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…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁,總=sectionpages22頁第=page11頁,總=sectionpages11頁2025年冀少新版選修1生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷103考試試卷考試范圍:全部知識(shí)點(diǎn);考試時(shí)間:120分鐘學(xué)校:______姓名:______班級(jí):______考號(hào):______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題,共12分)1、有關(guān)加酶洗衣粉使用注意事項(xiàng)的敘述正確的是()
①蛋白質(zhì)類織物不能用加酶洗衣粉來洗滌
②加酶洗衣粉使用的水溫一般在50℃以下
③加酶洗衣粉不宜存放太久;加酶洗衣粉有保質(zhì)期
④堿性蛋白酶洗衣粉會(huì)分解人體皮膚表面蛋白質(zhì),從而損傷人體皮膚,因此應(yīng)避免與這類洗衣粉長時(shí)間地接觸A.①②B.②③④C.①③④D.①②③④2、從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí),首先要將原料干燥、粉碎,其目的主要是()A.脫水,使原料與有機(jī)溶劑充分接觸,增大溶解度B.整個(gè)胡蘿卜不能溶于有機(jī)溶劑C.胡蘿卜太大,不能放入燒杯中D.減少萃取的時(shí)間,提高效率3、在進(jìn)行“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí),下列操作正確的是()A.在高壓蒸汽滅菌時(shí),保溫保壓結(jié)束后應(yīng)立即關(guān)閉電源、打開排氣閥B.實(shí)驗(yàn)室倒平板時(shí),應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C.在涂布接種時(shí),涂布器經(jīng)火焰直接灼燒滅菌后再在平板表面均勻涂布D.用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí),應(yīng)標(biāo)記在皿底上4、下列有關(guān)果酒和果醋制作的敘述,正確的是()A.發(fā)酵過程中有關(guān)反應(yīng)主要發(fā)生在細(xì)胞外B.發(fā)酵過程中為防止被污染,需要嚴(yán)格滅菌C.將葡萄汁制成果酒和果醋后,有機(jī)物總量減少而種類增加D.制成果酒后再制果醋,只需向裝置中通入無菌空氣5、用酵母菌使葡萄汁產(chǎn)葡萄酒,當(dāng)酒精含量達(dá)到12%~16%時(shí),發(fā)酵就停止了。有關(guān)解釋錯(cuò)誤的是()A.酒精對(duì)酵母菌有毒害作用B.營養(yǎng)物質(zhì)因消耗而不足C.產(chǎn)物積累使pH值發(fā)生改變D.氧氣過少導(dǎo)致其無法呼吸6、已知某樣品中存在甲;乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子;其分子大小、所帶電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如下圖所示,下列有關(guān)該樣品中蛋白質(zhì)的分離的敘述,正確的是()
A.將樣品裝入透析袋中透析12h,若分子乙保留在袋內(nèi),則分子丙也保留在袋內(nèi)B.若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì),則分子甲移動(dòng)速度最快C.若將樣品以2000r/min的速度離心10min,分子戊存在于沉淀中,則分子甲也存在于沉淀中D.若用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質(zhì)分子,則分子甲和分子戊形成的電泳帶相距最遠(yuǎn)評(píng)卷人得分二、多選題(共8題,共16分)7、圖1表示制備固定化酵母細(xì)胞的有關(guān)操作;圖2是利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行酒精發(fā)酵的示意圖。下列敘述正確的是。
A.剛?cè)芑暮T逅徕c應(yīng)迅速與活化的酵母菌混合制備混合液B.圖1中X溶液為CaCl2溶液,其作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠C.圖2發(fā)酵過程中攪拌的目的是為了使培養(yǎng)液與酵母菌充分接觸D.圖1中制備的凝膠珠用蒸餾水洗滌后再轉(zhuǎn)移到圖2裝置中8、某同學(xué)設(shè)計(jì)了如圖所示的果酒和果醋發(fā)酵裝置;下列有關(guān)敘述正確的是。
A.進(jìn)行果醋和果酒發(fā)酵的最適溫度相同B.該裝置既可阻止空氣進(jìn)入,也便于發(fā)酵產(chǎn)生的氣體排出C.去除彎管中的水,該裝置即可滿足果醋發(fā)酵時(shí)底層發(fā)酵液中大量醋酸菌的呼吸D.發(fā)酵過程中,發(fā)酵液的pH逐漸降低,密度逐漸下降9、下圖表示研究人員在實(shí)驗(yàn)室中使用的分批培養(yǎng)細(xì)菌的方法;下列敘述正確的是()
A.尿素分解菌可利用培養(yǎng)基中的尿素是因?yàn)槟芎铣呻迕窧.短期保存的菌種,可將菌液加入甘油后放在冷凍箱中冷藏C.液體選擇培養(yǎng)基通??捎糜谶x擇培養(yǎng),增加目標(biāo)菌種的濃度D.將三角瓶放在搖床上振蕩培養(yǎng)能提高溶氧量和養(yǎng)料的利用率10、廚余垃圾是指居民日常生活及食品加工、飲食服務(wù)、單位供餐等活動(dòng)中產(chǎn)生的垃圾。廢液中的淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì),易腐爛變質(zhì),滋生病原微生物等。若處理不當(dāng),可能造成嚴(yán)重的污染。圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌組合可以將有機(jī)廚余垃圾迅速分解成水和二氧化碳,減輕環(huán)境污染。為制備分解有機(jī)廚余垃圾的微生物菌劑,某科研小組對(duì)兩菌種進(jìn)行了最佳接種量比的探究實(shí)驗(yàn),并得出下圖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下面敘述錯(cuò)誤的是()
