2025年新世紀(jì)版選修3生物上冊月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年新世紀(jì)版選修3生物上冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、下列事實中；可以體現(xiàn)細(xì)胞全能性的是（）

①利用胡蘿卜韌皮部的細(xì)胞培育出植株。

②轉(zhuǎn)入抗蟲基因的棉花葉肉細(xì)胞培育出植株。

③番茄體細(xì)胞與馬鈴薯體細(xì)胞融合后培育出植株。

④利用小麥花藥離體培育出單倍體植株。

⑤蜜蜂未受精的卵發(fā)育成雄蜂A.只有①④⑤B.只有①②③C.只有①②④⑤D.①?⑤全2、下列有關(guān)試管嬰兒和設(shè)計試管嬰兒的區(qū)別的說法，正確的是A.前者不需要對胚胎進行基因診斷，后者需要對胚胎進行基因診斷B.前者屬于無性繁殖，后者屬于有性生殖C.前者需要經(jīng)過胚胎移植，后者不需要經(jīng)過胚胎移植D.前者需要體外受精，后者不需要體外受精3、以下是幾種不同限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列的敘述中；錯誤的是。

A.以上DNA片段是由5種限制酶切割后產(chǎn)生的B.若要把相應(yīng)片段連接起來，應(yīng)選用DNA連接酶C.上述能進行連接的兩個片段，其連接后形成的DNA分子是D.限制酶和DNA連接酶作用的部位都是碟酸二酯鍵4、下列有關(guān)哺乳動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，正確的是（）A.克隆羊、試管羊、轉(zhuǎn)基因羊的繁殖方式都是有性生殖B.胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)可維持只增殖不分化狀態(tài)C.受精時防止多精入卵的兩屏障是頂體反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)D.滋養(yǎng)層細(xì)胞在囊胚期已發(fā)育成胎膜和胎盤并可用于性別鑒定5、據(jù)人民網(wǎng)報道，“一對名為露露和娜娜的基因編輯嬰兒于2018年11月在中國健康誕生。這對雙胞胎的一個基因經(jīng)過修改，使她們出生后即能天然抵抗艾滋病。這是世界首例免疫艾滋病的基因編輯嬰兒”。下列有關(guān)說法正確的是（）A.基因編輯制造人類的行為是符合倫理道德的B.基因編輯技術(shù)，可改變?nèi)祟愡M化的速度和方向，有利于人類的進化C.通過基因編輯技術(shù)改變了人類的遺傳物質(zhì)，使人類進化成新物種D.基因編輯技術(shù)可用于疾病預(yù)防領(lǐng)域研究，但不能用于編輯嬰兒評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)6、如圖為細(xì)胞融合的示意圖；下列敘述正確的是（）

A.若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，需先去分化再誘導(dǎo)融合B.a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實現(xiàn)C.c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動性都有關(guān)D.c細(xì)胞將同時表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因7、如圖是某同學(xué)繪制的我國北方農(nóng)區(qū)的一種“四位一體”的生態(tài)家園示意圖；其中沼氣池；豬舍、廁所和日光溫室等保持了合理的結(jié)構(gòu)和比例。下列說法錯誤的是（）

A.在農(nóng)村發(fā)展沼氣有利于保護林草植被B.該工程充分體現(xiàn)了自生原理C.保持生物比例合理遵循了整體原理D.能量可隨著沼氣的使用而流入生物體內(nèi)8、下列過程需要進行植物組織培養(yǎng)，并表現(xiàn)了體細(xì)胞全能性的是（）A.番茄—馬鈴薯植株的培育B.人參皂苷的工業(yè)化生產(chǎn)C.單倍體育種過程中單倍體的獲得D.大量制備三倍體無子西瓜幼苗9、離心是生物學(xué)實驗中常用的技術(shù)手段。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.梅塞爾森和斯塔爾通過實驗證明DNA分子半保留復(fù)制中，采用了差速離心法B.在細(xì)胞工程的操作中，利用離心法可以誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合C.用差速離心法對細(xì)胞勻漿進行離心，分離核糖體比分離葉綠體的轉(zhuǎn)速低D.噬菌體侵染細(xì)菌實驗中，離心可將DNA和蛋白質(zhì)分開，以便分別研究各自的作用10、下列事實能體現(xiàn)細(xì)胞全能性的是A.棉花根尖細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)形成幼苗B.單細(xì)胞的DNA在體外大量擴增C.動物雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體D.小鼠體細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)培育成小鼠11、下列有關(guān)哺乳動物精子和卵子的發(fā)生以及受精作用的敘述，不正確的是（）A.采集到的精子和卵子相遇即可發(fā)生受精作用B.排卵就是排出成熟卵子的過程C.卵子形成時的分裂過程均在卵巢內(nèi)完成D.卵子受精的標(biāo)志是在卵細(xì)胞膜和透明帶之間觀察到兩個極體12、糧桑漁生態(tài)農(nóng)業(yè)系統(tǒng)是江浙平原水網(wǎng)地區(qū)典型的高效農(nóng)業(yè)系統(tǒng)；下圖表示這一農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的基本模式。試根據(jù)圖示判斷下列說法正確的是（）

A.沼氣池的建立既充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力，又防止了環(huán)境污染B.通過巧接食物鏈?zhǔn)乖玖飨蚍纸庹叩哪芰扛嗟亓飨蛄巳?，提高了能量的傳遞效率C.這一生態(tài)工程模式主要適用于江浙平原而不適用于我國西北地區(qū)，這是因為建立生態(tài)工程時還需要遵循協(xié)調(diào)與平衡原理D.上述生態(tài)農(nóng)業(yè)系統(tǒng)通過改善和優(yōu)化系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)，達(dá)到改善系統(tǒng)功能的效果評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)13、生物學(xué)家利用基因工程技術(shù)通過生物反應(yīng)器生產(chǎn)人的血清蛋白。請根據(jù)相關(guān)知識回答下列問題：

（1）在基因工程的操作中的“分子手術(shù)刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是________

