肝纖維化的檢測

肝纖維化檢測及肝纖四項產(chǎn)品的應(yīng)用Contents化學發(fā)光技術(shù)簡介肝纖維化綜述肝纖維化的檢測措施血清學肝纖維化四項診斷的應(yīng)用價值其他血清學檢測指標簡介肝纖維化診斷現(xiàn)實狀況肝纖四項檢測常見問題化學發(fā)光技術(shù)簡介Part1.化學發(fā)光免疫分析技術(shù)概念化學發(fā)光免疫診斷技術(shù)是臨床診斷領(lǐng)域最有前景的技術(shù)之一。其運用魯米諾在酶促下發(fā)出的光子信號(以及其他發(fā)光方式)，放大抗原抗體反應(yīng)，對體內(nèi)的多種微量標志物進行檢測，從而對多種疾病進行初期、特異和定量化的診斷。其特點在于敏捷度高、測定范圍寬、迅速、簡便，并且在測試中不使用有害的試劑，無污染?；瘜W發(fā)光技術(shù)簡介Part2.化學發(fā)光免疫分析技術(shù)的領(lǐng)先性放射免疫診斷技術(shù)（RIA）酶聯(lián)免疫診斷技術(shù)（ELISA）化學發(fā)光免疫診斷技術(shù)（CLIA）20世紀60年代70年代80年代90年代2000年2020年時間臨床免疫診斷技術(shù)的發(fā)展基本歷經(jīng)了如下三個階段：化學發(fā)光技術(shù)簡介化學發(fā)光技術(shù)簡介Part3.化學發(fā)光免疫分析技術(shù)的優(yōu)勢1）敏捷度高敏捷度可達10-19mol/L以上。敏捷度(mol/L)10-2210-1810-1410-10酶標熒光放免發(fā)光化學發(fā)光技術(shù)簡介2）線性范圍寬發(fā)光強度與測定物質(zhì)濃度間的線性關(guān)系達0～105范圍。與酶標免疫的比色吸光度（OD值）0～3.0的范圍相比，優(yōu)勢明顯。例：CEA酶免只能到達80ng/ml；發(fā)光可以到達3000ng/ml。線性范圍105104103102酶標熒光放免發(fā)光化學發(fā)光技術(shù)簡介酶標熒光放免發(fā)光有效期（月試劑有效期長發(fā)光免疫的試劑有效期可長達1年。放射免疫由于放射性同位素衰變，一般有效期只有一種月，酶標免疫的底物穩(wěn)定性差，有效期有限。化學發(fā)光技術(shù)簡介4）安全性好：

消除了放射性污染，環(huán)境保護、安全。到目前為止，尚未發(fā)現(xiàn)化學發(fā)光免疫法的危害性?；瘜W發(fā)光技術(shù)簡介

化學發(fā)光（CLIA）酶免（EIA）放免（RIA）檢測限（M/L）10-17-10-1910-1210-15標記物酶蛋白發(fā)光物質(zhì)酶蛋白放射性元素靈敏度高低高線性范圍寬窄寬放射污染無無有試劑穩(wěn)定性6-12個月6-12個月1-3個月操作易易繁瑣Part4.免疫分析技術(shù)對比（本章小結(jié)）肝纖維化（hepaticfibrosis）是指肝細胞發(fā)生壞死及炎癥刺激時，肝臟內(nèi)纖維結(jié)締組織異常增生的病理過程。是慢性肝病的共同病理學基礎(chǔ)，伴隨多種不一樣的慢性肝臟疾病的進展可逐漸形成肝纖維化。輕―――肝纖維化重―――肝硬化（不一樣之處――――肝小葉構(gòu)造與否完整）引起肝纖維化的病因消除后――初期肝纖維化可完全恢復(fù)，肝硬化則不易復(fù)原。肝纖維化綜述Part1.肝纖維化的概念肝纖維化嚴重時可引起門脈高壓――纖維化組織壓迫門靜脈分支，門靜脈阻力升高。從生理角度看，肝損傷時肝內(nèi)纖維結(jié)締組織增生是一種對損傷的正常修復(fù)反應(yīng)。

肝小葉構(gòu)造紊亂，肝細胞數(shù)量過度增生減少，肝功能減少