A.巨大芽孢桿菌生長過程中需要氮源,圓褐固氮菌生長過程中不需要氮源B.要統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)量可采用平板劃線法和稀釋涂布平板法C.將1mL菌液稀釋100倍,在3個(gè)平板上分別接0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為42、39和36。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為3.9×105D.處理該類廚余垃圾廢液,兩菌種的最佳接種量比為1:111、下列關(guān)于酶的應(yīng)用的說法中,不合理的是()A.使用加酶洗衣粉先用熱水浸泡洗衣粉和衣物,洗滌效果好B.污漬成分比較復(fù)雜時(shí)應(yīng)選用復(fù)合加酶洗衣粉,以減少用量C.加酶洗衣粉中的酶制劑需用特定材料包裹,屬于固定化酶D.固定化酶可以反復(fù)使用,且固定化后不會(huì)影響酶的催化活性12、桑葚與草莓營養(yǎng)價(jià)值極高,口味調(diào)和。草莓中含量較高的維生素C有助于延緩桑葚天然色素的氧化;桑葚獨(dú)有的花青素、白藜蘆醇等物質(zhì)能顯著增強(qiáng)復(fù)合果酒的功效。下圖為桑葚草莓復(fù)合果酒的工廠化制備流程,下列說法正確的是()
桑葚和草莓原料的挑選和清洗→混合攪拌→添加偏重亞硫酸鉀→榨汁→調(diào)糖和調(diào)酸→滅菌→接種發(fā)酵A.在生產(chǎn)復(fù)合果酒的過程中,要防止桑葚天然色素被氧化B.果酒發(fā)酵初期通入氧氣能促進(jìn)酵母菌繁殖,有利于加快果酒發(fā)酵C.復(fù)合果酒的制備過程中對(duì)發(fā)酵設(shè)備要進(jìn)行滅菌處理D.變酸的果酒表面會(huì)形成一層菌膜,這層菌膜是由乳酸菌形成的13、某同學(xué)設(shè)計(jì)了圖示的發(fā)酵裝置;下列有關(guān)敘述正確的是()
A.該裝置可阻止空氣進(jìn)入,用于果酒發(fā)酵B.該裝置便于果酒發(fā)酵中產(chǎn)生的氣體排出C.去除彎管中的水,該裝置可滿足果醋發(fā)酵時(shí)底層發(fā)酵液中大量醋酸菌的呼吸D.去除彎管中的水后,該裝置與巴斯德的鵝頸瓶作用相似14、下列關(guān)于中學(xué)“腐乳的制作”實(shí)驗(yàn),敘述正確的是()A.加鹽主要是為了調(diào)節(jié)水分,利于毛霉生長B.勤向腐乳坯表面噴水,有利于毛霉菌絲的生長C.將長滿毛霉的豆腐塊放在瓶中,并逐層加鹽,接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些D.實(shí)驗(yàn)室制作的腐乳不宜直接食用評(píng)卷人得分三、填空題(共8題,共16分)15、樣品處理及粗分離。
血液由__________和__________組成,其中紅細(xì)胞最多。紅細(xì)胞的組成中,除水分以外,約90%是__________。血紅蛋白由______條肽鏈組成,包括兩條__________和兩條__________。其中每條肽鏈環(huán)繞一個(gè)__________基團(tuán),此基團(tuán)可攜帶一分子氧或一分子__________。血紅蛋白因含有________而呈現(xiàn)____色。16、固定化酶技術(shù)是指將酶固定在不溶于水的________上,使酶既能與_________接觸,又能與__________分離。17、胡蘿卜素是_________________結(jié)晶,化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于乙醚等___________________。胡蘿卜等蔬菜是提取天然_______________的原料,工業(yè)生產(chǎn)上,提取天然β-胡蘿卜素的方法主要有三種,一是從____________提取,二是從大面積養(yǎng)殖的__________中獲得,三是利用________________的發(fā)酵生產(chǎn)。18、蒸餾時(shí)許多因素都會(huì)影響產(chǎn)品的品質(zhì)。例如,蒸餾溫度太高、時(shí)間太短,產(chǎn)品品質(zhì)就比較差。如果要提高品質(zhì),就需要___________________蒸餾時(shí)間。19、多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵,如_____________等,其中起主要作用的是________________。20、溫度和pH對(duì)酶活性的影響、探究果膠酶的用量注意:探究溫度的影響時(shí),溫度設(shè)置可以選_____________為溫度梯度,設(shè)置:10℃、20℃、至60℃。也可以選5℃為溫度梯度。在混合果泥與果膠酶前,二者應(yīng)分別放在不同試管中_________處理,以保證底物與酶在混合時(shí)溫度是_________的。此實(shí)驗(yàn)中,溫度是______________,保持不變的有:果泥量、酶的濃度和用量、水浴時(shí)間和混合物的pH等所有其他條件不變。探究pH時(shí),可將溫度梯度改成___________梯度,再選定一個(gè)適宜的____________即可。此實(shí)驗(yàn)中,不同pH梯度之間就是____________??赡芡ㄟ^測(cè)定濾出的_____________來判斷果膠酶的活性高低。因?yàn)樾》肿游镔|(zhì)可以通過濾紙,果膠酶活性越大,濾出的果汁的體積就越大。21、默寫腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程示意圖______22、紅細(xì)胞的洗滌。
洗滌次數(shù)、離心速度與離心時(shí)間十分重要。洗滌次數(shù)過少,無法除去________;離心速度過高和時(shí)間過長會(huì)使________等一同沉淀,達(dá)不到分離的效果,影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度。評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共2題,共14分)23、根據(jù)所學(xué)知識(shí);完成下列題目:
(1)尿素分解菌能分解尿素,將尿素中的N轉(zhuǎn)化成植物可利用的N形式,根本原因是這類細(xì)菌含有___________。
(2)加酶洗衣粉是指加入了酶制劑的洗衣粉,其中效果最顯著的是__________。洗衣粉中的酶制劑往往利用特殊化學(xué)物質(zhì)層層包裹,使其與洗衣粉中其他物質(zhì)隔開,洗衣遇水時(shí)隔離層溶解,酶釋放出來發(fā)揮作用。對(duì)酶制劑的包裹操作__________(填“是”或“否”)固定化酶技術(shù)。
(3)制作果汁過程中加入果膠酶能使果汁變得事澄清,其原因是__________。若以藍(lán)莓汁的體積作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的檢測(cè)指標(biāo)來探究果膠酶的最適用量,則酶的最適用量是指__________。如果實(shí)驗(yàn)室的果膠酶中可能存在某些小分子雜質(zhì),可以通過__________(操作)來去掉雜質(zhì),如果混入的是某種蛋白質(zhì),可用分配色譜法進(jìn)行分離,其前提是__________。24、根據(jù)所學(xué)的傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的知識(shí);回答下列問題:
(1)葡萄酒自然發(fā)酵過程中的菌種來源是___________。葡萄酒呈深紅色;原因是___________________________________________________________。
(2)果酒的發(fā)酵原理是_________________________________________。
(3)若果酒中已含有醋酸菌;在果酒發(fā)酵旺盛時(shí),醋酸菌____(能;不能)將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸,原因_____________________。
(4)用鹽水腌制咸鴨蛋的過程中會(huì)出現(xiàn)發(fā)臭腐敗,參照所學(xué)的方法,測(cè)定臭咸鴨蛋中的亞硝酸鹽含量。將生的臭咸鴨蛋打散后獲得樣液,再加入蒸餾水、提取劑、__________________溶液、___________溶液,進(jìn)行移液和定容操作,使樣液變得無色透明。移到比色管中再做比色操作,與___________比較,__________顏色越深亞硝酸鹽含量越高。評(píng)卷人得分五、非選擇題(共3題,共12分)25、測(cè)定水樣是否符合飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn);常用濾膜法測(cè)定大腸桿菌的數(shù)目。流程如圖所示,濾膜法的大致流程:用濾膜過濾待測(cè)水樣→水樣中的細(xì)菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基(EMB培養(yǎng)基)上培養(yǎng)→統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目。據(jù)圖回答問題:
(1)過濾待測(cè)水樣需要用到濾杯;濾膜和濾瓶;其中需要進(jìn)行滅菌處理的是___________。與過濾有關(guān)的操作都要在_______________旁進(jìn)行。
(2)將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上;這屬于微生物培養(yǎng)中的_________操作。從物理狀態(tài)角度分析,EMB培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。
(3)某生物興趣小組的某同學(xué)嘗試按照上述方法進(jìn)行測(cè)定;無菌操作下將10ml待測(cè)水樣加入到90ml無菌水中,稀釋后的菌液通過濾膜法測(cè)得EMB培養(yǎng)基上的菌落數(shù)平均為124,黑色菌落數(shù)平均為31,則推測(cè)1升待測(cè)水樣中的大腸桿菌數(shù)目為________個(gè)。
(4)該同學(xué)進(jìn)一步思考,利用濾膜法也可能用于測(cè)定待測(cè)水樣中其他微生物的數(shù)目。他取了兩份水樣,一份待測(cè)水樣來自變酸的果酒,從中檢測(cè)到兩種微生物,它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是____________________________。另一份來自明德中學(xué)屈子湖,若要通過測(cè)量藍(lán)藻的數(shù)目來研究水華,應(yīng)更換上述過濾裝置中的濾膜,選擇孔徑________(填“更小”或“不變”或“更大”)的濾膜,而培養(yǎng)基配方中則必需添加_____________________(水、無機(jī)鹽、碳源、氮源)。26、哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞,在生命科學(xué)研究中有著廣泛的應(yīng)用。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題:
(1)哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞是由骨髓中的造血干細(xì)胞經(jīng)__________(填“有絲分裂”或“無絲分裂”)和分化形成的。
(2)從哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中提取血紅蛋白時(shí),首先要用相當(dāng)于紅細(xì)胞液體體積五倍的__________洗滌紅細(xì)胞__________次,然后用蒸餾水和甲苯使紅細(xì)胞破裂,釋放出血紅蛋白。
(3)得到血紅蛋白混合液之后,可先用離心法進(jìn)行__________,再通過__________法或凝膠電泳法進(jìn)一步純化。使用前一種方法純化時(shí),先從色譜柱洗脫出來的是__________(填“大分子”或“小分子”)蛋白質(zhì)。
(4)用凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)分子量時(shí),需要在凝膠中加入SDS,目的是__________;使電泳遷移率完全取決于分子的大小。
(5)因哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞__________,常被用作制備細(xì)胞膜的材料。與提取血紅蛋白不同的是:在制備細(xì)胞膜時(shí),紅細(xì)胞的破裂只能使用__________而不能使用__________。27、請(qǐng)回答下列蛋白質(zhì)的提取和分離實(shí)驗(yàn)相關(guān)問題:
(1)凝膠色譜法是根據(jù)_________________分離蛋白質(zhì)的有效方法。
(2)蛋白質(zhì)的提取和分離實(shí)驗(yàn)中洗滌紅細(xì)胞的目的______________________________。
(3)重復(fù)洗滌三次;直至____________________,表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。在該過程中離心速度過高和時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致___________________________。
(4)在凝膠色譜柱裝填時(shí)不得有氣泡存在;原因?yàn)闅馀輹?huì)________________________。在操作中不能發(fā)生洗脫液流干漏出凝膠顆粒的現(xiàn)象,如果發(fā)生則___________________。
(5)在蛋白質(zhì)的分離過程中如果觀察到__________________________________,說明色譜柱制作成功。評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題,共30分)28、研究發(fā)現(xiàn);土壤中某種微生物能降解石油,分離降解石油的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)該實(shí)驗(yàn)所用的振蕩培養(yǎng)的培養(yǎng)基只能以石油作為唯一碳源,其原因是_______。
