醫(yī)學(xué)資料 艾滋病實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)

艾滋病實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)規(guī)范性文件《醫(yī)務(wù)人員艾滋病病毒職業(yè)暴露防護(hù)工作指導(dǎo)原則（試行）》中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部，2004年5月31日頒布，2004年6月1日起實(shí)施?！秾?shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》GB19489-2008，2009年7月1日起實(shí)施?！段⑸锖蜕镝t(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則（WS233-2002）》中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，2002-12-03發(fā)布，2003-08-01實(shí)施。GuidelinesfortheSafeTransportofInfectiousSubstancesandDiagnosticSpecimens.WHO1997.《消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）》中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部2002-11-15發(fā)布，2003-04-01起實(shí)施。HIV的生物危害人類免疫缺陷病毒（HIV）屬第二類病原微生物，是高致病性病原微生物。我國(guó)將病原微生物分為四類，第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。HIV相關(guān)檢測(cè)的生物安全級(jí)別HIV抗體檢測(cè)（包括篩查和確證實(shí)驗(yàn)）、抗原檢測(cè)和相關(guān)的免疫學(xué)檢測(cè)應(yīng)在符合Ⅱ級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）要求的艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。HIV分離培養(yǎng)、濃縮、中和試驗(yàn)、細(xì)胞培養(yǎng)及研究工作及其它需要應(yīng)用活病毒的研究工作，應(yīng)在Ⅲ級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-3）中進(jìn)行。HIV核酸提取和檢測(cè)均應(yīng)在符合Ⅱ級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）要求的艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。HIV病毒株應(yīng)保存在符合Ⅲ級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-3）要求的艾滋病實(shí)驗(yàn)室；HIV陽(yáng)性樣品，包括全血、血清、血槳和其他組織（液）、核酸提取物應(yīng)保存在符合BSL-2要求的艾滋病實(shí)驗(yàn)室。生物安全保證措施建立安全制度培訓(xùn)和管理個(gè)人保健和防護(hù)安全操作使用利器注意事項(xiàng)安全制度實(shí)驗(yàn)室主任是實(shí)驗(yàn)室安全的第一責(zé)任人，對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作和環(huán)境的安全負(fù)責(zé)，負(fù)責(zé)制定全面的實(shí)驗(yàn)室安全管理制度并監(jiān)督落實(shí)。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立下列安全制度：實(shí)驗(yàn)室的安全工作制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序（S-SOP）；意外事故處理預(yù)案，內(nèi)容包括應(yīng)急處理、登記和報(bào)告、調(diào)查和處理；信息安全及保密制度：與HIV/AIDS檢測(cè)相關(guān)的所有資料均應(yīng)嚴(yán)格保密，包括送檢單、檢測(cè)記錄、樣品登記、報(bào)告單及工作人員年度檢測(cè)結(jié)果等，不得對(duì)無(wú)關(guān)人員透露檢測(cè)結(jié)果。培訓(xùn)和管理進(jìn)行全員安全培訓(xùn)并強(qiáng)化“普遍性防護(hù)原則”安全意識(shí)，所有的血液、未固定的組織和組織液樣品，均應(yīng)視為有潛在的傳染性，都應(yīng)以安全的方式進(jìn)行操作。安全培訓(xùn)，包括上崗前培訓(xùn)和復(fù)訓(xùn)，并接受管理人員的監(jiān)督。