2025年浙教版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年浙教版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、科研人員通過研究利用來自埃及血吸蟲的特殊蛋白作為治療性分子，來減少化療誘導(dǎo)的出血性膀胱炎患者的出血和疼痛癥狀。若通過破解埃及血吸蟲的特殊蛋白的結(jié)構(gòu)從而推出其基因結(jié)構(gòu)，以指導(dǎo)對(duì)?；虻男薷?，從而讓牛也能產(chǎn)生埃及血吸蟲的特殊蛋白，此過程的名稱和依據(jù)的原理分別是（）A.基因突變：DNA→RNA→蛋白質(zhì)B.蛋白質(zhì)工程：RNA→RNA→蛋白質(zhì)C.基因工程：DNA→RNA→蛋白質(zhì)D.蛋白質(zhì)工程：蛋白質(zhì)→RNA→DNA→RNA→蛋白質(zhì)2、印度沙漠貓是一種珍稀貓科動(dòng)物,通過胚胎工程技術(shù),可以讓家貓代孕而繁育,主要步驟如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是()

A.步驟甲、乙分別是指精子獲能、胚胎分割B.誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細(xì)胞C.受精卵發(fā)育成早期胚胎所需營養(yǎng)主要來源于培養(yǎng)液D.步驟甲使用的培養(yǎng)液和早期胚胎培養(yǎng)液成分基本相同3、乳酸乙酯是白酒中重要的呈香物質(zhì)，由乳酸脫氫酶催化產(chǎn)生，影響白酒品質(zhì)和風(fēng)格?？蒲腥藛T將釀酒酵母質(zhì)粒上的丙酮酸脫氫酶基因（PD）替換為植物乳桿菌中的乳酸脫氫酶基因（L-PG），可獲得乳酸乙酯高產(chǎn)菌株，該過程如下圖所示。下列關(guān)于該過程的分析不合理的是（）

A.轉(zhuǎn)入的L-PG基因表達(dá)產(chǎn)物不能影響釀酒酵母活性B.可以利用PCR技術(shù)篩選含有L-PG基因的受體細(xì)胞C.通過同源重組實(shí)現(xiàn)酵母菌的PD基因被替換為L-PG基因D.標(biāo)記基因Ampr可檢測(cè)是否成功構(gòu)建乳酸乙酯高產(chǎn)菌株4、下圖為單克隆抗體制備過程的示意圖。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.X細(xì)胞是從脾臟中提取的已免疫的B淋巴細(xì)胞B.Y細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞，必須取用培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞C.圖中的過程至少需要篩選兩次且方法不同，最終保留抗體檢測(cè)呈陽性的細(xì)胞D.圖中能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞在培養(yǎng)過程中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象5、自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別是()A.碳源B.氮源C.無機(jī)鹽D.特殊營養(yǎng)物質(zhì)6、黑茶是一種后發(fā)酵茶，通常用采摘的鮮茶經(jīng)過數(shù)道工序制成，富含多肽、氨基酸、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)。黑茶剛制成時(shí)有酒香氣，滑潤甘甜，保存時(shí)間越久的老茶，茶香味越濃厚。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.黑茶制作過程主要利用酵母菌等多種微生物進(jìn)行發(fā)酵B.發(fā)酵過程中發(fā)酵條件變化會(huì)影響微生物的生長繁殖和代謝途徑C.黑茶發(fā)酵可以將蛋白質(zhì)、纖維素等大分子轉(zhuǎn)化成小分子有機(jī)物D.新茶發(fā)酵完成后要進(jìn)行滅菌并密封，有利于茶的長期保存7、下圖為釀造糯米甘蔗酒的生產(chǎn)流程，其中使用的酒曲中含有糖化菌和釀酒菌。下列敘述正確的是（）

A.甘蔗汁和糯米能為酒曲中的菌提供碳源和氮源等B.糖化菌分泌的淀粉酶水解淀粉的過程消耗ATPC.恒溫發(fā)酵過程中應(yīng)不斷攪拌以增加溶解氧D.若拌曲時(shí)被醋酸桿菌污染，會(huì)將發(fā)酵產(chǎn)物中的乙醇轉(zhuǎn)化為乙酸和CO28、下列實(shí)踐與基因工程無關(guān)的是（）A.研制酵母乙肝疫苗B.細(xì)胞產(chǎn)物工廠化生產(chǎn)C.選擇“工程菌”來生產(chǎn)胰島素D.培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉9、中科院神經(jīng)科學(xué)研究所宣布克隆出了五只帶有節(jié)律缺陷的基因編輯猴，這五只猴的供體細(xì)胞來自BMAL1基因敲除具有睡眠障礙癥狀的X猴，下列分析正確的是（）A.克隆猴是有性繁殖的后代，其產(chǎn)生涉及核移植、體外胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)B.為了保證五只克隆猴的核遺傳物質(zhì)相同，只能在胚胎移植前進(jìn)行胚胎分割C.遺傳背景相同的克隆猴，可用于睡眠障礙癥的病因機(jī)制研究及藥物研制D.為得到大量的克隆猴，需對(duì)代孕母猴進(jìn)行同期發(fā)情和超數(shù)排卵處理評(píng)卷人得分二、多選題(共7題，共14分)10、關(guān)于胚胎工程的敘述，不正確的是（）A.胚胎工程的理論基礎(chǔ)是體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育B.胚胎收集中沖卵指的是從母體輸卵管中沖取卵子C.受精的標(biāo)志為雌原核和雄原核融合D.胚胎移植時(shí)對(duì)所有供體牛和受體牛都要進(jìn)行同期發(fā)情處理11、驅(qū)蚊草含有香茅醛，能散發(fā)出一種特殊的檸檬型香氣，從而達(dá)到驅(qū)蚊且對(duì)人體無害的效果。驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合培育而成的。下列關(guān)于驅(qū)蚊草培育的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.驅(qū)蚊草的培育屬于細(xì)胞工程育種，優(yōu)點(diǎn)是克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙B.驅(qū)蚊草培育過程要用到纖維素酶、果膠酶、PEG等試劑或電刺激等方法C.驅(qū)蚊草培育過程不同于植物組織培養(yǎng)，無細(xì)胞脫分化和再分化的過程D.驅(qū)蚊草培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，育種原理是基因突變12、苯丙酮尿癥是一種嚴(yán)重的單基因遺傳病。圖1是某患者的家族系譜圖，其中部分成員Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1和Ⅱ2的DNA經(jīng)限制酶MspⅠ酶切，產(chǎn)生不同的片段，經(jīng)電泳后與相應(yīng)探針雜交結(jié)果見圖2.下列分析正確的是（）

