高考生物一輪浙江選考總復(fù)習(xí)課件第九單元生物技術(shù)實(shí)踐第30講

第30講微生物的利用第九單元生物技術(shù)實(shí)踐考試標(biāo)準(zhǔn)必考加試考試標(biāo)準(zhǔn)必考加試1.大腸桿菌的培養(yǎng)和分離

√2.分離以尿素為氮源的微生物

√考點(diǎn)一微生物的培養(yǎng)和分離考點(diǎn)二分離以尿素為氮源的微生物模擬演練課時(shí)訓(xùn)練內(nèi)容索引微生物的培養(yǎng)和分離考點(diǎn)一1.大腸桿菌(1)特性：大腸桿菌是革蘭氏

性、

(代謝類(lèi)型)的腸道桿菌，在腸道中一般對(duì)人無(wú)害，但若進(jìn)入人的

系統(tǒng)，就會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生危害。(2)用途：是

技術(shù)中被廣泛采用的工具。2.細(xì)菌的培養(yǎng)和分離(1)細(xì)菌的繁殖：以

的方式繁殖，分裂速度很快，約20min分裂一次。(2)培養(yǎng)的方法：需要將已有細(xì)菌的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基中，一般用

(工具)轉(zhuǎn)移帶菌的培養(yǎng)物。知識(shí)梳理陰兼性厭氧泌尿基因工程分裂接種環(huán)分離方法特點(diǎn)

法操作簡(jiǎn)單

法操作復(fù)雜，單菌落更易分開(kāi)(3)細(xì)菌分離的方法與特點(diǎn)劃線分離涂布分離3.大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn)(1)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：將大腸桿菌擴(kuò)大培養(yǎng)和劃線分離，即用

培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)大腸桿菌，培養(yǎng)后再在

培養(yǎng)基上劃線進(jìn)行分離，隨后培養(yǎng)基上就會(huì)形成一個(gè)個(gè)單獨(dú)的菌落。LB液體LB固體平面培養(yǎng)基滅菌

_______

_____

劃線分離

培養(yǎng)觀察50mLLB液體培養(yǎng)基和50mLLB固體培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿

滅菌將培養(yǎng)基分別倒至4個(gè)滅菌后的培養(yǎng)皿中，水平放置，使之形成平面在裝有液體培養(yǎng)基的

中接種大腸桿菌，培養(yǎng)12h用接種環(huán)在接種有大腸桿菌的三角瓶中蘸菌液一次，在固體培養(yǎng)基的平板上

，蓋好培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿倒置(蓋在下面)，放在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12～24h后，可看到劃線的末端出現(xiàn)不連續(xù)的____________(2)實(shí)驗(yàn)步驟高壓蒸汽倒平板接種三角瓶連續(xù)劃線單個(gè)菌落(3)大腸桿菌分離的用途：?jiǎn)尉涞姆蛛x是

的通用方法，也是用于篩選高表達(dá)量菌株的最簡(jiǎn)便方法之一。消除污染雜菌比較劃線分離法涂布分離法工具_(dá)________________原理通過(guò)

在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由

細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的細(xì)胞群體，即菌落將菌液進(jìn)行

的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂

培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)菌細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成___________4.微生物兩種常用的接種方法比較接種環(huán)玻璃刮刀一系列一個(gè)細(xì)菌接種環(huán)固體單個(gè)的菌落特點(diǎn)方法簡(jiǎn)單，但不適宜計(jì)數(shù)單菌落更易分開(kāi)，但操作復(fù)雜些目的使培養(yǎng)基上形成由單個(gè)細(xì)菌細(xì)胞繁殖而來(lái)的子細(xì)胞群體——菌落思考討論1.連線無(wú)菌技術(shù)的方法、類(lèi)型及對(duì)象，并總結(jié)消毒與滅菌的區(qū)別。項(xiàng)目條件結(jié)果常用的方法消毒較為溫和的物理或______方法僅殺死

或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)

消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法滅菌強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌、干熱滅菌、

滅菌消毒和滅菌的區(qū)別化學(xué)高壓蒸汽物體表面煮沸(1)請(qǐng)用文字和箭頭寫(xiě)出正確的倒平板操作流程：

。(2)甲、乙、丙中的滅菌方法是

。(3)丁中的操作需要等待

才能進(jìn)行。2.觀察甲、乙、丙、丁四幅圖，熟悉倒平板的操作流程，請(qǐng)?zhí)羁眨罕摇住∑桨謇鋮s凝固灼燒滅菌(1)每一次劃線后都要將接種環(huán)灼燒(

)(2)除第一次劃線外，每一次劃線的起點(diǎn)都是第一次劃線的末端(

)提示平板劃線時(shí)除第一次劃線外，每一次劃線的起點(diǎn)都是上一次劃線的末端，而不是第一次劃線的末端。答案3.下圖中甲為劃線分離法中最重要的環(huán)節(jié)，乙為操作的結(jié)果：√提示×(3)說(shuō)明乙圖劃線結(jié)束后，培養(yǎng)皿要倒置(蓋在下面)在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的原因是什么？提示

平板冷凝后倒置培養(yǎng)，使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)；防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染。提示(1)獲得圖A效果和B效果的接種方法分別是什么？提示

