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第4講實(shí)驗(yàn)檢測(cè)生物組織中的糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)【實(shí)驗(yàn)知識(shí)梳理】
【實(shí)驗(yàn)原理】
檢測(cè)物質(zhì)鑒定試劑顏色反應(yīng)還原糖斐林試劑_______脂肪蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)染液_____________蛋白質(zhì)________________淀粉碘液_____磚紅色橘黃色(紅色)雙縮脲試劑紫色藍(lán)色【實(shí)驗(yàn)步驟】1.還原糖的檢測(cè):
2.脂肪的檢測(cè):方法一:花生種子勻漿+3滴蘇丹Ⅲ染液→_______橘黃色方法二:3.蛋白質(zhì)的檢測(cè):4.淀粉的檢測(cè):【實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)探究】
1.檢測(cè)還原糖時(shí),為何不選甘蔗汁、西瓜汁作為實(shí)驗(yàn)材料?提示:檢測(cè)還原糖時(shí),應(yīng)選擇含還原糖豐富的白色或接近于白色的實(shí)驗(yàn)材料。甘蔗汁含有豐富的蔗糖,蔗糖不是還原糖;西瓜汁雖含有豐富的還原糖,但材料本身為紅色,會(huì)遮蓋反應(yīng)結(jié)果。2.檢測(cè)還原糖時(shí)使用的斐林試劑為何要現(xiàn)配現(xiàn)用?提示:因?yàn)殪沉衷噭┖懿环€(wěn)定,容易產(chǎn)生藍(lán)色的Cu(OH)2沉淀,所以應(yīng)將甲液和乙液分別配制,使用時(shí)現(xiàn)配現(xiàn)用。3.在成分、使用原理和使用順序上,斐林試劑和雙縮脲試劑有何不同?提示:斐林試劑和雙縮脲試劑成分相同,但CuSO4濃度不同,使用原理和使用方法不同,可簡(jiǎn)記為“一同三不同”:4.葡萄糖與斐林試劑混合后有何實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象?提示:葡萄糖與斐林試劑混合后,沒(méi)有經(jīng)過(guò)水浴加熱,不會(huì)生成磚紅色沉淀,而斐林試劑為藍(lán)色,二者混合后溶液呈現(xiàn)藍(lán)色。5.檢測(cè)脂肪時(shí),為何使用50%的酒精洗去浮色,而不用清水?提示:蘇丹Ⅲ(Ⅳ)染液易溶于有機(jī)溶劑,不溶于水。6.在還原糖、蛋白質(zhì)和脂肪的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中,加相應(yīng)試劑檢測(cè)之前,為什么要留出一部分組織樣液?提示:留出一部分組織樣液的目的是與檢測(cè)后的樣液顏色作對(duì)比,以增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力。7.檢測(cè)生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)中,哪些實(shí)驗(yàn)需要加熱?哪些實(shí)驗(yàn)需要用顯微鏡觀察?提示:(1)只有檢測(cè)還原糖的實(shí)驗(yàn)需要加熱,且實(shí)驗(yàn)中需要用溫水浴加熱,不能用酒精燈直接加熱。(2)只有檢測(cè)脂肪的實(shí)驗(yàn)需要用顯微鏡觀察,因?yàn)橹绢w粒儲(chǔ)存于細(xì)胞中,必須用顯微鏡觀察?!緦?shí)驗(yàn)創(chuàng)新探究】
探究點(diǎn)1實(shí)驗(yàn)試劑創(chuàng)新某同學(xué)鑒定蛋白質(zhì)時(shí),實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有雙縮脲試劑,該同學(xué)用斐林試劑甲液、乙液和蒸餾水完成了蛋白質(zhì)鑒定(1)操作:將斐林試劑_____(填“甲液”或“乙液”)用蒸餾水稀釋。(2)理由:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
