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文檔簡介

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁,總=sectionpages22頁第=page11頁,總=sectionpages11頁2025年新世紀(jì)版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍:全部知識點;考試時間:120分鐘學(xué)校:______姓名:______班級:______考號:______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題,共14分)1、如圖為胚胎發(fā)育過程中的某一時期示意圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是()

A.圖中①②③依次為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細(xì)胞團B.該時期稱為桑椹胚期,已經(jīng)發(fā)生細(xì)胞分化C.進行胚胎分割時,可以選擇圖示時期的胚胎進行D.胚胎從①中伸展出來的過程叫做孵化2、甲;乙、丙三位同學(xué)將葡萄榨成汁后分別裝入相應(yīng)的發(fā)酵瓶中制備葡萄酒;在適宜的條件下進行發(fā)酵,發(fā)酵過程中,每隔一段時間均排氣一次,如圖所示。下列說法錯誤的是()

A.甲同學(xué)的錯誤是未夾住發(fā)酵瓶的充氣管,丙同學(xué)的錯誤是瓶中發(fā)酵液過多B.試驗中,甲同學(xué)發(fā)酵產(chǎn)生的葡萄酒會從充氣管中流出C.若實驗中未及時排氣,乙同學(xué)發(fā)酵瓶瓶塞可能被沖開D.一段時間后,只有乙和丙能夠成功得到果酒3、下列有關(guān)微生物的培養(yǎng)說法正確的是()A.在同一培養(yǎng)基中生長的微生物菌落所表現(xiàn)的形態(tài)、大小、隆起程度和顏色均相同B.在微生物培養(yǎng)的接種過程中超凈工作臺需要在紫外燈照射下進行,以防止雜菌污染C.小鼠肺炎病毒(PVM)的培養(yǎng)過程需要進行滅菌操作D.在統(tǒng)計菌落數(shù)目的時候需要將某一適宜的稀釋度下的各平行組和對照組菌落數(shù)目相加取其平均值4、以下為植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖,其中甲和乙分別表示兩種二倍體植物細(xì)胞,所含有的染色體組分別是AA和BB。據(jù)圖分析,下列敘述正確的是()

A.經(jīng)過程①獲得的a、b稱為原生質(zhì)層,②過程利用了細(xì)胞膜的流動性B.c細(xì)胞只有AABB這一種類型,再生出細(xì)胞壁標(biāo)志著原生質(zhì)體融合完成C.過程③和④分別是脫分化和再分化,脫分化與再分化過程具有基因選擇性表達(dá)D.獲得的植物d,因為在減數(shù)分裂時同源染色體能正常配對,所以理論上是可育的5、2018年《細(xì)胞》期刊報道,中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對非人靈長類動物進行克隆,獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”,下列相關(guān)敘述正確的是()A.“中中”和“華華”的獲得涉及動物體細(xì)胞核移植過程B.通過此方法獲得的克隆猴,與核供體相比,其體細(xì)胞的染色體數(shù)目加倍C.胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動物的難度大于體細(xì)胞核移植,因為與成體細(xì)胞相比,其全能性更加難以表現(xiàn)出來D.此過程中若分別以雌性和雄性個體的體細(xì)胞作為核供體,通常得到的兩個克隆動物體細(xì)胞的性染色體組合相同6、現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)在醫(yī)藥、動物繁殖、植物育種、環(huán)境保護等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。下列敘述錯誤的是()A.利用雜交瘤技術(shù)可以制備大量單克隆抗體,為腫瘤治療提供藥物B.利用體外受精等技術(shù)可以實現(xiàn)優(yōu)質(zhì)奶牛種群的快速擴大,提高經(jīng)濟效益C.利用基因工程技術(shù)可以開發(fā)生物可降解的新型塑料,維護生態(tài)環(huán)境D.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的“番茄—馬鈴薯”具有兩種植物的全部優(yōu)良性狀7、科學(xué)家將β干擾素基因進行定點突變導(dǎo)入大腸桿菌表達(dá),使干擾素第17位的半胱氨酸改變成絲氨酸,結(jié)果大大提高β-干擾素的抗病性活性,并且提高了儲存穩(wěn)定性,該生物技術(shù)為:()A.基因工程B.蛋白質(zhì)工程C.胚胎工程D.細(xì)胞工程評卷人得分二、多選題(共8題,共16分)8、下列關(guān)于人早期胚胎發(fā)育過程中桑椹胚和囊胚的敘述中,正確的是()A.囊胚與桑椹胚相比,每個細(xì)胞內(nèi)DNA總量增加B.囊胚期出現(xiàn)了細(xì)胞分化,但遺傳物質(zhì)未發(fā)生改變C.囊胚期內(nèi)細(xì)胞團和滋養(yǎng)層細(xì)胞差異不是復(fù)制水平上的差異,而是轉(zhuǎn)錄水平上的差異引起D.桑椹胚的形成在卵巢,囊胚的形成在輸卵管9、下列關(guān)于基因工程中的基本工具的說法中,正確的是()A.基因工程中的工具酶有限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶B.DNA連接酶可將任意的DNA片段通過形成磷酸二酯鍵而連接起來C.質(zhì)粒上必須有標(biāo)記基因才可作為載體D.限制性內(nèi)切核酸酶一般不僅僅能切割外源DNA,也能切割自身的DNA分子10、下列有關(guān)哺乳動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述,錯誤的是()A.克隆羊、試管羊、轉(zhuǎn)基因羊的繁殖方式都是有性生殖B.胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)可維持只增殖不分化狀態(tài)C.受精時防止多精入卵的兩屏障是頂體反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)D.滋養(yǎng)層細(xì)胞在囊胚期發(fā)育成胎膜和胎盤并可用于性別鑒定11、下列關(guān)于基因工程中幾種工具的敘述,正確的是()A.限制酶可水解DNA上相鄰核苷酸間的磷酸二酯鍵B.DNA連接酶可將末端堿基互補的兩個DNA片段連接起來C.DNA聚合酶能夠從核苷酸片段末端延伸DNA或RNAD.作為載體的質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有對重組DNA進行鑒定和選擇的標(biāo)記基因12、在單克隆抗體的制備過程中,雜交瘤細(xì)胞(即瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的融合細(xì)胞)的篩選是必不可少的步驟。篩選雜交瘤細(xì)胞所用的HAT培養(yǎng)基成分和細(xì)胞增殖時所需的核苷酸的兩條形成途徑(D途徑,S途徑)如下表所示。已知融合所用的瘤細(xì)胞是經(jīng)毒性培養(yǎng)基選出的中間合成途徑缺失株,即只有起始合成途徑,效應(yīng)B細(xì)胞有兩條核苷酸合成途徑。若僅考慮細(xì)胞的兩兩融合,下列說法錯誤的是()。HAT培養(yǎng)基成分水,糖類、無機鹽、次黃嘌呤、氨基糖呤(葉酸拮抗劑),胸腺嘧啶脫氧核苷等起始合成途徑(D途徑)由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸,葉酸作為重要的輔酶參與這一過程中間合成途徑(S建徑)利用次黃嘌呤一鳥嘌呤磷酸核苷轉(zhuǎn)移酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶(TK)催化次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相應(yīng)的核苷酸

