2025年滬科新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年滬科新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷476考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、某小鼠生活過(guò)程中被多種病原體感染過(guò)，科學(xué)家以該小鼠為實(shí)驗(yàn)材料，利用單克隆抗體技術(shù)，獲得了抗某種病原體的髙純度單克隆抗體。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.被多種病原體感染過(guò)的小鼠體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生多種漿細(xì)胞B.經(jīng)細(xì)胞融合后形成的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞可分泌多種特異性抗體C.單克隆抗體特異性強(qiáng)是因?yàn)樗兌雀?，只能與特定的抗原結(jié)合D.單克隆抗體的制備過(guò)程中應(yīng)用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合技術(shù)2、關(guān)于DNA重組技術(shù)中基本工具的敘述，正確的是（）A.限制性?xún)?nèi)切酶的作用部位是特定的兩個(gè)核苷酸之間的氫鍵B.目的基因經(jīng)限制性?xún)?nèi)切酶切割后一定會(huì)形成黏性末端C.DNA連接酶用來(lái)連接兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵D.質(zhì)粒DNA分子上一定含有抗四環(huán)素基因3、下列有關(guān)植物細(xì)胞工程應(yīng)用的敘述，不正確的是（）A.利用組織培養(yǎng)技術(shù)培育脫毒苗，獲得具有抗病毒的新品種B.利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得人工種子，能保持親本的優(yōu)良性狀C.利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得紫草素，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)D.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得“蘿卜-甘藍(lán)”，克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙4、利用菠蘿蜜制作果醋的大致流程為：先在滅菌的果肉勻漿中接種酵母菌，發(fā)酵6天后，再接入活化的醋酸桿菌，發(fā)酵5天，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.乙醇既是醋酸發(fā)酵的底物，又可以抑制雜菌繁殖B.酵母菌和醋酸桿菌均以二分裂的方式進(jìn)行增殖C.酵母菌和醋酸桿菌發(fā)酵過(guò)程中控制通氣的情況不同D.接入醋酸桿菌后，應(yīng)適當(dāng)升高發(fā)酵溫度5、在基因工程操作中，通常需要利用質(zhì)粒作為載體將基因送入受體細(xì)胞。如圖1所示為pUC18/19的結(jié)構(gòu)示意圖（AmpR是氨芐青霉素抗性基因）；pUC18和pUC19除了MCS序列不同外，其他序列完全相同。圖2為pUC18和MCS序列。以下相關(guān)敘述正確的是（）

A.由環(huán)狀質(zhì)粒pUC18/19得到圖2中的單鏈結(jié)構(gòu)，只需要用到DNA解旋酶B.由質(zhì)粒pUC18和pUC19形成的圖2中的單鏈，彼此不能完全互補(bǔ)配對(duì)C.用BcgⅠ限制酶對(duì)質(zhì)粒和目的基因進(jìn)行酶切，導(dǎo)入成功的受體細(xì)胞的培養(yǎng)基中不需要添加氨芐青霉素D.若將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中，需使細(xì)胞處于興奮狀態(tài)6、下列關(guān)于DNA相關(guān)實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.可利用DNA不溶于酒精的特點(diǎn)來(lái)提取DNAB.可利用洋蔥研磨液離心后的沉淀物來(lái)提取DNAC.PCR中通過(guò)調(diào)節(jié)溫度來(lái)控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合D.瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物時(shí)，需將核酸染料加入瓊脂糖溶液中7、下列哪項(xiàng)不是蛋白質(zhì)工程的基本思路（）A.通過(guò)改造或合成基因獲得所需要的蛋白質(zhì)B.從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)C.根據(jù)所預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)相應(yīng)的氨基酸序列D.根據(jù)推測(cè)的氨基酸序列，便能確定唯一對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列8、下圖為利用重疊延伸PCR的方法在蛋白A基因中部引入定點(diǎn)突變（A/T堿基對(duì)變?yōu)镚/C）的過(guò)程。該過(guò)程需設(shè)計(jì)四種引物；其中引物A；D與蛋白A基因的兩端完全配對(duì)，引物B、C雖與蛋白A基因中部配對(duì)，但在欲引入突變的位置替換為突變后的堿基。通過(guò)多次獨(dú)立的PCR達(dá)到目的。

下列說(shuō)法不正確的是（）A.PCR1所用引物應(yīng)為引物A和BB.PCR2至PCR4依次以PCR1至PCR3的產(chǎn)物為模板C.PCR3無(wú)需額外加入引物D.PCR4的作用是大量擴(kuò)增突變基因9、從紅豆杉細(xì)胞中提取的紫杉醇是目前最好的抗腫瘤藥物之一。為提高紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)物中紫杉醇的產(chǎn)量；研究人員構(gòu)建紫杉醇合成關(guān)鍵酶基因（Bapt）的超表達(dá)載體，并將其導(dǎo)入紅豆杉細(xì)胞，具體流程如下圖。相關(guān)說(shuō)法正確的是（）

A.過(guò)程①和②使用的酶均為DNA聚合酶B.p1303載體上可能含有增強(qiáng)Bapt基因表達(dá)的序列C.可使用Bapt基因制成的探針檢測(cè)過(guò)程⑤是否成功D.改造的紅豆杉細(xì)胞需組織培養(yǎng)至完整植株再進(jìn)行紫杉醇提取評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)10、基因工程利用某目的基因（圖甲）和Pl噬菌體載體（圖乙）構(gòu)建重組DNA；限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是BglⅡ；EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析正確的是（）