乙液斐林試劑甲液和乙液的成分與雙縮脲試劑A液和B液的成分相同,只是斐林試劑乙液(0.05g/mL的CuSO4溶液)的質(zhì)量濃度比雙縮脲試劑B液(0.01g/mL的CuSO4溶液)大,需要將斐林試劑乙液進(jìn)行適當(dāng)稀釋探究點(diǎn)2實(shí)驗(yàn)過(guò)程創(chuàng)新檢測(cè)蛋白質(zhì)時(shí),某同學(xué)進(jìn)行了如圖所示的改進(jìn),各組均加入等量雙縮脲試劑。(1)現(xiàn)象:若待測(cè)組織樣液為大豆勻漿,則A組為_(kāi)__色、B組為_(kāi)__色、C組為_(kāi)__色。(2)目的:B組和C組為_(kāi)____組,可增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)說(shuō)服力。紫紫藍(lán)對(duì)照【實(shí)驗(yàn)提升演練】
【回扣教材題組】1.食品檢測(cè)需要對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行鑒定,下列成分、試劑和顏色對(duì)應(yīng)關(guān)系錯(cuò)誤的是(
)A.淀粉:碘液,藍(lán)色B.還原糖:斐林試劑,磚紅色C.脂肪:蘇丹Ⅲ染液,橘黃色D.蛋白質(zhì):雙縮脲試劑,黃綠色【解析】選D。淀粉的檢測(cè)和觀察用的試劑通常是碘液,淀粉遇碘變藍(lán)色,A正確;檢測(cè)還原糖時(shí)可用斐林試劑,出現(xiàn)磚紅色,B正確;脂肪的檢測(cè)可用蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液,顏色變化為橘黃色或紅色,C正確;蛋白質(zhì)的檢測(cè)可用雙縮脲試劑,顏色反應(yīng)為紫色,D錯(cuò)誤?!疽族e(cuò)提醒】斐林試劑是由甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)和乙液(0.05g/mL的CuSO4溶液)配制成的藍(lán)色溶液;雙縮脲試劑由A液(0.1g/mL的NaOH溶液)和B液(0.01g/mL的CuSO4溶液)組成,使用時(shí)應(yīng)先加入A液,再滴加B液。2.大豆中含有多種營(yíng)養(yǎng)成分,為了檢測(cè)大豆種子中是否含有蛋白質(zhì),某同學(xué)選取的試劑和進(jìn)行的相關(guān)操作正確的是 (
)A.選用雙縮脲試劑進(jìn)行檢測(cè)B.用顯微鏡觀察是否有被染成橘黃色的顆粒C.進(jìn)行水浴加熱D.A液和B液等量混合均勻后再使用【解析】選A。用于蛋白質(zhì)檢測(cè)的試劑是雙縮脲試劑,產(chǎn)生紫色反應(yīng),A正確;被染成橘黃色的顆粒是脂肪顆粒,B錯(cuò)誤;蛋白質(zhì)的檢測(cè)不需要加熱,C錯(cuò)誤;使用雙縮脲試劑時(shí),應(yīng)該先加雙縮脲試劑A液,再加雙縮脲試劑B液,D錯(cuò)誤。3.下列關(guān)于“檢測(cè)生物組織中的糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)”實(shí)驗(yàn)操作步驟的敘述,正確的是 (
)A.用于檢測(cè)還原糖的斐林試劑甲液和乙液,可直接用于蛋白質(zhì)的檢測(cè)B.若要檢測(cè)花生種子細(xì)胞中是否含有脂肪,一定需要用顯微鏡觀察C.檢測(cè)可溶性還原糖時(shí),要加入斐林試劑(甲液和乙液等量混合均勻再加入)D.用雙縮脲試劑檢測(cè)蛋白質(zhì)時(shí),需水浴加熱2min才能看到紫色【解析】選C。斐林試劑的甲液是0.1g/mL的NaOH,乙液是0.05g/mL的CuSO4,雙縮脲試劑的A液也是0.1g/mL的NaOH,B液是0.01g/mL的CuSO4,A項(xiàng)錯(cuò)誤;檢測(cè)花生種子細(xì)胞中是否含有脂肪,也可研磨制成濾液來(lái)檢測(cè),B項(xiàng)錯(cuò)誤;檢測(cè)還原糖時(shí)加入斐林試劑的方法是甲液和乙液等量混合均勻后再加入,C項(xiàng)正確;用雙縮脲試劑檢測(cè)蛋白質(zhì)時(shí),不需要加熱,D項(xiàng)錯(cuò)誤。4.如圖所示,在1、3、5號(hào)試管中分別加入2mL蒸餾水,在2、4、6號(hào)試管中分別加入2mL發(fā)芽的小麥種子勻漿樣液,然后在1~4號(hào)試管中滴加等量斐林試劑,在5、6號(hào)試管中滴加等量雙縮脲試劑,搖勻。預(yù)期觀察到的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象是(