A.HAT培養(yǎng)基中瘤細(xì)胞可利用氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸B.雜交瘤細(xì)胞能被篩選的原因為既具備增殖能力,又可進行S途徑C.篩選出來的雜交瘤細(xì)胞分泌的均為同一種特異性抗體D.在放入HAT培養(yǎng)基之前的融合細(xì)胞的培養(yǎng)液中,有D途徑的細(xì)胞有3種13、甲品種青花菜具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀,但屬于胞質(zhì)雄性不育品種。通過體細(xì)胞雜交,成功將乙品種細(xì)胞質(zhì)中的可育基因引入甲品種中。下列相關(guān)敘述錯誤的是()

A.獲得的融合原生質(zhì)體需放在無菌水中以防雜菌污染B.流程中A處理可使用纖維素酶和果膠酶,B處理可使用聚乙二醇C.培養(yǎng)形成的愈傷組織可繼續(xù)在原培養(yǎng)基中分化形成植株D.雜種植株含有控制甲品種青花菜優(yōu)良性狀的基因,并能通過父本進行傳遞14、欲探究1g土壤中有多少能分解尿素的細(xì)菌,需要用科學(xué)的方法測定微生物數(shù)量。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.利用以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基,可從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌B.平板劃線法可以分離得到單菌落,也可用來測定樣品中的活菌數(shù)C.樣品的稀釋度直接影響平板上的菌落數(shù)目,因此稀釋度越大越好D.利用顯微鏡進行直接計數(shù),可快速直觀地測定樣品中的活菌數(shù)15、下列有關(guān)菊花組織培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.實驗中使用的培養(yǎng)基、器械和外植體都要滅菌B.外植體用酒精消毒30s后,再用流水充分沖洗C.誘導(dǎo)愈傷組織期間不需要光照,后續(xù)培養(yǎng)需要適當(dāng)?shù)墓庹誅.一般先誘導(dǎo)根的形成,再轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基上評卷人得分三、填空題(共9題,共18分)16、回答下列問題。

(1)目前人類對基因________及基因間的________________尚缺乏足夠的認(rèn)識,要想通過基因檢測達(dá)到預(yù)防疾病的目的是困難的;況且人類的____________病,既與基因有關(guān),又與環(huán)境和________________有關(guān)。

(2)生物武器種類包括__________、________、__________,以及經(jīng)過___________的致病菌等。

(3)1998年6月27日,中美兩國元首在關(guān)于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中,重申了在任何情況下_____________、_____________、______________生物武器,并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴散。17、1.基因檢測引發(fā)的倫理問題。