A.構(gòu)建重組DNA時(shí)，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌體載體B.構(gòu)建重組DNA時(shí)，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌體載體C.圖乙中的P1噬菌體載體只用EcoRⅠ切割后，含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，再用DNA連接酶連接，只能產(chǎn)生一種重組DNA11、抗菌肽又名多肽抗生素，廣泛存在于昆蟲(chóng)以及兩棲類(lèi)動(dòng)物、哺乳動(dòng)物體內(nèi)，具有廣譜抗菌活性。其作用原理是在細(xì)菌細(xì)胞膜上形成跨膜的離子通道，造成細(xì)胞內(nèi)容物泄漏，最終導(dǎo)致細(xì)菌死亡。最新研究表明，某些抗菌肽對(duì)癌細(xì)胞甚至感染了病毒的宿主細(xì)胞均具有殺傷作用。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.從免疫調(diào)節(jié)的方式分析，抗菌肽參與特異性免疫過(guò)程B.抗菌肽改變了細(xì)胞膜的通透性，使細(xì)胞不能保持正常滲透壓而死亡C.利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)抗菌肽時(shí)，常選用大腸桿菌作為受體菌D.對(duì)抗菌肽的研究可為治療癌癥、新型冠狀病毒肺炎等提供新思路12、白地霉侵染是導(dǎo)致柑橘酸腐病的主要原因，實(shí)驗(yàn)證明桔梅奇酵母通過(guò)分泌普切明酸對(duì)白地霉具有生物防治能力。已知鐵是真菌生長(zhǎng)的必需元素，是胞內(nèi)重要酶活性中心的組成部分。普切明酸是桔梅奇酵母產(chǎn)生的一種水溶性鐵螯合劑，能快速在培養(yǎng)基中擴(kuò)散并與其中的Fe3+形成穩(wěn)定紅色復(fù)合物。研究配制的含有不同濃度FeCl3的培養(yǎng)基如下表所示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為隨FeCl3濃度增大，抑菌圈紅色加深但變窄，如下圖所示。相關(guān)敘述正確的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水瓊脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素，瓊脂不是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.白地霉采用了平板劃線法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.結(jié)果表明，F(xiàn)eCl3濃度增大，普切明酸與Fe3+結(jié)合的數(shù)量減少D.結(jié)果表明，F(xiàn)eCl3能降低桔梅奇酵母對(duì)白地霉的防治效果13、下列有關(guān)小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.精子在獲能液中于37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)的目的是使精子獲得能量B.分割的胚胎細(xì)胞有相同的遺傳物質(zhì)，發(fā)育成的個(gè)體沒(méi)有形態(tài)學(xué)差異C.胚胎干細(xì)胞具有自我更新能力和分化潛能，可以分化形成各種組織D.囊胚期細(xì)胞開(kāi)始分化，其增殖過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生基因突變和染色體變異14、體外受精和胚胎移植都是在醫(yī)學(xué)和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上應(yīng)用較多的胚胎工程技術(shù)。判斷下列相關(guān)表述錯(cuò)誤的是（）A.精子需要獲能才能與卵子結(jié)合，而卵子一經(jīng)排出就具備受精能力B.精子入卵后，卵細(xì)胞膜會(huì)發(fā)生反應(yīng)阻止其他精子入卵C.經(jīng)胚胎移植產(chǎn)生的后代，其遺傳特性與受體保持一致D.進(jìn)行胚胎移植前，要對(duì)供體和受體進(jìn)行免疫檢查，防止發(fā)生免疫排斥反應(yīng)15、在中國(guó)的傳說(shuō)中，醋最早是由“酒圣”杜康之子發(fā)明。杜康的兒子墨塔在-．次釀酒時(shí)發(fā)酵過(guò)頭，直至第21天開(kāi)缸時(shí)，發(fā)現(xiàn)酒液已變酸，但香氣撲鼻，且酸甜可口，于是墨塔便把“廿一日”加一“西”字，給這種酸水起名為“醋”。下列敘述正確的是（）A.酒發(fā)酵初期通入氧氣的目的是促進(jìn)酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量增殖B.酒精是在酵母菌細(xì)胞的線粒體中產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀試劑檢測(cè)C.墨塔釀酒反成醋的原因可能是發(fā)酵裝置密封不嚴(yán)或發(fā)酵裝置沒(méi)有清洗干凈D.釀酒時(shí)糖類(lèi)未耗盡，酵母菌的發(fā)酵也會(huì)停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多16、淀粉經(jīng)淀粉酶水解后得到的產(chǎn)物是重要的工業(yè)原料；但工業(yè)化生產(chǎn)常需在高溫條件下進(jìn)行，而現(xiàn)有的淀粉酶耐熱性不強(qiáng)，科研人員發(fā)現(xiàn)將淀粉酶（AmyS1）第27位的亮氨酸替換為天冬氨酸能產(chǎn)生耐熱性高的淀粉酶（AmyS2），由此科研人員根據(jù)AmyS2的氨基酸序列設(shè)計(jì)并人工合成了AmyS2基因，將其導(dǎo)入芽孢桿菌內(nèi)，具體過(guò)程如下圖所示。最終結(jié)果表明，與導(dǎo)入質(zhì)粒B相比，導(dǎo)入質(zhì)粒C的芽孢桿菌培養(yǎng)液中更易獲得并提純AmyS2．下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.獲得AmyS2基因并將其導(dǎo)入芽孢桿菌得到AmyS2的過(guò)程是通過(guò)基因工程實(shí)現(xiàn)的B.構(gòu)建質(zhì)粒C時(shí)需用限制酶Eco52I和BamHI同時(shí)切割質(zhì)粒B和信號(hào)肽基因C.信號(hào)肽基因表達(dá)的產(chǎn)物可幫助核糖體上合成的AmyS2進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體D.可用PCR技術(shù)檢測(cè)芽孢桿菌的DNA上是否插入了AmyS2基因17、下列關(guān)于試管嬰兒和克隆猴的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.受精過(guò)程中，透明帶和卵細(xì)胞膜的反應(yīng)保證了受精卵染色體數(shù)目的正常B.克隆猴的性狀表現(xiàn)與細(xì)胞核供體的一模一樣，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性C.試管嬰兒的生殖方式屬于無(wú)性生殖，克隆猴的生殖方式屬于有性生殖D.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”在操作上唯一的區(qū)別是前者需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)18、20世紀(jì)70年代以后；以基因工程為代表的一大批生物技術(shù)成果，進(jìn)入人類(lèi)的生產(chǎn)和生活，特別是在醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上發(fā)揮了極大的作用，但是與其他高新技術(shù)一樣，生物技術(shù)也同樣具有雙刃劍效應(yīng)。如同其他高新技術(shù)一樣，轉(zhuǎn)基因成果和轉(zhuǎn)基因技術(shù)也需要你的理性看待。在轉(zhuǎn)基因生物安全方面；

（1）你認(rèn)為轉(zhuǎn)基因生物有哪些優(yōu)點(diǎn)，①____________②___________③__________。

（2）你認(rèn)為轉(zhuǎn)基因生物有哪些缺點(diǎn)，①____________②___________③__________。

（3）你對(duì)于轉(zhuǎn)基因生物的態(tài)度是__________。19、本課題對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有___________和___________發(fā)酵兩種。纖維素酶的測(cè)定方法，一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的__________進(jìn)行________的測(cè)定。20、醋酸菌是一種____________細(xì)菌。醋酸生成反應(yīng)式是_____________________。21、酵母菌是______________微生物。酵母菌進(jìn)行有氧呼吸的反應(yīng)式如下：______________________；酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸的反應(yīng)式如下：_________________。22、_________℃左右最適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在_______________℃。23、___________（簡(jiǎn)稱(chēng)PCR）是一種____________迅速_______________的技術(shù)，它能以極少數(shù)的DNA為模板，在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝。24、隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的飛速發(fā)展；轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物相繼問(wèn)世，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物培育過(guò)程中都要用到的生物技術(shù)包括______。

（2）核移植是動(dòng)物克隆的第一步，包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植，其中后者更易成功，原因是______。核移植常用處于______（填時(shí)期）的______為受體細(xì)胞。

（3）在“試管動(dòng)物”的培育過(guò)程中，常采用______（填激素名稱(chēng)）處理可使雌性個(gè)體一次排出多枚卵母細(xì)胞。從雄性個(gè)體采集的精子需______后才能進(jìn)行受精作用；防止多精入卵的兩道屏障依次為_(kāi)_____；卵細(xì)胞膜反應(yīng)。

（4）若考慮環(huán)境承載力，轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物不宜放置到自然環(huán)境中，這遵循了生態(tài)工程的______原理。25、蛋白質(zhì)工程是指以______作為基礎(chǔ)，通過(guò)______，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行_____，或制造一種______，以滿(mǎn)足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)______的蛋白質(zhì)）

26、基因表達(dá)載體的組成及其作用。

一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦_(dá)_____________評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共18分)27、生殖性克隆是指通過(guò)克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個(gè)體。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯(cuò)誤28、我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管。（選擇性必修3P104）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共4分)29、（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮______、______和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、______、______等優(yōu)點(diǎn)；因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。

（2）在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行________（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和______；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能__________。