)A.1、3、5號(hào)試管內(nèi)都無(wú)色B.3組實(shí)驗(yàn)中甲組和乙組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相同C.4號(hào)試管內(nèi)生成磚紅色沉淀,其余試管內(nèi)都呈藍(lán)色D.4號(hào)試管內(nèi)生成磚紅色沉淀,6號(hào)試管內(nèi)呈紫色【解析】選D。斐林試劑和雙縮脲試劑都為藍(lán)色溶液,而蒸餾水不會(huì)與其發(fā)生顏色反應(yīng),A錯(cuò)誤;斐林試劑與還原糖的顏色反應(yīng)需要水浴加熱,B錯(cuò)誤;6號(hào)試管因存在蛋白質(zhì),滴加雙縮脲試劑而呈現(xiàn)紫色,C錯(cuò)誤、D正確。5.在檢測(cè)生物組織中的可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)中,需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇不同的實(shí)驗(yàn)材料。請(qǐng)根據(jù)下表所列各種材料回答問(wèn)題:(1)其中最適合用于檢測(cè)可溶性還原糖的是________,理由是______________________________。
(2)與小麥種子相比,花生種子更適合用來(lái)檢測(cè)脂肪,這是因?yàn)開(kāi)_________________________________________。
各種可供實(shí)驗(yàn)的材料梨黃桃胡蘿卜黃豆花生種子小麥種子(3)小麥種子中糖類(lèi)化合物的含量很高,卻不適合用來(lái)做還原糖的檢測(cè)實(shí)驗(yàn),這是因?yàn)開(kāi)___________________________________。
(4)某黃豆新品種中的蛋白質(zhì)含量高于普通黃豆,請(qǐng)用所學(xué)的方法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)原理:_____________________________。
材料用品:新鮮的普通黃豆子粒,新鮮的新品種黃豆子粒,研缽,試管,漏斗,紗布,吸管,清水,雙縮脲試劑A液,雙縮脲試劑B液,量筒。方法步驟:①將兩種黃豆子粒分別進(jìn)行_______,制備組織樣液。
②取A、B兩支試管,向A中加入新品種黃豆子粒組織樣液2mL,B中加入普通黃豆子粒組織樣液2mL。③向A、B兩支試管中分別加入1mL_______,搖勻,再分別加入4滴________,搖勻。
④觀察_____________________。
預(yù)期結(jié)果:_______________________________________。
【解析】(1)梨中含有較多的可溶性還原糖,且梨的組織細(xì)胞的顏色淺,不會(huì)干擾顏色反應(yīng)。(2)小麥種子含淀粉較多,花生種子含脂肪較多,故花生種子更適合用來(lái)檢測(cè)脂肪。(3)小麥種子含淀粉較多,淀粉不是還原糖,故小麥種子不適合用來(lái)做還原糖的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。(4)根據(jù)教材知識(shí)可知,實(shí)驗(yàn)原理為蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng),因此,紫色越深說(shuō)明蛋白質(zhì)含量越高。方法步驟:首先對(duì)兩種黃豆子粒進(jìn)行研磨,制備組織樣液;使用雙縮脲試劑時(shí),應(yīng)先加A液創(chuàng)造堿性環(huán)境,再加B液,搖勻,最終出現(xiàn)紫色;通過(guò)觀察顏色變化及深淺程度來(lái)判斷蛋白質(zhì)含量。由于實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖球?yàn)證新品種黃豆的蛋白質(zhì)含量高于普通黃豆,因此,預(yù)期結(jié)果應(yīng)為新品種黃豆子粒組織樣液的紫色較深。答案:(1)梨梨的組織細(xì)胞的顏色淺,且還原糖含量較高(2)小麥種子中的脂肪含量沒(méi)有花生種子的高,且不容易制作切片(3)小麥種子中的糖類(lèi)化合物主要是淀粉,淀粉不是還原糖(4)蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng),蛋白質(zhì)含量越高,顏色越深研磨雙縮脲試劑A液雙縮脲試劑B液顏色變化并比較顏色的深淺新品種黃豆子粒組織樣液(A試管)的紫色較深【拓展創(chuàng)新題組】1.有關(guān)生物組織中有機(jī)化合物的檢測(cè)實(shí)驗(yàn),下列敘述不正確的是 (
