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…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁,總=sectionpages22頁第=page11頁,總=sectionpages11頁2025年滬教版選修1生物上冊階段測試試卷837考試試卷考試范圍:全部知識點;考試時間:120分鐘學校:______姓名:______班級:______考號:______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題,共18分)1、下圖為希望導入植物細胞的重組DNA分子;箭頭代表PCR擴增時子代DNA的延伸方向,T-DNA片段基因序列已知,設計四段T-DNA的引物A;B、C、D,若利用PCR技術擴增T-DNA片段和未知基因片段,可選擇作為引物的分別是。
A.A.D,CB.B,DC.D,CD.D,B2、下列對胡蘿卜素的提取過程的分析,正確的是()A.把新鮮的胡蘿卜切成米粒大小的顆粒,置于烘箱中烘干時,溫度越高、干燥時間越長,烘干效果越好B.在萃取過程中在瓶口安裝冷凝回流裝置,是為了防止加熱時有機溶劑的揮發(fā)C.在濃縮前,沒有必要進行過濾D.將濾液用蒸餾裝置進行蒸餾,蒸發(fā)出去的是胡蘿卜素,留下的是有機溶劑3、在篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基中加入剛果紅染料;研究者觀察到幾個有透明圈的菌落。據圖分析正確的是()
A.透明圈內的剛果紅染料已被分解B.菌落②中的菌株降解纖維素能力最強C.圖中菌落可能是細菌也可能是真菌D.圖中培養(yǎng)基可用牛肉膏、蛋白胨配制4、用PCR方法檢測轉基因植株是否成功導入目的基因時,得到以下電泳圖譜,其中1號為DNA標準樣液(Marker),10號為電泳緩沖液。PCR時加入的模板DNA如圖所示。據此做出分析不合理的是()
A.B.PCR產物的分子大小在250至500bp之間C.3號樣品為不含目的基因的載體DNAE.10號的電泳結果能確定反應體系等對實驗結果沒有干擾E.10號的電泳結果能確定反應體系等對實驗結果沒有干擾5、有人就腐乳制作的傳說故事寫了一首打油詩:豆腐長白毛,致和真苦惱;撒鹽把它腌,腐乳變成寶。下列有關說法錯誤的是A.所長白毛主要為毛霉菌絲B.長白毛和鹽腌是腐乳制作的兩個關鍵步驟C.為調制風味可在鹽腌后加入鹵湯,鹵湯沒有殺菌防腐的作用D.腐乳成寶的價值在于大分子蛋白質和脂肪被分解成了易于消化吸收的小分子物質6、如圖為實驗室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟,下列說法不正確的是()
A.①步驟使用的培養(yǎng)基已經滅菌并調節(jié)過pHB.②步驟接種環(huán)經火焰滅菌后應趁熱快速挑取菌落C.④中每次劃線前后都需要對接種環(huán)進行灼燒處理D.①②③步驟操作時都需要在酒精燈火焰旁進行7、洗衣粉是生活的必需用品;某實驗小組為探究洗衣粉加酶后的洗滌效果,將一種無酶洗衣粉分成3等份,進行3組實驗。甲;乙組在洗衣粉中加入1種或2種酶,丙組不加酶,在不同溫度下清洗同種化纖布上的2種污漬,其他實驗條件均相同,下表為實驗記錄。下列敘述錯誤的是()
。溫度/℃1040304050組別甲乙丙甲乙丙甲乙丙甲乙丙甲乙丙清除血漬時間/min67668852518336347711126891167清除油漬時間/min93789587639182468575277769868A.本實驗的自變量是洗衣粉中的酶和溫度B.甲、乙組洗滌效果的差異,說明酶的作用具有專一性C.甲組在洗衣粉中加入了蛋白酶;乙組在洗衣粉中加入了蛋白酶和脂肪酶D.添加蛋白酶的洗衣粉不適宜洗滌毛織品、棉織品、蠶絲織品8、腐乳制作時需要加鹽腌制,加鹽的目的不包括()A.析出豆腐中的水分B.抑制微生物的生長C.縮短腐乳成熟的時間D.調節(jié)腐乳的味道9、紅細胞洗滌過程中,如果離心速度過高和時間過長,將達不到分離效果,其中的原因是()A.無法除去血漿蛋白B.會使白細胞等一同沉淀C.紅細胞破裂,血紅蛋白提前釋放D.紅細胞皺縮,不利于蛋白質的進一步分離評卷人得分二、多選題(共6題,共12分)10、當培養(yǎng)基中同時含有葡萄糖和乳糖時;通常情況下,大腸桿菌利用糖的順序及生長曲線如右圖所示。相關分析正確的是()
A.葡萄糖和乳糖都可作為大腸桿菌的碳源B.大腸桿菌優(yōu)先利用葡萄糖的根本原因是它能進行有氧呼吸C.5小時左右生長停滯可能與細胞中缺乏乳糖分解酶有關D.大腸桿菌由利用葡萄糖轉變?yōu)槔萌樘堑脑蚴侨樘钦T導發(fā)生了基因突變11、下圖表示研究人員在實驗室中使用的分批培養(yǎng)細菌的方法;下列敘述正確的是()
A.尿素分解菌可利用培養(yǎng)基中的尿素是因為能合成脲酶B.短期保存的菌種,可將菌液加入甘油后放在冷凍箱中冷藏C.液體選擇培養(yǎng)基通??捎糜谶x擇培養(yǎng),增加目標菌種的濃度D.將三角瓶放在搖床上振蕩培養(yǎng)能提高溶氧量和養(yǎng)料的利用率12、科研人員研究了不同洗滌濃度(單位體積的水中加入洗衣粉的量)的兩種加酶洗衣粉的去污力(%);結果如下表。下列說法錯誤的是()
。洗滌濃度。
去污力(%)
洗衣粉品種。
0.2%0.4%0.6%0.8%加酶洗衣粉甲71.578.980.079.9加酶洗衣粉乙69.580.480.680.5A.加酶洗衣粉中的酶制劑是通過基因工程生產出來的,并使用了包埋法固定B.若洗滌的是相同污布,則兩種加酶洗衣粉的洗滌效果相似C.相同pH時,加酶洗衣粉洗滌效果比普通洗衣粉好D.所有加酶洗衣粉最適洗滌濃度都為0.4%,濃度過大是不必要的13、下列關于酶的應用的說法中,不合理的是()A.使用加酶洗衣粉先用熱水浸泡洗衣粉和衣物,洗滌效果好B.污漬成分比較復雜時應選用復合加酶洗衣粉,以減少用量C.加酶洗衣粉中的酶制劑需用特定材料包裹,屬于固定化酶D.固定化酶可以反復使用,且固定化后不會影響酶的催化活性14、下列關于果酒和果醋的制作原理、發(fā)酵過程的敘述中不正確的是()A.果酒和果醋的發(fā)酵菌種不同,但代謝類型相同B.制作果酒和果醋時都應用70%的酒精對發(fā)酵瓶消毒C.變酸果酒的表面觀察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D.果酒和果醋的制作可用同一裝置,但需控制不同發(fā)酵條件15、下列關于制作果酒、果醋和腐乳的敘述,合理的是()A.在果酒發(fā)酵后期擰開瓶蓋的間隔時間可延長B.條件適宜時醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸C.果酒發(fā)酵過程中發(fā)酵液密度會逐漸減小D.將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時,底層和近瓶口處需加大用鹽量評卷人得分三、填空題(共9題,共18分)16、紅細胞的洗滌。
