2025年浙教新版選擇性必修3生物上冊月考試卷含答案

…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年浙教新版選擇性必修3生物上冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、下列關于基因工程的敘述，正確的是（）A.若受體大腸桿菌含有構建重組質粒時用到的限制性核酸內切酶，則一定有利于該重組質粒進入受體并保持結構穩(wěn)定B.抗除草劑基因轉入某抗鹽植物獲得2個穩(wěn)定遺傳轉基因品系，抗性鑒定為抗除草劑抗鹽和抗除草劑不抗鹽。表明一定是抗鹽性的改變與抗除草劑基因的轉入無關C.抗除草劑基因轉入某植物獲得轉基因植株，其DNA檢測均含目的基因，抗性鑒定為抗除草劑和不抗除草劑。表明一定是前者表達了抗性蛋白而后者只表達抗性基因RNAD.已知不同分子量DNA可分開成不同條帶，相同分子量的為一條帶。用某種限制性核酸內切酶完全酶切環(huán)狀質粒后，出現(xiàn)3條帶。表明該質粒上一定至少有3個被該酶切開的位置2、兩種遠緣植物的細胞融合后會導致一方的染色體被排出，若在細胞融合前染色體發(fā)生斷裂，形成的染色體片段可能不會被全部排出，而是整合到另一個細胞的染色體上留存在雜種細胞中。依據(jù)該原理，通過下圖過程獲得了耐鹽小麥新品種。下列說法不正確的是（）

A.過程①需使用纖維素酶和果膠酶處理細胞B.過程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂C.過程③中常用滅活的病毒誘導原生質體融合D.耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段3、如圖表示基因工程中目的基因的獲取示意圖，相關敘述不正確的是（）

A.①過程的完成需要逆轉錄酶B.②過程需用限制性核酸內切酶C.目前獲取目的基因的方法只有，上圖所示的兩種D.cDNA的構建需要提前了解目的基因的有關信息4、有關PCR技術的說法，不正確的是（）A.PCR是一項在生物體外復制特定的DNA片段的核酸合成技術B.PCR擴增中必須有解旋酶才能解開雙鏈DNAC.利用PCR技術獲取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列D.PCR技術依據(jù)的是DNA雙鏈復制的原理5、下圖是單克隆抗體制備流程示意圖；骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶（HGPRT），在HAT選擇培養(yǎng)基中不能正常合成DNA，而淋巴細胞還可通過其他途徑合成DNA。下列有關敘述，正確的是（）

A.①是從已免疫的小鼠骨髓中獲得的B淋巴細胞B.②中可用滅活的病毒誘導雜交瘤細胞的形成C.③中融合細胞均可以在HAT培養(yǎng)基中生長D.④是利用HAT培養(yǎng)基篩選分泌特異性抗體的細胞6、精氨酸依賴型谷氨酸棒狀桿菌不能在缺少精氨酸的培養(yǎng)基上正常生長，下圖為野生型谷氨酸棒狀桿菌經(jīng)誘變和篩選獲得精氨酸依賴型菌過程示意圖，過程②將紫外線照射處理過的菌液接種在培養(yǎng)基甲上，培養(yǎng)至菌落不再增加。過程③向培養(yǎng)基甲中添加某種物質，繼續(xù)培養(yǎng)。下列相關說法錯誤的是（）

A.紫外線照射可導致谷氨酸棒狀桿菌發(fā)生基因突變B.過程②所用的培養(yǎng)基是缺少精氨酸的選擇培養(yǎng)基C.圖甲中菌落A是采用平板劃線法接種后培養(yǎng)得到D.圖乙中菌落B應為精氨酸依賴型谷氨酸棒狀桿菌7、如圖是果酒、果醋的制作流程，以下相關說法正確的是（）

A.菌種1、菌種2分別代表酵母菌和乳酸桿菌B.接種初期菌種2的主要呼吸方式是無氧呼吸C.酒精發(fā)酵階段需多次補充氧氣利于菌種1的繁殖D.接種菌種2后需將溫度調高提高其醋酸發(fā)酵能力8、作物脫毒；改善畜產(chǎn)品品質、抗除草劑作物、可保存的干擾素；依次應用哪項生物技術（）

①基因工程②細胞工程③蛋白質工程④胚胎工程A.①②②③B.②①①③C.②①②③D.②①②④評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)9、下列關于人早期胚胎發(fā)育過程中桑椹胚和囊胚的敘述中，正確的是（）A.囊胚與桑椹胚相比，每個細胞內DNA總量增加B.囊胚期出現(xiàn)了細胞分化，但遺傳物質未發(fā)生改變C.囊胚期內細胞團和滋養(yǎng)層細胞差異不是復制水平上的差異，而是轉錄水平上的差異引起D.桑椹胚的形成在卵巢，囊胚的形成在輸卵管10、關于現(xiàn)代生物工程技術應用的安全性，下列說法正確的是（）A.對待生物武器的態(tài)度應明確而堅定，即堅決禁止生物武器B.中國對于克隆人的態(tài)度是不反對治療性克隆，但禁止生殖性克隆人C.對轉基因植物外源DNA要進行認真選擇，避免產(chǎn)生對人體有害的或過敏的蛋白質D.轉基因生物出現(xiàn)了安全性問題，不一定要馬上停止實驗11、下圖為利用PCR技術擴增特定DNA片段的部分示意圖；圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎。下列有關描述錯誤的是（）