獲得效果A的接種方法為涂布分離法，獲得效果B的接種方法為劃線分離法。4.如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請(qǐng)思考：提示(2)某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成了一片，最可能的原因是什么？應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？提示

最可能的原因是菌液濃度過(guò)高或劃線時(shí)在劃下一區(qū)域前未將接種環(huán)灼燒滅菌；采取的措施是增大稀釋倍數(shù)或每次劃新區(qū)域前先將接種環(huán)灼燒滅菌。提示1.(2017·杭州一模)據(jù)報(bào)道，一些企業(yè)生產(chǎn)的速凍食品中檢出金黃色葡萄球菌超標(biāo)，加上熟鹵制品的大腸桿菌超標(biāo)，“細(xì)菌門(mén)”事件引起公眾普遍關(guān)注。金黃色葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)某生物興趣小組欲檢測(cè)某果汁類(lèi)食品中是否含有金黃色葡萄球菌以及該菌的含量。①配制培養(yǎng)基：稱(chēng)取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂等，加入蒸餾水，攪拌加熱至完全溶解后________，分裝到錐形瓶后利用________________進(jìn)行滅菌，在無(wú)菌狀態(tài)下加入卵黃液(100mL10%滅菌NaCl溶液中加一個(gè)雞蛋黃，振蕩均勻)搖勻后立即倒平板。解題探究答案解析調(diào)節(jié)pH高壓蒸汽滅菌鍋解析培養(yǎng)基配制好后應(yīng)調(diào)節(jié)酸堿度(pH)，分裝到錐形瓶后利用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌。②接種：該小組采用涂布分離法檢測(cè)果汁樣品中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是__________________________；然后，將1mL果汁樣品稀釋10倍，在3個(gè)平板上用涂布分離法分別接入0.1mL稀釋液。答案解析檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格解析涂布接種前，將制好的空白平板先培養(yǎng)一段時(shí)間，目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格；③培養(yǎng)及結(jié)果：將培養(yǎng)皿_____放入恒溫培養(yǎng)箱中經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為19、18和17。據(jù)此可得出每升果汁樣品中的活菌數(shù)為_(kāi)_______個(gè)。答案解析倒置解析接種后，培養(yǎng)皿需要倒置培養(yǎng)，防止皿蓋上凝集的水滴滴落造成污染；0.1mL稀釋液(稀釋10倍)含細(xì)菌數(shù)約為18個(gè)，得出每升果汁含有活菌數(shù)1.8×106個(gè)。1.8×106(2)示意圖A和B中___表示的是用涂布分離法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。答案解析B解析圖中A為劃線分離得到的結(jié)果，B為涂布分離得到的結(jié)果。(3)下列有關(guān)常用涂布分離法的操作正確的是___。A.在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行接種時(shí)應(yīng)關(guān)閉紫外燈B.接種前需先稀釋?zhuān)缓筮^(guò)濾除去雜菌C.在每個(gè)固體培養(yǎng)基表面都可形成單菌落D.玻璃刮刀浸泡在70%的酒精中滅菌，不用灼燒答案解析A解析在超凈工作臺(tái)進(jìn)行接種操作時(shí)應(yīng)關(guān)閉紫外燈，A正確；涂布分離前需稀釋?zhuān)荒苓^(guò)濾除菌，B錯(cuò)誤；稀釋度較大的溶液涂布分離不一定出現(xiàn)菌落，C錯(cuò)誤；玻璃刮刀浸泡后需要灼燒，D錯(cuò)誤。(4)菌種保存：在無(wú)菌條件下將單菌落用接種環(huán)取出，再用劃線法接種在_____上，在37℃下培養(yǎng)24h后，置于4℃冰箱中保存。答案解析斜面解析純化的菌種保存在斜面上。2.下圖為“大腸桿菌的培養(yǎng)和分離”實(shí)驗(yàn)的基本流程，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：解析(1)A過(guò)程配制的是通用細(xì)菌培養(yǎng)基，稱(chēng)為_(kāi)______培養(yǎng)基。配制時(shí)除了加入特定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以外，還要加入一定量的氯化鈉，以維持一定的______。對(duì)培養(yǎng)基酸堿度的調(diào)節(jié)，應(yīng)該在B過(guò)程的_____(填“前面”或“后面”)。答案LB液體滲透壓前面解析LB液體培養(yǎng)基是通用的細(xì)菌培養(yǎng)基，LB固體平面培養(yǎng)基則用于劃線分離形成單菌落。氯化鈉的作用是維持培養(yǎng)基的滲透壓。調(diào)節(jié)好酸堿度后才能進(jìn)行滅菌，若滅菌后再進(jìn)行酸堿度調(diào)節(jié)，又會(huì)產(chǎn)生新的污染。(2)D過(guò)程與C過(guò)程相比，培養(yǎng)基中增加的物質(zhì)是_____，E過(guò)程所需的溫度是____。答案解析瓊脂解析在液體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上加入一定量的瓊脂可形成固體培養(yǎng)基。菌種應(yīng)置于4°C冰箱中保存。4℃(3)D過(guò)程后，一個(gè)菌體便會(huì)形成一個(gè)________，這種分離方法是___________________________的通用方法，也是篩選特定菌株的最簡(jiǎn)便方法之一。答案解析(單)菌落解析通過(guò)劃線分離后，一個(gè)菌體就會(huì)繁殖出一個(gè)菌落。消除污染雜菌(或純化菌種)(4)植物組織培養(yǎng)時(shí)，先配制MS培養(yǎng)基，再加入一定比例的植物激素，當(dāng)生長(zhǎng)素相對(duì)較多時(shí)，可促進(jìn)_____。答案解析生根解析植物組織培養(yǎng)中生長(zhǎng)素相對(duì)較多時(shí)，有利于生根，而細(xì)胞分裂素相對(duì)較多時(shí)，則有利于生芽。(5)植物組織培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)都需要無(wú)菌操作，下列不適宜用高壓蒸汽滅菌的是A.接種環(huán)和鑷子B.三角瓶和廣口瓶C.發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基D.用于培養(yǎng)的幼莖和幼芽解析解析高壓蒸汽滅菌常用于培養(yǎng)基、培養(yǎng)器材等的滅菌，而用于培養(yǎng)的幼莖和幼芽則不能進(jìn)行任何滅菌操作，否則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。答案√3.(2017·嘉興期末)下列是有關(guān)大腸桿菌的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答問(wèn)題：(1)配制培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時(shí)，根據(jù)“細(xì)菌喜葷，霉菌喜素”的規(guī)律，通常在培養(yǎng)基中加入蛋白胨和___________作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，為維持一定的滲透壓，常需加入一定量的_____。答案解析酵母提取物解析配制培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時(shí)，根據(jù)“細(xì)菌喜葷，霉菌喜素”的規(guī)律，通常在培養(yǎng)基中加入蛋白胨和酵母提取物作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，為維持一定的滲透壓，常需加入一定量的NaCl。NaCl(2)大腸桿菌培養(yǎng)和分離的實(shí)驗(yàn)中，在______________中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)液經(jīng)_____后，在LB固體培養(yǎng)基上進(jìn)行_____，并將培養(yǎng)皿_____放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，可以獲得如圖效果。為了檢測(cè)接種、培養(yǎng)過(guò)程是否受雜菌污染以及________________，應(yīng)同時(shí)將未接種的培養(yǎng)基放入相同條件的恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)。答案解析LB液體培養(yǎng)基稀釋分離倒置無(wú)菌操作是否規(guī)范解析大腸桿菌培養(yǎng)和分離的實(shí)驗(yàn)中，在LB液體培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)液經(jīng)稀釋后，在LB固體培養(yǎng)基上進(jìn)行分離，并將培養(yǎng)皿倒置放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；為了檢測(cè)接種、培養(yǎng)過(guò)程是否受雜菌污染以及無(wú)菌操作是否規(guī)范，應(yīng)同時(shí)將未接種的培養(yǎng)基放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)。(3)通常對(duì)獲得的純菌種可以依據(jù)_____的形狀、大小等特征進(jìn)行初步的鑒定。答案解析菌落解析通常對(duì)獲得的純菌種可以依據(jù)菌落的形狀、大小等特征進(jìn)行初步的鑒定。(4)下列關(guān)于“大腸桿菌培養(yǎng)和分離”的操作中，敘述正確的是A.高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)，打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零后，開(kāi)啟鍋蓋B.倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C.為了防止污染，接種工具經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D.用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上解析解析高壓滅菌加熱結(jié)束，等待壓力表指針回到零后，才能開(kāi)啟鍋蓋，不能直接打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零，A錯(cuò)誤；倒平板過(guò)程中不能打開(kāi)培養(yǎng)皿的皿蓋，以防止雜菌污染，B錯(cuò)誤；接種環(huán)在火焰上灼燒后，待冷卻后才可以快速挑取菌落，C錯(cuò)誤；用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上，D正確。答案√歸納提升培養(yǎng)基的成分和類(lèi)型(1)培養(yǎng)基成分：一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等，此外還要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。(2)培養(yǎng)基的類(lèi)型及其應(yīng)用劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基