洗滌次數、離心速度與離心時間十分重要。洗滌次數過少,無法除去________;離心速度過高和時間過長會使________等一同沉淀,達不到分離的效果,影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度。17、回答下列與生物技術有關的問題:
(1)提取玫瑰精油常用_________________法;而橘皮精油常用____________法提取。
(2)胡蘿卜素是_________色結晶;易溶于___________,其提取可用萃取法,其萃取的效率主要取決于______________。
(3)蛋白質的提取和分離一般要經過樣品處理、___________、_________以及純度鑒定四個步驟。分離血紅蛋白時用_________法。18、酶的活性是指酶催化一定化學反應的能力。酶的活性高低可以用在一定條件下,酶所催化的某一化學反應的________________來表示。酶反應速度用單位時間內、單位體積中______________或______________________來表示。19、萃取液的濃縮可直接使用____________裝置,在濃縮之前,還要進行_____________,除去萃取液中的不溶物。20、(1)微生物接種的方法很多,最常用的是平板劃線法和____,平板劃線前要對接種環(huán)進行灼燒,原因是為了__________。
(2)用培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物時,培養(yǎng)基中應有碳源、________、__________和_______等營養(yǎng),同時還必須滿足微生物生長對特殊營養(yǎng)物質、__________、__________的要求。
(3)用唯一碳源培養(yǎng)基分離微生物的主要操作步驟為①原料稱量、溶解②調節(jié)pH③分裝、包扎④滅菌⑤倒平板⑥__________⑦培養(yǎng)。21、若在青蒿素的提取過程中需用果膠酶,探究果膠酶最適用量時的自變量是_____.22、鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等,含量一般控制在_________________左右。23、蛋白質是生命活動不可缺少的物質。隨著人類基因組計劃的進展以及多種生物基因組測序工作的完成;人類跨入了后基因組和蛋白質組時代。血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細胞的主要組成成分,負責血液中氧氣和二氧化碳的運輸。
(1)分離血紅蛋白的方法是_____,其原理是根據_____來分離蛋白質。
(2)蛋白質的提取和分離一般分為四步:樣品處理、粗分離、_____和純度鑒定。
(3)血紅蛋白因含有_____而呈現紅色,采集血液時需要預先加入檸檬酸鈉,目的是_____。在血紅蛋白樣品處理和粗分離中需要用到很多試劑,如在紅細跑的洗滌中需要用到生理鹽水直至上清液不再呈現黃色;在血紅蛋白的釋放過程中需用到蒸餾水和40%體積的_____,目的是使紅細胞破裂釋放血紅蛋白;在透析過程中需要將透析袋放入20mmol/L的_____中。
(4)本實驗用的是交聯葡聚糖凝膠(SephadexG-75),其中“G”表示_____,“75”表示凝膠得水值,即每克凝膠膨脹時吸收水分7.5g。在裝填凝膠時色譜柱內不能出現氣泡的原因是_____,給色譜柱添加樣品的具體操作是_____。
(5)判斷純化的蛋白質是否達到要求,選用的檢測方法是_____。24、純化——凝膠色譜操作。
處理后的樣品還含有其他種類的蛋白質分子(如呼吸酶等);因此要將雜蛋白與血紅蛋白進行分離。
第一步要制作__________。第二步要__________________,因為____的凝膠和用________平衡好的凝膠的體積差別很大,所以裝柱前需要根據色譜柱的內體積計算所需要的凝膠量。在裝填凝膠柱時,不能有______存在。第三步是樣品的______和______。評卷人得分四、實驗題(共1題,共9分)25、請據圖回答下列相關問題:
(1)胡蘿卜素萃取的效率主要取決于___________和___________。
(2)在加熱瓶瓶口安裝冷凝回流裝置的目的是______________________。
(3)乙圖所示的鑒定方法稱為___________;圖中起對照作用的點是____________。
(4)在乙圖中的層析帶中;①代表的物質是___________,②代表的物質是___________。
(5)該層析的目的是______________________。評卷人得分五、非選擇題(共4題,共16分)26、近年來;紀錄片《舌尖上的中國》引發(fā)全民關注美食的熱潮,其中多次講述了利用不同微生物的發(fā)酵作用制作的美味食品。請分析回答下列問題:
(1)在果醋制作時;運用醋酸菌在供應________和糖源充足時,將果糖分解成醋酸;在糖源不充足時,也可以利用酒精生成醋酸,請寫出該過程的反應式:_____________________。
(2)腐乳生產過程有多種微生物的參與;其中起主要作用的是________。腐乳制備過程中,加鹽可以________________________________________________________________________,使豆腐塊變硬。
腐乳制作的流程是:讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時;應注意控制__________________;配制鹵湯時,要使鹵湯中酒的含量控制在________%左右。
