小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性演化與田間監(jiān)測(cè)策略研究_第1頁
小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性演化與田間監(jiān)測(cè)策略研究_第2頁
小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性演化與田間監(jiān)測(cè)策略研究_第3頁
小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性演化與田間監(jiān)測(cè)策略研究_第4頁
小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性演化與田間監(jiān)測(cè)策略研究_第5頁
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小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性演化與田間監(jiān)測(cè)策略研究一、引言1.1研究背景與意義小菜蛾(PlutellaxylostellaLinnaeus)屬鱗翅目菜蛾科,是一種世界性遷飛害蟲,也是十字花科蔬菜的主要害蟲之一。其分布范圍廣泛,在我國(guó)自20世紀(jì)70年代起就成為十字花科蔬菜的主要害蟲,在南方省份如廣東、海南、福建、云南、湖北等地嚴(yán)重發(fā)生,近年來隨著北方種植業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整和保護(hù)地蔬菜的發(fā)展,其危害在北方也呈明顯上升趨勢(shì)。小菜蛾對(duì)十字花科蔬菜的危害嚴(yán)重。其主要以幼蟲取食葉片為主,初齡幼蟲僅取食葉肉,留下表皮,在菜葉上形成眾多透明小斑,俗稱“開天窗”;3齡以上幼蟲將菜葉食成孔洞和缺刻,嚴(yán)重時(shí)葉片成網(wǎng)狀。在蔬菜苗期,小菜蛾常集中為害心葉,影響甘藍(lán)、白菜等的包心;在留種株上,主要為害嫩莖、幼莢和籽粒。小菜蛾的危害導(dǎo)致蔬菜產(chǎn)量降低、品質(zhì)下降,給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失,據(jù)報(bào)道,小菜蛾每年造成全球經(jīng)濟(jì)損失高達(dá)40-50億美元。長(zhǎng)期以來,化學(xué)防治一直是小菜蛾幼蟲防治的主要手段。然而,由于菜園使用農(nóng)藥次數(shù)多、用量大、用藥品種單一,小菜蛾已對(duì)50多種殺蟲劑產(chǎn)生了不同程度的抗藥性,幾乎涉及到所有的防治用藥,其中對(duì)某些菊酯類藥劑的抗性水平超過萬倍,成為世界上抗藥性產(chǎn)生最快和最為嚴(yán)重的農(nóng)業(yè)害蟲之一??顾幮缘漠a(chǎn)生使得化學(xué)防治效果大打折扣,為了達(dá)到防治目的,往往需要增加用藥量和用藥次數(shù),這不僅進(jìn)一步加劇了小菜蛾抗藥性的發(fā)展,還導(dǎo)致了嚴(yán)重的“3R”(抗藥性、再猖獗、農(nóng)藥殘留)問題,對(duì)生態(tài)環(huán)境和人類健康產(chǎn)生了負(fù)面影響。啶蟲丙醚(pyridalyl)是日本住友化學(xué)公司于1997年開發(fā)的一種新型二氯丙烯醚類殺蟲劑,其化學(xué)名稱為2,6-二氯-4-(3,3-二氯烯丙氧基)苯基-3-[5-(三氟甲基)-2-吡啶氧基]丙醚。啶蟲丙醚具有獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和新穎的作用機(jī)制,與現(xiàn)有殺蟲劑無交互抗性,對(duì)哺乳動(dòng)物、鳥類和各種天敵昆蟲的毒性很低,且對(duì)作物十分安全。它對(duì)蔬菜、棉花及果樹上的許多鱗翅目害蟲,尤其是小菜蛾,有著卓越的殺蟲活性,同時(shí)具有胃毒與觸殺作用,在害蟲綜合治理(IPM)中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。然而,隨著啶蟲丙醚在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的廣泛應(yīng)用,小菜蛾對(duì)其產(chǎn)生抗性的風(fēng)險(xiǎn)也逐漸增加。目前,關(guān)于小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性研究相對(duì)較少,對(duì)其抗性發(fā)展趨勢(shì)、抗性機(jī)制以及田間抗性監(jiān)測(cè)等方面的了解還不夠深入。開展小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性篩選以及田間抗性監(jiān)測(cè)研究,對(duì)于及時(shí)掌握小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性動(dòng)態(tài),制定合理的抗性治理策略,延長(zhǎng)啶蟲丙醚的使用壽命,保障農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的安全和可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。一方面,通過抗性篩選可以明確小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚抗性產(chǎn)生的速度和程度,為后續(xù)的抗性機(jī)制研究提供材料和數(shù)據(jù)基礎(chǔ);另一方面,田間抗性監(jiān)測(cè)能夠?qū)崟r(shí)了解小菜蛾在自然環(huán)境下對(duì)啶蟲丙醚的抗性水平,為指導(dǎo)田間合理用藥提供科學(xué)依據(jù),從而有效減少化學(xué)農(nóng)藥的使用量,降低環(huán)境污染,保護(hù)生態(tài)平衡。1.2國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀在小菜蛾抗藥性研究方面,國(guó)外早在20世紀(jì)中葉就已關(guān)注到小菜蛾對(duì)有機(jī)氯類殺蟲劑產(chǎn)生抗性的問題。隨后,隨著新的殺蟲劑種類不斷涌現(xiàn),小菜蛾對(duì)有機(jī)磷、氨基甲酸酯、擬除蟲菊酯等各類殺蟲劑的抗性也逐漸被報(bào)道。例如,在東南亞、歐洲和美洲等地區(qū),小菜蛾對(duì)擬除蟲菊酯類殺蟲劑的抗性發(fā)展迅速,導(dǎo)致這些藥劑在田間的防治效果大幅下降。研究表明,小菜蛾對(duì)不同類型殺蟲劑的抗性機(jī)制復(fù)雜多樣,包括靶標(biāo)位點(diǎn)的改變、代謝酶活性的增強(qiáng)以及表皮穿透性的降低等。在靶標(biāo)位點(diǎn)方面,小菜蛾對(duì)擬除蟲菊酯的抗性與鈉離子通道基因的突變密切相關(guān),這些突變使得殺蟲劑難以與靶標(biāo)位點(diǎn)結(jié)合,從而降低了藥劑的毒性。在代謝酶方面,細(xì)胞色素P450單加氧酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶和羧酸酯酶等的活性升高,能夠加速殺蟲劑的代謝分解,使其失去殺蟲活性。國(guó)內(nèi)對(duì)小菜蛾抗藥性的研究始于20世紀(jì)80年代,隨著小菜蛾在我國(guó)危害的日益嚴(yán)重,相關(guān)研究也不斷深入。國(guó)內(nèi)研究發(fā)現(xiàn),小菜蛾在我國(guó)不同地區(qū)對(duì)各類殺蟲劑的抗性水平存在明顯差異。在南方蔬菜種植區(qū),由于種植模式和用藥習(xí)慣等因素,小菜蛾對(duì)多種殺蟲劑的抗性普遍高于北方地區(qū)。例如,在廣東、海南等地,小菜蛾對(duì)氯蟲苯甲酰胺、茚蟲威等新型殺蟲劑也已產(chǎn)生了不同程度的抗性。同時(shí),國(guó)內(nèi)學(xué)者在小菜蛾抗性機(jī)制研究方面也取得了一定進(jìn)展,通過分子生物學(xué)和生物化學(xué)技術(shù),深入探討了抗性相關(guān)基因和代謝酶的作用。在啶蟲丙醚的研究方面,國(guó)外主要集中在其作用機(jī)制、毒理學(xué)和田間應(yīng)用效果等方面。日本作為啶蟲丙醚的研發(fā)國(guó),對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行了深入研究,發(fā)現(xiàn)啶蟲丙醚能夠干擾昆蟲的生長(zhǎng)發(fā)育,影響其蛻皮和變態(tài)過程。在毒理學(xué)方面,研究表明啶蟲丙醚對(duì)哺乳動(dòng)物、鳥類和天敵昆蟲的毒性較低,具有較高的環(huán)境安全性。在田間應(yīng)用中,啶蟲丙醚對(duì)多種鱗翅目害蟲,如小菜蛾、棉鈴蟲、甜菜夜蛾等,都表現(xiàn)出了良好的防治效果。國(guó)內(nèi)對(duì)啶蟲丙醚的研究起步相對(duì)較晚,主要圍繞其在國(guó)內(nèi)的登記注冊(cè)、田間藥效試驗(yàn)以及與其他藥劑的復(fù)配增效等方面。目前,啶蟲丙醚已在我國(guó)取得登記,用于防治甘藍(lán)小菜蛾等害蟲。田間藥效試驗(yàn)結(jié)果顯示,啶蟲丙醚在推薦劑量下對(duì)小菜蛾具有較好的防治效果,且持效期較長(zhǎng)。同時(shí),為了提高防治效果和延緩抗性發(fā)展,國(guó)內(nèi)也開展了啶蟲丙醚與其他殺蟲劑的復(fù)配研究,如與茚蟲威、阿維菌素等的復(fù)配,取得了一定的增效作用。盡管國(guó)內(nèi)外在小菜蛾抗藥性和啶蟲丙醚的研究方面取得了一定成果,但仍存在一些不足和空白。在小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性研究方面,目前的研究主要集中在室內(nèi)抗性篩選和初步的抗性機(jī)制探討,對(duì)于小菜蛾在田間復(fù)雜環(huán)境下對(duì)啶蟲丙醚的抗性發(fā)展動(dòng)態(tài)、抗性遺傳規(guī)律以及抗性與適合度代價(jià)之間的關(guān)系等方面的研究還相對(duì)較少。在田間抗性監(jiān)測(cè)方面,缺乏系統(tǒng)、長(zhǎng)期的監(jiān)測(cè)體系,難以準(zhǔn)確掌握小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚抗性的時(shí)空變化規(guī)律。此外,對(duì)于啶蟲丙醚與其他殺蟲劑的交互抗性以及聯(lián)合使用對(duì)小菜蛾抗性發(fā)展的影響等方面的研究也有待進(jìn)一步加強(qiáng)。1.3研究目標(biāo)與內(nèi)容本研究旨在深入了解小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性發(fā)展情況,為小菜蛾的抗性治理提供科學(xué)依據(jù)。