試劑標準操作規(guī)程（SOP）-RF

文件號：AA第1版頁數(shù)PAGE3共4頁試劑標準操作規(guī)程項目類風濕因子RF方法膠乳增強比濁法儀器H7600系列編寫人日期審核人日期批準人日期文件分發(fā)部門和/或個人本規(guī)程自年月日起實施 目錄檢測原理標本采集與處理2.1受檢者的準備2.2靜脈采血2.3抗凝劑2.4標本處理3．試劑3.1試劑3.2校準血清3.3試劑與校準血清的穩(wěn)定性4．儀器5．操作6．計算7．操作性能7.1精密度7.2準確度7.3靈敏度7.4可報告范圍7.5特異性7.6干擾8．參考值9．臨床意義附錄A:參數(shù)1.檢測原理血清中的類風濕因子（RF）引起包被有人γ-球蛋白的膠乳微粒凝集。凝集產(chǎn)生的濁度與類風濕因子的濃度成正比，可進行比濁測定。標本采集與處理2.1受檢者的準備：病人空腹12h，不飲酒24h后采集血樣。體檢對象抽血前應有兩周的的正常狀況記錄。注意有無應用影響測試項目的藥物。此外，對于體檢者，采血的季節(jié)都應做相關記錄，因為樣本中各項目的含量有季節(jié)性變動，為了前后比較應在每年同一季節(jié)檢驗。應囑體檢對象在抽血前24小時內(nèi)不做劇烈運動。2.2靜脈采血：除非是臥床的病人，一般在采血時取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布，會影響測試項目的濃度。在采血前至少應靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時間不超過1分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶。2.3抗凝劑：不使用抗凝劑。2.4標本處理：血清在2-8C下儲存不超過一周或在-20C可保存2個月。3．試劑3.1試劑：本科使用上海華臣生物技術有限公司RF試劑盒，為液體雙試劑，各組分如下：試劑包裝規(guī)格見試劑說明書。試劑1（R1）：Tris緩沖液，pH8.220mmol/L疊氮鈉0.95g/L試劑2（R2）：包被有人γ-球蛋白的膠乳懸浮液疊氮鈉0.95g/L3.2：校準血清使用上海華臣生物技術有限公司提供的RF校準液。校準頻次：全點定標：試劑換批號使用時或質控結果超過規(guī)定的2SD范圍，需要全點定標。3.3試劑與校準血清的穩(wěn)定性：原包裝試劑儲存在2-8℃至標簽所示失效日期。試劑開瓶后，在儀器中至少可保存20天。試劑儲存在18-22℃穩(wěn)定15天，試劑應避免污染。試劑R1顏色為無色，試劑R2顏色為無色至淺黃色，當試劑變色，按照試劑失效處理。RF校準液儲存在2-8℃至標簽所示失效日期。復溶后，在-20℃下將瓶蓋擰緊保存，標準品可以儲存長達1個月的時間。4．儀器H7600系列型號儀器。5．操作樣品為血清，兩點終點法。參數(shù)見后附，附錄A。試劑參數(shù)設置、定標操作以及樣本檢測常規(guī)操作，見儀器操作規(guī)程。6．計算定標：采用多點定標方式，用各濃度水平標準品吸光度值與對應的濃度做標準曲線。計算：對于自動生化儀，曲線擬合方式選擇SPLINE或log-logit4P法。樣本含量由樣本吸光度值△A在標準曲線上對應計算得到。7．操作性能7.1精密度：批內(nèi)CV<7%，批間CV<9%。7.2準確度：測量結果在上海華臣生物質控血清靶值±2SD范圍內(nèi)。不同方法學試劑的質控結果之間會存在差異，使用時請確保質控選擇與試劑的方法學保持一致。7.3靈敏度：RF濃度為144IU/mL時，吸光度A600nm約為0.4000-0.4500。7.4可報告范圍：血清與試劑用量之比為5:240:60時，測定范圍為0～140IU/mL。7.5特異性：測量值在給定值的90%-110％范圍內(nèi)。7.6干擾：內(nèi)源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黃疸30mg/ml、抗壞血酸300mg/ml對測試結果無明顯影響。8．參考值0～50U/mL9．臨床意義類風濕因子（RF）是對抗人體IgG（免疫球