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專題5過關(guān)檢測(時間:60分鐘,滿分:100分)一、選擇題(共25小題,每小題2分,共50分)1.下列敘述中錯誤的是()。A.轉(zhuǎn)變NaCl溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色C.用電泳法可分別帶電性質(zhì)、分子大小和外形不同的蛋白質(zhì)D.用透析法可去除蛋白質(zhì)樣品中的小分子物質(zhì)解析:在不同濃度的NaCl溶液中DNA的溶解度不同,在物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最小,DNA析出,呈絲狀物,過濾后存在于黏稠物中;在物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液中溶解度最大,所以DNA呈溶解狀態(tài),過濾后存在于濾液中。答案:A2.在DNA提取過程中,最好使用塑料試管和燒杯,目的是()。A.不易裂開B.削減提取過程中DNA的損失C.增加DNA的含量D.簡潔洗刷解析:玻璃對DNA有吸附作用,假如用玻璃器具,DNA會吸附在管壁上,削減DNA的提取量。答案:B3.“DNA的粗提取與鑒定”試驗(yàn)中,操作正確的是()。A.取制備好的雞血細(xì)胞液5~10mL,注入燒杯中,快速加入物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液20mL,同時用玻璃棒沿同一方向快速攪拌5min,可使血細(xì)胞裂開,釋放出DNAB.整個DNA提取過程中,兩次加蒸餾水的目的,都是為了降低溶液中NaCl的濃度,使DNA分子的溶解度達(dá)到最低,析出DNA分子C.整個DNA提取操作中,兩次加入2mol/L的NaCl溶液,目的都是使DNA盡可能多地溶解在NaCl溶液中D.DNA鑒定操作中,只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4mL的二苯胺試劑,即可消滅藍(lán)色解析:取制備好的雞血細(xì)胞液注入燒杯中,快速加入蒸餾水并用玻璃棒沿同一方向攪拌,使血細(xì)胞裂開,將DNA釋放出來;整個DNA提取過程中,使用兩次蒸餾水,第一次是使血細(xì)胞吸水脹破,釋放核DNA,其次次是用來稀釋NaCl溶液,使DNA析出;在DNA鑒定操作中,DNA遇二苯胺試劑呈藍(lán)色需在沸水浴條件下完成。答案:C4.(多選)下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取和分別試驗(yàn)的敘述,正確的是()。A.提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需要用蒸餾水脹破細(xì)胞B.用不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可除去蛋白質(zhì)C.蛋白質(zhì)提取和分別過程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNAD.蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進(jìn)行分別純化解析:A項(xiàng),在提取DNA時,假如材料是動物細(xì)胞則需要用蒸餾水脹破,假如是植物細(xì)胞則不需要,而是用洗滌劑瓦解細(xì)胞膜。B項(xiàng)用物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液溶解DNA,然后過濾出蛋白質(zhì),再降低NaCl溶液濃度,析出DNA。C項(xiàng)中透析用以除去小分子物質(zhì),DNA是大分子物質(zhì)。D項(xiàng)是常規(guī)方法如用聚丙烯酰胺凝膠電泳,可以依據(jù)其分子大小及所帶電荷性質(zhì)進(jìn)行分別純化。答案:BD5.做DNA粗提取和鑒定試驗(yàn)時,試驗(yàn)材料用雞血而不用豬血的緣由是()。