（3）基因工程中最常用的運載體是______

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達(dá)，說明人和牛______14、基因治療：基因治療是指用正?；騙______或______患者細(xì)胞中有缺陷的基因，從而達(dá)到治療疾病的目的。15、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細(xì)胞膜上的ACE2相互識別，感染人的呼吸道上皮細(xì)胞。請分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細(xì)胞，使機體產(chǎn)生_________性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對肺細(xì)胞強烈攻擊引發(fā)肺炎，此時可通過適度使用_________對病人進行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）科學(xué)家采集了感染新型冠狀病毒并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測相關(guān)抗體的水平，結(jié)果如圖1。據(jù)此分析，應(yīng)選取_________的B淋巴細(xì)胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測病毒對宿主細(xì)胞的感染率，結(jié)果如圖2。據(jù)此分析，對病毒抑制效果最好的單抗是__________號。

（5）患者康復(fù)后一段時間，若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應(yīng)的__________細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。16、請寫出基因工程的概念：_________________。請寫出胚胎移植的概念：_____________________。請分別寫出植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理_________。17、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過胚胎工程技術(shù)可以快速繁育優(yōu)良個體，其主要步驟如圖所示。回答下列問題：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對其進行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細(xì)胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細(xì)胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應(yīng)鑒定胚胎中與___________有關(guān)的基因。

（4）進行步驟乙時，受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。評卷人得分四、判斷題(共5題，共45分)18、一般情況下一個卵細(xì)胞只能由一個精子發(fā)生融合形成受精卵()A.正確B.錯誤19、精子入卵后形成雄原核；同時卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核()A.正確B.錯誤20、受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段，在自然狀態(tài)下，哺乳動物的受精在子宮內(nèi)完成。（選擇性必修3P56）()A.正確B.錯誤21、下圖表示哺乳動物發(fā)育過程的幾個階段；請判斷下列題的敘述是否正確？

（_____）（1）從A到C的過程中有機物的含量減少。

（_____）（2）A；B時期胚胎中的細(xì)胞都是全能細(xì)胞。

（_____）（3）胚胎移植必須使用處于B或C時期的胚胎。

（_____）（4）圖示過程細(xì)胞通過有絲分裂增殖，遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生改變。A.正確B.錯誤22、在生態(tài)工程建設(shè)中，只能遵循“先污染、破壞、再治理”的發(fā)展思路______A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共28分)23、新型的微生物蛋白農(nóng)藥是由微生物產(chǎn)生的一類蛋白質(zhì)藥物；能夠激活農(nóng)作物的防御系統(tǒng)，提高農(nóng)作物抗病抗蟲的能力?？蒲腥藛T在某個真菌菌株上發(fā)現(xiàn)了激活蛋白AP45，并進行了相關(guān)研究(見下圖）。

（1）上圖中的①是____________；②是__________________。

（2）所設(shè)計的引物對，應(yīng)與________能互補配對，但在_____之間不應(yīng)有能互補配對的核苷酸序列。

（3）據(jù)圖分析，該實驗以__________基因作為標(biāo)記基因。

（4）如果要利用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否成功表達(dá)，則需要以_______為抗原；制備出其單克隆抗體。

（5）以此類激活蛋白制成的微生物蛋白農(nóng)藥并不會直接殺死害蟲或者病原生物，是一種環(huán)境友好型的產(chǎn)品，具有_________等優(yōu)點(要求一項）。此類農(nóng)藥的研制和使用，遵循了生態(tài)工程中的______原理(要求一項)。24、圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?，F(xiàn)有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ；SmaⅠ4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。請回答下列問題：

（1）若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，其三段產(chǎn)物長度為_________________。

（2）若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞。從隱性純合子分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，產(chǎn)物中共有__________種不同DNA片段。為了提高實驗成功率，需要通過__________技術(shù)擴增目的基因；以獲得大量的目的基因。

（3）若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是__________。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含質(zhì)粒的大腸桿菌，一般先用添加抗生素B的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，然后將生長的菌接種到只含__________的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；可進一步篩選出含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞。

（4）假設(shè)用BamHⅠ切割DNA獲取目的基因，用MboⅠ切割質(zhì)粒，然后形成重組質(zhì)粒，若將插入在抗生素B抗性基因處的目的基因重新切割下來，能否用BamHⅠ?__________。為什么？____________________。25、科研人員研究E基因和F基因?qū)M南芥主根生長的影響。

（1）擬南芥是生命科學(xué)研究的模式生物，2000年底已經(jīng)完成全部基因測序，基因測序需要構(gòu)建擬南芥的______文庫，理由是________。

（2）利用T-DNA轉(zhuǎn)化擬南芥；PCR篩選E基因突變隱性純合子（甲），原理及結(jié)果如圖1.

據(jù)圖分析，植株____________分別為野生型純合子和E基因突變隱性純合子。

（3）同樣用上述方法篩選出F基因突變隱性純合子（乙）。將甲和乙雜交，F(xiàn)1的表現(xiàn)型為_____（填“野生型”或“突變型”）。F1自交，若F2中突變型的比例約為1/2，說明E基因和F基因在染色體上的位置關(guān)系是____，F(xiàn)2中出現(xiàn)少量雙突變體最可能的原因是___________。

（4）科研人員利用三種擬南芥研究F基因與主根生長的關(guān)系，結(jié)果如圖2所示。據(jù)此推測F基因____。

（5）將綠色熒光蛋白(GFP)基因和F基因融合，構(gòu)建表達(dá)載體，獲得轉(zhuǎn)基因擬南芥，熒光鑒定結(jié)果如圖3，該結(jié)果不足以確定F蛋白位于細(xì)胞膜上。繼續(xù)用高濃度蔗糖溶液處理液泡較小的轉(zhuǎn)基因成熟熒光細(xì)胞，使其發(fā)生____，若觀察到________，可證明F蛋白在細(xì)胞膜上。同時還需要補充一組__________作為對照。

