血液中11種毒品及代謝物的液相色譜-質(zhì)譜檢驗方法

1血液中11種毒品及代謝物的液相色譜-質(zhì)譜檢驗方法本文件描述了血液中0-單乙酰嗎啡、嗎啡、甲基苯丙胺、苯丙胺、3,4-亞甲二氧基甲基苯丙胺(MDMA)、3,4-亞甲二氧基苯丙胺(MDA)、可卡因、苯甲酰愛康寧、氯胺酮、甲卡西酮和△°-四氫大麻酚的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢驗方法，包括原理，試劑、儀器和設備，定性分析，定量分析以及分析結果評價。本文件適用于血液中0-單乙酰嗎啡、嗎啡、甲基苯丙胺、苯丙胺、MDMA、MDA、可卡因、苯甲酰愛康寧、氯胺酮、甲卡西酮和A-四氫大麻酚的定性分析和定量分析。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GA/T122毒物分析名詞術語3術語和定義GA/T122界定的術語和定義適用于本文件。血液樣品經(jīng)乙腈沉淀蛋白或乙醚液液提取后，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀進行檢測，經(jīng)與平行操作的空白樣品和添加樣品作對照，以保留時間、質(zhì)譜特征離子對峰和離子對豐度比進行定性分析：以定量離子對峰面積或峰面積比值為依據(jù)，采用外標法或內(nèi)標法進行定量分析5試劑、儀器和設備試驗用水應為符合GB/T6682規(guī)定的一級水。所用試劑及要求如下。a)甲醇：色譜純。b)乙腈：色譜純。c)甲酸：含量≥98%,色譜純。d)乙酸銨：色譜純。e)標準物質(zhì)溶液：1)標準物質(zhì)儲備溶液：根據(jù)嗎啡、甲基苯丙胺、苯丙胺、MDMA、MDA、苯甲酰愛康寧、氯胺酮、甲卡西酮和△-四氫大麻酚標準物質(zhì)的純度和鹽型換算后，分別精密稱取適量，用甲醇配制成質(zhì)量濃度為1.0mg/L的標準物質(zhì)儲備溶液：根據(jù)0-單乙酰嗎啡和可卡因標準物質(zhì)的純度和鹽型換算后，分別精密稱取適量，用乙腈配制成質(zhì)量濃度為1.0mg/mL的標準物質(zhì)儲備溶液。密封，置于冰箱中冷凍保存，有效期12個月.或采用市售標準溶液：2)標準物質(zhì)工作溶液：試驗中所用其他濃度的標準物質(zhì)工作溶液均由符合5.1e)1)的標準物質(zhì)儲備溶液用甲醇逐級稀釋得到。密封，置于冰箱中冷藏保存，有效期3個月。f)內(nèi)標溶液：1)內(nèi)標儲備溶液：根據(jù)嗎啡-d、甲基苯丙胺-d、苯丙胺-d、MDNA-d、MDA-d、苯甲酰愛康寧-d、氯胺酮-d、△°-四氫大麻酚-d、甲氧那明(或其他合適內(nèi)標物)標準物質(zhì)的純度和鹽型換算后，分別精密稱取適量，用甲醇配制成質(zhì)量濃度為0.1mg/mL的內(nèi)標儲備溶液：根據(jù)o-單乙酰嗎啡-d、可卡因-d.和甲卡西酮-d標準物質(zhì)的純度和鹽型換算后，分別精表1流動相梯度洗脫程序06.2.1.2質(zhì)譜條件6.2.1.2.1以下為參考條件，可根據(jù)不同品牌儀器等實際情況進行調(diào)整。a)離子源：電噴霧電離-正離子模式(ESI+)。b)檢測方式：多反應監(jiān)測(MRM)。d)碰撞氣、氣簾氣、霧化氣、輔助氣均為高純氮氣，使用前調(diào)節(jié)各氣流流量以使質(zhì)譜靈敏度達到檢測要求。e)去簇電壓、碰撞能量應優(yōu)化至最佳靈敏度。6.2.1.2.2在符合6.2.1.1和6.2.1.2的液相色譜條件和質(zhì)譜條件下，目標物和內(nèi)標物的質(zhì)譜參數(shù)和保留時間參見表2。表2目標物和內(nèi)標物的質(zhì)譜參數(shù)和保留時間目標物zY甲卡西酮苯丙胺-d(內(nèi)標物)甲基苯丙胺-d:(內(nèi)標物)4目標物去簇電壓V碰撞能量VDMA-d(內(nèi)標物)氧胺酮-d(內(nèi)標物)嗎啡-d(內(nèi)標物)0-單乙酰嗎啡-d(內(nèi)標物)可卡因-d(內(nèi)標物)苯甲酰愛康寧-d(內(nèi)標物)甲卡西酮-d(內(nèi)標物)甲氧那明(內(nèi)標物)分別吸取空白樣品提取液、檢材樣品提取液和添加樣品提取液。按6.2.1的條件進樣分析。