A.雞血的價格比豬血的價格低B.豬的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核,不易提取到DNAC.雞血不凝固,豬血會凝固D.用雞血提取DNA比用豬血提取操作簡便解析:DNA是生物的遺傳物質(zhì),主要存在于細(xì)胞核內(nèi)。生物試驗(yàn)材料的選擇原則:一是簡潔獲得,二是試驗(yàn)現(xiàn)象明顯。做DNA粗提取與鑒定試驗(yàn)的試驗(yàn)材料不選豬血是由于哺乳動物成熟的紅細(xì)胞無細(xì)胞核,不易提取到DNA,而鳥類、爬行類等動物成熟的紅細(xì)胞有細(xì)胞核,試驗(yàn)現(xiàn)象明顯。答案:B6.將粗提取的DNA絲狀物分別加入物質(zhì)的量濃度為0.14mol/LNaCl溶液、物質(zhì)的量濃度為2mol/LNaCl溶液、體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液中,然后用放有紗布的漏斗過濾,分別得到濾液P、Q、R以及存留在紗布上的黏稠物p、q、r,其中由于含DNA少可以丟棄的是()。A.P、Q、RB.p、q、rC.P、q、R D.p、Q、r解析:將粗提取的DNA絲狀物加入物質(zhì)的量濃度為0.14mol/LNaCl溶液中,DNA析出,過濾后存在于紗布上(p),雜質(zhì)存在于濾液中(P);加入物質(zhì)的量濃度為2mol/LNaCl溶液中,DNA溶解,過濾后存在于濾液中(Q),雜質(zhì)存在于紗布上(q);加入體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液中,DNA析出,過濾后存在于紗布上(r),雜質(zhì)存在于濾液中(R)。答案:C7.若選擇的試驗(yàn)材料為植物細(xì)胞,裂開細(xì)胞時要加入肯定量的洗滌劑和食鹽。加入食鹽的目的是()。A.利于DNA的溶解 B.分別DNA和蛋白質(zhì)C.溶解細(xì)胞膜 D.溶解蛋白質(zhì)解析:試驗(yàn)材料是植物細(xì)胞,需先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜,再加入食鹽利于DNA的溶解。答案:A8.(多選)下面能影響DNA粗提取含量的是()。A.選材 B.洗滌劑的用量C.二苯胺的用量 D.攪拌和研磨的程度解析:A項(xiàng):盡量選擇DNA含量高的材料粗提取DNA。B項(xiàng):洗滌劑的用量和類型能影響細(xì)胞膜的瓦解程度,從而導(dǎo)致DNA的釋放量的變化。C項(xiàng):二苯胺是DNA的鑒定劑,而非提取劑。D項(xiàng):攪拌和研磨充分有利于DNA的釋放。答案:ABD9.粗提取DNA的最終一步用到冷卻的酒精溶液,DNA會以白色絲狀物的形態(tài)析出,其中每一根白色絲狀物是()。A.一條脫氧核苷酸鏈B.一個DNA分子C.扭結(jié)在一起的多個DNA分子D.一條染色體解析:一條脫氧核苷酸鏈和一個DNA分子特殊微小,不會被眼睛直接觀看到。對DNA粗提取過程中,蛋白質(zhì)已被破壞或過濾掉,所以樣品中不再存在由DNA和蛋白質(zhì)組成的染色體。答案:C10.DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)解開的溫度范圍是()。A.10~20℃ B.80~100℃C.20~30℃ D.40~60℃解析:蛋白質(zhì)大多不能忍受60~80℃的高溫,而DNA在80℃以上才會變性。答案:B11.(雙選)下列有關(guān)PCR技術(shù)的說法,不正確的是()。A.PCR技術(shù)是在細(xì)胞內(nèi)完成的B.PCR技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)C.PCR技術(shù)的原理與DNA復(fù)制的原理不同D.PCR技術(shù)的前提是有一段已知的目的基因的核苷酸序列解析:PCR技術(shù)是在生物體外進(jìn)行DNA復(fù)制的技術(shù),其原理與DNA復(fù)制的原理相同,但前提是必需要有一段已知的目的基因的核苷酸序列和依據(jù)核苷酸序列合成的引物。