A.利用PCR技術擴增目的基因時不需要解旋酶而需要耐高溫的DNA聚合酶B.引物是子鏈合成延伸基礎，子鏈沿著模板鏈的3’→5’方向延伸C.從理論上推測，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中只含有引物A的DNA片段所占的比例為15/16D.在第三輪循環(huán)產(chǎn)物中才開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段且占1/212、營養(yǎng)缺陷型菌株就是在人工誘變或自發(fā)突變后，微生物細胞代謝調節(jié)機制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應不能進行的菌株。這種菌株能積累正常菌株不能積累的某些代謝中間產(chǎn)物，為工業(yè)生產(chǎn)提供大量的原料產(chǎn)物。以下是實驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程。下列說法不合理的是（）

A.過程①的接種方法為稀釋涂布平板法，過程②兩種培養(yǎng)基的成分相同B.進行過程②培養(yǎng)時必須先將絲絨布轉印至基本培養(yǎng)基上順序不能顛倒C.統(tǒng)計菌落種類和數(shù)量時要每隔24h觀察統(tǒng)計一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防止培養(yǎng)時間不足導致菌落數(shù)目偏大D.營養(yǎng)缺陷型菌株細胞代謝調節(jié)機制中的某些酶被破壞，可能與核孔復合體的蛋白質空間結構發(fā)生改變有關13、圖甲為培育轉基因生物時選用的載體，圖乙是含有目的基因的一段DNA序列，圖中標注了相關限制酶的酶切位點。下列敘述錯誤的是（）

A.若通過PCR技術提取該目的基因，應該選用引物a和引物cB.構建表達載體時應選用BamHⅠ和HindⅡ這兩種限制酶C.圖乙中一個DNA分子在PCR儀中經(jīng)過四輪復制得到所需目的基因的分子數(shù)為8個D.只利用含四環(huán)素的培養(yǎng)基就可以直接篩選出成功導入表達載體的受體細胞14、我國首例綠色熒光蛋白“轉基因”克隆豬的培育過程如圖所示，其中字母代表結構或生物，數(shù)字代表過程，下列相關敘述錯誤的是（）

A.為了①和②的順利完成，需要用滅活的病毒對細胞進行誘導B.將C的細胞核去掉，實質上是去除紡錘體—染色體復合物C.為避免將E植入F時產(chǎn)生排斥反應，移植前應給F注射免疫抑制劑D.移入F的桑葚胚要經(jīng)歷囊胚、原腸胚等階段才能形成豬的幼體15、iPS細胞被稱為誘導多能干細胞，可通過轉入相關因子來制備。iPS細胞最初是由成纖維細胞轉化而來，后來發(fā)現(xiàn)已分化的T細胞、B細胞等也能被誘導成該類細胞。下列說法正確的是（）A.導入的物質可以是DN蛋白質，還可用小分子物質來誘導B.iPS細胞的體外培養(yǎng)需要在無菌的CO2培養(yǎng)箱中進行C.T細胞、B細胞能被誘導為iPS細胞，說明體內細胞的分化是可逆的D.與胚胎干細胞相比，iPS細胞的優(yōu)點是分裂能力強，分化程度低16、新冠肺炎的發(fā)生使我們對病毒的威力有了深刻體會，所以更要禁止生物武器，面對一切可能的生物武器的威脅，我們絕不能掉以輕心！下列關于禁止生物武器的敘述，正確的是（）A.第二次世界大戰(zhàn)中，侵華日軍在我國多個地區(qū)使用過細菌武器，給我國人民帶來很大苦難B.生物武器相對容易獲得，也便于攜帶和釋放，一旦被恐怖組織利用，將產(chǎn)生極大的危害C.利用轉基因技術可以制造各種新型致病菌，這些致病菌可以讓大批感染者突然發(fā)病，而又無藥可醫(yī)D.1975年3月《禁止生物武器公約》生效，清除生物武器威脅，防止生物武器擴散是生物安全防控的重要方面17、如圖為煙草植物組織培養(yǎng)過程的流程圖。下列有關敘述錯誤的是（）

A.對過程①獲取的根組織塊應做較徹底的滅菌處理B.過程②應根據(jù)要求使用適宜的培養(yǎng)基，在避光的環(huán)境中進行C.過程③發(fā)生脫分化，其實質是基因的選擇性表達D.定向誘導X細胞可得到有利的突變體評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)18、______——“分子縫合針”19、酵母菌是______________微生物。酵母菌進行有氧呼吸的反應式如下：______________________；酵母菌進行無氧呼吸的反應式如下：_________________。20、常用的轉化方法：

將目的基因導入植物細胞：采用最多的方法是_______，其次還有______和______等。

將目的基因導入動物細胞：最常用的方法是_______。此方法的受體細胞多是_______。

將目的基因導入微生物細胞：原核生物作為受體細胞的原因是_______，最常用的原核細胞是_____，其轉化方法是：先用______處理細胞，使其成為______，再將______溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉化過程。21、第三步：將目的基因導入______22、為了避免外源DNA等因素污染，PCR實驗中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進行_____________。而使用的緩沖液并在__________℃存儲。23、DNA的粗提取實驗中，如果實驗材料是非哺乳動物如雞血細胞，需要在雞血細胞中加入一定量的____________，如果實驗材料是植物細胞，需要先使用_______________溶解細胞膜。24、通過____________的方式，來控制NaCL溶液的濃度，使DNA在鹽溶液中溶解或析出。25、隨著現(xiàn)代生物技術的飛速發(fā)展；轉基因動物；克隆動物和試管動物相繼問世，請回答下列問題：