肝臟萎縮變硬，肝硬化失代償肝纖維化是慢性肝病最重要的病理特性，也是慢性肝炎、肝硬化深入發(fā)展、惡化的重要原因。肝纖維化綜述Part2.肝纖維化的病理生理學肝纖維化綜述慢性乙型肝炎慢性丙型肝炎脂肪性肝炎（酒精或非酒精性）藥物免疫性肝病膽汁淤積等肝纖維化綜述Part3.肝纖維化的病因?qū)W過度纖維化會導(dǎo)致肝臟萎縮變硬，直到引起肝硬化或肝衰竭，進而導(dǎo)致患者完全喪失生活能力和死亡。據(jù)記錄，目前我國乙肝病毒攜帶者1.2億，慢性乙肝患者約3500萬，加上慢性丙肝、脂肪肝、血吸蟲病、免疫性肝病等，構(gòu)成了龐大的潛在的肝纖維化患者群。調(diào)查顯示，肝硬化占據(jù)國際上疾病死亡病因的第六位。初期發(fā)現(xiàn)并積極治療肝纖維化，使之逆轉(zhuǎn)或延緩其發(fā)展，對提高患者生活質(zhì)量，改善患者預(yù)后，有十分重要的作用。肝纖維化綜述Part4.肝纖維化的流行病學肝纖維化是肝硬化發(fā)展的必經(jīng)階段，多種原因?qū)е碌母螕p傷，都可繼發(fā)肝纖維化形成進而發(fā)展為肝硬化。初期肝纖維化可完全恢復(fù)，肝硬化則不易復(fù)原。肝纖維化綜述Part5.小結(jié)肝活檢病理學檢查仍是診斷肝纖維化的金原則，是明確診斷、衡量炎癥活動度、纖維化程度以及鑒定藥物療效的重要根據(jù)。目前一般采用半定量計分系統(tǒng)。不過，由于肝纖維化在肝內(nèi)分布不均勻，并且肝穿刺組織僅占全肝的五萬分之一，可導(dǎo)致診斷誤差。因此強調(diào)肝活檢標本至少15mm，并包括6個以上匯管區(qū)。Part1.病理學檢查肝纖維化的檢測措施肝纖維化的檢測方法現(xiàn)代影像學手段如B型超聲、CT、磁共振成像（MRI）等可以發(fā)現(xiàn)肝纖維化的某些征象，如肝臟輪廓、大小、及肝實質(zhì)信號強弱的變化，肝臟血管內(nèi)徑及血流方向、速度的變化，脾臟大小的變化等。彩色多普勒超聲檢查或放射性核素掃描可以測定肝臟動脈和門脈的血流量及功能性門體分流狀況。不過，目前這些影像學檢查尚不能對纖維化做出確診和鑒別診斷，更難于精確判斷肝纖維化的嚴重程度，故只能作為一種輔助診斷。Part2.影像學檢查肝纖維化的檢測方法細胞外基質(zhì)(ECM)及代謝產(chǎn)物ECM代謝有關(guān)酶類及克制劑膠原蛋白例如：PⅢNPPIPColⅣColVI非膠原糖蛋白例如：LNFNFNRUNTN糖胺多糖例如：HA蛋白多糖膠原酶及其克制劑例如：MMPsTIMPs脯氨酰羥化酶（PH）賴氨酰氧化酶細胞因子多肽類生長因子例如：TGF-β白細胞介素例如：IL-1腫瘤壞死因子例如：TNF-α干擾素例如：IFN-γPart3.血清學檢查肝纖維化的檢測方法Part4.不一樣措施的對比肝纖維化的檢測方法透明質(zhì)酸（hyaluronicacid，HA）重要由纖維母細胞細胞合成，通過淋巴系統(tǒng)進入血循環(huán)，并由肝臟迅速清除。肝內(nèi)皮細胞是HA攝取、降解的場所。由于體內(nèi)存在有效的HA清除機制，正常人血清中僅有低水平的HA。多種原因?qū)е碌母尾】墒寡錒A水平上升，重要與肝臟清除功能下降、肝臟內(nèi)成纖維細胞（肝星狀細胞）合成增長有關(guān)。在肝纖維化時，肝星狀細胞合成HA水平大大升高，且內(nèi)皮細胞清除HA能力亦有下降，雙重原因?qū)е赂卫w維化中HA水平上升。血清學肝纖維化四項診斷的應(yīng)用價值Part1.透明質(zhì)酸HA又稱“小肝穿”，測定具有如下作用：1.反應(yīng)肝臟纖維化形成；2.反應(yīng)肝臟纖維化程度；3.反應(yīng)肝細胞功能；4.反應(yīng)肝臟炎癥性病變；5.