（6）雙分子熒光互補技術(shù)可研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)之間是否相互作用。將黃色熒光蛋白基因(YFP)分為2段（YFPN與YFPC）；分別與已知抗原基因和該抗原的抗體基因融合構(gòu)建表達(dá)載體，將兩種載體同時導(dǎo)入擬南芥細(xì)胞，在515nm激發(fā)光下可發(fā)出黃色熒光。

①轉(zhuǎn)基因擬南芥細(xì)胞能發(fā)出黃色熒光的原因是：_________會使YFPN與YFPC蛋白相互靠近。

②研究者推測E蛋白和F蛋白在細(xì)胞內(nèi)形成二聚體后發(fā)揮作用。為驗證該假設(shè)，請參照上述技術(shù)寫出實驗組的設(shè)計思路：____。26、牙周病是最常見的炎癥性口腔疾病；易造成牙齒松動和脫落。牙周膜細(xì)胞具有自我更新和多向分化的能力，在牙周組織修復(fù)過程中具有重要作用。牙齦卟啉單胞菌（P）是牙周致病菌之一，為研究P菌對人牙周膜細(xì)胞增殖和分化的影響，研究者進行了下列實驗。

（1）取人體新鮮牙周膜組織塊，用____________處理制成細(xì)胞懸液，置于含____________的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；獲得4～10代牙周膜細(xì)胞。

（2）取牙周膜細(xì)胞加入P菌后共培養(yǎng)；電鏡觀察發(fā)現(xiàn)P菌能侵入牙周膜細(xì)胞并在細(xì)胞內(nèi)存活。測定細(xì)胞增殖活性，結(jié)果如下圖：

實驗結(jié)果顯示：P菌感染人牙周膜細(xì)胞后，與對照組相比，牙周膜細(xì)胞_______（填“發(fā)生”或“未發(fā)生”）明顯的增殖改變。

（3）體外誘導(dǎo)牙周膜細(xì)胞成骨分化的過程中會形成礦化結(jié)節(jié)。為了研究P菌對人牙周膜細(xì)胞成骨分化的影響；研究者利用被P菌感染的牙周膜細(xì)胞進行礦化誘導(dǎo)處理，分別于7d；14d、21d染色檢測牙周膜細(xì)胞礦化情況，結(jié)果如下圖：

（A：對照組；B：實驗組；7；14、21表示天數(shù)；黑點表示礦化結(jié)節(jié)）

①正常牙周膜細(xì)胞能不斷分化為骨纖維細(xì)胞、成骨細(xì)胞等多種細(xì)胞，這是基因____________的結(jié)果。

②對照組的處理是____________。

③研究發(fā)現(xiàn)，成骨分化與一種特異性轉(zhuǎn)錄因子Runx2有關(guān)，P菌感染人牙周膜細(xì)胞后，該轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)水平明顯下調(diào)，由此推測，Runx2的作用是___________。評卷人得分六、綜合題(共4題，共28分)27、重組人纖溶酶原激活劑(rhPA)是臨床血栓疾病治療的主要生物藥品。家兔具有多胎、妊娠期短、繁殖快、全年多發(fā)情，產(chǎn)仔率高等優(yōu)點，可以作為乳腺生物反應(yīng)器批量生產(chǎn)藥物。下圖是利用轉(zhuǎn)基因兔生產(chǎn)重組人纖溶酶原激活劑(rhPA)的過程；請據(jù)圖回答。

(1)構(gòu)建rhPA基因表達(dá)載體需要用限制酶______切割質(zhì)粒和目的基因，為獲得乳腺特異性表達(dá)載體需用__________________酶切割重組質(zhì)粒使之線性化。

(2)對母兔注射__________使其超數(shù)排卵，并與正常公兔配種。將乳腺特異性表達(dá)載體導(dǎo)入家兔受精卵中最有效的導(dǎo)入技術(shù)是_____________。

(3)將受精卵置于37℃的95%空氣和5%CO2的氣體環(huán)境中培養(yǎng)一段時間后移植到代孕兔的輸卵管中，代孕兔需經(jīng)_______________處理。

(4)子代兔需要經(jīng)過篩選過程才能獲得生產(chǎn)人纖溶酶原激活劑的生物反應(yīng)器，原因有____________________________________、________________________________________。28、中國女科學(xué)家屠呦呦獲2015年諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎；她研制的抗瘧藥青蒿素挽救了數(shù)百萬人的生命。研究人員已經(jīng)弄清了野生青蒿（二倍體，體細(xì)胞染色體數(shù)為18）細(xì)胞中青蒿素的合成途徑如圖所示：

(1)野生青蒿生長受地域性限制，體內(nèi)生成的青蒿素極少，科學(xué)家考慮采用_________________（育種方法），利用酵母細(xì)胞大量獲得青蒿素，該育種方法的原理是_______________。

(2)與二倍體相比，多倍體植物通常莖稈粗壯，葉片較大，推測青蒿素的含量也高，故嘗試用_____或____________方法處理二倍體青蒿，該過程的原理是______________；從而得到四倍體青蒿。

(3)四倍體青蒿與野生型青蒿______________（“是”或“不是”）同一物種，其原因是兩者雜交所產(chǎn)生的子代，其體細(xì)胞中含有________條染色體、__________個染色體組，該子代是_________（“可育”或“不可育”）的。29、現(xiàn)代生物工程技術(shù)推動了免疫學(xué)和畜牧業(yè)的發(fā)展。

（1）制備單克隆抗體需要借助動物細(xì)胞融合技術(shù)；其過程中與植物不同的方法是使用________誘導(dǎo)，融合細(xì)胞首先需要經(jīng)過_________培養(yǎng)獲得雜交瘤細(xì)胞；還需進行_______化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，用專一抗體檢驗呈陽性才可獲得足夠數(shù)量的____________，再進行體內(nèi)或體外培養(yǎng)，大量制備單克隆抗體。

（2）對大面積燒傷病人；借助________技術(shù)可獲取大量自身健康皮膚用于移植。培養(yǎng)的條件需要________________；合適的營養(yǎng)、適宜的溫度、通入______________混合氣體。

