腸桿菌科檢驗(yàn)概述靖吉芳講解

7.2.1腸桿菌科檢驗(yàn)概述OVERVIEWOFENTEROBACTERIACEAE靖吉芳概念腸桿菌科是一大群寄居在人和動(dòng)物腸道，以及自然界中的生物學(xué)性狀相似的G-桿菌。大多為腸道正常菌群的重要成員，可作為條件致病菌引起感染；少數(shù)為致病菌，可引起不同類型疾病。概念為何高度重視葡萄球菌？最常見的化膿性球菌，分布廣泛臨床分離率高耐藥形式嚴(yán)峻，多重耐藥2022年全國(guó)病原菌分布學(xué)習(xí)目標(biāo)1掌握銅綠假單胞菌的生物學(xué)特征與微生物學(xué)檢驗(yàn)。2掌握不動(dòng)桿菌屬的生物學(xué)特征與微生物學(xué)檢驗(yàn)。3了解銅綠假單胞菌和不動(dòng)桿菌屬的臨床意義。一、生物學(xué)性狀（一）形態(tài)與染色G-桿或球桿菌，無(wú)芽胞，多數(shù)有周鞭毛，致病菌常有菌毛。短桿狀的大腸埃希菌球桿狀的肺炎克雷伯菌有周鞭毛的傷寒沙門菌一、生物學(xué)性狀（二）培養(yǎng)特性營(yíng)養(yǎng)需求不高，普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好；需氧或兼性厭氧，最適溫度35~37℃，最適pH值7.4在血平板上形成灰白、濕潤(rùn)、光滑、凸起、邊緣整齊的S菌落，部分屬種在血平上可產(chǎn)生溶血環(huán)；在腸道選擇性培養(yǎng)基上（如MAC\SS），因分解乳糖的能力不同，形成不同顏色的菌落。血平板上的大腸埃希菌不同細(xì)菌在MAC培養(yǎng)基上的菌落特性圖片來自環(huán)凱微生物官網(wǎng)一、生物學(xué)性狀（三）生化反應(yīng)腸桿菌科細(xì)菌生化反應(yīng)活潑，共同的生化反應(yīng)特征如下：葡萄糖+/⊕氧化酶—觸酶+硝酸鹽還原試驗(yàn)+O/F試驗(yàn)為發(fā)酵型一、生物學(xué)性狀（四）抗原構(gòu)造O抗原：菌體抗原，脂多糖，耐熱。H抗原：鞭毛抗原，蛋白質(zhì)，不耐熱，60℃30分鐘可破壞。表面抗原：多糖。K、Vi抗原，不耐熱，60℃30分鐘可破壞；可阻擋O抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合。O及H抗原為腸桿菌科血清學(xué)分群及型的主要依據(jù)。腸桿菌科細(xì)菌的抗原結(jié)構(gòu)一、生物學(xué)性狀（五）變異性易變異：S-R變異、H-O變異、耐藥性變異。（六）抵抗力不強(qiáng)，加熱60℃經(jīng)30分鐘即死亡。膽鹽、煌綠等對(duì)G+及大腸桿菌等腸道非致病菌有選擇性抑制作用，可用于制備腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基以分離腸道致病菌。二、臨床意義腸道感染腹瀉食物中毒腸熱癥腸道外感染鼠疫（烈性傳染?。┟谀虻栏腥痉窝啄X膜炎傷口化膿菌血癥三、微生物學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本采集腸道外標(biāo)本：根據(jù)患者情況采集相應(yīng)標(biāo)本，膿液、滲出液、傷口分泌物、血液等；腸道內(nèi)標(biāo)本：采集疾病早期新鮮糞便標(biāo)本，挑取其中膿血、粘液部分，及時(shí)送檢。如不能立即送檢，應(yīng)將標(biāo)本置于運(yùn)送培養(yǎng)基或甘油緩沖鹽水中冷藏保存。三、微生物學(xué)檢驗(yàn)?zāi)?、滲出物、咽拭子、腦脊液離心沉淀物等血液、骨髓、腦脊液等糞便、嘔吐物、剩余食物直接涂片革蘭染色增菌培養(yǎng)(肉浸液)分離培養(yǎng)（BAP/EMB/MAC/SS）分離培養(yǎng)（EMB/MAC/SS）可疑菌落初步鑒定（KIA\MIU試驗(yàn)）最終鑒定藥敏試驗(yàn)全面生化反應(yīng)血清學(xué)鑒定常用腸道選擇性培養(yǎng)基伊紅美蘭平板（EMB）伊紅、美蘭、乳糖。分解乳糖的細(xì)菌產(chǎn)生酸使指示劑變色，菌落呈紫黑色，并帶有綠色金屬光澤。不分解乳糖的細(xì)菌，無(wú)酸產(chǎn)生，菌落呈無(wú)色至琥珀色。常用腸道選擇性培養(yǎng)基麥康凱平板（MAC）：膽鹽、中性紅、乳糖。當(dāng)細(xì)菌分解乳糖產(chǎn)酸使中性紅變色，菌落呈粉紅色。當(dāng)細(xì)菌不分解乳糖，無(wú)酸產(chǎn)生，菌落呈無(wú)色。常用腸道選擇性培養(yǎng)基SS平板：膽鹽、煌綠、乳糖、中性紅、枸櫞酸鐵。細(xì)菌分解乳糖產(chǎn)酸使中性紅變色，菌落呈紅色。細(xì)菌不分解乳糖，無(wú)酸產(chǎn)生，菌落呈無(wú)色。細(xì)菌分解含硫氨酸產(chǎn)生H2S時(shí)，與培養(yǎng)基中的鐵離子結(jié)合形成黑色菌落腸桿菌科細(xì)菌主要