（1）轉基因動物、克隆動物和試管動物培育過程中都要用到的生物技術包括______。

（2）核移植是動物克隆的第一步，包括體細胞核移植和胚胎細胞核移植，其中后者更易成功，原因是______。核移植常用處于______（填時期）的______為受體細胞。

（3）在“試管動物”的培育過程中，常采用______（填激素名稱）處理可使雌性個體一次排出多枚卵母細胞。從雄性個體采集的精子需______后才能進行受精作用；防止多精入卵的兩道屏障依次為______；卵細胞膜反應。

（4）若考慮環(huán)境承載力，轉基因動物、克隆動物和試管動物不宜放置到自然環(huán)境中，這遵循了生態(tài)工程的______原理。26、基因表達載體的組成及其作用。

一個基因表達載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦______________評卷人得分四、判斷題(共1題，共2分)27、利用基因工程技術建立移植器官工廠是目前基因工程取得實際應用成果非常多的領域。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共21分)28、鼠傷寒沙門氏菌的野生型菌株（his+）可在基本培養(yǎng)基（含微量組氨酸）上生長形成菌落，而突變型的組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株（his-）不能合成組氨酸；無法在基本培養(yǎng)基上形成菌落。利用his菌株可檢測環(huán)境或食品中是否存在化學致癌劑（誘發(fā)his-菌株突變）。回答下列問題：

(1).基本培養(yǎng)基的成分主要包括_____。制備基本固體培養(yǎng)基的操作：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。倒平板時應注意：_____。

(2).檢測是否存在化學致癌劑時，用_____法將his-菌株接種于基本培養(yǎng)基上，使其密集均勻分布在平板上，將浸泡過待測化合物的濾紙片貼于平板中央。若培養(yǎng)基滅菌合格，則可能影響該檢測結果的兩個重要因素是_____。若圖A為對照組，B為實驗組，則A組濾紙片的處理方法是_____。經(jīng)正確檢驗后，結果如B所示，則實驗結果和結論為_____。

(3).使用過的培養(yǎng)基在丟棄之前應做的處理及目的是_____。29、科學家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來了無限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過_______________法接種到高氏一號（加數(shù)滴質量分數(shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過PCR技術擴增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進行菌株的種屬鑒定。PCR技術中起關鍵作用的酶是_____________。該技術能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過_________________鑒定。

(3)科學家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉錄病毒轉入小鼠成纖維細胞中。2~3周后，這些細胞顯示出ES細胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細胞。在這個實驗過程中，逆轉錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？請寫出實驗設計思路______________30、科研人員以病毒表面S蛋白作為主要的病毒抗原；利用基因工程研制疫苗用于接種預防，簡要過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

(1)新冠病毒是一種RNA病毒，一般先通過_____________________得到cDNA，再經(jīng)PCR技術獲取大量S蛋白基因，PCR的中文全稱是_____________________。

(2)PCR技術還需用到_____________________酶，該酶能夠使脫氧核苷酸從引物的_____________________端開始連接，據(jù)下圖分析，可選擇的引物是_____________________。

(3)為了驗證表達的S蛋白與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性；請設計簡單的檢測方案并預期檢測結果。

方案:_________________________________。

結果:_________________________________。評卷人得分六、綜合題(共3題，共24分)31、如圖為微生物大腸桿菌的實驗室培養(yǎng)和純化的部分操作步驟。請回答下列問題：

(1).①是制備培養(yǎng)基時_____的主要操作，該操作溫度達到_____℃左右時進行。

(2).步驟④的操作，所使用接種方法是_____；在做第二次及其后的劃線操作時，須從上一次劃線的_____開始劃線；使細菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個細菌繁殖而成的菌落。

(3).在大腸桿菌的培養(yǎng)過程中，為了防止雜菌污染，應對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行_____；同時懸浮在空氣中的細菌可以用_____進行滅殺。

(4).在培養(yǎng)過程中需要添加的營養(yǎng)物質有水、_____、_____和無機鹽等。

(5).圖⑤所選擇的接種方法是_____。根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的_____就能大致推測出樣品中的活菌數(shù)。32、2020年12月中央經(jīng)濟工作會議指出∶種子是農(nóng)業(yè)的“芯片”；要開展種源“卡脖子”技術攻關?！翱瓜x和耐除草劑玉米雙抗12-5”是我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部于2020年1月頒發(fā)了轉基因安全證書的玉米新品種，下圖為該轉基因玉米的培育過程示意圖。請回答∶

（1）在研究過程中，研究人員利用相關基因組，采用_______________技術對目的基因進行擴增，在構建基因表達載體時需要用到的工具酶有_________________________________。

（2）抗蟲和耐除草劑基因必須插入到Ti質粒的___________________中，才能轉移并整合到受體細胞的染色體DNA上。圖示將目的基因導入玉米細胞的方法是______________________________。

（3）成功導入目的基因的玉米細胞需通過___________________技術進一步培養(yǎng)成完整植株，該技術的原理是______________________。配制叢狀苗生根培養(yǎng)基時，可適當增加______________（填“生長素”或“細胞分裂素”）的含量；以促進叢狀苗生根。

（4）檢測玉米植株細胞內是否合成抗蟲蛋白，分子水平上所用的檢測方法是______________________。33、馬鈴薯喜酸、厭堿，但是全國有近15億畝的鹽堿地，2017年開始國家馬鈴薯工程技術研究中心聯(lián)合山東省農(nóng)科院開展了多地馬鈴薯耐鹽堿育種項目。科學家發(fā)現(xiàn)在培育轉基因耐鹽馬鈴薯時，可利用某植物液泡膜上Na＋/K＋逆向轉運蛋白基因（AINHX基因）作為目的基因。請回答下列問題：