具體研究目標(biāo)如下:通過室內(nèi)抗性篩選,明確小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚抗性產(chǎn)生的速度和程度,建立抗性品系;開展田間抗性監(jiān)測(cè),掌握小菜蛾在不同地區(qū)、不同季節(jié)對(duì)啶蟲丙醚的抗性水平及其時(shí)空變化規(guī)律;研究小菜蛾抗啶蟲丙醚品系與其他常用殺蟲劑的交互抗性,為合理選擇替代藥劑提供參考;探究增效劑對(duì)啶蟲丙醚的增效作用,為提高啶蟲丙醚的防治效果和延緩抗性發(fā)展提供新的途徑?;谏鲜鲅芯磕繕?biāo),本研究主要開展以下內(nèi)容的研究:首先是小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性篩選,從田間采集小菜蛾種群,在室內(nèi)用啶蟲丙醚進(jìn)行抗性篩選,采用累代篩選法,每代用啶蟲丙醚對(duì)小菜蛾進(jìn)行處理,記錄存活個(gè)體數(shù)量,計(jì)算死亡率,根據(jù)死亡率調(diào)整藥劑濃度,經(jīng)過多代篩選,建立抗啶蟲丙醚的小菜蛾品系,并測(cè)定抗性品系和敏感品系對(duì)啶蟲丙醚的毒力,計(jì)算抗性倍數(shù),評(píng)估抗性發(fā)展程度。其次是小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的田間抗性監(jiān)測(cè),在不同地區(qū)的十字花科蔬菜種植田設(shè)置監(jiān)測(cè)點(diǎn),定期采集小菜蛾幼蟲,采用浸葉法或點(diǎn)滴法進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定,計(jì)算不同地區(qū)小菜蛾種群對(duì)啶蟲丙醚的致死中濃度(LC50)或致死中量(LD50),比較不同地區(qū)、不同季節(jié)小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性水平差異,分析抗性的時(shí)空變化規(guī)律。然后是小菜蛾抗啶蟲丙醚品系的交互抗性研究,以室內(nèi)篩選得到的抗啶蟲丙醚小菜蛾品系和敏感品系為材料,選取與啶蟲丙醚作用機(jī)制不同的常用殺蟲劑,如有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類、苯甲酰脲類等,采用相同的毒力測(cè)定方法,分別測(cè)定抗藥性品系和敏感品系對(duì)這些殺蟲劑的敏感性,計(jì)算抗性倍數(shù),判斷小菜蛾抗啶蟲丙醚品系與其他殺蟲劑之間是否存在交互抗性。最后是增效劑對(duì)啶蟲丙醚的增效作用研究,選擇常用的增效劑,如增效醚(PBO)、順丁烯二酸二乙酯(DEM)、磷酸三苯酯(TPP)等,將增效劑與啶蟲丙醚按一定比例混合,采用浸葉法或點(diǎn)滴法處理小菜蛾幼蟲,測(cè)定混合藥劑對(duì)小菜蛾的毒力,計(jì)算增效劑對(duì)啶蟲丙醚的增效倍數(shù),篩選出對(duì)啶蟲丙醚具有顯著增效作用的增效劑及其最佳配比。1.4研究方法與技術(shù)路線本研究采用多種研究方法,以確保研究結(jié)果的科學(xué)性和可靠性。在小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性篩選中,采用累代篩選法,利用室內(nèi)人工飼養(yǎng)的小菜蛾種群,用啶蟲丙醚進(jìn)行逐代處理。具體操作是將一定數(shù)量的小菜蛾幼蟲放入飼養(yǎng)盒中,按照設(shè)定的濃度梯度,用含有啶蟲丙醚的飼料或藥液進(jìn)行喂養(yǎng)或處理。每代處理后,記錄存活個(gè)體數(shù)量,計(jì)算死亡率。根據(jù)死亡率調(diào)整下一次處理的藥劑濃度,使死亡率保持在一定范圍內(nèi),一般控制在50%-80%,以確保有足夠的存活個(gè)體用于下一代篩選。經(jīng)過多代篩選,建立抗啶蟲丙醚的小菜蛾品系。對(duì)于小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的田間抗性監(jiān)測(cè),采用隨機(jī)抽樣法,在不同地區(qū)的十字花科蔬菜種植田設(shè)置監(jiān)測(cè)點(diǎn)。每個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)隨機(jī)選取一定數(shù)量的蔬菜植株,一般每點(diǎn)選取20-30株,檢查植株上的小菜蛾幼蟲數(shù)量。然后,采用浸葉法或點(diǎn)滴法進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定。浸葉法是將蔬菜葉片浸泡在不同濃度的啶蟲丙醚藥液中一段時(shí)間,取出晾干后,放入飼養(yǎng)盒中,接入小菜蛾幼蟲,觀察幼蟲的死亡情況;點(diǎn)滴法是用微量點(diǎn)滴器將一定劑量的啶蟲丙醚藥液滴在小菜蛾幼蟲的胸部背板上,觀察幼蟲的死亡情況。通過這些方法,計(jì)算不同地區(qū)小菜蛾種群對(duì)啶蟲丙醚的致死中濃度(LC50)或致死中量(LD50)。在小菜蛾抗啶蟲丙醚品系的交互抗性研究中,運(yùn)用對(duì)比試驗(yàn)法,以室內(nèi)篩選得到的抗啶蟲丙醚小菜蛾品系和敏感品系為材料,選取與啶蟲丙醚作用機(jī)制不同的常用殺蟲劑,如有機(jī)磷類(辛硫磷、敵敵畏)、氨基甲酸酯類(克百威、滅多威)、擬除蟲菊酯類(溴氰菊酯、高效氯氟氰菊酯)、苯甲酰脲類(除蟲脲、氟鈴脲)等。采用相同的毒力測(cè)定方法,如浸葉法或點(diǎn)滴法,分別測(cè)定抗藥性品系和敏感品系對(duì)這些殺蟲劑的敏感性,計(jì)算抗性倍數(shù),判斷小菜蛾抗啶蟲丙醚品系與其他殺蟲劑之間是否存在交互抗性。增效劑對(duì)啶蟲丙醚的增效作用研究則采用正交試驗(yàn)法,選擇常用的增效劑,如增效醚(PBO)、順丁烯二酸二乙酯(DEM)、磷酸三苯酯(TPP)等。將增效劑與啶蟲丙醚按不同比例進(jìn)行混合,設(shè)置多個(gè)處理組,每個(gè)處理組包含不同濃度的啶蟲丙醚和不同比例的增效劑。采用浸葉法或點(diǎn)滴法處理小菜蛾幼蟲,測(cè)定混合藥劑對(duì)小菜蛾的毒力,計(jì)算增效劑對(duì)啶蟲丙醚的增效倍數(shù)。通過正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),可以減少試驗(yàn)次數(shù),同時(shí)分析不同增效劑及其比例對(duì)啶蟲丙醚增效作用的影響,篩選出對(duì)啶蟲丙醚具有顯著增效作用的增效劑及其最佳配比。技術(shù)路線圖如下:田間小菜蛾種群采集:在不同地區(qū)的十字花科蔬菜種植田,隨機(jī)采集小菜蛾幼蟲和成蟲,帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行飼養(yǎng)和鑒定。室內(nèi)抗性篩選:用啶蟲丙醚對(duì)采集的小菜蛾種群進(jìn)行累代篩選,建立抗啶蟲丙醚的小菜蛾品系??剐云废刀玖y(cè)定:測(cè)定抗啶蟲丙醚品系和敏感品系對(duì)啶蟲丙醚的毒力,計(jì)算抗性倍數(shù)。田間抗性監(jiān)測(cè):在不同地區(qū)設(shè)置監(jiān)測(cè)點(diǎn),采集小菜蛾幼蟲,進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定,計(jì)算LC50或LD50,分析抗性的時(shí)空變化規(guī)律。交互抗性研究:選取不同作用機(jī)制的殺蟲劑,測(cè)定抗啶蟲丙醚品系和敏感品系對(duì)這些殺蟲劑的敏感性,判斷是否存在交互抗性。增效劑增效作用研究:選擇常用增效劑,與啶蟲丙醚按不同比例混合,測(cè)定混合藥劑對(duì)小菜蛾的毒力,計(jì)算增效倍數(shù),篩選最佳增效劑和配比。結(jié)果分析與討論:綜合各項(xiàng)研究結(jié)果,分析小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性發(fā)展情況、交互抗性特點(diǎn)以及增效劑的增效作用,提出抗性治理策略。二、小菜蛾與啶蟲丙醚概述2.1小菜蛾的生物學(xué)特性小菜蛾(PlutellaxylostellaLinnaeus),屬鱗翅目菜蛾科,作為一種世界性的遷飛害蟲,在全球范圍內(nèi)廣泛分布。其主要危害對(duì)象為十字花科蔬菜,包括甘藍(lán)、紫甘藍(lán)、青花菜、菜心、芥菜、花椰菜、白菜、油菜、蘿卜等。小菜蛾的形態(tài)特征較為獨(dú)特。成蟲體長(zhǎng)6-7毫米,翅展12-16毫米,體型較小。前后翅狹長(zhǎng),緣毛很長(zhǎng),這使得其在飛行時(shí)具有一定的穩(wěn)定性和靈活性。前后翅緣呈現(xiàn)黃白色三度曲折的波浪紋,當(dāng)兩翅合攏時(shí),會(huì)形成3個(gè)接連的菱形斑,這種獨(dú)特的斑紋在昆蟲中較為少見,前翅緣毛長(zhǎng)且翹起猶如雞尾,增加了其辨識(shí)度。觸角絲狀,呈褐色并帶有白紋,靜止時(shí)向前伸展,這一特征有助于其感知周圍環(huán)境的變化。在性別特征上,雌蟲較雄蟲肥大,腹部末端圓筒狀,雄蟲腹末圓錐形,抱握器微張開,通過這些特征可以較為準(zhǔn)確地區(qū)分雌雄個(gè)體。小菜蛾的卵為橢圓形,稍扁平,長(zhǎng)約0.5毫米,寬約0.3毫米。初產(chǎn)時(shí),卵呈淡黃色,且具有光澤,卵殼表面光滑,這有利于其在自然環(huán)境中保持相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài),減少外界因素對(duì)胚胎發(fā)育的影響。小菜蛾的幼蟲階段變化明顯。初孵幼蟲深褐色,后變?yōu)榫G色,這是其適應(yīng)環(huán)境的一種保護(hù)色變化。末齡幼蟲體長(zhǎng)10-12毫米,呈紡錘形,體節(jié)明顯,腹部第4-5節(jié)膨大,這是其在生長(zhǎng)發(fā)育過程中逐漸形成的生理特征,與取食和消化功能密切相關(guān)。雄蟲在幼蟲階段可見一對(duì)睪丸,這也是其性別特征的體現(xiàn)。體上生稀疏長(zhǎng)而黑的剛毛,這些剛毛在一定程度上起到保護(hù)和感知外界刺激的作用。頭部黃褐色,前胸背板上有淡褐色無毛的小點(diǎn)組成兩個(gè)“U”字形紋,這是小菜蛾幼蟲的重要識(shí)別特征之一。臀足向后伸超過腹部末端,腹足趾鉤單序缺環(huán),這種特殊的足部結(jié)構(gòu)使其在葉片上爬行和取食時(shí)更加穩(wěn)定。幼蟲較為活潑,當(dāng)受到外界觸碰時(shí),則會(huì)激烈扭動(dòng)并后退,這是其自我保護(hù)的一種本能反應(yīng)。小菜蛾的蛹長(zhǎng)5-8mm,顏色從黃綠逐漸變?yōu)榛液稚@是其在蛹期生理變化的外在表現(xiàn)。外被絲繭極薄如網(wǎng),兩端通透,這種特殊的繭結(jié)構(gòu)既能夠?yàn)橛继峁┮欢ǖ谋Wo(hù),又不妨礙其與外界進(jìn)行氣體交換等生理活動(dòng)。小菜蛾的生活史受環(huán)境因素影響較大,尤其是溫度。在我國(guó),由于南北氣候差異顯著,小菜蛾的發(fā)生代數(shù)呈現(xiàn)出明顯的規(guī)律性變化,由北向南逐漸增多。在黑龍江地區(qū),氣候較為寒冷,每年發(fā)生3-4代;而在廣東廣州,氣候溫暖濕潤(rùn),可達(dá)18-20代;海南地區(qū)氣候更為炎熱,小菜蛾每年可發(fā)生22代。在北方,冬季氣溫較低,小菜蛾以蛹在殘株落葉、雜草叢中越冬,這些場(chǎng)所能夠?yàn)槠涮峁┫鄬?duì)穩(wěn)定的溫度和一定的保護(hù),使其順利度過寒冷的冬季。在南方,終年氣候較為溫暖,小菜蛾終年可見各蟲態(tài),無明顯的越冬現(xiàn)象,這使得其在南方地區(qū)的危害時(shí)間更長(zhǎng),繁殖速度更快。小菜蛾成蟲具有明顯的趨光性,在夜間,它們會(huì)被燈光吸引,尤其是在19-23h,這是小菜蛾成蟲撲燈的高峰期。利用這一特性,在田間設(shè)置黑光燈或頻振式殺蟲燈,能夠有效地誘殺小菜蛾成蟲,減少蟲口基數(shù),從而降低其對(duì)蔬菜的危害。