個密碼子；構(gòu)成mRNA的堿基有4種，若虛線框后的序列未知，預(yù)測虛線框后的第一個密碼子最多有4×4-3=13種。

（5）根據(jù)表格數(shù)據(jù)分析可知，在pH為8.5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl的條件下；α-淀粉酶相對活性為99.5%，活性最高。

【點睛】解答本題的關(guān)鍵是基因工程的四個基本步驟以及PCR技術(shù)的過程、條件，回憶相關(guān)知識點和注意事項，結(jié)合提示分析答題?！窘馕觥炕蚪MDNA5’使DNA片段能定向插入表達載體，減少自連②⑥813pH為8．5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl26、略

【分析】微生物實驗室培養(yǎng)的實驗操作：1；制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的過程為：計算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板。2、純化大腸桿菌：（1）原理：在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個細(xì)胞；使其長成單個的菌落，這個單個菌落就是一個純化的細(xì)菌菌落。（2）微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在-起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

（1）將上表菌液分別接種于100mL餐廚垃圾廢液中進行振蕩培養(yǎng)；振蕩處理的目的是增加溶液中的溶氧量；有利于目的菌與溶液充分接觸；本實驗還需設(shè)置對照組為接種等量無菌水。

（2）測定活菌數(shù)；需要利用稀釋涂布平板法，接種時故需要取一定量菌液進行梯度稀釋，然后分別取0.1mL的菌液采用涂布法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)。進行計數(shù)時，可依據(jù)菌落的特征對兩種菌進行區(qū)分，并選取菌落數(shù)在30-300內(nèi)的平板。由實驗結(jié)果可知：兩種菌混合接種時有效菌落數(shù)均大于單獨接種；兩菌種接種量比例為1:1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化。

【點睛】

本題結(jié)合圖表，考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記制備培養(yǎng)基的過程;識記接種微生物常用的兩種方法及微生物的計數(shù)方法，能結(jié)合柱形圖中信息準(zhǔn)確答題。【解析】某餐廚垃圾廢液等量無菌水稀釋涂布平板系列（梯度）稀釋涂布平板菌落特征30~300兩種菌混合接種時有效菌落數(shù)均大于單獨接種；兩菌種接種量比例為1：1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化27、略

【分析】【分析】

1；稀釋涂布平板法：將待測樣品制成均勻的系列稀釋液；盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使成單個細(xì)胞存在，再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。2、平板劃線法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞，用接種環(huán)在平板表面上作多次由點到線的劃線稀釋而獲得較多獨立分布的單個細(xì)胞，并讓其成長為單菌落的方法。

【詳解】

（1）A；B、C中的菌落分布較均勻；是通過稀釋涂布平板法獲得的，而D是通過平板劃線法獲得的，劃線平板法是從上一次劃線的末端開始劃線。故選ABC。

（2）①從整個實驗過程可以看出；實驗通過對皮膚滲出物稀釋培養(yǎng)形成的菌落進行擴大培養(yǎng)后，利用噬菌體的作用檢測其中是否含有炭疽芽孢桿菌。②對照組中加入的液體不應(yīng)含有噬菌體，因此應(yīng)加入等量的生理鹽水；在進行微生物培養(yǎng)時為防止雜菌的混入，消毒和滅菌工作是關(guān)鍵，主要包括對操作的空間；操作者的衣著和手進行清潔和消毒；將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌；實驗操作在酒精燈火焰附近進行；操作過程中避免已經(jīng)滅菌的材料用具與周圍物品相接觸等。③若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度低于對照組，說明實驗組中的炭疽芽孢桿菌被噬菌體侵染與破壞，即該疑似患者感染了炭疽芽孢桿菌。④炭疽芽孢桿菌屬于細(xì)菌，能寄生在人和動物體內(nèi)，說明它是異養(yǎng)型生物，培養(yǎng)時需要借助搖床振蕩培養(yǎng)，說明它是需氧型生物；振蕩培養(yǎng)的目的是增加培養(yǎng)液中的氧氣含量，使細(xì)菌與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，有利于炭疽芽孢桿菌的大量繁殖；培養(yǎng)液變渾濁表明炭疽芽孢桿菌大量繁殖。

（3）分析表中數(shù)據(jù)可知，只有稀釋度為10-5時菌落數(shù)在30~300之間，適合用于計數(shù)。【解析】(1)ABC

(2)檢驗皮膚炭疽病疑似患者的皮膚滲出物中是否含有炭疽芽孢桿菌與實驗組等量的生理鹽水對操作的空間；操作者的衣著和手進行清潔和消毒；將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌；實驗操作在酒精燈火焰附近進行；操作過程中避免已經(jīng)滅菌的材料用具與周圍物品相接觸實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組低（異養(yǎng)）需氧型增加培養(yǎng)液中的氧氣含量；使細(xì)菌與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸炭疽芽孢桿菌大量繁殖。

(3)10-5稀釋度為10-5時菌落數(shù)在30~300之間六、綜合題(共3題，共9分)28、略

【分析】1；由圖可知；涉及到的細(xì)胞工程生物技術(shù)和胚胎工程技術(shù)有動物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植和胚胎移植；通過①獲得的體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)全能性更難，該過程中用到的細(xì)胞B是減數(shù)第二次分裂中期的次級卵母細(xì)胞；用于胚胎移植通常為發(fā)育至桑椹胚或囊胚的胚胎；要對甲牛和丙牛做同期發(fā)情處理處理，保證胚胎B處于相同生理環(huán)境。

2；動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：

（1）無菌；無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液；以清除代謝廢物。

（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖；氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等；還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。

（3）溫度和PH:36.5℃±0.5℃；適宜的pH:7.2～7.4。

（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。

3；胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和