(1)構建目的基因表達載體過程中使用的工具酶是_________?；虮磉_載體除含有目的基因及標記基因外，還應該含有_________（至少寫出兩個）。

(2)AINHX基因兩端的核苷酸序列已知，如下表所示，虛線處省略了部分核苷酸序列。利用PCR技術擴增該基因時，所需要的引物為表格中的_________（填序號）。已知序列5'－AACTATGCGCTCATGA－－－－GCAATGCGTAGCCTCTY

3'－TTGATACGCGAGTACT－－－－CGTTACGCATCGGAGASPCR引物①5'－TCATGAGCGCATAGTT－3'②5'－GCAATGCGTAGCCTCT－3'

③5'－AGAGGCTACGCATTGC－3'④5'－AACTATGCGCTCATGA－3'

(3)為探究目的基因在轉基因馬鈴薯植株中是否成功轉錄，可從轉基因植株的細胞中提取mRNA進行檢測。若以根細胞為材料檢測結果為陽性（有產(chǎn)物生成），以葉細胞為材料檢測結果為陰性（無產(chǎn)物生成），則說明_________。為證明轉基因馬鈴薯獲得了耐鹽性，檢驗方法是_________。

(4)同細胞工程、胚胎工程等現(xiàn)代生物技術一樣，轉基因馬鈴菊的培育過程中，要嚴格防止其他微生物的干擾，即在操作轉基因技術的過程中要盡可能提供_________的環(huán)境。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、D【分析】【分析】

基因工程中通常要有多種工具酶；目的基因、載體和宿主細胞等基本要素；并按一定的程序進行操作，包括目的基因的獲得、重組DNA的形成、重組DNA導入受體細胞、篩選含有目的基因的受體細胞和目的基因的表達等幾個方面。

【詳解】

A；若受體大腸桿菌含有構建重組質粒時用到的限制性核酸內切酶；則該酶會對進入受體的重組質粒進行切割，不利于其保持結構穩(wěn)定，A錯誤；

B；抗除草劑基因轉入抗鹽植物；獲得了抗除草劑抗鹽品系和抗除草劑不抗鹽品系，不抗鹽品系的產(chǎn)生可能是轉入的抗除草劑基因插入到抗鹽基因內，影響其表達造成，B錯誤；

C；轉基因植物中均含抗除草劑基因；但存在抗除草劑和不抗除草劑兩種植株，前者表達了抗性蛋白，后者可能抗除草劑基因未轉錄出mRNA，或轉錄出的mRNA未能翻譯成蛋白質，C錯誤；

D；某種限制性內切酶完全酶切環(huán)狀質粒后；出現(xiàn)3條帶，即3種不同分子量DNA，因此環(huán)狀質粒上至少有3個酶切位點，D正確。

故選D。2、C【分析】【分析】

1；圖中將不同種植物的體細胞在一定條件下融合成雜種細胞；并把雜種細胞培育成新的植物體叫做植物體細胞雜交。植物體細胞雜交這一育種方法的最大優(yōu)點是克服遠緣雜交不親和障礙。

2；植物體細胞雜交；其實質為植物原生質體的融合，在融合前需要使用酶解法(纖維素酶和果膠酶）去除植物的細胞壁，再用化學法(聚乙二醇）或物理法(振動、離心、電刺激）誘導原生質體融合，需要注意的是誘導植物原生質體的融合時不用生物方法(滅活的病毒)；細胞融合完成的標志是融合細胞再生出新的細胞壁；獲得融合細胞后需利用植物的組織培養(yǎng)技術將細胞培育成植株，故植物體細胞雜交技術的最終目的是培育具有優(yōu)良性狀的植物新品種。

【詳解】

A；①為去除細胞壁的過程；需使用纖維素酶和果膠酶處理細胞，A正確；

B；若在細胞融合前染色體發(fā)生斷裂；形成的染色體片段可能不會被全部排出，而是整合到另一個細胞的染色體上留存在雜種細胞中。所以過程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂，并進一步整合到另一個細胞的染色體上留存在雜種細胞中，B正確；

C；過程③為誘導融合；植物細胞誘導融合一般不用滅活的病毒誘導原生質體融合，常采用化學法(聚乙二醇）或物理法(振動、離心、電刺激）誘導原生質體融合，C錯誤；

D；由題可知；中間偃麥草的染色體被紫外線照射后發(fā)生斷裂，其片段整合到了耐鹽小麥的染色體上留存在雜種細胞中，D正確。

故選C。3、C【分析】【分析】

題圖分析；圖中顯示了兩種獲取目的基因的方法。圖中①表示逆轉錄過程，②表示用限制酶切割DNA分子得到一定大小范圍DNA，③表示獲取目的基因。

【詳解】

A；①為逆轉錄過程；完成該過程需要逆轉錄酶，A正確；

B；②表示將DNA分子切割；因此需用限制性核酸內切酶，B正確；

C；目前獲取目的基因的方法除了從基因文庫中獲取外；還可利用PCR技術擴增和人工化學合成，C錯誤；

D；cDNA的構建需要首先獲得相應的mRNA；因此，cDNA的構建需要提前了解目的基因的有關信息，D正確。

故選C。

【點睛】4、B【分析】【分析】

PCR技術：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應；是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。