答案:AC12.關(guān)于DNA的復(fù)制,下列敘述正確的是()。A.DNA聚合酶不能從頭開頭合成DNA,只能從5'端延長DNA鏈B.DNA復(fù)制不需要引物C.引物與DNA母鏈通過堿基互補(bǔ)配對進(jìn)行結(jié)合D.DNA的合成方向總是從子鏈的3'端向5'端延長解析:由于DNA聚合酶不能從頭開頭合成DNA,只能從引物的3'端即復(fù)制方向由模板鏈的3'端向5'端延長;由于DNA分子是反向平行的,子鏈?zhǔn)且罁?jù)堿基互補(bǔ)配對原則,在DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向是從子鏈5'端向3'端延長。答案:C13.PCR一般要經(jīng)過三十多次循環(huán),從其次輪循環(huán)開頭,上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反應(yīng),由引物Ⅰ延長而成的DNA單鏈作模板時將()。A.仍與引物Ⅰ結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延長B.無需與引物結(jié)合,在酶的作用下從頭合成子鏈C.同時與引物Ⅰ和引物Ⅱ結(jié)合進(jìn)行子鏈延長D.與引物Ⅱ結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延長解析:PCR擴(kuò)增中,從其次輪循環(huán)開頭,由引物Ⅰ延長而成的DNA單鏈作模板時,將與引物Ⅱ結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延長;由引物Ⅱ延長而成的DNA單鏈作模板時,將與引物Ⅰ結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延長。答案:D14.下圖是哪次循環(huán)的產(chǎn)物?()A.第一次循環(huán) B.其次次循環(huán)C.第三次循環(huán) D.第四次循環(huán)解析:在PCR反應(yīng)中,以引物為標(biāo)記,第一次循環(huán)時,以加入的DNA為模板,兩條DNA鏈可分別由引物Ⅰ和引物Ⅱ與其結(jié)合并在DNA聚合酶的作用下延長,所以形成的每個子DNA中只有一種引物;從其次次循環(huán)開頭,上次產(chǎn)生的DNA分子又可作為模板參與反應(yīng),所以會形成DNA分子兩端均含引物的狀況,如圖所示:因此題干中所消滅的狀況是第一次循環(huán)的產(chǎn)物。答案:A15.復(fù)性溫度是影響PCR特異性的較重要因素。變性后溫度快速冷卻至40~60℃,可使引物和模板發(fā)生結(jié)合。PCR的結(jié)果可不考慮原來解旋開的兩個DNA模板鏈的重新結(jié)合,緣由不包括()。A.由于模板DNA比引物簡單得多B.引物和模板之間的碰撞結(jié)合機(jī)會遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于模板互補(bǔ)鏈之間的碰撞C.加入引物的量足夠多而模板鏈數(shù)量少D.模板鏈加熱解旋已經(jīng)變性不行能再次結(jié)合解析:DNA分子在80~100℃的溫度范圍內(nèi)雙螺旋結(jié)構(gòu)解體,雙鏈打開,在DNA分子復(fù)制時供應(yīng)模板,這個過程稱為變性。當(dāng)溫度緩慢降低到50℃左右時,兩條解聚的單鏈重新結(jié)合成雙鏈,稱為復(fù)性,故D闡述錯誤。答案:D16.在PCR過程中,一般進(jìn)行自動把握的是()。A.引物的設(shè)計(jì)B.反應(yīng)成分的配制C.移液器槍頭的更換D.溫度由94℃→55℃→72℃的調(diào)整解析:真正的PCR過程一般由PCR儀完成,PCR儀對溫度的調(diào)整是自動的。引物的設(shè)計(jì)由人的大腦完成,反應(yīng)成分的配制、移液器槍頭的更換一般在PCR儀外由人工完成。