)A.西瓜汁含有較多的糖,是還原糖檢測(cè)的理想材料B.花生種子含脂肪多且子葉肥厚,可作為脂肪檢測(cè)的材料C.用雙縮脲試劑檢測(cè)稀釋的雞蛋清溶液,呈現(xiàn)紫色D.向淀粉溶液中滴加碘液,會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色【解析】選A。西瓜汁有顏色,會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象,A項(xiàng)錯(cuò)誤;花生富含脂肪,可以作為檢測(cè)脂肪實(shí)驗(yàn)的理想材料,B項(xiàng)正確;雞蛋清溶液富含蛋白質(zhì),用雙縮脲試劑檢測(cè)稀釋的雞蛋清溶液,呈現(xiàn)紫色,C項(xiàng)正確;淀粉遇碘變藍(lán)色,D項(xiàng)正確。2.下列關(guān)于有機(jī)物的檢測(cè)原理的敘述,正確的是 (
)A.變性蛋白質(zhì)不能與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)B.蔗糖、麥芽糖、乳糖都可與斐林試劑反應(yīng)生成磚紅色沉淀C.檢測(cè)氨基酸的含量可用雙縮脲試劑進(jìn)行顯色D.蘇丹Ⅲ染色后的花生子葉細(xì)胞中可觀察到橘黃色顆粒【解析】選D。雙縮脲試劑與肽鍵反應(yīng)生成紫色絡(luò)合物,不可用于檢測(cè)氨基酸含量,蛋白質(zhì)變性后被破壞的是空間結(jié)構(gòu),肽鍵沒(méi)有被破壞,A、C錯(cuò)誤;蔗糖不是還原糖,B錯(cuò)誤;蘇丹Ⅲ染液可使脂肪顆粒呈橘黃色,D正確。3.將剛剛萌發(fā)、帶有小芽的大麥充分研磨后,過(guò)濾得到組織樣液。在組織樣液中加入下列試劑后振蕩均勻,有關(guān)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)論的敘述正確的是 (
)A.加入蘇丹Ⅲ染液,溶液呈紅色,證明發(fā)芽的大麥中含有脂肪B.加入斐林試劑并水浴加熱,溶液呈磚紅色,說(shuō)明發(fā)芽的大麥中含有麥芽糖C.加入碘液,溶液呈藍(lán)色,說(shuō)明發(fā)芽的大麥中含有淀粉D.加入雙縮脲試劑,溶液呈藍(lán)色,說(shuō)明發(fā)芽的大麥中含有蛋白質(zhì)【解析】選C。蘇丹Ⅲ染液能將脂肪染成橘黃色,而不是紅色,A項(xiàng)錯(cuò)誤;加入斐林試劑并水浴加熱,溶液呈磚紅色,說(shuō)明發(fā)芽的大麥中含有還原糖,但不一定是麥芽糖,B項(xiàng)錯(cuò)誤;碘液可用于檢測(cè)淀粉,淀粉遇碘液變藍(lán),因此加入碘液,溶液呈藍(lán)色,說(shuō)明發(fā)芽的大麥中含有淀粉,C項(xiàng)正確;雙縮脲試劑與蛋白質(zhì)發(fā)生顯色反應(yīng),溶液應(yīng)呈紫色,D項(xiàng)錯(cuò)誤。4.(2020·長(zhǎng)沙模擬)如表是一組探究有機(jī)物存在與否的鑒別實(shí)驗(yàn),按表中編號(hào)順序?qū)?yīng)下列各項(xiàng)中的內(nèi)容,正確的是 (
)待測(cè)物試劑顏色反應(yīng)條件胰島素雙縮脲試劑①-脂肪②橘黃色-③斐林試劑磚紅色水浴加熱A.紫色、蘇丹Ⅳ染液、蔗糖B.紅色、蘇丹Ⅲ染液、蔗糖C.紫色、蘇丹Ⅲ染液、葡萄糖D.紅色、蘇丹Ⅲ染液、果糖【解析】選C。胰島素是蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng);脂肪可被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色;在水浴加熱的條件下,斐林試劑可與還原糖發(fā)生反應(yīng)生成磚紅色沉淀,而還原糖包括葡萄糖、麥芽糖、果糖等,蔗糖不是還原糖。5.(2019·江蘇高考)為探究玉米籽粒發(fā)芽過(guò)程中一些有機(jī)物含量的變化,研究小組利用下列供選材料用具進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。材料用具:玉米籽粒;斐林試劑,雙縮脲試劑,碘液,緩沖液,淀粉,淀粉酶等;研缽,水浴鍋,天平,試管,滴管,量筒,容量瓶,顯微鏡,玻片,酒精燈等。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)為了檢測(cè)玉米籽粒發(fā)芽過(guò)程中蛋白質(zhì)(肽類(lèi))含量變化,在不同發(fā)芽階段玉米提取液中,分別加入___________試劑,比較顏色變化。該實(shí)驗(yàn)需要選用的器具有_________(填序號(hào))。