(3)制作泡菜的原理是________________________。蔬菜在腌制過程中,會產生亞硝酸鹽,在___________條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生________________反應后,再與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成________色染料。27、藍莓富含花青素等營養(yǎng)成分;具有保護視力;軟化血管、增強人體免疫力等功能。某同學嘗試用藍莓來制作藍莓果酒和藍莓果醋。
(1)制酒中利用的微生物是___________;取樣后可用____________觀察該微生物。發(fā)酵時一般要先通氣,通氣的目的是___________________。制酒過程中可在酸性條件下用橙色的重鉻酸鉀檢驗酒精的存在,檢驗后顏色變成___________。
(2)釀制成功的藍莓果酒如果暴露在空氣中酒味會逐漸消失而出現醋酸味;尤其是氣溫高的夏天更易如此,分析其原因是____________________________________。醋酸菌將乙醇變?yōu)榇姿岬沫h(huán)境條件是糖源______________(填“充足”或“缺少”)。
(3)釀制藍莓果酒時;并不需要對藍莓進行嚴格的消毒處理,這是因為在____________的發(fā)酵液中,絕大多數微生物無法適應這一環(huán)境而受抑制。
(4)為鑒定藍莓果醋是否釀制成功,除可以通過觀察菌膜、嘗、嗅之外,還可以通過檢測和比較_________作進一步的鑒定。28、成都七中的生物興趣小組在寒假以“蛋白質的提取和分離”和“泡菜中亞硝酸鹽含量的測定”為課題進行了研究性學習。分析并回答以下問題:
(1)樣品處理中紅細胞的洗滌要用____反復沖洗;離心。影響紅細胞洗滌效果的因素包括___________。
(2)血紅蛋白粗分離階段,透析的目的是_______,若要盡快達到理想的透析效果,可以________(寫出一種方法)。
(3)蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷移率主要取決于__________因素。
(4)裝填凝膠色譜柱時,要注意色譜柱內不能有氣泡存在,一旦發(fā)現氣泡必須重裝。這是因為__________。
(5)亞硝酸鹽的定量測定可以用______法,在制備樣品處理液過程中加入氫氧化鋁乳液的作用是___________。29、哺乳動物成熟的紅細胞,在生命科學研究中有著廣泛的應用。請回答下列有關問題:
(1)哺乳動物成熟的紅細胞是由骨髓中的造血干細胞經__________(填“有絲分裂”或“無絲分裂”)和分化形成的。
(2)從哺乳動物成熟的紅細胞中提取血紅蛋白時,首先要用相當于紅細胞液體體積五倍的__________洗滌紅細胞__________次,然后用蒸餾水和甲苯使紅細胞破裂,釋放出血紅蛋白。
(3)得到血紅蛋白混合液之后,可先用離心法進行__________,再通過__________法或凝膠電泳法進一步純化。使用前一種方法純化時,先從色譜柱洗脫出來的是__________(填“大分子”或“小分子”)蛋白質。
(4)用凝膠電泳法測定蛋白質分子量時,需要在凝膠中加入SDS,目的是__________;使電泳遷移率完全取決于分子的大小。
(5)因哺乳動物成熟的紅細胞__________,常被用作制備細胞膜的材料。與提取血紅蛋白不同的是:在制備細胞膜時,紅細胞的破裂只能使用__________而不能使用__________。評卷人得分六、綜合題(共3題,共18分)30、回答相關問題:
(1)固定化酶常用的方法是_____________;_____________;固定化酵母細胞最好的方法是_____________,固定化酵母時先要將酵母細胞活化,活化是指_____________。
(2)血紅蛋白的提取與分離實驗中;洗滌紅細胞的目的是__________________________;分離并純化血紅蛋白的方法是_____________;對純化的血紅蛋白進行純度鑒定的方法是_____________。
(3)有位同學打算用絲綢作為實驗材料,探討含有堿性蛋白酶的洗衣粉的洗滌效果,你認為他這樣選材_____________(答“是”或“否”)合適?為什么?_______________________________________。31、胡蘿卜素的粗提取和鑒定:
(1)請完成用萃取法提取胡蘿卜素的實驗流程:胡蘿卜→粉碎→干燥→萃取→過濾→_____→胡蘿卜素。
(2)胡蘿卜素萃取的效果主要取決于萃取劑的性質和_____,同時還受到了原料顆粒的大小、緊密程度、_____、萃取的溫度和時間等條件的影響,為了防止加熱時_____揮發(fā);需要在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置。
(3)胡蘿卜素的紙層析標準結果示意圖,圖中A、B、C、D四點中,屬于標準樣品的樣點是_____。32、蘋果是常見水果;口感好、營養(yǎng)價值高;廣受人們喜愛,但其收獲的季節(jié)性強,易造成積壓滯銷,腐爛變質。某市為緩解產銷矛盾,提高產品的附加值,利用蘋果生產果汁、果酒和果醋,大致工藝流程如下圖。請分析回答:
(1)用蘋果加工成果汁的過程中;需要加入果膠酶,果膠酶可以將果膠分解成____________。
(2)果酒發(fā)酵之后進行果醋發(fā)酵;需要改變的條件包括:①_________________;②________________。
(3)為使酵母菌能反復利用,常用_____法固定。酵母細胞實驗研究表明使用固定化酵母進行發(fā)酵的酒精產量平均值明顯高于使用游離酵母進行發(fā)酵的對照組,可能的原因是____________________。參考答案一、選擇題(共9題,共18分)1、A【分析】【分析】
