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文檔簡介
模塊三脂代謝及脂代謝紊亂檢驗心血管病是當(dāng)今世界上威脅人類最嚴(yán)重的疾病之一在工業(yè)化國家里,約40%的死亡由心血管病所引起,這也是導(dǎo)致癱瘓和早死的主要原因在我國,心血管病也正在成為威脅人民健康的頭號“殺手”心血管病在出現(xiàn)明顯臨床癥狀前的數(shù)十年中可以沒有顯著的表現(xiàn),而隨著動脈粥樣硬化的發(fā)展逐步表現(xiàn)出不穩(wěn)定型心絞痛、心肌梗死等一系列嚴(yán)重的癥狀。臨床一直希望找到一些檢測項目來預(yù)示心血管病發(fā)生的危險性血脂代謝異常是動脈粥樣硬化性心血管病的重要致病因素了解體內(nèi)血脂狀況的檢測項目因而成為臨床醫(yī)學(xué)檢驗中的重要檢測內(nèi)容臨床常用的血脂檢測項目總膽固醇甘油三酯脂蛋白HDL、LDL、VLDL、Lp(a)
載脂蛋白ApoA、ApoB、ApoC、ApoE以及它們的一些亞類等實訓(xùn)總膽固醇(TC)檢測試劑盒(酶法)【操作步驟】:加入物空白(B)標(biāo)準(zhǔn)(S)標(biāo)本(U)工作液(ml)2.72.72.7蒸餾水(μl)60--校準(zhǔn)液(μl)-60-待測標(biāo)本(μl)--60混勻,37℃孵育10分鐘,于波長540nm處讀取各管的吸光度△A值?!窘Y(jié)果計算】:
樣品中TC濃度(mmol/L)=△AU/△AS×CS(mmol/L)問題一、什么是總膽固醇(TC)總膽固醇=膽固醇+膽固醇酯
膽固醇是雙親性分子,其極性的羥基與非極性的脂肪酸鏈間有固醇環(huán)相連;3
膽固醇酯是親脂性(既疏水性)分子問題二、酶法的測定原理?CEH-COD-PAP法——最普遍膽固醇酯+H2O膽固醇+游離脂肪酸CEH(膽固醇酯酶)膽固醇+O2△4-膽甾烯酮+H2O2COD(膽固醇氧化酶)H2O2+4-氨基安基比林+酚醌亞胺染料+2H2OPOD(過氧化物酶)Trinder反應(yīng)測定原理酶測定法特點:
常規(guī)測定中現(xiàn)已廣泛應(yīng)用酶法,酶法具有特異性好,精密度和靈敏度都能很好地滿足臨床實驗室的要求,既可以手工操作,也適合自動分析,但酶法測定中出現(xiàn)了不同程度的基質(zhì)效應(yīng)。
采用酶反應(yīng)原理的干化學(xué)法頗為實用,其缺點是價格高,精密度差。膽固醇的酶測定法始于70年代。由于操作簡便,試劑無腐蝕性,特別適用于自動生化分析,目前已成為測定膽固醇的主要方法。
膽固醇酶測定法的試劑中,除了上述三種酶、酚和4-氨基安替比林外,還有維持pH恒定的緩沖液、膽酸鈉、表面活性劑以及穩(wěn)定劑等。膽酸鈉是為了提高膽固醇酯酶的活性表面活性劑的作用是促進(jìn)膽固醇從脂蛋白中釋放出來評價:主要缺點是:優(yōu)點:本法靈敏度高、準(zhǔn)確度高、精密度好,線性范圍寬。①某些膽固醇酯酶對膽固醇酯的水解不完全,不能用純膽固醇結(jié)晶以有機溶劑配制的溶液作為TC分析的校準(zhǔn)液,而應(yīng)以準(zhǔn)確定值的血清作為標(biāo)準(zhǔn),此校準(zhǔn)液(品)相當(dāng)于三級標(biāo)準(zhǔn)。②表面活性劑,如吐溫-40可以干擾膽固醇酯酶的作用,而聚乙烯醇6000可使結(jié)果提高1%~2%;③本法具有氧化酶反應(yīng)途徑的共同缺陷,易受到一些還原性物質(zhì)如尿酸、膽紅素、維生素C和谷胱甘肽等的干擾?!緟⒖贾怠繂栴}三、TC測定的臨床意義?
血清總膽固醇合適范圍:≤5.20mmol/L(200mg/dl),邊緣升高:5.23~5.69mmol/L(201~219mg/dl),升高:≥5.72mmol/L(220mg/dl)。影響TC水平的因素①年齡與性別;②長期的高膽固醇、高飽和脂肪酸和高熱量飲食可使TC增高;③遺傳因素;④其它:如缺少運動、腦力勞動、精神緊張等可能使TC升高。TC除了作為高膽固醇血癥的診斷指標(biāo)之外,不能作為其它任何疾病的診斷指標(biāo),對于動
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