2025年湘教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年湘教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、利用麥冬花藥進(jìn)行離體培養(yǎng)可為后期基因改良及新品種選育提供材料；操作流程如下圖。下列敘述不正確的是（）

A.圖中X和Y分別表示愈傷組織和單倍體幼苗B.需要對麥冬花藥、培養(yǎng)基及操作工具進(jìn)行滅菌處理C.圖中①和②過程所用培養(yǎng)基中激素用量的比例不同D.麥冬花藥離體培養(yǎng)的過程體現(xiàn)了生殖細(xì)胞具有全能性2、下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述，錯誤的是（）A.使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要滅菌處理B.培養(yǎng)基中必須含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽C.平板劃線法和稀釋涂布平板法均可用于菌種鑒定D.培養(yǎng)不同的微生物所需的培養(yǎng)條件一般不同3、生物技術(shù)的安全性和倫理問題是社會關(guān)注的熱點(diǎn)。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.反對設(shè)計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒性別B.基因篩檢可能幫助人類盡早預(yù)防全部遺傳性疾病，但也會引發(fā)基因歧視問題C.我國對待生物武器的態(tài)度明確而堅定，應(yīng)嚴(yán)禁使用生物武器D.人們對轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭議集中在食物安全、生物安全和環(huán)境安全等方面4、下圖為培育“試管山羊”的基本過程示意圖；下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.甲過程中可通過給母山羊注射促性腺激素使其超數(shù)排卵B.乙過程將采集到的卵子和精子混合完成受精C.丙過程與乙過程中應(yīng)采用相同成分的培養(yǎng)液D.丁過程中必須將早期胚胎移植到與供體性狀相同的代孕母羊子宮內(nèi)5、下列有關(guān)動物細(xì)胞核移植和克隆動物的敘述，錯誤的是（）A.胚胎細(xì)胞核移植的難度明顯低于體細(xì)胞核移植B.用于核移植的卵母細(xì)胞需要在體外培養(yǎng)到MⅡ期C.核移植后形成的重構(gòu)胚可以直接移入受體動物體內(nèi)D.克隆動物和體細(xì)胞供體動物的性狀基本相同6、鼠源單克隆抗體制備的基本過程如下圖所示。下列關(guān)于鼠源單克隆抗體制備的敘述，錯誤的是（）

A.小鼠通常需要多次注射同種抗原蛋白，以提高相應(yīng)B細(xì)胞數(shù)量B.在HAT培養(yǎng)基上能生長的細(xì)胞不一定能產(chǎn)生所需的抗體C.克隆化培養(yǎng)過程中篩選抗體檢驗陽性的細(xì)胞以進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)D.可將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠血液中實現(xiàn)單克隆抗體的大規(guī)模生產(chǎn)7、野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長，賴氨酸營養(yǎng)缺陷型突變菌由于發(fā)生基因突變只能在添加了賴氨酸的培養(yǎng)基上生長。下圖為以野生型菌株為材料，誘變、純化賴氨酸營養(yǎng)缺陷突變株的部分流程圖，數(shù)字代表培養(yǎng)基，A、B、C表示操作步驟。下列有關(guān)說法正確的是（）

（原位影印是指用無菌絨布輕蓋在已長好菌落的培養(yǎng)基②上；然后不轉(zhuǎn)動任何角度，將②上的菌落按原位“復(fù)印”至新的培養(yǎng)基③和④上）

A.野生型大腸桿菌能夠合成所需的全部氨基酸，因此培養(yǎng)基中無需提供氮源B.①②④培養(yǎng)基中需添加賴氨酸，而③培養(yǎng)基中不能添加賴氨酸C.需將①中的菌液適當(dāng)稀釋后，用接種環(huán)蘸取菌液在②上進(jìn)行劃線接種D.從④培養(yǎng)基中挑取乙菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)即可獲得所需突變株8、通過基因工程，可使大腸桿菌合成人的胰島素。下列敘述不正確的是（）A.常用相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理目的基因和質(zhì)粒B.根據(jù)人的胰島素和氨基酸序列推測胰島素基因的序列，再化學(xué)合成胰島素基因C.大腸桿菌能合成人的胰島素，是因為有相同的雙螺旋結(jié)構(gòu)D.導(dǎo)入大腸桿菌的人的胰島素基因不一定能成功表達(dá)評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)9、下圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT-）；在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。下列敘述正確的是。

A.可用滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B.兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長C.雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D.細(xì)胞膜的流動性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)10、B基因存在于水稻基因組中；其僅在體細(xì)胞（2n）和精子中正常表達(dá)，但在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對卵細(xì)胞的影響，設(shè)計了如下實驗，培育轉(zhuǎn)基因植株。以下鑒定篩選轉(zhuǎn)基因植株的方式正確的是（）

A.將隨機(jī)斷裂的B基因片段制備成探針進(jìn)行DNA分子雜交B.以Luc基因為模板設(shè)計探針進(jìn)行DNA分子雜交C.以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計探針與從卵細(xì)胞提取的mRNA雜交D.檢測加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光11、聚羥基脂肪酸酯(PHA)是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯，它具有類似于合成塑料的理化特性，且廢棄后易被生物降解，可用于制造無污染的“綠色塑料”?？茖W(xué)家從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種的流程圖如下。下列敘述錯誤的是（）

A.步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含合成塑料的選擇培養(yǎng)基上B.步驟③所用的培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對嗜鹽細(xì)菌的生長越有利C.步驟④所用到的培養(yǎng)基應(yīng)加入瓊脂，以便挑取單菌落獲得純化菌株D.挑取菌落時，應(yīng)挑取多個菌落并分別測定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量12、細(xì)菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在與其他細(xì)菌的競爭中占優(yōu)勢，其中tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白。研究人員利用野生型細(xì)菌X及其不同突變體進(jìn)行了實驗：在固體培養(yǎng)基表面放置一張能隔離細(xì)菌的濾膜，將一種菌（下層菌）滴加在濾膜上后再放置第二張濾膜，滴加等量的另一種菌（上層菌），共同培養(yǎng)后，對上、下層菌計數(shù)得到如圖結(jié)果。下列分析正確的是（）