(2)振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量,同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸提高_(dá)______的利用率。
(3)為探究石油的降解機(jī)制,將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心,取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是_______。29、我國利用不同微生物的發(fā)酵作用來制作果酒;果醋、腐乳和酸奶等食品的歷史悠久;一般稱作傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。根據(jù)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識(shí)?;卮鹨韵聠栴}:
(1)制作高粱酒和蘋果醋要用到的微生物分別是____________________________。
(2)果酒和果醋的制作:
①傳統(tǒng)發(fā)酵時(shí)發(fā)酵液未經(jīng)過嚴(yán)格的滅菌處理;雜菌卻不能正常生長,這是由于果酒發(fā)酵的。
____條件抑制了雜菌的生長。與果酒發(fā)酵不同,果醋發(fā)酵需要在_____________條件下進(jìn)行。
②溫度較高時(shí)果酒發(fā)酵時(shí)間可縮短,原因是______________________________________。
③喝剩的葡萄酒放置一段時(shí)間后變酸的原因是____________________________________。
(3)腐乳和乳酸發(fā)酵:
①腐乳的色香味主要是由________________決定的。
②久置變質(zhì)的酸奶不能食用,原因是___________________________________________。泡菜制作過程中常會(huì)產(chǎn)生大量的亞硝酸鹽,亞硝酸鹽_______________(填“直接”或“間接”)致癌。30、紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白;紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成。下圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實(shí)驗(yàn)裝置,請(qǐng)回答下列問題:
(1)血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分,其在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有_________功能。我們選用動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)加入檸檬酸鈉的目的是____________。
(2)甲裝置中,B是血紅蛋白溶液,則A是______________________;該操作目的是去除樣品中____________。乙裝置中,操作壓一定,保證C溶液的流速__________(快或慢或一定)。
(3)用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫____________________________。
(4)最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行______________________。
(5)還有同學(xué)將大腸桿菌破碎并提取得到大腸桿菌蛋白質(zhì),一同學(xué)利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離,在電泳過程中,影響蛋白質(zhì)遷移速度的因素包括蛋白質(zhì)分子的分子大小、____________以及分子的形狀等。而另一位同學(xué)則利用乙圖分離,待蛋白質(zhì)接近色柱底端時(shí),用試管連續(xù)收集流出液。先收集到的蛋白質(zhì)與后收集到的蛋白質(zhì)的區(qū)別是先收集到的蛋白質(zhì)_____________。參考答案一、選擇題(共6題,共12分)1、D【分析】【分析】
加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉;目前常用的酶制劑有四類:蛋白酶;脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶,其中,應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。
【詳解】
加酶洗衣粉中含有蛋白酶;蛋白酶會(huì)水解蛋白質(zhì),因此蛋白質(zhì)類織物不能用加酶洗衣粉來洗滌,①正確;溫度會(huì)影響酶的活性,酶在高溫下會(huì)失活,因此加酶洗衣粉使用的水溫一般在50℃以下,②正確;酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)存放時(shí)間過久會(huì)被微生物分解,因此加酶洗衣粉不宜存放太久,加酶洗衣粉有保質(zhì)期,③正確;堿性蛋白酶洗衣粉會(huì)分解人體皮膚表面蛋白質(zhì),而使人患有過敏性皮質(zhì);濕疹等,因此,應(yīng)避免與這類洗衣粉長時(shí)間地接觸,④正確。
故選D。
【點(diǎn)睛】
影響加酶洗衣粉活性的條件:溫度、pH和水量。影響加酶洗衣粉的因素:水溫、水質(zhì)、洗衣粉的用量、衣物的質(zhì)地、大小、浸泡和洗滌的時(shí)間。2、A【分析】【分析】
胡蘿卜素為橘黃色結(jié)晶;化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等脂溶性有機(jī)溶劑。常采用萃取法提取胡蘿卜素。提取流程為:胡蘿卜-粉碎-干燥-萃取-過濾-尿素-胡蘿卜素。
【詳解】
從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí);首先將原料進(jìn)行粉碎;干燥,其目的是脫水,使原料充分與有機(jī)溶劑接觸,增大溶解度。
故選A。3、D【分析】【分析】
稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后;均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。
【詳解】