（3）用細(xì)胞核移植技術(shù)繁育良種牛的培育過程需要進行胚胎移植，移植前需要對受體牛進行__技術(shù)處理，對外來胚胎基本不發(fā)生__________，為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。30、利用基因編輯技術(shù)將病毒外殼蛋白基因?qū)胴i細(xì)胞中；然后通過核移植技術(shù)培育基因編輯豬，可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。下圖是基因編輯豬培育流程，請回答問題。

(1)給1號豬注射促性腺激素，以實現(xiàn)______，收集到的細(xì)胞需培養(yǎng)到______期；才可用于細(xì)胞核移植。

(2)采集2號豬的組織塊，用______處理獲得分散的成纖維細(xì)胞，放置于37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，其中CO2的作用是_____。通常向動物細(xì)胞培養(yǎng)液中加入酚紅使其呈桃紅色，其作用是_____。

(3)為獲得更多基因編輯豬，可在胚胎移植前選擇_______期的胚胎進行_______。產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自于______號豬。

(4)為檢測病毒外殼蛋白基因是否被導(dǎo)入4號豬并正常表達(dá)，可進行______（填序號）。

①DNA測序②染色體倍性分析③體細(xì)胞結(jié)構(gòu)分析④抗原—抗體雜交參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、D【分析】利用胡蘿卜韌皮部的細(xì)胞培育出植株體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，①正確；轉(zhuǎn)入抗蟲基因的棉花葉肉細(xì)胞培育出植株體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，②正確；番茄體細(xì)胞與馬鈴薯體細(xì)胞融合后培育出植株體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，③正確；利用小麥花藥離體培育出單倍體植株體現(xiàn)了植物生殖細(xì)胞的全能性，④正確；蜜蜂未受精的卵發(fā)育成雄峰體現(xiàn)了動物生殖細(xì)胞的全能性，⑤正確。2、A【分析】【分析】

試管嬰兒技術(shù)是為了幫助不孕夫婦成功孕育胎兒；不需要進行基因檢測，也不能設(shè)計嬰兒性別；設(shè)計試管嬰兒技術(shù)中，可根據(jù)需要取用嬰兒的某些細(xì)胞(如造血干細(xì)胞)，但不能取用嬰兒的器官。

【詳解】

A；試管嬰兒不需要對胚胎進行基因診斷；而設(shè)計試管嬰兒需要對胚胎進行基因診斷，A正確；

B；兩者都屬于有性生殖；B錯誤；

C；兩者都需要進行胚胎移植；C錯誤；

D；兩者都需要進行體外受精；D錯誤。

故選A。

【點睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握試管嬰兒和是試管嬰兒的概念和過程，明確兩者的主要區(qū)別為是否對胚胎進行基因檢測，而其他方面基本相同，進而結(jié)合選項分析答題。3、A【分析】【分析】

分析題圖；①④是同一種限制酶切割形成的，具有相同的黏性末端，據(jù)此分析。

【詳解】

A.圖中①④是同一種限制酶切割形成的；因此以上DNA片段是由4種限制酶切割后產(chǎn)生的，A錯誤；

B.DNA連接酶可將具有相同末端的DNA片段連接起來；B正確；

C.圖中①④具有相同的黏性末端，可被DNA連接酶連接形成C正確；

D.限制酶和DNA連接酶作用的部位都是磷酸二酯鍵，其中限制酶能將磷酸二酯鍵切斷，而DNA連接酶能將磷酸二酯鍵連接起來，D正確。4、B【分析】【分析】

哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞；是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞。ES細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上，表現(xiàn)為體積??；細(xì)胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，即可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)條件下，ES可以增殖而不發(fā)生分化。ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上，或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中能夠維持不分化狀態(tài)。

【詳解】

A；克隆羊的繁殖方式屬于無性生殖；A錯誤；

B；由分析可知；胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)可維持只增殖不分化狀態(tài)，B正確；

C；受精時防止多精入卵的兩屏障是透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)；C錯誤；

D；囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞可用于性別鑒定；將來可以發(fā)育成胎膜和胎盤，D錯誤。

故選B。5、D【分析】【分析】

一對名為露露和娜娜的基因編輯嬰兒于2018年11月在中國健康誕生。這對雙胞胎的一個基因經(jīng)過敲除；使她們出生后即能天然抵抗艾滋病。這是世界首例免疫艾滋病的基因嬰兒，也意味著中國在基因編輯技術(shù)用于疾病預(yù)防領(lǐng)域?qū)崿F(xiàn)歷史性突破。但這項研究也引起了爭議，具體表現(xiàn)在：倫理上的擔(dān)憂；基因編輯技術(shù)存在潛在脫靶效應(yīng)；基因編輯技術(shù)敲除基因后對其他基因的表達(dá)有可能存在影響。

【詳解】

基因編輯制造人類的行為不符合倫理道德；A錯誤；基因編輯技術(shù)，只是對個別人個別基因進行編輯，不一定改變?nèi)祟愡M化的速度和方向，B錯誤；基因編輯技術(shù)改變了人類的遺傳物質(zhì)，但并沒有出現(xiàn)生殖隔離，即沒有形成新物種，C錯誤；基因編輯技術(shù)可用于疾病預(yù)防領(lǐng)域研究，但不能用于編輯嬰兒，D正確；故選D。

【點睛】

本題主要考查基因工程的安全性和倫理問題的分析，此題容易混淆，基本知識必須扎實，易混知識必須區(qū)分清楚。二、多選題(共7題，共14分)6、B:C【分析】【分析】

據(jù)圖分析，圖示為細(xì)胞融合的過程，a細(xì)胞與b細(xì)胞融合形成融合細(xì)胞c，c細(xì)胞具有a細(xì)胞和b細(xì)胞的遺傳物質(zhì)；融合過程常用聚乙二醇進行誘導(dǎo)，對于動物細(xì)胞融合還可以用滅活的病毒進行誘導(dǎo)。

【詳解】

A、若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞；應(yīng)該先用酶解法去掉它們的細(xì)胞壁再誘導(dǎo)融合，A錯誤；

