2024-2025學(xué)年高二生物人教版選擇性必修3同步練習(xí) 第1章 第2節(jié) 第2課時(shí) 微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)

第2課時(shí)微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)課標(biāo)內(nèi)容(1)闡明微生物選擇培養(yǎng)的原理。(2)概述測(cè)定微生物數(shù)量的方法。(3)進(jìn)行土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)。知識(shí)點(diǎn)1選擇培養(yǎng)基及微生物的選擇培養(yǎng)1.選擇培養(yǎng)基(1)自然界中目的菌株的篩選①依據(jù)：根據(jù)目的菌株對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)環(huán)境中去尋找。②實(shí)例：PCR技術(shù)中用到的耐高溫的DNA聚合酶就是從熱泉中篩選出來的水生棲熱菌中分離出來的。(2)實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選①原理：人為提供有利于目的菌生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)。②選擇培養(yǎng)基：允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。2.微生物的選擇培養(yǎng)(稀釋涂布平板法)(1)系列稀釋操作將10g土樣加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。取1mL上清液加入盛有9mL無菌水的試管中，依次等比稀釋。(2)涂布平板操作(3)培養(yǎng)分離：待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后，將平板倒置，放入30～37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1～2d。在涂布有合適濃度菌液的平板上就可以觀察到分離的單菌落。知識(shí)點(diǎn)2微生物的數(shù)量測(cè)定1.稀釋涂布平板法2.顯微鏡直接計(jì)數(shù)法(1)選擇分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基。(×)提示：選擇分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基具有分離、鑒定作用。(2)在用涂布器涂布平板時(shí)，為了操作方便可完全打開培養(yǎng)皿蓋。(×)提示：為了防止雜菌污染，不能完全打開皿蓋。(3)在同一稀釋度下，至少要涂布3個(gè)平板。(√)(4)當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，選取菌落數(shù)為30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。(√)(5)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)就是活菌的實(shí)際數(shù)目。(×)提示：由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少。一、選擇培養(yǎng)基及微生物的選擇培養(yǎng)【情境探疑】1.通常1g土壤中有幾億到幾百億個(gè)土壤微生物，其中，細(xì)菌的數(shù)量最多，能分解尿素的細(xì)菌是其中的一部分。如何設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的配方，從而將土壤稀釋液中能分解尿素的細(xì)菌分離出來？提示：設(shè)計(jì)一種選擇培養(yǎng)基，以尿素作為唯一氮源，可以將分解尿素的細(xì)菌分離出來。2.用平板劃線法接種培養(yǎng)結(jié)果的圖片如圖。請(qǐng)結(jié)合圖片分析，平板劃線法能否達(dá)到對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)的目的？為什么？提示：不能，平板劃線法最開始的劃線很可能菌類會(huì)長(zhǎng)成一片，導(dǎo)致無法計(jì)數(shù)，此外灼燒接種環(huán)的時(shí)候也會(huì)殺死一部分菌類。3.當(dāng)菌液稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)單菌落來源于一個(gè)活菌。用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)結(jié)果的圖片如圖。與平板劃線法相比，為什么稀釋涂布平板法可以用于細(xì)菌的計(jì)數(shù)？提示：稀釋涂布平板法會(huì)進(jìn)行等比稀釋，在合適的稀釋倍數(shù)下，均勻涂布得到的菌落互不接觸，可以確定菌落的密度，再通過計(jì)算可以得知原菌液的細(xì)菌數(shù)量。平板劃線法和稀釋涂布平板法的比較【典例應(yīng)用】例1以下有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的敘述，錯(cuò)誤的是()A.在大腸桿菌的分離和培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，劃線后蓋好培養(yǎng)皿，再將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)B.分離土壤中的纖維素分解菌，一般先進(jìn)行選擇培養(yǎng)，以增大細(xì)菌濃度C.在釀酒生產(chǎn)中，常向發(fā)酵罐中加少量尿素，其目的是作為氮源，用于酵母菌合成蛋白質(zhì)和核酸D.不能用稀釋涂布平板法來測(cè)定土壤溶液中某活菌數(shù)目答案D解析在大腸桿菌的分離和培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，劃線后蓋好培養(yǎng)皿，再將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)，A正確；分離某種細(xì)菌，一般先用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，以增大目的細(xì)菌濃度，B正確；在釀酒生產(chǎn)中，常向發(fā)酵罐中加少量尿素，其目的是作為氮源，用于酵母菌合成蛋白質(zhì)和核酸，C正確；稀釋涂布平板法可以用來測(cè)定土壤溶液中某活菌數(shù)目，D錯(cuò)誤。