A;高壓蒸汽滅菌器滅菌所需時(shí)間到后;切斷電源或關(guān)閉煤氣,讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,當(dāng)壓力表的壓力降至0時(shí),打開排氣閥,旋松螺栓,打開蓋子,取出滅菌物品,A錯(cuò)誤;
B;倒平板時(shí);用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~20mL)倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋,不能打開皿蓋,B錯(cuò)誤;
C;涂布接種時(shí);涂布器應(yīng)在酒精燈火焰引燃滅菌,冷卻后再使用,以防止高溫殺死菌種,C錯(cuò)誤;
D;接種后的培養(yǎng)皿是倒置的;所以用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí),應(yīng)標(biāo)記在皿底上,D正確。
故選D。4、C【分析】1;參與果酒制作的微生物是酵母菌;其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理:
有氧條件下;酵母菌有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳和水分,并釋放大量的能量,無氧條件下,酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳和酒精,釋放少量的能量。
2;參與果醋制作的微生物是醋酸菌;其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理:
當(dāng)氧氣;糖源都充足時(shí);醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。
當(dāng)缺少糖源時(shí);醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>
【詳解】
A;發(fā)酵過程中有關(guān)反應(yīng)主要發(fā)生在細(xì)胞內(nèi);A錯(cuò)誤;
B;發(fā)酵過程中為防止被污染;需要進(jìn)行消毒處理,但不需要嚴(yán)格滅菌,B錯(cuò)誤;
C;將葡萄汁制成果酒和果醋后;有機(jī)物總量減少(細(xì)胞呼吸不斷消耗有機(jī)物)而種類增加,C正確;
D;醋酸菌是好氧菌;制成果酒后制作果醋,需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中,同時(shí)還需要不斷通入無菌空氣,D錯(cuò)誤。
故選C。5、D【分析】【分析】
參與果酒制作的微生物是酵母菌;其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理:
(1)在有氧條件下,反應(yīng)式如下:
(2)在無氧條件下,反應(yīng)式如下:
【詳解】
A;酒精對(duì)酵母菌有毒害作用;A正確;
B;酵母菌無氧呼吸時(shí)需要消耗葡萄糖等營養(yǎng)物質(zhì);使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)減少,很難維持大量酵母菌的代謝需要,B正確;
C;酒精發(fā)酵過程中會(huì)產(chǎn)生酒精和二氧化碳;導(dǎo)致pH值發(fā)生改變,不適宜酵母菌生存,C正確;
D;酒精發(fā)酵時(shí)進(jìn)行的是無氧呼吸;不需要氧氣,D錯(cuò)誤。
故選D。
【點(diǎn)睛】6、A【分析】【分析】
分析題圖:甲、乙、丙帶電的性質(zhì)相同(負(fù)電),丁、戊帶電的性質(zhì)相同(正電);甲、乙、丙、丁、戊的分子量大小依次是甲<戊<乙<丁<丙。
【詳解】
A、分子量大小是乙<丙;若分子乙保留在袋內(nèi),則丙一定保留在袋內(nèi),A正確;
B;由于甲蛋白質(zhì)分子量最??;最容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程最長,移動(dòng)的速度最慢,B錯(cuò)誤;
C;分子量甲小于戊;離心時(shí)分子戊先沉淀下來,故分子戊存在于沉淀中,分子甲不一定存在于沉淀中,C錯(cuò)誤;
D;SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳電泳的遷移速率完全決定于分子大小,甲和丙之間分子量差別最大,因此二者之間的電泳帶相距最遠(yuǎn),D錯(cuò)誤。
故選A。二、多選題(共8題,共16分)7、B:C:D【分析】【分析】
制作固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)步驟:1、酵母細(xì)胞的活化;2、配制0.05mol/L的CaCl2溶液;3;配制海藻酸鈉溶液(該實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵步驟);4、海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合;5、固定化酵母細(xì)胞。
【詳解】
A;溶化的海藻酸鈉應(yīng)冷卻至室溫后與活化的酵母菌混合;A錯(cuò)誤;
B、海藻酸鈉與酵母菌混合液應(yīng)滴入CaCl2溶液中;以制備凝膠珠,B正確;
C;攪拌可使酵母菌與培養(yǎng)液充分接觸;有利于發(fā)酵的順利進(jìn)行,C正確;
D;凝膠珠用蒸餾水沖洗2~3次后;再轉(zhuǎn)移到發(fā)酵裝置中,D正確。
故選BCD。8、B:D【分析】【分析】
果酒制作的原理:先通氣;酵母菌進(jìn)行有氧呼吸而大量繁殖,后密封,酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精。果醋制作的原理:醋酸菌是嗜溫菌,也是嗜氧菌,因此其進(jìn)行果醋發(fā)酵時(shí)需要不間斷的供氧。
【詳解】
A;果酒發(fā)酵的最適溫度是18~25℃;果醋發(fā)酵的最適溫度是30~35℃,錯(cuò)誤;
B;果酒發(fā)酵需要無氧環(huán)境;該裝置鵝頸中的水可以隔絕空氣,創(chuàng)造無氧環(huán)境,果酒發(fā)酵中產(chǎn)生的氣體是二氧化碳,該裝置便于二氧化碳的排除,正確。
C;醋酸菌是嗜氧菌;即使去除彎管中的水,該裝置也不能滿足果醋發(fā)酵時(shí)底層發(fā)酵液中大量醋酸菌呼吸所需的氧氣,錯(cuò)誤;
D;果酒發(fā)酵過程中;葡萄糖分解變成酒精,因此發(fā)酵液密度會(huì)逐漸減小;同時(shí)pH會(huì)逐漸降低,呈酸性,正確。
故選BD。9、A:C:D【分析】1、若要長期保存菌種,菌液中常需要加入一定量的甘油,且要放置在-20℃的冷凍箱中,若要短期保存菌種,可將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,菌落長成后,將試管放置在4℃的冰箱中保藏。
2;液體選擇培養(yǎng)基通常可用于選擇培養(yǎng);增加目標(biāo)菌種的濃度。將錐形瓶放在搖床上振蕩培養(yǎng)能提高溶氧量和養(yǎng)料的利用率。