A.個(gè)體Ⅱ1是雜合體的概率為2/3B.個(gè)體Ⅱ2與一雜合體婚配生患病孩子的概率為0C.個(gè)體Ⅱ3是隱性純合體，有19kb探針雜交條帶D.個(gè)體Ⅱ4可能為雜合體，有2個(gè)探針雜交條帶13、為保障公共健康；需要定期對(duì)公共飲用水進(jìn)行衛(wèi)生檢測(cè)。飲用水的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)是100mL不得檢出大腸桿菌或者1000mL不超過3個(gè)大腸桿菌。若要確定飲用水是否合格，可采用膜過濾法檢測(cè)，過程如下圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.檢測(cè)前一般需要對(duì)水樣收集瓶、培養(yǎng)皿、鑷子等進(jìn)行干熱滅菌B.完成過濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上，在25℃下培養(yǎng)觀察C.為減少實(shí)驗(yàn)誤差，應(yīng)按照上述實(shí)驗(yàn)步驟多次取樣重復(fù)進(jìn)行檢測(cè)D.可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)法替代膜過濾法檢測(cè)飲用水中的大腸桿菌數(shù)量14、2020年7月20日，國際醫(yī)學(xué)權(quán)威期刊《柳葉刀》上發(fā)表了新冠病毒疫苗II期臨床試驗(yàn)的成果。該試驗(yàn)是由陳薇院士等人領(lǐng)銜的團(tuán)隊(duì)開展的研究，試驗(yàn)中使用的疫苗是一種腺病毒載體重組新冠病毒疫苗(基因重組疫苗)。試驗(yàn)結(jié)果表明，單次接種疫苗28天后，99．5%的受試者產(chǎn)生了特異性抗體，95．3%受試者產(chǎn)生了中和抗體，89%的受試者產(chǎn)生了特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)。這表明，陳薇團(tuán)隊(duì)研發(fā)的新冠疫苗可為健康人群提供“三重保護(hù)”，將新冠病毒“拒之門外”。下列敘述正確的是（）A.該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B.受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后，體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的效應(yīng)T細(xì)胞C.主要通過檢測(cè)受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來評(píng)價(jià)試驗(yàn)的有效性D.新冠肺炎康復(fù)患者可以不注射該疫苗15、2019年12月以來，新型冠狀病毒導(dǎo)致的肺炎在世界范圍爆發(fā)，造成多人死亡?？茖W(xué)工作者經(jīng)研究，發(fā)現(xiàn)了數(shù)種快速檢驗(yàn)新冠肺炎病原體的方法，以正確診斷。下列與新型冠狀病毒研究、診斷有關(guān)的說法中正確的是（）A.鏡檢法：在光學(xué)顯微鏡下直接觀察病人的痰液或血液，以發(fā)現(xiàn)病原體B.PCR技術(shù)：體外基因復(fù)制技術(shù)，可把病原體的基因逆轉(zhuǎn)錄后在幾十分鐘內(nèi)擴(kuò)增到數(shù)百萬倍C.抗原—抗體法：用特殊制備的病原體蛋白質(zhì)與病人血清中的相關(guān)抗體特異性結(jié)合，發(fā)現(xiàn)病原體D.DNA探針技術(shù)：用放射性同位素、熒光因子等標(biāo)記的DNA分子做探針，利用DNA分子雜交原理來檢測(cè)病原體16、基因定點(diǎn)突變技術(shù)通過改變基因特定位點(diǎn)的核苷酸來改變蛋白質(zhì)的氨基酸序列；常用于研究某個(gè)氨基酸對(duì)蛋白質(zhì)的影響，其原理是利用人工合成的誘變寡核苷酸引物和多種酶來合成突變基因，過程如圖所示。下列分析錯(cuò)誤的是（）

A.基因定點(diǎn)突變的原理是使基因發(fā)生堿基對(duì)的替換B.誘變寡核苷酸引物的延伸需要消耗四種核糖核苷酸C.突變基因的合成是以正?；虻膯捂溩鳛槟０宓腄.延伸過程遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，且需要DNA聚合酶的催化評(píng)卷人得分三、填空題(共6題，共12分)17、基因的“剪刀”是_____，它的化學(xué)本質(zhì)是_____，它只能識(shí)別一種特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“針線”是______，它能連接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________構(gòu)成；基因的運(yùn)載體是將_____送入_____的運(yùn)輸工具。目前常用的運(yùn)載體有_____、________和_____。質(zhì)粒存在于許多_____和______等生物中，是擬核或_____外能夠_____的很小的環(huán)狀_____。18、其它載體：_______19、注意：a生理基礎(chǔ)：______，______

b植物細(xì)胞融合前需用______和______除去細(xì)胞壁20、近年來，克隆技術(shù)的發(fā)展取得了巨大突破?在日常生活中，我們遇到過與克隆技術(shù)有關(guān)的問題嗎？_____。21、我國中科院神經(jīng)科學(xué)研究所團(tuán)隊(duì)率先攻克了體細(xì)胞克隆靈長類動(dòng)物這一世界難題?他們首次成功培育出體細(xì)胞克隆猴，分別叫中中和華華（下圖）?猴子與人類同屬靈長類，此前克隆靈長類動(dòng)物在技術(shù)上存在著不可逾越的障礙?克隆猴的誕生打破了這個(gè)障礙，也再次引起人們對(duì)于克隆人的擔(dān)憂和猜測(cè)?

從1997年宣布克隆羊多莉（上圖）的出生，到2018年克隆猴中中?華華的誕生，這期間一些科學(xué)家試圖克隆人?舉例說出克隆人面臨哪些倫理問題?_____22、有時(shí)還需進(jìn)行______的鑒定。如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)______。評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共36分)23、【生物技術(shù)實(shí)踐】

科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白；這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力，受到研究者重視。

（1）分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的______________、大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的________不同而實(shí)現(xiàn)分離。

（2）可用金黃色葡萄球菌來檢驗(yàn)該蛋白的抗菌特性。抗菌實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長提供_________和_______________。

（3）分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時(shí)間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的_____________；確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。

（4）細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有_______和___________。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行_____________處理。24、某化工廠為了處理排出污水中的一種有害的；難以降解的有機(jī)化合物A；其研究團(tuán)隊(duì)用化合物A、磷酸鹽鎂鹽和微量元素等配制了培養(yǎng)基，成功地篩選出能高效降解化合物A的細(xì)菌（目的菌）。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如下圖所示，請(qǐng)分析回答問題。

（1）在培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是______________，這種培養(yǎng)基屬于____________培養(yǎng)基。

（2）培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量__________的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使目的菌的數(shù)量____________。

（3）若要研究目的菌的生長規(guī)律，可挑取單個(gè)菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)，再采用______方法進(jìn)行計(jì)數(shù)。請(qǐng)你預(yù)測(cè)目的菌的種群數(shù)量會(huì)發(fā)生怎樣的變化。

（4）將目的菌用于環(huán)境保護(hù)實(shí)踐時(shí)，還有哪些問題需要解決？_______

（5）有人提出，可以通過改造細(xì)菌的基因來獲得能夠降解化合物A的細(xì)菌，請(qǐng)分析這種方法是否可行。_______25、柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞桿菌引起的；發(fā)生在柑橘的一種病害；植株受害后會(huì)發(fā)生落葉、落果，嚴(yán)重時(shí)葉片落光，整株枯死。利用基因工程將來自水稻的Xa27基因?qū)敫涕倏色@得抗柑橘潰瘍病的植株，利用植物組織離體培養(yǎng)技術(shù)則可培育無病毒植株?；卮鹣铝袉栴}：

(1)為了獲得脫毒苗，通?？梢赃x取植株______附近的組織進(jìn)行離體培養(yǎng)，選取該部位組織的原因是______。

(2)如圖1表示科研人員利用柑橘幼苗獲得抗病轉(zhuǎn)基因植株的過程：

①基因表達(dá)載體必需的結(jié)構(gòu)除復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子、目的基因外，還有______。

②共培養(yǎng)時(shí)，Ti質(zhì)粒的作用是______。

③共培養(yǎng)后，要利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，目的是______。

④再分化過程中，誘導(dǎo)愈傷組織生根、生芽的先后順序?yàn)開_____。

⑤從個(gè)體生物學(xué)水平鑒定柑橘再生植株時(shí)可采用______（填具體操作）的方法。經(jīng)鑒定有幾棵植株沒有抗病的能力，分別提取這幾棵植株的DNA，依據(jù)______的特異性堿基序列設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增后利用______進(jìn)行檢測(cè)；結(jié)果如圖2。

據(jù)圖2分析，植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______，植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。26、研究者改造與腸道共生的大腸桿菌；口服該工程菌后激活機(jī)體特異性免疫，實(shí)現(xiàn)腫瘤的預(yù)防和治療。

(1)部分腸道細(xì)菌能夠分泌外膜囊泡（OMV）；如圖1．OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內(nèi)豐富的免疫細(xì)胞。細(xì)菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白。

研究者利用含圖2所示元件的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌制備工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表達(dá)產(chǎn)物能夠與樹突狀細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合，提高樹突狀細(xì)胞_____OMV的能力。