(1)基因身份證:基因身份證指把個人的_____和_____檢測出來;記錄在磁卡上,而做成的個人基因身份證。

(2)基因檢測引發(fā)的爭論①_____②_____③_____④_____⑤_____⑥_____

。項目。

反對。

支持。

技術(shù)方面。

目前人類對①及基因間的相互作用尚缺乏足夠的認(rèn)識;通過基因檢測達(dá)到②的目的是很困難的;基因檢測結(jié)果會給受檢者帶來巨大的③。

通過基因檢測可以對遺傳性疾病及早采取④;適時進行治療,達(dá)到挽救患者生命的目的。

道德方面。

基因資訊的泄露造成⑤;如個人婚姻困難;人際關(guān)系疏遠(yuǎn),更明顯的是造成一支遺傳性失業(yè)大軍。

對于基因歧視現(xiàn)象;可以通過正確的科學(xué)知識傳播;⑥教育和立法得以解決。

2.試管嬰兒與設(shè)計試管嬰兒的比較①_____②_____③_____④_____

。項目。

設(shè)計試管嬰兒。

試管嬰兒。

技術(shù)手段。

胚胎移植前①(填“需要”或“不需要”)進行遺傳學(xué)診斷這一環(huán)節(jié)。

②(填“需要”或‘不需要”)進行遺傳學(xué)診斷。

實踐應(yīng)用。

用于白血??;貧血病等遺傳性疾病的預(yù)測。

解決不孕不育問題。

聯(lián)系。

二者都是③受精;體外進行早期胚胎發(fā)育,再進行胚胎移植,從生殖方式上都為④

18、轉(zhuǎn)化的概念:是______進入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持______的過程。19、獲取目的基因的方法______、______、______20、目的基因是指:______21、純化DNA,去除雜質(zhì)有________________個方案。22、對于DNA的粗提取而言,就是利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在__________方面的差異,提取DNA,去除雜質(zhì)。(人教P54)23、科學(xué)家采用定點誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì),發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基,并形成一個二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會有什么變化?這項技術(shù)的要點是什么?_________24、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似,只是前者熱穩(wěn)定性較差,進入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。評卷人得分四、判斷題(共4題,共12分)25、轉(zhuǎn)基因生物可能會破壞生態(tài)平衡(______)A.正確B.錯誤26、基因工程技術(shù)已被廣泛用于改良動植物品種、提高作物和畜產(chǎn)品的產(chǎn)量等方面。(選擇性必修3P87)()A.正確B.錯誤27、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上,延伸出來的第二代基因工程。(選擇性必修3P93)()A.正確B.錯誤28、生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)的區(qū)別。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、綜合題(共4題,共8分)29、EPO是促紅細(xì)胞生成素的英文簡稱;是一種激素樣物質(zhì),可促進體內(nèi)新紅細(xì)胞生成。人類已可通過基因工程合成EPO基因,并采用中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)來獲取產(chǎn)物,其過程如下。請回答下列問題:

(1)從人體組織中提取EPO的mRNA,通過逆轉(zhuǎn)錄得到_________,再通過__________獲得大量EPO基因。

(2)供體母鼠通常情況下每次排卵8~12枚,為使其超數(shù)排卵,需注射_________激素以排出更多的卵子,培養(yǎng)到___________時期與獲能的精子相遇時,精子首先發(fā)生__________反應(yīng);穿越放射冠和透明帶,完成體外受精。

(3)①過程構(gòu)成了基因表達(dá)載體,內(nèi)部包括不可缺少的組成部分,其中________能驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。

(4)采用_____技術(shù),將重組表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠受精卵中,將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)液成分除一些無機鹽和有機鹽類外,還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分,以及_______等物質(zhì)。

(5)當(dāng)胚胎發(fā)育至________時期,向受體移植,為獲得更多個轉(zhuǎn)基因胚胎,要將___________均等切割,否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育。此外,移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進行_________。

(6)若想檢驗轉(zhuǎn)基因倉鼠是否成功表達(dá)EPO,可以采用___________技術(shù)對血液來進行檢測。30、重疊延伸PCR技術(shù)是采用具有互補末端的引物;使PCR產(chǎn)物形成了重疊鏈,從而在隨后的擴增反應(yīng)中通過重疊鏈的延伸,將不同來源的擴增片段重疊拼接起來的技術(shù),可通過定點誘變在體外改造DNA分子,并將改造后的目的基因?qū)胭|(zhì)粒構(gòu)建目的基因表達(dá)載體。

(1)上圖所示的重疊延伸PCR技術(shù)中,PCR1的引物是_________。PCR4可獲得大量定點誘變目的基因,此時的引物為__________。PCR3時模板DNA不能選擇DNA分子③的原因是___________。

(2)為使重疊延伸PCR技術(shù)改造后的目的基因(該基因序列不含圖中限制酶的識別序列)能與載體正確連接,PCR4時,應(yīng)在基因上、下游引物的_________端分別添加限制酶_________的酶切位點。

(3)將目的基因、質(zhì)粒及大腸桿菌混合,溫育一段時間后涂在含四環(huán)素的平板上培養(yǎng),一段時間后平板上長出菌落。這些菌落的菌體內(nèi)_________(填“一定不一定”)含有目的基因,理由是_________。31、研究發(fā)現(xiàn)部分晚期胃癌患者體內(nèi)存在人表皮生長因子受體2(HER2)的過量表達(dá)因此胃癌治療可用HER2作為免疫治療靶點。T—Dxd是由人源化抗HER2抗體參與構(gòu)成的一種抗體——藥物偶聯(lián)物;可將細(xì)胞毒性藥物選擇性地送至胃癌細(xì)胞,達(dá)到治療癌癥的效果。為獲得T—Dxd,科研人員先制備鼠源抗HER2的單克隆抗體,制備過程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:

(1)上述實驗前需給小鼠注射特定的抗原,這些抗原應(yīng)取自患者的______細(xì)胞,并定期多次注射,該處理的目的是______。

(2)寫出以小鼠的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實驗步驟:______。

(3)已知合成核苷酸有兩個途徑,物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑(如下圖)。正常細(xì)胞內(nèi)含有補救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶,制備單克隆抗體選用的骨髓瘤細(xì)胞缺乏轉(zhuǎn)化酶。篩選1的培養(yǎng)基是加入H、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”,篩選的依據(jù)是______。圖中篩選2含多次篩選,篩選所依據(jù)的基本原理是______。

(4)鼠源抗體易引發(fā)人體免疫排斥,科研人員擬通過改造抗體結(jié)構(gòu)的FR區(qū),獲得鼠源區(qū)域占比更小的人源化抗體。請對下列操作步驟進行正確排序______