例2如圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素的細(xì)菌的過程示意圖。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.在配制步驟②③的培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)先調(diào)pH后濕熱滅菌B.步驟③純化分解尿素的細(xì)菌的原理是將聚集的細(xì)菌分散，以獲得單菌落C.步驟③采用稀釋涂布平板法接種，并需向牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入尿素D.步驟④挑取③中不同種的菌落分別接種，比較不同種細(xì)菌分解尿素的能力答案C解析步驟③篩選分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基中，應(yīng)以尿素為唯一氮源，不能含有其他氮源，不能加入牛肉膏蛋白胨，C錯(cuò)誤。二、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)【情境探疑】1.原理：絕大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，可以從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌。2.方法步驟(1)實(shí)驗(yàn)中所用接種方法是________，選擇上述方法的理由是____________________________________________________________________。提示：稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法能用于微生物計(jì)數(shù)，而平板劃線法不能用于微生物計(jì)數(shù)。(2)實(shí)驗(yàn)中能以菌落數(shù)表示活菌數(shù)的原因是___________________________________________________________________________________________________。該實(shí)驗(yàn)所用計(jì)數(shù)方法的統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際值________(填“大”或“小”)。若用顯微鏡進(jìn)行直接計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際值________(填“大”或“小”)。提示：當(dāng)樣品稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，培養(yǎng)基上的一個(gè)單菌落來源于一個(gè)活菌小大(3)某同學(xué)將1mL土壤樣液稀釋100倍，在3個(gè)平板上用稀釋涂布平板法分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、57和58，則土壤樣液中活菌數(shù)大約為________個(gè)/L。提示：5.7×107(4)如何檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)中所配制的選擇培養(yǎng)基能發(fā)揮選擇作用？____________________________________________________________________提示：將一接種了菌液的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與接種了菌液的選擇培養(yǎng)基一起培養(yǎng)。(5)利用稀釋涂布平板法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，常常將同一稀釋度的稀釋液接種三個(gè)平板，分析這樣做的目的。________________________________________________________________________________________________________________________________________提示：該做法是設(shè)置重復(fù)實(shí)驗(yàn)，目的是增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力和準(zhǔn)確性。將同一稀釋度的稀釋液接種三個(gè)平板，經(jīng)涂布、培養(yǎng)，計(jì)算出菌落平均數(shù)，可使結(jié)果更接近真實(shí)值。3.進(jìn)一步探究【資料】酚紅指示劑是一種常用的酸堿指示劑，在pH為6.6～8.0時(shí)顯示橙色，pH低于6.6呈現(xiàn)黃色，pH高于8.4呈現(xiàn)紅色。分解尿素的細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶，脲酶將尿素分解成了氨，培養(yǎng)基pH升高，可使酚紅指示劑變紅。(1)實(shí)驗(yàn)中在以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)上生長(zhǎng)的菌落________(填“是”“不是”或“不一定是”)分解尿素的細(xì)菌，原因是__________________________________________________________________________________________________。提示：不一定是固氮細(xì)菌利用氮?dú)鉃榈矗材茉谝阅蛩貫槲ㄒ坏吹呐囵B(yǎng)基上生長(zhǎng)(2)結(jié)合所給資料，說出如何對(duì)分離的菌種進(jìn)行鑒定？________________________________________________________________________________________________________________________________________提示：在以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑。1.兩種微生物計(jì)數(shù)方法的比較2.“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析【典例應(yīng)用】例3稀釋涂布平板法不僅是分離和純化微生物的重要方法，也是測(cè)定微生物數(shù)量的重要方法。用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)時(shí)應(yīng)()A.隨機(jī)抽取某個(gè)稀釋度的培養(yǎng)基，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)B.將不同稀釋度的3個(gè)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)求和C.將相同稀釋度的全部培養(yǎng)基上的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)D.選擇相同稀釋度下菌落數(shù)為30～300的3個(gè)培養(yǎng)基進(jìn)行計(jì)數(shù)后求平均值答案D解析用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí)，同一稀釋度下，至少要涂布3個(gè)平板，確定培養(yǎng)基未被污染后，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，求其平均值，再通過計(jì)算得出土壤中的細(xì)菌數(shù)。例4(多選)(2023·遼寧丹東高三一模)下圖所示為分離某種以尿素為氮源的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)過程，下列敘述正確的是()A.土樣從有哺乳動(dòng)物尿液的地方取，獲得目的菌種的概率很高B.為驗(yàn)證尿素固體培養(yǎng)基具有選擇作用，可用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基做對(duì)照C.將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組37℃恒溫培養(yǎng)24～48h時(shí)，需將平板倒置D.在尿素固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的細(xì)菌都是以尿素為氮源的細(xì)菌答案ABC解析在含哺乳動(dòng)物尿液的土壤中有較多含脲酶的細(xì)菌，因此土樣從有哺乳動(dòng)物尿液的地方取，獲得目的菌種的概率很高，A正確；取不同稀釋倍數(shù)的土壤稀釋液各0.1mL，分別涂布于牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基、尿素固體培養(yǎng)基上，其中牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基是對(duì)照，B正確；將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組37℃恒溫培養(yǎng)24～48h時(shí)，需將平板倒置，C正確；在尿素固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的細(xì)菌大多數(shù)是以尿素為氮源的細(xì)菌，可能還有一些可以利用空氣中氮的微生物等，D錯(cuò)誤。思維導(dǎo)圖晨讀必背1.測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計(jì)活菌的數(shù)目，但統(tǒng)計(jì)結(jié)果往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少。2.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用以尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基分離能分解尿素的細(xì)菌。3.為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)；在同一稀釋度下，應(yīng)至少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出平均值。隨堂檢測(cè)1.研究人員利用無機(jī)鹽、瓊脂和石油配制培養(yǎng)基，欲培養(yǎng)出石油降解菌，以修復(fù)被石油污染的土壤。下列相關(guān)敘述中，錯(cuò)誤的是()A.這種培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基B.這種培養(yǎng)基的唯一碳源是石油C.能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物可能是石油降解菌D.石油降解菌在未被石油污染的土壤中含量較高答案D解析分離獲得能降解石油的菌株的關(guān)鍵是用以石油作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，A、B正確；由于該培養(yǎng)基以石油作為唯一碳源，能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物可能是石油降解菌，有些以空氣中二氧化碳為碳源的微生物也能在該培養(yǎng)基上生存，C正確；石油降解菌在被石油污染的土壤中含量較高，D錯(cuò)誤。2.(2023·江蘇泰州高三期末)稀釋涂布平板法是常用的微生物培養(yǎng)方法，下列相關(guān)敘述正確的是()A.滅菌鍋中取出的培養(yǎng)基應(yīng)趁燙時(shí)倒平板，如此可對(duì)培養(yǎng)皿滅菌B.稀釋涂布平板法不可用于微生物的分離，可用于微生物的計(jì)數(shù)C.用此法估測(cè)的數(shù)值往往偏小，應(yīng)以菌落數(shù)最多的平板計(jì)數(shù)為準(zhǔn)D.稀釋涂布平板法分離到的單菌落需進(jìn)一步純化，可用平板劃線法答案D解析滅菌鍋中取出的培養(yǎng)基應(yīng)冷卻至50℃左右時(shí)倒平板，A錯(cuò)誤；稀釋涂布平板法既可用于微生物的分離，也可用于微生物的計(jì)數(shù)，B錯(cuò)誤；當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少。