（3）若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的_______。

（4）通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的____________。

（5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_________。

（6）若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)_______處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。30、Hela細(xì)胞系是人工培養(yǎng)具有無(wú)限增殖能力的水生瘤細(xì)胞系；在世界各地的相關(guān)實(shí)驗(yàn)室中為研究者提供了相同的研究對(duì)象?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）Hela細(xì)胞源自一位美國(guó)婦女的宮頸癌細(xì)胞，目前實(shí)驗(yàn)室中為了進(jìn)步研究Hela細(xì)胞，需進(jìn)行___________(填“原代”或“傳代”)培養(yǎng)。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，需要用胰蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是________________________________________________。

（2）某小組為研究葡萄糖饑餓對(duì)Hela細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制情況，其他營(yíng)養(yǎng)條件適宜，用不同葡萄糖濃度的培養(yǎng)基，培養(yǎng)Hela細(xì)胞24h，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示：。葡萄糖濃度（mmol:L-1）Hela細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率%056．161．036．301．525．002．016．44

該實(shí)驗(yàn)_____________(填“需要”或“不需要”)另設(shè)對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：葡萄糖濃度與Hela細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率的關(guān)系是____________________。

（3）體內(nèi)低濃度葡萄糖可_________________癌細(xì)胞的增殖，為腫瘤的限食療法提供理論依據(jù)。Hela細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，例如，它幫助科學(xué)家首次實(shí)現(xiàn)了人源細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合。細(xì)胞融合技術(shù)的意義是__________________________________________。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共40分)31、科研人員發(fā)現(xiàn)了抗胰高血糖素受體的單克隆抗體具有降血糖的功能。為制備抗胰高血糖素受體的單克隆抗體；科研人員以小鼠為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)流程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）為制備抗胰高血糖素受體的單克隆抗體，科研人員以_________作為抗原處理小鼠使其成為免疫小鼠。制備單克隆抗體時(shí)，需將該抗原先后多次接種于小鼠體內(nèi)，其目的是_____________。

（2）與植物細(xì)胞融合相比，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素是_____________。經(jīng)過(guò)第一次篩選獲得______細(xì)胞，將其轉(zhuǎn)移到含_________（天然成分）的培養(yǎng)基中，并置于含________+5%CO2的混合氣體的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，CO2的主要作用是_____________。該實(shí)驗(yàn)過(guò)程中第二次篩選的原理是__________。

（3）請(qǐng)從激素調(diào)節(jié)的角度分析，抗胰高血糖素受體的單克隆抗體具有降血糖功能的原因是_____________。32、結(jié)核病是由結(jié)核桿菌引起的人畜共患病。結(jié)核桿菌通常以氣溶膠形式傳播；氣溶膠顆粒被肺泡吞噬細(xì)胞吞噬，吞噬細(xì)胞破裂導(dǎo)致結(jié)核桿菌在機(jī)體內(nèi)進(jìn)一步傳播。羊癢病是由正常細(xì)胞的非致病性朊蛋白異構(gòu)化為癢病朊蛋白所致。為研制既能抗結(jié)核病又能抗羊癢病的雙抗羊，科學(xué)家進(jìn)行了如下操作。

（1）將山羊吞噬細(xì)胞特異性啟動(dòng)子MRS與小鼠SP110基因形成融合基因，用_______將融合基因與質(zhì)粒構(gòu)建成重組質(zhì)粒，導(dǎo)入山羊肺泡吞噬細(xì)胞（組2）。以_________（組3）和轉(zhuǎn)入空質(zhì)粒的山羊吞噬細(xì)胞為對(duì)照組（組1）。分別接種等量的結(jié)核桿菌，72h后加入_________使吞噬細(xì)胞破裂，取裂解液進(jìn)行涂布培養(yǎng)，結(jié)果如圖1。由圖可知小鼠SP110基因可用于雙抗羊的研制，依據(jù)是_________。

（2）非致病性朊蛋白是由山羊13號(hào)染色體上的PRNP基因的第三外顯子控制合成的；PRNP基因的結(jié)構(gòu)如圖2。

以L4和R1為識(shí)別位點(diǎn)設(shè)計(jì)TALEN敲除載體，對(duì)山羊成纖維細(xì)胞L4與R1之間的序列實(shí)施定點(diǎn)敲除。請(qǐng)根據(jù)上述信息，寫(xiě)出檢測(cè)敲除是否成功的思路，并描述敲除成功的實(shí)驗(yàn)結(jié)果_________。

（3）將TALEN敲除載體與供體DNA載體共轉(zhuǎn)化幼羊成纖維細(xì)胞；可將SP110基因定點(diǎn)敲入PRNP基因的第三外顯子中，原理如圖3。請(qǐng)指出圖4中的數(shù)字分別代表的結(jié)構(gòu)。

1_________2________3_________4___________經(jīng)_________檢測(cè)；成纖維細(xì)胞的SP110基因表達(dá)量明顯下降。

（4）欲用上述細(xì)胞獲得雙抗羊，需要用到的技術(shù)有__________。33、玉米是我國(guó)重要的農(nóng)作物；研究種子發(fā)育的機(jī)理對(duì)培育高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的玉米新品種具有重要作用。

（1）玉米果穗上的每一個(gè)籽粒都是受精后發(fā)育而來(lái)。我國(guó)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了甲品系玉米，其自交后的果穗上出現(xiàn)嚴(yán)重干癟且無(wú)發(fā)芽能力的籽粒，這種異常籽粒約占1/4。籽粒正常和干癟這一對(duì)相對(duì)性狀的遺傳遵循孟德?tīng)柕腳_______定律。上述果穗上的正常籽粒均發(fā)育為植株，自交后，有些植株果穗上有約1/4干癟籽粒，這些植株所占比例約為_(kāi)_______。

（2）為闡明籽粒干癟性狀的遺傳基礎(chǔ)，研究者克隆出候選基因A/a。將A基因?qū)氲郊灼废抵?，獲得了轉(zhuǎn)入單個(gè)A基因的轉(zhuǎn)基因玉米。假定轉(zhuǎn)入的A基因已插入a基因所在染色體的非同源染色體上，請(qǐng)從下表中選擇一種實(shí)驗(yàn)方案及對(duì)應(yīng)的預(yù)期結(jié)果以證實(shí)“A基因突變是導(dǎo)致籽粒干癟的原因”________。

。實(shí)驗(yàn)方案預(yù)期結(jié)果I．轉(zhuǎn)基因玉米×野生型玉米。

II．轉(zhuǎn)基因玉米×甲品系。

III．轉(zhuǎn)基因玉米自交。

IV．野生型玉米×甲品系。

①正常籽粒：干癟籽?！?：1

②正常籽粒：干癟籽?！?：1

③正常籽粒：干癟籽粒≈7：1

④正常籽粒：干癟籽?！?5：1

（3）現(xiàn)已確認(rèn)A基因突變是導(dǎo)致籽粒干癟的原因，序列分析發(fā)現(xiàn)a基因是A基因中插入了一段DNA（見(jiàn)圖1），使A基因功能喪失。甲品系果穗上的正常籽粒發(fā)芽后，取其植株葉片，用圖1中的引物1、2進(jìn)行PCR擴(kuò)增，若出現(xiàn)目標(biāo)擴(kuò)增條帶則可知相應(yīng)植株的基因型為_(kāi)________。

（4）為確定A基因在玉米染色體上的位置，借助位置已知的M/m基因進(jìn)行分析。用基因型為mm且籽粒正常的純合子P與基因型為MM的甲品系雜交得F1，F(xiàn)1自交得F2。用M、m基因的特異性引物，對(duì)F1植株果穗上干癟籽粒（F2）胚組織的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增結(jié)果有1、2、3三種類(lèi)型，如圖2所示。

