2025年蘇科版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案

…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年蘇科版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、甲烷氧化菌生產(chǎn)的某種蛋白具有較高的經(jīng)濟效益。某研究小組利用污泥，經(jīng)過濃縮培養(yǎng)，最終分離出以甲烷為碳源和能源的菌株。下列說法不正確的是（）A.在培養(yǎng)過程中，可先用液體培養(yǎng)基進行多次選擇培養(yǎng)，以增大該菌濃度B.濃縮培養(yǎng)后，為了得到單菌落，可直接用灼燒后冷卻的接種環(huán)蘸取菌液進行平板劃線C.若用稀釋涂布平板法對菌種純化并計數(shù)，則各梯度應該分別涂布3個平板D.對已分離的菌株，可采用斜面保藏法在-20℃的冷凍冰箱中長期保存2、如圖是中國科學家首次用體細胞核移植技術克隆出兩只獼猴的簡單流程，相關敘述錯誤的是（）

A.選擇MⅡ期的卵母細胞有利于細胞核全能性的恢復B.重構胚可以用PEG、滅活的病毒等激活C.克隆猴的遺傳物質與供體體細胞不完全一致D.培養(yǎng)供體體細胞的培養(yǎng)液中常需添加動物血清3、下表為某培養(yǎng)基的配方，有關敘述正確的是（）。成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4伊紅美藍青霉素瓊脂蒸餾水含量10g10g2g0．4g0．065g1萬單位適量1000ml

A.此培養(yǎng)基屬于天然鑒別培養(yǎng)基，其中的氮源來自于牛肉膏B.能在此培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌，擬核上有抗青霉素的基因C.此培養(yǎng)基可以用來檢測自來水中細菌含量是否符合飲用水標準D.此培養(yǎng)基可以用于選育轉基因大腸桿菌菌種的基因工程的操作過程中4、人參是一種名貴藥材，具有良好的滋補作用。干擾素在慢性乙肝、丙肝及部分腫瘤的治療中有一定療效。下圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細胞的流程。①~④表示相關的操作，EcoRI、BamHI為限制酶，它們的識別序列及切割位點如下表所示。下列有關敘述正確的是（）

。限制酶識別序列及切割位點EcoRIG↓AATTCBamHIG↓GATCC

A.過程①所需的兩種引物中分別加上GAATTC和GGATCC序列有利于后續(xù)操作B.構建基因表達載體時，目的基因必須位于啟動子和終止子之間才能進行復制C.過程③利用的是T-DNA的特性將目的基因整合到受體細胞的染色體DNA中D.過程④需利用液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，可通過PCR技術檢測干擾素基因是否表達5、2022年3月8日，史上首例接受了“豬心臟”移植手術的患者在術后2個月去世。盡管沒能最終救回他，但也延長了患者的壽命。據(jù)悉，手術使用的“豬心臟”源于被基因改造過的實驗豬。這項技術有望解決器官移植面臨的器官短缺的難題。下列關于器官移植的說法，不正確的是（）A.通常器官移植要面臨的難題之一是由T淋巴細胞引起的免疫排斥B.該實驗豬可能通過基因敲除技術“敲除”了引起人免疫系統(tǒng)反應的抗原基因C.為保證該豬任何內臟都能供人體移植，需要在原腸胚時期對豬的細胞進行改造D.我國支持的治療性克隆也能解決器官短缺的難題評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)6、下圖為雜交瘤細胞制備示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶（HGPRT-）；在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。下列敘述正確的是（）

A.可用滅活病毒誘導細胞融合B.未融合的細胞和融合的同種核細胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長C.雜交瘤細胞需進一步篩選才能用于生產(chǎn)D.細胞膜的選擇透過性是細胞融合的基礎7、良種試管牛的繁殖過程是用激素促進甲牛多排卵，然后把卵母細胞在體外與人工采集的乙牛的精子進行受精，在特定培養(yǎng)基上培育成胚胎，再把胚胎送入經(jīng)過激素處理的丙牛的子宮內，孕育成試管牛。下列相關敘述正確的是（）A.“用激素促進甲牛多排卵”的激素是孕激素B.產(chǎn)生試管牛的生殖方式屬于有性生殖C.甲牛、乙牛對試管牛核基因的貢獻相同D.該技術可應用于加速優(yōu)良種畜的繁殖8、為提高一株石油降解菌的凈化能力，將菌涂布于石油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，以致死率為90%的輻照劑量誘變處理，下列敘述不合理的是（）A.將培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中后滅菌，可降低培養(yǎng)基污染的概率B.涂布用的菌濃度應控制在30~300個/mLC.需通過預實驗考察輻射時間對存活率的影響，以確定最佳誘變時間D.挑取培養(yǎng)基上長出的較大單菌落，給純化后進行降解效率分析9、下列關于DNA粗提取與鑒定、DNA片段的擴增及電泳鑒定的原理的敘述正確的是（）A.利用DNA不溶于酒精，但蛋白質均溶于酒精的原理，可分離DNA與蛋白質B.利用在一定溫度下DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色的原理對粗提取的DNA進行鑒定C.PCR技術利用了DNA的熱變性原理，通過調節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結合D.電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理10、白地霉侵染是導致柑橘酸腐病的主要原因，實驗證明桔梅奇酵母通過分泌普切明酸對白地霉具有生物防治能力。已知鐵是真菌生長的必需元素，是胞內重要酶活性中心的組成部分。普切明酸是桔梅奇酵母產(chǎn)生的一種水溶性鐵螯合劑，能快速在培養(yǎng)基中擴散并與其中的Fe3+形成穩(wěn)定紅色復合物。研究配制的含有不同濃度FeCl3的培養(yǎng)基如下表所示。實驗結果為隨FeCl3濃度增大，抑菌圈紅色加深但變窄，如下圖所示。相關敘述正確的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水瓊脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素，瓊脂不是營養(yǎng)物質B.白地霉采用了平板劃線法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.結果表明，F(xiàn)eCl3濃度增大，普切明酸與Fe3+結合的數(shù)量減少D.結果表明，F(xiàn)eCl3能降低桔梅奇酵母對白地霉的防治效果11、野生型大腸桿菌能夠在基本培養(yǎng)基上生長，營養(yǎng)缺陷型的大腸桿菌則不能在基本培養(yǎng)基上生長，需要在培養(yǎng)基中添加某些營養(yǎng)物質。研究人員用影印培養(yǎng)法對誘變產(chǎn)生的營養(yǎng)缺陷型突變體進行篩選，方法如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.母板培養(yǎng)基與基本培養(yǎng)基的成分相同B.用稀釋涂布平板法將菌液接種在母板培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)C.作為接種工具的“印章”需經(jīng)過滅菌后才能印在長有菌落的母板上粘取菌種D.母板培養(yǎng)基上的菌落4、5、6為營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌繁殖而來12、下圖是利用牛的乳腺細胞生產(chǎn)人體血清白蛋白的操作流程；其中細胞①已導入人血清白蛋白基因。相關敘述正確的是（）