一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；稀釋涂布平板法分離到的單菌落仍需進(jìn)一步劃線純化，以獲得純種，D正確。3.(多選)(2023·江蘇徐州高二檢測(cè))丙草胺是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長(zhǎng)。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對(duì)其計(jì)數(shù)(如下圖所示)，以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.提供適宜的溫度，將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，有利于降解菌的生長(zhǎng)繁殖B.利用該方法計(jì)數(shù)的結(jié)果往往比顯微鏡直接計(jì)數(shù)法大C.配制以丙草胺為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，可以提高降解菌的濃度D.5號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×109個(gè)答案AB解析培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，應(yīng)該將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性，A錯(cuò)誤；該計(jì)數(shù)方法為稀釋涂布平板法，由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，故計(jì)數(shù)結(jié)果比顯微鏡直接計(jì)數(shù)法小，B錯(cuò)誤；若以丙草胺作為唯一氮源，則只有具有降解丙草胺能力的降解菌能夠存活，故可以提高降解菌的濃度，C正確；根據(jù)5號(hào)試管的數(shù)據(jù)可知，每克土壤中菌株數(shù)為(168＋175＋167)÷3×105×100＝1.7×109個(gè)，D正確。4.分解尿素的微生物廣泛存在于農(nóng)田等土壤中，某生物實(shí)驗(yàn)小組嘗試對(duì)分解尿素的微生物進(jìn)行分離與計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答下列問題：(1)分解尿素的微生物能產(chǎn)生________酶；配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)以________作為唯一氮源。(2)該小組在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是_____________________________________________________________________________________________________________________________________；然后將1mL樣液稀釋10000倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別涂布0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板的菌落數(shù)分別為39、42和45。據(jù)此可得出每毫升樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為________個(gè)。(3)微生物的培養(yǎng)與觀察①培養(yǎng)：不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)________和培養(yǎng)________。②觀察：每隔24h統(tǒng)計(jì)一次________數(shù)目，最后選取菌落數(shù)目________時(shí)的記錄作為結(jié)果。答案(1)脲尿素(2)檢測(cè)平板滅菌是否合格4.2×106(3)①溫度時(shí)間②菌落穩(wěn)定解析(1)分解尿素的微生物能產(chǎn)生脲酶；配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)以尿素作為唯一氮源。(2)在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時(shí)間，其目的是檢測(cè)平板滅菌是否合格。每毫升樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)＝某一稀釋度下培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)÷涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積×稀釋倍數(shù)＝(39＋42＋45)÷3÷0.1×10000＝4.2×106(個(gè))。(3)不同種類的微生物，在培養(yǎng)時(shí)往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間，在培養(yǎng)過程中，可以每隔24h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，最后選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果。eq\a\vs4\al(課時(shí)精練)(時(shí)間：30分鐘)【基礎(chǔ)對(duì)點(diǎn)】知識(shí)點(diǎn)1選擇培養(yǎng)基及微生物的選擇培養(yǎng)1.某些土壤細(xì)菌可將尿素[CO(NH2)2]分解為CO2和NH3供植物吸收和利用，但分解物CO2不能為該菌提供營(yíng)養(yǎng)。下列關(guān)于配制分離這一菌種的選擇培養(yǎng)基的成分符合要求的是()A.僅尿素 B.尿素＋葡萄糖C.僅葡萄糖 D.牛肉膏＋蛋白胨答案B解析根據(jù)題意可知，該土壤細(xì)菌是異養(yǎng)型微生物，要配制分離這一菌種的選擇培養(yǎng)基需要含碳有機(jī)物作為碳源，尿素作為唯一氮源，B符合要求。