A.推測對應(yīng)的核糖核苷酸序列。

B.設(shè)計替換FR區(qū)氨基酸序列。

C.從細(xì)胞培養(yǎng)液中分離抗體。

D.合成新的基因或改造基因。

E.導(dǎo)入受體細(xì)胞。

(5)科學(xué)家從某些無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出了無限增殖調(diào)控基因(prG),該基因能激發(fā)動物細(xì)胞分裂,這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。除本題描述的制備單克隆抗體技術(shù)外,請再簡要寫出一種制備單克隆抗體的思路______。32、干擾素是一種具有干擾病毒復(fù)制作用的糖蛋白;廣泛用于病毒感染;癌癥等疾病的治療。某科研小組欲利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)獲得高品質(zhì)干擾素,并進行了一系列研究。圖1是人干擾素基因及其上下游限制酶切割位點的示意圖,圖2是用于構(gòu)建基因表達(dá)載體的質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖,圖3是獲得轉(zhuǎn)基因動物的過程。請據(jù)圖分析回答相關(guān)問題。

(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體需要用到的酶有限制酶和___________。為了正確構(gòu)建基因表達(dá)載體,圖1和圖2均需用__________切割。將構(gòu)建完成的基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體后,在加入了__________的培養(yǎng)液中培養(yǎng);以篩選成功導(dǎo)入的細(xì)胞。

(2)干擾素在體外保存相當(dāng)困難,如果將干擾素分子上的一個半胱氨酸變成絲氨酸,其可以在-70℃下保存半年,欲達(dá)到這一目的,可以采用的技術(shù)是__________,該技術(shù)的基本思路與中心法則___________(填“相同”或“相反”)。

(3)圖3主要用到的技術(shù)手段有____________。獲得的精子和卵子在受精前分別要進行的處理是___________。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是__________。

(4)如果要將轉(zhuǎn)基因動物作為乳腺生物反應(yīng)器,需要取___________進行性別鑒定。參考答案一、選擇題(共7題,共14分)1、B【分析】【分析】

分析題圖:圖示為胚胎發(fā)育過程某一時期示意圖;該時期為囊胚期,其中①為透明帶;②為滋養(yǎng)層,將來發(fā)育成胎盤或胎膜;③為內(nèi)細(xì)胞團,將來發(fā)育成胎兒的各種組織。

【詳解】

A;由以上分析可知;圖中①②③依次為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細(xì)胞團,A正確;

B;據(jù)圖分析;圖示時期為囊胚時期,該時期細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生分化,B錯誤;

C;圖示為囊胚期;進行胚胎分割時,應(yīng)選擇圖示時期的胚胎或之前的桑椹胚進行,C正確;

D;①為透明帶;囊胚的擴大會導(dǎo)致透明帶的破裂,胚胎伸展出來,這一過程叫孵化,D正確。

故選B。2、B【分析】【分析】

1;參與果酒制作的微生物是酵母菌;其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

2;參與果醋制作的微生物是醋酸菌;其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理:醋酸菌是一種好氧性細(xì)菌,只有當(dāng)氧氣充足時,才能進行旺盛的生理活動.實驗表明,醋酸菌對氧氣的含當(dāng)量特別敏感,當(dāng)進行深層發(fā)酵時,即使只是短時間中斷通入氧氣,也會引起醋酸菌死亡.當(dāng)氧氣、糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸;當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

AB;酒精發(fā)酵是無氧呼吸;應(yīng)提供無氧環(huán)境,因此甲同學(xué)的操作有誤,其未夾住發(fā)酵瓶的充氣管,導(dǎo)致發(fā)酵液從充氣管流出,使發(fā)酵液變酸;果酒發(fā)酵時,發(fā)酵罐中的發(fā)酵液不能超過容積的2/3,因此丙同學(xué)的操作有誤,加入的發(fā)酵液過多,淹沒了排氣管在瓶內(nèi)的管口,導(dǎo)致排氣時發(fā)酵液從排氣管中流出,A正確、B錯誤;

C;乙同學(xué)由于未及時排氣;導(dǎo)致發(fā)酵瓶中氣壓過大而沖開瓶塞,C正確;

D;酒精發(fā)酵是無氧呼吸;應(yīng)提供無氧環(huán)境,因此甲同學(xué)的操作有誤,其未夾住發(fā)酵瓶的充氣管,導(dǎo)致發(fā)酵液從充氣管流出,使發(fā)酵液變酸,因此甲同學(xué)實際得到的發(fā)酵產(chǎn)品是葡萄醋;乙同學(xué)操作正確,其進行果酒發(fā)酵得到的是果酒;果丙同學(xué)的操作雖然有誤,但因為其它操作正確,其得到的是葡萄酒,D正確。

故選B。3、C【分析】1;微生物實驗室培養(yǎng)的關(guān)鍵就在于防止雜菌污染;故實驗室培養(yǎng)時需嚴(yán)格無菌操作對培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌、培養(yǎng)皿用干熱滅菌接種環(huán)用灼燒滅菌實驗者的雙手用酒精擦拭消毒處理。

2;制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的操作順序為計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。

3;菌落的特征有菌落的形狀、大小、隆起程度、和顏色等方面;同種微生物菌落特征相對穩(wěn)定。

【詳解】

A;菌落的特征有菌落的形狀、大小、隆起程度、和顏色等方面;同種微生物菌落特征相對穩(wěn)定一般相同,A錯誤;