A.實驗中的培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基和濾膜均需要進(jìn)行滅菌處理B.對上、下層菌計數(shù)時應(yīng)采用稀釋涂布平板法而不能用顯微鏡直接計數(shù)C.由甲、乙、丙三組結(jié)果可推測tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性D.野生型細(xì)菌X在與tcel-tcil雙突變體和tcel突變體的競爭中均占優(yōu)勢13、研究發(fā)現(xiàn)，跨膜糖蛋白CD47與巨噬細(xì)胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，能抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞表面的高，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱。為驗證抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細(xì)胞的抑制作用，科學(xué)家按照如下流程進(jìn)行了實驗組實驗。下列敘述正確的是（）

A.①過程注射CD47相當(dāng)于給小鼠注射抗原B.②過程依據(jù)的原理是細(xì)胞膜具有流動性C.③過程需要進(jìn)行抗體檢測D.與對照組相比，圖中巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)會下降14、桑葚與草莓營養(yǎng)價值極高，口味調(diào)和。草莓中含量較高的維生素C有助于延緩桑葚天然色素的氧化；桑葚獨(dú)有的花青素、白藜蘆醇等物質(zhì)能顯著增強(qiáng)復(fù)合果酒的功效。下圖為桑葚草莓復(fù)合果酒的工廠化制備流程，下列說法正確的是（）

桑葚和草莓原料的挑選和清洗→混合攪拌→添加偏重亞硫酸鉀→榨汁→調(diào)糖和調(diào)酸→滅菌→接種發(fā)酵A.在生產(chǎn)復(fù)合果酒的過程中，要防止桑葚天然色素被氧化B.果酒發(fā)酵初期通入氧氣能促進(jìn)酵母菌繁殖，有利于加快果酒發(fā)酵C.復(fù)合果酒的制備過程中對發(fā)酵設(shè)備要進(jìn)行滅菌處理D.變酸的果酒表面會形成一層菌膜，這層菌膜是由乳酸菌形成的15、剛果紅是一種染料，可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)紅色復(fù)合物中的纖維素被分解后紅色消失。表中是篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基，利用此培養(yǎng)基可從土壤中篩選纖維素分解菌，結(jié)果如圖。下列說法正確的是（）。培養(yǎng)基的成分：纖維素15gFeSO40．5gKH2PO41gZnSO40．5gK2HPO41gCaCl20．5g尿素0．5g剛果紅適量MgSO40．5g瓊脂20g定容1L

A.培養(yǎng)基中纖維素和尿素分別提供碳源和氮源B.KH2PO4和K2HPO4在提供無機(jī)鹽的同時還能維持培養(yǎng)基的pHC.將土壤稀釋液接種在平板上的方法為稀釋涂布平板法D.平板上5個菌落都有透明圈，說明5個菌落都能分解纖維素16、下圖表示選用具有同一外源目的基因?qū)δ称贩N奶牛進(jìn)行遺傳特性改造的三種途徑；下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.獲得奶牛1通常采用顯微注射法導(dǎo)入外源基因B.奶牛2體內(nèi)不同組織細(xì)胞的基因組成一定相同C.成功獲得奶牛1、2、3表明三個受體細(xì)胞都具有全能性D.奶牛1、2、3的獲得均需在體外進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)17、GAL4基因的表達(dá)產(chǎn)物能識別啟動子中的UAS序列，從而驅(qū)動UAS序列下游基因的表達(dá)。野生型雌雄果蠅均為無色翅，且基因組中無GAL4基因和含UAS序列的啟動子?？蒲腥藛T利用基因工程在雄果蠅的一條Ⅲ號染色體上插入GAL4基因，雌果蠅的某條染色體上插入基因M（含有UAS序列啟動子的綠色熒光蛋白基因），利用雜交實驗對雌果蠅中基因M插入的位置進(jìn)行判斷：將上述雌雄果蠅雜交得到F1，讓F1中綠色翅雌雄果蠅隨機(jī)交配，觀察并統(tǒng)計F2個表型和比例。下列說法正確的是（）A.同時含有GAL4基因和基因M的果蠅才能表現(xiàn)出綠色性狀B.若F1中綠色翅：無色翅為1：3，則基因M插入Ⅲ號染色體上C.若F2中綠色翅：無色翅=9：7，則基因M插入Ⅲ號以外的其他常染色體上D.若F2中綠雌：無雌：綠雄：無雄=6：2：3：5，則基因M插入X染色體上評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)18、請回答下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性和倫理問題：

（1）一些持支持態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為，由于不同物種間存在__________，同時花粉的傳播距離和__________有限；轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物很難與其它植物雜交，因而不大可能對生物多樣性造成威脅。

（2）在轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品研究過程中，絕大多數(shù)科學(xué)家都能自覺遵守科學(xué)研究道德。例如，把重組DNA的轉(zhuǎn)移限制在遺傳上具有___________的生物上；對外源DNA進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免能夠表達(dá)出對人體有毒性或過敏的___________．

（3）一些持反對態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為，由于克隆技術(shù)尚不成熟，現(xiàn)在就做克隆人很可能孕育出有嚴(yán)重缺陷的孩子。但是支持克隆人的科學(xué)家則認(rèn)為，一些技術(shù)問題可以通過胚胎分級、______和__________等方法得到解決。

（4）對于克隆技術(shù)，中國政府的態(tài)度是___________．但不反對___________。19、載體具備的條件：①_____。②具有一至多個限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入。③______。20、目的：使目的基因在受體細(xì)胞中_____，并且可以______，使目的基因能夠______作用。21、_______mol/L濃度下，DNA溶解度最大。22、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