2.稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)的一種常用的接種方法。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.操作中需要將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋B.不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單菌落C.需將不同稀釋濃度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面D.操作過程中對(duì)培養(yǎng)基和涂布器等均需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理答案B解析稀釋涂布平板法操作中需要將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋，以獲得單菌落，A正確；只有稀釋度足夠高的菌液才可在培養(yǎng)基表面形成單菌落，若稀釋度不夠高，細(xì)胞聚集在一起，得不到單菌落，B錯(cuò)誤；需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面，C正確；操作過程中對(duì)培養(yǎng)基和涂布器等均需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理，以防雜菌污染，D正確。3.微生物的接種方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，下列關(guān)于兩者區(qū)別的說法，正確的是()類別平板劃線法稀釋涂布平板法①需要接種環(huán)(灼燒滅菌)需要涂布器(酒精消毒)②無須對(duì)菌液進(jìn)行梯度稀釋對(duì)菌液進(jìn)行系列梯度稀釋③能純化微生物，不可計(jì)數(shù)既能純化微生物，又能計(jì)數(shù)④最后的劃線區(qū)域一定出現(xiàn)單菌落稀釋倍數(shù)足夠大的菌液，涂布的平板才會(huì)出現(xiàn)單菌落A.②④ B.③④C.①④ D.②③答案D解析稀釋涂布平板法用到的涂布器進(jìn)行酒精浸泡消毒后要在涂布平板前進(jìn)行灼燒滅菌，①錯(cuò)誤；平板劃線法不需要對(duì)菌液進(jìn)行梯度稀釋，稀釋涂布平板法需要對(duì)菌液進(jìn)行系列梯度稀釋，②正確；平板劃線法不能計(jì)算出菌液中的活菌數(shù)，稀釋涂布平板法可計(jì)算菌液中的活菌數(shù)，二者都可純化微生物，③正確；如果劃線操作不規(guī)范，平板劃線的最后劃線區(qū)域不一定會(huì)出現(xiàn)單菌落，④錯(cuò)誤。4.在篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基中加入剛果紅染料，研究者觀察到幾個(gè)有透明圈的菌落。據(jù)圖分析正確的是()A.透明圈內(nèi)的剛果紅染料已被分解B.菌落②中的菌株降解纖維素能力最強(qiáng)C.圖中菌落可能是細(xì)菌也可能是真菌D.圖中培養(yǎng)基可用牛肉膏、蛋白胨配制答案C解析根據(jù)分析可知，透明圈不顯紅色的原因是其中的纖維素已被分解，A錯(cuò)誤；菌落①形成的透明圈直徑與菌落直徑之比最大，說明菌落①降解纖維素能力最強(qiáng)，B錯(cuò)誤；根據(jù)題干信息不能判斷圖中菌落的微生物類型，可能是細(xì)菌也可能是真菌，C正確；圖中培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源，不可用牛肉膏、蛋白胨配制，D錯(cuò)誤。知識(shí)點(diǎn)2微生物的數(shù)量測(cè)定5.(2023·江蘇泰州高三期末)研究小組利用稀釋涂布平板法來估測(cè)大腸桿菌的數(shù)量，每一個(gè)濃度涂布四個(gè)平板。下列關(guān)于操作步驟的敘述，正確的是()A.因?yàn)閷?shí)驗(yàn)前后形成對(duì)照，因此本實(shí)驗(yàn)不必設(shè)置空白對(duì)照組B.涂布前將蘸有少量酒精的涂布器引燃，待涂布器冷卻后再涂布C.為避免混淆，應(yīng)在培養(yǎng)皿的皿蓋上做標(biāo)記，并將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)D.用此法估測(cè)的數(shù)值往往偏小，故應(yīng)以菌落數(shù)最多平板計(jì)數(shù)為準(zhǔn)答案B解析需要一個(gè)空白的培養(yǎng)基作對(duì)照，以判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染，A錯(cuò)誤；涂布器滅菌時(shí)，將蘸有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8～10s再涂布，B正確；用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底，C錯(cuò)誤；當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，菌落密度過大會(huì)影響結(jié)果的準(zhǔn)確性，D錯(cuò)誤。6.(2023·河南駐馬店高二檢測(cè))下圖中甲是稀釋涂布平板法中的部分操作，乙是平板劃線法的操作結(jié)果。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.甲中涂布前要將涂布器灼燒，冷卻后才能接觸菌液B.若甲中的稀釋倍數(shù)僅為102，則所得的菌落不一定是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成的C.乙培養(yǎng)皿中所得的菌落都符合要求D.乙中的連續(xù)劃線的起點(diǎn)是上一次劃線的末端答案C解析甲中涂布前要將涂布器灼燒滅菌，冷卻后才能接觸菌液，A正確；對(duì)于濃度較高的菌液，若甲中的稀釋倍數(shù)僅為102，則所得的菌落不一定是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成的，B正確；平板劃線法中在最后一次劃線的末端形成的菌落才可能是由單一細(xì)胞或孢子繁殖而成的，C錯(cuò)誤；乙中的連續(xù)劃線的起點(diǎn)是上一次劃線的末端，這樣能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減小，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落，D正確。