統(tǒng)計(jì)干癟籽粒（F2）的數(shù)量，發(fā)現(xiàn)類(lèi)型1最多、類(lèi)型2較少、類(lèi)型3極少。請(qǐng)解釋類(lèi)型3數(shù)量極少的原因________。34、閱讀以下材料；回答（1）～（4）題。

進(jìn)入21世紀(jì)以來(lái)；在短短的20年內(nèi)，全球已經(jīng)爆發(fā)了3次較大規(guī)模的冠狀病毒感染肺炎事件。此次SARS-CoV-2疫情，是聯(lián)合國(guó)成立以來(lái)傳播和爆發(fā)范圍最大的一次疫情。它有以下特點(diǎn)：一是傳播力強(qiáng)，基本傳染數(shù)（RO）高達(dá)2．70～3．77；二是攻擊能力大，可以入侵多器官，不單單是病毒性肺炎；三是潛伏期難確定，出現(xiàn)了潛伏期超長(zhǎng)病例；四是癥狀消失之后，還可以排毒；五是沒(méi)有癥狀也可以高效傳播。因此，SARS-CoV-2堪稱(chēng)自本世紀(jì)以來(lái)3種冠狀病毒中最“狡猾”的。

SARS-CoV-2是一種RNA病毒；它的外殼上有刺突狀的S蛋白，S蛋白上存在受體結(jié)合城（RBD），SAIRS-CoV-2通過(guò)S蛋白上的RBD與人體細(xì)胞表面受體血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）結(jié)合，進(jìn)入細(xì)胞大量復(fù)制。當(dāng)細(xì)胞檢測(cè)到病毒入侵時(shí)，會(huì)釋放干擾素啟動(dòng)免疫反應(yīng)，而大多數(shù)免疫反應(yīng)對(duì)宿主會(huì)造成不利影響。免疫性炎癥反應(yīng)以及產(chǎn)生的破壞性物質(zhì)的破壞性極強(qiáng)，大多數(shù)SARS-Cov-2的患者死于并發(fā)癥。臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)肺是“歸零地”，其損害范圍可以延伸到許多器官，包括心臟和血管；腎臟、腸道和大腦。由此可見(jiàn)，SARS-CoV-2的治療過(guò)程非常艱難，做好預(yù)防措施、研發(fā)SARS-CoV-2疫苗就尤為重要。而阻斷病毒表面受體結(jié)合城與細(xì)胞表面受體結(jié)合成為研發(fā)抗病毒藥物的思路。中和抗體就是這樣一種能夠識(shí)別病毒表面蛋白并阻止其與細(xì)胞受體結(jié)合的抗體。原理上，它能夠搶先細(xì)胞占據(jù)病毒表面受體結(jié)合域，使其無(wú)法與細(xì)胞結(jié)合。中和抗體治療是直接注射的方式，其作用不同于疫苗，疫苗是用抗原誘導(dǎo)人體產(chǎn)生抗體。

在這次疫情防控中；我國(guó)政府高度關(guān)注疫苗的研發(fā)進(jìn)展，并在世界疫苗研發(fā)中取得卓越成績(jī)。為盡早戰(zhàn)勝新冠病毒，全球已有12個(gè)國(guó)家批準(zhǔn)我國(guó)國(guó)藥集團(tuán)中國(guó)生物北京公司；北京科興中維公司的新冠病毒疫苗注冊(cè)上市或緊急使用，6款疫苗進(jìn)入Ⅲ期臨床試驗(yàn)。因其安全、有效、可及、可負(fù)擔(dān)贏得多國(guó)紛紛采購(gòu)，中國(guó)企業(yè)全速擴(kuò)產(chǎn)，為世界抗疫做出扎實(shí)貢獻(xiàn)。

（1）本文從哪些方面進(jìn)行了探討？______________

（2）由文章可知，SARS-Cov-2病毒由______________和______________兩種成分組成。進(jìn)入人體后，依靠______________與人體細(xì)胞______________結(jié)合進(jìn)入細(xì)胞并大量增殖；從而對(duì)人體產(chǎn)生危害。

（3）根據(jù)文章內(nèi)容和相關(guān)生物學(xué)原理判斷，下列敘述不正確的是___________

A．SARS-CoV-2進(jìn)入宿主細(xì)胞的過(guò)程利用了細(xì)胞膜流動(dòng)性的特點(diǎn)。

B．SARS-CoV-2感染人體后會(huì)抑制人體的免疫反應(yīng)。

C．SARS-CoV-2利用宿主細(xì)胞的mRNA；氨基酸、ATP等資源進(jìn)行增殖。

D．可利用帶標(biāo)記的基因探針對(duì)疑似感染者進(jìn)行病毒抗原檢測(cè)。

E．中和抗體通過(guò)與人體細(xì)胞表面受體結(jié)合從而阻止病毒的侵染。

（4）在利用疫苗進(jìn)行預(yù)防的同時(shí)，利用單克隆抗體進(jìn)行治療也很重要?？贵w由可變區(qū)（與抗原結(jié)合）和恒定區(qū)兩部分構(gòu)成，而由小鼠制備的鼠源單克隆抗體的恒定區(qū)容易觸發(fā)人體的免疫排斥反應(yīng)。請(qǐng)利用相關(guān)的生物學(xué)原理進(jìn)行分析，談?wù)効梢酝ㄟ^(guò)什么方法或技術(shù)對(duì)其進(jìn)行改造。______________。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、B【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；由于抗體具有特異性；一種抗體只能和相應(yīng)的抗原結(jié)合，該小鼠被多種病原體感染過(guò)，所以體內(nèi)抗體種類(lèi)多，每種抗體由相應(yīng)的漿細(xì)胞產(chǎn)生，所以小鼠體內(nèi)有多種漿細(xì)胞，A正確；

B；經(jīng)細(xì)胞融合后形成的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞最多只能分泌一種特異性抗體；B錯(cuò)誤；

C；單克隆抗體是單一的B淋巴細(xì)胞克隆的細(xì)胞群分泌的；所以抗體純度高，特異性強(qiáng)，只能與特定的抗原結(jié)合，C正確；

D；由分析可知；單克隆抗體的制備采用了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】2、C【分析】【分析】

DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）；DNA連接酶、運(yùn)載體．常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種。

【詳解】

A；限制性?xún)?nèi)切酶的作用部位是特定的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵；A錯(cuò)誤；

B；目的基因經(jīng)限制性?xún)?nèi)切酶切割后可能會(huì)形成黏性末端；也可能形成平末端，B錯(cuò)誤；

C；DNA連接酶用來(lái)連接兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵；C正確；

D；質(zhì)粒DNA分子上一般含有抗性基因；但不一定是抗四環(huán)素基因，也可能是抗青霉素基因等，D錯(cuò)誤。

故選C。3、A【分析】【分析】

植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖；作物脫毒、人工種子等）；作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）；細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

【詳解】

A；因?yàn)榉稚M織的病毒極少；甚至沒(méi)有病毒，所以將分生組織（如根尖、莖尖）進(jìn)行離體培養(yǎng)能獲得脫毒植株，但不能獲得抗病毒植株，A錯(cuò)誤；

B；利用組織培養(yǎng)技術(shù)為無(wú)性繁殖；能保持親本的優(yōu)良性狀，因此利用該技術(shù)獲得的人工種子，能保持親本的優(yōu)良性狀，B正確；