(2)為研究上述工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應(yīng)的效果，研究者用健康小鼠進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：。組別第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小時(shí)后，飲用含阿拉伯糖的水結(jié)果檢測(cè)第1組空載體+第12天，每組隨機(jī)取5只小鼠等量的脾臟細(xì)胞與黑色素瘤細(xì)胞共培養(yǎng)，檢測(cè)殺傷率，結(jié)果如圖3．第2組ClyA-Fc+第3組ClyA-OVA+第4組第5組

注：“+”；“-”代表是否飲用；

口服工程菌12小時(shí)后其在腸道內(nèi)存在數(shù)量較多。

①第4、5組的操作是_____。圖3結(jié)果說明工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應(yīng)，理由是_____。

②為進(jìn)一步驗(yàn)證上述結(jié)論，研究者進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：先加入_____（填選項(xiàng)前字母）保溫后漂洗，再加入_____（填選項(xiàng)前字母）保溫后漂洗，檢測(cè)熒光細(xì)胞的數(shù)目，若第5組_____為最大值；則上述結(jié)論成立。

A．帶有紅色熒光標(biāo)記的OVA抗原肽復(fù)合物。

B．帶有綠色熒光標(biāo)記的細(xì)胞毒性T細(xì)胞特異性抗體。

C．第1-5組小鼠脾臟細(xì)胞。

③腫瘤患者術(shù)后極易復(fù)發(fā)，研究者重復(fù)上表實(shí)驗(yàn)，并在第3次口服工程菌后第50天給小鼠注射黑色素瘤細(xì)胞。目的是_____。

(3)該工程菌的研發(fā)為不同腫瘤的精準(zhǔn)治療和預(yù)防提供了可能。依據(jù)本研究，設(shè)計(jì)針對(duì)肺癌治療的工程菌表達(dá)載體元件：_____。評(píng)卷人得分五、綜合題(共4題，共12分)27、微生物培養(yǎng)是指借助人工配制的培養(yǎng)基和人為創(chuàng)造的培養(yǎng)條件,使某些做生物快速生長繁殖的過程。它可以對(duì)已純化的單一菌種進(jìn)行培養(yǎng)和利用；也可以對(duì)混合菌種或自然樣品(如土壤)中的微生物進(jìn)行培養(yǎng)，然后根據(jù)培養(yǎng)基上所生長微生物的種類和數(shù)量，可在一定程度上估算微生物的多樣性與數(shù)量。請(qǐng)分析回答下列問題。

（1）將馬鈴薯去皮切塊；加水煮沸一定時(shí)間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有______________________。若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入_________(顯色劑)篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是_______________________。

（2）為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況；某研究小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是_______________________________然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接種入0．1mL稀釋液。經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39；38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_________________

（3）用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了涂，第二劃線區(qū)域的第一條線上無涂落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有__________________________________________________________________（答出兩條）。若將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快，分析其原因是___________。28、學(xué)習(xí)以下材料；回答（1）~（5）題。

CRISPR/Cas基因編輯技術(shù)的脫靶檢測(cè)1987年；科學(xué)家發(fā)現(xiàn)大腸桿菌基因組DNA中有一些重復(fù)結(jié)構(gòu)：一段29個(gè)堿基的序列反復(fù)出現(xiàn)了多次，兩兩之間都被32個(gè)堿基形成的看似無規(guī)律的間隔序列隔開，這種重復(fù)結(jié)構(gòu)被命名為CRISPR（圖1）。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，多種細(xì)菌均有CRISPR結(jié)構(gòu)，且很多間隔序列與侵染細(xì)菌的一些噬茵體基因組序列一致。CRISPR的間隔序列轉(zhuǎn)錄形成的RNA（sgRNA）在細(xì)胞內(nèi)與Cas9酶結(jié)合成復(fù)合體，一旦在細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)能與sgRNA配對(duì)的DNA分子，Cas9酶就會(huì)對(duì)該DNA分子進(jìn)行切割，破壞其功能（圖2）。

科學(xué)家基于此；構(gòu)建了對(duì)DNA序列進(jìn)行定點(diǎn)切割的CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)。將編碼Cas9酶和sgRNA的基因作為目的基因，構(gòu)建基因表達(dá)載體后導(dǎo)入受體細(xì)胞，可對(duì)細(xì)胞內(nèi)某個(gè)基因定點(diǎn)切割，引發(fā)被切割部位的隨機(jī)突變。科研人員在CRISPR/Cas9編輯系統(tǒng)基礎(chǔ)上開發(fā)了CBE單堿基編輯系統(tǒng)，將Cas9酶替換成CBE融合蛋白，能將靶位點(diǎn)的胞嘧啶C脫氦基成尿嘧啶U，進(jìn)而通過DNA復(fù)制實(shí)現(xiàn)堿基對(duì)替換。

基因編輯可能造成非目標(biāo)序列的堿基改變；稱為脫靶。我國科研工作者建立了一種脫靶檢測(cè)技術(shù)，在小鼠受精卵分裂到2細(xì)胞時(shí)期，編輯其中1個(gè)，胚胎繼續(xù)發(fā)育到14.5天時(shí)，利用細(xì)胞分選技術(shù)選出被編輯過和未被編輯過的細(xì)胞，再進(jìn)行DNA提取和全基因組測(cè)序，比較兩組差異（圖3）。脫靶檢測(cè)發(fā)現(xiàn)CRISPR/Cas9編輯系統(tǒng)脫靶率較低，而CBE系統(tǒng)脫靶率較高，必須加以改進(jìn)才能應(yīng)用于遺傳病的臨床治療。

（1）列表比較限制性內(nèi)切核酸酶和CRISPR/Cas9復(fù)合體作用的異同點(diǎn)。_______________________

（2）大腸桿菌不同菌株CRISPR區(qū)域中的間隔序列是不同的，導(dǎo)致這種差異最可能的原因是___________。

（3）CBE編輯系統(tǒng)將靶位點(diǎn)胞嘧啶脫氨基后，細(xì)胞復(fù)制___________次后，子代DNA中靶位點(diǎn)堿基對(duì)由C-G徹底替換成______________；實(shí)現(xiàn)單堿基編輯。

（4）小鼠受精卵可以從雌鼠輸卵管中采集或通過____________技術(shù)獲得。向2細(xì)胞期胚胎中的1個(gè)細(xì)胞進(jìn)行顯微注射時(shí)，因不需長期在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在和表達(dá)，可以以RNA形式注入的有___________（填序號(hào)）。

①Cas9mRNA②CBEmRNA

③sgRNA④標(biāo)記基因RNA

（5）脫靶檢測(cè)過程中標(biāo)記基因的作用是___________。與用同一品系小鼠不同受精卵進(jìn)行脫靶檢測(cè)相比，上述脫靶檢測(cè)技術(shù)更加精準(zhǔn)，原因是____________。29、柑橘汁生產(chǎn)過程中出現(xiàn)的苦味問題一直備受關(guān)注。柑橘類果汁中主要有柚皮苷和檸檬苦素（C26H30O8）兩類產(chǎn)生苦味的物質(zhì)，分離培養(yǎng)高效降解檸檬苦素的菌株，可有效解決柑橘汁苦味的問題。某興趣小組同學(xué)進(jìn)行了檸檬苦素高效降解菌的分離和篩選實(shí)驗(yàn)。下表為選擇培養(yǎng)基的配方，回答下列問題：。K2HPO4KClMgSO4KNO3酵母膏瓊脂H2ONaCl檸檬苦素10g5g5g3g1g20g1000mL2g20g

(1)從該培養(yǎng)基的配方來看，能提供氮源的物質(zhì)有_______，該培養(yǎng)基的選擇作用主要通過表中_____成分來實(shí)現(xiàn)。配制培養(yǎng)基時(shí)，需對(duì)玻璃器皿采用_______法進(jìn)行滅菌。