A.細胞①的培養(yǎng)液中需要加入胃蛋白酶B.“卵母細胞”應在體外培養(yǎng)成熟C.圖示“細胞②→早期胚胎”發(fā)生輸卵管中D.該技術與試管牛培育的主要原理不同13、下列有關動物細胞培養(yǎng)的表述錯誤的是（）A.培養(yǎng)環(huán)境中需要O2，不需要CO2B.細胞要經(jīng)過脫分化形成愈傷組織C.培養(yǎng)液通常含有糖類，氨基酸，無機鹽，維生素和動物血清D.培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)到一定階段后分瓶后才能繼續(xù)增殖14、下圖為科學家培育克隆猴的基本步驟，下列相關敘述正確的是（）

A.動物細胞核移植技術，體現(xiàn)了動物細胞的全能性B.對A猴卵母細胞去核是為了保證克隆猴的核遺傳物質都來自B猴C.必須將重組細胞培育到一定程度后才能植入代孕動物體內D.A猴的卵母細胞的細胞質中含有促進B猴體細胞核全能性表達的物質評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)15、哺乳動物核移植可以分為______核移植（比較容易）和______核移植（比較難）。16、禁止生物武器公約。

（1）1972年4月10日，蘇聯(lián)、美國、英國分別在其首都簽署了《禁止試制、生產(chǎn)和儲存并銷毀細菌（生物）和毒劑武器公約》（簡稱_____）；并于1975年3月26日生效。1984年11月15日，我國也加入了這一公約。

（2）我國在任何情況下_____、_____、_____生物武器，并反對生物武器及其技術和設備的擴散。17、本課題對分解纖維素的微生物進行了初步的篩選。但是，這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，纖維素酶的發(fā)酵方法有___________和___________發(fā)酵兩種。纖維素酶的測定方法，一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的__________進行________的測定。18、最常用的載體是______，它是一種裸露的、結構簡單的、獨立于細菌染色體之外，并具有______能力的_____。19、兩種DNA連接酶（E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：

①相同點：都縫合______鍵。

②區(qū)別：E·coliDNA連接酶來源于T4噬菌體，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。20、加入酒精和用玻璃棒攪拌時，動作要輕緩，以免加劇___________，導致DNA分子不能形成__________。21、利用DNA和蛋白質等其它成分在___________中的溶解度不同，選擇適當?shù)柠}濃度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。22、動物細胞培養(yǎng)的流程：

取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉入培養(yǎng)瓶中進行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。23、生物數(shù)據(jù)庫的知識與正在迅猛發(fā)展的生物信息學有關。什么是生物信息學________？評卷人得分四、判斷題(共4題，共24分)24、目前，種植的轉基因作物中以水稻和小麥最多，其次是轉基因棉花和油菜（______）A.正確B.錯誤25、通過體細胞核移植技術已經(jīng)獲得了多種克隆動物，該技術的成功率已經(jīng)很高。（選擇性必修3P54）()A.正確B.錯誤26、治療性克隆是指利用克隆技術產(chǎn)生特定的細胞、組織和器官，用它們來修復或替代受損的細胞、組織和器官，從而達到治療疾病的目的。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯誤27、生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質的區(qū)別。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共24分)28、（1）國家生活飲用水衛(wèi)生標準中規(guī)定細菌學指標的限值：細菌總數(shù)為100CFU/mL（說明：CFU為菌落形成單位）。興趣小組同學通過濾膜法對某小區(qū)自供水設備的蓄水池進行細菌總數(shù)測定，將10mL的水樣進行過濾后，將濾膜放在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)時應將平板倒置，其原因是___________________。

（2）所用培養(yǎng)基中的牛肉膏除為微生物提供________和_______外，還能提供磷酸鹽和________。在培養(yǎng)過程中，不同時間所觀察到的平板上菌落特征的差異有___________（至少寫出兩點）。

（3）上述檢測過程在37℃條件下經(jīng)24h培養(yǎng)后；測得如下結果：

。平板l平板2平板3細菌總數(shù)（CFU/mL）413538據(jù)上表結果判斷，所取水樣測定結果是_________________。29、氧化硫硫桿菌（T．t）通過將單質硫與還原態(tài)硫氧化為硫酸以獲得能量進行化能合成作用。科學家欲通過實驗探究硫酸鋅對T．t產(chǎn)酸量的影響。

實驗材料：氧化硫硫桿菌（T．t）菌液；蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液，配制好的氧化硫硫桿菌（T．t）液體培養(yǎng)基(含單質硫)，恒溫搖床等。

請分析并回答以下問題：

（1）氧化硫硫桿菌的代謝類型為______________，培養(yǎng)氧化硫硫桿菌（T．t）的液體培養(yǎng)基中的碳源是___________，該培養(yǎng)基從功能上屬于______________培養(yǎng)基。