無論是無癥狀性病毒感染或嚴重病毒感染、酒精性肝病、膽汁性肝硬化，HA均是有效指標，可用于藥物療效觀測及病情的動態(tài)觀測。就目前臨床研究而言：HA是目前眾多纖維化生化指標中最為敏感和特異的指標（80%以上）。在慢性肝病肝纖維化組織學-血清對照研究中發(fā)現(xiàn)，HA是4項細胞外間質(zhì)成分中最為敏感和特異的指標，HA的診斷精確性為82.9%，特異性為93%，敏感性為56%。血清學肝纖維化四項診斷的應(yīng)用價值血清學肝纖維化四項診斷的應(yīng)用價值Part2.層粘連蛋白層粘蛋白（laminin，LN）是基底膜成分中的重要大分子糖蛋白，在肝臟內(nèi)與Ⅳ型膠原共同分布，大量沉積則引起肝竇毛細血管化，直接影響肝竇血流阻力。LN有十幾種亞型，有報道顯示肝纖維化過程中肝臟內(nèi)大量合成β1和γ1鏈，有人研究老鼠肝纖維化時說大量合成的是2型而非1型。但到目前，在肝纖維化過程中研究最多的是1型。血清LN的測定一般是測定其LN-P1片斷。LN-P1重要反應(yīng)的是肝纖維化形成中的纖維化活性，其血清值被認為是反應(yīng)基底膜更新率的指標，可提醒肝竇的毛細血管化和匯管區(qū)纖維化。LN在肝纖維化中的診斷價值：與肝纖維化形成的病因親密有關(guān)，LN水平在酒精性肝硬化明顯高于病毒性肝硬化和膽汁性肝硬化，LN水平可反應(yīng)酒精性肝病與否存在門脈高壓及門脈高壓程度，但在非酒精性肝硬化，LN則不能用于門脈高壓的診斷。目前，有關(guān)LN對診斷肝纖維化的價值仍有爭議，其診斷敏感性不及ColⅣ和PⅢNP。血清學肝纖維化四項診斷的應(yīng)用價值血清學肝纖維化四項診斷的應(yīng)用價值PⅢNP是PCⅢ在細胞外形成原膠原前，被有關(guān)酶切下后進入血循環(huán)的氨基端尾肽。完整的PⅢNP重要通過竇狀隙內(nèi)皮細胞受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用被清除，故膠原代謝活躍及肝功能損傷時，血清PⅢNP升高，PⅢNP被視為肝纖維化生成的血清學指標。Part3.Ⅲ型前膠原N端肽血清學肝纖維化四項診斷的應(yīng)用價值PⅢNP的含量可以有效地區(qū)別輕型與中/重型慢性肝炎，提醒活動性肝纖維化，是反應(yīng)慢性肝纖維化活動性和程度的指標。長期隨訪血清PⅢNP含量能鑒定慢性肝病的預(yù)后。對原發(fā)性膽汁性肝硬化、慢性遷延性肝炎、慢性活動性肝炎、自身免疫性肝炎進行2~隨訪，無論藥物治療與否，原發(fā)性肝硬化者血清PⅢNP總是升高，接受肝移植后恢復(fù)正常；慢性遷延性肝炎PⅢNP含量在正常上限；發(fā)展成肝硬化的慢性活動性肝炎其血清PⅢNP持續(xù)升高，轉(zhuǎn)入緩和期則血清PⅢNP正常。唯自身免疫性肝炎例外，血清值一直不升高。血清PⅢNP可評估慢性肝病，尤其是慢性活動性肝炎纖維化過程，其臨床判斷預(yù)后價值已被公認，但總體敏感性、特異性不高。有報道，血清PⅢNP含量鑒別肝纖維化的敏感性和特異性分別是76%和71%。但PⅢNP正?；蜉p微升高不能排除已經(jīng)存在但正在緩慢進展中的纖維化。此外，值得提出的是，在年幼的小朋友，生長導(dǎo)致全身間質(zhì)膠原的更新可使血清PⅢNP水平明顯升高，故對小朋友肝纖維化沒有診斷價值。血清學肝纖維化四項診斷的應(yīng)用價值血清學肝纖維化四項診斷的應(yīng)用價值Ⅳ型膠原是構(gòu)成基底膜的重要成分。肝纖維化時肝內(nèi)Ⅳ型膠原合成增多并大量沉積，致使肝竇毛細血管化。Ⅳ型前膠原由氨基端三螺旋即7S膠原、羧基端球形區(qū)即NCl及主三螺旋區(qū)構(gòu)成。