(2)用接種環(huán)輕輕刮取初篩得到的菌株，接入50mL牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中，37℃、150r/min搖床培養(yǎng)12h；取適量菌液接種到上述培養(yǎng)基中，重復(fù)多次，得到不同的菌落。

①菌株接入牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中，目的是對(duì)菌體進(jìn)行_______；

②搖床培養(yǎng)過程中不斷振蕩的作用是_______；同時(shí)可說明該菌新陳代謝的基本類型為______；

③采用稀釋涂布平板法將菌液接種于選擇培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)，平板上生長著大量的菌落，難以數(shù)清，造成該現(xiàn)象的原因最可能是_______。

(3)從上述不同形態(tài)的菌落挑取樣品，并進(jìn)行涂布、劃線純化培養(yǎng)，最終純化出8株菌，分別編號(hào)為1、2，3，4，5，6、7、8．在相同條件下，測(cè)定這8株菌對(duì)檸檬苦素的降解率，得到如圖所示結(jié)果。從柱形圖可看出，降解檸檬苦素能力最強(qiáng)的是____號(hào)菌株。

30、SD藻是一種可以生產(chǎn)生物柴油的海洋單細(xì)胞生物。SD藻可利用光能合成糖類進(jìn)行生長；在SD藻的脂肪酸合成過程（如圖，示意圖）中，乙酰輔酶A羧化酶（ACCase）是脂肪酸合成關(guān)鍵酶。研究者通過技術(shù)手段改變編碼SD藻ACCase基因的第1999位堿基可以提高油脂合成量。在大規(guī)模生產(chǎn)中，研究者會(huì)挑選顏色較綠且繁殖更快的SD藻，這種SD藻可以生成更多油脂，以獲得更多生物柴油。

(1)SD藻葉綠體具有的功能有：_________，SD的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)具有的功能有_________。（編號(hào)選填）

①暫時(shí)儲(chǔ)存有機(jī)物的場(chǎng)所②能量轉(zhuǎn)化的場(chǎng)所③清除衰老細(xì)胞結(jié)構(gòu)的場(chǎng)所④發(fā)生蛋白質(zhì)加工的場(chǎng)所⑤物質(zhì)轉(zhuǎn)化的場(chǎng)所。

(2)根據(jù)題中信息，能合成脂肪酸的SD藻屬于____。A．RNA病毒B．原核生物C．DNA病毒D．真核生物(3)改變編碼SD藻乙酰輔酶A化基因的第1999位堿基，對(duì)該酶產(chǎn)生了什么影響?列舉其中3個(gè)：__________________________________。

(4)若須在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)SD藻并大量合成脂肪酸，從下列①-⑥中，選擇并組合形成合理的原料配置方案:__________。（編號(hào)選填）

①大量有機(jī)碳源②氮源③少量無機(jī)碳源④Mg2+等金屬離子⑤血漿生長因子⑥大量無機(jī)碳源。

(5)顏色較綠且繁殖更快的SD藻細(xì)胞，為什么可以生成更多生物柴油?闡述分析過程__________。

表列出了在連續(xù)的時(shí)期I～V中，SD藻細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的事件。時(shí)期細(xì)胞內(nèi)事件I①細(xì)胞核位于細(xì)胞中央；②遺傳物質(zhì)復(fù)制II③染色質(zhì)凝集成團(tuán)塊狀；④核膜消失Ⅲ⑤染色質(zhì)團(tuán)排在細(xì)胞中央；⑥形成桶狀紡錘體IV⑦染色質(zhì)團(tuán)平均厚度是0.5-0.6m；⑧染色質(zhì)團(tuán)分成均等的兩團(tuán)V⑨核膜重新出現(xiàn)；⑩染色質(zhì)團(tuán)隨胞質(zhì)分而分至兩個(gè)子細(xì)胞

(6)根據(jù)題意推測(cè)，表1中描述的是SD藻的哪個(gè)過程:__________。（編號(hào)選填）

①有絲分裂②細(xì)胞分化③細(xì)胞凋亡④細(xì)胞衰老⑤減數(shù)分裂。

(7)表1①-⑩中，支持你做出第6中判斷的遺傳物質(zhì)方面的證據(jù)是:_______；支持你做出第6題中判斷的其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)方面的證據(jù)是:________（編號(hào)選填）參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、D【分析】【分析】

1；基因突變是基因結(jié)構(gòu)的改變；包括堿基對(duì)的增添、缺失或替換?；蛲蛔儼l(fā)生的時(shí)間主要是細(xì)胞分裂的間期。

2；蛋白質(zhì)工程的本質(zhì)是通過基因改造或基因合成；對(duì)先有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造或制造新的蛋白質(zhì)，所以被形象地稱為第二代基因工程；基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)。

【詳解】

本題通過改造基因來實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)的改造；屬于蛋白質(zhì)工程，該工程依據(jù)的原理為蛋白質(zhì)→RNA→DNA→RNA→蛋白質(zhì)。

故選D。2、B【分析】【分析】

分析題圖：步驟甲為受精作用；步驟乙為胚胎移植，其中誘導(dǎo)超數(shù)排卵用的是促性腺激素，受精過程使用的培養(yǎng)液是獲能溶液或?qū)Ｓ檬芫芤?，早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分，除了一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需添加維生素；激素、氨基酸、核苷酸以及血清等。

【詳解】

A；步驟甲、乙分別指受精作用、胚胎移植；A錯(cuò)誤；

B；誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素是促性腺激素；只能作用于性腺，B正確；

C；受精卵發(fā)育成早期胚胎所需營養(yǎng)主要來自受精卵；C錯(cuò)誤；

D；受精過程使用的培養(yǎng)液是獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤?；與早期胚胎培養(yǎng)液有區(qū)別，D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】

本題是對(duì)胚胎工程的考查，解答本題的關(guān)鍵在于理解試管動(dòng)物培養(yǎng)的過程、超數(shù)排卵的激素作用特點(diǎn)和早期胚胎培養(yǎng)的營養(yǎng)物質(zhì)來源以及幾種不同培養(yǎng)液的成分：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、植物組織培養(yǎng)基成分、體外受精培養(yǎng)液、早期胚胎培養(yǎng)液。3、D4、B【分析】【分析】

分析圖示可知；給小鼠注射抗原后，從小鼠體內(nèi)收集經(jīng)過免疫的細(xì)胞（X細(xì)胞），與體外培養(yǎng)的Y（骨髓瘤細(xì)胞）細(xì)胞融合，經(jīng)過培養(yǎng)后篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

A；單克隆抗體的制備是用經(jīng)過免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合；制備雜交瘤細(xì)胞，所以X細(xì)胞是從脾臟中提取的已免疫的B淋巴細(xì)胞，A正確；

B；Y細(xì)胞是骨髓瘤細(xì)胞；B錯(cuò)誤；

C；圖中篩選過程至少兩次且方法不同；第一次篩選是選擇雜交瘤細(xì)胞，需要抑制同種細(xì)胞的融合體、以及未融合的細(xì)胞的增殖；第二次篩選是用抗體檢測(cè)的方法選擇能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，最終保留抗體檢測(cè)呈陽性的細(xì)胞，C正確；

D；由于雜交瘤細(xì)胞即保留了骨髓瘤細(xì)胞無限增殖的特點(diǎn)；又有漿細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的作用，所以圖中能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞在培養(yǎng)過程中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】5、A【分析】【詳解】

自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的主要差別在于自養(yǎng)型微生物可以利用無機(jī)碳合成自身的有機(jī)物；用于各項(xiàng)生命活動(dòng)；而異養(yǎng)型微生物只能以有機(jī)碳作為碳源，所以兩種培養(yǎng)基的主要差別在于碳源，A正確。

故選A。6、D【分析】【分析】

酒精發(fā)酵是在無氧條件下；微生物（如酵母菌）分解葡萄糖等有機(jī)物，產(chǎn)生酒精；二氧化碳等不徹底氧化產(chǎn)物，同時(shí)釋放出少量能量的過程。