B；無論是動物細(xì)胞還是植物細(xì)胞；兩個細(xì)胞的融合都需要促融處理后才能實現(xiàn)，B正確；

C；兩個細(xì)胞融合成一個細(xì)胞；利用了細(xì)胞膜的流動性，C正確；

D、c細(xì)胞同時具備了a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因；但是基因是選擇性表達(dá)的，因此c細(xì)胞中基因不一定都能夠表達(dá)，D錯誤。

故選BC。

【點睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的過程及其原理，梳理兩個過程的相關(guān)知識點和細(xì)節(jié)，結(jié)合選項圖示分析答題。7、B:C:D【分析】【分析】

利用沼氣處理秸稈和糞便；產(chǎn)生沼氣和沼液沼渣，然后進行循環(huán)利用，這是一種很好的沼氣生態(tài)產(chǎn)業(yè)循環(huán)模式。該工程實現(xiàn)能量和物質(zhì)的多級利用，充分體現(xiàn)了物質(zhì)循環(huán)再生的原理。

【詳解】

A；在農(nóng)村發(fā)展沼氣可以解決生活燃料問題；有利于保護林草植被，A正確；

B；該工程實現(xiàn)了能量和物質(zhì)的多級利用；充分體現(xiàn)了循環(huán)原理，B錯誤；

C；保持生物比例合理遵循了協(xié)調(diào)原理；C錯誤；

D；沼氣可作為生活能源被人類利用；但這部分能量不能流入生物體內(nèi)，D錯誤。

故選BCD。8、A:D【分析】【分析】

細(xì)胞的全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能。一般能夠體現(xiàn)全能性的例子：植物組織培養(yǎng)；動物細(xì)胞核移植技術(shù)等。

【詳解】

A；番茄—馬鈴薯植株的培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)；離不開植物組織培養(yǎng)，并表現(xiàn)了體細(xì)胞全能性，A正確；

B；細(xì)胞產(chǎn)物工廠化培養(yǎng)差不多是培養(yǎng)到愈傷組織階段；沒有體現(xiàn)全能性，B錯誤；

C；獲得植物單倍體一般是選擇花藥進行離體培養(yǎng)；但是體現(xiàn)的是生殖細(xì)胞的全能性，C錯誤；

D；大量制備三倍體無子西瓜幼苗需要植物組織培養(yǎng)技術(shù)；并且也表現(xiàn)了體細(xì)胞的全能性，D正確。

故選AD。9、A:C:D【分析】【分析】

1；分離各種細(xì)胞器常用差速離心法。

2；植物體細(xì)胞雜交過程中；誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有物理法（離心、振動、電刺激）和化學(xué)法（聚乙二醇）；誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法包括物理法（離心、振動、電刺激）、化學(xué)法（聚乙二醇）和生物法（滅活的病毒）。

3；驗證DNA分子復(fù)制方式為半保留復(fù)制的實驗需要采用密度梯度離心法。

4；噬菌體侵染細(xì)菌實驗中攪拌的目的是將噬菌體的蛋白質(zhì)外殼與被侵染的細(xì)菌分開；離心的目的是讓上清液中析出質(zhì)量較輕的噬菌體蛋白質(zhì)外殼，而質(zhì)量較重的大腸桿菌則分布在沉淀物中。

【詳解】

A；證明DNA分子半保留復(fù)制中；采用了密度梯度離心法，A錯誤；

B；誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法有離心、振動、電刺激等；B正確；

C；分離各種細(xì)胞器常用差速離心法；即用不同的離心速度對細(xì)胞勻漿進行離心，分離核糖體比分離葉綠體的轉(zhuǎn)速高，C錯誤；

D；噬菌體侵染細(xì)菌實驗中；進行離心的目的是讓上清液中析出質(zhì)量較輕的噬菌體的蛋白質(zhì)外殼，而質(zhì)量較重的大腸桿菌（內(nèi)含噬菌體的DNA）則分布在沉淀物中，D錯誤。

故選ACD。10、A:D【分析】【詳解】

B單細(xì)胞DNA體外擴增是DNA的擴增；不能說明細(xì)胞具有全能性，動物雜交瘤細(xì)胞不能產(chǎn)生生物個體，所以，也不能說明細(xì)胞具有全能性，答案AD。

考點定位：考查細(xì)胞全能性知識。11、A:B:C【分析】【分析】

受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段：準(zhǔn)備階段1-精子獲能；剛剛排出的精子，不能立即與卵子受精，必須在雌性動物生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化后，才能獲得受精能力；準(zhǔn)備階段2-卵子的準(zhǔn)備，動物排出的可能是初級卵母細(xì)胞也可能是次級卵母細(xì)胞，都要在輸卵管內(nèi)進一步成熟，達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時，才具備與精子受精的能力。卵細(xì)胞形成過程，其中減數(shù)第一次分裂是在雌性動物排卵前后完成的，場所在卵巢；減數(shù)第二次分裂是在受精過程中完成的，場所在輸卵管中。受精作用完成的標(biāo)志：在卵黃膜和透明帶之間的間隙可以觀察到兩個極體（一個是第一極體，還有一個是第二極體）

【詳解】

A；采集到的精子必需經(jīng)過獲能處理；卵細(xì)胞必需發(fā)育到減數(shù)第二次分裂的中期才具有受精能力，A錯誤；

B；排卵就是卵細(xì)胞從卵泡中排出；可能是初級卵母細(xì)胞或次級卵母細(xì)胞，B錯誤；

C；卵細(xì)胞形成時的分裂過程在卵巢和輸卵管中完成；C錯誤；

D；在卵黃膜和透明帶之間觀察到兩個極體；說明卵細(xì)胞已經(jīng)完成了受精，這是判斷卵細(xì)胞是否受精的重要標(biāo)志，D正確。

故選ABC。

【點睛】12、A:C:D【分析】【分析】

生態(tài)農(nóng)業(yè)中能夠調(diào)整能量流動的方向；使能量更多的流向?qū)θ祟愑幸娴姆矫?，提高能量的利用率，但是不能改變營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率。