記錄空白樣品、檢材樣品和添加樣品中目標物可疑色譜峰的保留時間、質(zhì)譜特征離子對和離子對豐度比。6.4定性判斷依據(jù)以保留時間、質(zhì)譜特征離子對峰和離子對豐度比作為定性判斷依據(jù)。若檢材樣品中出現(xiàn)目標物的兩對定性離子對的色譜峰，保留時間與添加樣品中相應目標物的色譜峰保留時間比較，相對誤差在±2.5%內(nèi)，且定性離子對豐度比與添加樣品的離子對豐度比之相對誤差不超過表3規(guī)定的范圍，則可判定檢材樣品中檢出該種目標物。表3高子對豐度比的最大允許相對誤差7定量分析7.1樣品前處理取檢材樣品血液100山(或1mL)兩份，按6.1.1.1(或6.1.1.2)的方法操作。另取空白血液若干份，添加標準物質(zhì)工作溶液適量，制得系列質(zhì)量濃度或單點質(zhì)量濃度的添加樣品，與檢材樣品平行操作。目標物的相關信息及方法線性范圍、檢出限與定量限見附錄A。定量限應符合表檢材樣品中目標物的質(zhì)量濃度應在工作曲線的線性范圍內(nèi)。配制單點質(zhì)量濃度的添加樣品時，檢材樣品中目標物質(zhì)量濃度應在添加樣品目標物質(zhì)量濃度的(100±50)%范圍內(nèi)。7.2儀器分析5記錄檢材樣品、系列質(zhì)量濃度的添加樣品或單點質(zhì)量濃度的添加樣品中目標物及內(nèi)標物(內(nèi)標法)定量離子對的峰面積值，然后計算檢材樣品中目標物的質(zhì)量濃度。在系列質(zhì)量濃度的添加樣品中，以目標物定量離子對的峰面積值(D為縱坐標、目標物質(zhì)量濃度(0為橫坐標進行線性回歸，得線性方程。根據(jù)檢材樣品中目標物的峰面積值，按式(1)計算檢材樣品中目標物的質(zhì)量濃度。C檢材樣品中目標物的質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升(ng/mL);a—線性方程的截距：b—線性方程的斜率。根據(jù)檢材樣品和添加樣品中目標物的峰面積值，按式(2)計算檢材樣品中目標物的質(zhì)量濃度。式中： C——檢材樣品中目標物的質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升(ng/mL);A——檢材樣品中目標物的峰面積值；c——添加樣品中目標物的質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升(ng/mL)。在系列質(zhì)量濃度的添加樣品中，以目標物與內(nèi)標物定量離子對的峰面積比值(D為縱坐標、目標物質(zhì)量濃度(0為橫坐標進行線性回歸，得線性方程。根據(jù)檢材樣品中目標物及內(nèi)標物定量離子對的峰面積比值，按式(3)計算檢材樣品中目標物的質(zhì)量濃度。 …c——檢材樣品中目標物的質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升(ng/mL):——檢材樣品中目標物與內(nèi)標物的峰面積比值：b線性方程的斜率。6根據(jù)檢材樣品和添加樣品中目標物與內(nèi)標物定量離子對的峰面積比值，按式(4)計算檢材樣品中……C——檢材樣品中目標物的質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升(ng/mL);A——檢材樣品中目標物與內(nèi)標物的峰面積比值；A'——添加樣品中目標物與內(nèi)標物的峰面積比值：檢材樣品平行測定兩份，相對相差按式(5)計算。G、C—兩份檢材樣品中目標物的質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升(ng/mL);c兩份檢材樣品中目標物質(zhì)量濃度的平均值(Ca)若檢材樣品中僅檢出內(nèi)標物，未檢出目標物，且添加樣品中檢出目標物，則陰性結果可靠：b)若檢材樣品中未檢出內(nèi)標物，或添加樣品中未檢出目標物，則陰性結果不可靠，應按第6章的規(guī)定重新檢驗。8.1.2陽性結果評價a)若檢材樣品中檢出目標物，且空白樣品無干擾，則陽性結果可靠：b)若檢材樣品中檢出目標物，空白樣品亦呈陽性，則陽性結果不可靠，應按第6章的規(guī)定重新檢兩份檢材樣品中目標物質(zhì)量濃度的相對相差不