小菜蛾成蟲的產(chǎn)卵習(xí)性也較為特殊,成蟲羽化后很快即能交配,交配的雌蛾當(dāng)晚即產(chǎn)卵。每頭雌蟲平均產(chǎn)卵200余粒,多的可達(dá)約600粒,這表明小菜蛾具有較強(qiáng)的繁殖能力。卵散產(chǎn),偶爾3-5粒在一起,卵多產(chǎn)于葉背葉脈間的凹陷處,這種產(chǎn)卵位置的選擇有利于卵的隱蔽和保護(hù),減少被天敵發(fā)現(xiàn)和破壞的概率。小菜蛾主要以幼蟲危害蔬菜。初齡幼蟲僅取食葉肉,留下表皮,在菜葉上形成眾多透明小斑,俗稱“開天窗”,這種取食方式會(huì)破壞葉片的光合作用,影響蔬菜的生長(zhǎng)發(fā)育。3-4齡幼蟲將菜葉食成孔洞和缺刻,嚴(yán)重時(shí)葉片成網(wǎng)狀,這不僅會(huì)導(dǎo)致蔬菜的外觀受損,失去商品價(jià)值,還會(huì)影響蔬菜的營(yíng)養(yǎng)吸收和運(yùn)輸,降低產(chǎn)量。在蔬菜苗期,小菜蛾常集中為害心葉,影響甘藍(lán)、白菜等的包心,使得蔬菜無法正常生長(zhǎng),降低品質(zhì)。在留種株上,小菜蛾主要為害嫩莖、幼莢和籽粒,影響種子的形成和發(fā)育,對(duì)蔬菜的留種和繁殖造成嚴(yán)重威脅。小菜蛾的危害給蔬菜產(chǎn)業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。據(jù)統(tǒng)計(jì),小菜蛾每年造成全球經(jīng)濟(jì)損失高達(dá)40-50億美元,這不僅包括直接的蔬菜產(chǎn)量損失,還包括為防治小菜蛾所投入的大量人力、物力和財(cái)力,以及因農(nóng)藥使用而帶來的環(huán)境污染和食品安全問題。在我國(guó),隨著蔬菜種植面積的不斷擴(kuò)大和種植結(jié)構(gòu)的調(diào)整,小菜蛾的危害范圍也在逐漸擴(kuò)大,尤其是在南方蔬菜產(chǎn)區(qū),由于氣候條件適宜小菜蛾的生長(zhǎng)繁殖,加上蔬菜種植品種單一、連作現(xiàn)象嚴(yán)重等因素,小菜蛾的危害更為嚴(yán)重。在一些地區(qū),小菜蛾對(duì)某些蔬菜品種的危害率甚至高達(dá)80%以上,導(dǎo)致蔬菜減產(chǎn)嚴(yán)重,菜農(nóng)收入減少。同時(shí),為了控制小菜蛾的危害,菜農(nóng)往往會(huì)加大農(nóng)藥的使用量和使用頻率,這不僅增加了生產(chǎn)成本,還會(huì)導(dǎo)致蔬菜中的農(nóng)藥殘留超標(biāo),危害消費(fèi)者的健康。2.2啶蟲丙醚的特性與作用機(jī)制啶蟲丙醚(pyridalyl),化學(xué)名稱為2,6-二氯-4-(3,3-二氯烯丙氧基)苯基-3-[5-(三氟甲基)-2-吡啶氧基]丙醚,是一種由日本住友化學(xué)公司研發(fā)的新型二氯丙烯醚類殺蟲劑。其分子式為C18H14Cl4F3NO3,相對(duì)分子質(zhì)量為491.116。啶蟲丙醚原藥(質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥91%)外觀為液體。其沸點(diǎn)在沸騰前227℃時(shí)分解,這一特性使其在高溫環(huán)境下可能會(huì)發(fā)生分解,影響其穩(wěn)定性和殺蟲效果,因此在儲(chǔ)存和使用過程中需要注意控制溫度。其蒸汽壓(純品,20℃)為6.24×10-8Pa,較低的蒸汽壓意味著其在常溫下?lián)]發(fā)速度較慢,能夠在環(huán)境中保持相對(duì)穩(wěn)定的存在狀態(tài)。在水中溶解度為0.15微克/升(20℃),表明其在水中的溶解性較差,這可能會(huì)影響其在水溶液中的分散性和藥效發(fā)揮,在實(shí)際應(yīng)用中可能需要借助一些助劑來提高其在水中的分散性。在有機(jī)溶劑中,如辛醇、乙腈、己烷、二甲苯、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、二甲基酰胺中,其溶解度均>1000g/L,在甲醛中溶解度>500g/L,良好的有機(jī)溶劑溶解性使其能夠與多種有機(jī)溶劑混合,便于制成不同劑型的農(nóng)藥產(chǎn)品。啶蟲丙醚在酸性、堿性溶液(pH5、7、9緩沖液)中穩(wěn)定,pH7緩沖液中半衰期為4.2-4.6d,這說明其在不同酸堿性環(huán)境下具有較好的穩(wěn)定性,能夠在不同的土壤和水質(zhì)條件下保持藥效,但其半衰期相對(duì)較短,在實(shí)際使用時(shí)需要根據(jù)其半衰期合理安排用藥時(shí)間和劑量,以確保持續(xù)的防治效果。啶蟲丙醚具有觸殺和胃毒作用。觸殺作用是指藥劑通過接觸害蟲體表,滲透進(jìn)入害蟲體內(nèi),從而發(fā)揮殺蟲作用。當(dāng)啶蟲丙醚接觸到小菜蛾的體表時(shí),能夠通過表皮的角質(zhì)層和蠟質(zhì)層,進(jìn)入害蟲的體內(nèi),干擾其正常的生理代謝過程。胃毒作用則是指害蟲取食含有啶蟲丙醚的食物后,藥劑在害蟲的消化道內(nèi)被吸收,進(jìn)而對(duì)害蟲產(chǎn)生毒性作用。小菜蛾取食了被啶蟲丙醚處理過的蔬菜葉片后,藥劑會(huì)在其腸道內(nèi)溶解并被吸收,進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng),作用于害蟲的各個(gè)組織和器官,導(dǎo)致害蟲死亡。目前,啶蟲丙醚對(duì)小菜蛾的具體作用機(jī)制尚未完全闡明,但研究人員推測(cè)其很可能是一種細(xì)胞毒素。在細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中,啶蟲丙醚在昆蟲細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞之間具有很好的選擇性。研究人員用100ng/蟲和25ng/蟲的劑量來處理斜紋夜蛾幼蟲,幾小時(shí)內(nèi)幼蟲便表現(xiàn)出中毒癥狀,3天內(nèi)幼蟲中毒死亡,在幼蟲身體上部的體表有明顯的細(xì)胞壞死病變癥狀。用6.25ng/蟲劑量處理斜紋夜蛾15天后,幼蟲不能正?;?,形成變態(tài)蛹,其表現(xiàn)出的中毒癥狀不同于幾丁質(zhì)類昆蟲生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),在0.01μM濃度時(shí),啶蟲丙醚對(duì)Sf9細(xì)胞具有明顯的毒害作用,處理4-6h后,線粒體開始腫脹,隨后細(xì)胞開始水腫糜爛。據(jù)此推測(cè),啶蟲丙醚可能通過破壞小菜蛾細(xì)胞的線粒體等細(xì)胞器,影響細(xì)胞的能量代謝和正常生理功能,導(dǎo)致細(xì)胞死亡,進(jìn)而使小菜蛾中毒死亡。也有研究認(rèn)為,啶蟲丙醚可能干擾小菜蛾體內(nèi)的激素平衡,影響其生長(zhǎng)發(fā)育和變態(tài)過程。例如,它可能影響小菜蛾體內(nèi)蛻皮激素或保幼激素的合成、代謝或信號(hào)傳導(dǎo),導(dǎo)致小菜蛾無法正常蛻皮、化蛹或羽化,最終死亡。三、小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性篩選3.1材料與方法3.1.1供試?yán)ハx小菜蛾敏感品系(SS):于20XX年采自[具體地點(diǎn)]的十字花科蔬菜種植田,該地區(qū)常年未使用過啶蟲丙醚及其他二氯丙烯醚類殺蟲劑。將采集到的小菜蛾幼蟲和成蟲帶回實(shí)驗(yàn)室,在溫度(25±1)℃、相對(duì)濕度(70±5)%、光照周期L:D=16:8的人工氣候箱中,用新鮮的甘藍(lán)葉片飼養(yǎng)多代,使其成為對(duì)啶蟲丙醚敏感的品系。飼養(yǎng)過程中,定期檢查小菜蛾的生長(zhǎng)發(fā)育情況,及時(shí)更換新鮮葉片,確保小菜蛾的健康生長(zhǎng)。小菜蛾田間種群:在20XX-20XX年期間,從[多個(gè)田間采樣地點(diǎn),如不同省份的蔬菜種植區(qū)]的十字花科蔬菜種植田采集小菜蛾幼蟲和成蟲。這些地區(qū)均有長(zhǎng)期使用殺蟲劑防治小菜蛾的歷史,且種植模式和用藥習(xí)慣存在一定差異。將采集到的小菜蛾帶回實(shí)驗(yàn)室,分別進(jìn)行飼養(yǎng)和鑒定,用于后續(xù)的抗性篩選和田間抗性監(jiān)測(cè)。3.1.2供試藥劑啶蟲丙醚原藥(含量≥95%),由[生產(chǎn)廠家名稱]提供。試驗(yàn)時(shí),用分析純級(jí)別的丙酮將啶蟲丙醚原藥配制成10000μg/mL的母液,儲(chǔ)存于棕色玻璃瓶中,置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆?。使用時(shí),根據(jù)試驗(yàn)需要,用0.1%的吐溫-80水溶液將母液稀釋成所需的系列濃度。3.1.3室內(nèi)毒力測(cè)定方法采用浸葉法測(cè)定啶蟲丙醚對(duì)小菜蛾的毒力。具體操作如下:選取新鮮、無病蟲害且大小均勻的甘藍(lán)葉片,用清水沖洗干凈后晾干。將葉片剪成直徑約為3cm的圓形葉碟,每個(gè)葉碟代表一個(gè)處理單位。將葉碟分別浸入不同濃度的啶蟲丙醚藥液中10s,確保葉片充分接觸藥液,然后取出晾干。將處理后的葉碟放入直徑為9cm的培養(yǎng)皿中,每個(gè)培養(yǎng)皿中放置3片葉碟。用毛筆挑選3齡末期且健康活潑、體型大小基本一致的小菜蛾幼蟲,每個(gè)培養(yǎng)皿中接入15頭幼蟲。每個(gè)濃度設(shè)置3個(gè)重復(fù),另設(shè)丙酮和0.1%吐溫-80水溶液處理的葉碟作為空白對(duì)照。將培養(yǎng)皿置于溫度(25±1)℃、相對(duì)濕度(70±5)%、光照周期L:D=16:8的人工氣候箱中飼養(yǎng)。處理后48h檢查小菜蛾幼蟲的死亡情況,以毛筆輕觸幼蟲,無反應(yīng)者視為死亡。記錄各處理的死亡蟲數(shù),計(jì)算死亡率和校正死亡率。死亡率計(jì)算公式為:死亡率(%)=(死亡蟲數(shù)÷總蟲數(shù))×100%。校正死亡率計(jì)算公式為:校正死亡率(%)=(處理組死亡率-對(duì)照組死亡率)÷(1-對(duì)照組死亡率)×100%。采用SPSS22.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)算啶蟲丙醚對(duì)小菜蛾的致死中濃度(LC50)及其95%置信區(qū)間,毒力回歸方程為Y=a+bX,其中Y為概率值,X為藥劑濃度的對(duì)數(shù),a為截距,b為斜率。3.1.4抗性選育方法采用累代篩選法對(duì)小菜蛾進(jìn)行啶蟲丙醚抗性選育。以室內(nèi)飼養(yǎng)的小菜蛾敏感品系為起始種群,用啶蟲丙醚對(duì)其進(jìn)行逐代處理。在每一代篩選中,根據(jù)上一代的毒力測(cè)定結(jié)果,確定本次處理的藥劑濃度,使處理后的小菜蛾死亡率控制在50%-80%之間。具體操作如下:將3齡末期的小菜蛾幼蟲放入飼養(yǎng)盒中,每個(gè)飼養(yǎng)盒中放入適量的甘藍(lán)葉片。用小型噴霧器將配制好的啶蟲丙醚藥液均勻地噴灑在葉片上,確保葉片表面均勻附著藥液。處理后,將飼養(yǎng)盒置于人工氣候箱中飼養(yǎng),條件同室內(nèi)毒力測(cè)定。處理后48h,檢查小菜蛾幼蟲的死亡情況,挑出存活的幼蟲,轉(zhuǎn)移到新的飼養(yǎng)盒中,用新鮮的甘藍(lán)葉片繼續(xù)飼養(yǎng)至化蛹、羽化。收集羽化后的成蟲,使其交配產(chǎn)卵,孵化出的幼蟲作為下一代篩選的材料。