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AdualfluorescentquantitativePCRmethodfordistinguishingoorfvirus山東省獸醫(yī)協(xié)會(huì)發(fā)布Ⅰ得生物科技有限公司、山東綠都生物科技有限公司、聊城職業(yè)技術(shù)莫玲、徐晴晴、呂素芳、郭廣君、唐娜、郭時(shí)金、陳金1鑒別羊痘病毒與羊傳染性膿皰病毒的雙重?zé)晒舛縋CR方法本文件規(guī)定了羊痘病毒與羊傳染性膿皰病毒熒光定量PCR方法樣品采集、保存與運(yùn)凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單））：4.6羊痘病毒陽性對(duì)照：含有擴(kuò)增羊痘病4.7羊傳染性膿皰病毒陽性對(duì)照：含有擴(kuò)增羊傳染性膿皰病毒目的26.2組織樣品采集：發(fā)病活體羊的皮膚丘疹、鼻唇部膿皰或硬痂6.3保存：采集樣品在2℃~8℃條件下保存，時(shí)間應(yīng)不超過24h；若需要長期保存，應(yīng)放置-70℃冰6.4運(yùn)輸：采集的樣品密封后，采用保溫箱加冰密封，在2℃~8℃條件下24h內(nèi)運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室。做min，取上清液轉(zhuǎn)入離心管中編號(hào)備用。8.2.1羊痘病毒核酸陽性：被檢樣本檢線，報(bào)告為羊痘病毒核酸陽性；38＜Ct≤40，判定為可疑，可疑樣品重新檢測(cè)，如重復(fù)后仍然38＜Ct8.2.3羊傳染性膿皰病毒核酸陽性：被檢樣本檢測(cè)結(jié)果中FAM通道Ct≤38，且擴(kuò)增曲線為典型的S曲線，判定為羊痘病毒核酸陽性；38＜Ct≤40，判定為可疑，可疑樣品重新檢測(cè)，如重復(fù)后仍然38<4HEX-TAAAACCAGCAGCATCTAGT-BHTACACGGAGTTGGCCGTGATFAM-TG
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