艾滋病實驗室標(biāo)本管理制度

艾滋病實驗室標(biāo)本管理制度（一）、樣品的采集和處理1.血液樣本的采集和處理1.1抗凝全血：消毒局部皮膚，用加有抗凝劑（EDTA鈉鹽或鉀鹽、枸櫞酸鈉、肝素）的真空采血管抽取適量靜脈血，或用一次性注射器抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管中，輕輕顛倒混勻10-15次，備用。1.2末梢全血：消毒局部皮膚（成人和1歲以上兒童可選擇耳垂、中指、無名指或食指，1歲以下兒童采用足跟部）。用采血針刺破皮膚，用無菌紗布擦掉第一滴血。收集滴出的血液，備用。血漿：根據(jù)檢測需要，選擇含適宜抗凝劑的采血管，按照采1.3血管說明采集：靜脈血，分離血漿；或?qū)⒉杉目鼓?500～3000r/min離心15分鐘，上層即為血漿，吸出置于合適的容器中，備用。血清：根據(jù)檢測需要，按照采血管說明采集靜脈血，分離血清；或用不含抗凝劑的真空采血管抽取適量靜脈血，或用一次性注射器抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至無抗凝劑或含促凝劑的試管中放置1～2小時，待血液凝固、血塊收縮后再用1500～3000r/min離心15分鐘，吸出血清，置于合適的容器中，備用。淋巴細(xì)胞富集液：將采集的抗凝全血1500～3000r/min離心15分鐘，吸取血漿層下的淋巴細(xì)胞富集液，置于合適的容器中，備用。外周血單個核細(xì)胞（PBMC）：使用淋巴細(xì)胞分離液，進(jìn)行密度梯度離心，吸出PBMC層，置于合適的容器中，備用。1.4抗凝劑的選擇：根據(jù)檢測要求選用適當(dāng)?shù)目鼓齽?，如CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)測定可選用EDTA鉀鹽或鈉鹽、枸櫞酸鈉、肝素（如果血液不用于核酸檢測）；艾滋病-1分離、核酸定性/定量檢測可選用EDTA鉀鹽或鈉鹽或枸櫞酸鈉。2、樣本采集后處理、保存、運輸?shù)臅r限和條件，因不同的檢測項目而異，應(yīng)參見相應(yīng)檢測項目要求。采血完成后的穿刺針頭必須丟棄于尖銳危險品容器內(nèi)，妥善處理，防止發(fā)生職業(yè)暴露。3、采集樣品注意事項（1）采集樣品原則上應(yīng)按臨床采血技術(shù)規(guī)范操作。（2）采集樣品時應(yīng)注意安全，建議采用真空采血管及蝶形針具，以避免直接接觸血液；直接接觸艾滋病感染者/艾滋?。ˋIDS）病人血液/體液的操作，應(yīng)戴雙層手套。（3）所有的血液、血清、未固定的組織和組織液樣品，均應(yīng)視為有潛在傳染性，都應(yīng)以安全的方式進(jìn)行操作。（4）應(yīng)像操作未知傳染風(fēng)險樣品一樣，小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。（5）采血時一定要注意安全，采血用一次性注射器，謹(jǐn)慎操作，防止發(fā)生刺傷皮膚和造成外界污染。（6）離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時形成氣溶膠。（二）樣品的保存用于抗體和抗原檢測的血清或血漿樣本，短期（1周）內(nèi)進(jìn)行檢測的可存放于2～8℃，一周以上應(yīng)存放于-20℃以下。用于核酸檢測的血漿和血細(xì)胞樣本，4天內(nèi)進(jìn)行檢測的可存放于2-8℃：3個月以內(nèi)應(yīng)存放于-20℃以下；3個月以上應(yīng)置于-70℃以下保存。用于CD4+T淋巴細(xì)胞檢測的全血樣本，室溫保存，時間不超過48小時。如果用CD45設(shè)門，樣本保存不超過72小時。篩查結(jié)果為陽性的樣本應(yīng)及時進(jìn)行補(bǔ)充試驗；篩查結(jié)果為陰性的樣本，可根據(jù)具體需要決定保存時間，建議至少保存1個月。艾滋病檢測確證實驗室收到的篩查陽性樣本，無論補(bǔ)充試驗結(jié)果如何，均應(yīng)保存剩余樣本，保存時間根據(jù)需要確定，建議至少保存3年，特殊用途或?qū)ｍ楉椖康臉颖靖鶕?jù)具體要求確定保存時間。補(bǔ)充試驗結(jié)果為陽性的樣本按照國家生物樣本管理的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。