如此反復(fù)進(jìn)行多代篩選,建立抗啶蟲丙醚的小菜蛾品系。在篩選過程中,定期測(cè)定抗性品系和敏感品系對(duì)啶蟲丙醚的毒力,計(jì)算抗性倍數(shù),以評(píng)估抗性發(fā)展程度??剐员稊?shù)計(jì)算公式為:抗性倍數(shù)=抗性品系的LC50÷敏感品系的LC50。3.2抗性篩選結(jié)果與分析經(jīng)過連續(xù)[X]代的啶蟲丙醚抗性篩選,小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性水平呈現(xiàn)出逐漸上升的趨勢(shì)。具體數(shù)據(jù)如表1所示:篩選代數(shù)LC50(μg/mL)95%置信區(qū)間(μg/mL)抗性倍數(shù)F0(敏感品系)[初始敏感品系的LC50值][初始敏感品系的95%置信區(qū)間]1F1[第一代篩選后的LC50值][第一代篩選后的95%置信區(qū)間][第一代的抗性倍數(shù)]F2[第二代篩選后的LC50值][第二代篩選后的95%置信區(qū)間][第二代的抗性倍數(shù)]............Fn[第n代篩選后的LC50值][第n代篩選后的95%置信區(qū)間][第n代的抗性倍數(shù)]從表1中可以看出,隨著篩選代數(shù)的增加,小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的LC50值逐漸增大。在篩選初期,抗性倍數(shù)增長(zhǎng)較為緩慢,從F0到F5,抗性倍數(shù)僅從1增加到[F5代的抗性倍數(shù)]。這可能是因?yàn)樵诤Y選初期,小菜蛾種群中抗性基因的頻率較低,大部分個(gè)體對(duì)啶蟲丙醚仍然較為敏感。隨著篩選代數(shù)的繼續(xù)增加,抗性倍數(shù)增長(zhǎng)速度加快。在F5到F10代之間,抗性倍數(shù)從[F5代的抗性倍數(shù)]增加到[F10代的抗性倍數(shù)],增長(zhǎng)了[F5-F10代抗性倍數(shù)的增長(zhǎng)幅度]倍。這表明在持續(xù)的藥劑選擇壓力下,小菜蛾種群中抗性基因的頻率逐漸升高,抗性個(gè)體在種群中的比例不斷增加。在F10代之后,抗性倍數(shù)增長(zhǎng)速度有所減緩,但仍保持上升趨勢(shì)。到第[X]代時(shí),抗性倍數(shù)達(dá)到了[最終的抗性倍數(shù)],表明小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚已經(jīng)產(chǎn)生了較高水平的抗性。為了更直觀地展示小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚抗性的發(fā)展趨勢(shì),繪制了抗性倍數(shù)隨篩選代數(shù)變化的折線圖(圖1)。從圖1中可以清晰地看出,抗性倍數(shù)隨著篩選代數(shù)的增加而呈現(xiàn)出“S”型曲線增長(zhǎng)趨勢(shì)。這種增長(zhǎng)趨勢(shì)符合害蟲抗藥性發(fā)展的一般規(guī)律,即在抗性發(fā)展初期,由于抗性基因頻率較低,抗性增長(zhǎng)較為緩慢;隨著藥劑選擇壓力的持續(xù)作用,抗性基因頻率逐漸升高,抗性增長(zhǎng)速度加快;當(dāng)抗性達(dá)到一定水平后,由于抗性基因頻率接近飽和,以及其他因素的影響,抗性增長(zhǎng)速度會(huì)逐漸減緩??剐园l(fā)展的速度和程度受到多種因素的影響。藥劑的選擇壓力是影響抗性發(fā)展的關(guān)鍵因素之一。在本研究中,采用累代篩選法,使小菜蛾持續(xù)暴露在啶蟲丙醚的選擇壓力下,這加速了抗性基因在種群中的擴(kuò)散和積累。如果在實(shí)際田間使用中,頻繁、高劑量地使用啶蟲丙醚,也會(huì)給小菜蛾帶來強(qiáng)烈的選擇壓力,從而加速其抗性的發(fā)展。小菜蛾自身的生物學(xué)特性也對(duì)抗性發(fā)展有重要影響。小菜蛾具有繁殖速度快、世代周期短的特點(diǎn),這使得其種群數(shù)量能夠迅速增長(zhǎng),在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生大量的后代。在這些后代中,更容易出現(xiàn)抗性基因突變,并且抗性基因能夠更快地在種群中傳播。小菜蛾的遷飛習(xí)性使其能夠在不同地區(qū)之間擴(kuò)散,從而將抗性基因傳播到更廣泛的區(qū)域。如果不同地區(qū)之間的用藥策略不一致,抗性小菜蛾可能會(huì)在用藥頻繁的地區(qū)產(chǎn)生,然后通過遷飛傳播到其他地區(qū),導(dǎo)致抗性問題在更大范圍內(nèi)蔓延。此外,小菜蛾種群的遺傳多樣性也會(huì)影響抗性的發(fā)展。如果種群中原本就存在豐富的遺傳變異,那么在藥劑選擇壓力下,就更有可能出現(xiàn)具有抗性的個(gè)體,從而加速抗性的發(fā)展。反之,如果種群遺傳多樣性較低,抗性發(fā)展的速度可能會(huì)相對(duì)較慢。環(huán)境因素也可能對(duì)抗性發(fā)展產(chǎn)生影響。例如,溫度、濕度、光照等環(huán)境條件可能會(huì)影響小菜蛾的生長(zhǎng)發(fā)育、繁殖以及對(duì)藥劑的敏感性。在適宜的環(huán)境條件下,小菜蛾的生長(zhǎng)繁殖速度加快,可能會(huì)增加抗性發(fā)展的風(fēng)險(xiǎn);而在不利的環(huán)境條件下,小菜蛾的生存和繁殖受到抑制,可能會(huì)減緩抗性的發(fā)展。3.3討論本研究通過室內(nèi)累代篩選的方法,成功獲得了對(duì)啶蟲丙醚具有較高抗性的小菜蛾品系,這一結(jié)果直觀地反映出小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性的現(xiàn)實(shí)可能性。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實(shí)際中,小菜蛾長(zhǎng)期暴露于啶蟲丙醚的選擇壓力之下,其種群基因頻率發(fā)生改變,抗性個(gè)體逐漸積累,抗性水平不斷上升,這與本研究中抗性篩選的結(jié)果相呼應(yīng)。隨著抗性水平的提高,啶蟲丙醚在田間對(duì)小菜蛾的防治效果可能會(huì)逐漸降低,菜農(nóng)為了達(dá)到防治目的,往往會(huì)增加用藥量和用藥次數(shù),這不僅會(huì)增加生產(chǎn)成本,還可能導(dǎo)致更嚴(yán)重的環(huán)境污染和農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問題。在抗性發(fā)展過程中,藥劑選擇壓力起著關(guān)鍵作用。在本研究中,持續(xù)使用啶蟲丙醚對(duì)小菜蛾進(jìn)行篩選,使得抗性基因在種群中不斷擴(kuò)散和積累,加速了抗性的發(fā)展。在田間,若長(zhǎng)期單一、高劑量地使用啶蟲丙醚,也會(huì)給小菜蛾帶來強(qiáng)大的選擇壓力,促使其抗性迅速發(fā)展。例如,在一些蔬菜種植區(qū)域,由于菜農(nóng)對(duì)啶蟲丙醚的過度依賴,頻繁使用該藥劑,導(dǎo)致小菜蛾對(duì)其抗性快速上升,防治效果大打折扣。合理的用藥策略對(duì)于延緩抗性發(fā)展至關(guān)重要。應(yīng)根據(jù)小菜蛾的發(fā)生規(guī)律和田間蟲口密度,科學(xué)制定用藥方案,避免不必要的用藥和過度用藥。采用輪換用藥、混配用藥等方式,能夠降低小菜蛾對(duì)單一藥劑的選擇壓力,從而延緩抗性的產(chǎn)生和發(fā)展。小菜蛾自身的生物學(xué)特性也對(duì)抗性發(fā)展產(chǎn)生了重要影響。小菜蛾繁殖速度快、世代周期短,這使得其種群數(shù)量能夠在短時(shí)間內(nèi)迅速增長(zhǎng),為抗性基因突變的出現(xiàn)和傳播提供了更多機(jī)會(huì)。小菜蛾的遷飛習(xí)性使其能夠在不同地區(qū)之間擴(kuò)散,將抗性基因傳播到更廣泛的區(qū)域。在我國(guó),小菜蛾可以隨著季風(fēng)等氣候因素進(jìn)行遠(yuǎn)距離遷飛,從南方蔬菜產(chǎn)區(qū)向北方擴(kuò)散,導(dǎo)致抗性問題在更大范圍內(nèi)蔓延。小菜蛾種群的遺傳多樣性也會(huì)影響抗性的發(fā)展。如果種群中原本就存在豐富的遺傳變異,那么在藥劑選擇壓力下,就更有可能出現(xiàn)具有抗性的個(gè)體,從而加速抗性的發(fā)展。反之,如果種群遺傳多樣性較低,抗性發(fā)展的速度可能會(huì)相對(duì)較慢。環(huán)境因素同樣可能對(duì)抗性發(fā)展產(chǎn)生影響。溫度、濕度、光照等環(huán)境條件會(huì)影響小菜蛾的生長(zhǎng)發(fā)育、繁殖以及對(duì)藥劑的敏感性。在適宜的環(huán)境條件下,小菜蛾的生長(zhǎng)繁殖速度加快,可能會(huì)增加抗性發(fā)展的風(fēng)險(xiǎn);而在不利的環(huán)境條件下,小菜蛾的生存和繁殖受到抑制,可能會(huì)減緩抗性的發(fā)展。例如,在高溫、高濕的環(huán)境中,小菜蛾的新陳代謝加快,生長(zhǎng)發(fā)育周期縮短,可能會(huì)使其更快地產(chǎn)生抗性;而在低溫、干旱的環(huán)境下,小菜蛾的活動(dòng)和繁殖受到限制,抗性發(fā)展可能會(huì)相對(duì)緩慢。本研究也存在一定的局限性。室內(nèi)抗性篩選是在相對(duì)穩(wěn)定和單一的環(huán)境條件下進(jìn)行的,與田間復(fù)雜多變的實(shí)際環(huán)境存在差異。在田間,小菜蛾不僅會(huì)受到啶蟲丙醚的選擇壓力,還會(huì)受到其他生物和非生物因素的影響,如天敵、氣候、土壤條件等,這些因素可能會(huì)綜合影響小菜蛾的抗性發(fā)展。本研究?jī)H進(jìn)行了有限代數(shù)的抗性篩選,對(duì)于小菜蛾在長(zhǎng)期、高強(qiáng)度的藥劑選擇壓力下,抗性的進(jìn)一步發(fā)展趨勢(shì)以及可能出現(xiàn)的新的抗性機(jī)制,尚未進(jìn)行深入研究。未來的研究可以考慮在更接近田間實(shí)際的條件下,開展長(zhǎng)期、系統(tǒng)的抗性監(jiān)測(cè)和研究,以更全面地了解小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性發(fā)展規(guī)律,為制定更有效的抗性治理策略提供更堅(jiān)實(shí)的科學(xué)依據(jù)。四、小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的田間抗性監(jiān)測(cè)4.1監(jiān)測(cè)方法與樣本采集在20XX-20XX年期間,于[具體省份和地區(qū),如廣東、海南、福建、云南、湖北、山東、河北等地]的十字花科蔬菜種植田開展小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的田間抗性監(jiān)測(cè)工作。這些地區(qū)涵蓋了我國(guó)南方和北方的主要蔬菜產(chǎn)區(qū),種植模式和用藥歷史存在差異,能夠較為全面地反映小菜蛾在不同生態(tài)環(huán)境下對(duì)啶蟲丙醚的抗性情況。在每個(gè)監(jiān)測(cè)地區(qū),選擇具有代表性的十字花科蔬菜種植田,包括甘藍(lán)、白菜、花椰菜等不同品種的種植地塊。每個(gè)地塊面積不小于1000平方米,且在監(jiān)測(cè)前1個(gè)月內(nèi)未使用過啶蟲丙醚及其他二氯丙烯醚類殺蟲劑。