C；利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得紫草素是植物細(xì)胞工程的應(yīng)用；實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，C正確；

D；利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得“蘿卜-甘藍(lán)”；其重要意義在于克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，D正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】4、B【分析】【分析】

1；果酒制作的菌種是酵母菌；來(lái)源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心，原理是酵母菌在無(wú)氧環(huán)境下進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸醋菌；其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理是當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸醋菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸醋菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；當(dāng)缺少糖源時(shí)；醋酸醋菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?，同時(shí)乙醇還可以抑制雜菌繁殖，A正確；

B；酵母菌為真核生物；一般以出芽的方式繁殖，醋酸桿菌為原核生物，以二分裂的方式進(jìn)行增殖，B錯(cuò)誤；

C；酵母菌發(fā)酵過(guò)程中先通氣使其大量繁殖；再密閉發(fā)酵產(chǎn)乙醇；醋酸桿菌為好氧菌，需持續(xù)通入無(wú)菌氧氣，C正確；

D；酵母菌適宜溫度低于醋酸桿菌最適溫度；果酒發(fā)酵結(jié)束接入醋酸桿菌后，應(yīng)適當(dāng)升高發(fā)酵溫度，D正確。

故選B。5、C【分析】【分析】

基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲??；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】

A；將環(huán)狀質(zhì)粒打開(kāi)成圖2中的單鏈結(jié)構(gòu)需要用到限制酶（將環(huán)狀鏈切割成直鏈）及DNA解旋酶（解開(kāi)雙鏈變成單鏈）；A錯(cuò)誤；

B；pUC18和pUC19除了MCS序列不同外；其他序列完全相同。由圖可知，MCS序列已被切割，因此由質(zhì)粒pUC18和pUC19形成的圖2中的單鏈，彼此能完全互補(bǔ)配對(duì)，B錯(cuò)誤；

C；若使用了BcgⅠ限制酶同時(shí)對(duì)質(zhì)粒和目的基因進(jìn)行酶切；氨芐青霉素抗性基因被切斷而失活，故導(dǎo)入成功的受體細(xì)胞不能置于含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中，C正確；

D、若將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中，需用Ca2+處理細(xì)胞制備感受態(tài)細(xì)胞；D錯(cuò)誤。

故選C。6、B【分析】【分析】

DNA粗提?。豪肈NA與RNA；蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異；提取DNA，去除其他成分。DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60~80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會(huì)變性。

【詳解】

A；DNA不溶于酒精、某些蛋白質(zhì)能溶于酒精；可利用DNA不溶于酒精的特點(diǎn)來(lái)提取DNA，A正確；

B；可利用洋蔥研磨液離心后的上清液來(lái)提取DNA；B錯(cuò)誤；

C；溫度上升到90℃以上時(shí)；DNA雙鏈解開(kāi)、溫度下降到50℃時(shí)，DNA雙鏈重新互補(bǔ)配對(duì)，PCR中通過(guò)調(diào)節(jié)溫度來(lái)控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合，C正確；

D；核酸染料和DNA結(jié)合；使DNA顯示出顏色，瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物時(shí)，需將核酸染料加入瓊脂糖溶液中，D正確。

故選B。7、D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿(mǎn)足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求。

【詳解】

A；蛋白質(zhì)工程通過(guò)基因修飾或基因合成；對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，A不符合題意；

BC；蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）；BC不符合題意；

D；由于有的氨基酸可能由多個(gè)密碼子編碼；因此根據(jù)氨基酸序列推測(cè)的脫氧核苷酸序列可能不唯一，D符合題意。

故選D。8、B【分析】【分析】

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)；它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，PCR的最大特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加。

【詳解】

A、引物與模板的3，端結(jié)合；由圖PCR1的產(chǎn)物可知，PCR1所用引物應(yīng)為引物A和B，A正確；

B；由圖可知；PCR1和2均以原始DNA為模板，PCR3以PCR1和2的產(chǎn)物為模板，PCR4以PCR3產(chǎn)物為模板，B錯(cuò)誤；

C；由圖可知；兩條鏈互為模板和引物，故PCR3無(wú)需額外加入引物，C正確；

D；PCR4的作用是大量擴(kuò)增突變基因；得到大量的新的蛋白A基因，D正確。

故選B。9、B【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：分子水平鑒定用抗原—抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；①為逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程；需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化；②為PCR擴(kuò)增過(guò)程，該過(guò)程需要使用Taq酶，A錯(cuò)誤；

B；根據(jù)題干信息“研究人員構(gòu)建紫杉醇合成關(guān)鍵酶（Bapt）基因的超表達(dá)載體來(lái)提高紫杉醇產(chǎn)量”可知；p1303載體上可能含有增強(qiáng)子序列，作用是促進(jìn)Bapt基因的表達(dá)，B正確；

C；因?yàn)榧t豆杉細(xì)胞中本身存在Bapt基因；不管超表達(dá)載體是否成功導(dǎo)入，都能與Bapt基因探針形成雜交分子，因此不能通過(guò)Bapt基因探針來(lái)檢測(cè)步驟⑤是否成功，C錯(cuò)誤；

D；要獲得細(xì)胞產(chǎn)物；只需要培養(yǎng)到愈傷組織階段即可，不需要培育成完整的紅豆杉植株，D錯(cuò)誤。

故選B。二、多選題(共8題，共16分)10、A:B:C【分析】【分析】

一種限制酶只能識(shí)別一種核苷酸序列且在特定的位點(diǎn)對(duì)DNA分子進(jìn)行切割；切割出的末端有黏性末端和平末端兩種，具有相同黏性末端的DNA片段之間可以在DNA連接酶的作用下連接到一起。

【詳解】

A；如果用BglⅡ和Sau3AI切割目的基因；目的基因兩端將形成不同的黏性末端，同樣用BglⅡ和Sau3AI切割Pl噬菌體載體也形成這兩種相同的黏性末端，因此它們可構(gòu)成重組DNA，A正確；

B；由于Sau3AI的切割位點(diǎn)在EcoRI的左側(cè)；因此用EcoRI和Sau3AI切割目的基因，目的基因兩端將形成不同的黏性末端，同樣用EcoRI和Sau3AI切割Pl噬菌體載體也形成這兩種相同的黏性末端，因此它們可構(gòu)成重組DNA，B正確；

C；P1噬菌體載體為環(huán)狀DNA；其上只含有一個(gè)EcoRI的切點(diǎn)，因此用EcoRI切割后，該環(huán)狀DNA分子變?yōu)榫€性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，因此切割后含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，C正確；

D；從圖甲看出；用EcoRI切割目的基因后兩端各有一切口，與圖乙中EcoRI切口對(duì)接時(shí)，可有兩種可能，即可產(chǎn)生兩種重組DNA，D錯(cuò)誤。

故選ABC。11、B:D【分析】【分析】

1；病毒同所有生物一樣；具有繁殖、遺傳、變異、進(jìn)化的特點(diǎn)，病毒是一種體積非常微小，結(jié)構(gòu)極其簡(jiǎn)單的生物，僅由蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)組成，沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)。不能獨(dú)立生活，只能寄生在活細(xì)胞內(nèi)，并在寄主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行繁殖。一旦離開(kāi)了活細(xì)胞，病毒就無(wú)法生存，就會(huì)變成結(jié)晶體。

2；真菌較細(xì)菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)是真菌為真核微生物；含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體可對(duì)蛋白進(jìn)行加工和修飾。