2；原理：DNA復制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；PCR是一項在生物體外復制特定的DNA片段的核酸合成技術；A正確；

B；PCR技術中通過高溫解旋；不需要解旋酶，B錯誤；

C；利用PCR技術獲取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列；以便于合成引物，C正確；

D；PCR技術的原理是DNA雙鏈復制；D正確。

故選B。

【點睛】5、B【分析】【分析】

1；動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性；誘導手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結果產(chǎn)生雜交細胞，主要用于制備單克隆抗體。

2；制備單克隆抗體過程中的幾種細胞：①免疫B細胞（漿細胞）：能產(chǎn)生單一抗體；但不能無限增殖；②骨髓瘤細胞：能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；③雜交瘤細胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。

【詳解】

A；①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的B淋巴細胞；A錯誤；

B；誘導動物細胞融合的方法有電激、聚乙二醇和滅活的病毒；B正確；

C；③中融合細胞有3類；同種融合細胞均不能在HAT培養(yǎng)基中生長，只有雜交瘤細胞即獲得了瘤細胞的無限增殖能力，又有B細胞的DNA復制途徑，可以生長增殖，C錯誤；

D；④過程為從融合細胞到獲得分泌特異性抗體的細胞的過程；利用HAT選擇培養(yǎng)基篩選只能得到雜交瘤細胞，需要在經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和專一抗體陽性檢測才能得到分泌特異性抗體的細胞，D錯誤。

故選B。6、C【分析】【分析】

由圖分析可知；圖中①表示將紫外線照射處理的菌液接種在缺乏精氨酸的培養(yǎng)基上，因此甲中A表示野生型谷氨酸棒狀桿菌，②表示向培養(yǎng)基中添加精氨酸后繼續(xù)培養(yǎng)，其中A為野生型谷氨酸棒狀桿菌，B為精氨酸依賴型菌株。

【詳解】

A；谷氨酸棒狀桿菌屬于原核生物；遺傳物質是DNA，用紫外線照射可導致谷氨酸棒狀桿菌發(fā)生基因突變，A正確；

B；通過分析可知；過程②所用的培養(yǎng)基是缺少精氨酸的選擇培養(yǎng)基，B正確；

C；圖甲中菌落A不是采用平板劃線法接種后培養(yǎng)得到；C錯誤；

D；通過分析可知；圖乙中菌落B應為精氨酸依賴型谷氨酸棒狀桿菌，D正確。

故選C。7、D【分析】【分析】

酵母菌是兼性厭氧菌；在無氧條件下進行酒精發(fā)酵；醋酸菌是好氧細菌，當氧氣；糖源都充足時，能將糖分分解成醋酸，當缺少糖源時，則將乙醇轉化為乙醛，再將乙醛變成醋酸。

【詳解】

A；菌種1進行酒精發(fā)酵；為酵母菌，菌種2進行醋酸發(fā)酵，為醋酸菌，A錯誤；

B；菌種2為醋酸菌；醋酸菌是好氧細菌，進行有氧呼吸，B錯誤；

C；酒精發(fā)酵階段是酵母菌的無氧呼吸過程；不需要補充氧氣，C錯誤；

D；菌種1為酵母菌；菌種2為醋酸菌，酵母菌的最適生長溫度約為28℃，醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃，故接種菌種2后需將溫度調高提高其醋酸發(fā)酵能力，D正確。

故選D。8、B【分析】【分析】

基因工程可以用于培育抗蟲轉基因植物；抗病轉基因植物、抗逆轉基因植物、改良植物的品質、提高動物的生長速度、用于改善畜產(chǎn)品的品質、用轉基因動物生成藥物等。植物細胞工程可以用于微型繁殖、作物脫毒、合成人工種子等。

【詳解】

作物脫毒（選根尖；莖尖）屬于細胞工程的應用；改善畜產(chǎn)品的品質、抗除草劑作物屬于基因工程的應用；可保存的干擾素經(jīng)過蛋白質工程的改造；屬于蛋白質工程。綜上所述，ACD不符合題意，B符合題意。

故選B。二、多選題(共9題，共18分)9、B:C【分析】【分析】

胚胎發(fā)育過程：（1）卵裂期：細胞進行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加；（2）桑椹胚：32個細胞左右的胚胎；（3）囊胚：細胞開始分化，其中個體較大的細胞叫內細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內部逐漸出現(xiàn)囊胚腔；（4）原腸胚：內細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內胚層，由內胚層包圍的囊腔叫原腸腔。

【詳解】

A；由桑椹胚發(fā)育到囊胚進行的是有絲分裂；形成的每個細胞內DNA總量不變，A錯誤；

B；囊胚期細胞出現(xiàn)了細胞分化；但細胞分化的實質是基因的選擇性表達，因此其遺傳物質未發(fā)生改變，B正確；

C；囊胚期內細胞團和滋養(yǎng)層細胞的差異不是DNA復制水平上的差異；而是轉錄水平上的差異，即基因的選擇性表達，C正確；

D；受精卵在輸卵管中形成；后在子宮中發(fā)育，故胚胎發(fā)育的早期不可能在卵巢，D錯誤。

故選BC。10、A:B:C【分析】【分析】

1.生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員；牲畜、毀壞植物的武器。生物武器又是生物制劑、載體和分散手段的綜合利用。生物武器自誕生以來；給人類的生存安全構成了嚴重威脅。