7.平板劃線法和稀釋涂布平板法是純化微生物的兩種常用方法，下列描述正確的是()A.都要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋B.平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作C.稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)D.稀釋涂布平板法可用于微生物的純化和計(jì)數(shù)，而平板劃線法只能用于微生物的分離，不能計(jì)數(shù)答案D解析平板劃線法不需要進(jìn)行梯度稀釋，A、B錯(cuò)誤；稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液滴加到固體培養(yǎng)基的表面，然后用涂布器將菌液均勻涂布在培養(yǎng)基表面進(jìn)行培養(yǎng)，C錯(cuò)誤；稀釋涂布平板法可用于微生物的純化和計(jì)數(shù)，平板劃線法只能用于微生物的分離，不能計(jì)數(shù)，D正確。8.下列有關(guān)稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法的敘述，錯(cuò)誤的是()A.利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)屬于顯微鏡直接計(jì)數(shù)法，其缺點(diǎn)是不能區(qū)分死菌與活菌B.兩種計(jì)數(shù)方法，其統(tǒng)計(jì)值與實(shí)際值相比，均有差異，但差異原因不同C.兩種計(jì)數(shù)方法均能在計(jì)數(shù)的同時(shí)觀察到所研究微生物的形態(tài)特征D.當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，一般選取菌落數(shù)在30～300的且差異不大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)答案C解析顯微鏡直接計(jì)數(shù)法無法區(qū)分死菌和活菌，A正確；稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，故而統(tǒng)計(jì)值比實(shí)際值?。伙@微鏡直接計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)時(shí)不能區(qū)分死菌和活菌，故測(cè)定的微生物數(shù)量往往大于實(shí)際的活菌數(shù)，因此兩種計(jì)數(shù)方法其統(tǒng)計(jì)值與實(shí)際值相比，均有差異，但差異原因不同，B正確；稀釋涂布平板法觀察到的是菌落的形態(tài)特征，而不是微生物的形態(tài)特征，顯微鏡直接計(jì)數(shù)法觀察到的是微生物的形態(tài)特征，C錯(cuò)誤?！揪C合提升】9.(2023·重慶八中月考)某興趣小組在校園土壤中取樣，進(jìn)行“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)。小明從稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中篩選出約120個(gè)菌落，而其他同學(xué)只篩選出約40個(gè)菌落。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.小明出現(xiàn)這種結(jié)果的可能原因是和其他同學(xué)取樣的土壤不同B.要證明培養(yǎng)基是否受到污染，可將小明配制的培養(yǎng)基不加土樣進(jìn)行培養(yǎng)C.當(dāng)稀釋倍數(shù)太小時(shí)，可能由于菌落重疊而導(dǎo)致計(jì)數(shù)結(jié)果偏小D.在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可初步鑒定尿素分解菌答案D解析小明篩選出的菌落數(shù)明顯比其他同學(xué)多，出現(xiàn)這種結(jié)果的可能原因是和其他同學(xué)取樣的土壤不同，也有可能是培養(yǎng)基混入其他氮源或培養(yǎng)基被污染，A正確；要證明培養(yǎng)基是否受到污染，可將小明配制的培養(yǎng)基不加土樣進(jìn)行培養(yǎng)，即進(jìn)行空白對(duì)照，B正確；當(dāng)稀釋倍數(shù)太小時(shí)，可能會(huì)出現(xiàn)菌落重疊而導(dǎo)致計(jì)數(shù)結(jié)果偏小，C正確；在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，可初步鑒定尿素分解菌，D錯(cuò)誤。10.(多選)下列關(guān)于分離土壤中尿素分解菌并計(jì)數(shù)的敘述，正確的是()A.該實(shí)驗(yàn)中，采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后，可以用于制取土壤稀釋液B.土壤取樣、稱取土壤、稀釋、涂布培養(yǎng)不需要都在酒精燈火焰旁進(jìn)行無菌操作C.用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目更高D.取1×104、1×105、1×106倍稀釋的土壤稀釋液分別涂布于各組平板上，得到的所有菌落數(shù)求平均值答案BC解析在分離土壤中的尿素分解菌并計(jì)數(shù)的過程中，采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后，土樣中的微生物會(huì)被殺死，再制取土壤稀釋液接種并培養(yǎng)，不會(huì)得到菌落，A錯(cuò)誤；土壤取樣時(shí)不需要在酒精燈火焰旁操作，B正確；用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)得到的結(jié)果包含死的菌體和活的菌體，故計(jì)數(shù)結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目更高，C正確；取1×104、1×105、1×106倍稀釋的土壤稀釋液分別涂布于各組平板上，得到的同一稀釋倍數(shù)下的不同培養(yǎng)基上的菌落數(shù)求平均值，D錯(cuò)誤。