【詳解】

A；通過(guò)題干信息可知；抗菌肽具有廣譜抗菌活性，抗菌肽不參與特異性免疫過(guò)程，A錯(cuò)誤；

B；根據(jù)題干信息；抗菌肽“在細(xì)菌細(xì)胞膜上形成跨膜的離子通道，造成細(xì)胞內(nèi)容物泄漏，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡”，即改變了細(xì)胞膜的通透性，使細(xì)胞不能保持正常滲透壓而死亡，B正確；

C；抗菌肽“是廣泛存在于昆蟲(chóng)以及兩棲類(lèi)動(dòng)物、哺乳動(dòng)物體內(nèi)的抗菌活性物質(zhì)”；即來(lái)源于真核細(xì)胞，如利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)提高抗菌肽的產(chǎn)量，但最好選擇真菌作為受體菌，因?yàn)檎婢钦婧思?xì)胞，繁殖速度快，遺傳物質(zhì)少，C錯(cuò)誤；

D；根據(jù)題干信息；“某些抗菌肽對(duì)癌細(xì)胞甚至病毒等均具有強(qiáng)有力的殺傷作用”，則對(duì)抗菌肽的研究可為治療癌癥、新型冠狀病毒肺炎等提供新思路，D正確。

故選BD。

【點(diǎn)睛】12、A:D【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。

2；微生物常見(jiàn)的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素；瓊脂是凝固劑的一種，并不是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在培養(yǎng)液中加入瓊脂可以使液體培養(yǎng)基成為瓊脂固體培養(yǎng)基，A正確；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接種都采用了涂布平板法；B錯(cuò)誤；

C、隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，普切明酸與Fe3+的結(jié)合增強(qiáng)；抑菌圈的紅色加深，C錯(cuò)誤；

D、普切明酸與Fe3+形成紅色復(fù)合物，但隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，抑菌圈變窄，說(shuō)明FeCl3能降低桔梅奇酵母對(duì)白地霉的防治效果；D正確。

故選AD。13、A:B【分析】【分析】

1；胚胎干細(xì)胞（1）哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng)ES或EK細(xì)胞；來(lái)源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來(lái)。（2）具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

2；胚胎分割的特點(diǎn)：來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)；胚胎分割可以看做動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一。

【詳解】

A、精子在獲能液中于37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)的目的是使精子獲能；具有受精“能力”，而不是獲得能量，A錯(cuò)誤；

B；分割的胚胎細(xì)胞有相同的遺傳物質(zhì)；但個(gè)體的性狀還受到環(huán)境的影響，因此發(fā)育成的個(gè)體有形態(tài)學(xué)差異，B錯(cuò)誤；

C；胚胎干細(xì)胞是從哺乳動(dòng)物的早期胚胎或原始性腺中獲得的；具有發(fā)育的全能性，具有自我更新能力和分化潛能，可以分化形成各種組織，C正確；

D；囊胚期細(xì)胞開(kāi)始分化；其增殖過(guò)程中進(jìn)行的是有絲分裂，該過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生基因突變和染色體變異，D正確。

故選AB。14、A:C:D【分析】【分析】

試管動(dòng)物是通過(guò)體外受精；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)；最終在受體的子宮中發(fā)育而來(lái)的動(dòng)物，屬于有性生殖過(guò)程。

【詳解】

A；采集來(lái)的精子必須獲能之后才具備與卵子完成受精的能力；卵子只有發(fā)育到MⅡ中期才具備與精子受精的能力，A錯(cuò)誤；

B；精子入卵后；卵細(xì)胞膜會(huì)發(fā)生卵細(xì)胞膜反應(yīng)，阻止其它精子的進(jìn)入，這是防止多精入卵受精的其中一個(gè)重要屏障，B正確；

C；供體胚胎與受體子宮建立的僅是生理和組織上的聯(lián)系；其遺傳物質(zhì)在孕育過(guò)程中不會(huì)發(fā)生任何變化，因此胚胎移植產(chǎn)生的后代，其遺傳特性不受到受體的影響，后代的遺傳特性與供體保持一致，C錯(cuò)誤；

D；受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；所以不必進(jìn)行免疫檢查，D錯(cuò)誤。

故選ACD。15、A:C:D【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類(lèi)型為異養(yǎng)兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理:當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；酵母菌是兼性厭氧型微生物；所以發(fā)酵初期通入氧氣的目的是促進(jìn)酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量增殖，A正確；

B；酒精是酵母菌無(wú)氧呼吸的產(chǎn)物；在酵母菌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中產(chǎn)生，可以用酸性重鉻酸鉀試劑檢測(cè)酒精的產(chǎn)生，B錯(cuò)誤；

C；酒變酸是醋酸桿菌發(fā)酵的結(jié)果；墨塔釀酒反成醋的原因可能是：發(fā)酵裝置密封不嚴(yán)，發(fā)酵裝置沒(méi)有清洗干凈，導(dǎo)致醋酸菌混入發(fā)酵液中，C正確；

D；在釀酒的過(guò)程中；糖類(lèi)即使未耗盡，酵母菌的發(fā)酵過(guò)程也會(huì)停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多，對(duì)發(fā)酵起抑制作用，導(dǎo)致酵母菌發(fā)酵停止，D正確；

故選ACD。16、A:B:C【分析】【分析】

基因工程：目的基因的篩選與獲??；構(gòu)建基因表達(dá)載體、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。

分泌蛋白的合成：首先；在游離的核糖體中以氨基酸為原料開(kāi)始多肽鏈的合成。當(dāng)合成了一段肽鏈后，這段肽鏈會(huì)與核糖體一起轉(zhuǎn)移到粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成過(guò)程，并且邊合成邊轉(zhuǎn)移到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)，再經(jīng)過(guò)加工；折疊，形成具有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜鼓出形成囊泡，包裹著蛋白質(zhì)離開(kāi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，到達(dá)高爾基體，與高爾基體融合，高爾基體對(duì)蛋白質(zhì)做進(jìn)一步的加工，然后形成包裹著蛋白質(zhì)的囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜，與細(xì)胞膜融合。

【詳解】

A；科研人員根據(jù)AmyS2的氨基酸序列設(shè)計(jì)并人工合成了AmyS2基因；因此獲得AmyS2基因并將其導(dǎo)入芽孢桿菌得到AmyS2的過(guò)程是通過(guò)蛋白質(zhì)工程和基因工程實(shí)現(xiàn)的，A錯(cuò)誤；

B；BamHI會(huì)破壞AmyS2基因；B錯(cuò)誤；

C；在分泌蛋白的合成過(guò)程中；信號(hào)肽序列可幫助肽鏈進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)被切割，因此信號(hào)肽基因表達(dá)的產(chǎn)物可幫助核糖體上合成的AmyS2進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，但不能引導(dǎo)其進(jìn)入高爾基體，C錯(cuò)誤；

D；可用PCR技術(shù)檢測(cè)芽孢桿菌的DNA上是否插入了AmyS2基因；如果經(jīng)過(guò)PCR擴(kuò)增，不出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物，說(shuō)明沒(méi)有插入基因，反之，則成功插入，D正確。

故選ABC。17、B:C:D【分析】【分析】

1；“試管嬰兒”是利用體外授精和胚胎移植的方法；解決不孕夫婦的生育問(wèn)題。

2；設(shè)計(jì)試管嬰兒概念：是指體外受精形成的胚胎在植入母體孕育前；根據(jù)人們的需要，將胚胎的一個(gè)細(xì)胞取出，進(jìn)行某些設(shè)計(jì)，當(dāng)檢測(cè)結(jié)果符合人們需要時(shí)，再把胚胎植入母體孕育。