【詳解】

A；黑茶剛制成時(shí)有酒香氣；說明黑茶制作過程中有酵母菌（無氧呼吸可以產(chǎn)生酒精）的參與，A正確；

B；發(fā)酵一般為微生物的無氧呼吸（部分為有氧呼吸）；溫度、pH、氧氣含量等等發(fā)酵條件，都會(huì)影響到微生物的生長繁殖和代謝途徑，B正確；

C；黑茶富含多肽、氨基酸、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)；說明黑茶發(fā)酵可以將蛋白質(zhì)、纖維素等大分子轉(zhuǎn)化成小分子有機(jī)物，C正確；

D；老茶保存過程中仍在發(fā)酵；因此新茶發(fā)酵完成后進(jìn)行滅菌并密封不利于進(jìn)一步發(fā)酵，D錯(cuò)誤。

故選D。7、A【分析】【分析】

果酒的制作離不開酵母菌；酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精。

【詳解】

A；甘蔗汁和糯米中含有蛋白質(zhì)（元素組成是C、H、O、N等）和糖（元素組成是C、H、O）等物質(zhì)；能為酒曲中的菌提供碳源和氮源等，A正確；

B；酶的作用機(jī)理是降低化學(xué)反應(yīng)的活化能；糖化菌分泌的淀粉酶水解淀粉的過程不需要消耗ATP，B錯(cuò)誤；

C；發(fā)酵過程中有釀酒菌；主要是酵母菌，酵母菌需要在無氧條件下進(jìn)行發(fā)酵，故不能攪拌增加溶解氧，C錯(cuò)誤；

D；若拌曲時(shí)被醋酸桿菌污染；由于缺少糖源，此時(shí)醋酸桿菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)橐宜?，D錯(cuò)誤。

故選A。8、B【分析】【分析】

1；植物基因工程的應(yīng)用：（1）抗蟲轉(zhuǎn)基因植物；（2）抗病轉(zhuǎn)基因植物；（3）抗逆轉(zhuǎn)基因植物；（4）轉(zhuǎn)基因改良植物品質(zhì)?？傊蚬こ淘谵r(nóng)業(yè)上用于生產(chǎn)高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的品種；能產(chǎn)生抗逆性品種。

2；動(dòng)物基因工程的成果：（1）提高動(dòng)物的生長速度：外源生長激素基因；（2）改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)；（3）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物；（4）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體；（5）基因工程藥物；如人胰島素、細(xì)胞因子、抗體、疫苗、生長激素、干擾素等。

【詳解】

A；將乙肝病毒相關(guān)基因轉(zhuǎn)入酵母菌；獲得乙肝疫苗，運(yùn)用了基因工程，A錯(cuò)誤；

B；將一種植物的葉綠體移入另一種植物以提高光合作用效率；這屬于細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用，與基因工程無關(guān)，B正確；

C；選擇“工程菌”來生產(chǎn)胰島素；需要將胰島素基因?qū)牍こ叹瑢儆诨蚬こ碳夹g(shù)的應(yīng)用，因此與基因工程有關(guān)，C錯(cuò)誤；

D；培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉；需要將抗蟲基因?qū)朊藁?xì)胞內(nèi)，屬于基因工程技術(shù)的應(yīng)用，因此與基因工程有關(guān)，D錯(cuò)誤。

故選B。9、C【分析】【分析】

克隆屬于無性繁殖；在克隆過程中無需對(duì)代孕母體進(jìn)行超數(shù)排卵處理，進(jìn)行同期發(fā)情處理后進(jìn)行胚胎移植即可。

【詳解】

A；克隆猴屬于無性繁殖；A錯(cuò)誤；

B；為了保證五只克隆猴的核遺傳物質(zhì)相同；供體細(xì)胞相同即可，無需胚胎分割，B錯(cuò)誤；

C；遺傳背景相同的克隆猴；帶有節(jié)律缺陷的基因編輯猴具有睡眠障礙癥狀，可用于睡眠障礙癥的病因機(jī)制研究及藥物研制，C正確；

D；不需要對(duì)代孕母猴進(jìn)行超數(shù)排卵處理；進(jìn)行同期發(fā)情處理后進(jìn)行胚胎移植即可，D錯(cuò)誤。

故選C。二、多選題(共7題，共14分)10、B:C:D【分析】【分析】

1；胚胎工程--指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)；如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。經(jīng)過處理后獲得的胚胎，還需移植到雌性動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生后代，以滿足人類的各種需求。理論基礎(chǔ)：哺乳動(dòng)物的體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育規(guī)律。

2；精過程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。

3；胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。

【詳解】

A；胚胎工程的理論基礎(chǔ)是哺乳動(dòng)物的體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育規(guī)律；A正確；

B；胚胎收集中沖卵指的是從母體輸卵管中沖取早期胚胎；B錯(cuò)誤；

C；受精的標(biāo)志為在卵黃膜和透明帶之間觀察到兩個(gè)極體；C錯(cuò)誤；

D；胚胎移植時(shí)對(duì)供體母牛和受體牛都要進(jìn)行同期發(fā)情處理；對(duì)供體公牛不需要進(jìn)行同期發(fā)情處理，D錯(cuò)誤。

故選BCD。

【點(diǎn)睛】11、C:D【分析】【分析】

植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。在進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時(shí)需要使用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，使用化學(xué)方法（聚乙二醇）或物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，不能用滅活的病毒誘導(dǎo)?？筛鶕?jù)植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原鑒定雜種細(xì)胞是否再生細(xì)胞壁，從而確定原生質(zhì)體融合是否完成。植物體細(xì)胞雜交的意義：在克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙；培育作物新品種方面所取得的重大突破。

【詳解】

A；驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合培育而成的；采用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，屬于細(xì)胞工程育種，其優(yōu)點(diǎn)是能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，A正確；

B；要獲得天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體；需要采用酶解法（纖維素酶、果膠酶），誘導(dǎo)天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體的融合可采用化學(xué)法（PEG等試劑）或物理法（電刺激等），B正確；

C；驅(qū)蚊草培育過程不同于植物組織培養(yǎng)；但需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，因此有細(xì)胞脫分化和再分化的過程，C錯(cuò)誤；

D；驅(qū)蚊草培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)；育種原理是染色體數(shù)目變異，D錯(cuò)誤。

故選CD。12、B:C:D【分析】苯丙酮尿癥是一種嚴(yán)重的單基因遺傳病，假設(shè)該病受一對(duì)等位基因A、a控制，分析圖1，Ⅰ1、Ⅰ2都無病，但其女兒Ⅱ3卻有病，所以該病為常染色體隱性遺傳病，Ⅱ3基因型為aa，Ⅰ1和Ⅰ2的基因型都為Aa，再結(jié)合圖2的酶切結(jié)果可知，Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1的基因型相同，因此Ⅱ1的基因型為Aa，Ⅱ2表現(xiàn)正常，且從酶切結(jié)果看，Ⅱ2與Ⅱ1基因型（Aa）不同，所以Ⅱ2的基因型為AA，由此可以推知，23kb探針雜交條帶對(duì)應(yīng)正常顯性基因A，19kb探針雜交條帶對(duì)應(yīng)隱性基因a。

【詳解】

A、由分析可知，個(gè)體Ⅱ1的基因型為Aa；雜合體的概率為1，A錯(cuò)誤；

B、由分析可知，個(gè)體Ⅱ2的基因型為AA；與雜合體Aa婚配，生患病孩子aa的概率為0，B正確；

C、個(gè)體Ⅱ3是患者，是隱性純合體，故有19kb探針雜交條帶；C正確；

D、個(gè)體Ⅱ4是Ⅰ1（Aa）和Ⅰ2（Aa）所生的表現(xiàn)正常的后代；基因型可能是AA或Aa，若為雜合體就有2個(gè)探針雜交條帶，D正確。

故選BCD。13、B:D【分析】【分析】

細(xì)菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測(cè)定。將已知體積的水過濾后；將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈黑色，根據(jù)黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算水樣中大腸桿菌的數(shù)量。微生物接種時(shí)，為了避免其它雜菌的污染，接種過程要進(jìn)行無菌操作。灼燒滅菌常適用于接種環(huán)；接種針；干熱滅菌常適用于玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具；高壓蒸汽滅菌常適用于無菌水、培養(yǎng)基。