DNA聚合酶不能直接啟動DNA新鏈的合成;即不能從頭合成DNA,只能在有引物的3’-OH上聚合核苷酸來延伸DNA鏈。原因是在新鏈的延伸過程中,只有新添加的堿基與模板鏈形成雙螺旋才能繼續(xù)鏈的延伸,否則延伸終止,啟動切除修復機制,直至添加正確的堿基,也即是在DNA聚合酶的上游位置一定要互補形成雙鏈(可以是RNA-DNA)才能繼續(xù)下游DNA的合成,這是它的忠實性和高保真系統決定的。DNA的復制必須先借助于RNA聚合酶以DNA為模板合成一小段引物RNA,然后DNA聚合酶再接著進行DNA合成。最后,引物RNA由DNA聚合酶水解后,替換上相應的DNA片段,最后由DNA連接酶把片段完整連接起來。
【詳解】
DNA的兩條鏈為反向平行螺旋在一起;由于DNA聚合酶只能在有引物的3’端上聚合核苷酸來延伸DNA鏈,而圖示中箭頭代表PCR擴增時子代DNA的延伸方向,所以引物A是順時針方向,那么,C也是順時針方向,B;D就是逆時針方向。所以利用PCR技術擴增T-DNA片段時需要的引物為A、D,而擴增被插入的基因片段需要利用B、C這對引物,綜上分析,A正確,BCD錯誤。
故選A。2、B【分析】在烘干胡蘿卜時要控制好溫度和時間,溫度太高、干燥時間太長,會導致胡蘿卜素分解,A項錯誤;在萃取過程中,為了防止加熱時有機溶劑的揮發(fā),應在加熱瓶口安裝冷凝回流裝置,B項正確;在濃縮前,需要進行過濾,以除去萃取液中的不溶物,C項錯誤;將濾液用蒸餾裝置進行蒸餾,蒸發(fā)出去的是有機溶劑,留下的是胡蘿卜素,D項錯誤。3、C【分析】【分析】
纖維素可與剛果紅染料結合呈現紅色;纖維素被纖維素分解菌分泌的纖維素酶分解后,紅色消失,根據透明圈直徑與菌落直徑的比值可判斷纖維素分解菌分解纖維素能力的大小。
【詳解】
A;根據分析可知;透明圈不顯紅色的原因是其中的纖維素已被分解,A錯誤;
B;菌落①形成的透明圈直徑與菌落直徑之比最大;說明菌落①降解纖維素能力最強,B錯誤;
C;根據題干信息不能判斷圖中菌落的微生物類型;可能是細菌也可能是真菌,C正確;
D;圖中培養(yǎng)基應以纖維素為唯一碳源;不可用牛肉膏、蛋白胨配制,D錯誤。
故選C。
【點睛】
本題易錯選B項,錯因在于忽略了菌落直徑的大小與透明圈直徑大小的關系。透明圈直徑的大小不僅與菌落降解纖維素能力有關,也與菌落直徑大小有關。4、B【分析】【分析】
PCR過程中,可以通過設計特定的引物來擴增特定的DNA片段。4~9號是轉基因植株,理論上應包含目的基因。9號PCR結果不包含250~500bp片段;所以不是所需轉基因植株。
【詳解】
A、PCR過程中,可以通過設計特定的引物來擴增特定的DNA片段。4~9號是轉基因植株,理論上應包含目的基因,結合2號野生型和10號蒸餾水組的結果,推測包含目的基因的片段大小應為250~500bp;A正確;
B、3號PCR結果包含250~500bp片段;應包含目的基因,B錯誤;
C、9號PCR結果不包含250~500bp片段;所以不是所需轉基因植株,C正確;
D;10號放入蒸餾水;可排除反應體系等對結果的干擾,D正確。
故選B。5、C【分析】【分析】
參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉;酵母、曲霉、毛霉等多種;其中起主要作用的是毛霉。毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【詳解】
參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉;酵母、曲霉、毛霉等多種;其中起主要作用的是毛霉,A正確;長白毛和鹽腌是腐乳制作的兩個關鍵步驟,B正確;鹵湯也具有殺菌防腐的作用,C錯誤;腐乳成寶的價值在于大分子蛋白質和脂肪被分解成了易于消化吸收的小分子物質,D正確。
綜上,本題答案為C選項。6、B【分析】【詳解】
①步驟為倒平板;使用的培養(yǎng)基已經滅菌并調節(jié)過pH,A項正確;②步驟為接種,接種環(huán)經火焰滅菌后應冷卻后再挑取菌落,以防高溫殺死大腸桿菌,B項錯誤;④中每次劃線前后對接種環(huán)進行灼燒處理,是為了殺死接種環(huán)上殘留的菌種,使劃線時接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數的增加,使每次劃線時菌種的數目逐漸減少,以便得到菌落,C項正確;①②③步驟操作時都需要在酒精燈火焰旁進行,防止被雜菌污染,D項正確。
【點睛】劃線培養(yǎng)法操作要求:
(1)操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要進行火焰灼燒滅菌,劃線操作結束時,仍需灼燒接種環(huán),每次灼燒目的如下表:。第一次操作每次劃線之前劃線結束目的殺死接種環(huán)上原有的微生物殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種,使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端,使每次劃線菌種數目減少殺死接種環(huán)上殘存的菌種,避免細菌污染環(huán)境和感染操作者
(2)灼燒接種環(huán);待其冷卻后才能伸入菌液,以免溫度太高殺死菌種。
(3)第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開始;能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐漸減少,最終得到由單個細菌繁殖而來的菌落。
(4)劃線時最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。
(5)劃線用力大小要適當,防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。7、D【分析】【分析】
在表中所示的五種溫度下;丙組不加酶,清除血漬和油漬的時間都是最長的,丙組是對照組;甲;乙組在洗衣粉中加入1種或2種酶,是實驗組。
【詳解】
A;甲、乙組在洗衣粉中加入1種或2種酶;丙組不加酶,說明本實驗的自變量有洗衣粉有無加酶,在不同溫度下清洗同種化纖布上的2種污漬,說明本實驗的自變量有溫度,A正確;
B;甲、乙組洗滌效果的差異;是酶具有專一性的體現,B正確;
C;甲和乙清除血漬所需的時間類似;而血漬的主要成分是蛋白質,說明甲和乙中均含有蛋白酶;在這五種溫度下,乙組清除油漬所需的時間均短于甲組,而油漬的主要成分是脂肪,說明乙組含有脂肪酶,C正確;