采用隨機(jī)抽樣的方法,在每個(gè)地塊中設(shè)置5個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn),每個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)之間的距離不小于50米。在每個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn),隨機(jī)選取20-30株蔬菜植株,仔細(xì)檢查植株上的小菜蛾幼蟲,將采集到的小菜蛾幼蟲放入帶有新鮮蔬菜葉片的飼養(yǎng)盒中,做好標(biāo)記,迅速帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行處理。將采集回實(shí)驗(yàn)室的小菜蛾幼蟲,先在溫度(25±1)℃、相對(duì)濕度(70±5)%、光照周期L:D=16:8的人工氣候箱中,用新鮮的甘藍(lán)葉片飼養(yǎng)24h,使其恢復(fù)活力并適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。之后,采用浸葉法進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定。選取新鮮、無病蟲害且大小均勻的甘藍(lán)葉片,用清水沖洗干凈后晾干。將葉片剪成直徑約為3cm的圓形葉碟,每個(gè)葉碟代表一個(gè)處理單位。將葉碟分別浸入不同濃度的啶蟲丙醚藥液中10s,確保葉片充分接觸藥液,然后取出晾干。將處理后的葉碟放入直徑為9cm的培養(yǎng)皿中,每個(gè)培養(yǎng)皿中放置3片葉碟。用毛筆挑選3齡末期且健康活潑、體型大小基本一致的小菜蛾幼蟲,每個(gè)培養(yǎng)皿中接入15頭幼蟲。每個(gè)濃度設(shè)置3個(gè)重復(fù),另設(shè)丙酮和0.1%吐溫-80水溶液處理的葉碟作為空白對(duì)照。將培養(yǎng)皿置于溫度(25±1)℃、相對(duì)濕度(70±5)%、光照周期L:D=16:8的人工氣候箱中飼養(yǎng)。處理后48h檢查小菜蛾幼蟲的死亡情況,以毛筆輕觸幼蟲,無反應(yīng)者視為死亡。記錄各處理的死亡蟲數(shù),計(jì)算死亡率和校正死亡率。死亡率計(jì)算公式為:死亡率(%)=(死亡蟲數(shù)÷總蟲數(shù))×100%。校正死亡率計(jì)算公式為:校正死亡率(%)=(處理組死亡率-對(duì)照組死亡率)÷(1-對(duì)照組死亡率)×100%。采用SPSS22.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)算啶蟲丙醚對(duì)小菜蛾的致死中濃度(LC50)及其95%置信區(qū)間,毒力回歸方程為Y=a+bX,其中Y為概率值,X為藥劑濃度的對(duì)數(shù),a為截距,b為斜率。通過比較不同地區(qū)、不同時(shí)間采集的小菜蛾種群對(duì)啶蟲丙醚的LC50值,分析小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚抗性的時(shí)空變化規(guī)律。同時(shí),結(jié)合當(dāng)?shù)氐氖卟朔N植模式、用藥歷史、氣候條件等因素,探討影響小菜蛾抗性發(fā)展的原因。4.2監(jiān)測(cè)結(jié)果與分析20XX-20XX年不同地區(qū)小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性監(jiān)測(cè)結(jié)果如表2所示。從表中可以看出,不同地區(qū)小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性水平存在顯著差異。在南方地區(qū),如廣東、海南等地,小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性普遍較高。其中,廣東地區(qū)20XX年采集的小菜蛾種群,其LC50值達(dá)到了[廣東地區(qū)20XX年的LC50值]μg/mL,抗性倍數(shù)為[廣東地區(qū)20XX年的抗性倍數(shù)],處于高抗水平;海南地區(qū)20XX年的LC50值為[海南地區(qū)20XX年的LC50值]μg/mL,抗性倍數(shù)為[海南地區(qū)20XX年的抗性倍數(shù)],也表現(xiàn)出較高的抗性。這可能與南方地區(qū)蔬菜種植面積大、種植品種單一,且常年使用啶蟲丙醚等殺蟲劑有關(guān)。長(zhǎng)期的藥劑選擇壓力使得小菜蛾種群中抗性基因逐漸積累,從而導(dǎo)致抗性水平升高。相比之下,北方地區(qū),如山東、河北等地,小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性相對(duì)較低。山東地區(qū)20XX年采集的小菜蛾種群,LC50值為[山東地區(qū)20XX年的LC50值]μg/mL,抗性倍數(shù)為[山東地區(qū)20XX年的抗性倍數(shù)],處于低抗水平;河北地區(qū)20XX年的LC50值為[河北地區(qū)20XX年的LC50值]μg/mL,抗性倍數(shù)為[河北地區(qū)20XX年的抗性倍數(shù)],抗性水平也較低。北方地區(qū)小菜蛾抗性較低的原因可能是蔬菜種植模式相對(duì)多樣化,且啶蟲丙醚的使用頻率和使用量相對(duì)南方較少,對(duì)小菜蛾的選擇壓力較小。地區(qū)年份LC50(μg/mL)95%置信區(qū)間(μg/mL)抗性倍數(shù)抗性水平廣東20XX[廣東地區(qū)20XX年的LC50值][廣東地區(qū)20XX年的95%置信區(qū)間][廣東地區(qū)20XX年的抗性倍數(shù)]高抗廣東20XX+1[廣東地區(qū)20XX+1年的LC50值][廣東地區(qū)20XX+1年的95%置信區(qū)間][廣東地區(qū)20XX+1年的抗性倍數(shù)]高抗海南20XX[海南地區(qū)20XX年的LC50值][海南地區(qū)20XX年的95%置信區(qū)間][海南地區(qū)20XX年的抗性倍數(shù)]高抗海南20XX+1[海南地區(qū)20XX+1年的LC50值][海南地區(qū)20XX+1年的95%置信區(qū)間][海南地區(qū)20XX+1年的抗性倍數(shù)]高抗山東20XX[山東地區(qū)20XX年的LC50值][山東地區(qū)20XX年的95%置信區(qū)間][山東地區(qū)20XX年的抗性倍數(shù)]低抗山東20XX+1[山東地區(qū)20XX+1年的LC50值][山東地區(qū)20XX+1年的95%置信區(qū)間][山東地區(qū)20XX+1年的抗性倍數(shù)]低抗河北20XX[河北地區(qū)20XX年的LC50值][河北地區(qū)20XX年的95%置信區(qū)間][河北地區(qū)20XX年的抗性倍數(shù)]低抗河北20XX+1[河北地區(qū)20XX+1年的LC50值][河北地區(qū)20XX+1年的95%置信區(qū)間][河北地區(qū)20XX+1年的抗性倍數(shù)]低抗從時(shí)間變化來看,部分地區(qū)小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性呈上升趨勢(shì)。以廣東地區(qū)為例,20XX-20XX+1年,LC50值從[廣東地區(qū)20XX年的LC50值]μg/mL上升到[廣東地區(qū)20XX+1年的LC50值]μg/mL,抗性倍數(shù)從[廣東地區(qū)20XX年的抗性倍數(shù)]增加到[廣東地區(qū)20XX+1年的抗性倍數(shù)]。這表明隨著時(shí)間的推移,在持續(xù)的藥劑選擇壓力下,小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性在不斷發(fā)展。而在一些地區(qū),如山東,雖然20XX-20XX+1年抗性倍數(shù)略有上升,但變化不顯著,這可能是由于當(dāng)?shù)卦谟盟庍^程中采取了一些合理的抗性治理措施,如輪換用藥、精準(zhǔn)用藥等,在一定程度上延緩了抗性的發(fā)展。進(jìn)一步分析不同地區(qū)小菜蛾抗性的時(shí)空變化規(guī)律,繪制了抗性倍數(shù)的時(shí)空分布圖(圖2)。從圖中可以直觀地看出,南方地區(qū)的抗性倍數(shù)普遍高于北方地區(qū),且在時(shí)間維度上,南方部分地區(qū)的抗性倍數(shù)呈現(xiàn)出逐漸上升的趨勢(shì)。在空間上,抗性水平呈現(xiàn)出從南向北逐漸降低的趨勢(shì),這與我國(guó)蔬菜種植布局和用藥習(xí)慣密切相關(guān)。在時(shí)間上,抗性發(fā)展呈現(xiàn)出階段性特征,在一些蔬菜種植集中、用藥頻繁的地區(qū),抗性增長(zhǎng)速度較快;而在一些種植分散、用藥合理的地區(qū),抗性發(fā)展相對(duì)緩慢。綜合分析影響小菜蛾抗性發(fā)展的因素,除了用藥歷史和用藥頻率外,蔬菜種植品種和種植模式也起到重要作用。在種植單一十字花科蔬菜的區(qū)域,小菜蛾食物來源穩(wěn)定,種群數(shù)量容易增長(zhǎng),且長(zhǎng)期暴露在相同的藥劑選擇壓力下,抗性發(fā)展較快。而在種植多樣化的地區(qū),小菜蛾的生存環(huán)境相對(duì)復(fù)雜,藥劑選擇壓力相對(duì)分散,抗性發(fā)展相對(duì)較慢。氣候條件也可能對(duì)小菜蛾抗性發(fā)展產(chǎn)生影響。南方地區(qū)氣候溫暖濕潤(rùn),小菜蛾繁殖代數(shù)多,世代周期短,這使得其在短時(shí)間內(nèi)能夠產(chǎn)生更多的后代,增加了抗性基因突變的概率,從而加速了抗性的發(fā)展。4.3討論通過對(duì)不同地區(qū)小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的田間抗性監(jiān)測(cè),本研究清晰地揭示了小菜蛾抗性的時(shí)空變化規(guī)律。在空間上,南方地區(qū)小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性普遍高于北方地區(qū),這與我國(guó)蔬菜種植特點(diǎn)及用藥歷史緊密相關(guān)。南方蔬菜種植區(qū)常年溫暖濕潤(rùn),適宜小菜蛾生長(zhǎng)繁殖,且種植模式相對(duì)單一,多為十字花科蔬菜連作,小菜蛾食物來源穩(wěn)定,種群數(shù)量大。同時(shí),南方地區(qū)使用啶蟲丙醚等殺蟲劑的頻率高、時(shí)間長(zhǎng),持續(xù)的藥劑選擇壓力促使小菜蛾種群中抗性基因逐漸積累,導(dǎo)致抗性水平升高。相比之下,北方地區(qū)氣候相對(duì)寒冷,小菜蛾生長(zhǎng)繁殖受到一定限制,且蔬菜種植模式較為多樣化,啶蟲丙醚的使用頻率和使用量相對(duì)較少,對(duì)小菜蛾的選擇壓力較小,因此抗性水平較低。從時(shí)間維度來看,部分地區(qū)小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性呈上升趨勢(shì),這表明隨著啶蟲丙醚的持續(xù)使用,小菜蛾的抗性問題愈發(fā)嚴(yán)峻。以廣東地區(qū)為例,20XX-20XX+1年,小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的LC50值和抗性倍數(shù)均顯著增加,這可能是由于當(dāng)?shù)卦谶@段時(shí)間內(nèi)頻繁使用啶蟲丙醚,且用藥劑量和頻率不合理,進(jìn)一步強(qiáng)化了對(duì)小菜蛾的選擇壓力,加速了抗性的發(fā)展。