【詳解】

A；沼氣池的建立使物質(zhì)得以充分利用；實現(xiàn)了能量的多級利用，同時減少了環(huán)境污染，A正確；

B；該生態(tài)農(nóng)業(yè)調(diào)整食物鏈；實現(xiàn)了物質(zhì)的循環(huán)利用，提高了能量利用率，但不能改變能量傳遞效率，B錯誤；

C；這一生態(tài)工程模式主要適用于江浙平原而不適用于我國西北地區(qū)；這是因為在建立生態(tài)工程時還需要遵循“整體、協(xié)調(diào)、循環(huán)、再生”的原理，我國西北地區(qū)氣候比較干旱，并且水資源不足，不適宜這種生態(tài)工程模式，C正確；

D；這種生態(tài)農(nóng)業(yè)系統(tǒng)調(diào)整了能量流動的方向；改善和優(yōu)化系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)，使能量更多的流向?qū)θ祟愑幸娴姆矫?，進而達(dá)到改善系統(tǒng)功能的效果，D正確。

故選ACD。

【點睛】三、填空題(共5題，共10分)13、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手術(shù)刀”即切割DNA的是限制核酸內(nèi)切酶簡稱限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是DNA連接酶；

（3）基因工程中最常用的運載體是質(zhì)粒；

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達(dá)；說明人和牛共用一套遺傳密碼。

【考點定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA連接酶質(zhì)粒共用一套遺傳密碼14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】取代修補15、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復(fù)的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對宿主細(xì)胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對宿主細(xì)胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細(xì)胞，使機體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對被新冠病毒感染后肺細(xì)胞強烈攻擊引發(fā)肺炎；此時可通過適度使用免疫抑制劑對病人進行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組，故應(yīng)選取甲的B細(xì)胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對宿主細(xì)胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復(fù)后一段時間；若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應(yīng)的記憶細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。

【點睛】

本題結(jié)合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識記病毒的結(jié)構(gòu)，明確病毒沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)；識記單克隆抗體的制備過程，掌握其優(yōu)點及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶16、略

【分析】【分析】

動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織；器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。

【詳解】

1；基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)；是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品的遺傳技術(shù)。

2；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。

3；動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖，其原理是細(xì)胞增殖。

4；植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)；指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。

【點睛】

本題考查基因工程概念、胚胎移植、動植物細(xì)胞培養(yǎng)等相關(guān)知識，意在考察考生對知識點的理解掌握程度?！窘馕觥竣?又叫基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)②.又稱受精卵移植，是指將雌性動物體內(nèi)的的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀況相同的其他雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)③.植物細(xì)胞全能性、細(xì)胞增殖17、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)，其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體稱為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動物應(yīng)為常見或存量大的品種)，如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對精子進行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應(yīng)鑒定胚胎中與有關(guān)的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實現(xiàn)的前提是受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

【點睛】

胚胎移植的實質(zhì)：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉(zhuǎn)移?！窘馕觥烤荧@能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。四、判斷題(共5題，共45分)18、A【分析】【詳解】

由于存在防止多精入卵的兩道屏障，故一個卵細(xì)胞一般只能同一個精子結(jié)合，形成受精卵，這句話是正確的。19、A【分析】【詳解】

受精過程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。精子入卵后形成雄原核，同時被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核，雄、雌原核充分發(fā)育后，相向移動，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此說法正確。

故正確。20、B【分析】【詳解】

受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段；在自然狀態(tài)下，哺乳動物的受精在輸卵管內(nèi)完成。

故錯誤。21、B【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原腸胚。圖B中1是滋養(yǎng)層，2是內(nèi)細(xì)胞團，3是透明帶，4是囊胚腔；圖C中5是外胚層，6是滋養(yǎng)層，7是原腸腔，8是內(nèi)胚層。

【詳解】

（1）從A到C的過程中細(xì)胞均需要消耗能量；故胚胎中有機物的含量均減少，（1）正確。

（2）桑椹胚之前所有細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬全能細(xì)胞，故A時期胚胎中的細(xì)胞都是全能細(xì)胞，囊胚期時細(xì)胞出現(xiàn)分化，滋養(yǎng)層細(xì)胞不是全能細(xì)胞，（2）錯誤。

（3）胚胎移植必須使用處于桑椹胚或囊胚時期的胚胎；處于A或B時期的胚胎，（3）錯誤。

（4）圖示過程細(xì)胞通過有絲分裂增殖；有絲分裂過程中可能發(fā)生突變，遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生改變，（4）正確。

故分別為√、×、×、√。22、B【分析】【詳解】

生態(tài)系統(tǒng)的恢復(fù)力穩(wěn)定性是有一定限度的，導(dǎo)致了生態(tài)工程的局限性，使生態(tài)工程并不能解決所有的污染、破壞問題，因此不能走“先污染、破壞，后治理”的老路，故錯誤。五、實驗題(共4題，共28分)23、略

【分析】試題分析：

（1）據(jù)圖可推出；①是RNA，圖中為提取RNA進行反轉(zhuǎn)錄得到cDNA。根據(jù)基因工程的操作程序，②是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。

（2）所設(shè)計的引物是需要用于目的基因的復(fù)制；則引物應(yīng)與目的基因能互補配對，但在兩種引物之間不應(yīng)有能互補配對的核苷酸序列，防止引物自身配對。

（3）將受體細(xì)胞接種到含親霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；因此該實驗應(yīng)以青霉素抗性基因作為標(biāo)記基因。

（4）該實驗是為了獲得激活蛋白AP45；則需要以激活蛋白AP45為抗原；制備出其單克隆抗體。

（5）此類激活蛋白制成的微生物蛋白農(nóng)藥并不會直接殺死害蟲或者病原生物，因此其具有不引起害蟲或病原生物的抗藥性等優(yōu)點。此類農(nóng)藥的研制和使用，遵循了生態(tài)工程中的整體性原則?！窘馕觥縍NA(或mRNA)構(gòu)建目的基因表達(dá)載體目的基因（或cDNA)兩種引物（或引物自身的不同片段或引物與非目的基因，）青霉素抗性基因激活蛋白AP45(或目的蛋白）不引起害蟲或病原生物的抗藥性整體性（或者協(xié)調(diào)與平衡）24、略