答案:D17.為了提取血紅蛋白,從學(xué)校四周的屠宰場索取新穎的豬血,對豬血處理的正確操作是()。A.要在采血容器中預(yù)先加入抗凝血劑檸檬酸鈉B.取血回來后,馬上進(jìn)行高速長時間離心C.將離心后的血細(xì)胞加入清水緩慢攪拌D.重復(fù)洗滌直到上清液呈紅色為止解析:取血后,應(yīng)進(jìn)行低速短時間離心;離心后的血細(xì)胞加入蒸餾水緩慢攪拌,使紅細(xì)胞裂開;紅細(xì)胞重復(fù)洗滌直到上清液沒有黃色為止。答案:A18.利用離心法純化蛋白質(zhì)主要是利用了蛋白質(zhì)的()。A.結(jié)構(gòu)與組成 B.種類和數(shù)量C.大小和密度 D.所攜帶電荷的多少解析:離心法純化蛋白質(zhì),是通過把握離心速率,使分子大小、密度不同的蛋白質(zhì)發(fā)生分層,從而達(dá)到分別出各種蛋白質(zhì)的目的。答案:C19.有資料顯示,在非洲,作為鐮刀形細(xì)胞貧血癥基因攜帶者更能適應(yīng)于當(dāng)?shù)氐沫h(huán)境。有人認(rèn)為這種人的血紅蛋白可能與正常人或鐮刀形細(xì)胞貧血癥病人的有肯定差異。為證明這種猜想,需對攜帶者的血紅蛋白進(jìn)行實(shí)際的檢測,而欲要檢測,就必需分別得到這種血紅蛋白。試想分別提純鐮刀形細(xì)胞貧血癥攜帶者(Aa)的血紅蛋白時,用不到的藥品或儀器是()。A.瓊脂糖 B.磷酸緩沖液C.離心機(jī) D.自來水解析:由于分別血紅蛋白的常用方法是凝膠色譜法,而該法中所用的凝膠可以是葡聚糖或瓊脂糖,故A是可用品;又由于該方法的實(shí)際操作中,需要用離心方法將紅細(xì)胞與其他血液成分分別開,故C也是必需的;又因試驗(yàn)環(huán)境中的pH必需與人體內(nèi)的基本全都,故需要用磷酸緩沖液進(jìn)行酸堿度的調(diào)整。答案:D20.下列有關(guān)PCR技術(shù)的敘述,錯誤的是()。A.PCR技術(shù)肯定需要解旋酶和DNA聚合酶B.DNA聚合酶不能從頭開頭合成DNA,而只能從引物的3'端延長DNA鏈C.PCR的引物的基本單位是脫氧核苷酸或核糖核苷酸D.擴(kuò)增DNA時,需要加入兩種引物解析:在PCR技術(shù)中,用高溫加熱的方法使DNA變性即解旋,而不用解旋酶。DNA聚合酶不能從頭開頭合成DNA,而只能從3'端延長DNA。引物是一小段DNA或RNA,其基本單位是脫氧核苷酸或核糖核苷酸。DNA復(fù)制時以兩條單鏈為模板,每條單鏈都需要引物,故需要兩種引物。答案:A21.下列關(guān)于凝膠色譜法的原理及操作不正確的是()。A.是利用凝膠把分子大小不同的物質(zhì)分別開的一種方法B.在洗脫過程中,大分子不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部而最先流出,而小分子可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部而流速緩慢,最終流出C.凝膠內(nèi)部有很微細(xì)的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),其孔隙大小與被分別的物質(zhì)分子的大小無相應(yīng)關(guān)系D.一般狀況下,凝膠對要分別的物質(zhì)沒有吸附作用,因此全部要分別的物質(zhì)都應(yīng)當(dāng)被洗脫出來解析:本題考查凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)的原理。凝膠色譜法是依據(jù)相對分子質(zhì)量大小分別蛋白質(zhì)的有效方法,凝膠是由多糖類化合物構(gòu)成的,其內(nèi)部有很微細(xì)的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),小分子蛋白質(zhì)可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部,路程較長,移動速度慢,而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部,路程較短,移動速度快,因此在洗脫過程中先被分別。