2.轉基因生物的安全性問題包括食物安全；生物安全和環(huán)境安全。

3.“治療性克隆”將使人胚胎干細胞（簡稱ES細胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細胞移植到去核卵母細胞中構建形成重組胚胎；體外培養(yǎng)到一定時期分離出ES細胞，獲得的ES細胞定向分化為所需的特定類型細胞（如神經(jīng)細胞；肌肉細胞和血細胞），用于治療。

【詳解】

A；對待生物武器的態(tài)度應明確而堅定；即在任何情況下都不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，堅決禁止生物武器，A正確；

B；中國對于克隆人的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；但不反對治療性克隆，B正確；

C；對轉基因植物外源DNA要進行認真選擇；避免產(chǎn)生對人體有害的或過敏的蛋白質，C正確；

D；一旦發(fā)現(xiàn)轉基因生物出現(xiàn)了安全性問題；要馬上停止實驗，并銷毀重組生物，D錯誤。

故選ABC。11、C:D【分析】【分析】

聚酶鏈式反應擴增DNA片段：

1.PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2.PCR反應過程是：變性→復性→延伸。

【詳解】

A；利用PCR技術擴增目的基因時不需要解旋酶；該過程中氫鍵的斷裂是通過高溫完成的，而子鏈延伸過程需要耐高溫的DNA聚合酶，A正確；

B；引物是子鏈合成延伸基礎；即DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，也可以說子鏈沿著模板鏈的3’→5’方向延伸，B正確；

C、從理論上推測，第四輪循環(huán)產(chǎn)物共有24=16個DNA分子；其中有2個是模板鏈，只含有引物A的DNA片段即為與其中的一個模板鏈形成的1個DNA分子，因此，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中只含有引物A的DNA片段所占的比例為1/16，C錯誤；

D、DNA復制為半保留復制，DNA復制n次，共形成2n個DNA，其中兩個DNA含有母鏈和子鏈（引物A或引物B），（2n-2）個DNA都含有子鏈（含有引物A和引物B）。第三輪循環(huán)即DNA復制3次；共形成8個DNA，其中2個DNA含有引物A或引物B，6個DNA含有引物A和引物B，其中只有2個兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段，含量為1/4，D錯誤。

故選CD。

【點睛】12、A:C:D【分析】【分析】

完全培養(yǎng)基中含有微生物生長所需要的各種營養(yǎng)成分；基本培養(yǎng)基缺少某種營養(yǎng)成分，通過影印培養(yǎng)法，二者接種的菌種相同，基本培養(yǎng)基上不能生長的菌株即為營養(yǎng)缺陷型菌株。

【詳解】

A；過程①得到的菌落均勻分布；接種方法為稀釋涂布平板法，過程②兩種培養(yǎng)基的成分不同，基本培養(yǎng)基中缺乏某種氨基酸，A錯誤；

B；進行過程②培養(yǎng)時先將絲絨布轉印至完全培養(yǎng)基上；可能會攜帶某種氨基酸進入基本培養(yǎng)基，因此順序不能顛倒，B正確；

C；統(tǒng)計菌落種類和數(shù)量時要每隔24h觀察統(tǒng)計一次；直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防止培養(yǎng)時間不足導致菌落數(shù)目偏小，C錯誤；

D；若該菌株為原核細胞；則不存在核孔復合體，營養(yǎng)缺陷型菌株細胞代謝調節(jié)機制中的某些酶被破壞，應是控制該酶合成的基因發(fā)生突變，D錯誤。

故選ACD。

【點睛】13、B:D【分析】【分析】

分析題圖：構建表達載體時；不能選用限制酶BamHⅠ，否則會導致兩種抗性基因都被破壞，因此應該選擇Bc1I和HindⅢ這兩種限制酶，根據(jù)引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c。

【詳解】

A；PCR技術要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結合；根據(jù)引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c，A正確；

B；根據(jù)圖甲可知；BamHⅠ會導致兩種抗性基因都被破壞，同時為防止目的基因自身環(huán)化，因此只能選BclI和HindⅢ兩種限制酶切割，B錯誤；

C；圖乙中一個DNA分子在PCR儀中經(jīng)過四輪復制可得到16個DNA片段；其中所需目的基因的分子數(shù)為8個，C正確；

D；由于選擇BclI和HindⅢ這兩種限制酶；破壞了氨芐青霉素抗性基因，但沒有破壞四環(huán)素抗性基因，因此應該先用含四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選出含有基因表達載體和普通質粒的大腸桿菌，再用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選含重組質粒的大腸桿菌，培養(yǎng)基加氨芐青霉素含普通質粒的大腸桿菌能生存，而含重組質粒的不能生存，從而篩選出成功導入表達載體的受體細胞，D錯誤。

故選BD。14、A:C【分析】【分析】

分析圖解，可以看出綠色熒光蛋白“轉基因”克隆豬涉及了多項生物工程技術。圖中B表示基因表達載體的構建；然后將目的基因導入豬胎兒的成纖維細胞，經(jīng)過動物細胞培養(yǎng)篩選出轉基因體細胞，然后該細胞的細胞核與豬的卵細胞進行細胞核移植獲得重組細胞。重組細胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚期，最后經(jīng)過胚胎移植技術將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內，最后生成轉基因克隆豬。由此可見，該過程中利用基因工程、動物細胞培養(yǎng)、細胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術。

【詳解】

A；①是將重組DNA導入受體細胞；直接采用顯微注射法，無需對受體細胞進行誘導，②過程通常是將細胞注入去核卵母細胞中，然后利用電融合法使D構建成功，A錯誤；

B；C是處于MⅡ期的卵母細胞；這個時期的“核”實際上是紡錘體—染色體復合物，B正確；

C；受體對移入的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應；因此無需給F注射免疫抑制劑，C錯誤；