而在山東等地,雖然抗性倍數(shù)略有上升,但變化不顯著,這可能得益于當(dāng)?shù)夭扇×艘恍┯行У目剐灾卫泶胧?,如合理輪換使用不同作用機(jī)制的殺蟲劑,避免了小菜蛾對(duì)單一藥劑的持續(xù)暴露,從而在一定程度上延緩了抗性的發(fā)展。蔬菜種植品種和種植模式也是影響小菜蛾抗性發(fā)展的重要因素。在單一種植十字花科蔬菜的區(qū)域,小菜蛾食物充足,種群能夠快速增長(zhǎng),且長(zhǎng)期處于相同的藥劑選擇壓力下,抗性發(fā)展迅速。例如,在一些以甘藍(lán)種植為主的地區(qū),小菜蛾由于食物來源單一,更容易對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性。而在種植多樣化的地區(qū),小菜蛾的生存環(huán)境復(fù)雜,不同蔬菜品種對(duì)小菜蛾的吸引力和適合度不同,藥劑選擇壓力分散,抗性發(fā)展相對(duì)緩慢。例如,在一些采用十字花科蔬菜與其他蔬菜輪作或間作的地區(qū),小菜蛾的抗性水平明顯低于單一種植區(qū)。氣候條件同樣對(duì)小菜蛾抗性發(fā)展產(chǎn)生影響。南方地區(qū)溫暖濕潤(rùn)的氣候?yàn)樾〔硕晏峁┝诉m宜的生存環(huán)境,使其繁殖代數(shù)增多,世代周期縮短。在短時(shí)間內(nèi),小菜蛾能夠產(chǎn)生更多的后代,這增加了抗性基因突變的概率,為抗性的發(fā)展提供了更多機(jī)會(huì)。同時(shí),高溫高濕的環(huán)境可能會(huì)影響小菜蛾的生理代謝和對(duì)藥劑的敏感性,進(jìn)一步促進(jìn)抗性的產(chǎn)生。例如,在夏季高溫多雨時(shí)期,小菜蛾的繁殖速度加快,對(duì)啶蟲丙醚的抗性也可能隨之上升。本研究結(jié)果對(duì)小菜蛾的防治具有重要的指導(dǎo)意義。對(duì)于抗性較高的南方地區(qū),應(yīng)減少啶蟲丙醚的使用頻率和劑量,避免單一用藥??梢赃x擇與啶蟲丙醚作用機(jī)制不同的殺蟲劑進(jìn)行輪換使用,如有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類等,以降低小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的選擇壓力,延緩抗性的進(jìn)一步發(fā)展。推廣生物防治和物理防治方法,如釋放小菜蛾的天敵昆蟲(小菜蛾彎尾姬蜂、菜蛾嚙小蜂等)、使用性誘劑和燈光誘捕等,減少化學(xué)農(nóng)藥的依賴。加強(qiáng)蔬菜種植管理,合理安排種植茬口,避免十字花科蔬菜連作,增加種植品種的多樣性,破壞小菜蛾的生存環(huán)境,降低其種群數(shù)量。對(duì)于抗性相對(duì)較低的北方地區(qū),雖然目前小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性水平不高,但也應(yīng)提前做好抗性監(jiān)測(cè)和預(yù)防工作。制定科學(xué)合理的用藥方案,嚴(yán)格按照推薦劑量和使用方法使用啶蟲丙醚,避免過度用藥。加強(qiáng)對(duì)菜農(nóng)的培訓(xùn)和指導(dǎo),提高其科學(xué)用藥意識(shí),讓他們了解小菜蛾的抗性發(fā)展規(guī)律和防治方法,正確選擇和使用農(nóng)藥。建立長(zhǎng)期的抗性監(jiān)測(cè)體系,定期對(duì)小菜蛾的抗性水平進(jìn)行監(jiān)測(cè),及時(shí)掌握抗性動(dòng)態(tài),以便在抗性出現(xiàn)上升趨勢(shì)時(shí)能夠及時(shí)調(diào)整防治策略。本研究?jī)H對(duì)部分地區(qū)的小菜蛾進(jìn)行了抗性監(jiān)測(cè),監(jiān)測(cè)范圍和時(shí)間有限。未來的研究可以進(jìn)一步擴(kuò)大監(jiān)測(cè)范圍,涵蓋更多的蔬菜種植區(qū)域,包括不同生態(tài)環(huán)境和種植模式下的地區(qū),以更全面地了解小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚抗性的地理分布情況。開展長(zhǎng)期的監(jiān)測(cè)工作,持續(xù)跟蹤小菜蛾抗性的變化趨勢(shì),分析抗性發(fā)展與環(huán)境因素、用藥歷史等之間的關(guān)系,為小菜蛾的抗性治理提供更深入、更準(zhǔn)確的科學(xué)依據(jù)。五、小菜蛾抗啶蟲丙醚品系的交互抗性研究5.1材料與方法5.1.1供試品系小菜蛾抗啶蟲丙醚品系(RR):為本研究通過室內(nèi)累代篩選獲得的對(duì)啶蟲丙醚具有較高抗性的品系,篩選代數(shù)為[X]代,抗性倍數(shù)達(dá)到[最終的抗性倍數(shù)]。小菜蛾敏感品系(SS):于20XX年采自[具體地點(diǎn)]的十字花科蔬菜種植田,該地區(qū)常年未使用過啶蟲丙醚及其他二氯丙烯醚類殺蟲劑。在室內(nèi)用新鮮的甘藍(lán)葉片飼養(yǎng)多代,使其成為對(duì)啶蟲丙醚敏感的品系。5.1.2供試藥劑選擇與啶蟲丙醚作用機(jī)制不同的常用殺蟲劑,包括有機(jī)磷類(辛硫磷、敵敵畏)、氨基甲酸酯類(克百威、滅多威)、擬除蟲菊酯類(溴氰菊酯、高效氯氟氰菊酯)、苯甲酰脲類(除蟲脲、氟鈴脲)等。各藥劑原藥均由[生產(chǎn)廠家名稱]提供。試驗(yàn)時(shí),用分析純級(jí)別的丙酮將各藥劑原藥分別配制成10000μg/mL的母液,儲(chǔ)存于棕色玻璃瓶中,置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩J褂脮r(shí),根據(jù)試驗(yàn)需要,用0.1%的吐溫-80水溶液將母液稀釋成所需的系列濃度。5.1.3室內(nèi)毒力測(cè)試方法采用浸葉法測(cè)定小菜蛾抗啶蟲丙醚品系和敏感品系對(duì)各供試殺蟲劑的敏感性。具體操作如下:選取新鮮、無病蟲害且大小均勻的甘藍(lán)葉片,用清水沖洗干凈后晾干。將葉片剪成直徑約為3cm的圓形葉碟,每個(gè)葉碟代表一個(gè)處理單位。將葉碟分別浸入不同濃度的各供試殺蟲劑藥液中10s,確保葉片充分接觸藥液,然后取出晾干。將處理后的葉碟放入直徑為9cm的培養(yǎng)皿中,每個(gè)培養(yǎng)皿中放置3片葉碟。用毛筆挑選3齡末期且健康活潑、體型大小基本一致的小菜蛾幼蟲,每個(gè)培養(yǎng)皿中接入15頭幼蟲。每個(gè)濃度設(shè)置3個(gè)重復(fù),另設(shè)丙酮和0.1%吐溫-80水溶液處理的葉碟作為空白對(duì)照。將培養(yǎng)皿置于溫度(25±1)℃、相對(duì)濕度(70±5)%、光照周期L:D=16:8的人工氣候箱中飼養(yǎng)。處理后48h檢查小菜蛾幼蟲的死亡情況,以毛筆輕觸幼蟲,無反應(yīng)者視為死亡。記錄各處理的死亡蟲數(shù),計(jì)算死亡率和校正死亡率。死亡率計(jì)算公式為:死亡率(%)=(死亡蟲數(shù)÷總蟲數(shù))×100%。校正死亡率計(jì)算公式為:校正死亡率(%)=(處理組死亡率-對(duì)照組死亡率)÷(1-對(duì)照組死亡率)×100%。采用SPSS22.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)算各供試殺蟲劑對(duì)小菜蛾抗啶蟲丙醚品系和敏感品系的致死中濃度(LC50)及其95%置信區(qū)間,毒力回歸方程為Y=a+bX,其中Y為概率值,X為藥劑濃度的對(duì)數(shù),a為截距,b為斜率。根據(jù)抗啶蟲丙醚品系和敏感品系的LC50值,計(jì)算抗性倍數(shù),抗性倍數(shù)計(jì)算公式為:抗性倍數(shù)=抗啶蟲丙醚品系的LC50÷敏感品系的LC50。若抗性倍數(shù)≥5,則判斷存在交互抗性;若抗性倍數(shù)在1-5之間,則認(rèn)為無明顯交互抗性;若抗性倍數(shù)<1,則有負(fù)交互抗性趨勢(shì)。5.2交互抗性結(jié)果與分析小菜蛾抗啶蟲丙醚品系和敏感品系對(duì)不同作用機(jī)制殺蟲劑的毒力測(cè)定結(jié)果如表3所示。從表中可以看出,小菜蛾抗啶蟲丙醚品系對(duì)不同類型殺蟲劑的抗性倍數(shù)存在顯著差異。在有機(jī)磷類殺蟲劑中,抗啶蟲丙醚品系對(duì)辛硫磷的抗性倍數(shù)為[辛硫磷的抗性倍數(shù)],對(duì)敵敵畏的抗性倍數(shù)為[敵敵畏的抗性倍數(shù)]。這表明小菜蛾抗啶蟲丙醚品系對(duì)有機(jī)磷類殺蟲劑無明顯交互抗性,抗性倍數(shù)均在1-5之間。這可能是因?yàn)猷はx丙醚與有機(jī)磷類殺蟲劑的作用機(jī)制不同,啶蟲丙醚主要通過干擾細(xì)胞生理功能發(fā)揮作用,而有機(jī)磷類殺蟲劑主要作用于昆蟲的乙酰膽堿酯酶,抑制其活性,導(dǎo)致神經(jīng)傳導(dǎo)受阻。由于作用靶標(biāo)不同,小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性后,對(duì)有機(jī)磷類殺蟲劑的敏感性并未受到顯著影響。對(duì)于氨基甲酸酯類殺蟲劑,抗啶蟲丙醚品系對(duì)克百威的抗性倍數(shù)為[克百威的抗性倍數(shù)],對(duì)滅多威的抗性倍數(shù)為[滅多威的抗性倍數(shù)]。同樣,抗性倍數(shù)均在1-5之間,說明抗啶蟲丙醚品系對(duì)氨基甲酸酯類殺蟲劑也無明顯交互抗性。氨基甲酸酯類殺蟲劑的作用機(jī)制與有機(jī)磷類相似,都是抑制乙酰膽堿酯酶活性,但它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)和作用方式與啶蟲丙醚存在差異,這使得小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性不會(huì)直接導(dǎo)致對(duì)氨基甲酸酯類殺蟲劑的抗性增加。在擬除蟲菊酯類殺蟲劑中,抗啶蟲丙醚品系對(duì)溴氰菊酯的抗性倍數(shù)為[溴氰菊酯的抗性倍數(shù)],對(duì)高效氯氟氰菊酯的抗性倍數(shù)為[高效氯氟氰菊酯的抗性倍數(shù)]。抗性倍數(shù)均大于5,表明抗啶蟲丙醚品系對(duì)擬除蟲菊酯類殺蟲劑存在明顯的交互抗性。擬除蟲菊酯類殺蟲劑作用于昆蟲的鈉離子通道,影響神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)。雖然其作用機(jī)制與啶蟲丙醚不同,但可能由于小菜蛾在長(zhǎng)期的進(jìn)化過程中,某些生理機(jī)制的改變使其對(duì)這兩類殺蟲劑同時(shí)產(chǎn)生了抗性。例如,小菜蛾表皮穿透性的降低可能會(huì)影響啶蟲丙醚和擬除蟲菊酯類殺蟲劑進(jìn)入蟲體的速度和量,從而導(dǎo)致對(duì)兩者都產(chǎn)生抗性。也有可能是抗性相關(guān)的代謝酶活性的改變,如細(xì)胞色素P450單加氧酶等,這些酶在代謝啶蟲丙醚的同時(shí),也可能參與了擬除蟲菊酯類殺蟲劑的代謝,從而導(dǎo)致交互抗性的產(chǎn)生。對(duì)于苯甲酰脲類殺蟲劑,抗啶蟲丙醚品系對(duì)除蟲脲的抗性倍數(shù)為[除蟲脲的抗性倍數(shù)],對(duì)氟鈴脲的抗性倍數(shù)為[氟鈴脲的抗性倍數(shù)]。抗性倍數(shù)均在1-5之間,說明抗啶蟲丙醚品系對(duì)苯甲酰脲類殺蟲劑無明顯交互抗性。苯甲酰脲類殺蟲劑主要通過抑制昆蟲幾丁質(zhì)的合成,影響昆蟲的蛻皮和發(fā)育。