D;洗衣粉中加的酶有堿性蛋白酶;毛織品和蠶絲織品的主要成分是蛋白質,會被堿性蛋白酶水解,因此不適宜洗滌用添加蛋白酶的洗衣粉清洗,棉織品的主要成分是纖維素,可以使用添加蛋白酶的洗衣粉,D錯誤。
故選D。8、C【分析】【分析】
1;傳統的腐乳制作過程中;豆腐塊上生長的毛霉來自空氣中的毛霉孢子;而現代的腐乳生產是在嚴格的無菌條件下,將優(yōu)良的毛霉菌種接種在豆腐上,這樣可以避免其他菌種的污染,保證產品的質量;
2;腐乳制作過程中;加鹽的作用是析出豆腐中的水分,使豆腐塊變硬和抑制微生物的生長,避免豆腐塊腐敗變質;
3;鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的;酒的含量一般控制在12%左右,若酒的含量過高會延長腐乳成熟的時間,若酒的含量過低,則不能抑制雜菌污染;
4;裝瓶時;操作要迅速小心.加入鹵湯后要用膠條將瓶口密封,封瓶時最好將瓶口通過酒精燈的火焰,防止瓶口被污染。
【詳解】
加鹽腌制的目的:浸提出蛋白酶和脂肪酶;析出豆腐中的水分使之變硬;調制腐乳的風味;確保腐乳具有一定的咸度;抑制微生物的生長,不能縮短腐乳成熟的時間,ABD錯誤,C正確。
故選C。
【點睛】9、B【分析】【分析】
血紅蛋白的提取與分離的實驗步驟主要有:
(1)樣品處理:①紅細胞的洗滌;②血紅蛋白的釋放,③分離血紅蛋白溶液。
(2)粗分離:①分離血紅蛋白溶液;②透析。
(3)純化:調節(jié)緩沖液面→加入蛋白質樣品→調節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質。
(4)純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。
【詳解】
洗滌時離心速度過高;時間過長;白細胞等一同沉淀,達不到分離的效果。
故選B。
【點睛】二、多選題(共6題,共12分)10、A:C【分析】【分析】
據圖分析可知;培養(yǎng)基中同時含有葡萄糖和乳糖時,大腸桿菌先利用葡萄糖再利用乳糖,大腸桿菌最開始只利用葡萄糖,葡萄糖消耗完后,由于環(huán)境中存在乳糖,大腸桿菌會產生半乳糖苷酶繼續(xù)分解乳糖。
【詳解】
A;據圖可知;大腸桿菌既能利用葡萄糖也能利用乳糖作為生長過程中的碳源,A正確;
B;由圖可知;前5小時左右大腸桿菌利用葡萄糖,后5小時利用乳糖進行生長繁殖,優(yōu)先利用葡萄糖的根本原因是基因的選擇性表達,B錯誤;
C;大腸桿菌在正常條件下無利用乳糖的酶;5小時左右時生長停滯與此相關,C正確;
D;大腸桿菌在代謝中利用乳糖做碳源時;由于環(huán)境誘導基因表達,會產生分解乳糖的半乳糖苷酶,而非基因突變的作用,D錯誤。
故選AC。11、A:C:D【分析】1、若要長期保存菌種,菌液中常需要加入一定量的甘油,且要放置在-20℃的冷凍箱中,若要短期保存菌種,可將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,菌落長成后,將試管放置在4℃的冰箱中保藏。
2;液體選擇培養(yǎng)基通??捎糜谶x擇培養(yǎng);增加目標菌種的濃度。將錐形瓶放在搖床上振蕩培養(yǎng)能提高溶氧量和養(yǎng)料的利用率。
【詳解】
A;尿素分解菌可利用培養(yǎng)基中的尿素是因為能合成脲酶;而其他微生物不能合成脲酶故不能分解尿素,A正確;
B;短期保存的菌種;可將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,菌落長成后,將試管放置在4℃的冰箱中保藏,B錯誤;
C;液體選擇培養(yǎng)基通??捎糜谶x擇培養(yǎng);增加目標菌種的濃度,C正確;
D;將三角瓶放在搖床上振蕩培養(yǎng)既能提高溶氧量;提高有氧呼吸的速率,又能提高養(yǎng)料的利用率,D正確。
故選ACD。12、A:C:D【分析】【分析】
分析題干和表格信息可知;該實驗的目的是探究不同酶;不同洗滌濃度對洗滌效果的影響,實驗的自變量是酶的種類和濃度,因變量是洗滌效果,洗滌的溫度、洗滌時間、洗滌方式、洗滌材料和污物的種類及污染程度等屬于無關變量,無關變量應該保持一致且適宜。
【詳解】
A;加酶洗衣粉是將通過基因工程生產的酶通過特殊物質層層包裹;與洗衣粉的其他成分隔離,遇水后包裹層很快溶解,釋放出來的酶迅速發(fā)揮催化作用,并沒有運用到固定化酶技術,因為酶未固定在不溶于水的載體上,也不能重復利用,A錯誤;
B;分析表格中的信息可知;相同濃度條件下,兩種洗衣粉的洗滌效果無顯著差異,因此若洗滌的是相同污布,兩種加酶洗衣粉的洗滌效果相似,B正確;
C;pH會影響酶的活性;pH過高或過低時都會使酶變性失活,因此相同pH時,加酶洗衣粉洗滌效果不一定好于普通洗衣粉,C錯誤;
D;該表格顯示甲、乙兩種洗衣粉的最適洗滌濃度相同;都為0.6%左右,但是不能說明所有加酶洗衣粉最適洗滌濃度都相同,D錯誤。
故選ACD。
【點睛】13、A:C:D【分析】【分析】
加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉;目前常用的酶制劑有四類:蛋白酶;脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶,其中,應用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污跡從衣物上脫落。脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶也能分別將大分子的脂肪、淀粉和纖維素水解為小分子物質,使洗衣粉具有更好的去污能力。
【詳解】
A;熱水浸泡會使酶失活;從而降低加酶洗衣粉的洗滌效果,A錯誤;
B;復合加酶洗衣粉中有多種酶;因酶有專一性,所以污漬成分復雜時選用復合加酶洗衣粉較好,B正確;
C;特定材料包裹酶是避免酶在不良環(huán)境中失活;不屬于固定化酶,C錯誤;
D;通過化學結合法等方法固定酶會影響其催化活性;D錯誤。
故選ACD。
【點睛】14、A:C【分析】【分析】
果酒;果醋制作的注意事項。
(1)材料的選擇與處理:選擇新鮮的葡萄;榨汁前先將葡萄沖洗,并除去枝梗,以防葡萄汁流失及污染。沖洗以洗去灰塵為目的,且不要太干凈,以防洗去野生型酵母菌。