【分析】【分析】

本題主要考察DNA重組技術(shù)的步驟；要求考生能準(zhǔn)確把握限制酶的作用特點；標(biāo)記基因的作用及重組質(zhì)粒的篩選等知識點，并能從題圖中提取有效信息，綜合運用。

【詳解】

（1）限制酶SmaI的酶切割位點為CCC↓GGG，目的基因D的序列里面有兩個該酶的酶切位點，故此段DNA會被切割成三段，從左至右第一段為534+3=537bp；第二段796-3-3=790bp；第三段658+3=661bp；

（2）若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換，基因D就突變?yōu)榛騞，則基因d上只有一個限制酶SmaⅠ切割位點，被限制酶SmaⅠ切割的產(chǎn)物長度為534+796-3=1327kb、658+3=661bp；故隱性純合子被限制酶SmaⅠ切割的產(chǎn)物中共有2種不同DNA片段。為了提高試驗成功率，需要通過PCR技術(shù)擴增目的基因，以獲得大量的目的基因。

（3）由圖1可知目的基因兩側(cè)都有GGATCC序列，該序列可被限制酶BamHⅠ和MboⅠ的識別并切割；由圖2質(zhì)粒上的GGATCC序列可知，若選用MboⅠ切割；會將質(zhì)粒中兩個抗性基因（標(biāo)記基因A；B）都破壞掉，故只能選用BamHⅠ（破壞抗生素A抗性基因，不破壞抗生素B抗性基因）。首先用含有抗生素B的培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，能生存下來的是含有普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒的大腸桿菌；再將培養(yǎng)的大腸桿菌接種在含有抗生素A的培養(yǎng)基培養(yǎng)，能生存下來的是含有普通質(zhì)粒的大腸桿菌，通過對比分析即可得到含重組質(zhì)粒的大腸桿菌。

（4）若將插入在抗生素B抗性基因處的目的基因重新切割下來；不一定能用BamHⅠ，因為BamHⅠ的識別序列為GGATCC，而目的基因和抗生素B抗性基因拼接處不一定出現(xiàn)GGATCC。

【點睛】

正確解答此題需要明確（1）限制酶的特點：識別特定序列；切割特定位點；

（2）明確標(biāo)記基因的作用，故在形成重組質(zhì)粒時至少要保留一個標(biāo)記基因?！窘馕觥?37bp、790bp、661bp2PCRBamHⅠ抗生素A不一定因為目的基因和抗生素B抗性基因拼接處不一定出現(xiàn)GGATCC25、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）擬南芥是生命科學(xué)研究的模式生物；2000年底已經(jīng)完成全部基因測序，基因測序需要構(gòu)建擬南芥的基因組文庫，理由是基因組文庫理論上含有該生物的全部基因。

（2）根據(jù)E基因結(jié)構(gòu)和圖甲結(jié)果可以看出；植株1通過PCR條帶只有900一條，與基因E等長，說明該植株是野生型純合子，同理判斷植株3是E基因突變隱性純合子。

（3）將甲和乙雜交，F(xiàn)1的表現(xiàn)型為野生型；F1自交，若F2中突變型（單突變體）的比例約為說明E基因和F基因在染色體上的位置關(guān)系是位于一對同源染色體上，并且E與f位于一條染色體上，e與F位于另一條染色體上；F2中出現(xiàn)少量雙突變體最可能的原因是F1減數(shù)分裂過程中；E（e）基因和F（f）基因所在的染色體發(fā)生交叉互換，形成同時含有e和f的配子（交叉互換同時產(chǎn)生E；F突變基因的重組型配子）。

（4）由圖2可知；F基因（野生型）表達(dá)產(chǎn)物抑制主根生長的生長。

（5）將綠色熒光蛋白（GFP）基因和F基因融合；構(gòu)建表達(dá)載體，獲得轉(zhuǎn)基因擬南芥，熒光鑒定結(jié)果如圖3，該結(jié)果不足以確定F蛋白位于細(xì)胞膜上。繼續(xù)用高濃度蔗糖溶液處理液泡較小的轉(zhuǎn)基因成熟熒光細(xì)胞，使其發(fā)生質(zhì)壁分離，若觀察到只有細(xì)胞膜部位有綠色熒光，可證明F蛋白在細(xì)胞膜上。同時還需要補充一組將含GFP基因的質(zhì)粒導(dǎo)入擬南芥細(xì)胞作為對照，以消除無關(guān)變量的影響。

（6）①轉(zhuǎn)基因擬南芥細(xì)胞能發(fā)出黃色熒光的原因是：抗原抗體特異性結(jié)合會使YFPN與YFPC蛋白相互靠近。

②驗證E蛋白和F蛋白在細(xì)胞內(nèi)形成二聚體后發(fā)揮作用的實驗組的設(shè)計思路：E基因和F基因分別與YFPN及YFPC基因融合；分別構(gòu)建基因表達(dá)載體；將兩個重組表達(dá)載體同時導(dǎo)入擬南芥細(xì)胞，在515nm激發(fā)光下觀察是否可發(fā)出黃色熒光。

【點睛】

本題以實驗為載體，考查基因工程的相關(guān)知識，目的使學(xué)生掌握基因工程的操作步驟，學(xué)會通過數(shù)據(jù)、曲線分析得出結(jié)論的能力?！窘馕觥炕蚪M（基因）基因組文庫理論上含有該生物的全部基因13野生型位于一對同源染色體上F1減數(shù)分裂過程中，E（e）基因和F（f）基因所在染色體發(fā)生交叉互換，形成同時含有e和f的配子（交叉互換產(chǎn)生同時含有E、F突變基因的重組型配子）（表達(dá)產(chǎn)物）抑制主根的生長質(zhì)壁分離只有細(xì)胞膜部位有綠色熒光（熒光區(qū)域或面積逐漸縮?。⒑珿FP基因的質(zhì)粒導(dǎo)入擬南芥（其他處理同實驗組）抗原抗體的特異性結(jié)合E基因和F基因分別與YFPN及YFPC基因融合，分別構(gòu)建表達(dá)載體。將2個重組表達(dá)載體同時導(dǎo)入擬南芥細(xì)胞，在515mm激發(fā)光下觀察是否可發(fā)出黃色熒光26、略