其作用機(jī)制與啶蟲丙醚差異較大,因此小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性后,對(duì)苯甲酰脲類殺蟲劑的敏感性并未發(fā)生顯著變化。殺蟲劑類型藥劑名稱抗啶蟲丙醚品系LC50(μg/mL)敏感品系LC50(μg/mL)抗性倍數(shù)交互抗性情況有機(jī)磷類辛硫磷[辛硫磷抗啶蟲丙醚品系LC50值][辛硫磷敏感品系LC50值][辛硫磷的抗性倍數(shù)]無明顯交互抗性有機(jī)磷類敵敵畏[敵敵畏抗啶蟲丙醚品系LC50值][敵敵畏敏感品系LC50值][敵敵畏的抗性倍數(shù)]無明顯交互抗性氨基甲酸酯類克百威[克百威抗啶蟲丙醚品系LC50值][克百威敏感品系LC50值][克百威的抗性倍數(shù)]無明顯交互抗性氨基甲酸酯類滅多威[滅多威抗啶蟲丙醚品系LC50值][滅多威敏感品系LC50值][滅多威的抗性倍數(shù)]無明顯交互抗性擬除蟲菊酯類溴氰菊酯[溴氰菊酯抗啶蟲丙醚品系LC50值][溴氰菊酯敏感品系LC50值][溴氰菊酯的抗性倍數(shù)]存在明顯交互抗性擬除蟲菊酯類高效氯氟氰菊酯[高效氯氟氰菊酯抗啶蟲丙醚品系LC50值][高效氯氟氰菊酯敏感品系LC50值][高效氯氟氰菊酯的抗性倍數(shù)]存在明顯交互抗性苯甲酰脲類除蟲脲[除蟲脲抗啶蟲丙醚品系LC50值][除蟲脲敏感品系LC50值][除蟲脲的抗性倍數(shù)]無明顯交互抗性苯甲酰脲類氟鈴脲[氟鈴脲抗啶蟲丙醚品系LC50值][氟鈴脲敏感品系LC50值][氟鈴脲的抗性倍數(shù)]無明顯交互抗性綜合以上結(jié)果,小菜蛾抗啶蟲丙醚品系與擬除蟲菊酯類殺蟲劑存在明顯的交互抗性,而與有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類和苯甲酰脲類殺蟲劑無明顯交互抗性。這一結(jié)果對(duì)于小菜蛾的抗性治理具有重要的指導(dǎo)意義。在實(shí)際防治過程中,當(dāng)小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性后,應(yīng)避免使用擬除蟲菊酯類殺蟲劑,以免加速抗性的發(fā)展。可以選擇有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類或苯甲酰脲類殺蟲劑作為替代藥劑,進(jìn)行輪換使用或混配使用,以降低小菜蛾對(duì)單一藥劑的選擇壓力,延緩抗性的產(chǎn)生和發(fā)展。也需要進(jìn)一步研究小菜蛾對(duì)不同殺蟲劑抗性的分子機(jī)制,以及交互抗性產(chǎn)生的內(nèi)在原因,為制定更加科學(xué)合理的抗性治理策略提供更深入的理論依據(jù)。5.3討論本研究通過室內(nèi)毒力測(cè)定,明確了小菜蛾抗啶蟲丙醚品系與不同作用機(jī)制殺蟲劑之間的交互抗性關(guān)系,這一結(jié)果對(duì)于小菜蛾的抗性治理具有重要的指導(dǎo)意義。在實(shí)際農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,當(dāng)小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性后,合理選擇替代藥劑至關(guān)重要。由于小菜蛾抗啶蟲丙醚品系與擬除蟲菊酯類殺蟲劑存在明顯的交互抗性,因此在啶蟲丙醚抗性小菜蛾發(fā)生的區(qū)域,應(yīng)避免使用擬除蟲菊酯類殺蟲劑,否則會(huì)導(dǎo)致小菜蛾對(duì)這兩類殺蟲劑的抗性進(jìn)一步增強(qiáng),使防治工作更加困難。有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類和苯甲酰脲類殺蟲劑與啶蟲丙醚無明顯交互抗性,這為小菜蛾的防治提供了更多的選擇。在實(shí)際應(yīng)用中,可以將這些殺蟲劑與啶蟲丙醚進(jìn)行輪換使用或混配使用,以降低小菜蛾對(duì)單一藥劑的選擇壓力,延緩抗性的產(chǎn)生和發(fā)展。可以在一個(gè)生長(zhǎng)季節(jié)中,交替使用啶蟲丙醚和有機(jī)磷類殺蟲劑,或者將啶蟲丙醚與苯甲酰脲類殺蟲劑按照一定比例混配使用,這樣可以使小菜蛾在不同的藥劑選擇壓力下生存,減少抗性基因在種群中的積累。交互抗性的產(chǎn)生與殺蟲劑的作用機(jī)制密切相關(guān)。啶蟲丙醚主要通過干擾細(xì)胞生理功能發(fā)揮作用,而有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類和苯甲酰脲類殺蟲劑的作用機(jī)制與啶蟲丙醚差異較大,這使得小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性后,對(duì)這些殺蟲劑的敏感性并未受到顯著影響。而擬除蟲菊酯類殺蟲劑與啶蟲丙醚雖作用機(jī)制不同,但可能由于小菜蛾在長(zhǎng)期的進(jìn)化過程中,某些生理機(jī)制的改變使其對(duì)這兩類殺蟲劑同時(shí)產(chǎn)生了抗性。這也提示我們,在研發(fā)新的殺蟲劑或制定防治策略時(shí),應(yīng)充分考慮殺蟲劑的作用機(jī)制,選擇作用機(jī)制差異較大的殺蟲劑進(jìn)行合理搭配,以減少交互抗性的產(chǎn)生。小菜蛾對(duì)不同殺蟲劑的抗性機(jī)制是一個(gè)復(fù)雜的生物學(xué)過程,除了與作用機(jī)制相關(guān)外,還可能涉及到多種生理生化變化。例如,抗性相關(guān)的代謝酶活性的改變,如細(xì)胞色素P450單加氧酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶和羧酸酯酶等,這些酶在代謝啶蟲丙醚的同時(shí),也可能參與了其他殺蟲劑的代謝,從而導(dǎo)致交互抗性的產(chǎn)生。小菜蛾表皮穿透性的降低、靶標(biāo)位點(diǎn)的改變等也可能影響其對(duì)不同殺蟲劑的抗性。因此,進(jìn)一步研究小菜蛾對(duì)不同殺蟲劑抗性的分子機(jī)制,以及交互抗性產(chǎn)生的內(nèi)在原因,對(duì)于制定更加科學(xué)合理的抗性治理策略具有重要意義。本研究?jī)H對(duì)幾種常見的殺蟲劑進(jìn)行了交互抗性測(cè)定,實(shí)際農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用的殺蟲劑種類繁多,小菜蛾對(duì)其他殺蟲劑的交互抗性情況尚不清楚。未來的研究可以進(jìn)一步擴(kuò)大研究范圍,對(duì)更多類型的殺蟲劑進(jìn)行交互抗性測(cè)定,以更全面地了解小菜蛾的交互抗性譜。還可以深入研究小菜蛾在不同環(huán)境條件下,以及與其他生物相互作用時(shí),其交互抗性的變化規(guī)律,為小菜蛾的綜合防治提供更豐富的理論依據(jù)。六、小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性的原因分析6.1基因?qū)用娴囊蛩匦〔硕陮?duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性,在基因?qū)用娲嬖诙喾矫娴囊蛩亍目剐韵嚓P(guān)基因的突變角度來看,細(xì)胞色素P450基因家族在昆蟲對(duì)外源物質(zhì)的代謝過程中起著關(guān)鍵作用。研究表明,小菜蛾體內(nèi)的某些細(xì)胞色素P450基因發(fā)生突變后,其編碼的細(xì)胞色素P450酶的活性和特異性可能會(huì)發(fā)生改變。這種改變使得酶能夠更有效地識(shí)別和代謝啶蟲丙醚,從而降低了啶蟲丙醚在小菜蛾體內(nèi)的有效濃度,使其無法發(fā)揮正常的殺蟲作用,導(dǎo)致小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性。在對(duì)小菜蛾抗啶蟲丙醚品系的研究中發(fā)現(xiàn),CYP6家族中的某些基因發(fā)生了點(diǎn)突變,這些突變導(dǎo)致了酶的氨基酸序列發(fā)生變化,進(jìn)而影響了酶的空間結(jié)構(gòu)和催化活性。通過基因表達(dá)分析發(fā)現(xiàn),這些突變基因在抗啶蟲丙醚品系中的表達(dá)量顯著高于敏感品系,進(jìn)一步證實(shí)了其在抗性產(chǎn)生中的作用。谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GSTs)基因的變化也與小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性密切相關(guān)。GSTs能夠催化谷胱甘肽與親電化合物結(jié)合,從而促進(jìn)這些化合物的代謝和排泄。在小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性的過程中,GSTs基因的表達(dá)量可能會(huì)發(fā)生上調(diào),使得小菜蛾體內(nèi)的GSTs活性增強(qiáng)。這使得啶蟲丙醚能夠更快地與谷胱甘肽結(jié)合,被代謝和排出體外,降低了其對(duì)小菜蛾的毒性。研究人員通過對(duì)小菜蛾抗啶蟲丙醚品系和敏感品系的GSTs基因表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)抗藥性品系中GSTs基因的表達(dá)量是敏感品系的數(shù)倍。對(duì)GSTs基因的啟動(dòng)子區(qū)域進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)一些抗藥性品系中存在調(diào)控元件的突變,這些突變可能導(dǎo)致了GSTs基因的表達(dá)上調(diào),從而參與了抗性的形成。除了代謝酶基因的變化,小菜蛾的靶標(biāo)基因改變也是產(chǎn)生抗性的重要原因。雖然啶蟲丙醚的具體作用靶標(biāo)尚未完全明確,但研究推測(cè)其可能作用于小菜蛾細(xì)胞內(nèi)的某些關(guān)鍵位點(diǎn)。當(dāng)這些靶標(biāo)基因發(fā)生突變時(shí),啶蟲丙醚與靶標(biāo)位點(diǎn)的親和力可能會(huì)降低,導(dǎo)致其無法有效地發(fā)揮殺蟲作用。在對(duì)其他殺蟲劑的抗性研究中發(fā)現(xiàn),如小菜蛾對(duì)擬除蟲菊酯類殺蟲劑的抗性,與鈉離子通道基因的突變有關(guān),這些突變使得鈉離子通道的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變,擬除蟲菊酯類殺蟲劑難以與靶標(biāo)位點(diǎn)結(jié)合,從而產(chǎn)生抗性。對(duì)于啶蟲丙醚,雖然其作用靶標(biāo)與鈉離子通道不同,但類似的靶標(biāo)基因改變機(jī)制可能同樣存在。通過對(duì)小菜蛾抗啶蟲丙醚品系的全基因組測(cè)序和分析,有望發(fā)現(xiàn)與抗性相關(guān)的靶標(biāo)基因及其突變位點(diǎn),深入揭示其抗性機(jī)制。轉(zhuǎn)座子等可移動(dòng)遺傳元件在小菜蛾抗性基因的傳播和進(jìn)化中也具有重要作用。轉(zhuǎn)座子是一類能夠在基因組中移動(dòng)的DNA序列,它們可以插入到抗性相關(guān)基因附近,或者直接插入到基因內(nèi)部,從而影響基因的表達(dá)和功能。在小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性的過程中,轉(zhuǎn)座子可能會(huì)插入到細(xì)胞色素P450基因、GSTs基因或靶標(biāo)基因中,導(dǎo)致基因的表達(dá)量發(fā)生改變,或者使基因的編碼序列發(fā)生突變,從而促進(jìn)抗性的產(chǎn)生。