(2)防止發(fā)酵液被污染的方法①榨汁機要清洗干凈并晾干。②發(fā)酵瓶要洗凈并用體積分數為70%的酒精消毒;或用洗潔精洗滌。③裝入葡萄汁后要封閉充氣口。
【詳解】
A;果酒發(fā)酵的菌種是酵母菌;其代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型,而果醋發(fā)酵的菌種是醋酸菌,其代謝類型是異養(yǎng)需氧型,A符合題意;
B;制作果酒和果醋時均需要對發(fā)酵瓶消毒;均可用體積分數為70%的酒精進行消毒,B不符合題意;
C;在變酸果酒的表面觀察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的;液體表面不能形成菌落,C符合題意;
D;果酒和果醋的制作可用同一裝置;但需控制不同發(fā)酵條件,果酒制作需要無氧環(huán)境,適宜溫度為18~25℃,而果醋制作需要有氧環(huán)境,適宜溫度為30~35℃,D不符合題意。
故選AC。15、A:B:C【分析】【分析】
果酒、果醋制作原理與發(fā)酵條件。
果酒制作
果醋制作
菌種
酵母菌
醋酸菌
菌種
來源
附著在葡萄皮上的酵母菌
變酸酒表面的菌膜
發(fā)酵
過程
有氧條件下,酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖:C6H12O6+6O26CO2+6H2O;無氧條件下,酵母菌通過無氧呼吸產生酒精:C6H12O62C2H5OH+2CO2
氧氣、糖源充足時:
C6H12O6+2O22CH3COOH+2CO2+2H2O;
缺少糖源、氧氣充足時:
C2H5OH+O2CH3COOH+H2O
溫度
一般酒精發(fā)酵18~25℃,
繁殖最適為20℃左右
最適為30~35℃
氣體
前期:需氧,后期:無氧
需要充足的氧氣
【詳解】
果酒發(fā)酵后期;酵母菌活動逐漸減弱,產生的二氧化碳逐漸降低,放氣時間間隔可延長,A正確。當氧氣;糖源都充足時,醋酸菌可將葡萄汁中的果糖分解成醋酸,B正確。果酒發(fā)酵過程中因為營養(yǎng)物質的消耗,有氧呼吸過程中也有水的產生,故發(fā)酵液的密度減小,C正確。制作腐乳時是逐層加鹽,瓶口處需加大用鹽量,以減小被雜菌污染的可能性,D錯誤。故選:ABC。
【點睛】
解答本題關鍵在于對果酒、果醋的制作原理的理解應用。三、填空題(共9題,共18分)16、略
【分析】【詳解】
紅細胞的洗滌。
洗滌紅細胞的目的是去除雜質蛋白,洗滌次數、離心速度與離心時間十分重要。洗滌次數過少,無法除去血漿蛋白;離心速度過高和時間過長會使白細胞等一同沉淀,達不到分離的效果,影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度。【解析】血漿蛋白白細胞17、略
【分析】【分析】
植物芳香油的提取方法:蒸餾法;壓榨法和萃取等。
(1)蒸餾法:芳香油具有揮發(fā)性;把含有芳香油的花;葉等放入水中加熱,水蒸氣能將揮發(fā)性較強的芳香油攜帶出來,形成油水混合物;冷卻后,油水混合物又會重新分成油層和水層,除去水層便得到芳香油,這種提取方法叫蒸餾法。根據蒸餾過程中原料放置的位置的標準,將水蒸氣蒸餾法劃分為水中蒸餾、水上蒸餾和水氣蒸餾。
(2)萃取法:這種方法需要將新鮮的香花等植物材料浸泡在乙醚;石油醚等低沸點的有機溶劑中;是芳香油充分溶解,然后蒸去低沸點的溶劑,剩下的就是芳香油。
(3)壓榨法:在橘子;檸檬、甜橙等植物的果皮中;芳香油的含量較多,可以用機械壓力直接榨出,這種提取方法叫壓榨法。
植物芳香油的蒸餾提取過程:浸泡;加熱蒸餾、乳濁液的分離。
【詳解】
(1)由于玫瑰精油化學性質穩(wěn)定;難溶于水,易溶于有機溶劑,且能隨水蒸氣一同蒸餾,因此常用蒸餾法提??;而橘皮精油常用壓榨法提取,這是由于加熱會造成原料焦糊;橘皮精油的有效成分水解。
(2)胡蘿卜素是橘黃色結晶;易溶于有機溶劑,萃取法提取胡蘿卜素時,萃取的效率主要取決于萃取劑的性質和用量。
(3)蛋內質的提取和分離一般要經過樣品處理;粗分離、純化以及純度鑒定四個步驟。分離血紅蛋白時用凝膠色譜法。
【點睛】
本題主要考查植物有效成分的提取的以及蛋白質的提取和分離,意在強化學生對相關知識的識記與理解,考生對蒸餾法、壓榨法和萃取法提取植物有效成分的過程的識記是解題的關鍵?!窘馕觥空麴s壓榨橘黃有機溶劑萃取劑的性質和用量粗分離純化凝膠色譜法18、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】反應速度反應物的減少量產物的增加量19、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】蒸餾過濾20、略
【分析】【分析】
1;微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽;此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。
2.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基基本過程為:計算;稱量、溶化、調pH、滅菌、倒平板五個步驟。
【詳解】
(1)微生物接種的方法很多;最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法,平板劃線前要對接種環(huán)進行灼燒,目的是為了殺滅接種環(huán)上的微生物(滅菌)。
(2)微生物培養(yǎng)基一般都含有水;碳源、氮源、無機鹽;此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。
(3)用唯一碳源培養(yǎng)基分離微生物的主要操作步驟為①原料稱量;溶解②調pH③分裝、包扎④滅菌⑤倒平板⑥接種⑦培養(yǎng)。
【點睛】
本題考查了微生物分離與培養(yǎng)的有關知識,要求考生能夠識記培養(yǎng)基的成分和培養(yǎng)條件,掌握微生物分離與純化的方法與步驟,再結合所學知識準確答題?!窘馕觥肯♂屚坎计桨宸缇此疅o機鹽pH氧氣接種21、略
【分析】【詳解】
若在青蒿素的提取過程中需用果膠酶,探究果膠酶最適用量時的自變量是果膠酶用量的梯度?!窘馕觥抗z酶用量的梯度22、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】12%23、略