D；移入F的通常是桑葚胚；它要經(jīng)歷囊胚、原腸胚階段的發(fā)育才能成為豬的幼體，D正確。

故選AC。15、A:B【分析】【分析】

iPS細胞被稱為誘導多能干細胞；具有分裂和分化的能力。

【詳解】

A；目前已采用多種方法來制備iPS細胞；包括借助載體將特定的基因導入細胞中，直接將特定的蛋白導入細胞中或者用小分子化合物等來誘導形成iPS細胞，A正確；

B、iPS細胞的體外培養(yǎng)是利用動物細胞培養(yǎng)技術，需要在無菌的CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；B正確；

C；T細胞、B細胞能被誘導為iPS細胞；說明離體的已分化的細胞經(jīng)過誘導可轉化為能分化的狀態(tài)，C錯誤；

D；胚胎干細胞和iPS細胞均具有分裂能力強；分化程度低的特點，D錯誤。

故選AB。16、A:B:C:D【分析】【分析】

1；轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

2；中國政府：禁止生殖性克隆人；堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆人。

3；生物武器種類：包括致病菌、病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

【詳解】

AB；生物武器致病能力強、攻擊范圍廣；第二次世界大戰(zhàn)中，侵華日軍在我國多個地區(qū)使用過細菌武器，給我國人民帶來很大苦難，他們的種種暴行遭到國際輿論的一致譴責。一些恐怖組織或個人在試圖尋找各種大規(guī)模殺傷性武器，而生物武器相對容易獲得，也便于攜帶和釋放，一旦被他們利用，將產(chǎn)生極大的危害，AB正確；

C；利用轉基因技術可以制造各種新型致病菌；這些人類沒有接觸過的致病菌可以讓大批感染者突然發(fā)病，而又無藥可醫(yī)，C正確；

D；1975年3月《禁止生物武器公約》生效；清除生物武器威脅，防止生物武器擴散是生物安全防控的重要方面，徹底銷毀生物武器是全世界愛好和平的人民的共同期望，D正確。

故選ABCD。17、A:C:D【分析】分析題圖：圖示表示煙草植物組織培養(yǎng)過程的流程圖；其中①表示獲取外植體，②表示脫分化，③表示再分化，④表示從愈傷組織中獲取細胞X，⑤表示進一步發(fā)育形成幼苗。

【詳解】

A；對過程①獲取的根組織塊應進行消毒處理；如果采用滅菌技術，會使根組織塊失去活力，無法進行組織培養(yǎng)，A錯誤；

B；過程②是脫分化形成愈傷組織的過程；需要在避光的環(huán)境中進行，B正確；

C；過程③發(fā)生再分化；其實質是基因的選擇性表達，C錯誤；

D；可以通過誘導使細胞產(chǎn)生突變；但突變是不定向的，D錯誤。

故選ACD。三、填空題(共9題，共18分)18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA連接酶19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】兼性厭氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO220、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】農(nóng)桿菌轉化法基因槍法花粉管通道法顯微注射技術受精卵繁殖快、多為單細胞、遺傳物質相對較少大腸桿菌Ca2+感受態(tài)細胞重組表達載體DNA分子21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】受體細胞22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】高壓滅菌—2023、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蒸餾水洗滌劑和食鹽24、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】滴加蒸餾水逐漸稀釋2mol/L濃度的NaCL溶液25、略

【分析】【分析】

1；動物核移植的概念：將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體，核移植得到的動物稱克隆動物；

2；早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分；除無機鹽和有機鹽外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，并需添加動物血清等天然成分。

【詳解】

（1）轉基因動物；試管動物和克隆動物分別在體外得到早期胚胎后；都要通過胚胎移植獲得新個體。

（2）核移植包括體細胞核移植和胚胎細胞核移植；其中后者更易成功，原因是胚胎細胞分化程度低，恢復全能性相對容易，而體細胞分化程度高，全能性不易表達；核移植常用的減數(shù)第二次分裂中期的去核卵母細胞作為受體細胞，其中去核的目的是避免原細胞核中遺傳物質對克隆動物的影響，保證克隆動物的核遺傳物質來自供體細胞。

（3）促性腺激素處理可促使雌性個體超數(shù)排卵；即使良種母牛一次排出多枚卵母細胞。精子需要經(jīng)過獲能處理才能受精；防止多精入卵的兩道屏障依次為透明帶反應；卵細胞膜反應。

（4）要考慮環(huán)境承載力；處理好生物與環(huán)境的協(xié)調與平衡，這體現(xiàn)了生態(tài)工程的協(xié)調與平衡原理。

【點睛】

本題考查細胞工程、胚胎工程和生態(tài)工程的有關知識，意在考查考生理解能力、獲取信息的能力和綜合運用能力?！窘馕觥颗咛ヒ浦玻ɑ蚺咛サ脑缙谂囵B(yǎng)和胚胎移植）胚胎細胞分化程度低，恢復全能性相對容易MⅡ中期去核卵母細胞促性腺激素獲能透明帶反應協(xié)調與平衡26、略