組織培養(yǎng)技術(shù)除了在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用外，還廣泛應(yīng)用于另一個重要的領(lǐng)域，即______。23、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會有什么變化？這項技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________24、研究表明，轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的大面積種植有效遏制了棉鈴蟲害，也顯著地降低了化學(xué)農(nóng)藥的使用量?但是，科研人員也發(fā)現(xiàn)，棉田中一種體型很小的盲蝽蟓卻容易爆發(fā)成災(zāi)?有人認(rèn)為這與大面積種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉有關(guān)?我們應(yīng)如何看待這種觀點(diǎn)_____？如果回答問題有困難，可以請教老師或通過互聯(lián)網(wǎng)尋找答案。25、我國政府同樣禁止進(jìn)行治療性克隆實驗。（選擇性必修3P108）()26、基因工程是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵技術(shù)；蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸。有人對基因工程和蛋白質(zhì)工程的關(guān)系進(jìn)行了比較，并歸納為下表。

基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較。比較項目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程原理中心法則中心法則區(qū)別過程獲取目的基因→構(gòu)建表達(dá)載體→導(dǎo)入受體細(xì)胞→目的基因的檢測與鑒定預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測氨基酸序列→合成DNA→表達(dá)出蛋白質(zhì)實質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需要的生物類型或生物產(chǎn)品（基因的異體表達(dá)）定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)結(jié)果生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是第二代基因工程

上表的比較是否正確？如果有不妥之處，嘗試進(jìn)行修改。_________評卷人得分四、實驗題(共2題，共18分)27、黑枸杞具有治療心熱病及心臟??；降低膽固醇；使大腦神經(jīng)興奮、增強(qiáng)免疫功能等效果，回答下列有關(guān)利用黑枸杞制作果酒和果醋的問題：

（1）制備黑枸杞果酒和果醋所用的菌種分別是__________________，它們的細(xì)胞在結(jié)構(gòu)方面的主要區(qū)別是_____________________。

（2）將黑枸杞榨汁后裝瓶時，不能裝滿，要留出1/3的空間，目的是_______________________。對果汁并沒有進(jìn)行滅菌處理，但隨著果酒發(fā)酵的進(jìn)行，其他微生物含量變少，原因是_____________________。據(jù)圖2可知，先進(jìn)行果酒發(fā)酵再進(jìn)行果醋發(fā)酵，用反應(yīng)式的形式寫出利用果酒進(jìn)行果醋發(fā)酵的原理：_______________________________________。

（3）進(jìn)行果醋發(fā)酵時，溫度大約要控制在_______________，另外氣體控制方面要_______________。28、（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮______、______和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、______、______等優(yōu)點(diǎn)；因此常作為遺傳學(xué)研究的實驗材料。

（2）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行________（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和______；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能__________。

（3）若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的_______。

（4）通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的____________。

（5）培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_________。

（6）若用大腸桿菌進(jìn)行實驗，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_______處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。評卷人得分五、綜合題(共4題，共8分)29、中藥在我國憑借切實的療效得到了廣泛應(yīng)用。芍藥的主要藥效成分是芍藥苷；研究人員利用抗芍藥苷的單克隆抗體對不同配伍方劑中芍藥苷的含量進(jìn)行了測定。

（1）將_______________與蛋白結(jié)合作為抗原對小鼠進(jìn)行免疫。并在_______________前取血清作為免疫結(jié)果的陰性對照樣品。

（2）取免疫后的小鼠脾臟細(xì)胞和_______________置于離心管中；加入_______________促進(jìn)細(xì)胞融合。融合后的細(xì)胞加入選擇培養(yǎng)液中培養(yǎng)一周，而后進(jìn)行專一抗體檢測篩選出_______________進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，最終獲得與芍藥苷特異性結(jié)合的單克隆抗體。

（3）為了確定制備的單克隆抗體可以用于芍藥苷含量的檢測；研究人員檢測了單抗與芍藥苷結(jié)構(gòu)類似的其他中藥小分子化合物結(jié)合率，結(jié)果如下表：

?；衔锝Y(jié)合反應(yīng)率（%）芍藥苷100人參皂苷<0．27三七皂苷<0．01甾類<0．01黃酮類<0．01

該結(jié)果充分體現(xiàn)了單克隆抗體______________的特點(diǎn)。

（4）研究人員選擇了《傷寒論》中6個含有白芍的方劑進(jìn)行研究。首先按照原書中配方進(jìn)行藥物配制；打碎后用相同濃度的乙醇浸提，過濾獲得提取液。而后利用單克隆抗體對提取液中的芍藥苷含量進(jìn)行測定，并計算芍藥苷溶出率（溶出率=芍藥苷質(zhì)量/方劑中添加白芍質(zhì)量），結(jié)果見下圖。

實驗中還測定了單獨(dú)白芍一味藥物中的芍藥苷溶出率；測定的目的是_____________。結(jié)果顯示，除_____________兩種方劑外，其他配伍對芍藥苷溶出率有較大影響，可見藥物成分間存在著復(fù)雜的相互作用。

（5）研究不同配伍方劑中藥物有效成分含量的意義在于_____________。30、下面為制備單克隆抗體和多克隆抗體的示意圖；據(jù)圖回答下列問題。

（1）與傳統(tǒng)克隆抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)______________________________。

（2）給小鼠注射抗原的目的是________________，圖中選用B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，說明細(xì)胞膜其有_______________，如果僅考慮細(xì)胞的兩兩融合，其融合細(xì)胞有_______種類型。

（3）圖中兩次篩選的目的不同，其中篩選①的目的是篩選出_________________，所用培養(yǎng)基是特定的_____________培養(yǎng)基，篩選②的目的是篩選出______________________________。

（4）科學(xué)工作者正在研究的用于治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”是將________________與________________相連。用“生物導(dǎo)彈”治療癌癥的方法優(yōu)于化療的原因是_______________________。

（5）由圖中可看出，單克隆抗體的制備過程中，運(yùn)用了動物細(xì)胞工程中的_____________和_____________兩大技術(shù)。31、科學(xué)家將CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)導(dǎo)入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒并進(jìn)行改造；通過同源重組實現(xiàn)目的基因的精確插入，利用該方法已培育出了耐寒的玉米新品種(轉(zhuǎn)入CXE-20耐寒基因)。下圖1表示構(gòu)建轉(zhuǎn)基因耐寒玉米重組質(zhì)粒的過程，其中Cas9-gRNA是CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)基因，HRA是抗除草劑基因，HR1和HR2是同源重組序列，圖2表示重組質(zhì)粒與受體細(xì)胞核DNA重組的過程。請回答問題：