不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂觀察微生物的運(yùn)動(dòng)及微生物的分類(lèi)、鑒定物理性質(zhì)固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂微生物的分離、鑒定及活菌計(jì)數(shù)目的用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)、促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)特定微生物的培養(yǎng)、分離鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品不同種類(lèi)的微生物的鑒別分離以尿素為氮源的微生物考點(diǎn)二1.菌種特點(diǎn)含有

酶，可以通過(guò)降解尿素作為其生長(zhǎng)的氮源。2.培養(yǎng)基用以

為唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)，以

培養(yǎng)基為對(duì)照。3.實(shí)驗(yàn)原理(1)篩選以尿素為氮源的微生物，可使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)選擇。(2)細(xì)菌合成的脲酶能將尿素分解成

，致使pH升高，使酚紅指示劑

。知識(shí)梳理尿素脲LB全營(yíng)養(yǎng)NH3變紅G6玻璃砂漏斗全營(yíng)養(yǎng)LB倒置4.實(shí)驗(yàn)步驟多而雜少、單一紅色5.反應(yīng)的鑒定在配制培養(yǎng)基時(shí)，加入指示劑酚紅，培養(yǎng)時(shí)細(xì)菌將尿素分解并產(chǎn)生堿性的氨，使培養(yǎng)基上菌落周?chē)霈F(xiàn)