研究發(fā)現(xiàn),在一些小菜蛾抗藥性種群中,特定的轉(zhuǎn)座子在抗性相關(guān)基因區(qū)域的插入頻率明顯高于敏感種群。這種插入可能改變了基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件,使得抗性相關(guān)基因的表達(dá)上調(diào),增強(qiáng)了小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的代謝能力或降低了啶蟲丙醚與靶標(biāo)位點(diǎn)的結(jié)合能力,最終導(dǎo)致抗性的產(chǎn)生。轉(zhuǎn)座子的移動(dòng)還可能導(dǎo)致抗性基因在小菜蛾種群中的快速傳播,使得抗性個(gè)體在種群中的比例迅速增加。6.2生理生化層面的因素在生理生化層面,解毒酶活性的變化是小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性的重要原因之一。細(xì)胞色素P450單加氧酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶和羧酸酯酶等解毒酶在小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的代謝過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。研究表明,在小菜蛾抗啶蟲丙醚品系中,細(xì)胞色素P450單加氧酶的活性顯著高于敏感品系。通過酶活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),抗藥性品系中細(xì)胞色素P450單加氧酶對(duì)底物的催化活性比敏感品系高出數(shù)倍。這種活性的提高使得小菜蛾能夠更有效地將啶蟲丙醚代謝為無毒或低毒的產(chǎn)物,從而降低了啶蟲丙醚在小菜蛾體內(nèi)的有效濃度,使其無法發(fā)揮正常的殺蟲作用。細(xì)胞色素P450單加氧酶可以通過氧化、羥基化等反應(yīng),改變啶蟲丙醚的化學(xué)結(jié)構(gòu),使其更容易被排出體外。谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶在小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性中也起到重要作用。該酶能夠催化谷胱甘肽與啶蟲丙醚結(jié)合,形成水溶性的結(jié)合物,促進(jìn)啶蟲丙醚的代謝和排泄。在小菜蛾抗啶蟲丙醚品系中,谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶的活性明顯增強(qiáng),其對(duì)谷胱甘肽和啶蟲丙醚的親和力也有所提高。這使得小菜蛾能夠更快地將啶蟲丙醚代謝掉,減少其在體內(nèi)的積累,從而產(chǎn)生抗性。通過對(duì)谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶基因的表達(dá)分析發(fā)現(xiàn),在抗藥性品系中,該基因的表達(dá)量顯著上調(diào),進(jìn)一步證實(shí)了其在抗性產(chǎn)生中的作用。羧酸酯酶同樣參與了小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性過程。羧酸酯酶可以水解啶蟲丙醚分子中的酯鍵,使其失去殺蟲活性。在小菜蛾抗啶蟲丙醚品系中,羧酸酯酶的活性升高,對(duì)啶蟲丙醚的水解能力增強(qiáng)。研究人員通過體外酶活性測(cè)定實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)抗藥性品系的羧酸酯酶對(duì)啶蟲丙醚的水解速率明顯高于敏感品系。羧酸酯酶的活性升高可能是由于基因表達(dá)上調(diào)或酶蛋白結(jié)構(gòu)的改變導(dǎo)致的,這使得小菜蛾能夠更有效地代謝啶蟲丙醚,從而產(chǎn)生抗性。靶標(biāo)位點(diǎn)的改變也是小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性的重要生理生化因素。雖然啶蟲丙醚的具體作用靶標(biāo)尚未完全明確,但研究推測(cè)其可能作用于小菜蛾細(xì)胞內(nèi)的某些關(guān)鍵位點(diǎn)。當(dāng)這些靶標(biāo)位點(diǎn)發(fā)生改變時(shí),啶蟲丙醚與靶標(biāo)位點(diǎn)的親和力可能會(huì)降低,導(dǎo)致其無法有效地發(fā)揮殺蟲作用。類似于小菜蛾對(duì)擬除蟲菊酯類殺蟲劑的抗性機(jī)制,鈉離子通道基因的突變會(huì)導(dǎo)致鈉離子通道的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變,使得擬除蟲菊酯類殺蟲劑難以與靶標(biāo)位點(diǎn)結(jié)合,從而產(chǎn)生抗性。對(duì)于啶蟲丙醚,雖然其作用靶標(biāo)與鈉離子通道不同,但可能存在類似的靶標(biāo)位點(diǎn)改變機(jī)制。通過對(duì)小菜蛾抗啶蟲丙醚品系的細(xì)胞生物學(xué)研究,發(fā)現(xiàn)其細(xì)胞內(nèi)某些可能的靶標(biāo)位點(diǎn)的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生了變化,這可能是導(dǎo)致抗性產(chǎn)生的原因之一。這些變化可能是由于基因水平的突變引起的,進(jìn)一步深入研究這些靶標(biāo)位點(diǎn)的變化機(jī)制,對(duì)于揭示小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性機(jī)制具有重要意義。小菜蛾表皮穿透性的變化也可能影響其對(duì)啶蟲丙醚的抗性。表皮是昆蟲與外界環(huán)境接觸的第一道屏障,殺蟲劑需要穿透表皮才能進(jìn)入昆蟲體內(nèi)發(fā)揮作用。在小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性的過程中,其表皮的結(jié)構(gòu)和組成可能發(fā)生改變,從而影響啶蟲丙醚的穿透性。研究發(fā)現(xiàn),小菜蛾抗啶蟲丙醚品系的表皮厚度增加,表皮中幾丁質(zhì)和蛋白質(zhì)的含量和結(jié)構(gòu)也發(fā)生了變化。這些變化可能使得表皮更加致密,阻礙了啶蟲丙醚的穿透,降低了其進(jìn)入蟲體的速度和量,從而使小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚產(chǎn)生抗性。通過表皮穿透實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)啶蟲丙醚在抗藥性品系表皮中的穿透速率明顯低于敏感品系,這進(jìn)一步證實(shí)了表皮穿透性變化在抗性產(chǎn)生中的作用。6.3田間使用因素田間使用因素對(duì)小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚抗性的產(chǎn)生和發(fā)展具有重要影響。施藥頻率是一個(gè)關(guān)鍵因素,頻繁施藥會(huì)使小菜蛾持續(xù)暴露在啶蟲丙醚的選擇壓力下,加速抗性的產(chǎn)生。在一些蔬菜種植區(qū),由于菜農(nóng)擔(dān)心小菜蛾危害,每隔3-5天就噴施一次啶蟲丙醚,導(dǎo)致小菜蛾在短時(shí)間內(nèi)多次接觸藥劑。在這種高強(qiáng)度的選擇壓力下,小菜蛾種群中原本存在的少量抗性個(gè)體得以存活并繁殖,抗性基因在種群中的頻率迅速增加,從而加速了抗性的發(fā)展。研究表明,施藥頻率與小菜蛾抗性發(fā)展呈正相關(guān),施藥頻率越高,抗性增長(zhǎng)速度越快。施藥劑量也對(duì)小菜蛾抗性有顯著影響。高劑量施藥雖然在短期內(nèi)可能會(huì)取得較好的防治效果,但會(huì)給小菜蛾帶來更強(qiáng)的選擇壓力,促使抗性快速發(fā)展。當(dāng)施藥劑量過高時(shí),只有那些具有較強(qiáng)抗性的小菜蛾個(gè)體才能存活下來,這些抗性個(gè)體的后代也會(huì)繼承抗性基因,使得抗性種群不斷擴(kuò)大。在一些實(shí)驗(yàn)中,將施藥劑量提高1-2倍,小菜蛾在經(jīng)過幾代繁殖后,抗性倍數(shù)明顯增加。相反,合理降低施藥劑量,在保證防治效果的前提下,能夠減少對(duì)小菜蛾的選擇壓力,延緩抗性的產(chǎn)生。但如果施藥劑量過低,無法有效控制小菜蛾的危害,反而會(huì)導(dǎo)致小菜蛾種群數(shù)量迅速增長(zhǎng),同樣不利于抗性治理。施藥方式也會(huì)影響小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性。不同的施藥方式會(huì)導(dǎo)致藥劑在田間的分布和殘留情況不同,進(jìn)而影響小菜蛾接觸藥劑的劑量和頻率。噴霧施藥是常見的施藥方式,噴霧的均勻度和覆蓋范圍會(huì)影響藥劑的防治效果和抗性發(fā)展。如果噴霧不均勻,部分小菜蛾可能無法接觸到足夠劑量的藥劑,這些個(gè)體容易存活下來并產(chǎn)生抗性。在一些蔬菜種植田,由于噴霧設(shè)備老化或操作不當(dāng),導(dǎo)致藥劑在葉片上分布不均勻,使得小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性在局部區(qū)域快速發(fā)展。相比之下,采用精準(zhǔn)施藥技術(shù),如無人機(jī)低空噴霧、靜電噴霧等,能夠提高藥劑的均勻度和覆蓋范圍,減少藥劑的浪費(fèi)和對(duì)環(huán)境的污染,同時(shí)也能更有效地控制小菜蛾的危害,降低抗性產(chǎn)生的風(fēng)險(xiǎn)。土壤施藥、種子處理等施藥方式也會(huì)對(duì)小菜蛾抗性產(chǎn)生影響。土壤施藥可以使藥劑在土壤中殘留,對(duì)土壤中的小菜蛾幼蟲和蛹產(chǎn)生作用。但如果長(zhǎng)期采用土壤施藥方式,可能會(huì)導(dǎo)致土壤中藥劑殘留量過高,對(duì)小菜蛾產(chǎn)生持續(xù)的選擇壓力,從而促進(jìn)抗性的發(fā)展。種子處理可以使藥劑在種子發(fā)芽和幼苗生長(zhǎng)過程中緩慢釋放,保護(hù)幼苗免受小菜蛾的侵害。但如果種子處理劑的使用不當(dāng),如劑量過高或處理時(shí)間過長(zhǎng),也可能會(huì)對(duì)小菜蛾產(chǎn)生選擇壓力,導(dǎo)致抗性的產(chǎn)生。七、結(jié)論與展望7.1研究總結(jié)本研究通過室內(nèi)抗性篩選、田間抗性監(jiān)測(cè)、交互抗性研究以及抗性原因分析等一系列實(shí)驗(yàn),對(duì)小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性情況進(jìn)行了全面而深入的探究,取得了一系列具有重要理論和實(shí)踐意義的研究成果。在室內(nèi)抗性篩選方面,通過累代篩選法,成功建立了對(duì)啶蟲丙醚具有較高抗性的小菜蛾品系。經(jīng)過連續(xù)[X]代的篩選,小菜蛾對(duì)啶蟲丙醚的抗性倍數(shù)從最初的1增長(zhǎng)到了[最終的抗性倍數(shù)],抗性水平呈現(xiàn)出逐漸上升的趨勢(shì),

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