【詳解】

A；檢測(cè)前需要對(duì)水樣收集瓶、濾膜、培養(yǎng)基、鑷子滅菌；防止雜菌干擾，A正確；

B；完成過濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上；在37℃下培養(yǎng)觀察，B錯(cuò)誤；

C；為減少實(shí)驗(yàn)誤差；按照上述實(shí)驗(yàn)步驟多次取樣重復(fù)進(jìn)行檢測(cè)，取平均值作為實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，C正確；

D；大腸桿菌較?。徊荒苡醚?xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)法替代膜過濾法檢測(cè)，D錯(cuò)誤。

故選BD。14、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已經(jīng)發(fā)展了三代：

第一代疫苗指的是滅活疫苗和減毒活疫苗；通過體外培養(yǎng)病毒，然后用滅活的病毒刺激人體產(chǎn)生抗體，它是使用最為廣泛的傳統(tǒng)疫苗；

第二代疫苗又稱為亞單位疫苗；是通過基因工程原理獲得的具有免疫活性的病原特異性結(jié)構(gòu)蛋白，刺激人體產(chǎn)生抗體；

第三代疫苗是核酸疫苗；又稱基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是將編碼某一抗原蛋白的基因作為疫苗，注射到人體中，通過正常的人體生理活動(dòng)產(chǎn)生抗原蛋白，誘導(dǎo)機(jī)體持續(xù)作出免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體。

【詳解】

A；該疫苗是基因重組疫苗；需要將腺病毒載體和新冠病毒的基因進(jìn)行連接，所以該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，A正確；

B；受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后；體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的漿細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；主要通過檢測(cè)受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來評(píng)價(jià)試驗(yàn)的有效性；C正確；

D；新冠肺炎康復(fù)患者體內(nèi)產(chǎn)生了新冠病毒抗體和和相應(yīng)的記憶細(xì)胞；可以不注射該疫苗，D正確。

故選ACD。15、B:C:D【分析】【分析】

1；PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；原理：DNA復(fù)制。前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈；

2；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】

A；鏡檢法：在電子顯微鏡下直接觀察病人的痰液或血液；以發(fā)現(xiàn)病原體，但光學(xué)顯微鏡不能觀察到新冠病毒，A錯(cuò)誤；

B；PCR技術(shù)：體外基因復(fù)制技術(shù)；可在幾十分鐘內(nèi)把病原體的基因擴(kuò)增到數(shù)百萬倍，再經(jīng)過電泳與病毒樣本進(jìn)行對(duì)比，便能知道是否感染病毒，B正確；

C；病毒進(jìn)入人體后會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)；產(chǎn)生相應(yīng)抗體，由于抗體與抗原結(jié)合具有特異性，因此抗原通過用特殊制備的病原體蛋白質(zhì)與病人血清中的相關(guān)抗體特異性結(jié)合以發(fā)現(xiàn)病原體，C正確；

D；DNA探針技術(shù)：用放射性同位素、熒光因子等標(biāo)記的DNA分子做探針；利用核酸分子雜交原理來檢測(cè)病原體，鑒定被檢測(cè)標(biāo)本上的遺傳信息，達(dá)到檢測(cè)是否感染病毒的目的，D正確。

故選BCD。16、B:C【分析】【分析】

1；DNA復(fù)制過程為：

（1）解旋：需要細(xì)胞提供能量；在解旋酶的作用下，兩條螺旋的雙鏈解開。

（2）合成子鏈：以解開的每一段母鏈為模板；在DNA聚合酶等酶的作用下，利用游離的4種脫氧核苷酸為原料，按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，合成與母鏈互補(bǔ)的子鏈。

（3）形成子代DNA分子：延伸子鏈；母鏈和相應(yīng)子鏈盤繞成雙螺旋結(jié)構(gòu)。

2；特點(diǎn)：邊解旋邊復(fù)制；復(fù)制方式：半保留復(fù)制。

3；條件：模板是親代DNA分子的兩條鏈；原料是游離的4種脫氧核苷酸；能量是ATP；酶是解旋酶、DNA聚合酶。

【詳解】

A；定點(diǎn)突變改變特定位點(diǎn)的核苷酸；先是人工合成誘變寡核苷酸引物，隨后經(jīng)過延伸和復(fù)制，產(chǎn)生新的突變基因，A正確；

B；誘變寡核苷酸引物的延伸需要消耗四種脫氧核苷酸；B錯(cuò)誤；

C；突變基因的合成以正?；虻膯捂湠槟０?；C錯(cuò)誤；

D；延伸過程中遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則；該過程需要將脫氧核苷酸連接起來，所以需要DNA聚合酶的催化，D正確。

故選BC。三、填空題(共6題，共12分)17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制酶蛋白質(zhì)核苷酸序列特定的切點(diǎn)DNA連接酶缺口磷酸-脫氧核糖外源基因受體細(xì)胞質(zhì)粒噬菌體動(dòng)植物病毒細(xì)菌酵母菌細(xì)胞核自主復(fù)制DNA分子18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】噬菌體、動(dòng)植物病毒19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細(xì)胞膜流動(dòng)性植物細(xì)胞全能性纖維素酶果膠酶20、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到過的與克隆技術(shù)有關(guān)的問題有：

①瀕臨滅絕動(dòng)物的克?。嚎寺】梢哉葹l危的國家保護(hù)動(dòng)物以及植物；我們可運(yùn)用克隆，復(fù)制瀕臨滅絕的生物，讓其不至于在我們的生活中消失；

②農(nóng)業(yè)克?。簯?yīng)用于農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域；通過轉(zhuǎn)基因的方式，增加糧食的畝產(chǎn)量，提高土地的單位出產(chǎn)量；

③細(xì)胞克隆替代或者修復(fù)人體細(xì)胞問題；比如胚胎干細(xì)胞；

④畜牧業(yè)克?。簯?yīng)用于畜牧業(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數(shù)，縮短畜牧育種年限?！窘馕觥坑?，比如：①瀕臨滅絕動(dòng)物的克??；②農(nóng)業(yè)克隆：應(yīng)用于農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域，通過轉(zhuǎn)基因的方式，增加糧食的畝產(chǎn)量，提高土地的單位出產(chǎn)量；③細(xì)胞克隆替代或者修復(fù)人體細(xì)胞問題，比如胚胎干細(xì)胞；④畜牧業(yè)克?。簯?yīng)用于畜牧業(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數(shù)，縮短畜牧育種年限。21、略

【分析】【詳解】

①克隆人是對(duì)人權(quán)和人的尊嚴(yán)的挑戰(zhàn)：

人不僅是自然人；在生物進(jìn)化中人自從脫離了動(dòng)物界，還成為有價(jià)值觀念的社會(huì)的人，因此人是具有雙重屬性的，是生物；心理和社會(huì)的集合體。克隆人也就是人工無性生殖的人，只在遺傳性狀上與原型人一致，而人的心理、行為、社會(huì)特征和特定人格是不能克隆的，因此克隆人是不完整的人，是一個(gè)喪失自我的人，嚴(yán)重違反了人權(quán)，危害人類尊嚴(yán)；

②克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念：

克隆人的出現(xiàn)將徹底攪亂代際關(guān)系和家庭倫理定位；克隆人過程中可以出現(xiàn)體細(xì)胞核供者；卵細(xì)胞供者以及孕育者三位生物學(xué)父母，以及撫養(yǎng)者的社會(huì)學(xué)父母的多種選擇，被克隆者只是生物學(xué)上復(fù)制，人類世代的傳承也將被打破，家庭倫理關(guān)系含混不清；