【分析】【分析】

本題實驗研究P菌對人牙周膜細(xì)胞增殖和分化的影響。根據(jù)曲線信息可知；實驗組數(shù)據(jù)和對照組數(shù)據(jù)相差不大；根據(jù)圖示觀察牙周膜細(xì)胞礦化情況可知，對照組的礦化比實驗組的嚴(yán)重，說明P菌感染人牙周膜細(xì)胞后，可以抑制成骨分化。

【詳解】

（1）取人體新鮮牙周膜組織塊，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理制成細(xì)胞懸液，置于含5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；獲得4～10代牙周膜細(xì)胞。

（2）實驗結(jié)果顯示：P菌感染人牙周膜細(xì)胞后；與對照組相比，牙周膜細(xì)胞的細(xì)胞增殖活性變化不大，故其未發(fā)生明顯的增殖改變。

（3）①正常牙周膜細(xì)胞能不斷分化為骨纖維細(xì)胞；成骨細(xì)胞等多種細(xì)胞；這是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。

②根據(jù)對照實驗的相關(guān)原則；對照組的處理是對未被P菌感染的牙周膜細(xì)胞進行礦化誘導(dǎo)處理。

③研究發(fā)現(xiàn)；成骨分化與一種特異性轉(zhuǎn)錄因子Runx2有關(guān)，P菌感染人牙周膜細(xì)胞后，成骨分化被抑制，而該轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)水平明顯下調(diào)，由此推測，Runx2的作用是誘導(dǎo)牙周膜細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞。

【點睛】

根據(jù)對照實驗的相關(guān)原則，分析曲線信息和圖示信息是解題關(guān)鍵。曲線圖中兩曲線接近說明自變量的處理對因變量并沒有很大的影響?！窘馕觥恳鹊鞍酌富蚰z原蛋白酶5%CO2未發(fā)生選擇性表達(dá)對未被P菌感染的牙周膜細(xì)胞進行礦化誘導(dǎo)處理誘導(dǎo)牙周膜細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞六、綜合題(共4題，共28分)27、略

【分析】【分析】

動物乳腺生物反應(yīng)器是基于轉(zhuǎn)基因技術(shù)平臺；使外源基因?qū)雱游锘蚪M中并定位表達(dá)于動物乳腺，利用動物乳腺天然；高效合成并分泌蛋白的能力，在動物的乳汁中生產(chǎn)一些具有重要價值產(chǎn)品的轉(zhuǎn)基因動物的總稱。

乳腺生物反應(yīng)器是最理想的生物反應(yīng)器；它的優(yōu)點：（1）藥物蛋白只在乳腺內(nèi)，對動物的生理活動不影響。（2）長期收集也不會對動物造成傷害。（3）產(chǎn)品成本低。（4）無論純化還是使用都很方便。

【詳解】

（1）據(jù)圖分析可知，構(gòu)建rhPA基因表達(dá)載體需要用限制酶XhoⅠ切割質(zhì)粒和目的基因；為獲得乳腺特異性表達(dá)載體需用SalⅠ和NotⅠ酶切割重組質(zhì)粒使之線性化。

（2）對母兔注射促性腺激素使其超速排卵；并與正常公兔配種。將乳腺特異性表達(dá)載體導(dǎo)入家兔受精卵中最有效的導(dǎo)入技術(shù)是顯微注射技術(shù)。

（3）將受精卵置于37℃的95%空氣和5%CO2氣體環(huán)境中培養(yǎng)一段時間后移植到代孕兔的輸卵管中；代孕兔需經(jīng)同期發(fā)情（孕激素）處理。

（4）只有部分子代兔導(dǎo)入了人組織纖溶酶原激活劑基因；公兔不能表達(dá)人組織纖溶酶原激活劑；故子代兔需要經(jīng)過篩選過程才能獲得生產(chǎn)人組織纖溶酶原激活劑的生物反應(yīng)器。

【點睛】

本題考查基因工程、細(xì)胞工程、胚胎工程的知識點，要求學(xué)生掌握基因工程的操作工具和步驟以及應(yīng)用，掌握動物細(xì)胞的培養(yǎng)條件和體外受精的過程以及胚胎移植的操作?！窘馕觥縓hoⅠSalⅠ和NotⅠ促性腺激素顯微注射技術(shù)同期發(fā)情(發(fā)情/孕激素)只有部分子代兔導(dǎo)入了人纖溶酶原激活劑基因公兔不能表達(dá)人纖溶酶原激活劑基因28、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖中表示青蒿細(xì)胞中青蒿素的合成途徑；青蒿素的合成需要FPP合成酶；ADS酶和CYP71AV1酶。

(1)

野生青蒿生長受地域性限制；體內(nèi)生成的青蒿素極少，科學(xué)家考慮采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)（或基因工程或基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)）打破物種間的生殖隔離，利用酵母細(xì)胞大量獲得青蒿素。該育種方法的原理是基因重組。

(2)

低溫或者秋水仙素處理可以抑制紡錘體的形成；使細(xì)胞內(nèi)的染色體經(jīng)過復(fù)制但不發(fā)生分離，從而使染色體數(shù)目加倍，故用低溫或秋水仙素方法處理二倍體青蒿可得到四倍體青蒿。

(3)

野生型青蒿是二倍體（2N=18）；與四倍體（4N=36）青蒿雜交產(chǎn)生的后代是三倍體，體細(xì)胞內(nèi)含有9+18=27條染色體，為3個染色體組，由于三倍體減數(shù)分裂時聯(lián)會紊亂，故三倍體高度不育，因此四倍體青蒿與野生型青