。紅色的環(huán)帶(1)在該培養(yǎng)基的配方中，為微生物提供碳源的物質(zhì)是

，提供氮源的物質(zhì)是

。成分含量成分含量KH2PO41.4g葡萄糖10.0gNa2HPO42.1g尿素1.0gMgSO4·7H2O0.2g瓊脂糖15.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL1.分析下表所示培養(yǎng)基的配方，回答下列問(wèn)題。思考討論葡萄糖尿素(2)該培養(yǎng)基

(填“是”或“否”)具有選擇作用，因?yàn)開(kāi)___________________

。是只有能分解尿素的微生物才能生長(zhǎng)(3)用瓊脂糖代替瓊脂配制固體培養(yǎng)基的原因是什么？提示瓊脂是未被純化的混合物，內(nèi)含一定量的含氮化合物。如果用瓊脂固體培養(yǎng)基，會(huì)為細(xì)菌提供一定量的非尿素類(lèi)氮源，這樣會(huì)在尿素固體培養(yǎng)基上產(chǎn)生大量以非尿素為氮源的細(xì)菌，所以用經(jīng)純化的瓊脂糖做固化劑。提示(1)實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖鞘褂煤?/p>

的培養(yǎng)基分離能產(chǎn)生___酶的細(xì)菌，使用

作為指示劑。2.如圖為分離以尿素為氮源的微生物的實(shí)驗(yàn)，思考回答下列問(wèn)題：脲酚紅尿素(2)有脲酶的細(xì)菌菌落周?chē)霈F(xiàn)有色環(huán)帶的原因是什么？提示

細(xì)菌向胞外分泌脲酶，使培養(yǎng)基中尿素水解產(chǎn)生呈堿性的氨，遇培養(yǎng)基中的酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化，形成紅色環(huán)帶。提示(3)制備尿素固體培養(yǎng)基的過(guò)程中采用的滅菌方法有

、G6玻璃砂漏斗過(guò)濾法。高壓蒸汽滅菌法(4)與全營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基相比，尿素培養(yǎng)基上只有少數(shù)菌落的原因是什么？提示

土壤中能利用尿素的細(xì)菌占極少數(shù)。因?yàn)槿撕推渌溉閯?dòng)物產(chǎn)生的排泄物畢竟是少量的，此外尿素還可以在高溫下自然分解，因此，以尿素為氮源的菌群較少。提示(5)從下圖所示實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可判斷出細(xì)菌懸液C的稀釋度為

，用涂布分離法分離細(xì)菌。10－43.判斷下列敘述的正誤(1)土樣應(yīng)從有哺乳動(dòng)物排泄物的地方取(

)提示

有哺乳動(dòng)物排泄物的地方含脲酶的細(xì)菌較多。(2)取10－4、10－5的土壤稀釋液各0.1mL，分別涂布于全營(yíng)養(yǎng)LB固體培養(yǎng)基、尿素固體培養(yǎng)基上(

)(3)將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37°C恒溫培養(yǎng)24～48h(

)(4)在尿素固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的細(xì)菌都是以尿素為氮源的細(xì)菌(

)答案√√×提示√4.海洋發(fā)生石油泄漏事件后，可用一些微生物有效分解石油，如何配制選擇培養(yǎng)基將這類(lèi)微生物選擇出來(lái)？提示

配制的選擇培養(yǎng)基中，石油作為唯一的碳源，然后用這種培養(yǎng)基培養(yǎng)多種微生物，凡是能在該種培養(yǎng)基上生存的就是能分解石油的微生物。提示1.(2017·紹興市魯迅高級(jí)中學(xué)期中質(zhì)檢)回答下列問(wèn)題：尿素是一種高濃度氮肥，且長(zhǎng)期施用沒(méi)有不良影響，但尿素只有通過(guò)土壤中某些細(xì)菌的分解作用，才能被植物吸收利用。某同學(xué)要分離出土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并嘗試進(jìn)行計(jì)數(shù)，培養(yǎng)基配方如下：解題探究K2HPO4NaClH2O葡萄糖尿素酚紅瓊脂0.12g0.12g15mL0.025g2.0g0.25mg0.5g答案(1)上述培養(yǎng)基配制完成后，應(yīng)選擇_____________法滅菌，根據(jù)培養(yǎng)基的成分推斷，該同學(xué)能否分離出土壤中只分解尿素的細(xì)菌？___(填“能”或“否”)，推斷理由是______________________________________________________________________。高壓蒸汽滅菌否