B;在微生物培養(yǎng)的接種過程中;超凈工作臺不需要在紫外燈照射下進行,B錯誤;

C;小鼠肺炎病毒的培養(yǎng)過程需要進行滅菌操作;C正確;

D;在統(tǒng)計菌落數(shù)目的時候;需要將某以一適宜的稀釋度下的各平行組菌落數(shù)目相加取其平均值,D錯誤。

故選C。

【點睛】4、D【分析】【分析】

題圖分析:圖示為植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖;其中①是去除植物細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體的過程;②是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過程;③是再生形成新的細(xì)胞壁的過程;④是脫分化過程,⑤是再分化過程。

【詳解】

A、經(jīng)①去除植物細(xì)胞壁過程獲得的a、b稱為原生質(zhì)體;A錯誤;

B;若只考慮兩兩融合;則融合的細(xì)胞有三種:AA.BB.AABB,B錯誤;

C;由分析可知;過程④和⑤分別是脫分化和再分化,C錯誤;

D;通過植物體細(xì)胞雜交獲得的植物d;因為細(xì)胞中有同源染色體存在,在減數(shù)分裂時能正常的聯(lián)會、配對,所以可育,D正確。

故選D。5、A【分析】【分析】

動物核移植是將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核;移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體,核移植得到的動物稱克隆動物。

【詳解】

A;“中中”和“華華”是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)和胚胎移植等技術(shù)獲得的克隆猴;A正確;

B;通過此方法獲得的克隆猴;與核供體相比,其體細(xì)胞的染色體數(shù)目不變,B錯誤;

C;胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)的難度小于體細(xì)胞核移植技術(shù);因為胚胎細(xì)胞分化程度相對較低,恢復(fù)其全能性更容易一些,C錯誤;

D;哺乳動物細(xì)胞核移植技術(shù)中;若分別以雌性和雄性個體的體細(xì)胞作為核供體,通常得到的兩個克隆動物體細(xì)胞的常染色體組成相同,性染色體組合不同,D錯誤。

故選A。6、D【分析】【分析】

1.植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞;進而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全能性。

2.生物導(dǎo)彈:單克隆抗體+放射性同位素;化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素;借助單克隆抗體的定位導(dǎo)向作用將藥物定向帶到癌細(xì)胞,在原位殺死癌細(xì)胞.療效高,副作用小,位置準(zhǔn)確。

【詳解】

A;利用雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可生產(chǎn)單克隆抗體;可與放射性同位素或化學(xué)藥物結(jié)合,制成”生物導(dǎo)彈”,定向治療癌癥,A正確;

B;利用體外受精技術(shù)結(jié)合胚胎移植;可實現(xiàn)優(yōu)質(zhì)奶牛種群的快速擴大,B正確;

C;利用基因工程技術(shù)可以開發(fā)生物;如培育超級細(xì)菌,進而可降解的新型塑料,維護生態(tài)環(huán)境,C正確;

D;利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù);實現(xiàn)了兩個物種的全部遺傳物質(zhì)的合并,但是目前還不能讓雜種植株完全按人們的要求表現(xiàn)出雙親所有性狀,D錯誤。

故選D。

【點睛】7、B【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ);通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行基因改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。據(jù)此答題。

【詳解】

基因工程是將符合人們要求的目的基因?qū)脒m宜的生物體內(nèi);使其高效表達(dá),從中提取人們所需的蛋白質(zhì),或表現(xiàn)出某種性狀,蛋白質(zhì)產(chǎn)品仍然是天然存在的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)工程是對控制蛋白質(zhì)合成的基因進行改造,從而實現(xiàn)對相應(yīng)蛋白質(zhì)的改變,所得到的蛋白質(zhì)已不是天然存在的蛋白質(zhì)。題干中的操作涉及的基因顯然不再是原來的基因,其合成的β﹣干擾素也不是天然的β﹣干擾素,而是經(jīng)過人工改造的;符合人類需求的蛋白質(zhì),因而該生物技術(shù)為蛋白質(zhì)工程,ACD錯誤,B正確。

故選B。二、多選題(共8題,共16分)8、B:C【分析】【分析】

胚胎發(fā)育過程:(1)卵裂期:細(xì)胞進行有絲分裂;數(shù)量增加,胚胎總體積不增加;(2)桑椹胚:32個細(xì)胞左右的胚胎;(3)囊胚:細(xì)胞開始分化,其中個體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織;而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤;胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔;(4)原腸胚:內(nèi)細(xì)胞團表層形成外胚層,下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層,由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。

【詳解】

A;由桑椹胚發(fā)育到囊胚進行的是有絲分裂;形成的每個細(xì)胞內(nèi)DNA總量不變,A錯誤;

B;囊胚期細(xì)胞出現(xiàn)了細(xì)胞分化;但細(xì)胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),因此其遺傳物質(zhì)未發(fā)生改變,B正確;

C;囊胚期內(nèi)細(xì)胞團和滋養(yǎng)層細(xì)胞的差異不是DNA復(fù)制水平上的差異;而是轉(zhuǎn)錄水平上的差異,即基因的選擇性表達(dá),C正確;

D;受精卵在輸卵管中形成;后在子宮中發(fā)育,故胚胎發(fā)育的早期不可能在卵巢,D錯誤。

故選BC。9、A:C【分析】【分析】

基因工程的工具:

(1)限制酶:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列;并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

(2)DNA連接酶:連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

(3)運載體:常用的運載體:質(zhì)粒;噬菌體的衍生物、動植物病毒。

【詳解】

A;限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶是基因工程的工具酶;A正確;