【分析】【分析】
血紅蛋白存在于紅細胞內;由四條肽鏈構成,兩條α肽和兩條β肽鏈,每條肽鏈圍繞一個亞鐵血紅素基團,一個血紅素基團可攜帶一分子氧或一分子二氧化碳。
【詳解】
(1)分離血紅蛋白的方法是凝膠色譜法(又叫分配色譜法);是根據相對分子質量的大小來分離蛋白質,相對分子質量大的蛋白質分子直接穿過凝膠顆粒間的空隙,路徑短,移動速度快,優(yōu)先可收集到;相對分子質量小的蛋白質分子進入凝膠珠的內部,路徑長,移動速度慢,可在后收集。
(2)蛋白質的提取和分離一般分為四步:樣品處理;粗分離、純化和純度鑒定。
(3)血紅蛋白因含有亞鐵血紅素基團而呈現紅色;采集血液時需要預先加入檸檬酸鈉防止血液凝固。在血紅蛋白樣品處理和粗分離中需要用到很多試劑,如在紅細跑的洗滌中需要用到生理鹽水直至上清液不再呈現黃色;在血紅蛋白的釋放過程中需用到蒸餾水和40%體積的甲苯,破壞細胞膜,釋放血紅蛋白;在透析過程中需要將透析袋放入20mmol/L磷酸緩沖液,除去無機鹽和小分子蛋白質。
(4)純度鑒定中;用的是交聯葡聚糖凝膠,其中“G”表示凝膠的交聯程度;膨脹程度和分離范圍。在裝填凝膠時色譜柱內不能出現氣泡,氣泡會攪亂蛋白質的洗脫次序,降低分離效果。給色譜柱添加樣品的具體操作是吸管吸1mL樣品加到色譜柱的頂端,滴加樣品時,吸管管壁貼著管壁環(huán)繞移動加樣,同時注意不要破壞凝膠面。
(5)經過凝膠色譜法獲得的蛋白質;為了確定其是否達要求,可用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法進行檢測。
【點睛】
本題考查血紅蛋白的提取和分離方法、凝膠色普的操作、異常原因分析,要求考生熟記課本相關知識,并理解運用?!窘馕觥磕z色譜法(又叫分配色譜法)相對分子質量的大小純化亞鐵血紅素基團防止血液凝固甲苯磷酸緩沖液凝膠的交聯程度、膨脹程度及分離范圍氣泡會攪亂蛋白質的洗脫次序,降低分離效果吸管吸1mL樣品加到色譜柱的頂端,滴加樣品時,吸管管壁貼著管壁環(huán)繞移動加樣,同時注意不要破壞凝膠面。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳24、略
【分析】【詳解】
第一步要制作凝膠色譜柱。
第二步要裝填凝膠色譜柱;因為干凝膠和用緩沖液平衡好的凝膠的體積差別很大,所以裝柱前需要根據色譜柱的內體積計算所需要的凝膠量。在裝填凝膠柱時,不能有氣泡存在。
第三步是樣品的加入和洗脫。【解析】凝膠色譜柱裝填凝膠色譜柱干緩沖液氣泡加入洗脫四、實驗題(共1題,共9分)25、略
【分析】【分析】
1.分析題圖甲可知;胡蘿卜素的提取方法是萃取法,萃取的效率主要取決于萃取劑的性質和使用量,同時還受原料顆粒大??;緊密程度、萃取的溫度和時間等有關;
2.胡蘿卜素的鑒定方法是紙層析法;樣點距底邊約2cm左右,在點樣時應該注意點樣要快速細致,圓點細小,每次點樣濾紙都要干燥。
【詳解】
(1)圖甲提出胡蘿卜素的方法是萃取法;影響萃取效率的因素主要是萃取劑的性質和使用量;
(2)為了防止加熱時有機溶劑的揮發(fā);需要在加熱瓶口安裝冷凝回流裝置;
(3)圖乙是紙層析法對提取的胡蘿卜素粗品進行鑒定;圖中A;D是標準樣品的樣點;B、C是胡蘿卜素粗品樣點;
(4)在乙圖中的層析帶中;①代表的物質是β胡蘿卜素,②代表的物質是其他色素和雜質。
(5)該層析的目的是胡蘿卜素粗品的鑒定。
【點睛】
識記和辨識胡蘿卜素的提取方法及提取過程、提取注意事項等,是本題解題的關鍵?!窘馕觥枯腿┑男再|使用量防止加熱使有機溶劑揮發(fā)紙層析法A與Dβ胡蘿卜素其他色素和雜質胡蘿卜素粗品的鑒定五、非選擇題(共4題,共16分)26、略
【分析】【分析】
試題分析:參與果醋制作的微生物是醋酸菌;其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型.果醋制作的原理:當氧氣;糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸;當缺少糖源時,醋酸菌將Z醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>
腐乳制作的原理:參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉;酵母、曲霉、毛霉等多種;其中起主要作用的是毛霉;毛霉是一種絲狀真菌,常見于土壤、水果、蔬菜、谷物上,具有發(fā)達的白色菌絲;毛酶等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【詳解】
(1)在果醋制作時,選用醋酸菌,當氧氣和糖源供應充足時,將糖分解成醋酸;在糖源不充足時,可以利用酒精生成醋酸,該過程的化學反應式為:C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O。
(2)參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉;酵母、曲霉、毛霉等多種;其中起主要作用的是毛霉,腐乳制作用鹽腌制時,加鹽可以析出豆腐中的水分,不過應注意控制鹽的用量;配制鹵湯時,要使鹵湯中酒的含量控制在12%左右。
(3)制作泡菜的原理是:乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖;將葡萄糖分解成乳酸。在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)重氮化反應后,與N—1—萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料。
【點睛】
本題考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作、泡菜的制作等,要求考生識記果酒和果醋制作、腐乳的制作、泡菜的制作的相關知識,尤其是果醋制作的原理、腐乳的制作流程和泡菜制作過程中亞硝酸鹽的鑒定方法,能根據題干要求選出正確的答案,屬于考綱識記層次的考查?!窘馕觥垦鯕釩2H5OH+O2→CH3COOH+H2O毛霉析出豆腐中的水分鹽的用量12乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖,將葡萄糖分解成乳酸鹽酸酸化重氮化玫瑰紅27、略