【詳解】
A;尿素分解菌可利用培養(yǎng)基中的尿素是因?yàn)槟芎铣呻迕?;而其他微生物不能合成脲酶故不能分解尿素,A正確;
B;短期保存的菌種;可將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,菌落長成后,將試管放置在4℃的冰箱中保藏,B錯(cuò)誤;
C;液體選擇培養(yǎng)基通??捎糜谶x擇培養(yǎng);增加目標(biāo)菌種的濃度,C正確;
D;將三角瓶放在搖床上振蕩培養(yǎng)既能提高溶氧量;提高有氧呼吸的速率,又能提高養(yǎng)料的利用率,D正確。
故選ACD。10、A:B:C:D【分析】【分析】
微生物接種的方法很多;最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。若要對(duì)微生物進(jìn)行取樣計(jì)數(shù),接種方法只能是稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。
【詳解】
A;微生物的生長需要碳源、氮源、無機(jī)鹽等物質(zhì);只是有些固氮菌由于能利用氮?dú)庾鳛榈?,不需要在培養(yǎng)基中添加氮源,A錯(cuò)誤;
B;平板劃線法不能用于計(jì)數(shù);B錯(cuò)誤;
C、將1mL菌液稀釋100倍,在3個(gè)平板上分別接0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為42、39和36。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為(42+39+36)÷3÷0.1×100×1000=3.9×107;C錯(cuò)誤;
D;根據(jù)圖示可知;兩菌種的接種量比為1:1時(shí)比兩菌種的接種量比為2:1時(shí)效果好,但由于該實(shí)驗(yàn)設(shè)置的兩菌種的接種量比例的組數(shù)過少,所以無法判斷處理該類廚余垃圾廢液的兩菌種的最佳接種量比,D錯(cuò)誤。
故選ABCD。11、A:C:D【分析】【分析】
加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉;目前常用的酶制劑有四類:蛋白酶;脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶,其中,應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污跡從衣物上脫落。脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶也能分別將大分子的脂肪、淀粉和纖維素水解為小分子物質(zhì),使洗衣粉具有更好的去污能力。
【詳解】
A;熱水浸泡會(huì)使酶失活;從而降低加酶洗衣粉的洗滌效果,A錯(cuò)誤;
B;復(fù)合加酶洗衣粉中有多種酶;因酶有專一性,所以污漬成分復(fù)雜時(shí)選用復(fù)合加酶洗衣粉較好,B正確;
C;特定材料包裹酶是避免酶在不良環(huán)境中失活;不屬于固定化酶,C錯(cuò)誤;
D;通過化學(xué)結(jié)合法等方法固定酶會(huì)影響其催化活性;D錯(cuò)誤。
故選ACD。
【點(diǎn)睛】12、A:B:C【分析】【分析】
在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖;再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵;酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃~30℃,pH最好是弱酸性。
【詳解】
A;桑葚獨(dú)有的花青素等能顯著增強(qiáng)復(fù)合果酒的功效;所以在生產(chǎn)復(fù)合果酒的過程中,要防止桑葚天然色素被氧化,增強(qiáng)功效,A正確;
B;酵母菌在有氧條件下進(jìn)行快速的增殖;所以果酒發(fā)酵初期通入氧氣能促進(jìn)酵母菌繁殖,有利于加快果酒發(fā)酵,B正確;
C;為了防止雜菌污染;復(fù)合果酒的制備過程中對(duì)發(fā)酵設(shè)備要進(jìn)行滅菌處理,C正確;
D;變酸的果酒表面會(huì)形成一層菌膜;這層菌膜是由醋酸菌形成的,D錯(cuò)誤。
故選ABC。13、A:B:D【分析】【詳解】
果酒制作是厭氧發(fā)酵,該裝置水可阻止空氣進(jìn)入;果酒發(fā)酵產(chǎn)生的氣體是CO2,該裝置便于CO2的排出;該裝置彎管為了排出發(fā)酵產(chǎn)生的氣體,不能保證果醋發(fā)酵需要的O2;去除彎管中的水后;與巴斯德的鵝頸瓶作用相似,排出氣體,避免雜菌污染。
【考點(diǎn)定位】本題考查果酒、果醋的制作,意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系,形成知識(shí)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。14、C:D【分析】【分析】
腐乳是用豆腐發(fā)酵制成;多種微生物參與發(fā)酵,其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌具發(fā)達(dá)的白色菌絲。毛霉等微生物產(chǎn)生的以蛋白酶為主各種酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。
【詳解】
A;加鹽主要是為了抑制微生物生長;防止豆腐腐敗變質(zhì),A錯(cuò)誤;
B;勤向腐乳坯表面噴水;會(huì)導(dǎo)致豆腐含水量過高,不利于毛霉菌絲的生長,B錯(cuò)誤;
C;加鹽腌制時(shí);為防止污染,將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地?cái)[放在瓶中,同時(shí)逐層加鹽,隨著層數(shù)的加高而增高鹽量,接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些,C正確;
D;實(shí)驗(yàn)室制作的腐乳可能滅菌不徹底;不宜直接食用,D正確。
故選CD。三、填空題(共8題,共16分)15、略
【分析】【詳解】
樣品處理及粗分離:
血液由血漿和血細(xì)胞組成,其中紅細(xì)胞最多。紅細(xì)胞的組成中,除水分以外,約90%是血紅蛋白。血紅蛋白由4條肽鏈組成,包括兩條α-肽鏈和兩條β-肽鏈。其中每條肽鏈環(huán)繞一個(gè)亞鐵血紅基團(tuán),此基團(tuán)可攜帶一分子氧或一分子二氧化碳。血紅蛋白因含有血紅素而呈現(xiàn)紅色?!窘馕觥垦獫{血細(xì)胞血紅蛋白4α-肽鏈β-肽鏈亞鐵血紅基團(tuán)二氧化碳血紅素紅16、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】載體反應(yīng)物產(chǎn)物17、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】橘黃色有機(jī)溶劑β-胡蘿卜素植物巖藻微生物18、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】延長19、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】青霉、酵母、曲霉、毛霉毛霉20、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】10℃恒溫相同變量pH溫度對(duì)照果汁的體積大小21、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】讓豆腐長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制22、略
【分析】【詳解】
紅細(xì)胞的洗滌。
洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜質(zhì)蛋白,洗滌次數(shù)、離心速度與離心時(shí)間十分重要。洗滌次數(shù)過少,無法除去血漿蛋白;離心速度過高和時(shí)間過長會(huì)使白細(xì)胞等一同沉淀,達(dá)不到分離的效果,影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度?!窘馕觥垦獫{蛋白白細(xì)胞四、實(shí)驗(yàn)題(共2題,共14分)23、略
【分析】【分析】
1;尿素分解菌能分解尿素是靠合成的脲酶;
2;加酶洗衣粉是指加入了酶制劑的洗衣粉;可以幫助水解污漬中的蛋白質(zhì)和油脂;
3;制作果汁過程中加入果膠酶可以分解植物細(xì)胞間的果膠;使果汁變得澄清。
【詳解】
(1)尿素水解:尿素在水的作用下分解成氨和二氧化碳的過程。尿素分解菌含有脲酶;脲酶能催化尿素的分解,將尿素中的N轉(zhuǎn)化成植物可利用的N形式;
(2)加入堿性蛋白酶和堿性脂肪酶的洗衣粉可以催化蛋白質(zhì)和脂肪類的污漬水解;效果最顯著;洗衣粉中的酶制劑往往利用特殊化學(xué)物質(zhì)層層包裹,不是固定化酶技術(shù),固定化技術(shù)常有包埋法;吸附法、交聯(lián)法、共價(jià)偶聯(lián)法;
(3)果膠酶能將不溶于水的果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸;使果汁變得更澄清;以藍(lán)莓汁的體積作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的檢測(cè)指標(biāo),那么酶的最適用量是指果汁體積達(dá)到最大值時(shí)所對(duì)應(yīng)的酶;用透析法除去其中的小分子雜質(zhì),而讓蛋白質(zhì)等保留袋中;分離蛋白質(zhì)常用的方法是凝膠色譜法,原理是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的,所以需要混入的蛋白質(zhì)與果膠酶的分子量相差較大才行。
【點(diǎn)睛】
本題綜合考查尿素分解菌、加酶洗衣粉、果膠酶等實(shí)驗(yàn)操作及原理?!窘馕觥?1)控制脲酶合成的基因。
(2)堿性蛋白酶和堿性脂肪酶否。
(3)果膠酶能將不溶于水的果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸果汁體積達(dá)到最大值時(shí)所對(duì)應(yīng)的酶透析
混入的蛋白質(zhì)與果膠酶的分子量相差較大24、略
【分析】【分析】
(1)葡萄酒的自然發(fā)酵過程中;菌種主要來自于葡萄皮上的野生酵母菌.利用酵母菌發(fā)酵制作葡萄酒要控制的溫度為18~25℃;
(2)酵母菌為兼性厭氧菌;無氧條件下產(chǎn)生酒精和二氧化碳,醋酸菌為好氧菌,需要在有氧條件下生活產(chǎn)生醋酸。
【詳解】
(1)在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中;起主要作用的是附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。隨著酒精度數(shù)的提高,紅葡萄皮的色素進(jìn)入發(fā)酵液,因此葡萄酒的顏色通常呈現(xiàn)深紅色;
(2)酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖,表達(dá)式為:C6H12O6+6O2+6H2O6CO2+12H2O+能量;產(chǎn)生酒精和CO2;酒精發(fā)酵:C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量。
(3)酒精是酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物;醋酸菌是好氧細(xì)菌,在酒精發(fā)酵旺盛的時(shí)候,處于無氧呼吸狀態(tài),醋酸菌無法正常生命活動(dòng);
(4)亞硝酸鹽測(cè)定溶液需要蒸餾水;提取劑(50g氯化鎘與50g氯化鋇;溶解于1000mL蒸餾水中,用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH至1)、氫氧化鋁乳液和氫氧化鈉等溶液;與標(biāo)準(zhǔn)顯色液進(jìn)行比較,玫瑰紅顏色越深,亞硝酸鹽含量越高。
【點(diǎn)睛】
生物技術(shù)實(shí)踐內(nèi)容考生不能將其完全獨(dú)立出來,果酒、果醋屬于細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,要和細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、代謝緊密相聯(lián)系,始終要以生命觀念為主線?!窘馕觥扛街谄咸哑ど系囊吧徒湍妇l(fā)酵過程中,隨著酒精度數(shù)的提高,紅葡萄皮上的色素也進(jìn)入發(fā)酵液酵母菌在無氧條件下分解有機(jī)物產(chǎn)生酒精不能果酒發(fā)酵旺盛時(shí),是無氧環(huán)境,而醋酸菌是需氧生物,只有在有氧條件下才能將酒精轉(zhuǎn)化成醋酸氫氧化鈉氫氧化鋁標(biāo)準(zhǔn)顯色液玫瑰紅五、非選擇題(共3題,共12分)25、略
【分析】【分析】由題意和實(shí)驗(yàn)流程圖呈現(xiàn)的信息可知;該題考查的是微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng);微生物的分離與計(jì)數(shù)、果酒與果醋的制作等相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)。
【詳解】(1)為了防止雜菌的污染;過濾待測(cè)水樣所用的濾杯;濾膜和濾瓶都需要經(jīng)過滅菌處理,與過濾有關(guān)的操作均需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行。
