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文檔簡介

生化檢測中的影響因素一、檢測前因素二、檢測中因素三、檢測后因素

檢測前的影響因素

一、

標(biāo)本的因素1.生理因素對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響影響檢驗(yàn)結(jié)果的生理因素可分為可控因素和不可控因素兩種類型。主要有年齡、性別、運(yùn)動、情緒、體位改變、生活方式、妊娠、季節(jié)變化、海拔高度、生理性波動等.2.飲食對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響4.標(biāo)本采集對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響5.標(biāo)本處理、儲存對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響標(biāo)本的離心速度、時間,離心前放置的時間、以及標(biāo)本貯存的溫度、時間等都會對生化檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。6.2脂血對生化檢測的干擾:血液脂濁可散射光線,所以對吸光度一般產(chǎn)生正向干擾,導(dǎo)致某些項(xiàng)目如ALB、UA、總蛋白(TP)[23]等測定結(jié)果。而在pH10以上的環(huán)境中,乳糜中的TG會皂化可使血清逐漸變清,使許多比色法測定如Ca2+、Cr、ALP、TP等結(jié)果產(chǎn)生負(fù)誤差。6.3黃疸膽紅素對反應(yīng)結(jié)果產(chǎn)生黃色化合物的比色分析影響很大,一般可以用樣本空白或兩點(diǎn)比色法、連續(xù)監(jiān)測法來消除膽紅素對黃色結(jié)果的影響,但由于膽紅素不穩(wěn)定,隨著膽紅素被氧化為膽綠素、膽褐素而變色,此時如果使用兩點(diǎn)法、連續(xù)監(jiān)測法同樣也不能排除膽紅素對結(jié)果的干擾。此外膽紅素作為一種還原劑對氧化反應(yīng)有干擾,如氧化酶法測定GLU、TG、UA、膽固醇等,因?yàn)槟懠t素可以與上述過程中H2O2分解產(chǎn)生的新生態(tài)氧發(fā)生反應(yīng),從而使新生態(tài)氧與氧化酶法反應(yīng)中的色源物質(zhì)結(jié)合減少,導(dǎo)致結(jié)果偏低。此時也可用雙波長法或設(shè)計樣本空白消除干擾,亦或當(dāng)外觀檢查發(fā)現(xiàn)是黃疸血清時可先除蛋白,然后加膽紅素氧化酶預(yù)先將膽紅素氧化成較穩(wěn)定的氧化產(chǎn)物膽褐素,可大大減低甚至消除膽紅素的干擾。

返回二、環(huán)境的因素包括生化分析儀的用水、電源以及環(huán)境的溫濕度等方面對生化檢測的結(jié)果都會產(chǎn)生影響。

分析中因素確立測定系統(tǒng)的概念測定系統(tǒng)包括測定原理、試劑、儀器、校準(zhǔn)品四要素。對于一個臨床檢測項(xiàng)目,如果所用方法的測定原理、試劑、儀器、校準(zhǔn)品中任何一個不同,都可能得到不同的測定結(jié)果。如果我們想要得到準(zhǔn)確可靠的測定結(jié)果,而該結(jié)果又具有與國際、國內(nèi)其他實(shí)驗(yàn)室的可比性,應(yīng)該自己建立一個標(biāo)準(zhǔn)測定系統(tǒng)。用已糖激酶(HK)法則定葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液時,葡萄糖的消耗與NADH的生成是等摩爾關(guān)系,校準(zhǔn)生化分析儀340nm處NAD(P)H的摩爾吸光系數(shù)??捎肁LP測定試劑的緩沖液作為測定試劑,對硝基苯酚標(biāo)準(zhǔn)液作為血清標(biāo)本,實(shí)際測定405nm的吸光度值,根據(jù)對硝基苯酚的濃度可計算ε值。檢測方法的選擇不同的檢測方法對檢測結(jié)果的影響是不言而預(yù)的,我們應(yīng)優(yōu)先選擇國際、國內(nèi),行業(yè)內(nèi)權(quán)威機(jī)構(gòu)推薦的方法,沒有推薦常規(guī)方法的,應(yīng)該選擇公認(rèn)的測定方法。試劑的影響生化試劑盒有許多生產(chǎn)廠家,不同廠家產(chǎn)品的質(zhì)量、技術(shù)含量等常有區(qū)別,有時即使同一廠家不同批號的同種試劑因原料來源、純度不同以及生產(chǎn)條件變動,會產(chǎn)生批間變異。同一批號的同種試劑盒在儲存、運(yùn)輸時的情況有所不同,性能也可能發(fā)生變化。同項(xiàng)目試劑盒之間作比較,如果穩(wěn)定性好、線性范圍寬、正向型試劑空白吸光度低、反向型試劑空白吸光度高、試劑空白速率低、瓶間差小者可視為優(yōu)質(zhì)試劑。