（2）實驗前，科學家發(fā)現(xiàn)氧化硫硫桿菌（T．t）菌液已被雜菌污染，于是在配制好的氧化硫硫桿菌（T．t）液體培養(yǎng)基中加入____________，用______________法接種并進行純化培養(yǎng)；得到了氧化硫硫桿菌菌落。

（3）實驗步驟：

第一步：對配制好的培養(yǎng)基再次進行______________滅菌處理；以防止雜菌污染影響實驗結果。

第二步：取三個錐形瓶（編號A、B、C）分別加入等量培養(yǎng)基后，再依次分別加入____________________________；

第三步：往A、B、C三組中接種______________后放入恒溫搖床中培養(yǎng)7天。

第四步：每天測定并記錄各組的硫酸含量。

（4）實驗結果：如圖所示；據(jù)圖分析實驗結論：

實驗結論：________________________________________________________。30、黃粉蟲可以吞食；降解塑料；利用黃粉蟲腸道微生物對白色污染進行生物降解，是一種綠色環(huán)保的處理工藝。下圖是從黃粉蟲腸道中分離、純化微生物的過程，回答下列問題：

(1)富集培養(yǎng)基按物理性質屬于___________培養(yǎng)基，不含有_____________，但含有酵母膏、蛋白豚。酵母膏能提供所需的__________________。

(2)選擇培養(yǎng)基中需加入_______________作為唯一碳源，稀釋涂布后最后一組可能形成菌落。統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法有_______________和利用顯微鏡直接計數(shù)。

(3)如果對白色污染進行傳統(tǒng)填埋、焚燒容易造成二次污染，黃粉蟲腸道微生物對白色污染的降解______（填“會”或“不會”）造成二次污染。31、柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞桿菌引起的；發(fā)生在柑橘的一種病害；植株受害后會發(fā)生落葉、落果，嚴重時葉片落光，整株枯死。利用基因工程將來自水稻的Xa27基因導入柑橘可獲得抗柑橘潰瘍病的植株，利用植物組織離體培養(yǎng)技術則可培育無病毒植株?；卮鹣铝袉栴}：

(1)為了獲得脫毒苗，通?？梢赃x取植株______附近的組織進行離體培養(yǎng)，選取該部位組織的原因是______。

(2)如圖1表示科研人員利用柑橘幼苗獲得抗病轉基因植株的過程：

①基因表達載體必需的結構除復制原點、啟動子、終止子、目的基因外，還有______。

②共培養(yǎng)時，Ti質粒的作用是______。

③共培養(yǎng)后，要利用選擇培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，目的是______。

④再分化過程中，誘導愈傷組織生根、生芽的先后順序為______。

⑤從個體生物學水平鑒定柑橘再生植株時可采用______（填具體操作）的方法。經(jīng)鑒定有幾棵植株沒有抗病的能力，分別提取這幾棵植株的DNA，依據(jù)______的特異性堿基序列設計引物，擴增后利用______進行檢測；結果如圖2。

據(jù)圖2分析，植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______，植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。評卷人得分六、綜合題(共4題，共12分)32、請回答以下基因工程方面的有關問題：

（1）利用PCR技術擴增目的基因；其原理與細胞內DNA復制類似（如下圖所示）。圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎。

①從理論上推測，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例為_______________。

②在第___________輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段。

（2）設計引物是PCR技術的關鍵步驟之一。某同學設計的兩組引物（只標注了部分堿基序列）都不合理（如下圖）；請分別說明理由。

①第1組：___________；②第2組：___________。

（3）PCR反應體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下面的表達式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因為_________________。

33、為增加油菜種子的含油量；研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉運肽基因相連，導入油菜細胞并獲得了轉基因油菜品種?；卮鹣铝袉栴}：

(1)酶D基因和轉運肽基因所含的三種限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切點如圖甲所示，現(xiàn)為獲得融合基因，研究人員采用PCR法擴增酶D基因，首先要依據(jù)基因兩端的堿基序列設計____________，同時從擬南芥基因文庫中獲取轉運肽基因，再用________和________酶處理兩個基因后，即可得到________端與_________端（填圖中字母）相連的融合基因。

(2)用PCR法擴增酶D基因時，每次循環(huán)可分為_______、_______、_______三步，其中第三步所使用的酶是___________。

(3)將上述融合基因插入圖乙所示Ti質粒的T-DNA中，構建____________并導入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含____________的培養(yǎng)基上；其目的是得到含融合基因的農(nóng)桿菌，再利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉化的侵染液。

(4)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間，此過程的目的是_____________________，進一步篩選后獲得轉基因油菜細胞，該細胞通過___________技術，可培育成轉基因由此植株。34、研究者擬構建高效篩選系統(tǒng)；將改進的苯丙氨酸合成關鍵酶基因P1導入谷氨酸棒桿菌，以提高苯丙氨酸產(chǎn)量。

(1)如圖是該高效篩選系統(tǒng)載體的構建過程。載體1中含有KanR（卡那霉素抗性基因）和SacB兩個標記基因，為去除篩選效率較低的SacB，應選擇引物________和________，并在引物的________（5＇∕3＇）端引入XhoⅠ酶識別序列；進行PCR擴增，產(chǎn)物經(jīng)酶切；連接后環(huán)化成載體2。

(2)PCR擴增載體3中篩選效率較高的標記基因RpsL（鏈霉素敏感基因）時，引物應包含___________（EcoRⅠ∕HindⅢ∕XhoⅠ）酶識別序列；產(chǎn)物經(jīng)單酶切后連接到載體2構建高效篩選載體4。

(3)將改進的P1基因整合到載體4構建載體5。將載體5導入鏈霉素不敏感（由RpsL突變造成）、卡那霉素敏感的受體菌。為獲得成功導入載體5的菌株，應采用含有__________的平板進行初步篩選。

