DB5329T 121-2025食品檢測實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物管理規(guī)范

ICS07.100.30CCSX015329IDB5329/T121—2025前言 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4一般要求 5管理流程 附錄A（資料性）標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物管理流程圖 1附錄B（資料性）附錄B標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物管理記錄 2DB5329/T121—2025本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由大理白族自治州檢驗(yàn)檢測院提出。本文件由大理州市場監(jiān)督管理局歸口。本文件起草單位：大理白族自治州檢驗(yàn)檢測院、大理大學(xué)、云南歐亞乳業(yè)有限公司。本文件主要起草人：郭啟新、舒平、張蕾、徐幸、張妮妮、陳朋云、姜燕、彭金國、楊宋坪。DB5329/T121—20251食品檢測實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物管理規(guī)范本文件規(guī)定了大理白族自治州食品檢測實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物管理的術(shù)語和定義、一般要求和管理流程。本文件適用于大理白族自治州食品檢測實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物的管理。其他實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物管理可參照本標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4789.28食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB/T27405實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品微生物檢測GB50346生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范SN/T2660食品微生物實(shí)驗(yàn)室菌種保藏方法3術(shù)語和定義GB4789.28界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物標(biāo)準(zhǔn)菌株、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株、儲(chǔ)備菌株和工作菌株的統(tǒng)稱。3.2工作菌株由標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株、儲(chǔ)備菌株、原則上4代以內(nèi)經(jīng)過轉(zhuǎn)接獲得或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品轉(zhuǎn)接1代獲得的同種菌株。3.3代將活的培養(yǎng)物接種到微生物生長的新鮮培養(yǎng)基中培養(yǎng)1次，即為1代。4一般要求4.1人員4.1.1應(yīng)滿足標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物管理工作的要求。4.1.2應(yīng)具有相應(yīng)的微生物教育經(jīng)歷或經(jīng)專業(yè)技能培訓(xùn)，掌握微生物實(shí)驗(yàn)室相關(guān)的知識，能力經(jīng)確認(rèn)合格方可上崗，并定期進(jìn)行培訓(xùn)考核。4.1.3操作特種壓力容器，應(yīng)按相應(yīng)規(guī)定持證。DB5329/T121—202524.1.4有顏色視覺障礙的人員不能從事辨色的實(shí)驗(yàn)。4.2設(shè)施與設(shè)備4.2.1應(yīng)配置與檢測要求相符合的生物安全實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室要求應(yīng)符合GB19489和GB50346的相關(guān)規(guī)定。4.2.2應(yīng)配備與標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物保藏、傳代、銷毀等實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相關(guān)的設(shè)備，定期進(jìn)行檢定或校準(zhǔn)、維護(hù)和保養(yǎng)，應(yīng)有相應(yīng)的記錄。4.3安全防護(hù)4.3.1標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物的制備過程應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行。4.3.2標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物傳代和鑒定應(yīng)根據(jù)其危害程度分類在相應(yīng)等級生物安全實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，需配置符合微生物危害等級要求的生物安全防護(hù)用品，并加貼相應(yīng)安全標(biāo)識。4.3.3標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物的保藏和領(lǐng)用，應(yīng)有專人負(fù)責(zé)保管和發(fā)放，使用情況應(yīng)進(jìn)行監(jiān)督。4.4轉(zhuǎn)借標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物不能隨意轉(zhuǎn)借其他單位或個(gè)人。需要時(shí)，借用單位需提出書面申請，記錄借用菌株名稱、類型、使用目的等信息，并填寫借用申請表，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物管理員審核，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后，方可發(fā)放菌株并將記錄歸檔，嚴(yán)格按《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》管理。5管理流程5.1流程概述標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物管理流程包括采購、驗(yàn)收、保藏、制備、銷毀、收集處置、記錄等流程。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物管理流程參見附件A。5.2采購按照計(jì)劃，應(yīng)從行業(yè)內(nèi)廣泛認(rèn)可或其他有效的、經(jīng)過認(rèn)證的商業(yè)機(jī)構(gòu)，且經(jīng)評價(jià)合格的供應(yīng)商采購工作需要的標(biāo)準(zhǔn)菌株或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品，菌株編號應(yīng)符合相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的要求。5.3驗(yàn)收應(yīng)按相關(guān)規(guī)定進(jìn)行驗(yàn)收，包括菌種發(fā)放單、菌種包裝標(biāo)簽、證書等信息，并做好記錄和歸檔。5.4保藏5.4.1采購的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物應(yīng)按供應(yīng)商提供的使用說明書要求進(jìn)行保藏。