瓊脂是未純化的混合物，內(nèi)含一定量的含氮化合物，導(dǎo)致尿素不是唯一的氮源解析解析高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫的物品，如培養(yǎng)基、金屬器械、玻璃等，題述培養(yǎng)基配制完成后，應(yīng)選擇高壓蒸汽滅菌；該同學(xué)不能分離出土壤中只分解尿素的細(xì)菌，因?yàn)榄傊俏醇兓幕旌衔铮瑑?nèi)含一定量的含氮化合物，導(dǎo)致尿素不是唯一的氮源。答案(2)分離得到分解尿素的細(xì)菌后，則應(yīng)選擇_____培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。培養(yǎng)一段時(shí)間后，要借助顯微鏡對(duì)微生物細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)過(guò)程中，下列哪種行為會(huì)影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性___。A.計(jì)數(shù)時(shí)直接從靜置培養(yǎng)的試管底部取培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)B.如果方格內(nèi)微生物細(xì)胞數(shù)量多于300個(gè)，應(yīng)將培養(yǎng)液先稀釋后再計(jì)數(shù)C.如果微生物細(xì)胞有粘連，要數(shù)出團(tuán)塊中的每一個(gè)細(xì)胞D.壓在方格線上的細(xì)胞只計(jì)左線和上線上的細(xì)胞數(shù)液體A解析解析應(yīng)選擇液體培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)；由于重力作用，試管底部培養(yǎng)液中細(xì)菌種群密度較大，應(yīng)將培養(yǎng)液搖勻后進(jìn)行計(jì)數(shù)。答案(3)為了提高尿素肥效，可以將分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”。為了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用__________技術(shù)。固定化酶解析解析為了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用固定化酶技術(shù)，使酶與尿素分開(kāi)，可重復(fù)利用。答案2.(2016·浙江10月選考)請(qǐng)回答從土壤中分離產(chǎn)脲酶細(xì)菌和脲酶固定化實(shí)驗(yàn)的有關(guān)問(wèn)題：(1)LB固體培養(yǎng)基：取適量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl，加入一定量的蒸餾水溶解，再加_____，滅菌備用。瓊脂解析解析固體培養(yǎng)基中需添加瓊脂起到凝固的作用。答案(2)尿素固體培養(yǎng)基：先將適宜濃度的尿素溶液用_________滅菌過(guò)的G6玻璃砂漏斗過(guò)濾，因?yàn)镚6玻璃砂漏斗____________________，故用于

高壓蒸汽解析解析因?yàn)镚6玻璃砂漏斗中存在雜菌，所以在其過(guò)濾除菌之前需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌；G6玻璃砂漏斗能過(guò)濾除菌的原理是其孔徑較小，細(xì)菌不能通過(guò)?？讖叫。?xì)菌不能濾過(guò)答案(3)取適量含產(chǎn)脲酶細(xì)菌的10－4、10－5兩種土壤稀釋液，分別涂布接種到LB固體培養(yǎng)基和尿素固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)48h，推測(cè)固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)最少的是___。(A.10－5稀釋液＋尿素固體培養(yǎng)基B.10－5稀釋液＋LB固體培養(yǎng)基C.10－4稀釋液＋尿素固體培養(yǎng)基D.10－4稀釋液＋LB固體培養(yǎng)基)。在尿素固體培養(yǎng)基上產(chǎn)脲酶細(xì)菌菌落周?chē)霈F(xiàn)_________，其原因是細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶催化尿素分解產(chǎn)生__________所致。A解析紅色環(huán)帶氨(或NH3)解析土壤中的微生物在LB全營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中都能生長(zhǎng)，在尿素固體培養(yǎng)基中只有能利用尿素的微生物能生長(zhǎng)，10－4土壤稀釋液中微生物數(shù)量較多，所以推測(cè)固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)最少的是10－5＋尿素固體培養(yǎng)基；在尿素固體培養(yǎng)基上產(chǎn)脲酶的細(xì)菌菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶，這是因?yàn)榧?xì)菌產(chǎn)生的脲酶催化尿素分解產(chǎn)生了氨(NH3)，導(dǎo)致培養(yǎng)基呈堿性，培養(yǎng)基中的酚紅遇堿性條件會(huì)變紅。答案(4)制備固定化脲酶時(shí)，用石英砂吸附脲酶，裝柱。再用蒸餾水洗滌固定化酶柱，其作用是_______________。除去游離的脲酶解析解析并不是所有的脲酶都吸附在石英砂上，所以裝柱后需用蒸餾水洗滌固定化酶柱，以洗去多余的未吸附的脲酶。(1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以_____為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加______作為指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周?chē)闹甘緞⒆兂蒧__色。答案3.如圖是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過(guò)程。尿素解析解析脲酶能夠催化尿素分解為氨，故圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素作為唯一氮源。由于尿素被分解成了氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，使酚紅指示劑變紅色。酚紅紅答案(2)在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過(guò)程采取的接種方法是___________，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為_(kāi)____×108個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較____。涂布分離法1.75解析解析用于計(jì)數(shù)細(xì)菌菌落數(shù)的接種方法是涂布分離法，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)應(yīng)介于30～300之間，故選擇細(xì)菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計(jì)數(shù)，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為(156＋178＋191)/3÷0.1×105＝1.75×108個(gè)。由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連接在一起時(shí)，往往統(tǒng)計(jì)的是一個(gè)菌落，故用此方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)偏少。少歸納提升1.培養(yǎng)基中觀測(cè)指標(biāo)的分析(1)培養(yǎng)基中的酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化(變紅)，標(biāo)志著存在脲酶水解尿素的作用，從而證明這一菌株能以尿素為氮源。紅色環(huán)狀區(qū)域的大小代表脲酶活性的強(qiáng)弱和含量的多少。紅色區(qū)域越大，表明菌株利用尿素的能力越強(qiáng)。(2)與全營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)比較，尿素培養(yǎng)基上只有少數(shù)菌落，這一現(xiàn)象表明能利用尿素的細(xì)菌在土壤菌群中只占極少部分。2.微生物篩選過(guò)程中必要的兩種對(duì)照培養(yǎng)基及其作用對(duì)照組作用現(xiàn)象結(jié)論未接種培養(yǎng)基有無(wú)雜菌污染的判斷未接種的培養(yǎng)皿中無(wú)菌落生長(zhǎng)未被雜菌污染接種的LB全營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基篩選作用的確認(rèn)LB全營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)大于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目選擇培養(yǎng)基具有篩選作用3.樣品稀釋的原因和標(biāo)準(zhǔn)(1)稀釋原因：樣品的稀釋度直接影響平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)。在適當(dāng)?shù)南♂尪认?，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。因此，恰當(dāng)?shù)南♂尪仁浅晒Φ亟y(tǒng)計(jì)菌落數(shù)的關(guān)鍵。(2)稀釋標(biāo)準(zhǔn)：選用一定范圍的樣品稀釋液進(jìn)行培養(yǎng)，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板計(jì)數(shù)。模擬演練1234答案1.下圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5。下列操作方法正確的是A.操作前要將接種環(huán)放在火焰旁滅菌B.劃線操作須在火焰上進(jìn)行C.在5區(qū)域中才有可能得到所需菌落D.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌√解析1234解析操作前要將接種環(huán)放在火焰上灼燒滅菌，A項(xiàng)錯(cuò)誤；劃線操作須在火焰旁進(jìn)行，B項(xiàng)錯(cuò)誤；在5區(qū)域中最有可能得到所需菌落，C項(xiàng)錯(cuò)誤；在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，D項(xiàng)正確。答案解析2.下列關(guān)于大腸桿菌的培養(yǎng)的敘述，不正確的是A.在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮pH、溫度和滲

透壓等條件B.若對(duì)大腸桿菌活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)

嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品的稀釋度合適C.在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)

行消毒D.使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄√1234解析微生物培養(yǎng)條件有營(yíng)養(yǎng)條件、pH、溫度、滲透壓等，A正確；為計(jì)數(shù)活菌數(shù)，要多次實(shí)驗(yàn)求平均值、操作要嚴(yán)格，還要保證樣品的稀釋度合適，便于檢測(cè)，B正確；為防止雜菌污染，對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進(jìn)行滅菌，C錯(cuò)誤；為防止對(duì)環(huán)境的污染，用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，D正確。1234答案解析3.下圖是“分離以尿素為氮源的微生物”實(shí)驗(yàn)的基本流程，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)該實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基不能含有___。A.尿素 B.氯化鈉C.葡萄糖 D.瓊脂D1234解析分離以尿素為氮源的微生物，應(yīng)該以尿素為唯一氮源，所以不應(yīng)有瓊脂。答案(2)尿素溶液可用___________________使之無(wú)菌。若要檢查B過(guò)程滅菌是否徹底，可以采用的方法是_________________________________________________________。G6玻璃砂漏斗過(guò)濾1234

將空白培養(yǎng)基放在適宜溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察有無(wú)菌落出現(xiàn)解析解析尿素用G6玻璃砂漏斗過(guò)濾除去其中的細(xì)菌等微生物。答案(3)圖中步驟C為_(kāi)______。相對(duì)于劃線分離法，過(guò)程D涂布分離法的優(yōu)點(diǎn)是_______________。倒平板1234單菌落更易分開(kāi)(4)如果菌落周?chē)霈F(xiàn)___色環(huán)帶，說(shuō)明該菌落能分泌脲酶。1234解析解析若菌落能分泌脲酶，則菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶。答案紅4.(2017·寧波期末測(cè)試)石油烴是環(huán)境的重要污染源。為了篩選出具有強(qiáng)分解石油烴能力的微生物，進(jìn)行了一系列操作，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)分解石油烴的微生物一般要從土壤中分離，獲取土壤樣品的取樣地點(diǎn)最好選在_______________。1234解析解析分解石油烴的微生物在石油污染明顯處分布較多。答案石油污染明顯處(2)微生物實(shí)驗(yàn)室采用___法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理。A.干熱滅菌 B.過(guò)濾滅菌C.灼燒滅菌 D.高壓蒸汽滅菌1234解析解析微生物實(shí)驗(yàn)室常用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基滅菌。答案D(3)下圖為獲取土壤樣品后的培養(yǎng)研究過(guò)程：

為了能有效地分離出分解石油烴的微生物，過(guò)程①～④所用培養(yǎng)基的成分的特點(diǎn)是_____________________，從而有利于分解石油烴的微生物的生長(zhǎng)。1234解析解析實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，過(guò)程①～④所用培養(yǎng)基應(yīng)用石油烴作為唯一碳源，以抑制其他種類(lèi)微生物的生長(zhǎng)，從而分離出以石油烴為碳源的微生物。答案以石油烴作為唯一碳源(4)對(duì)④進(jìn)行接種常采用的兩種方法分別是____________和____________。1234解析解析在微生物的分離實(shí)驗(yàn)中，常用劃線分離法或涂布分離法進(jìn)行接種。答案劃線分離法