校準(zhǔn)品(Calibrationmaterials)含有已知量的欲測物,用以校準(zhǔn)該測定方法的數(shù)值,它與該方法及試劑、儀器是相關(guān)聯(lián)的。校準(zhǔn)品的作用是為了減少或消除儀器、試劑等造成的系統(tǒng)誤差。

在全自動生化分析儀上使用配套的試劑和標(biāo)準(zhǔn)品,各儀器廠家均有自己的標(biāo)準(zhǔn)測定系統(tǒng),對于校準(zhǔn)品不能亂用。關(guān)于酶活性測定校準(zhǔn)問題常用K值有以下幾種:a)理論K值:根據(jù)理論摩爾消光系數(shù)(ε)來計算,如NADH為6.22×103

b)實(shí)測K值:由于儀器波長的精密及半寬度不同,而應(yīng)根據(jù)實(shí)測ε值來設(shè)定K值c)廠家給的K值:廠家生產(chǎn)試劑盒說明書上提供的K值(有的廠家提供6.3×103)d)校準(zhǔn)K值:通過校準(zhǔn)物直接校準(zhǔn)得到的K值。

從上述K值中不難發(fā)現(xiàn)實(shí)測K值大于理論K值,這說明生化分析儀的測光系統(tǒng)還存在著一定誤差,如波長、半寬度及光徑等偏差,使儀器達(dá)不到理論上的最佳狀態(tài);校準(zhǔn)K值與實(shí)測K值之間也存在一定的差距,即使指示物和儀器相同,其差異可能由試劑及校準(zhǔn)品造成的;校準(zhǔn)K值應(yīng)有其溯源性。試劑間的相互干擾全自動生化分析儀的吸樣針、試劑針、攪拌捧及比色杯是常見交叉污染的原因,稱互為干擾的項(xiàng)目為交叉污染對。①測定試劑中含有下一測試所要測定的底物,直接干擾下一檢測的測定結(jié)果;②試劑中含有的某種試劑成分與下一反應(yīng)所要測定的底物有作用,因而干擾下一反應(yīng)的測定結(jié)果。;③該試劑中所引導(dǎo)的反應(yīng)對下一個項(xiàng)目的反應(yīng)進(jìn)程帶來間接的干擾,下一項(xiàng)目所測定的是前后兩個項(xiàng)目反應(yīng)的綜合作用結(jié)果。分析后階段