（三）樣品的運送1、全血、血漿的運送應(yīng)符合生物安全要求，參照《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》（衛(wèi)健委第45號令，2006年2月1日執(zhí)行）。2、血液樣本運送時應(yīng)采用三層容器對樣本進(jìn)行包裝，隨樣本應(yīng)附有與樣本唯一性編碼相對應(yīng)的送檢單。送檢單應(yīng)標(biāo)明受檢者姓名、樣本種類等信息，并應(yīng)放置在第二層和第三層容器之間。第一層容器：直接裝樣本，應(yīng)防滲漏。樣本應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi)，試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記，標(biāo)明樣本的唯一性編碼或受檢者姓名、種類和采集時間。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料，以免碰碎。第二層容器：容納并保護(hù)第一層容器，可以裝若干個第一層容器。要求不易破碎、帶蓋、防滲漏、容器的材料要易于消毒處理。第三層容器：容納并保護(hù)第二層容器的運輸用外層包裝箱。外面要貼上醒目的標(biāo)簽，注明數(shù)量、收樣和發(fā)件人及聯(lián)系方式，同時要注明“小心輕放、防止日曬、小心水浸、防止重壓、禁止倒立”等字樣，還應(yīng)易于消毒。3、用于抗體檢測的血清和血漿樣本應(yīng)在凍存條件下運送。用于CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞測定的樣本應(yīng)在室溫下（18～25℃）運送。用于病毒載量檢測的樣本應(yīng)在-20℃以下運輸。干血斑和尿液樣本應(yīng)在室溫下（18～25℃）運送，可通過郵寄方式運送。血液制品樣本的運送按照血液制品有關(guān)使用說明執(zhí)行。4、運送樣本必須有記錄。（四）樣本接收和拒收標(biāo)準(zhǔn)1、含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實驗室內(nèi)由經(jīng)過培訓(xùn)的、穿戴防護(hù)衣的工作人員打開，用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。2、核對樣品與送檢單，認(rèn)真核對標(biāo)本上病人姓名、年齡、性別、病區(qū)、床號、住院號是否與申請單符合。檢查樣品管有無破損和溢漏，如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出，對樣品管和盛器消毒，同時報告有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和專家。3、檢查樣品的狀況，觀察標(biāo)本的量、標(biāo)本類型、是否抗凝或有小凝塊樣品，記錄有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況，判斷標(biāo)本是否符合檢驗要求。如果污染過重或者認(rèn)為樣品不能被接受，則應(yīng)將樣品安全廢棄。并要將樣品情況立即通知送樣人。4、打開標(biāo)本容器時要小心，以防內(nèi)容物潑濺。樣品處理時若內(nèi)容物有可能濺出，則應(yīng)在生物安全柜中戴手套進(jìn)行。同時應(yīng)戴口罩、防護(hù)眼鏡，以防皮膚或黏膜污染。5、因特殊臨床治療導(dǎo)致自發(fā)熒光的樣品不可用于熒光方法測試。6、接收樣品時應(yīng)規(guī)范填寫樣品接收單。7、不符要求的標(biāo)本，必須及時填寫退回理由單，及時通知送樣人，說明情況，重新留取。不符合要求的標(biāo)本與可疑含有感染性樣品用后的包裹同檢驗后的標(biāo)本一樣進(jìn)行消毒或無害化處理后廢棄。（五）標(biāo)本檢測1、離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時形成氣溶膠。復(fù)核標(biāo)本接收過程中的每一步驟，在檢測過程中，應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程。2、在標(biāo)本足夠的情況下，不能浪費、隨意丟棄或損壞標(biāo)本。應(yīng)像