B;DNA連接酶只能催化具有互補黏性末端或平末端的DNA片段之間形成磷酸二酯鍵;B錯誤;

C;質(zhì)粒上必須有標(biāo)記基因才可作為載體;便于篩選含有目的基因的受體細(xì)胞,C正確;

D;限制性內(nèi)切核酸酶的作用是不切割自身DNA分子;只切割外源DNA,以保護自身DNA的安全,D錯誤。

故選AC。

【點睛】10、A:C:D【分析】【分析】

哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞;是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞。ES細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性,在形態(tài)上,表現(xiàn)為體積??;細(xì)胞核大、核仁明顯;在功能上,具有發(fā)育的全能性,即可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外,在體外培養(yǎng)條件下,ES可以增殖而不發(fā)生分化。ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上,或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中能夠維持不分化狀態(tài)。

【詳解】

A;試管羊、轉(zhuǎn)基因羊的繁殖方式都是有性生殖;克隆羊的繁殖方式屬于無性生殖,A錯誤;

B;胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)可維持只增殖不分化狀態(tài);B正確;

C;受精時防止多精入卵的兩屏障是透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng);C錯誤;

D;囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞可用于性別鑒定;將來可以發(fā)育成胎膜和胎盤,D錯誤。

故選ACD。11、A:B:D【分析】【分析】

基因工程中的工具:(1)限制酶:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列;并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。(2)DNA連接酶:連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(3)運載體:常用的運載體:質(zhì)粒;噬菌體的衍生物、動植物病毒。

【詳解】

A;限制酶可識別并在特定位置水解DNA上相鄰核苷酸間的磷酸二酯鍵;A正確;

B;DNA連接酶可以連接黏性末端相同;即末端堿基互補的兩個DNA片段之間的磷酸二酯鍵,B正確;

C;DNA聚合酶只能從核苷酸片段末端延伸DNA;而不能延伸RNA,C錯誤;

D;標(biāo)記基因可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來;故作為載體的質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有對重組DNA進行鑒定和選擇的標(biāo)記基因,D正確。

故選ABD。12、A:C:D【分析】【分析】

誘導(dǎo)植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合物理方法包括離心;振動、電激;化學(xué)方法用聚乙二醇,誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合除了以上物理化學(xué)方法可用生物方法,即滅活的病毒。

在HAT培養(yǎng)基中;氨甲蝶呤是葉酸的拮抗劑阻斷DNA合成的主途徑,未融合的瘤細(xì)胞;融合的瘤細(xì)胞--瘤細(xì)胞不能合成次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶,合成DNA的S途徑也不能進行,所以最終死亡。

HAT培養(yǎng)基中篩選出的雜交瘤細(xì)胞;經(jīng)選擇性培養(yǎng)在適宜條件下可無限增值,然后進行單克降抗體檢測,篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

A;HAT培養(yǎng)基中含葉酸拮抗劑;其中不能進行D途徑,A錯誤;

B;雜交瘤細(xì)胞為瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的融合細(xì)胞;既具備增殖能力,又可在HAT培養(yǎng)基中進行S途徑,B正確;

C;最終篩選出來的可能有多種雜交瘤細(xì)胞;分泌的可能不是同一種特異性抗體,還需進行進一步篩選,C錯誤;

D;僅考慮細(xì)胞的兩兩融合;在放入HAT培養(yǎng)基之前的融合細(xì)胞的培養(yǎng)液中,會有融合的B淋巴細(xì)胞—瘤細(xì)胞、融合的B淋巴細(xì)胞—B淋巴細(xì)胞、融合的瘤細(xì)胞—瘤細(xì)胞、未融合的B淋巴細(xì)胞、未融合的瘤細(xì)胞等多種形式的細(xì)胞,這幾種形式的細(xì)胞均可進行D途徑,D錯誤。

故選ACD。13、A:C【分析】【分析】

植物體細(xì)胞雜交技術(shù):就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞;并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括離心;振動、電刺激等.化學(xué)法一般是用聚乙二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑。

【詳解】

A;獲得的融合原生質(zhì)體需放在等滲的無菌溶液中;不能放在無菌水中,否則會吸水漲破,A錯誤;

B;流程中A為去除細(xì)胞壁;可使用纖維素酶和果膠酶分解細(xì)胞壁,B過程為誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,需要用聚乙二醇進行誘導(dǎo),B正確;

C;形成愈傷組織的脫分化培養(yǎng)基和再分化形成植株的再分化培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素和生長素比例不同;C錯誤;

D;甲品種控制多種優(yōu)良性狀的基因;為核基因,雜種植物細(xì)胞核內(nèi)含有控制甲青花菜優(yōu)良性狀的基因,精子中具有一半核基因,能通過父本(精子)進行傳遞,D正確。

故選AC。14、B:C:D【分析】【分析】

選擇培養(yǎng)基是用來將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基。設(shè)計選擇培養(yǎng)基時;主要考慮某些微生物的特殊營養(yǎng)需求或它們對某些化學(xué)物質(zhì)具有的抗性。

【詳解】

A;以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基;可從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌,A正確;

B;平板劃線法能將單個微生物分散到培養(yǎng)基上;從而分離得到單菌落,但是不可以用來測定樣品中的活菌數(shù),稀釋涂布平板法可以計數(shù),B錯誤;

C;樣品的稀釋度太大;會導(dǎo)致微生物數(shù)量太少,一般要求稀釋后平板上的菌落數(shù)在30到300之間比較合適,C錯誤;