在血清中可出現(xiàn)這三種重要的降解片斷，3者均是反應(yīng)Ⅳ型膠原降解的指標，即具有相似的臨床意義，差異在于不一樣成分的檢測敏感度不一樣。由于膠原降解的增長常伴有更多的再合成，因此，確切地說，它們是反應(yīng)基底膜膠原更新的指標。Part4.Ⅳ型膠原研究表明，Ⅳ型膠原成分的檢測對判斷肝纖維化和肝硬化具有較高的敏感性（79%）和特異性（82%）。有文獻報道在慢性活動性丙肝患者中組合運用Ⅳ型膠原與凝血酶原時間（PT)可明確地診斷為肝硬化。血清學肝纖維化四項診斷的應(yīng)用價值血清甘膽酸(Cholyglycine,CG)是膽酸與甘氨酸結(jié)合二次的結(jié)合型膽酸之一，在肝細胞內(nèi)，膽固醇通過及其復(fù)雜的酶促反應(yīng)，轉(zhuǎn)變成初級膽汁酸。其中有膽酸(CA)和鵝去氧膽酸（CD-CA）。膽酸的類固醇核上有三個羥基(C3、C7、C12），側(cè)鏈末端的羥基以肽鍵與甘氨酸結(jié)合，分子量為462u。

CG正常代謝途徑為腸—肝循環(huán)，CG由肝細胞合成，經(jīng)毛細膽管、膽管排入膽囊，隨同膽汁進入十二指腸，協(xié)助食物消化。95%膽酸在回腸末端重吸取，經(jīng)門靜脈再回肝臟，由肝細胞攝取再運用。在血清中重要以蛋白結(jié)合形式存在，溢入體循環(huán)的總量不不小于1%。在正常狀況下,外周血中膽酸含量甚微,正常成人無論空腹或餐后,其血清CG濃度穩(wěn)定在低水平。其他血清學指標簡介Part1.甘膽酸其他血清學指標簡介當肝細胞受損時，肝細胞攝取CG能力下降，致使血中CG含量增高；膽汁郁滯時，肝臟排泄膽酸發(fā)生障礙，而返流血液循環(huán)的CG含量增高，也使血CG含量增高。因此，用RIA（radioimmunoassay放射免疫測定法）法檢測血清甘膽酸（SCG）是評價肝細胞功能及其肝膽系物質(zhì)循環(huán)功能的敏感指標之一。臨床意義

（1）急性肝炎、慢性活動性肝炎、原發(fā)性肝癌、肝硬化、慢遷肝患者血CG均明顯高于正常人，且呈遞性增高。

（2）膽石癥伴黃疸患者膽管、膽囊排泄功能障礙引起血清CG明顯升高。

（3）肝硬化、梗阻性肝病、腸—肝循環(huán)障礙血清CG水平高于正常人。Part2.纖維連接蛋白及其受體纖維連接蛋白(FN)及其受體(FNR)：FN在體內(nèi)有2種形式，即細胞型和血漿型。血漿型FN絕大部分由肝細胞合成。在肝臟，F(xiàn)N與膠原、LN等共同構(gòu)成基底膜成分。肝纖維化及肝硬化時，肝組織中細胞型FN含量明顯增長，但血漿FN水平則明顯減少，后者反應(yīng)了肝細胞合成蛋白質(zhì)功能的減退。故血清FN對肝纖維化的判斷價值尚不能一定。運用ELISA法研究慢性肝病病人血清FNR(FN受體B亞單位)，發(fā)現(xiàn)慢性活動性肝炎、肝硬化、酒精性肝病和肝細胞癌病人血清FNR水平明顯升高，并與血清PⅢNP水平有關(guān)；血清FNR水平與組織學肝纖維化程度的有關(guān)性，比與組織學上壞死、炎癥的有關(guān)性更為親密，而血清PⅢNP則相反。表明血清FNR在反應(yīng)肝纖維化方面優(yōu)于血清PⅢNP，認為其是反應(yīng)肝纖維化的1種有價值的指標.其他血清學指標簡介Part3.Ⅰ型前膠原羧基端肽和氨基端肽Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)和氨基端肽(PⅠNP)：Ⅰ型膠原的生物合成過程與Ⅲ型膠原不一樣的是，Ⅰ型前膠原形成原膠原過程中，其PⅠCP被完全切除。因此，理論上講，PⅠCP可直接反應(yīng)膠原生成。