涂布分離法(5)若發(fā)現(xiàn)在⑤中無(wú)法區(qū)分菌落，可以將圖中③取出的菌液_______________。1234解析解析若發(fā)現(xiàn)在⑤中無(wú)法區(qū)分菌落，可能是菌液中細(xì)菌濃度太高，可進(jìn)行梯度稀釋處理后再進(jìn)行接種。答案進(jìn)行(梯度)稀釋A.②①④③ B.②①④①③②C.②①④②③② D.①④①③②(6)若實(shí)驗(yàn)室為分離純化優(yōu)良菌種進(jìn)行了如下操作，排序最合理的是___。1234解析解析圖示為用劃線分離法進(jìn)行接種分離。接種過(guò)程中應(yīng)先在酒精燈火焰上灼燒接種環(huán)后，蘸取菌液進(jìn)行接種，整個(gè)操作在酒精燈火焰旁進(jìn)行，接種結(jié)束后還須在酒精燈上灼燒接種環(huán)。答案B(7)整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)的操作，一定要注意在_____條件下進(jìn)行。1234解析解析為避免污染，整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)的操作，一定要注意在無(wú)菌條件下進(jìn)行。答案無(wú)菌課時(shí)訓(xùn)練答案一、選擇題1.下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過(guò)程中的部分操作步驟，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是