D;利用顯微鏡進行直接計數(shù);可快速直觀地測定樣品中的活菌數(shù)和死菌數(shù),D錯誤。

故選BCD。15、B:C【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的過程為:離體的植物組織;器官或細(xì)胞經(jīng)過脫分化(避光)形成愈傷組織;愈傷組織經(jīng)過再分化(需光)過程形成胚狀體,進一步發(fā)育形成植株。

【詳解】

A;無菌技術(shù)包括消毒和滅菌;植物組織培養(yǎng)需要無菌操作,防止雜菌污染,所用器械需滅菌,實驗人員和外植體需消毒操作,A錯誤;

B;菊花莖段在洗滌靈稀釋液浸泡2min;用流水沖洗干凈后,在70%酒精中消毒30s,再用流水沖洗后置于10%次氯酸鈉溶液中消毒10min,然后用無菌水多次沖洗,B正確;

C;誘導(dǎo)培養(yǎng)愈傷組織期間一般不需要照光;在后續(xù)培養(yǎng)過程中,每日需要給予光照,目的是誘導(dǎo)葉綠素的形成,進一步形成葉綠體進行光合作用,C正確;

D;誘導(dǎo)愈傷組織形成試管苗的過程;需要將生長良好的愈份組織先轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基上,長出芽后,再將其轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基上,進一步誘導(dǎo)生根,D錯誤。

故選BC。三、填空題(共9題,共18分)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

(1)人類對基因的結(jié)構(gòu);基因間的相互作用尚缺乏足夠的認(rèn)識;人類的多基因病,既與基因有關(guān),又與環(huán)境和生活習(xí)慣有關(guān)。

(2)生物武器種類包括致病菌;病毒、生化毒劑、以及經(jīng)過基因重組的致病菌。

(3)1998年6月27日,中美兩國元首在關(guān)于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中,重申了在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器?!窘馕觥竣?結(jié)構(gòu)②.相互作用③.多基因④.生活習(xí)慣⑤.致病菌⑥.病毒⑦.生化毒劑⑧.基因重組⑨.不發(fā)展⑩.不生產(chǎn)?.不儲存17、略

【分析】【分析】

1.基因檢測可以把人體內(nèi)的致病基因和易感基因檢測出來;通過采取一定的預(yù)防措施預(yù)防遺傳病的發(fā)生,但同時可能會帶來基因歧視等倫理道德方面的問題。

2.設(shè)計試管嬰兒不同于試管嬰兒;試管嬰兒是為了解決不孕不育的問題,而設(shè)計試管嬰兒是為了解決器官移植方面的醫(yī)療問題。

【詳解】

1.(1)基因身份證是指把每個人的致病基因和易感基因都檢測出來;并記錄在磁卡上,這樣到醫(yī)院看病時,只要帶上這種身份證,醫(yī)生就可以“對證”治療。

(2)反對基因檢測的人認(rèn)為:目前人類對基因結(jié)構(gòu)及基因間相互作用尚缺乏足夠的認(rèn)識;要想通過基因檢測達(dá)到預(yù)防疾病的目的是困難的;況且人類的多基因病,既與基因有關(guān),又與環(huán)境和生活習(xí)慣有關(guān),有某種致病基因的人不見得就會患病。但是,基因檢測結(jié)果本身就已經(jīng)足以給受檢者帶來巨大的心理壓力。個人基因資訊的泄露所造成的基因歧視,勢必造成奇特的失業(yè)大軍,即遺傳性失業(yè)大軍。個人基因資訊被暴露之后,還會造成個人婚姻困難;人際關(guān)系疏遠(yuǎn)等嚴(yán)重后果。支持基因檢測的人認(rèn)為:通過基因檢測可以對遺傳性疾病及早采取預(yù)防措施,適時進行治療,達(dá)到挽救患者生命的目的。對于基因歧視現(xiàn)象,可以通過正確的科學(xué)知識傳播、倫理道德教育和立法得以解決。

2.設(shè)計試管嬰兒需要因而具有特定的性別或遺傳性狀;因此胚胎移植前需要進行遺傳學(xué)診斷這一環(huán)節(jié),而試管嬰兒是為了解決不孕不育問題,不需要考慮嬰兒的性別等問題,不需要進行遺傳學(xué)診斷。二者的共同點是:兩者都是體外受精,并進行體外早期胚胎培養(yǎng),都要經(jīng)過胚胎移植,都是有性生殖。

【點睛】

1.基因與疾病的關(guān)系:具有致病基因的個體不一定患遺傳??;因為生物的性狀還受到環(huán)境因素的影響;沒有致病基因也可能患病,因為基因表達(dá)的蛋白質(zhì),在加工或修飾過程中出現(xiàn)錯誤,也會出現(xiàn)癥狀。