(1)過程①的原料是_______，需要_______催化。

(2)限制酶BamHⅠ、SacⅠ、HindⅢ、EcoRⅠ的識別序列分別是GGATCC、GAGC.AAGCTT、GAATTC，過程①所用引物如下，則過程②使用的限制酶是_______和_______。

5′-CGCGAGCTCATGAGAAAGGGCCCGTGG-3′

5′-CGGAATTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA-3′

(3)如圖表示Cas9-gRNA復(fù)合體切割DNA的示意圖，其靶序列是5′-CGAAAGCGTATCAGTATGCGTACGT-3′，根據(jù)圖中靶序列設(shè)計的gRNA中相應(yīng)序列是5′-_______-3′，Cas9-gRNA復(fù)合體切割DNA的_______鍵使其斷裂。

(4)用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化玉米幼胚后，在培養(yǎng)基中加入_______篩選出導(dǎo)入目的基因幼胚。提取培養(yǎng)后的植株DNA，設(shè)計引物進(jìn)行PCR、電泳，基因長度及結(jié)果如下圖。設(shè)計引物的依據(jù)是_______，其中_______號玉米中成功插入了外源基因，研究人員認(rèn)為這些植株自交后會發(fā)生性狀分離，其判斷依據(jù)是_______。

32、閱讀以下材料；回答（1）～（3）。

基因魔剪：CRISPR/Cas系統(tǒng)。

要揭示生命的運(yùn)作原理；常需要對基因進(jìn)行編輯。在過去，這一步異常艱難。但隨著CRISPR/Cas技術(shù)的出現(xiàn)，科學(xué)家已能在極短時間內(nèi)就更改生命密碼。

CRISPR/Cas9系統(tǒng)由Cas9蛋白和人工設(shè)計的gRNA構(gòu)成。在gRNA引導(dǎo)下；Cas9與靶序列結(jié)合并將DNA雙鏈切斷。隨后細(xì)胞通過自身的DNA損傷修復(fù)機(jī)制，將斷裂上下游兩端的序列連接起來，但通常會在斷裂處造成少量核苷酸的插入或缺失。當(dāng)DNA雙鏈斷裂后，如果細(xì)胞中有DNA修復(fù)模板（由需要插入的目的基因和靶序列上下游的同源序列組成），斷裂部分可依據(jù)修復(fù)模板進(jìn)行精確修復(fù)，從而將目的基因插入到指定位點(diǎn)。

通過在Cas9基因中引入突變；獲得了只有切割一條鏈活性的nCas9。將nCas9與胞嘧啶脫氨酶或腺嘌呤脫氨酶融合，科學(xué)家開發(fā)出了單堿基編輯技術(shù)（圖2），能夠?qū)Π形稽c(diǎn)進(jìn)行精準(zhǔn)的堿基編輯。

對CRISPR/Cas系統(tǒng)的不斷改造；使其在基因編輯外，還可用于激活或抑制基因的轉(zhuǎn)錄等。雖然目前CRISPR/Cas技術(shù)還存在一些不足，但作為一種革命性的技術(shù)，其應(yīng)用前景廣闊。

(1)利用CRISPR/Cas9技術(shù)進(jìn)行基因編輯，需構(gòu)建含gRNA基因和Cas基因的________，并導(dǎo)入受體細(xì)胞。gRNA依據(jù)________原則與靶序列特異性結(jié)合；引導(dǎo)Cas9蛋白進(jìn)行切割。

(2)有些遺傳病是由于基因中一個堿基對的改變引起的，如果要修正此基因突變，圖示的三種途徑①②③中，哪種更為合適？_________，因為_____________。

(3)通過①途徑僅能夠?qū)崿F(xiàn)某基因內(nèi)部少量核苷酸的插入或缺失，如果要將該基因從基因組序列中刪除，利用CRISPR/Cas9技術(shù)，設(shè)計gRNA的思路是_________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、B【分析】【分析】

圖示表示麥冬花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的途徑；其原理是植物細(xì)胞具有全能性。其中①階段表示脫分化，該階段能形成X愈傷組織，其細(xì)胞分化程度低，全能性高；②階段表示再分化過程，該階段能形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育形成植株，Y是單倍體植株。

【詳解】

A；由分析可知：圖中X和Y分別表示愈傷組織和單倍體幼苗；A正確；

B；植物組織培養(yǎng)的過程要求無菌無毒的環(huán)境；其中麥冬花藥要進(jìn)行消毒處理，而培養(yǎng)基及操作工具需滅菌處理，B錯誤；

C；在植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)過程中；使用不同的植物激素能夠人為地控制細(xì)胞的脫分化和再分化，故脫分化與再分化二者使用的培養(yǎng)基主要是生長素以及細(xì)胞分裂素兩種激素用量及比例的不同，C正確；

D；麥冬花藥離體培養(yǎng)的過程體現(xiàn)了生殖細(xì)胞具有全能性；D正確。

故選B。2、B【分析】【分析】

微生物培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源；氮源、水和無機(jī)鹽等；有的還需要生長因子等特殊的營養(yǎng)，微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作，篩選和分離微生物常用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法。

【詳解】

A；使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要滅菌處理；以免對環(huán)境造成污染，A正確；

B；如果培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物；培養(yǎng)基中可以不加碳源，B錯誤；

C；平板劃線法可用于菌種分離、鑒定；稀釋涂布平板法可用于菌種鑒定與計數(shù)，C正確；

D；不同微生物培養(yǎng)條件一般不相同；如培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧的條件，D正確。

故選B。3、B【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊；正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。

【詳解】

A；為了防止有人濫用設(shè)計試管嬰兒技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒性別；我國反對設(shè)計試管嬰兒，A正確；

B；基因篩檢可能幫助人類及早預(yù)防基因控制的遺傳性疾??；但基因篩檢不能預(yù)防染色體異常遺傳病，B錯誤；

C；我國對于生物武器采取的態(tài)度是不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器、并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散；C正確；

D；人類對轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭議集中在食物安全、生物安全和環(huán)境安全方面；D正確。