【分析】略【解析】目的基因標記基因啟動子終止子啟動子上游RNA聚合酶終止子下游轉錄標記四、判斷題(共1題，共2分)27、B【分析】【詳解】

基因工程技術可以使建立移植器官工廠的設想成為現(xiàn)實；說明并未開始實際應用。

故錯誤。五、實驗題(共3題，共21分)28、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基的制作流程一般為：計算→稱量→溶化（包括瓊脂）→調節(jié)pH→分裝→滅菌→倒平板→（冷卻后）倒置平板。微生物接種是微生物學研究中最常用的基本操作；主要用于微生物的分離純化。具體來說，就是在無菌條件下，用接種環(huán)或接種針等專用工具，從一個培養(yǎng)皿（上面可能存在各種雜菌落）挑取所需的微生物，轉接到另一個培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)的方法。【小問1】

培養(yǎng)基的組成成分包括碳源；氮源、水、無機鹽、生長因子等。倒平板時；應待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右倒平板，平板冷凝后要將平板倒置，倒平板過程中應在酒精燈火焰附近進行，以防止雜菌污染?！拘?】

題干中表明菌體密集均勻分布在平板上；所以是稀釋涂布平板法接種。培養(yǎng)基滅菌合格，影響因素應為除培養(yǎng)基滅菌以外可能的影響因素，因此，可能操作過程中是否無菌操作，以及使用的濾紙條是否滅菌合格等。A為對照組，應除自變量以外，其他條件都相同，因此，處理方法為浸泡在無菌水中處理后貼于平板中央；實驗中能觀察到出現(xiàn)野生型菌株菌落，說明環(huán)境中存在化學致癌劑導致突變型菌株突變成野生型菌株。【小問3】

使用過的培養(yǎng)基應滅菌后再丟棄；以防止培養(yǎng)基中的有害物質污染環(huán)境或感染實驗操作者。

【點睛】

本題考查培養(yǎng)基的成分、制備過程以及微生物的接種方法等相關知識，意在考查考生對所學知識的識記和理解能力?！窘馕觥俊拘☆}1】①.碳源；氮源、水和無機鹽②.待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時；在酒精燈火焰旁附近倒平板。

【小題2】①.稀釋涂布平板②.濾紙片是否滅菌徹底和待測化合物是否含有雜菌③.（濾紙片）用無菌水浸泡④.his-菌株在培養(yǎng)基上突變?yōu)閔is+菌株；說明待測化合物中存在致癌劑（或待測化合物中存在化學誘變劑，這些化學物質具有致癌性，敘述合理即可）

【小題3】滅菌，避免對環(huán)境造成污染29、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術是一項通過體外控制溫度擴增DNA的技術，該技術中由于溫度較高，起關鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設計合成的；PCR產(chǎn)物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定：凝膠中的DNA分子通過染色；可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。

（3）分析題意，科學家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉錄病毒轉入小鼠成纖維細胞中，該過程中逆轉錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞；分析題意，實驗目的是iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用，故實驗的自變量是外源基因的有無，因變量是IPS細胞的產(chǎn)生情況，實驗設計應遵循對照與單一變量原則，故可設計實驗如下：將轉入外源基因的細胞和沒有轉入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉入外源基因的細胞轉化成了iPS細胞，則可以證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用?！窘馕觥?1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結合（引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設計合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞。將轉入外源基因的細胞和沒有轉入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉入外源基因的細胞轉化成了iPS細胞，則可以證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用30、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）利用RNA得到相應DNA的方法為逆轉錄；起作用的酶為逆轉錄酶。在體外將DNA擴增的技術是PCR，中文名稱為多聚酶鏈式反應。

（2）PCR技術是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術；該過程需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)能夠使脫氧核苷酸從引物的3'端開始連接，使子代DNA從5'向3'延伸；進行擴增時，還應選擇一對方向相反的引物，且與模板的3'端結合，據(jù)圖可知，應選擇Ⅱ；Ⅲ。

（3）細胞內是否合成了由目的基因控制的蛋白質，使用抗原-抗體雜交法檢測，為了檢驗表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性，可用S蛋白與新冠病毒肺炎康復患者血清進行抗原-抗體雜交實驗來進行檢測，本實驗是驗證性實驗，實驗結果是唯一的，因此本實驗結果是出現(xiàn)雜交帶?！窘馕觥?1)逆轉錄多聚酶鏈式反應。

(2)熱穩(wěn)定DNA聚合酶##Taq酶3'II；Ⅲ

(3)用表達的S蛋白與新冠病毒肺炎康復患者血清進行抗原-抗體雜交實驗出現(xiàn)雜交帶六、綜合題(共3題，共24分)31、略

【分析】【分析】

由圖可知；①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進行平板劃線，④是培養(yǎng)，⑤是稀釋涂布平板法接種微生物?！拘?】

①是制備培養(yǎng)基時倒平板中的主要操作；該操作溫度達到50℃左右時進行，若溫度太低培養(yǎng)基會凝固。【小問2】

接種微生物常用稀釋涂布平板法和平板劃線法；圖中步驟④使用的是平板劃線法。在做第二次及其后的劃線操作時，須從上一次劃線的末端開始劃線，使細菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個細菌繁殖而成的菌落。【小問3】

微生物培養(yǎng)過程中；為了防止雜菌污染，關鍵要做到無菌操作，對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿應進行滅菌。懸浮在空氣中的細菌可采用紫外線消毒的方法進行滅殺。【小問4】

微生物培養(yǎng)過程中需要的營養(yǎng)物質主要有碳源；氮源、水、無機鹽等。此外；還需要滿足微生物生長對滲透壓、pH、溫度、氧氣、及特殊營養(yǎng)物質的需求?！拘?】

圖⑤是將稀釋的