2.明確設(shè)計試管嬰兒和試管嬰兒目的的不同是解答本題的關(guān)鍵之一?!窘馕觥恐虏』蛞赘谢蚧蚪Y(jié)構(gòu)預(yù)防疾病心理壓力預(yù)防措施基因歧視倫理道德需要不需要體外有性生殖18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因穩(wěn)定和表達(dá)19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因文庫人工合成PCR技術(shù)20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】是人們所需要轉(zhuǎn)移或改造的基因21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】322、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】物理和化學(xué)性23、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵,使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定,因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會提高。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù),其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)?!窘馕觥繒岣逿4溶菌酶的耐熱性。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù),該技術(shù)的要點是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。24、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性,可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸,改善其功能,需要從改造控制該酶合成的基因著手,具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)?!窘馕觥坎捎玫鞍踪|(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸,提高該酶的熱穩(wěn)定性,從改造控制該酶合成的基因著手,具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共4題,共12分)25、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物可能會破壞生態(tài)平衡,特別是對生物多樣性的影響。大自然經(jīng)過億萬年的演化,各種生物相對處于一種和諧的生態(tài)平衡狀態(tài)。但是,如果我們用轉(zhuǎn)基因技術(shù)把某種生物人為地變得更加“強悍”,那其他物種就會衰敗以至滅絕,故本題正確。26、A【分析】【詳解】

目前,基因工程技術(shù)已被廣泛用于改良動植物品種、提高作物和畜產(chǎn)品的產(chǎn)量等方面,例如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物;將植物花青素代謝相關(guān)的基因?qū)霠颗;ㄖ?,使其呈現(xiàn)自然界沒有的顏色,提高了觀賞價值;將外源生長素基因?qū)膈庺~體內(nèi),轉(zhuǎn)基因鯉魚生長速率加快等,所以正確。27、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過基因修飾或基因合成來完成的,是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程。故該說法正確。28、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)區(qū)別;最重要的體現(xiàn)在目的不同。

【詳解】

治療性克?。菏侵赴芽寺〕鰜淼慕M織和器官用于治療疾病,這種用于醫(yī)療目的的使用克隆技術(shù)制造胚胎稱為治療性克隆。生殖性克?。禾幱谏车哪康氖褂每寺〖夹g(shù)在實驗室制造人類胚胎。治療性克隆和生殖性克隆最重要的差別是目的不同。五、綜合題(共4題,共8分)29、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟:

1;目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

2;基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟;基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

3;將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同;導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

4;目的基因的檢測與鑒定:(1)分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù);(2)個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。(1)

獲取EPO基因(目的基因);可從人體組織中提取EPO的mRNA,通過逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA,再經(jīng)PCR技術(shù)擴增。

(2)

為使供體母鼠超數(shù)排卵;需注射促性腺激素。采集的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才具備受精能力。當(dāng)卵子與獲能的精子相遇時,精子首先發(fā)生頂體反應(yīng),穿越放射冠和透明帶,完成體外受精。

(3)

基因表達(dá)載體的組成部分中;能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄的是啟動子。

(4)

將重組表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠受精卵中;通常采用顯微注射技術(shù)。發(fā)育培養(yǎng)液的成分除一些無機鹽和有機鹽類外,還需添加維生素;激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分,以及血清(血漿)等物質(zhì)。

(5)

胚胎移植時;應(yīng)選擇發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段的胚胎。借助胚胎分割技術(shù)可獲得更多的轉(zhuǎn)基因胚胎,胚胎分割時,需要將內(nèi)細(xì)胞團進行均等切割,否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育。依題意“采用中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)來獲取產(chǎn)物”可推知,在胚胎移植前,需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進行性別鑒定。

(6)

若想檢驗轉(zhuǎn)基因倉鼠是否成功表達(dá)EPO;可以采用抗原-抗體雜交技術(shù)對血液來進行檢測。

【點睛】

本題以“促紅細(xì)胞生成素”的合成為題材,考查基因工程胚胎工程的相關(guān)知識,要求考生識記基因工程的原理及操作步驟,識記胚胎移植的原理及應(yīng)用,能結(jié)合題中信息準(zhǔn)確答題?!窘馕觥?1)①.cDNA②.PCR技術(shù)。

(2)①.促性腺②.減數(shù)第二次分裂中期③.頂體。

(3)啟動子。

(4)①.顯微注射②.血清##血漿。

(5)①.桑椹胚或囊胚②.內(nèi)細(xì)胞團③.性別鑒定。

(6)抗原-抗體雜交30、略

【分析】【分析】

PCR原理:在DNA復(fù)制中;打開DNA雙鏈,每條DNA單鏈作為母鏈,以四種游離脫氧核苷酸為原料,合成子鏈,在引物的作用下,DNA聚合酶從引物3’端開始延伸DNA鏈。

【詳解】

(1)由于DNA合成的方向是從子鏈的5’端到3’端延伸的;根據(jù)PCR1的產(chǎn)物,可知引物是引物A;引物C。根據(jù)PCR2的產(chǎn)物,PCR2的引物為引物B、引物C,將DNA分子②④混合后退火可得到③⑤,PCR3獲得DNA⑥,DNA⑥分子的3’端與引物D互補配對,5’端與引物C互補配對,所以PCR4的引物為引物C、引物D;PCR3為了獲得重疊鏈,模板DNA不能選擇DNA分子③的原因是子鏈的延伸方向只能從5’→3',以DNA分子③作模板時子鏈不能延伸。

(2)為使重疊延伸PCR技術(shù)改造后的目的基因能與載體正確連接;PCR4時,應(yīng)在基因上;下游引物的5'端分別添加限制酶,因為子鏈的延伸是從3'端開始的。目的基因應(yīng)插在啟動子和終止子之間,由于pstI靠近終止子,所以應(yīng)在基因上、下游引物的5'端分別添加限制酶Kpnl、EcoRl。

(3)目的基因、質(zhì)粒及大腸桿菌混合,可能有一些質(zhì)粒與目的基因成功連接,可能也有些質(zhì)粒沒有與目的基因連接,這些質(zhì)粒若成功導(dǎo)入大腸桿菌,由

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