(2)將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上;這屬于微生物培養(yǎng)中的接種操作。伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基(EMB培養(yǎng)基)是專一鑒別大腸桿菌的培養(yǎng)基,因其含有凝固劑瓊脂,所以從物理狀態(tài)角度分析,EMB培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基。
(3)無菌操作下將10ml待測(cè)水樣加入到90ml無菌水中;將待測(cè)水樣稀釋10倍。依據(jù)大腸桿菌鑒定的原理可知,EMB培養(yǎng)基上的菌落數(shù)平均為31的黑色菌落為大腸桿菌菌落,因此1升待測(cè)水樣中的大腸桿菌數(shù)目=31×(1000÷10)=3100個(gè)。
(4)從變酸的果酒中檢測(cè)到的兩種微生物分別是酵母菌和醋酸菌;酵母菌是由真核細(xì)胞構(gòu)成的真核生物,醋酸菌是由原核細(xì)胞構(gòu)成的原核生物,可見,它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是有無(成形的)細(xì)胞核。單個(gè)藍(lán)藻細(xì)胞的直徑比細(xì)菌細(xì)胞的大,因此若要通過測(cè)量藍(lán)藻的數(shù)目來研究水華,應(yīng)更換上述過濾裝置中的濾膜,選擇孔徑更大的濾膜。藍(lán)藻是自養(yǎng)生物,其培養(yǎng)基配方中必需添加水;無機(jī)鹽、氮源。
【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握濾膜法的原理和步驟、無菌技術(shù)的主要內(nèi)容、果酒和果醋的制作原理、大腸桿菌的鑒定方法等相關(guān)知識(shí)、形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上,結(jié)合問題情境,從題意和題圖中提取有效信息進(jìn)行相關(guān)問題的解答?!窘馕觥繛V杯、濾膜和濾瓶酒精燈火焰接種固體3100有無(成形的)細(xì)胞核更大水、無機(jī)鹽、氮源26、略
【分析】【分析】
1;哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞是由骨髓中的造血干細(xì)胞分裂分化形成;細(xì)胞內(nèi)沒有細(xì)胞核和眾多的細(xì)胞器,所以常常選做為提取細(xì)胞膜的材料;
2;紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白的提取和分離一般分為:洗滌→釋放→分離→透析→純化→純度鑒定。
【詳解】
(1)哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞是由骨髓中的造血干細(xì)胞經(jīng)有絲分裂和分化形成的。
(2)從哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中提取血紅蛋白時(shí);首先要用相當(dāng)于紅細(xì)胞液體體積五倍的生理鹽水洗滌紅細(xì)胞3次,然后用蒸餾水和甲苯使紅細(xì)胞破裂,釋放出血紅蛋白。
(3)得到血紅蛋白混合液之后;可先用離心法進(jìn)行樣品處理及粗分離,再通過凝膠色譜法或凝膠電泳法進(jìn)一步純化。使用凝膠色譜法純化時(shí),先從色譜柱洗脫出來的是大分子蛋白質(zhì)。
(4)用凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)分子量時(shí);消為了除凈電荷對(duì)遷移率的影響,需要在凝膠中加入SDS,使電泳遷移率完全取決于分子的大小。
(5)因哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和眾多的細(xì)胞器,常被用作制備細(xì)胞膜的材料。在制備細(xì)胞膜時(shí);紅細(xì)胞的破裂只能使用蒸餾水而不能使用甲苯,因?yàn)檎麴s水的作用是讓紅細(xì)胞吸水脹破,而甲苯的作用是溶解細(xì)胞膜。
【點(diǎn)睛】
解答本題關(guān)鍵需要熟悉血紅蛋白的提取與分離的步驟與相關(guān)操作方法以及操作原理?!窘馕觥坑薪z分裂生理鹽水3樣品處理及粗分離凝膠色譜法大分子消除凈電荷對(duì)遷移率的影響(或掩蓋不同種蛋白間的電荷差別)沒有細(xì)胞核和眾多的細(xì)胞器蒸餾水甲苯27、略
【分析】【分析】
血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗(yàn)步驟主要有:
(1)樣品處理:①紅細(xì)胞的洗滌;②血紅蛋白的釋放,③分離血紅蛋白。
(2)粗分離:①分離血紅蛋白溶液;②透析。
(3)純化:調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)。
(4)純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。
【詳解】
(1)凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì)的有效方法;分子量大的路徑短;速度快。
(2)蛋白質(zhì)的提取和分離實(shí)驗(yàn)中;首先要用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞,其目的是去除雜蛋白。
(3)洗滌紅細(xì)胞后有利于后續(xù)步驟的分離純化;洗滌干凈的標(biāo)志是離心后的上清液不再呈現(xiàn)黃色;該實(shí)驗(yàn)的目的是分離白細(xì)胞,離心速度過高和時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致白細(xì)胞等一同沉淀,而達(dá)不到分離效果使實(shí)驗(yàn)失敗。
(4)由于氣泡的存在會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序;降低分離效果,所以在裝填凝膠色譜柱時(shí),不得有氣泡產(chǎn)生。在操作中不能發(fā)生洗脫液流干漏出凝膠顆粒的現(xiàn)象,如果發(fā)生則凝膠色譜柱需要重新裝填。
(5)在蛋白質(zhì)分離過程中;如果紅色區(qū)帶均勻一致地移動(dòng),說明色譜柱制作成功。
【點(diǎn)睛】
易錯(cuò)點(diǎn):純化的過程是調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì),不要記混;記住在裝填凝膠色譜柱時(shí),不得有氣泡產(chǎn)生?!窘馕觥肯鄬?duì)分子質(zhì)量的大小去除雜蛋白上清液不再呈現(xiàn)黃色白細(xì)胞等一同沉淀,達(dá)不到分離效果攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果凝膠色譜柱需
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