【詳解】

A；透明帶和卵細(xì)胞膜的反應(yīng)可以防止多精入卵；從而保證受精卵染色體數(shù)目的正常，A正確；

B；由于細(xì)胞質(zhì)中也存在基因控制生物性狀；所以克隆猴的性狀不完全與細(xì)胞核供體的相同，B錯(cuò)誤；

C；試管嬰兒技術(shù)與正常的生殖過(guò)程相比僅僅是受精和早期胚胎發(fā)育的場(chǎng)所不同；實(shí)質(zhì)沒(méi)有變化，屬于有性生殖；而克隆猴是將動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞后發(fā)育成的新個(gè)體，屬于無(wú)性生殖的范疇，C錯(cuò)誤；

D；設(shè)計(jì)試管嬰兒與試管嬰兒的主要區(qū)別是前者在胚胎植入前需進(jìn)行遺傳學(xué)診斷；設(shè)計(jì)試管嬰兒有時(shí)除體外受精、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植外還需要借助其它技術(shù)，D錯(cuò)誤。

故選BCD。三、填空題(共9題，共18分)18、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人們的愿望；進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦子生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫做DNA重組技術(shù)。

基因工程的原理是基因重組；其優(yōu)點(diǎn)是打破了生殖隔離。但由于科學(xué)發(fā)展水平的限制，目前科學(xué)家對(duì)基因的結(jié)構(gòu)；基因間的相互作用以及基因的調(diào)控機(jī)制等都了解得相當(dāng)有限；再加上轉(zhuǎn)移的基因雖然是功能已知的基因，但不少卻是異種生物的基因；同時(shí)，由于外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機(jī)的，因此在轉(zhuǎn)基因生物中，有時(shí)候會(huì)出現(xiàn)一些人們意想不到的后果。

【詳解】

（1）轉(zhuǎn)基因生物具有以下優(yōu)點(diǎn)：

作物產(chǎn)量高；能解決糧食短缺問(wèn)題；利用基因工程生產(chǎn)的抗蟲(chóng)作物能夠減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染；利用基因工程培育的生長(zhǎng)迅速；營(yíng)養(yǎng)品豐富的生物，能增加食物營(yíng)養(yǎng)，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能夠生產(chǎn)稀缺的生化藥物。

（2）轉(zhuǎn)基因生物受限于科學(xué)發(fā)展水平；可能會(huì)產(chǎn)生以下問(wèn)題：

轉(zhuǎn)基因生物與同種生物雜交；可能產(chǎn)生重組病菌；重組病毒或超級(jí)雜草；導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因生物的外源基因有可能與感染轉(zhuǎn)基因生物的某些細(xì)菌或病毒雜交，從而重組出對(duì)人類(lèi)或其他生物有害的病原體，可能使疾病的傳播跨越物種障礙。

（3）轉(zhuǎn)基因技術(shù)取得了巨大的成果；但科學(xué)技術(shù)是把雙刃劍，面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，而不能因噎廢食。

【點(diǎn)睛】

本題考查轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題，意在考查學(xué)生對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性問(wèn)題的識(shí)記與理解?！窘馕觥拷鉀Q糧食短缺問(wèn)題減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染增加食物營(yíng)養(yǎng)，提高附加值能產(chǎn)生有毒蛋白或新過(guò)敏原可能產(chǎn)生重組病菌、重組病毒或超級(jí)雜草可能使疾病的傳播跨越物種障礙趨利避害不能因噎廢食19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】液體發(fā)酵固體發(fā)酵葡萄糖定量20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】好氧C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】兼性厭氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO222、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2018～2523、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外擴(kuò)增DNA片段24、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物核移植的概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體，核移植得到的動(dòng)物稱(chēng)克隆動(dòng)物；

2；早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分；除無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，并需添加動(dòng)物血清等天然成分。

【詳解】

（1）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；試管動(dòng)物和克隆動(dòng)物分別在體外得到早期胚胎后；都要通過(guò)胚胎移植獲得新個(gè)體。

（2）核移植包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植；其中后者更易成功，原因是胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易，而體細(xì)胞分化程度高，全能性不易表達(dá)；核移植常用的減數(shù)第二次分裂中期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，其中去核的目的是避免原細(xì)胞核中遺傳物質(zhì)對(duì)克隆動(dòng)物的影響，保證克隆動(dòng)物的核遺傳物質(zhì)來(lái)自供體細(xì)胞。

（3）促性腺激素處理可促使雌性個(gè)體超數(shù)排卵；即使良種母牛一次排出多枚卵母細(xì)胞。精子需要經(jīng)過(guò)獲能處理才能受精；防止多精入卵的兩道屏障依次為透明帶反應(yīng)；卵細(xì)胞膜反應(yīng)。

（4）要考慮環(huán)境承載力；處理好生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡，這體現(xiàn)了生態(tài)工程的協(xié)調(diào)與平衡原理。

【點(diǎn)睛】

本題考查細(xì)胞工程、胚胎工程和生態(tài)工程的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解能力、獲取信息的能力和綜合運(yùn)用能力?！窘馕觥颗咛ヒ浦玻ɑ蚺咛サ脑缙谂囵B(yǎng)和胚胎移植）胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易MⅡ中期去核卵母細(xì)胞促性腺激素獲能透明帶反應(yīng)協(xié)調(diào)與平衡25、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系基因修飾或基因合成改造新的蛋白質(zhì)自然界已存在26、略

【分析】略【解析】目的基因標(biāo)記基因啟動(dòng)子終止子啟動(dòng)子上游RNA聚合酶終止子下游轉(zhuǎn)錄標(biāo)記四、判斷題(共2題，共18分)27、A【分析】【詳解】

生殖性克隆，即通常所說(shuō)的克隆人，通過(guò)克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個(gè)體，即通常所說(shuō)的克隆人，該說(shuō)法正確。28、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是一貫的、明確的，就是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管。

該說(shuō)法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共4分)29、略

【分析】【分析】

1；大腸桿菌屬于細(xì)菌；是原核生物。微生物營(yíng)養(yǎng)成分主要有碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等，另外還需要注意滲透壓、溫度、pH等條件。大腸桿菌常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料．微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無(wú)菌技術(shù)，防止外來(lái)雜菌的污染。

2；微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無(wú)菌操作。使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過(guò)程稱(chēng)為滅菌；常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過(guò)程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等。

【詳解】

（1）大腸桿菌具有體積??；結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點(diǎn)；培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。

（2）滅菌使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物；所以對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌；消毒使用較為溫和的物理或化學(xué)方法，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。

（3）稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)蝗缓髮⒉煌♂尪鹊木海謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合。

（4）對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀；大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。

（5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)；在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。

（6）因?yàn)橛械拇竽c桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素；并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記大腸桿菌的培養(yǎng)條件以及其作為遺傳實(shí)驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)，區(qū)分掌握不同材料消毒和滅菌的方法，識(shí)記菌種鑒定的方法等，屬于基礎(chǔ)題?！窘馕觥竣?溫度②.酸堿度③.易培養(yǎng)④.生活周期短⑤.滅菌⑥.消毒⑦.損傷DNA的結(jié)構(gòu)⑧.比例合適⑨.鑒定(或分類(lèi))⑩.將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生.?.滅菌30、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿(mǎn)瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2；培養(yǎng)條件：