(4)用一定的方法篩選出如下菌株：P1基因脫離載體5并整合到受體菌擬核DNA，且載體5上其他DNA片段全部丟失。該菌的表型為__________。A．卡那霉素不敏感、鏈霉素敏感B．卡那霉素敏感、鏈霉素不敏感C．卡那霉素和鏈霉素都敏感D．卡那霉素和鏈霉素都不敏感(5)可采用__________技術鑒定成功整合P1基因的菌株。之后以發(fā)酵法檢測苯丙氨酸產(chǎn)量。35、中國女科學家屠呦呦因從中藥中分離出青蒿素并應用于瘧疾治療，獲得了2015年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)青蒿素還具有抗腫瘤的功效，能殺傷人的肝癌和卵巢癌細胞系。2015年諾貝爾化學獎頒給了研究DNA修復細胞機制的三位科學家。人的P53基因能夠控制人的P53蛋白的合成。人的P53蛋白可對癌變前的DNA損傷進行修復；使其恢復正常，或誘導其進入休眠狀態(tài)，阻止細胞癌變。請回答下列問題：

（1）可利用____________________技術在短期內獲得大量的青蒿植株。該技術利用的原理是____________________。

（2）某生物科研小組做了探究青蒿素對肝癌細胞生長影響的相關實驗。將患肝癌的小鼠肝臟取出，剪碎，用____________________酶處理一段時間，使組織分散成單個細胞。然后，用培養(yǎng)液將分散的細胞稀釋制成細胞懸液，再將細胞懸液放入培養(yǎng)瓶內，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)。正常動物細胞培養(yǎng)具有________________和________________的特點，一般傳至________代以內的細胞能保持正常的二倍體核型。

（3）在動物細胞培養(yǎng)時，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清、血漿等一些天然成分，其原因是__________________________________________________________________________。

（4）進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體環(huán)境中，CO2的主要作用是____________________。為了防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的____________。

（5）P53基因的大量擴增可以采用PCR技術，該技術中需使用的一種特殊的酶是__________。

（6）將目的基因導入動物細胞最常用的的方法是________________，若要檢測P53基因是否插入到受體細胞的DNA上，可以采用________________技術。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、D【分析】【分析】

1；微生物常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。

2；培養(yǎng)基按照物理狀態(tài)可以分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基；其中固體培養(yǎng)基多用來進行分離、鑒定和計數(shù)。臨時保藏法主要適用于短期保存菌種，要求溫度一般為4℃。

【詳解】

A；在培養(yǎng)過程中；可先用液體培養(yǎng)基進行多次選擇培養(yǎng)（濃縮培養(yǎng)），以增大該菌濃度，A正確；

B；濃縮培養(yǎng)后；可直接用灼燒后冷卻的接種環(huán)蘸取菌液進行平板劃線，經(jīng)過多次劃線，可以得到單菌落，B正確；

C；若用稀釋涂布平板法純化菌種；各梯度應該分別涂布3個平板，對菌落數(shù)在30-300之間的平板進行計數(shù)，C正確；

D；對分離的菌株；可采用斜面保藏法在4℃的冰箱中短期保存，也可采取甘油管藏法在-20℃的冷凍冰箱中長期保存，D錯誤。

故選D。2、B【分析】【分析】

動物細胞核移植技術是將動物一個細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中；使這個重新組合的細胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術。

【詳解】

A；MⅡ期的卵母細胞含有激發(fā)細胞核全能性的物質；有利于細胞核全能性的恢復，A正確；

B、用物理或化學方法（如電刺激、Ca2+載體；乙醇、蛋白酶合成抑制劑等）激活重構胚；使其完成細胞分裂和發(fā)育進程，PEG、滅活的病毒可以誘導細胞融合，B錯誤；

C；克隆猴的遺傳物質大部分來自供體體細胞；少部分來自去核卵母細胞，所以克隆猴的遺傳物質與供體體細胞不完全一致，C正確；

D；培養(yǎng)供體體細胞的培養(yǎng)液中常需添加動物血清以補充其發(fā)育所需物質；D正確。

故選B。3、D【分析】【分析】

據(jù)表分析：該培養(yǎng)基中加有伊紅美藍；可用于鑒別大腸桿菌，同時加的青霉素還使該培養(yǎng)基具有選擇作用。培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分主要有碳源；氮源、水和無機鹽，有的還會有生長因子等。

【詳解】

A；牛肉膏可為培養(yǎng)的微生物提供氮源；根據(jù)分析可知，此培養(yǎng)基可用于鑒定大腸桿菌，由于牛肉膏中的具體成分不確定，所以屬于天然培養(yǎng)基，另外其中的青霉素還使該培養(yǎng)基具有選擇作用，A錯誤；

B；抗青霉素的抗性基因一般位于大腸桿菌的質粒上；B錯誤；

C；此培養(yǎng)基只能用來檢測自來水中大腸桿菌含量是否符合飲用水標準；不能檢測其它細菌含量，C錯誤；

D；大腸桿菌常作為基因工程的工程菌；此培養(yǎng)基含有青霉素，能篩選含有青霉素抗性基因的生物，可以用于選育轉基因大腸桿菌菌種的基因工程的操作過程中，D正確。

故選D。4、A【分析】【分析】

Ti質粒是在根瘤土壤桿菌細胞中存在的一種核區(qū)DNA外的自主復制的環(huán)形雙鏈DNA分子。是一種存在于根癌土壤桿菌中可引起雙子葉植物根部致癌的質粒。細菌從雙子葉植物的受傷根部侵入根部細胞后；最后在其中裂解，釋放出Ti質粒，其上的T-DNA片段會與植物細胞的核基因組整合。