然而，研究表明，血清PⅠCP對區(qū)別酒精性肝炎和酒精性脂肪肝的精確性不如血清PⅢNP；血吸蟲病患者初期血清PⅠCP增高的幅度不小于晚期，而晚期患者血清PⅢNP仍持續(xù)增高；肝外間質(zhì)組織(如骨、皮膚)富含Ⅰ型膠原，在生長年齡對血清含量影響較大，故目前已較少采用。血清PⅠNP檢測的意義和價值與PⅠCP相似。其他血清學指標簡介肝纖維化的診斷依賴于肝活檢病理診斷，這種創(chuàng)傷性檢查具有許多明顯局限性，如具有創(chuàng)傷性、難以反復(fù)活檢、有一定的并發(fā)癥（1/3的患者有疼痛；0.3％的患者出現(xiàn)嚴重并發(fā)癥，包括出血，氣胸，結(jié)腸和膽囊穿孔等；尚有0.03％的死亡率）、病變在肝臟內(nèi)不均勻、存在觀測者自身和觀測者之間的差異（半定量分期系統(tǒng)可誤差1-2期）、標本長度不夠（長度<20mm和<10個匯管區(qū)）等易出現(xiàn)低估以及標本破碎及肝包膜下纖維化可導(dǎo)致假象。因此臨床上迫切需要尋找簡樸、易推廣的非創(chuàng)傷性診斷措施來診斷和評估肝纖維化。數(shù)年來，人們一直在試圖尋找無創(chuàng)的血清學指標來評估慢性肝病的肝纖維化，包括常規(guī)生化、纖維化、細胞因子、免疫功能等，但迄今為止，還沒有任何單項指標能足夠敏感、精確地反應(yīng)肝纖維化程度。近十數(shù)年來，國外建立了多種以綜合多項臨床、生化指標及影像學為基礎(chǔ)的肝纖維化非創(chuàng)傷性診斷預(yù)測模型。目前公認的是這四項：HA、LN、PⅢNP、CⅣ。診斷肝纖的敏捷度為60-70%，特異性為90%以上。肝纖維化診斷現(xiàn)實狀況肝纖四項檢測常見問題問題一：肝纖維化血清學檢測有什么臨床意義？解釋：肝纖維化檢測的措施常規(guī)的有三種，即病理學檢測、影像學檢測和血清學檢測。目前，病理學檢測仍然是肝纖維化檢測的“金原則”，而影像學和血清學作為輔助診斷的項目。雖然病理學檢測的承認度最高，不過由于具有創(chuàng)傷性，并且技術(shù)難度和風險度都很高而致使其應(yīng)用受到限制，尤其是不可以監(jiān)測患者的病情。影像學的發(fā)展對肝纖維化的診治非常地故意義，不過目前市場上產(chǎn)品的辨別率普遍偏低，這對初期肝纖維化的發(fā)現(xiàn)和診治失去價值，從而使病人失去肝纖維化治療的寶貴時間。血清學檢測則是對病理學檢測和影像學檢測最有效的補充，不僅可以監(jiān)測病人病情，并且對初期肝纖維化的發(fā)現(xiàn)和治療非常有價值。肝纖四項檢測常見問題問題二：肝纖維化檢測的血清學指標非常多，為何國內(nèi)多采用透明質(zhì)酸、層粘連蛋白、Ⅲ型前膠原N端肽和Ⅳ型膠原聯(lián)合檢測來診斷肝纖維化？解釋：盡管肝纖維化發(fā)生時，許多血清學指標也許都會升高，不過目前在血清學檢測肝纖維化領(lǐng)域，還沒有任何單項指標具有較高的敏感度和特異性，單項檢測的意義也需要結(jié)合患者自身的其他狀況綜合分析。因此目前研究者都在尋求最佳的檢測指標組合模式以提高檢測的敏感度和特異性。不過由于肝纖維化的病因諸多，學術(shù)方面還沒有找到適合所有肝纖維化病因的血清學指標組合方案。肝纖維化四項產(chǎn)品是針對國內(nèi)患者人群的現(xiàn)實狀況開發(fā)出的具有相對較高臨床敏感度和臨床特異性的產(chǎn)品。問題三：肝纖維化四項檢測的應(yīng)用范圍有哪些？解釋：重要合用于：1）門診上肝病病人的常規(guī)檢查，如慢性乙肝患者、脂肪肝患者（包括酒精肝患者）、慢性丙肝患者等等；2）臨床上對病人病情的監(jiān)測及對病人治療效果的觀測。3）抗纖維化藥物的臨床研究。