故選B。4、A【分析】【分析】

分析題圖：甲表示卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)過程；該過程可通過給母山羊注射促性腺激素使其超數(shù)排卵；乙表示體外受精過程，需在獲能培養(yǎng)液或受精培養(yǎng)液中進(jìn)行；丙是早期胚胎發(fā)育過程，需要在發(fā)育培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；丁是胚胎移植過程。

【詳解】

A；甲過程表示卵母細(xì)胞的采集；可通過給母山羊注射有關(guān)激素（促性腺激素）使其超數(shù)排卵，A正確；

B；乙過程表示體外受精；需將獲能的精子和成熟的卵子在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液中共同培養(yǎng)一段時間完成受精，B錯誤；

C；獲能的精子和成熟的卵子在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液中共同培養(yǎng)一段時間完成受精；而受精卵要移入發(fā)育培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，C錯誤；

D；丁過程中早期胚胎須移植到與供體生理狀態(tài)相同的代孕母羊子宮內(nèi)；D錯誤。

故選A。5、C【分析】【分析】

動物克隆主要通過核移植技術(shù)來完成；動物核移植是指將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。在體外將采集到的卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟，可以通過顯微操作技術(shù)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核和第一極體，核移植時，對提供細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的猴子不需要進(jìn)行同期發(fā)情處理，使用電脈沖等方法可以激活重組細(xì)胞使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育。

【詳解】

A；體細(xì)胞分化程度高；表現(xiàn)全能性困難，而胚胎細(xì)胞分化程度低，表現(xiàn)全能性容易，因此胚胎細(xì)胞核移植的難度明顯低于體細(xì)胞核移植，A正確；

B；獲得的卵母細(xì)胞去核后；需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能進(jìn)行核移植，B正確;

C；重構(gòu)胚；使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程才能移入受體動物體內(nèi)，C錯誤；

D；個體性狀表現(xiàn)主要由細(xì)胞核控制；因此克隆動物的性狀表現(xiàn)與供體動物（供核動物）基本相同，D正確。

故選C。6、D【分析】【分析】

單克隆抗體制備的主要步驟有：抗原的制備；免疫動物、免疫脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的制備、細(xì)胞融合、雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng)、篩選雜交瘤細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞的克隆化、單克隆抗體的檢定、抗體的大量制備等。

【詳解】

A；小鼠通常需要多次注射同種抗原蛋白；反復(fù)的抗原刺激能多次刺激記憶B細(xì)胞，促使其增殖、分化為漿細(xì)胞，漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體，A正確；

B；在HAT培養(yǎng)基上能生長的細(xì)胞既能無限增殖、又能產(chǎn)生抗體；由于從小鼠中提取的B細(xì)胞有多種，此時在HAT培養(yǎng)基上能生長的細(xì)胞，不一定能產(chǎn)生所需的抗體，B正確；

C；克隆化培養(yǎng)過程中；進(jìn)行專一抗體檢測，從而篩選抗體檢驗陽性的細(xì)胞以進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)，C正確；

D；可將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔中；在小鼠腹腔中增殖進(jìn)入從腹水中提取單克隆抗體，實現(xiàn)單克隆抗體的大規(guī)模生產(chǎn)，D錯誤。

故選D。7、B【分析】【分析】

培養(yǎng)基：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。

培養(yǎng)基種類：培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基；半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。

微生物的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

①平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作；將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。

②稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。

【詳解】

A；野生型大腸桿菌不能夠合成所需的全部氨基酸；并且還有別的有機(jī)物需要氮元素，因此培養(yǎng)基中需要提供氮源，A錯誤；

B；紫外線照射菌液；使大腸桿菌產(chǎn)生基因突變，便于篩選賴氨酸營養(yǎng)缺陷突變株，由于基因突變頻率較低，且不定向，因此發(fā)生賴氨酸營養(yǎng)缺陷型突變的菌種不多，因此需要在①中添加賴氨酸來增大該突變株濃度，以便進(jìn)行稀釋涂布操作，②④中添加賴氨酸目的是使賴氨酸營養(yǎng)缺陷突變株能夠在該培養(yǎng)基上生長，③不添加賴氨酸，賴氨酸營養(yǎng)缺陷突變株不能在其上繁殖形成菌落，通過③④對比，選擇能在④中生長但是不能在③中生長的菌落即為賴氨酸營養(yǎng)缺陷突變株，故①②④培養(yǎng)基中需添加賴氨酸，而③培養(yǎng)基中不能添加賴氨酸，B正確；

C；需將①中的菌液適當(dāng)稀釋后；用微量移液器吸取少量菌液，用涂布器在②上進(jìn)行涂布接種，C錯誤；

D；乙菌落在③培養(yǎng)基內(nèi)對應(yīng)位置也有菌落；屬于野生型，不是所需突變株，D錯誤。

故選B。8、C【分析】【分析】

1；基因工程是指按照人們的愿望；進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計，通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品，基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計和施工的，又叫做DNA重組技術(shù)。

2；不同生物的基因能連接在一起的原因是不同生物的基因都含有相同的化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)。

3；一種生物的基因能在另一種生物體內(nèi)表達(dá)的原因是自然界中所有生物共用一套遺傳密碼子。

【詳解】

A；常用相同的限制性內(nèi)切酶處理含目的基因的DNA和質(zhì)粒；以產(chǎn)生相同的黏性末端，A正確；

B；在已知人的胰島素和氨基酸序列的基礎(chǔ)上；推測出胰島素的基因序列，再用化學(xué)方法合成新的胰島素基因，B正確；

C；自然界中所有生物共用一套遺傳密碼子；因此將人的胰島素基因注入大腸桿菌體內(nèi)，大腸桿菌也能合成人胰島素，C錯誤；

D；導(dǎo)入大腸桿菌的目的基因不一定能成功表達(dá)；故導(dǎo)入大腸桿菌的人的胰島素基因也不一定能成功表達(dá)，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】二、多選題(共9題，共18分)9、A:C:D【分析】【分析】

（1）動物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動性；細(xì)胞的增殖；誘導(dǎo)手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞，主要用于制備單克隆抗體。