5.4.2其他標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物的保藏方法根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件參照SN/T2660執(zhí)行。5.4.3記錄標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物保藏條件、期限等信息并歸檔。5.5制備5.5.1制備要求a)每一支培養(yǎng)物應(yīng)進(jìn)行標(biāo)識，標(biāo)識內(nèi)容應(yīng)包括名稱、類別、代數(shù)、菌種號、菌種保藏位置、接種日期等信息。DB5329/T121—20253b)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株不應(yīng)用來制備標(biāo)準(zhǔn)菌株；儲(chǔ)備菌株不應(yīng)用來制備標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株和標(biāo)準(zhǔn)菌株；工作菌株不應(yīng)用來制備儲(chǔ)備菌株、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)存菌株和標(biāo)準(zhǔn)菌株。c)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株和儲(chǔ)備菌株解凍使用后不能再次凍融。d)儲(chǔ)備菌株和工作菌株制備時(shí)若需驗(yàn)證，可按照5.5.3進(jìn)行。e)從標(biāo)準(zhǔn)菌株到標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株、儲(chǔ)備菌株和工作菌株傳代次數(shù)一般不超過5代，除標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定外，或?qū)嶒?yàn)室能夠提供文件化證據(jù)證明其相關(guān)特性沒有變化。f)從質(zhì)控樣中分離標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物，僅可作為工作菌株使用。5.5.2復(fù)蘇和分離純化按照供應(yīng)商提供的使用說明書要求對標(biāo)準(zhǔn)菌株（第0代）進(jìn)行復(fù)蘇，如需培養(yǎng)，復(fù)蘇液中菌株是第1代，復(fù)蘇后采用非選擇性平板對復(fù)蘇后的標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行分離、純化。5.5.3驗(yàn)證菌株活化后、保藏前均需對平板分離出的菌落進(jìn)行存活性、純度及實(shí)驗(yàn)室中所需要的其他關(guān)鍵特征指標(biāo)（生化試驗(yàn)、血清試驗(yàn)、分子生物學(xué)試驗(yàn)等）驗(yàn)證。驗(yàn)證符合后，方可進(jìn)行制備，如驗(yàn)證不符合，應(yīng)及時(shí)反饋供應(yīng)商、滅菌銷毀和處置。5.5.4期間核查需要時(shí)，應(yīng)結(jié)合檢測工作的實(shí)際按照計(jì)劃，對標(biāo)準(zhǔn)菌株的保藏條件、有效期及標(biāo)簽完好等信息核查；標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株、儲(chǔ)備菌株和工作菌株還應(yīng)核查其存活性、純度及生化試驗(yàn)、血清試驗(yàn)等符合性指標(biāo)。5.5.5由標(biāo)準(zhǔn)菌株制備標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株和工作菌株挑取標(biāo)準(zhǔn)菌株分離、純化的菌落按適當(dāng)方法分裝保藏，即得到標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株(第1代或第2代)。挑取純菌落接種于斜面培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，即得到工作菌株(第2代或第3代)。5.5.6由標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株制備儲(chǔ)備菌株和工作菌株取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株，迅速解凍后在非選擇性平板上涂布接種培養(yǎng)后驗(yàn)證其存活性和純度，驗(yàn)證合格后，挑取純菌落進(jìn)行分裝保藏，即得到儲(chǔ)備菌株(第2代或第3代)。同時(shí)，挑取純菌落接種于斜面培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，即得到工作菌株(第3代或第4代)。5.5.7由儲(chǔ)備菌株制備工作菌株取儲(chǔ)備菌株，迅速解凍后在非選擇性平板接種培養(yǎng)后驗(yàn)證其存活性和純度，驗(yàn)證合格后，在合適斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)即得到工作菌株（第4代或第5代）。5.6銷毀5.6.1應(yīng)在監(jiān)督員的監(jiān)督下銷毀。5.6.2將需要銷毀的菌株和使用后帶菌試劑、耗材按GB/T27405規(guī)定處理。需要銷毀的菌株包括但不限于以下內(nèi)容:a)使用后的標(biāo)準(zhǔn)菌株、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株、儲(chǔ)備菌株、工作菌株及傳代次數(shù)大于5代工作菌株；b)經(jīng)驗(yàn)證不符合的菌株；c)超過保藏期限的菌株；d)其他需銷毀的菌株。DB5329/T121—202545.7收集處置無害化處理后的危險(xiǎn)廢物應(yīng)按國家有關(guān)規(guī)定交有依法取得危險(xiǎn)廢物經(jīng)營許可證的單位集中處置，執(zhí)行危險(xiǎn)廢物處置管理相關(guān)規(guī)定。5.8記錄應(yīng)對標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物管理進(jìn)行記錄并按相關(guān)要求歸檔留存，標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物記錄表參見附錄B，記錄內(nèi)容包括(但不限于)以下內(nèi)容：a)標(biāo)準(zhǔn)菌株采購、驗(yàn)收、保藏、領(lǐng)用和期間核查結(jié)果；b)制備過程中菌株標(biāo)簽、驗(yàn)證使用的培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、革蘭氏染色、菌落形態(tài)、生化試驗(yàn)、血清試驗(yàn)等結(jié)果；c)菌種保藏條件、期限和位置；d)銷毀條件、時(shí)間、日期和銷毀人；e)危害廢棄物處置交接記錄。DB5329/T121—20251（資料性）標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物管理流程圖圖A.1標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物管理流程制定計(jì)標(biāo)準(zhǔn)菌株獲得、驗(yàn)收和保存（0代）復(fù)蘇、分離和純化驗(yàn)證不符符不符制備標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株（1代）否在合適培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)（2代）否反饋生產(chǎn)商符是制備儲(chǔ)備菌株或工作菌株（2代）執(zhí)行采購合同在合適培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)（3代）否符是工作菌株（3代）在合適培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)使用測試菌株銷毀處置DB5329/T121—20252