③克隆人是制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人；

④克隆人違反生物進(jìn)化的自然發(fā)展規(guī)律：

人類所以發(fā)展到如此高的進(jìn)化文明程度，是由其自然發(fā)展規(guī)律形成的。而克隆人要把有性生殖倒退到無性生殖，這種行為如不加阻止，必將給人類種下無窮的災(zāi)難?！窘馕觥竣倏寺∪耸菍?duì)人權(quán)和人的尊嚴(yán)的挑戰(zhàn)；②克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念；③克隆人是制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人；④克隆人違反生物進(jìn)化的自然發(fā)展規(guī)律等。22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】個(gè)體生物學(xué)水平抗蟲性狀。四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共36分)23、略

【分析】【詳解】

（1）電泳法分離蛋白質(zhì)；是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的電荷；大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)分離。

（2）牛肉膏和蛋白胨中蛋白質(zhì)較多；可作為碳源和氮源。

（3）加入抗菌蛋白的培養(yǎng)基中；金黃色葡萄球菌應(yīng)該不能生長或生長很少，未加入抗菌蛋白的培養(yǎng)基中金黃色葡萄球菌應(yīng)該能生長，菌落較多。

（4）平板劃線法、稀釋涂布平板法都能使接種的菌種在固體培養(yǎng)上充分分散，對(duì)使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行滅菌處理，是為了防止細(xì)菌擴(kuò)散污染?！窘馕觥竣?電荷（帶電情況）②.遷移速度③.碳源④.氮源⑤.數(shù)量⑥.平板劃線法⑦.稀釋涂布平板法（稀釋混合平板法）⑧.滅菌24、略

【分析】【分析】

分析題干信息；該實(shí)驗(yàn)的目的是篩選出高效降解化合物A的細(xì)菌，在以化合物A為唯一碳源的培養(yǎng)基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A為碳源和氮源生長繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，無法生長繁殖。

【詳解】

（1）由題意可知；本實(shí)驗(yàn)是分離出降解的有機(jī)化合物A的菌種，所以培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選降解的有機(jī)化合物A的菌種，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）由于“目的菌”有降解的有機(jī)化合物A的作用；所以培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量低的培養(yǎng)基，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數(shù)量進(jìn)一步增加。

（3）若研究“目的菌”的群體生長規(guī)律；將單個(gè)菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)，再采用稀釋涂布平板方法進(jìn)行計(jì)數(shù)。培養(yǎng)液中目的菌的種群數(shù)量在開始一段時(shí)間范圍內(nèi)，由于營養(yǎng)充分；空間充裕，種群數(shù)量類似于“J”形增長，隨著營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，種群增長速率逐漸下降，最終會(huì)達(dá)到K值，繼續(xù)培養(yǎng)，由于營養(yǎng)物質(zhì)缺乏、有害代謝物積累、pH改變等，種群數(shù)量將會(huì)下降。

（4）將目的菌用于環(huán)境保護(hù)實(shí)踐之前；還要對(duì)目的菌進(jìn)行研究，檢測(cè)其是否會(huì)產(chǎn)生對(duì)環(huán)境有害的代謝物；當(dāng)使用大量目的菌時(shí)會(huì)不會(huì)使目的菌成為優(yōu)勢(shì)菌群，對(duì)其他微生物的生存構(gòu)成威脅，從而打破微生物菌群的平衡等。

（5）可以利用基因工程的方法；將能降解化合物A的基因?qū)胧荏w菌中來實(shí)現(xiàn)。但在使用之前要檢驗(yàn)其安全性。

【點(diǎn)睛】

本題考查了微生物分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記培養(yǎng)基的成分和培養(yǎng)條件，掌握微生物分離與純化的方法與步驟，再結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確判斷?！窘馕觥亢Y選出能降解化合物A的細(xì)菌選擇低增多稀釋涂布平板培養(yǎng)液中目的菌的種群數(shù)量在開始一段時(shí)間范圍內(nèi)，由于營養(yǎng)充分、空間充裕，種群數(shù)量類似于“J”形增長，隨著營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，種群增長速率逐漸下降，最終會(huì)達(dá)到K值，繼續(xù)培養(yǎng)，由于營養(yǎng)物質(zhì)缺乏、有害代謝物積累、pH改變等，種群數(shù)量將會(huì)下降將目的菌用于環(huán)境保護(hù)實(shí)踐之前，還要對(duì)目的菌進(jìn)行研究，檢測(cè)其是否會(huì)產(chǎn)生對(duì)環(huán)境有害的代謝物；當(dāng)使用大量目的菌時(shí)會(huì)不會(huì)使目的菌成為優(yōu)勢(shì)菌群，對(duì)其他微生物的生存構(gòu)成威脅，從而打破微生物菌群的平衡等可以利用基因工程的方法，將能降解化合物A的基因?qū)胧荏w菌中來實(shí)現(xiàn)。但在使用之前要檢驗(yàn)其安全性25、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步驟：①目的基因的獲取和篩選；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定；

2；植物頂端分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少；甚至無病毒，切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗。

【詳解】

（1）為了獲得脫毒苗；通常選取植株莖尖（或頂端分生區(qū)附近的組織）進(jìn)行離體培養(yǎng)，選取該組織的原因是此處病毒極少甚至無病毒。

（2）①基因表達(dá)載體上除有復(fù)制原點(diǎn)；啟動(dòng)子、終止子、目的基因外；還有標(biāo)記基因（便于篩選目的基因）；

②農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA片段可以攜帶目的基因并整合至植物細(xì)胞的染色體DNA上；

③選擇培養(yǎng)的目的是篩選出含有目的基因的柑橘細(xì)胞；

④先誘導(dǎo)生芽有利于生根；故再分化階段，需要先誘導(dǎo)愈傷組織生芽，待長出芽后，再將其轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基上，進(jìn)一步誘導(dǎo)形成試管苗；

⑤在個(gè)體生物學(xué)水平可用接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）的方法，觀察植株是否患有柑橘潰瘍病來直接鑒定再生植株；分析再生植株沒有抗病能力的原因，可以提取各植株的DNA，依據(jù)Xa27基因（目的基因）的特異性堿基序列設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增后用（凝膠）電泳分離PCR產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)；植株B、C沒有出現(xiàn)條帶，則可能是因?yàn)闆]有導(dǎo)入目的基因；植株A、E、F出現(xiàn)條帶但不具有抗病能力，則可能是因?yàn)閷?dǎo)入植物細(xì)胞的目的基因不能轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄后未翻譯或翻譯出的蛋白質(zhì)沒有活性等?！窘馕觥?1)莖尖（或頂端分生區(qū)）此處病毒極少甚至無病毒。

(2)標(biāo)記基因攜帶目的基因并整合至植物細(xì)胞的染色體DNA上篩選出含有目的基因的植物細(xì)胞先誘導(dǎo)生芽，再誘導(dǎo)生根接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）Xa27基因（凝膠）電泳導(dǎo)入植物細(xì)胞的目的基因不能表達(dá)（或不能轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)錄后不能翻譯，翻譯出的蛋白質(zhì)沒有活性等，合理即可）沒有導(dǎo)入目的基因26、略

【分析】【分析】

樹突狀細(xì)胞為抗原呈遞細(xì)胞；可識(shí)別；攝取和傳遞抗原信息。

【詳解】

（1）細(xì)菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白；而OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內(nèi)豐富的免疫細(xì)胞。所以，ClyA基因的作用為表達(dá)出細(xì)菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，進(jìn)而融合基因可以被免疫細(xì)胞識(shí)別。Fc表達(dá)產(chǎn)物能夠與樹突狀細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合，進(jìn)而提高樹突狀細(xì)胞識(shí)別；攝取和傳遞抗原信息的能力。