11.(多選)(2023·江蘇海門中學(xué)高三檢測(cè))下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述，正確的是()A.以尿素為唯一氮源且含剛果紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌B.接種前要了解固體培養(yǎng)基是否被污染，需用完全培養(yǎng)基接種菌液檢測(cè)C.鑒別培養(yǎng)基作用的原理是顯現(xiàn)某種微生物的特征，以區(qū)別其他微生物D.應(yīng)用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)的估計(jì)值比實(shí)際值小答案CD解析尿素分解菌的氮源是尿素，其他不能利用尿素的菌就不能生長(zhǎng)，所以以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上可以選擇尿素分解菌，尿素分解菌可以將尿素分解為氨，氨可以使酚紅指示劑變紅，A錯(cuò)誤；檢測(cè)培養(yǎng)基被污染的方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，B錯(cuò)誤；鑒別培養(yǎng)基作用的原理是顯現(xiàn)某種微生物的特征，以區(qū)別其他微生物，C正確；應(yīng)用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)的估計(jì)值比實(shí)際值小，因?yàn)榭赡苡袃蓚€(gè)或多個(gè)微生物長(zhǎng)成一個(gè)菌落的情況，D正確。12.(多選)土壤中有些細(xì)菌可以降解焦化廠淤泥中的污染物S，下圖是分離、純化和篩選高效降解S的優(yōu)質(zhì)菌株的過程，下列敘述錯(cuò)誤的是()A.甲是土樣經(jīng)高溫滅菌后用無菌水配制的土壤稀釋液B.丙是添加了瓊脂的選擇培養(yǎng)基C.在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，可通過平板劃線法進(jìn)行計(jì)數(shù)D.經(jīng)多次稀釋和篩選，形成的單菌落中所有細(xì)胞的遺傳物質(zhì)都相同答案ACD解析土樣不能高溫滅菌，這樣會(huì)殺死土樣中的目的菌，A錯(cuò)誤；由題圖可知，乙是液體培養(yǎng)基，丙是固體培養(yǎng)基，故丙培養(yǎng)基中比乙培養(yǎng)基多加了瓊脂，從功能角度分析，丙培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，B正確；平板劃線法是常用的接種分離方法，不能用來計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；菌落往往是由一個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體，細(xì)菌在繁殖過程中可能會(huì)發(fā)生基因突變，故單菌落中所有細(xì)胞的遺傳物質(zhì)不一定相同，D錯(cuò)誤。13.蘋果樹腐爛病是由黑腐皮殼菌引起的，是限制蘋果產(chǎn)量的重要因素之一。生產(chǎn)上主要以化學(xué)藥劑防治該病。為開發(fā)生物防治途徑，科研人員擬從土壤中分離篩選出能抑制黑腐皮殼菌生長(zhǎng)的枯草芽孢桿菌，實(shí)驗(yàn)流程圖如下：請(qǐng)回答：(1)要獲得所需菌種，應(yīng)從________________土壤選擇樣品。(2)①中木糖和硝酸鉀的作用分別是__________________________________________________________________________________________________________。(3)②→③中梯度稀釋的目的是_____________________________________________________________________________________________________________。(4)常用的兩種接種方法中，操作上的共同點(diǎn)是________________。從④到⑤的接種方法是________。培養(yǎng)過程中，主要根據(jù)________特征鑒別出枯草芽孢桿菌。(5)現(xiàn)有經(jīng)純化后獲得的4個(gè)枯草芽孢桿菌品系，為探究哪個(gè)品系對(duì)黑腐皮殼菌的抑制效果更好，科研人員在如圖平板中的A處接種黑腐皮殼菌，在距離A處等距離的B1～B4處分別接種等量的4個(gè)枯草芽孢桿菌品系，在適宜條件下培養(yǎng)3～5天，通過______________________________________________________________就能篩選出抑菌效果更好的枯草芽孢桿菌菌株。(6)在利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)土樣中活菌的數(shù)目時(shí)，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。答案(1)患腐爛病果樹所在(2)提供碳源、氮源和無機(jī)鹽(3)將聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在固體培養(yǎng)基表面形成單菌落(4)在酒精燈火焰旁接種等平板劃線法菌落(5)觀察黑腐皮殼菌菌落的形狀(或測(cè)量黑腐皮殼菌菌落邊緣與4個(gè)枯草芽孢桿菌菌落的距離)(6)30～300解析(1)患腐爛病果樹所在的土壤中含有較多的所需菌種。(2)微生物的生長(zhǎng)需要碳源、氮源、水和無機(jī)鹽，①中木糖含有C、H、O，故能提供碳源，硝酸鉀中含有N，可以提供氮源和無機(jī)鹽。(3)分離篩選枯草芽孢桿菌需要得到單菌落，②→③中梯度稀釋的目的是將聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在固體培養(yǎng)基表面形成單菌落。(4)常用的兩種接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，二者的共同點(diǎn)有操作上為了防止雜菌污染，需要在酒精燈火焰旁接種等。從④到⑤的接種方法是平板劃線法。不同菌種形成的菌落大小、形狀等不同，故培