（1）無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境：無(wú)菌--對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理；在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；無(wú)毒--定期更換培養(yǎng)液；防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)自身造成危害。

（2）營(yíng)養(yǎng)：

成分：所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同；例如需要有糖；氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。

培養(yǎng)基類(lèi)型：合成培養(yǎng)基（將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類(lèi)和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基）

（3）溫度和pH值：哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜；多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

【詳解】

（1）目前實(shí)驗(yàn)室中為了進(jìn)一步研究Hela細(xì)胞；需進(jìn)行傳代培養(yǎng)；由于是在多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液適宜的pH范圍內(nèi)，胃蛋白酶（最適pH是強(qiáng)酸性）已失去活性，所以在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，需要用胰蛋白酶處理制備細(xì)胞懸液。

（2）分析表格數(shù)據(jù)；該實(shí)驗(yàn)需要另設(shè)對(duì)照組，觀察在正常條件下細(xì)胞生長(zhǎng)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：葡萄糖濃度與Hela細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率的關(guān)系是葡萄糖濃度越低，Hela細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率越高。

（3）體內(nèi)低濃度葡萄糖可抑制癌細(xì)胞的增殖；為腫瘤的限食療法提供理論依據(jù)。兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合形成的單核細(xì)胞叫做雜交細(xì)胞，細(xì)胞融合技術(shù)的意義是突破了有性雜交局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)內(nèi)容，重點(diǎn)考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程和條件，相關(guān)知識(shí)點(diǎn)只需考生識(shí)記即可正確作答，屬于考綱識(shí)記層次的考查。對(duì)于此類(lèi)試題，考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中，應(yīng)該注意構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)?！窘馕觥總鞔诙鄶?shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH范圍內(nèi)，胃蛋白酶已失去活性需要葡萄糖濃度越低，Hela細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率越高抑制突破了有性雜交局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能六、綜合題(共4題，共40分)31、略

【分析】【分析】

1；單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原；從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。

2；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、振動(dòng)）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）。

【詳解】

（1）制備單克隆抗體時(shí)；應(yīng)注射相應(yīng)的抗原，則制備抗胰高血糖素受體的單克隆抗體時(shí)，以胰高血糖素受體作為抗原處理小鼠使其成為免疫小鼠。制備單克隆抗體時(shí)，多次接種抗原可加強(qiáng)免疫，增加抗體和記憶細(xì)胞的數(shù)量。

（2）與植物細(xì)胞融合相比，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素是滅活的病毒。經(jīng)過(guò)第一次篩選可以獲得雜交瘤細(xì)胞，將其轉(zhuǎn)移到含動(dòng)物血清的的培養(yǎng)基中，細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含95%空氣加5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的主要作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH。第二次篩選的目的是獲得能產(chǎn)生抗胰高血糖素受體的抗體的雜交瘤細(xì)胞；依據(jù)的原理是抗原和抗體的特異性結(jié)合。

（3）抗胰高血糖素受體的單克隆抗體與胰高血糖素受體結(jié)合；使胰高血糖素不能發(fā)揮升血糖的作用，從而起到降血糖的功能。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合單克隆抗體制備的流程圖，主要考查單克隆抗體的制備過(guò)程，要求考生識(shí)記單克隆抗體制備的具體步驟，能結(jié)合題圖和所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題?！窘馕觥恳雀哐撬厥荏w加強(qiáng)免疫，增加抗體和記憶細(xì)胞的數(shù)量滅活的病毒雜交瘤動(dòng)物血清95%空氣維持培養(yǎng)液的pH抗原和抗體特異性結(jié)合抗胰高血糖素受體的單克隆抗體與胰高血糖素受體結(jié)合，使胰高血糖素不能發(fā)揮升血糖的作用32、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)需要限制酶切割目的基因和質(zhì)粒；然后用DNA連接酶將目的基因和質(zhì)粒連接，形成重組質(zhì)粒，組2是實(shí)驗(yàn)組，導(dǎo)入了重組質(zhì)粒，對(duì)照分別導(dǎo)入空質(zhì)粒和只含目的基因，分別為組3和組1，組3中轉(zhuǎn)入廣泛表達(dá)小鼠SP110基因的重組質(zhì)粒的山羊吞噬細(xì)胞。吞噬細(xì)胞破裂的方式是加入蒸餾水。由圖可知小鼠SP110基因可用于雙抗羊的研制，依據(jù)是組2的吞噬細(xì)胞裂解后釋放的結(jié)核桿菌數(shù)量與組3接近，顯著小于組1。

（2）檢測(cè)敲除是否成功的思路及實(shí)驗(yàn)結(jié)果為：提取成纖維細(xì)胞DNA；根據(jù)第三外顯子的序列設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行PCR，并對(duì)PCR產(chǎn)物用BamHI進(jìn)行切割，電泳，若僅有一條帶，則敲除成功。（或提取成纖維細(xì)胞DNA，根據(jù)第三外顯子的序列設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行PCR，并對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，若不存在GGATCC序列，則敲除成功。）

（3）圖4表示基因表達(dá)載體；其上包括有啟動(dòng)子；終止子、目的基因和標(biāo)記基因等，所以1是L4序列，2是MRS啟動(dòng)子，3是終止子，4是R1序列，MRS是山羊吞噬細(xì)胞特異性啟動(dòng)子，經(jīng)抗原抗體雜交技術(shù)檢測(cè)，成纖維細(xì)胞的SP110基因表達(dá)量明顯下降。

（4）欲用上述細(xì)胞獲得雙抗羊；需要用到的技術(shù)有：核移植；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生能從題圖中提取有效信息并結(jié)合這些信息，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確結(jié)論的能力?！窘馕觥肯拗泼负虳NA連接酶轉(zhuǎn)入廣泛表達(dá)小鼠SP110基因的重組質(zhì)粒的山羊吞噬細(xì)胞蒸餾水組2的吞噬細(xì)胞裂解后釋放的結(jié)核桿菌數(shù)量與組3接近，顯著小于組1提取成纖維細(xì)胞DNA，根據(jù)第三外顯子的序列設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行PCR，并對(duì)PCR產(chǎn)物用BamHI進(jìn)行切割，電泳，若僅有一條帶，則敲除成功。（或提取成纖維細(xì)胞DNA，根據(jù)第三外顯子的序列設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行PCR，并對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，若不存在GGATCC序列，則敲除成功。）L4序列MRS啟動(dòng)子終止子R1序列抗原抗體雜交技術(shù)核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植33、略

【分析】【分析】

1；基因分離定律的實(shí)質(zhì)：進(jìn)行有性生殖的生物在進(jìn)行減數(shù)分裂產(chǎn)生配子時(shí)；等位基因隨同源染色體分離而分離，分別進(jìn)入不同的配子中，隨配子獨(dú)立遺傳給后代；位于性染色體上的基因控制的性狀的遺傳總是和性別相關(guān)聯(lián)，叫伴性遺傳，伴性遺傳也遵循分離定律。

2；基因突變：（1）DNA分子中發(fā)生堿基的替換、增添或缺失；而引起的基因堿基序列的改變，叫作基因突變。（2）基因突變的特點(diǎn)：普遍性、隨機(jī)性、不定向性、多害少利性等。

（1）

分析題干信息：“甲品系玉米；其自交后的果穗上出現(xiàn)嚴(yán)重干癟且無(wú)發(fā)芽能力的籽粒，這種異常籽粒約占1/4”，即甲