目前大多數(shù)檢驗(yàn)科室都實(shí)行了計算機(jī)網(wǎng)絡(luò)管理技術(shù),病人資料、檢驗(yàn)數(shù)據(jù)網(wǎng)上共享,各實(shí)驗(yàn)室當(dāng)天的測試結(jié)果通過聯(lián)機(jī)即時傳達(dá)電腦網(wǎng)絡(luò),這種模式提高了工作效率,也避免了以往由人為抄錄結(jié)果時發(fā)生的誤差。由于標(biāo)本量大,影響因素多而復(fù)雜,加上審核人員的經(jīng)驗(yàn)等原因的影響.生化檢驗(yàn)的幾種異常結(jié)果的分析1.體檢標(biāo)本中的Glu結(jié)果普遍偏低;2.體檢標(biāo)本中部分TG,T-CH結(jié)果偏低;3.CK-MB大于CK;4.Mg、TBA、K等項(xiàng)目的結(jié)果在與其它一些項(xiàng)目在一起檢測的結(jié)果與單獨(dú)檢測的結(jié)果差距較大;5.黃疸標(biāo)本中的UA、Cr、Glu等結(jié)果偏低;6.溶血標(biāo)本中的K、LDH、AST、DBIL、CRP等結(jié)果偏高;7.ALT檢測中原倍結(jié)果遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于標(biāo)本稀釋的檢測結(jié)果;血清ALT測定,血清中的內(nèi)源性丙酮酸及其它酮酸也可與試劑中的指示酶(乳酸脫氫酶)起反應(yīng),使結(jié)果偏高。若先加入缺乏α-酮戊二酸的第一試劑,使其它酮酸與指示酶反應(yīng)之后再加入含有α-酮戊二酸的第二試劑,啟動真正的ALT酶促反應(yīng)生成丙酮酸,而丙酮酸與乳酸脫氫酶的反應(yīng)消耗的NAD+能真正反映ALT的活性,從而消除以上副反應(yīng)的影響。8.部分項(xiàng)目原倍的檢測結(jié)果正常,稀釋后的結(jié)果顯著升高;9.部分免疫比濁法項(xiàng)目的檢測結(jié)果小于"0"

應(yīng)對措施1.完善制度,認(rèn)真實(shí)施完善的規(guī)章制度,規(guī)范的文件體系是全面質(zhì)量管理體系必須具備的要素,根據(jù)實(shí)際情況,制定各級管理制度,如:標(biāo)本查對制度,儀器校準(zhǔn)、保養(yǎng)管理制度,試劑管理制度,各種實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)操作(SOP文件),新項(xiàng)目新方法的評價,質(zhì)量控制操作程序,實(shí)驗(yàn)操作考核制度,差錯登記、安全管理制度等等。各種制度緊密結(jié)合,始終貫穿檢驗(yàn)分析前、分析中、分析后的全過程。2.加強(qiáng)與客戶的溝通檢驗(yàn)科與臨床配合的好壞直接影響診療的質(zhì)量,兩者結(jié)合是提高臨床診治水平的重要環(huán)節(jié)。因分析前質(zhì)量控制大部分是由臨床完成的,這就要求檢驗(yàn)科需加強(qiáng)與臨床聯(lián)系,對標(biāo)本正確采集及影響測定的各種因素進(jìn)行告知和培訓(xùn),為臨床正確分析結(jié)果提供參考意見,促進(jìn)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)和諧發(fā)展。

4.3做好臨床常規(guī)生化的室內(nèi)質(zhì)量控制每日工作前,執(zhí)行嚴(yán)格的校準(zhǔn)程序,先測定質(zhì)控血清以監(jiān)測儀器的工作狀態(tài)及試劑的質(zhì)量,一旦發(fā)現(xiàn)失控,及時分析原因,采取措施,改善后方可進(jìn)行當(dāng)天標(biāo)本的檢測。在每批標(biāo)本測定的同時,隨機(jī)測定質(zhì)控血清,以監(jiān)控儀器測定的漂移。為保證檢驗(yàn)質(zhì)量,使用的質(zhì)控血清統(tǒng)一向臨床檢驗(yàn)中心購買。使用質(zhì)控品時,實(shí)驗(yàn)室要重復(fù)檢測以決定每批質(zhì)控品在本室的統(tǒng)計學(xué)參數(shù)。在報告檢驗(yàn)結(jié)果前,質(zhì)控品結(jié)果必須達(dá)到實(shí)驗(yàn)室設(shè)定的可接受標(biāo)準(zhǔn)。

4.6提高檢驗(yàn)人員自身素質(zhì)

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