【詳解】

A；結合圖示可知；PCR的產(chǎn)物用EcoRI和BamHI來酶切，因此在基因的引物兩側加上識別序列GAATTC和GGATCC，A正確；

B；啟動子負責與RNA聚合酶結合啟動表達；終止子負責終止表達，因此構建基因表達載體時，目的基因必須位于啟動子和終止子之間才能進行表達，B錯誤；

C；過程③是利用T-DNA的特性將目的基因導入到農(nóng)桿菌中；農(nóng)桿根瘤菌是原核生物，無染色體，C錯誤；

D；過程④需利用固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)；可通過分子雜交技術檢測干擾素基因是否表達，D錯誤。

故選A。5、C【分析】【分析】

人體器官移植面臨的主要問題有供體器官短缺和免疫排斥；目前臨床通過免疫抑制劑的應用，通過抑制T淋巴細胞的增殖來提高器官移植的成活率。

【詳解】

A；人體免疫系統(tǒng)中T淋巴細胞分裂分化形成細胞毒性T細胞會攻擊移植的器官；所以通常器官移植要面臨的難題之一是由T淋巴細胞引起的免疫排斥，A正確；

B；由于移植的器官會引發(fā)人體免疫反應；所以通過基因敲除技術“敲除”了引起人免疫系統(tǒng)反應的抗原基因，就會避免這個現(xiàn)象的發(fā)生，B正確；

C；由于在原腸胚已經(jīng)發(fā)生了分化；所以應該應該對豬的卵原細胞或者受精卵進行改造，才能夠保證該豬任何內臟都能供人體移植，C錯誤；

D；治療性克隆指利用克隆技術產(chǎn)生特定細胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植；可以也能解決器官短缺的難題，D正確。

故選C。二、多選題(共9題，共18分)6、A:C【分析】【分析】

（1）動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性；細胞的增殖；誘導手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結果產(chǎn)生雜交細胞，主要用于制備單克隆抗體。

（2）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫理：B淋巴細胞能產(chǎn)生特異性抗體；②細胞融合原理：利用病毒對宿主細胞的穿透性使B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合；③動物細胞培養(yǎng)技術：對雜交瘤細胞進行體內；體外培養(yǎng)。

（3）制備單克隆抗體過程中的幾種細胞：①免疫B細胞（漿細胞）：能產(chǎn)生單一抗體；但不能無限增殖；②骨髓瘤細胞：能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；③雜交瘤細胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。

【詳解】

A；誘導動物細胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒（如滅活的仙臺病毒）等；A正確；

B；兩兩融合的細胞包括免疫B細胞與免疫B細胞融合的具有同種核的細胞、骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合的具有同種核的細胞、免疫B細胞與骨髓瘤細胞融合的雜交瘤細胞；骨髓瘤細胞雖然能無限增殖，但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶，免疫B細胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶，但不具有無限增殖的本領，所以在HAT篩選培養(yǎng)液中，兩兩融合的具有同種核的細胞都無法生長，只有雜交瘤細胞才能生長，B錯誤；

C；因每個免疫B細胞只分泌一種特異性抗體；因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來的眾多的雜交瘤細胞所分泌的抗體，不一定都是人類所需要的，還需要進一步通過專一抗體陽性檢測，把能分泌人類所需要抗體的雜交瘤細胞篩選出來，C正確；

D；動物細胞融合是以細胞膜的流動性為基礎的；D錯誤。

故選AC。

【點睛】7、B:C:D【分析】【分析】

良種試管牛的繁殖過程：對供體和受體的選擇和處理（同期發(fā)情處理；超數(shù)排卵處理）；配種或進行人工授精、對胚胎的收集檢查培養(yǎng)或保存、進行胚胎移植。

【詳解】

A；處理供體甲牛的激素可能是促性腺激素；使其超數(shù)排卵，A錯誤；

B；產(chǎn)生試管牛的過程中經(jīng)過了兩性生殖細胞的融合過程；因此試管牛產(chǎn)生的生殖方式屬于有性生殖，B正確；

C；母本甲牛提供卵細胞、父本乙牛提供精子；試管牛細胞核中基因一半來源于父方，一半來源于母方，C正確；

D；體外受精和早期胚胎發(fā)育、胚胎移植等技術可以縮短繁殖周期；增加一生繁殖的后代數(shù)量，即該技術可充分發(fā)揮優(yōu)良雌性個體的繁殖潛力，D正確。

故選BCD。

【點睛】8、A:B【分析】【分析】

培養(yǎng)基的配制：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。微生物的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法。預實驗可以為正式實驗進一步的摸索條件；可以檢驗實驗設計的科學性和可行性，避免人力；物力和財力的浪費。

【詳解】

A；培養(yǎng)基應先滅菌再分裝于培養(yǎng)皿中；A符合題意；

B、涂布用的菌濃度應控制在106倍；以避免菌種重疊而不能得到單菌落，B符合題意；

C；輻射劑量和誘變時間都是正式實驗的無關變量；可通過預實驗確定，C不符合題意；

D；石油降解菌能分解石油獲得碳源；形成菌落，挑取培養(yǎng)基上長出的較大單菌落，給純化后進行降解效率分析，以獲得能高效降解石油的菌種，D不符合題意。

故選AB。9、B:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細胞中的某些蛋白質溶于酒精；DNA對酶；高溫和洗滌劑的耐受性。

（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍色。

【詳解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但細胞中的某些蛋白質溶于酒精，可將DNA與蛋白質分離，A錯誤；

B；在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍色，B正確；

C；PCR是一種體外擴增DNA片段的技術；利用了DNA熱變性原理，通過調節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結合，包括：高溫變性（解鏈）→低溫復性→中溫延伸三個步驟，C正確；

D；由于同性相斥、異性相吸；帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動，電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理，D正確。

故選BCD。10、A:D【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質；根據(jù)物理性質分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質的基礎上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質和氧氣的要求。

2；微生物常見的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素；瓊脂是凝固劑的一種，并不是營養(yǎng)物質，在培養(yǎng)液中加入瓊脂可以使液體培養(yǎng)基成為瓊脂固體培養(yǎng)基，A正確；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接種都采用了涂布平板法；B錯誤；