A.①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行B.步驟①中，待倒入的培養(yǎng)基冷卻后蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋C.步驟③中，每次劃線前后都需對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理D.劃線接種結(jié)束后，將圖④平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)解析√1234567891012345678910解析由圖可知，步驟①是倒平板，步驟②是用接種環(huán)蘸取菌液，步驟③是進(jìn)行平板劃線，步驟④是培養(yǎng)。①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止被雜菌污染，A項(xiàng)正確；倒完平板后應(yīng)立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，冷卻后將平板倒過(guò)來(lái)放置，B項(xiàng)錯(cuò)誤；每次劃線前后灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到單菌落，C項(xiàng)正確；劃線接種結(jié)束后，將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，有利于培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)和防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，D項(xiàng)正確。答案解析2.尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培養(yǎng)基時(shí)A.葡萄糖在培養(yǎng)基中含量越多越好B.尿素在培養(yǎng)基中含量越少越好C.尿素分解菌有固氮能力，故培養(yǎng)基中的尿素為無(wú)機(jī)氮D.尿素分解菌無(wú)固氮能力，故培養(yǎng)基中的尿素為有機(jī)氮√12345678910解析尿素既可以作為尿素分解菌的氮源，也可以作為其碳源，葡萄糖在培養(yǎng)基中并不是越多越好，葡萄糖過(guò)多會(huì)使培養(yǎng)基的滲透壓過(guò)高，影響尿素分解菌的繁殖，A錯(cuò)誤；添加尿素的目的是篩選尿素分解菌，其他微生物不能很好地生活在該培養(yǎng)基上，尿素在培養(yǎng)基中不是越少越好，過(guò)少就失去了選擇作用，過(guò)多又會(huì)使細(xì)胞失水死亡，B錯(cuò)誤；尿素分解菌沒(méi)有固氮能力，故培養(yǎng)基中需要添加尿素為氮源，C錯(cuò)誤，D正確。12345678910答案解析3.(2016·舟山中學(xué)期末測(cè)試)下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述中，不正確的是A.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B.單菌落的分離是消除污染的雜菌的通用方法C.培養(yǎng)基都必須使用高壓蒸汽滅菌法滅菌D.倒置平板防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落√12345678910解析微生物培養(yǎng)中獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，A項(xiàng)正確；通?？梢圆捎猛坎挤蛛x法或劃線分離法進(jìn)行單菌落的分離，以消除污染的雜菌，B項(xiàng)正確；培養(yǎng)基通常可以進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，但對(duì)于培養(yǎng)基中有高溫易分解的成分，就不能用此方法，如培養(yǎng)基中的尿素等物質(zhì)，C項(xiàng)錯(cuò)誤；劃線接種結(jié)束后需要將培養(yǎng)皿倒置，以防止培養(yǎng)基蒸發(fā)冷凝成的水滴入培養(yǎng)基而造成污染，D項(xiàng)正確。1234567891023456789104.(2017·欽州期末)在做土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)時(shí)，甲組實(shí)驗(yàn)用氮源只含尿素的培養(yǎng)基，乙組實(shí)驗(yàn)用氮源除尿素外還含硝酸鹽的培養(yǎng)基，其他成分都相同，在相同條件下操作、培養(yǎng)與觀察，則乙組實(shí)驗(yàn)屬于A.空白對(duì)照 B.標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照C.相互對(duì)照 D.條件對(duì)照1答案√解析解析乙組和甲組實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)條件不同，形成了條件對(duì)照。二、非選擇題5.幽門(mén)螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下：23456789101請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p含有_____，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)___色環(huán)帶。答案脲酶紅解析解析幽門(mén)螺桿菌(Hp)含有脲酶，能以尿素為氮源，在加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)Hp，由于尿素經(jīng)脲酶的降解可產(chǎn)生堿性的NH3，NH3能使培養(yǎng)基中的酚紅由紅黃色變成紅色，故菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)下列對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是___滅菌。A.高壓蒸汽 B.紫外燈照射C.70%酒精浸泡 D.過(guò)濾解析解析由于尿素加熱會(huì)分解，對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌最好用G6玻璃砂漏斗過(guò)濾。答案D23456789101(3)步驟X表示_____。在無(wú)菌條件下操作時(shí)，先將菌液稀釋?zhuān)缓髮⒕篲____到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得____菌落。解析解析微生物的分離和培養(yǎng)步驟：配制培養(yǎng)基→滅菌、倒平板→接種→培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應(yīng)先將菌液稀釋?zhuān)缓髮⒕和坎嫉脚囵B(yǎng)基平面上即可。答案接種涂布單23456789101(4)在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿倒置并放在___________中，若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致_______________。解析解析微生物培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，則無(wú)法形成單菌落。答案恒溫培養(yǎng)箱無(wú)法形成單菌落23456789101(5)臨床上用14C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將14C標(biāo)記的_____分解為NH3和14CO2。解析幽門(mén)螺桿菌能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14CO2，故臨床上常用14C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體內(nèi)幽門(mén)螺桿菌的存在。尿素6.(2017·寧波三中期末)飼養(yǎng)動(dòng)物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動(dòng)物吸收利用，還影響對(duì)其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用。若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等。以下是科研人員從作物根部土壤中分離出產(chǎn)植酸酶的菌株的過(guò)程示意圖。請(qǐng)分析作答：23456789101(1)為防止雜菌污染，要對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿等進(jìn)行______________，而且須將接種后的培養(yǎng)皿呈_____狀態(tài)放置。解析解析為防止雜菌污染，要對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行(高壓蒸汽)滅菌處理，而且須將接種后的培養(yǎng)皿呈倒置狀態(tài)放置，以防止污染。答案(高壓蒸汽)滅菌倒置23456789101(2)接種以前進(jìn)行的一系列操作，目的是在培養(yǎng)皿表面形成_________。根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的_______就能大致推測(cè)出樣品中的活菌數(shù)。解析解析接種以前對(duì)樣品進(jìn)行稀釋的目的是在培養(yǎng)皿表面形成單個(gè)菌落；根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能大致推測(cè)出樣品中的活菌數(shù)。答案單個(gè)菌落菌落數(shù)23456789101(3)由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁。產(chǎn)植酸酶的菌株會(huì)水解植酸鈣，菌落的周?chē)鷮⑿纬赏该鞯膮^(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無(wú)，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示A～E五種菌株中，___是產(chǎn)植酸酶的最理想菌株。解析解析根據(jù)題意，菌落體積越小，透明圈越大，說(shuō)明產(chǎn)植酸酶越多，故E是產(chǎn)植酸酶的最理想菌株。答案E23456789101(4)獲得目的菌以后，若要用于植酸酶的生產(chǎn)，還需要進(jìn)行_________。解析解析獲得目的菌后，若用于植酸酶的生產(chǎn)，還需要進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。答案擴(kuò)大培養(yǎng)234567891017.有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。請(qǐng)回答問(wèn)題：(1)在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以_____為唯一碳源的培養(yǎng)基上。從功能上講，該培養(yǎng)基屬于___(A.固體B.液體C.純化D.選擇)培養(yǎng)基。23456789101解析解析可以將所需要的微生物從混雜的微生物群中分離出來(lái)的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。欲篩選出能降解原油的菌株，培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無(wú)其他碳源，這樣不能降解原油的細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生存，可篩選出能分解原油的菌種。答案原油D(2)純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即_________________________。解析解析分離純化菌種時(shí)，接種的方法有劃線分離法和涂布分離法，其目的都是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單菌落，以便于純化菌種。答案劃線分離法和涂布分離法23456789101(3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周?chē)该魅Φ拇笮。该魅υ酱笳f(shuō)明該菌株的降解能力_____。解析降解原油能力越強(qiáng)的菌株，在菌落周?chē)纬傻耐该魅υ酱?。越?qiáng)(4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、__________和高壓蒸汽滅菌。無(wú)菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈_____附近進(jìn)行，以避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染。解析解析實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌(如接種環(huán))、干熱滅菌(如培養(yǎng)皿)和高壓蒸汽滅菌(如培養(yǎng)基)等。無(wú)菌技術(shù)要求整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作都要在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以避免周?chē)⑸锏奈廴?。答案干熱滅菌火?34567891018.(2016·金麗衢十校聯(lián)考)下表是3組生物實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：23456789101組別培養(yǎng)基a無(wú)機(jī)鹽、蔗糖、維生素和甘氨酸等有機(jī)物、水、瓊脂b葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、酚紅、水、瓊脂糖c蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水、瓊脂(1)分離以尿素為氮源的細(xì)菌應(yīng)選用培養(yǎng)基___。在含有脲酶的細(xì)菌菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)_________，這是由于尿素被分解產(chǎn)生的___使pH升高，酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化，從而證明這一菌株能以尿素為氮源。變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力_____。答案b紅色環(huán)帶解析氨越強(qiáng)解析分離以尿素為氮源的細(xì)菌應(yīng)選用以尿素為唯一氮源并添加酚紅指示劑的培養(yǎng)基。分解尿素的微生物可產(chǎn)生脲酶，脲酶可催