①試管②滴管③量筒④酒精燈⑤顯微鏡(2)為了檢測(cè)玉米籽粒發(fā)芽過(guò)程中淀粉含量變化,將不同發(fā)芽階段的玉米籽粒縱切,滴加___________,進(jìn)行觀察。結(jié)果顯示,胚乳呈藍(lán)色塊狀,且隨著發(fā)芽時(shí)間的延長(zhǎng),藍(lán)色塊狀物變小。由此可得出的結(jié)論是____________________________________。
(3)為了驗(yàn)證上述藍(lán)色塊狀物變小是淀粉酶作用的結(jié)果,設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn):在1~4號(hào)試管中分別加入相應(yīng)的提取液和溶液(如圖所示),40℃溫浴30min后,分別加入斐林試劑并60℃水浴加熱,觀察試管內(nèi)顏色變化。請(qǐng)繼續(xù)以下分析:①設(shè)置試管1作為對(duì)照,其主要目的是________________________________。
②試管2中應(yīng)加入的X是___________的提取液。
③預(yù)測(cè)試管3中的顏色變化是___________。若試管4未出現(xiàn)預(yù)期結(jié)果(其他試管中結(jié)果符合預(yù)期),則最可能的原因是____________________。
【解析】(1)蛋白質(zhì)或多肽的檢測(cè)用雙縮脲試劑;需要用量筒量取一定體積的蛋白質(zhì)溶液和雙縮脲試劑A液(NaOH),雙縮脲試劑B液(CuSO4)需要用滴管滴加,用雙縮脲試劑檢測(cè)時(shí)不需要加熱,也不需要顯微鏡觀察,故選①②③。(2)從題中出現(xiàn)藍(lán)色塊狀物可知檢測(cè)淀粉應(yīng)該用碘液;胚乳呈現(xiàn)藍(lán)色塊狀,說(shuō)明胚乳含有大量的淀粉,而隨著時(shí)間的延長(zhǎng),藍(lán)色塊狀物變小了,說(shuō)明玉米發(fā)芽的過(guò)程中胚乳中的淀粉逐漸減少了。(3)①該實(shí)驗(yàn)的目的是驗(yàn)證題述藍(lán)色塊狀物變小是否是淀粉酶的作用,在淀粉酶的作用下淀粉水解產(chǎn)生了還原性糖,用斐林試劑檢測(cè)會(huì)出現(xiàn)磚紅色沉淀。1號(hào)試管加的是緩沖液和淀粉溶液,作為對(duì)照實(shí)驗(yàn),其可以排除用于實(shí)驗(yàn)的淀粉溶液中含有還原性糖。②根據(jù)單一變量原則,1號(hào)試管加的是緩沖液作為對(duì)照,3號(hào)、4號(hào)實(shí)驗(yàn)組分別加了發(fā)芽玉米提取液、淀粉酶溶液,則2號(hào)試管加的X溶液應(yīng)該是發(fā)芽前玉米提取液。③3號(hào)試管發(fā)芽玉米提取液中含有淀粉酶,催化淀粉水解能產(chǎn)生還原性糖,因此其顏色由藍(lán)色變成了磚紅色;若4號(hào)試管的顏色沒(méi)有從藍(lán)色變成磚紅色,可能是因?yàn)榈矸勖敢咽Щ睿荒艽呋矸鬯?。答案?1)雙縮脲①②③
(2)碘液玉米發(fā)芽過(guò)程中胚乳的淀粉逐漸減少(3)①排除用于實(shí)驗(yàn)的淀粉溶液中含有還原性糖②發(fā)芽前玉米③由藍(lán)色變成磚紅色淀粉酶已失活6.根據(jù)檢測(cè)生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn),回答下列問(wèn)題:(1)檢測(cè)花生子葉中脂肪的實(shí)驗(yàn)中,能將脂肪染成橘黃色的是_______染液,用其染色后,要用酒精溶液沖洗浮色,選用酒精的原因是_____________________________________________。
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