C、隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，普切明酸與Fe3+的結合增強；抑菌圈的紅色加深，C錯誤；

D、普切明酸與Fe3+形成紅色復合物，但隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，抑菌圈變窄，說明FeCl3能降低桔梅奇酵母對白地霉的防治效果；D正確。

故選AD。11、B:C:D【分析】【分析】

影印培養(yǎng)法；是指確保在一系列平板培養(yǎng)基的相同位置上接種并培養(yǎng)出相同菌落的一種微生物培養(yǎng)方法。主要操作方法是:用滅菌的絲絨覆蓋在一塊與培養(yǎng)皿同樣大小(或略小)的木制圓柱體上，輕輕地在母種培養(yǎng)皿的菌苔上印一下，把細菌菌落全部轉移到絲絨面上，然后將這一絲絨面再印在另外的選擇性培養(yǎng)基平板上，獲得與原始平板完全相同的接種平板。待培養(yǎng)后，比對各培養(yǎng)皿在相同位置出現(xiàn)相同的菌落，從而篩選出適當?shù)木辍?/p>

【詳解】

A；母板培養(yǎng)基上有發(fā)生突變的營養(yǎng)缺陷型和野生型大腸桿菌的菌落；而基本培養(yǎng)基上只有野生型大腸桿菌的菌落，由此可知母板培養(yǎng)基與基本培養(yǎng)基的成分不同，A錯誤；

B；分析題圖可知；用了稀釋涂布平板法將菌液接種在母板培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，B正確；

C；作為接種工具的“印章"需經(jīng)過滅菌處理才能印在長有菌落的母板上；以防止雜菌污染，C正確；

D；根據(jù)基本培養(yǎng)基上的菌落分布和添加不同營養(yǎng)物質的補充培養(yǎng)基上的菌落分布對應位置可知；4、5、6為營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌，理由是這三個菌落在基本培養(yǎng)基上都沒有，而分別在添加了不同營養(yǎng)物質的補充培養(yǎng)基上形成，D正確。

故選BCD。12、B:D【分析】【分析】

題圖分析：圖示操作流程為“利用牛的乳腺細胞生產(chǎn)人體血清白蛋白”；因此首先需要將人體血清白蛋白基因導入雌性奶牛乳腺細胞，形成細胞①；取出細胞①的細胞核，注入去核牛卵母細胞中，形成細胞②，該過程采用了核移植技術，其原理是動物細胞的細胞核具有全能性；要形成轉基因克隆奶牛還需要采用早期胚胎培養(yǎng)技術和胚胎移植技術。

【詳解】

A；為了得到單個細胞；在細胞①的培養(yǎng)液中需要加入胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，A錯誤；

B；圖中卵母細胞應該在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期；此時的次級卵母細胞具有受精能力，B正確；

C；圖示“細胞②→早期胚胎”為體外培養(yǎng)胚胎的過程；該過程在體外完成，C錯誤；

D；圖示克隆牛的培育主要采用了核移植技術和胚胎移植技術；屬于無性生殖；試管牛的培育主要采用了體外受精和胚胎移植技術，屬于有性生殖，因此兩者產(chǎn)生犢牛的生殖方式不相同，D正確。

故選BD。13、A:B【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。②營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。③溫度：適宜溫度。④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

【詳解】

A、動物細胞培養(yǎng)中，培養(yǎng)環(huán)境中需要O2，也需要CO2（用來維持培養(yǎng)液的pH）；A錯誤；

B；動物細胞培養(yǎng)不需要脫分化；植物細胞要經(jīng)過脫分化才形成愈傷組織，B錯誤；

C；動物細胞培養(yǎng)中常用含糖類、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清的液體培養(yǎng)基；C正確；

D；動物細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象而停止分裂增殖；故培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)到一定階段后要用胰蛋白酶處理，分瓶后才能繼續(xù)增殖，D正確。

故選AB。14、B:C:D【分析】【分析】

動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。核移植得到的動物稱克隆動物，克隆動物的核基因完全來自供體動物，而細胞質基因來自受體細胞。核移植包括體細胞核移植和胚胎細胞核移植，其中體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植，因為體細胞的全能性低于胚胎細胞。

【詳解】

A；動物細胞核移植技術；不能體現(xiàn)動物細胞的全能性，而是體現(xiàn)動動物細胞核的全能性，A錯誤；

B；去除A猴卵母細胞的細胞核；目的是排除A猴核遺傳物質的干擾，保證克隆猴的核遺傳物質都來自B猴，B正確；

C；必須將重組細胞培育到桑椹胚或囊胚階段后才能植入代孕動物體內；才可正常繼續(xù)發(fā)育，C正確；

D；卵母細胞的細胞質中含有促進細胞核全能性表達的物質；故體細胞的細胞核需移植到去核卵母細胞后才能表現(xiàn)出全能性，D正確。

故選BCD。三、填空題(共9題，共18分)15、略

【解析】①.胚胎細胞②.體細胞16、略

【分析】【詳解】

為最大程度的保障人類權益；簽署了禁止生物武器公約：

（1）《禁止試制；生產(chǎn)和儲存并銷毀細菌（生物）和毒劑武器公約》；簡稱《禁止生物武器公約》。

（2）我國對于生物武器的態(tài)度是在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，并反對生物武器及其技術和設備的擴散。【解析】①.《禁止生物武器公約》②.不發(fā)展③.不生產(chǎn)④.不儲存17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】液體發(fā)酵固體發(fā)酵葡萄糖定量18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】質粒自我復制雙鏈環(huán)狀DNA分子19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】磷酸二酯20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA斷裂絮狀沉淀21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不同濃度的NaCL溶液DNA雜質22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個細胞細胞懸液原代傳代23、略