例如森隆藥業(yè)的藥物安絡(luò)化纖宣傳資料上就推薦使用“小肝穿”的HA判斷肝纖維化的程度和觀測藥物的療效。肝纖四項檢測常見問題問題四：為何肝纖維化四項有些項目測定值非常高，而其他幾項指標正常？解釋：肝纖維化四項檢測在國內(nèi)由來已久，雖然是國內(nèi)公認的檢測肝纖維化比較敏感和特異的血清學指標，不過單個項目檢測肝纖維化的敏感度和特異性卻有很大差異。重要有兩個原因：1）肝纖維化的病因不一樣導(dǎo)致的差異；2）肝纖維化發(fā)展為不一樣步期導(dǎo)致的差異。目前對于這個問題學術(shù)還沒有非常詳盡的解釋，對于第二種原因我們通過某些臨床試驗發(fā)現(xiàn)四項指標都高的多是肝硬化、重肝和肝癌病人；在肝纖維化初期透明質(zhì)酸和Ⅲ型前膠原N端肽的敏感度更高；肝纖維化發(fā)展為肝硬化前的中晚期時層粘連蛋白和Ⅳ型膠原迅速升高；而處在治療階段的病人伴隨病情的好轉(zhuǎn)某些指標會轉(zhuǎn)為正常，尤其是透明質(zhì)酸和Ⅲ型前膠原N端肽，它們對于肝纖維化病情的監(jiān)測效果更佳。需要提起注意的是：四項指標檢測肝纖維化沒有固定的模式，因病因、因病情、因病人會有差異，需要結(jié)合單個項目的臨床意義和病人的其他檢測指標及有關(guān)癥狀分析病人病情，只通過成果的陰陽性鑒定肝纖維化是不科學的。肝纖四項檢測常見問題問題五：問什么層粘連蛋白和Ⅳ型膠原采用夾心兩步法？解釋：LN系生物大分子，不僅存在二十種左右的亞型，并且在血清內(nèi)被降解至少7個片段以上，理論上無法對其進行最精確的定量。由于這個原因，競爭法測定期，由于抗原降解時片段增多，而抗原位阻減小，從而導(dǎo)致成果大大偏高（如放免類試劑），夾心一步法測定成果則由于片段干擾標識抗體結(jié)合在固相上而導(dǎo)致不一樣程度地偏低，可以說有關(guān)性很差，我們在研發(fā)過程中發(fā)現(xiàn)某些重癥肝硬化患者一步法測定成果整體偏低證明這個現(xiàn)象，這樣的成果一定無法應(yīng)用于病情監(jiān)測。而我們最終確定的兩步法模式，則最大程度克服了這個問題，使測定成果和病人病情有很高的有關(guān)性，從而可以應(yīng)用于病情的監(jiān)測。在最初研究CⅣ項目時，曾發(fā)現(xiàn)血清稀釋一倍后，發(fā)光值成更大比例地減少，通過查閱文獻，推測血清內(nèi)應(yīng)存在大量的單體形式或降解形式，由于只有這樣，才會導(dǎo)致測定成果受到極大的干擾。因此，采用競爭法和夾心一步法測定CⅣ，成果一定不精確。我們采用兩步法操作，斜率在1左右，最大程度消除了單體及降解片段的干擾，成果更可信，對于患者的病情監(jiān)測更故意義。肝纖四項檢測常見問題問題六：肝纖維化四項操作時要尤其注意的問題有哪些？會導(dǎo)致什么后果？解釋：操作時需要尤其注意的問題有：1）所有項目盡量減小加樣誤差，提議采用貼壁的加樣措施，為了防止HA和PⅢNP產(chǎn)品加樣時污染，可采用加標本時貼微孔下壁，加HA結(jié)合蛋白溶液或PⅢNP抗體溶液時貼微孔上壁的措施，或者加完標本時把板子水平轉(zhuǎn)動180度再加HA結(jié)合蛋白溶液或PⅢNP抗體溶液。當加樣不準時會導(dǎo)致誤差加大，污染則導(dǎo)致測定錯誤。2）溫育時使用水浴最佳，也可采用在水浴鍋內(nèi)放入試管架或醫(yī)用托盤，上面鋪上濕紗布，反應(yīng)時將板子放在紗布上的做法，還可以采用在溫箱中放入鋪有濕紗布的醫(yī)用托盤的做法。以上提議的溫育措施重要是為了消除邊緣效應(yīng)，提高測定的精確性，使可反復(fù)性增強。假如直接把微孔板放在鐵架子上，會使邊緣微孔受熱過快，發(fā)光值偏高