試劑標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）-LPa

文件號：AA第1版頁數(shù)PAGE3共4頁試劑標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程項目脂蛋白a（LPa）方法膠乳凝集比濁法儀器H7600系列編寫人日期審核人日期批準(zhǔn)人日期文件分發(fā)部門和/或個人本規(guī)程自年月日起實施目錄檢測原理標(biāo)本采集與處理2.1受檢者的準(zhǔn)備2.2靜脈采血2.3抗凝劑2.4標(biāo)本處理3.試劑3.1試劑3.2校準(zhǔn)血清3.3試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性4.儀器5.操作6.計算7.操作性能7.1精密度7.2準(zhǔn)確度7.3靈敏度7.4可報告范圍7.5特異性7.6干擾8.參考值9.臨床意義附錄A:參數(shù)檢測原理血清（漿）中的脂蛋白（a）（Lp(a)）與鼠抗人脂蛋白（a）單克隆抗體膠乳增強顆粒反應(yīng)，形成凝集塊。根據(jù)對濁度的測定，求出脂蛋白（a）濃度。Lp(a)+鼠抗人脂蛋白（a）單克隆抗體膠乳增強顆?？乖贵w引起的凝集2．標(biāo)本采集與處理2.1受檢者的準(zhǔn)備：病人空腹12h，不飲酒24h后采集血樣。體檢對象抽血前應(yīng)有兩周的的正常狀況記錄。妊娠后期各項血脂都會增高，應(yīng)在產(chǎn)后或中哺乳后3個月檢驗才能反應(yīng)其基本血脂水平。注意有無應(yīng)用影響血脂的藥物，如降血脂藥、避孕藥等。此外，對于體檢者，采血的季節(jié)都應(yīng)做相關(guān)記錄，因為血脂水平有季節(jié)性變動，為了前后比較應(yīng)在每年同一季節(jié)檢驗，應(yīng)囑體檢對象在抽血前24小時內(nèi)不做劇烈運動。2.2靜脈采血：除非是臥床的病人，一般在采血時取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布，會影響測試項目的濃度。在采血前至少應(yīng)靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時間不超過1分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶。2.3抗凝劑：血漿使用肝素作為抗凝劑。2.4標(biāo)本處理：血標(biāo)本室溫放置30min～45min后離心分離血清或血漿，置潔凈試管加蓋低溫保存。3．試劑3.1試劑：本科使用上海華臣生物技術(shù)有限公司LPa試劑盒，為液體雙試劑，各組分如下：試劑包裝規(guī)格見試劑說明書。試劑1：甘氨酸緩沖液（pH9.0）50mmol/L試劑2膠乳液：鼠抗人脂蛋白（a）單克隆抗體膠乳增強顆粒1.6mg/dL3.2：校準(zhǔn)血清使用上海華臣生物技術(shù)有限公司提供LPa的專用標(biāo)準(zhǔn)液。校準(zhǔn)頻次：空白定標(biāo)：每日需做試劑空白定標(biāo)。全點定標(biāo)：試劑換批號使用時或質(zhì)控結(jié)果超過規(guī)定的2SD范圍，需要全點定標(biāo)。3.3試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性：原包裝試劑儲存在2-8℃至標(biāo)簽所示失效日期。試劑開瓶后，在儀器中至少可保存20天。試劑儲存在18-22℃穩(wěn)定15天，試劑應(yīng)避免污染。試劑R1顏色為無色，試劑R2顏色為乳白色，當(dāng)試劑變色，按照試劑失效處理。LPa專用標(biāo)準(zhǔn)液在2-8℃儲存至標(biāo)簽所示失效日期，開瓶后2-8℃儲存避免污染，可冷凍穩(wěn)定1個月。4．儀器H7600系列型號儀器。5．操作樣品為血清或肝素抗凝血漿。本法為乳膠增強免疫比濁法。參數(shù)見后附，附錄A。試劑參數(shù)設(shè)置、定標(biāo)操作以及樣本檢測常規(guī)操作，見儀器操作規(guī)程。6．計算定標(biāo)：采用多點定標(biāo)方式，用各濃度水平標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值與對應(yīng)的濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線。計算：對于自動生化儀，曲線擬合方式選擇SPLINE或log-logit4P法。樣本含量由樣本吸光度值△A在標(biāo)準(zhǔn)曲線上對應(yīng)計算得到。7．操作性能7.1精密度：批內(nèi)CV<10%，批間CV<15%。7.2準(zhǔn)確度：測量結(jié)果在上海華臣生物質(zhì)控血清靶值±2SD范圍內(nèi)。不同方法學(xué)試劑的質(zhì)控結(jié)果之間會存在差異，使用時請確保質(zhì)控選擇與試劑的方法學(xué)保持一致。7.3靈敏度：脂蛋白濃度為：500mg/L時，脂蛋白吸光度為0.190～0.200。7.4可報告范圍：血清與試劑用量之比為3:210:70時，測定上限為1000mg/L。7.5特異性：測量值在給定值的90%-110％范圍內(nèi)。7.6干擾：內(nèi)源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黃疸30mg/ml、抗壞血酸300mg/ml對測試結(jié)果無明顯影響。8．參考值0～300mg/L。9．臨床意義LPa是一種與LDL(低密度脂蛋白)結(jié)構(gòu)相近的人體血清中的蛋白，密度介于HDL(高密度脂蛋白)與LDL之間。Lpa在血液中的濃度有很大差異，從低至幾乎無法檢測到100mg/dl。原因為遺傳因素且不受飲食和生活習(xí)慣的差異控制。血清中高濃度的