（2）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫理：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體；②細(xì)胞融合原理：利用病毒對宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合；③動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)；體外培養(yǎng)。

（3）制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞：①免疫B細(xì)胞（漿細(xì)胞）：能產(chǎn)生單一抗體；但不能無限增殖；②骨髓瘤細(xì)胞：能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；③雜交瘤細(xì)胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。

【詳解】

誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒（如滅活的仙臺病毒）等，A正確；兩兩融合的細(xì)胞包括免疫B細(xì)胞與免疫B細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、免疫B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞雖然能無限增殖，但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，免疫B細(xì)胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，但不具有無限增殖的本領(lǐng)，所以在HAT篩選培養(yǎng)液中，兩兩融合的具有同種核的細(xì)胞都無法生長，只有雜交瘤細(xì)胞才能生長，B錯誤；因每個免疫B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來的眾多的雜交瘤細(xì)胞所分泌的抗體，不一定都是人類所需要的，還需要進(jìn)一步把能分泌人類所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來，C正確；動物細(xì)胞融合是以細(xì)胞膜的流動性為基礎(chǔ)的，D正確。故選ACD。10、B:C:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中①表示將目的基因?qū)朕r(nóng)桿菌；②表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，之后再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植株。

【詳解】

A；探針是指用放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的含有目的基因DNA片段；因此要以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計探針，而不是將隨機(jī)斷裂的B基因片段制備成探針，A錯誤；

B；可用DNA分子雜交技術(shù)；即以Luc基因為模板設(shè)計探針進(jìn)行DNA分子雜交，B正確；

C；用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交；即以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計探針與從卵細(xì)胞提取的mRNA雜交，C正確；

D；檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)；由圖可知B基因與Luc基因連接形成B-Luc融合基因，因此可通過Luc基因表達(dá)，檢測加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光，D正確。

故選BCD。11、A:B:C【分析】【分析】

聚羥基脂肪酸酯（PHA）是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯；要從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種，首先要進(jìn)行目的菌株的篩選，可將咸湖水接種在含鹽量較高的選擇培養(yǎng)基上，篩選培養(yǎng)得到嗜鹽細(xì)菌；然后，從選擇培養(yǎng)基上挑選多個單菌落分別進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基；最后檢測嗜鹽細(xì)菌的數(shù)目和PHA的產(chǎn)量，選擇PHA產(chǎn)量最高的嗜鹽細(xì)菌作為目的菌株。

【詳解】

A；PHA是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯；要篩選嗜鹽細(xì)菌，步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含鹽量較高的選擇培養(yǎng)基上，A錯誤；

B；步驟③培養(yǎng)基濃度過高；會導(dǎo)致菌體失水死亡，不利于嗜鹽細(xì)菌的生長，B錯誤；

C；步驟④擴(kuò)大培養(yǎng)應(yīng)選用液體培養(yǎng)基；液體培養(yǎng)基中無需加入瓊脂，C錯誤；

D；要挑選高產(chǎn)聚羥基脂肪酸酯（PHA）的嗜鹽菌；挑取菌落時，應(yīng)挑取多個菌落并分別測定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量，進(jìn)行比較，D正確。

故選ABC。12、A:B:C【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；為避免雜菌的污染；實驗中的濾膜、培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基等均需滅菌處理，A正確；

B；對活菌進(jìn)行計數(shù)的方法是稀釋涂布平板法；具體方法是：先將菌體進(jìn)行梯度稀釋，再涂布到濾膜的表面，待菌落數(shù)穩(wěn)定時進(jìn)行計數(shù)，不能用顯微鏡直接計數(shù)的原因是顯微鏡直接計數(shù)不能區(qū)分死菌和活菌，B正確；

C；tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白；乙組中野生型可產(chǎn)生tce1蛋白作用于tcel-tcil雙突變體，后者無法產(chǎn)生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在競爭中占據(jù)優(yōu)勢；而在丙組中，野生型可產(chǎn)生tce1蛋白作用于tcel突變體，后者可以產(chǎn)生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生長受到抑制，由此推測，tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性，C正確；

D；由甲組、乙組可知；野生型細(xì)菌X在與tcel-tcil雙突變體的競爭中均占優(yōu)勢，由甲組、丙組可知，野生型細(xì)菌X在與tcel突變體的競爭中不占優(yōu)勢，D錯誤。

故選ABC。13、A:B:C【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；①過程注射CD47相當(dāng)于給小鼠注射抗原；通過多次注射可獲得更多已免疫的B淋巴細(xì)胞，A正確；

B；②過程表示誘導(dǎo)細(xì)胞融合；依據(jù)的原理是細(xì)胞膜具有流動性，B正確；

C；③過程表示雜交瘤細(xì)胞多次篩選培養(yǎng)；該過程需要進(jìn)行抗體檢測，從而獲得能產(chǎn)生我們所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞，C正確；

D；根據(jù)題干中“抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細(xì)胞的抑制作用”；因此與對照組相比，圖中巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)會升高，D錯誤。

故選ABC。14、A:B:C【分析】【分析】

在利用酵母菌發(fā)酵時最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時間使其繁殖；再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～30℃，pH最好是弱酸性。

【詳解】

A；桑葚獨(dú)有的花青素等能顯著增強(qiáng)復(fù)合果酒的功效；所以在生產(chǎn)復(fù)合果酒的過程中，要防止桑葚天然色素被氧化，增強(qiáng)功效，A正確；

B；酵母菌在有氧條件下進(jìn)行快速的增殖；所以果酒發(fā)酵初期通入氧氣能促進(jìn)酵母菌繁殖，有利于加快果酒發(fā)酵，B正確；

C；為了防止雜菌污染；復(fù)合果酒的制備過程中對發(fā)酵設(shè)備要進(jìn)行滅菌處理，C正確；

D；變酸的果酒表面會形成一層菌膜；這層菌膜是由醋酸菌形成的，D錯誤。

故選ABC。15、A:B:C【分析】【分析】

本題知識點(diǎn)為剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理、培養(yǎng)基中各物質(zhì)的作用。剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。纖維素為纖維素分解菌提供碳源，尿素為纖維素分解菌提供氮源，KH2PO4和K2HPO4具有緩沖作用；在提供無機(jī)鹽的同時還能維持培養(yǎng)基的pH。獲取單個菌落的方法可通過稀釋涂布平板或平板劃線等技術(shù)完成。