選用不同種凝膠,其立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)不同,孔隙大小不同,因此可分別的分子大小也不同。凝膠一般對分別的物質(zhì)無吸附作用,全部要分別的物質(zhì)都應(yīng)當(dāng)被洗脫出來,這是凝膠色譜法與一般層析法的不同。答案:C22.(原創(chuàng))對含血紅蛋白的樣品透析和洗脫均用到磷酸緩沖液。磷酸緩沖液的pH依次為()。A.5.0、8.0 B.8.0、5.0C.7.0、8.0 D.7.0、7.0解析:紅細(xì)胞內(nèi)的pH一般為7.0,為了不破壞所提取血紅蛋白的分子結(jié)構(gòu),對含血紅蛋白的樣品透析和洗脫用到的磷酸緩沖液pH均為7.0(中性)。答案:D23.在血紅蛋白分別過程中,假如紅色帶區(qū)歪曲、散亂、變寬,與其有關(guān)的主要是()。A.樣品的處理 B.凝膠色譜柱的裝填C.洗脫過程 D.凝膠色譜柱的制作解析:在血紅蛋白分別過程中,假如紅色帶區(qū)歪曲、散亂、變寬,說明凝膠色譜柱的裝填不緊密,需重新裝填。答案:B24.下列各項(xiàng)中,一般不影響凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)中的分別度的是()。A.色譜柱高 B.色譜柱的直徑C.緩沖溶液 D.樣品的分布解析:色譜柱太短不會使大小不同的蛋白質(zhì)分子拉開距離;緩沖溶液的pH不當(dāng)會造成蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的變化因而使分別受到影響;樣品的分布不均勻會影響蛋白質(zhì)分子移行的路徑。色譜柱的直徑與大小不同的蛋白質(zhì)分子的下移沒有必定的聯(lián)系。答案:B25.下圖甲是用DNA測序儀測出的某人DNA片段的堿基排列挨次。圖乙是DNA測序儀測出的另外四個DNA片段的堿基排列挨次,請認(rèn)真比較這四幅圖,其中與所給樣本堿基排列挨次最相像的是()。解析:分別將A、B、C、D四圖中的堿基挨次與所給樣本比較,分布最相像的,就是堿基序列最相像的,因C圖與樣本最相近,故選C。答案:C二、非選擇題(共4小題,共50分)26.(8分)請依據(jù)下列有關(guān)試驗(yàn)及結(jié)果,回答問題。在DNA的粗提取與鑒定試驗(yàn)中,為得到含DNA的黏稠物,某同學(xué)進(jìn)行了如下操作,最終所得含DNA的黏稠物極少,導(dǎo)致下一步試驗(yàn)無法進(jìn)行,請指出該同學(xué)試驗(yàn)操作中的三處錯誤并改正。①在新穎的家鴿血中加入適量的檸檬酸鈉,經(jīng)離心后,除去血漿,留下血細(xì)胞備用。②取5~10mL血細(xì)胞放入50mL的燒杯中,并馬上注入20mL物質(zhì)的量濃度為0.015mol/L的NaCl溶液,快速攪拌5min后經(jīng)濾紙過濾,取其濾液。③濾液中加入40mL物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液,并用玻璃棒沿一個方向攪拌1min。④向上述溶液中緩緩加入蒸餾水,同時用玻璃棒沿一個方向不停地輕輕攪拌,直到溶液中消滅絲狀物為止,再進(jìn)行過濾,得到含DNA的黏稠物。(1)
;
(2)
;
(3)
。
解析:紅細(xì)胞的裂開需在清水中進(jìn)行,攪拌時應(yīng)輕輕地沿一個方向不停地均勻攪拌;第一次過濾,是除去細(xì)胞碎片,DNA在濾液中,因此不能用濾紙過濾;絲狀物消滅時才剛剛開頭析出DNA,應(yīng)讓DNA完全析出。答案:(1)第②步中“并馬上注入20mL物質(zhì)的量濃度為0.015mol/L的NaCl溶液,快速攪拌”應(yīng)改為“緩慢貼壁加入蒸餾水,并輕輕地沿一個方向不停地均勻攪拌”(3分)(2)第②步中的“濾紙”應(yīng)改為“紗布”(2分)(3)第④步中“直到溶液中消滅絲狀物為止”應(yīng)改為“直到溶液中絲狀物不再增加為止”(3分)27.