【分析】【詳解】

生物信息學是研究生物信息的采集、處理、存儲、傳播,分析和解釋等各方面的學科，也是隨著生命科學和計算機科學的迅猛發(fā)展，生命科學和計算機科學相結合形成的一門新學科，生物信息學主要是核酸和蛋白質序列數(shù)據(jù)的計算機處理和分析。【解析】生物信息學是研究生物信息的采集、處理、存儲、傳播,分析和解釋等各方面的學科，也是隨著生命科學和計算機科學的迅猛發(fā)展，生命科學和計算機科學相結合形成的一門新學科四、判斷題(共4題，共24分)24、B【分析】【詳解】

目前，種植的轉基因作物中以大豆和玉米最多，其次是轉基因棉花和油菜，所以錯誤。25、B【分析】【詳解】

目前；用體細胞核移植技術得到克隆動物的成功率還很低。

故錯誤。26、A【分析】【詳解】

治療性克隆是指利用克隆技術產(chǎn)生特定的細胞、組織和器官，用它們來修復或替代受損的細胞、組織和器官，從而達到治療疾病的目的。本說法正確。27、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質區(qū)別；最重要的體現(xiàn)在目的不同。

【詳解】

治療性克?。菏侵赴芽寺〕鰜淼慕M織和器官用于治療疾病，這種用于醫(yī)療目的的使用克隆技術制造胚胎稱為治療性克隆。生殖性克?。禾幱谏车哪康氖褂每寺〖夹g在實驗室制造人類胚胎。治療性克隆和生殖性克隆最重要的差別是目的不同。五、實驗題(共4題，共24分)28、略

【分析】【分析】

1；微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽；此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用。

2；統(tǒng)計菌落數(shù)目使用的方法有顯微鏡直接計數(shù)法和活菌計數(shù)法；其中活菌計數(shù)法即稀釋涂布平板法，一般選擇菌落數(shù)目在30-300的平板進行計數(shù)。

【詳解】

（1）平板倒置后既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)；又可防止冷凝水滴落培養(yǎng)基，造成污染，影響實驗結果。

（2）所用培養(yǎng)基中的牛肉膏除為微生物提供碳源和氮源外；還能提供磷酸鹽和維生素。區(qū)分菌落種類的依據(jù)是菌落的形狀；大小、隆起程度和顏色等特征。

（3）統(tǒng)計菌落種類和數(shù)量時要每隔24h觀察統(tǒng)計一次；直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防因培養(yǎng)時間不足而導致遺漏菌落的種類和數(shù)目。表格中3個平板的平均菌落數(shù)為（41+35+38）÷3=38個，低于國家標準，因此所取水樣符合飲用水標準。

【點睛】

本題考查微生物分離和培養(yǎng)的相關知識，要求考生識記培養(yǎng)基的成分，掌握微生物分離和計數(shù)的方法，屬于考綱理解層次的考查?！窘馕觥糠乐估淠温湮廴九囵B(yǎng)基碳源氮源維生素菌落大小、形狀、隆起程度和顏色等符合飲用水的標準29、略

【分析】【分析】

微生物接種常用的兩種方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

（1）

結合題意“氧化硫硫桿菌通過將單質硫與還原態(tài)硫氧化為硫酸以獲得能量進行化能合成作用”可知，氧化硫硫桿菌的代謝類型為自養(yǎng)需氧型；由于該菌可以進行化能合成作用，可以利用液體培養(yǎng)基中的無機碳或CO2；可以其作為液體培養(yǎng)基中的碳源；該培養(yǎng)基中含有單質硫，對生長的菌類具有選擇作用，在功能上屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）

培養(yǎng)微生物應用固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)；故應在配置好的液體培養(yǎng)基中加入瓊脂；對微生物進行純化培養(yǎng)的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）

第一步；對培養(yǎng)基的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌；

第二步；由于本實驗的目的是通過實驗探究硫酸鋅對T．t產(chǎn)酸量的影響，則實驗的自變量為硫酸鋅的有無及其含量，實驗應遵循對照與單一變量原則，故本步驟應在三個錐形瓶中分別加入等量的蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液；

第三步；遵循無關變量一致原則，故往A；B、C三組中接種等量的氧化硫硫桿菌（T．t）后放入恒溫搖床中培養(yǎng)7天。

（4）

據(jù)圖分析；與對照（蒸餾水組）相比，低濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸無明顯作用，高濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸起抑制作用。

【點睛】

本題主要考查培養(yǎng)基的制作和微生物的接種方法，意在強化學生對實驗室的微生物的培養(yǎng)的相關知識的理解與掌握。熟記相關知識并能結合術語分析作答是解題關鍵?！窘馕觥浚?）自養(yǎng)需氧型無機碳或CO2選擇培養(yǎng)基。

（2）瓊脂平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）高壓蒸汽等量的蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液等量的氧化硫硫桿菌（T．t）

（4）低濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸無明顯作用，高濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸起抑制作用30、略

【分析】【分析】

分離菌株的思路：

（1）自然界中目的菌株的篩選：①依據(jù)：根據(jù)它對生存環(huán)境的要求；到相應的環(huán)境中去尋找。②實例：PCR技術過程中用到的耐高溫的TaqDNA聚合酶，就是從熱泉中篩選出來的Taq細菌中提取出來的。

（2）實驗室中目的菌株的篩選原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)溫度.pH等）；同時抑制或阻止其他微生物生長。

(1)

富集培養(yǎng)基不含有瓊脂；按物理性質屬于液體培養(yǎng)基，其中酵母膏能提供所需的碳源和氮源，可獲得數(shù)目較多的塑料降解菌。

(2)

篩選能降解塑料的微生物；需要使用以塑料為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，稀釋涂布后最后一組可能形成菌落。微生物的接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可以用來進行微生物的計數(shù)。

(3)