【詳解】

A；在此培養(yǎng)基中；纖維素為纖維素分解菌提供碳源，尿素為纖維素分解菌提供氮源，A正確；

B、KH2PO4和K2HPO4具有緩沖作用；在提供無機(jī)鹽的同時還能維持培養(yǎng)基的pH，B正確；

C；從平板上纖維素分解菌的菌落分布可以看出（菌落較均勻）；接種方法為稀釋涂布平板法，C正確；

D；菌落周圍有透明圈不一定是細(xì)胞分解了纖維素；還有可能是分解了剛果紅染料，D錯誤；

故選ABC。16、A:D【分析】【分析】

分析題圖：奶牛1的培育采用了基因工程技術(shù)；早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；奶牛2的培育采用可基因工程技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；奶牛3的培育采用了核移植、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。

【詳解】

A；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；A正確；

B；奶牛2的培育過程中；在囊胚階段注入了含有外源基因的受體細(xì)胞，因此其體內(nèi)不同組織細(xì)胞的基因型可能不同，B錯誤；

C；奶牛3表明受體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；C錯誤；

D；結(jié)合分析可知；奶牛1、2、3的獲得均需在體外進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)，D正確。

故選AD。17、A:D【分析】【分析】

分析題意可知，GAL4基因可以控制GAL4蛋白的表達(dá)，它能夠與特定的DNA序列UAS結(jié)合，并驅(qū)動UAS下游基因的表達(dá)。將GAL4基因插入到雄果蠅的Ⅲ號染色體上(一條常染色體上)，UAS綠色熒光蛋白基因隨機(jī)插入到雌果蠅某條染色體上，但無法表達(dá)(親代雌果蠅缺乏GAL4蛋白)。同時具備GAL4和UAS-綠色熒光蛋白基因的果蠅，才能合成GAL4蛋白驅(qū)動UAS下游的綠色熒光蛋白基因表達(dá)，從而表現(xiàn)出綠色性狀。為便于理解，假設(shè)插入GAL4基因用A表示(沒有該基因用a表示)，插入UAS綠色熒光蛋白基因用B表示(沒有該基因用b表示)。UAS-綠色熒光蛋白基因插入的位置有3種可能：Ⅲ號染色體上(則雄、雌基因型可表示為Aabb×aaBb，遵循連鎖定律)，其他常染色體上(則雄、雌基因型可表示為Aabb×aaBb，遵循自由組合定律)、X染色體上(則雄、雌基因型可表示為AaXbY×aaXBXb；遵循自由組合定律)。

【詳解】

A；同時具備GAL4和UAS-綠色熒光蛋白基因（M基因）的果蠅；才能合成GAL4蛋白驅(qū)動UAS下游的綠色熒光蛋白基因表達(dá)，從而表現(xiàn)出綠色性狀，A正確；

B、若綠色熒光蛋白基因（M基因）插入Ⅲ號染色體上，發(fā)生基因連鎖，假設(shè)插入GAL4基因用A表示(沒有該基因用a表示)，插入UAS綠色熒光蛋白基因用B表示(沒有該基因用b表示)，則親本為Aabb×aaBb，則F1中綠色翅（AaBb）：無色翅（Aabb、aaBb、aabb）為1：3，若插入Ⅲ號染色體以外的染色體上，兩對基因遵循基因組合定律，則親本仍為Aabb×aaBb，F(xiàn)1中綠色翅（AaBb）與無色翅（Aabb、aaBb、aabb）比例仍為1：3；B錯誤；

C、若F2中綠色翅：無色翅=9：7，則說明兩種基因自由組合，故綠色熒光蛋白基因（M基因）沒有插入Ⅲ號染色體上，但不能確定熒光蛋白基因的具體位置，不一定就在常染色體上，也可能在X染色體上，C錯誤；

D、若F2中綠色翅雌性：無色翅雌性：綠色翅雄性：無色翅雄性=6：2：3：5；雌雄中綠色翅和無色翅比例不同，說明與性別相關(guān)，則可以得出熒光蛋白基因（M基因）插入X染色體的結(jié)論，D正確。

故選AD。三、填空題(共9題，共18分)18、略

【分析】1；試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；設(shè)計試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

3；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；生物安全主要是指轉(zhuǎn)基因生物釋放到環(huán)境中，可能會對生物多樣性構(gòu)成潛在的風(fēng)險和威脅。

【詳解】

（1）一些持支持態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為；由于不同物種間存在生殖隔離，同時花粉的傳播距離和存活時間有限，不會造成轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物與其它植物的雜交，因而也不太可能對生物多樣性造成威脅。

（2）在轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品研究過程中；為保證轉(zhuǎn)基因生物的安全，要把重組DNA的轉(zhuǎn)移限制在遺傳上具有特定缺陷的生物上；對外源DNA進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免能夠表達(dá)出對人體有毒性或過敏的蛋白質(zhì)等等。

（3）堅持克隆人的科學(xué)家則認(rèn)為；一些技術(shù)問題可以通過胚胎分級；基因診斷和染色體檢查等方法得到解決。

（4）中國政府對于克隆技術(shù)的態(tài)度是禁止生殖性克隆；但不反對治療性克隆。

【點(diǎn)睛】

本題難度一般，屬于考綱中識記、理解層次的要求，結(jié)合基因工程的應(yīng)用，綜合考查了基因工程、試管嬰兒和轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題，并且深入考查了相關(guān)基礎(chǔ)知識，要求考生能夠構(gòu)建一定的知識網(wǎng)絡(luò)．面對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。【解析】①.生殖隔離②.存活時間③.特定缺陷④.蛋白質(zhì)⑤.基因診斷⑥.染色體檢查⑦.禁止生殖性克隆人⑧.治療性克隆19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】穩(wěn)定存在遺傳至下一代表達(dá)和發(fā)揮21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】0．1422、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。23、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會提高。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥繒岣逿4溶菌酶的耐熱性。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。24、略