(12分)PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù),下圖表示合成過程,請據(jù)圖分析回答下列問題。(1)A過程高溫使DNA變性解旋,對該過程的原理敘述,正確的是()。A.該過程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵B.該過程用到限制酶破壞磷酸二酯鍵C.該過程不需要解旋酶的作用D.該過程與人體細(xì)胞的過程完全相同(2)C過程要用到的酶是。這種酶在高溫下仍保持活性,因此在PCR擴(kuò)增時可以加入,(需要/不需要)再添加。PCR反應(yīng)除供應(yīng)酶外,還需要滿足的基本條件有。
(3)假如把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記,游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記,把握“95℃~55℃~72℃”溫度循環(huán)3次,則在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占。
(4)假如模板DNA分子共有a個堿基對,其中含有胞嘧啶m個,則該DNA復(fù)制10次,需要加入胸腺嘧啶脫氧核苷酸個。
(5)PCR中由堿基錯配引起的變異屬于。假設(shè)對一個DNA進(jìn)行擴(kuò)增,第一次循環(huán)時某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯配,則擴(kuò)增若干次后檢測所用DNA的擴(kuò)增片段,與原DNA相應(yīng)片段相同的占。
解析:(1)高溫所起的作用類似于解旋酶,使雙鏈DNA變?yōu)閱捂湣?2)C過程為PCR技術(shù)的延長階段,當(dāng)系統(tǒng)溫度上升至72℃左右,溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下合成新的DNA鏈。TaqDNA聚合酶是耐熱的,高溫下不變性,所以一次性加入即可。(3)PCR技術(shù)遵循半保留復(fù)制的特點(diǎn)。經(jīng)過三次循環(huán),共產(chǎn)生23個DNA分子,其中有2個DNA分子含有15N標(biāo)記。(4)在一個雙鏈DNA分子中,C+T占堿基總數(shù)的一半,故T的數(shù)目為a-m,復(fù)制10次,相當(dāng)于新增加了(210-1)個DNA分子。故需補(bǔ)充T的數(shù)目為(210-1)(a-m)。(5)基因中的堿基對轉(zhuǎn)變屬于基因突變。對一個DNA進(jìn)行擴(kuò)增,第一次循環(huán)時某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯配,其次次以后按正常配對方式進(jìn)行擴(kuò)增,錯配鏈作模板擴(kuò)增的都是錯誤的DNA分子,原正常鏈擴(kuò)增得到的DNA分子都是正常的DNA分子,故若干次后檢測所用DNA的擴(kuò)增片段,與原DNA相應(yīng)片段相同的占3/4。答案:(除標(biāo)出的分值外,每空1分)(1)C(2)TaqDNA聚合酶一次不需要DNA模板、引物、四種脫氧核苷酸、適當(dāng)?shù)臏囟?4分)(3)25%(4)(210-1)(a-m)(5)基因突變75%28.(14分)下面是凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)時樣品的加入(圖Ⅰ)和洗脫(圖Ⅱ)示意圖,請據(jù)圖回答下列問題。(1)在加樣示意圖中,正確的加樣挨次是。
(2)用吸管加樣時,應(yīng)留意正確操作,分別是:①;②;③。
(3)等樣品時,才加入緩沖液。
(4)分別血紅蛋白時,待接近色譜柱底端時,用試管收集流出液,每mL收集一管,連續(xù)收集。
解析:進(jìn)行凝膠色譜操作加樣時,加
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