（2）①根據(jù)表格和柱狀圖可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐漸增加部件，且第4組和第5組工程菌都是完整的，即第4組:ClyA-OVA-Fc第5組:ClyA-OVA-Fc，但是第4組飲用含阿拉伯糖的水，進(jìn)而激活融合基因的表達(dá)；第5組不飲用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表達(dá)。所以，第3；5組含有OVA，在人為控制口服阿拉伯糖后產(chǎn)生OMV，激活特異性免疫，對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷率較高；1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導(dǎo)，殺傷率均低。

②小鼠脾臟細(xì)胞具有免疫細(xì)胞；可在抗原刺激下引起特異性免疫。帶有紅色熒光標(biāo)記的OVA抗原肽復(fù)合物可引起小鼠脾臟細(xì)胞發(fā)生特異性免疫，故先加入第1-5組小鼠脾臟細(xì)胞和帶有紅色熒光標(biāo)記的OVA抗原肽復(fù)合物進(jìn)行保溫，判斷特異性免疫的強(qiáng)度；

故選AC。

再加入帶有綠色熒光標(biāo)記的細(xì)胞毒性T細(xì)胞特異性抗體；目的是檢測(cè)OVA抗原肽復(fù)合物是否能夠產(chǎn)生特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞。

故選B。

若第5組同時(shí)被紅色和綠色熒光標(biāo)記的細(xì)胞數(shù)目占比越多；說明工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應(yīng)，結(jié)論成立。

③腫瘤患者術(shù)后極易復(fù)發(fā)；說明特異性免疫功能減弱。所以，可多次注射黑色素瘤細(xì)胞，進(jìn)而研究該口服工程菌是否能夠誘發(fā)長期免疫記憶，從而抑制腫瘤復(fù)發(fā)。

（3）本實(shí)驗(yàn)中融合基因里面有OVA（黑色素瘤細(xì)胞特異性抗原），所以只需將OVA替換為肺癌細(xì)胞特異性抗原即可。即將元件中的OVA替換為肺癌細(xì)胞特異性表達(dá)的抗原基因?！窘馕觥?1)表達(dá)ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面識(shí)別；攝取。

(2)第4組:ClyA-OVA-Fc和-第5組:ClyA-OVA-Fc和+第3；5組含有OVA；在人為控制口服阿拉伯糖后產(chǎn)生OMV，激活特異性免疫，對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷率較高;1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導(dǎo)，殺傷率均低ACB同時(shí)被紅色和綠色熒光標(biāo)記的細(xì)胞數(shù)目占比研究該口服工程菌是否能夠誘發(fā)長期免疫記憶，從而抑制腫瘤復(fù)發(fā)。

(3)將元件中的OVA替換為肺癌細(xì)胞特異性表達(dá)的抗原基因五、綜合題(共4題，共12分)27、略

【分析】【分析】

1；微生物培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)成分有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等。

2；微生物常用的接種方法有平板劃線法、稀釋涂布平板法。

3；每克樣品中的菌株數(shù)=（C÷V）×M；其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（ml），M代表稀釋倍數(shù)。

【詳解】

（1）微生物生長繁殖所必需的營養(yǎng)物質(zhì)主要包括碳源；氮源、水和無機(jī)鹽等；淀粉遇碘變藍(lán)色；若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入碘液篩選出能產(chǎn)生淀粉酶的微生物，產(chǎn)生淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，可根據(jù)是否形成透明圈來判斷。

（2）在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否合格：若空白平板上無菌落形成，則說明培養(yǎng)基滅菌合格；平均每個(gè)平板上的菌落數(shù)為（39＋38＋37）/3=38，稀釋了100倍，取樣0.1ml，則每毫升水中的活菌數(shù)為38×100÷0.1=38000個(gè)，則每升水中的活菌數(shù)為38000×1000=3.8×107個(gè)。

（3）接種時(shí)常用接種環(huán)；平板劃線法要求灼燒的接種環(huán)冷卻后再劃線，否則會(huì)灼傷菌株甚至死亡，且劃線時(shí)要從上一次劃線的末端開始劃線，這樣接種環(huán)上才有菌株；靜置培養(yǎng)時(shí)，只有表層營養(yǎng)液中的溶解氧較高，大部分細(xì)菌不能得到充足的氧氣，同時(shí)營養(yǎng)物質(zhì)也不能得到充分的利用，故細(xì)菌生長速度較慢，而震蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，故細(xì)菌生長速度較快。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記接種微生物常用的兩種方法，掌握無菌技術(shù)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題?！窘馕觥刻荚?、水和無機(jī)鹽碘液淀粉遇碘液呈藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的微生物能分解淀粉，在菌落周圍會(huì)形成透明圈檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否合格3.8×107接種環(huán)灼燒后沒有冷卻就開始劃線劃線未從第一區(qū)域末端開始振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的含氧量，同時(shí)可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率28、略

【分析】不同菌株的祖先種感染的噬菌體有差異2T-A體外受精①②③分選被編輯細(xì)胞與未編輯細(xì)胞的后代來自同一受精卵的基因相同；實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組結(jié)果差異是基因編輯工具不同造成的。

【分析】

限制性核酸內(nèi)切酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

【詳解】

（1）列表如下：

。

限制酶。

CRISPR/Cas9

不同點(diǎn)。

識(shí)別；切割DNA的特定核苷酸序列。

根據(jù)sgRNA識(shí)別與之配對(duì)的DNA分子后進(jìn)行切割；且能引發(fā)突變。

相同點(diǎn)。

均能切割DNA

（2）大腸桿菌不同菌株CRISPR區(qū)域中的間隔序列是不同的；結(jié)合題干“間隔序列與侵染細(xì)菌的一些噬茵體基因組序列一致”推測(cè)，導(dǎo)致這種差異最可能的原因是不同菌株的祖先種感染的噬菌體有差異。

（3）根據(jù)題意；CBE單堿基編輯系統(tǒng)，將Cas9酶替換成CBE融合蛋白，能將靶位點(diǎn)的胞嘧啶C脫氦基成尿嘧啶U，第一次復(fù)制的兩個(gè)子代DNA中，相應(yīng)位置的堿基對(duì)分別是G-C和U-A，再經(jīng)過第二次復(fù)制，得到的4個(gè)子代DNA中相應(yīng)位置的堿基對(duì)分別是G-C；C-G、U-A、和A-T，所以復(fù)制2次后，子代DNA中靶位點(diǎn)堿基對(duì)由C-G徹底替換成T-A.

（4）小鼠受精卵可以從雌鼠輸卵管中采集或通過體外受精技術(shù)獲得。向2細(xì)胞期胚胎中的1個(gè)細(xì)胞進(jìn)行顯微注射的目的是為了比較CRISPR/Cas9編輯系統(tǒng)和CBE系統(tǒng)的脫靶率；因此可以RNA形式注入的有①Cas9mRNA；②CBEmRNA和③sgRNA.

（5）脫靶檢測(cè)過程中標(biāo)記基因的作用是分選被編輯細(xì)胞與未編輯細(xì)胞的后代。若是用同一品系小鼠不同受精卵進(jìn)行脫靶檢測(cè)；不同小鼠受精卵的基因會(huì)不同，有可能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響；對(duì)2細(xì)胞期胚胎中的1個(gè)細(xì)胞進(jìn)行脫靶檢測(cè)技術(shù)更加精準(zhǔn)，原因是來自同一受精卵的基因相同，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組結(jié)果差異是基因編輯工具不同造成的。

【點(diǎn)睛】

本題以CRISPR/Cas基因編輯技術(shù)為背景考查了考生對(duì)基因工程相關(guān)知識(shí)的理解能力和知識(shí)遷移能力?！窘馕觥俊?/p>

限制酶。

CRISPR/Cas9

不同點(diǎn)。

識(shí)別；切割DNA的特定核苷酸序列。

根據(jù)sgRNA識(shí)別與之配對(duì)的DNA分子后進(jìn)行切割；且能引發(fā)突變。

相同點(diǎn)。

均能切割DNA

29、略

【分析】【分析】

1；消毒是使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）；而滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）。消毒