【分析】【詳解】

生物之間存在（種間）競爭多關(guān)系，該區(qū)域的棉鈴蟲與盲蝽蟓之間共同以棉花為食，種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉后，棉鈴蟲不能存活，盲蝽蟓的食物等資源充足，故大量繁殖，爆發(fā)成災(zāi)。【解析】該區(qū)域的棉鈴蟲與盲蝽蟓之間存在競爭關(guān)系，種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉后，棉鈴蟲不能存活，盲蝽蟓大量繁殖25、略

【分析】【詳解】

中國政府的態(tài)度：禁止生殖性克隆，不反對治療性克隆，該表述錯誤?！窘馕觥垮e誤26、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，其結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)?！窘馕觥康鞍踪|(zhì)工程的結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)四、實驗題(共2題，共18分)27、略

【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理∶醋酸菌是一種好氧性細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時才能進(jìn)行旺盛的生理活動。當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

（1）制作果酒和果醋所用的菌種分別是酵母菌和醋酸菌；酵母菌是真核細(xì)胞，醋酸菌是原核細(xì)胞，真核細(xì)胞和原核細(xì)胞的區(qū)別是有無以核膜為界限的細(xì)胞核（或酵母菌有以核膜為界限的細(xì)胞核，而醋酸菌沒有）；

（2）將優(yōu)質(zhì)黑枸杞榨汁后裝瓶時，不能裝滿，要留出1/3的空間，可為酵母菌有氧呼吸提供氧氣，防止發(fā)酵液溢出。過程中對果汁并沒有進(jìn)行滅菌處理，但是隨著果酒發(fā)酵的進(jìn)行，其他微生物含量變少，原因是發(fā)酵過程中形成了缺氧和酸性的環(huán)境，不利于其他微生物的生存。果酒進(jìn)行果醋發(fā)酵的反應(yīng)式是：

（3）進(jìn)行果醋發(fā)酵時；溫度大約要控制在30~35℃，氧氣充足，即將進(jìn)氣口和排氣口都打開。

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋的制作等的相關(guān)知識，要求學(xué)生識記參與果酒、果醋制作的微生物及其代謝類型，掌握果酒、果醋制作的原理及條件，能結(jié)合所學(xué)知識準(zhǔn)確解答各題?！窘馕觥拷湍妇痛姿峋袩o以核膜為界限的細(xì)胞核（或酵母菌有以核膜為界限的細(xì)胞核，而醋酸菌沒有）為酵母菌有氧呼吸提供氧氣﹐防止發(fā)酵液溢出發(fā)酵過程形成的缺氧和酸性環(huán)境不利于其他微生物的生存30-35℃將進(jìn)氣口和排氣口都打開28、略

【分析】【分析】

1；大腸桿菌屬于細(xì)菌；是原核生物。微生物營養(yǎng)成分主要有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等，另外還需要注意滲透壓、溫度、pH等條件。大腸桿菌常作為遺傳學(xué)研究的實驗材料．微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌技術(shù)，防止外來雜菌的污染。

2；微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作。使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程稱為滅菌；常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等。

【詳解】

（1）大腸桿菌具有體積??；結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點(diǎn)；培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。

（2）滅菌使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物；所以對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌；消毒使用較為溫和的物理或化學(xué)方法，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。

（3）稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液，分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合。

（4）對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀；大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。

（5）培養(yǎng)大腸桿菌時；在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。

（6）因為有的大腸桿菌會釋放一種強(qiáng)烈的毒素；并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生能夠識記大腸桿菌的培養(yǎng)條件以及其作為遺傳實驗的優(yōu)點(diǎn)，區(qū)分掌握不同材料消毒和滅菌的方法，識記菌種鑒定的方法等，屬于基礎(chǔ)題?！窘馕觥竣?溫度②.酸堿度③.易培養(yǎng)④.生活周期短⑤.滅菌⑥.消毒⑦.損傷DNA的結(jié)構(gòu)⑧.比例合適⑨.鑒定(或分類)⑩.將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生.?.滅菌五、綜合題(共4題，共8分)29、略

【分析】【分析】

本題主要借助芍藥苷的相關(guān)研究來考查單克隆抗體制備的相關(guān)知識；單克隆抗體制備的過程中需要用到動物細(xì)胞融合和動物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)，其制備過程中需要經(jīng)過兩次篩選。

【詳解】

（1）要制備抗芍藥苷的單克隆抗體；故應(yīng)該將芍藥苷和蛋白結(jié)合作為抗原對小鼠進(jìn)行免疫處理，免疫處理前需血清作為對照。

（2）將已免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行混合培養(yǎng)；加入聚乙二醇誘導(dǎo)融合。對融合后的細(xì)胞分別進(jìn)行兩次篩選，篩選出能產(chǎn)生抗芍藥苷的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)行克隆化培養(yǎng)。

（3）由圖可知；單克隆抗體與芍藥苷的結(jié)合率為100%，與其他小分子化合物的結(jié)合率較低，體現(xiàn)單克隆抗體特異性強(qiáng)；靈敏度高的特點(diǎn)。

（4）實驗中還測定了單獨(dú)白芍一味藥物中的芍藥苷溶出率；測定的目的是形成空白對照。根據(jù)實驗結(jié)果可知，四逆湯和單獨(dú)白芍一味藥物中芍藥苷的溶出率幾乎一致，其他各組對芍藥苷的溶出率均有較大的影響。

（5）研究不同配伍方劑中藥物有效成分的含量；可以提高用藥的安全性和準(zhǔn)確性。

【點(diǎn)睛】

單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)；靈敏度高、可大量制備；

雜交瘤細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)：既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體?！窘馕觥可炙庈彰庖咛幚砉撬枇黾?xì)胞聚乙二醇能產(chǎn)生抗芍藥苷的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞特異性強(qiáng)；靈敏度高作為對照。

白芍和四逆散提高用藥的安全性和準(zhǔn)確性30、略

【分析】【分析】

1；動物細(xì)胞融合