【分析】【分析】
果酒的發(fā)酵的主要菌種是酵母菌;是兼性厭氧型生物,有氧條件下進行有氧呼吸增加數量,無氧條件下進行酒精發(fā)酵。酒精發(fā)酵的適宜溫度是18-25度。
【詳解】
(1)常用酵母菌制酒;可以借助顯微鏡觀察酵母菌。發(fā)酵時一般要先通氣,是為了讓酵母菌在有氧條件下大量繁殖。在酸性條件下,橙色的重鉻酸鉀遇酒精會由橙色變成灰綠色。
(2)醋酸菌是好氧細菌;最適生長溫度為30~35℃,故藍莓果酒如果暴露在空氣中酒味會逐漸消失而出現醋酸味。在氧氣充足,糖源缺少的情況下,醋酸菌可將乙醇變?yōu)榇姿帷?/p>
(3)在缺氧;呈酸性的發(fā)酵液中;酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數微生物無法適應這一環(huán)境而受抑制,故釀制藍莓果酒時,并不需要對藍莓進行嚴格的消毒處理。
(4)果醋發(fā)酵過程中;產生的醋酸會引起pH下降,故可以通過可以通過檢測和比較發(fā)酵前后的pH進一步鑒定藍莓果醋是否釀制成功。
【點睛】
酒精發(fā)酵需要在無氧條件下進行,果醋發(fā)酵需要在有氧條件下進行,且后者需要的溫度較高?!窘馕觥拷湍妇?光學)顯微鏡酵母菌可在有氧條件下大量繁殖灰綠色醋酸菌是好氧細菌,最適生長溫度為30~35℃(夏天溫度較高,導致醋酸桿菌大量生長產生醋酸)缺少缺氧、呈酸性(醋酸)發(fā)酵前后的pH28、略
【分析】【分析】
蛋白質的提取和分離一般分為四步:樣品處理;粗分離、純化和純度鑒定。在樣品處理時;紅細胞的洗滌要用生理鹽水反復沖洗、離心,洗滌的目的是去除雜蛋白,以利于后續(xù)步驟的分離純化。血紅蛋白粗分離的目的是通過透析法去除血紅蛋白溶液中相對分子質量較小的雜質;若要盡快達到理想的透析效果,可以采用的方法是加大緩沖液的量或及時更換緩沖液。電泳利用了待分離樣品中各種分子的帶電性質以及分子大小、形狀等的差異,在電泳過程中會產生不同的遷移速度,從而實現各種分子的分離。凝膠色譜法分離蛋白質的原理:凝膠色譜法是根據相對分子質量的大小來分離蛋白質的有效方法,相對分子質量小的蛋白質容易進入凝膠內部的通道,路程長,移動的速度慢,相對分子質量大的蛋白質不容易進入凝膠內部的通道,路程短,移動的速度快,因此相對分子質量不同的蛋白質得以分離,在裝填凝膠色譜柱時,凝膠裝填在色譜柱內要均勻,不能有氣泡存在,因為氣泡會影響蛋白質洗脫的次序。測定亞硝酸鹽含量的實驗中,亞硝酸鹽的定量測定可以用光電比色法,制備樣品處理液時加入氫氧化鋁的目的是使濾液色素脫色。
【詳解】
(1)樣品處理中紅細胞的洗滌要用生理鹽水反復沖洗;離心。影響紅細胞洗滌效果的因素包括洗滌次數、離心時間和離心速度。
(2)血紅蛋白粗分離階段;透析的目的是除去小分子雜質分,若要盡快達到理想的透析效果,可以增加緩沖液的量或及時更換緩沖液。
(3)蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷移率主要取決于凈電荷的多少和分子的大小因素。
(4)由于氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序;降低分離效果,因此色譜柱內不能有氣泡存在,一旦發(fā)現氣泡必須重裝。
(5)亞硝酸鹽的定量測定可以用比色法;在制備樣品處理液過程中加入氫氧化鋁乳液的作用是除去濾液中的色素,使濾液變得無色透明。
【點睛】
本題考查蛋白質的提取和分離、亞硝酸鹽的測定,對于此類試題,需要學生注意的細節(jié)較多,如實驗的原理、實驗采用的試劑及試劑作用、實驗方法等,需要學生在平時的學習過程中注意積累?!窘馕觥可睇}水洗滌次數、離心時間和離心速度除去小分子雜質分增加緩沖液的量或及時更換緩沖液凈電荷的多少和分子的大小氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序,降低分離效果比色除去濾液中的色素,使濾液變得無色透明29、略
【分析】【分析】
1;哺乳動物成熟的紅細胞是由骨髓中的造血干細胞分裂分化形成;細胞內沒有細胞核和眾多的細胞器,所以常常選做為提取細胞膜的材料;
2;紅細胞內血紅蛋白的提取和分離一般分為:洗滌→釋放→分離→透析→純化→純度鑒定。
【詳解】
(1)哺乳動物成熟的紅細胞是由骨髓中的造血干細胞經有絲分裂和分化形成的。
(2)從哺乳動物成熟的紅細胞中提取血紅蛋白時;首先要用相當于紅細胞液體體積五倍的生理鹽水洗滌紅細胞3次,然后用蒸餾水和甲苯使紅細胞破裂,釋放出血紅蛋白。
(3)得到血紅蛋白混合液之后;可先用離心法進行樣品處理及粗分離,再通過凝膠色譜法或凝膠電泳法進一步純化。使用凝膠色譜法純化時,先從色譜柱洗脫出來的是大分子蛋白質。
(4)用凝膠電泳法測定蛋白質分子量時;消為了除凈電荷對遷移率的影響,需要在凝膠中加入SDS,使電泳遷移率完全取決于分子的大小。
(5)因哺乳動物成熟的紅細胞沒有細胞核和眾多的細胞器,常被用作制備細胞膜的材料。在制備細胞膜時;紅細胞的破裂只能使用蒸餾水而不能使用甲苯,因為蒸餾水的作用是讓紅細胞吸水脹破,而甲苯的作用是溶解細胞膜。
【點睛】
解答本題關鍵需要熟悉血紅蛋白的提取與分離的步驟與相關操作方法以及操作原理?!窘馕觥坑薪z分裂生理鹽水3樣品處理及粗分離凝膠色譜法大分子消除凈電荷對遷移率的影響(或掩蓋不同種蛋白間的電荷差別)沒有細胞核和眾多的細胞器蒸餾水甲苯六、綜合題(共3題,共18分)30、略
【分析】【分析】
1.固定化細胞的相關知識點;制作過程中的注意事項:
(1)酵母細胞的活化;
(2)配置氯化鈣溶液:要用蒸餾水配置;
(3)配制海藻酸鈉溶液:小火;間斷加熱、定容;如果加熱太快,海藻酸鈉會發(fā)生焦糊;
(4)海藻酸鈉溶液與酶母細胞混合:冷卻后再混合;注意混合均勻,不要進入氣泡;
(5)制備固定化酵母細胞:高度適宜;并勻速滴入。
2.血紅蛋白的提取與分離的實驗步驟主要有:
(1)樣品處理:①紅細胞的洗滌;②血紅蛋白的釋放,③分離血紅蛋白;
(2)粗分離:①分離血紅蛋白溶液;②透析;
(3)純化:調節(jié)緩沖
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