新上崗人員必須接受安全教育和培訓(xùn)，使他們清楚實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險(xiǎn)，通過(guò)考核等方式確認(rèn)他們具備安全操作的能力后方可單獨(dú)工作。必須對(duì)新調(diào)入人員、外來(lái)合作、進(jìn)修和學(xué)習(xí)的人員進(jìn)行生物安全培訓(xùn)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主任批準(zhǔn)后，方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。生物安全培訓(xùn)和監(jiān)督應(yīng)有客觀詳實(shí)的記錄。個(gè)人保健和防護(hù)遇有手部皮膚有開(kāi)放性傷口及其他不適于工作的情況，應(yīng)暫停工作。皮膚的微小傷口、擦傷、皸裂等，應(yīng)用防水敷料嚴(yán)密覆蓋。應(yīng)提供充足的防護(hù)服、一次性乳膠手套、口罩、帽子和覆蓋足背的工作鞋。清潔的防護(hù)服和其他個(gè)人防護(hù)用品置于實(shí)驗(yàn)室清潔區(qū)內(nèi)存放。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置應(yīng)急沖洗眼睛裝置。工作人員上崗前必須進(jìn)行HIV、HBV、HCV等抗體檢測(cè)，接種乙肝疫苗。每年對(duì)工作人員采血檢測(cè)HIV抗體，血清應(yīng)長(zhǎng)期保留。進(jìn)實(shí)驗(yàn)室工作前要摘除首飾，修剪長(zhǎng)的帶刺的指甲，以免刺破手套。嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)食、飲水、吸煙和化妝。個(gè)人保健和防護(hù)實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)穿合適的防護(hù)服、戴手套和口罩、穿實(shí)驗(yàn)室專用的工作鞋。如接觸物的傳染性大、應(yīng)戴雙層手套；含有HIV的液體（樣品或病毒培養(yǎng)液）有可能噴濺時(shí)，應(yīng)戴防護(hù)眼鏡、穿防水（如塑料）圍裙。工作完畢，先脫去手套，再脫去防護(hù)服，用肥皂和流動(dòng)水洗手。穿過(guò)的污染的防護(hù)服應(yīng)及時(shí)放入污物袋中，消毒后方可洗滌或廢棄。操作過(guò)程中，如發(fā)現(xiàn)防護(hù)服被污染應(yīng)立即更換，如手套破損，應(yīng)立即丟棄、洗手并換上新手套。不能用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。不要將手套清洗或消毒后再次使用。禁止使用口腔吸液管，必須使用移液器來(lái)操作實(shí)驗(yàn)的所有液體。安全操作試劑及樣品的管理設(shè)立專門儲(chǔ)存陽(yáng)性血清、質(zhì)控品的血清庫(kù)和/或毒種庫(kù)，上鎖并專人管理。對(duì)存放試劑和有毒有害物質(zhì)的區(qū)域應(yīng)進(jìn)行監(jiān)控，冷藏柜、冰箱、培養(yǎng)箱和存放生物試劑、化學(xué)危險(xiǎn)品、放射性物質(zhì)的容器，置于工作人員視線之外的地點(diǎn)時(shí)應(yīng)上鎖。實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒工作完畢應(yīng)對(duì)工作臺(tái)面消毒，推薦用0.1～0.2%的次氯酸溶液消毒；用消毒液清洗后要干燥20min以上；操作過(guò)程中如有樣品、檢測(cè)試劑外濺，應(yīng)及時(shí)消毒。如有大量高濃度的傳染性液體濺出，在清潔之前應(yīng)先用1%的次氯酸鈉溶液浸泡，然后戴上手套擦凈。安全操作樣品的采集和處理采集血液樣本時(shí)要注意安全，應(yīng)使用一次性注射器，戴手套，謹(jǐn)慎操作，防止血液污染雙手。應(yīng)小心防止被針頭和其它利器刺傷。離心樣品時(shí)要使用密閉的罐和密封頭，防止離心時(shí)液體溢出或在超/高速離心時(shí)形成氣溶膠。安全操作樣本的帶入、帶出和操作不得將非實(shí)驗(yàn)室物品帶入實(shí)驗(yàn)室。收樣人員應(yīng)接受過(guò)處理感染源方面的訓(xùn)練并穿戴合適的防護(hù)服；實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有處理感染源的設(shè)備并準(zhǔn)備好可消毒的容器。打開(kāi)樣品容器時(shí)要小心，防止內(nèi)容物潑濺。核對(duì)樣品與送檢單，檢查樣品管有無(wú)破損和溢漏。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出，對(duì)樣品管和盛器進(jìn)行消毒，同時(shí)要按照程序報(bào)告有關(guān)負(fù)責(zé)人。要檢查樣品的狀況，記錄有無(wú)嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過(guò)多以及黃疸等情況。