如果對白色污染進行傳統(tǒng)填埋焚燒容易造成二次污染；黃粉蟲腸道微生物對白色污染的降解不會造成二次污染。

【點睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的種類及功能，掌握接種微生物的方法及菌種保藏方法，能結合所學的知識準確答題?！窘馕觥?1)液體瓊脂碳源和氮源。

(2)塑料稀釋涂布平板法。

(3)不會31、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步驟：①目的基因的獲取和篩選；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定；

2；植物頂端分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少；甚至無病毒，切取一定大小的莖尖進行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗。

【詳解】

（1）為了獲得脫毒苗；通常選取植株莖尖（或頂端分生區(qū)附近的組織）進行離體培養(yǎng)，選取該組織的原因是此處病毒極少甚至無病毒。

（2）①基因表達載體上除有復制原點；啟動子、終止子、目的基因外；還有標記基因（便于篩選目的基因）；

②農(nóng)桿菌Ti質粒上的T-DNA片段可以攜帶目的基因并整合至植物細胞的染色體DNA上；

③選擇培養(yǎng)的目的是篩選出含有目的基因的柑橘細胞；

④先誘導生芽有利于生根；故再分化階段，需要先誘導愈傷組織生芽，待長出芽后，再將其轉接到誘導生根的培養(yǎng)基上，進一步誘導形成試管苗；

⑤在個體生物學水平可用接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）的方法，觀察植株是否患有柑橘潰瘍病來直接鑒定再生植株；分析再生植株沒有抗病能力的原因，可以提取各植株的DNA，依據(jù)Xa27基因（目的基因）的特異性堿基序列設計引物，擴增后用（凝膠）電泳分離PCR產(chǎn)物進行檢測；植株B、C沒有出現(xiàn)條帶，則可能是因為沒有導入目的基因；植株A、E、F出現(xiàn)條帶但不具有抗病能力，則可能是因為導入植物細胞的目的基因不能轉錄或轉錄后未翻譯或翻譯出的蛋白質沒有活性等?！窘馕觥?1)莖尖（或頂端分生區(qū)）此處病毒極少甚至無病毒。

(2)標記基因攜帶目的基因并整合至植物細胞的染色體DNA上篩選出含有目的基因的植物細胞先誘導生芽，再誘導生根接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）Xa27基因（凝膠）電泳導入植物細胞的目的基因不能表達（或不能轉錄，轉錄后不能翻譯，翻譯出的蛋白質沒有活性等，合理即可）沒有導入目的基因六、綜合題(共4題，共12分)32、略

【分析】【分析】

采用PCR技術擴增DNA的過程為：變性、退火、延伸，能根據(jù)PCR過程的特點，繪制PCR過程示意圖是解決本題的關鍵。

【詳解】

（1）①由圖可知，以原來的每條母鏈為模板合成的兩個新DNA分子中，只含有引物A或引物B，而以新合成的子鏈為模板合成新DNA分子時，兩種引物都含有，故第四輪循環(huán)共產(chǎn)生16個DNA分子，其中含有引物A的分子是15個，占15/16。②第一、二輪循環(huán)合成的子鏈長度均不同，根據(jù)半保留復制特點，前兩輪循環(huán)產(chǎn)生的4個DNA分子的兩條鏈均不等長，第三輪循環(huán)產(chǎn)生的DNA分子存在等長的兩條核苷酸鏈。

（2）引物是單鏈DNA時才能與DNA結合，而單鏈DNA的堿基互補配對部分容易形成雙鏈結構而失去其功能。從圖示可以看出，第1組引物Ⅰ和引物Ⅱ局部堿基互補配對，易形成雙鏈結構而失效。第2組引物相互間不能發(fā)生堿基互補配對，但引物Ⅰ′自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補配對而失效。

（3）DNA聚合酶的作用是將單個脫氧核苷酸連續(xù)結合到雙鏈DNA片段的引物鏈上，而不能直接將兩個脫氧核苷酸連在一起。

【點睛】

本題結合PCR過程示意圖，考查PCR技術、DNA分子復制、基因工程等知識，要求考生識記PCR技術的過程及原理，能分析題圖提取有效信息答題；掌握DNA分子半保留復制特點，能進行簡單的計算?！窘馕觥?5/16三引物Ⅰ和引物Ⅱ局部發(fā)生堿基互補配對而失效引物自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補配對而失效DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸連續(xù)結合到雙鏈DNA片段的引物鏈上33、略

【分析】【分析】

PCR循環(huán)可分為高溫變性；低溫復性、中溫延伸三步。

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。唬?）基因表達載體的構建；（3）將目的基因導入受體細胞；（4）目的基因的檢測與鑒定。

（1）

采用PCR法擴增酶D基因；首先要依據(jù)基因兩端的堿基序列設計引物，同時從擬南芥基因文庫中獲取轉運肽基因，由圖可知，需用ClaⅠ限制酶（兩個基因都含有該酶切位點）和DNA連接酶處理兩個基因，得到A；D端相連的融合基因。

（2）

用PCR法擴增酶D基因時；PCR循環(huán)可分為高溫變性；低溫復性、中溫延伸三步，第三步使用的是耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）。

（3）

將上述融合基因插入圖乙所示Ti質粒的T-DNA中；構建表達載體即重組質粒并導入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素（由圖可知，表達載體含四環(huán)素抗性基因，能產(chǎn)生抗四環(huán)素物質，以此達到篩選的目的）的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落。

（4）

剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間，此過程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因導入油菜細胞，經(jīng)篩選后再經(jīng)過植物組織培養(yǎng)技術培養(yǎng)獲得轉基因油菜?！窘馕觥?1)引物ClaIDNA連接AD

(2)變性復性延伸#耐高溫的DNA聚合酶##Taq酶#

(3)#基因表達載體##重組質粒#四環(huán)素。

(4)利用農(nóng)桿菌將融合基因導入油菜細胞植物組織培養(yǎng)34、略

【分析】【分析】

PCR反應過程:變性→復性→延伸。變性：當溫度上升