如樣本不能接收，應(yīng)用安全方式廢棄，并通知送樣人。安全操作樣本的帶入、帶出和操作常規(guī)處理血液、體液樣品可在工作臺(tái)上進(jìn)行，如樣品有可能濺出，則應(yīng)戴手套、口罩和防護(hù)眼鏡，在生物安全柜中操作。樣品轉(zhuǎn)送其他實(shí)驗(yàn)室時(shí)，應(yīng)防止對(duì)工作人員、患者或環(huán)境造成污染。被污染或可能污染的材料在帶出實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)進(jìn)行消毒。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。用于國(guó)際空運(yùn)的樣品要按照國(guó)際空運(yùn)協(xié)會(huì)（IATA）的規(guī)則進(jìn)行包裝和標(biāo)記，并提交相應(yīng)的資料。使用利器注意事項(xiàng)應(yīng)盡量避免在實(shí)驗(yàn)室使用針頭、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺傷。如果必須使用，在處理或清洗時(shí)應(yīng)采取措施防止刺傷或劃傷，并應(yīng)對(duì)用過(guò)的物品進(jìn)行消毒。應(yīng)使用安全針具采血，如蝶形真空針，自毀性針具等，以降低直接接觸血液和刺傷的危險(xiǎn)性。應(yīng)將用過(guò)的銳器直接放入耐穿、防滲漏的利器盒，用過(guò)的針頭應(yīng)直接放入堅(jiān)固的容器內(nèi)，消毒后廢棄。禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。禁止用手直接接觸使用過(guò)的針頭、刀片等利器。污染物處理應(yīng)按照《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489-2004）和《消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）》處置實(shí)驗(yàn)室廢棄物。艾滋病實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室，經(jīng)高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法物理消毒方法高壓蒸汽消毒，121℃，保持15～20min;干燥空氣烘箱消毒（干烤消毒），140℃，保持2～3h。化學(xué)消毒方法含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯2000～5000mg/L）75%乙醇2%戊二醛艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室物品常用的消毒方法廢棄物缸：5000mg/L次氯酸鈉。生物安全柜工作臺(tái)面和儀器表面：75%乙醇。溢出物：5000mg/L次氯酸鈉。污染的臺(tái)面和器具：2000mg/L次氯酸鈉，也可以用過(guò)氧化氫或過(guò)氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒。意外事故處理皮膚、粘膜污染：按職業(yè)暴露處理原則進(jìn)行。衣物污染：盡快脫掉污染的衣物，進(jìn)行消毒處理。污染物潑濺：小范圍污染物潑濺，應(yīng)立即進(jìn)行消毒處理和清洗。發(fā)生大范圍污染物潑濺事故時(shí)，應(yīng)立即通知實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負(fù)責(zé)人到達(dá)事故現(xiàn)場(chǎng)，查清情況，確定消毒的程序。發(fā)生空氣污染時(shí)：可采用低溫蒸汽甲醛氣體對(duì)空氣進(jìn)行消毒，但甲醛有致癌作用，不宜用于生物安全柜和實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)空氣消毒。意外事故處理如果發(fā)生重大潑濺事故，應(yīng)采取以下措施進(jìn)行：從污染處疏散人員，但要防止污染擴(kuò)散；控制污染擴(kuò)散，鎖門并禁止人員進(jìn)入；通知實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)、安全負(fù)責(zé)人等，查清情況，確定消毒處理的程序；必要時(shí)可進(jìn)行生物安全柜和/或?qū)嶒?yàn)室的低溫蒸汽甲醛氣體消毒，此時(shí)生物安全柜和/或?qū)嶒?yàn)室必須密閉，人員必須離開(kāi)。溢漏處可用經(jīng)消毒劑浸泡的吸水物質(zhì)覆蓋；消毒劑作用10－15分鐘后，移走吸水性物質(zhì)，用消毒劑沖洗，用水清洗。意外及事故的登記、報(bào)告和檢測(cè)對(duì)重大意外和事故必須進(jìn)行登記，職業(yè)暴露應(yīng)填寫“艾滋病職業(yè)暴露人員個(gè)案登記表”。內(nèi)容包括：意外和事故發(fā)生的時(shí)間、地點(diǎn)及詳細(xì)經(jīng)過(guò)；如發(fā)生職業(yè)暴露還包括暴露方式；