新教材高中生物選擇性必修3課件：1 2 1 微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)(人教版)

第1課時

微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)1.概述培養(yǎng)基的成分和配制方法。2.區(qū)分消毒和滅菌，掌握不同物品的滅菌方法。3.概述微生物純培養(yǎng)的基本操作要求。學(xué)習(xí)目標(biāo)一、培養(yǎng)基的配制二、無菌技術(shù)三、微生物的純培養(yǎng)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建課時對點練內(nèi)容索引一、培養(yǎng)基的配制1.培養(yǎng)基的概念：人們按照微生物對

的不同需求，配制出供其

的營養(yǎng)基質(zhì)。2.作用：用以

、分離、

、保存微生物或積累其

。教材梳理預(yù)習(xí)新知夯實基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)生長繁殖培養(yǎng)鑒定代謝物3.培養(yǎng)基種類

培養(yǎng)基

↓加入凝固劑(如

)

培養(yǎng)基液體瓊脂固體特別提醒(1)固體培養(yǎng)基中的瓊脂僅作為凝固劑，不能為微生物生長提供能量和碳源。(2)病毒為非細(xì)胞結(jié)構(gòu)生物，只能在活細(xì)胞中營寄生生活，目前不能利用人工培養(yǎng)基來培養(yǎng)。4.培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成(1)主要營養(yǎng)物質(zhì)：水、

(提供碳元素的物質(zhì))、

(提供氮元素的物質(zhì))和無機鹽。(2)某種常見的細(xì)菌培養(yǎng)基——牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成組分含量提供的主要營養(yǎng)牛肉膏5g

等蛋白胨10g

等NaCl5g無機鹽H2O定容至1000mL水碳源氮源碳源、磷酸鹽和維生素氮源和維生素(3)還需滿足微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。例如：在培養(yǎng)乳酸桿菌時，需要在培養(yǎng)基中添加

；在培養(yǎng)霉菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至

；在培養(yǎng)細(xì)菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性；在培養(yǎng)厭氧微生物時，需要提供無氧的條件。維生素酸性(1)用于發(fā)酵的微生物主要指細(xì)菌和真菌(

)(2)培養(yǎng)基中加入瓊脂的目的是提供碳源(

)(3)所有微生物在培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中都需加入氮源(

)(4)培養(yǎng)不同微生物的培養(yǎng)基成分完全一樣(

)判斷正誤√×××探討點概述培養(yǎng)基的種類和營養(yǎng)構(gòu)成資料一：配制培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基：稱取去皮的馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000mL，加熱煮沸至馬鈴薯軟爛，用紗布過濾。向濾液中加入20g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15～20g瓊脂，用蒸餾水定容至1000mL。資料二：100g馬鈴薯中含有80g水、2g蛋白質(zhì)、16g碳水化合物，還有維生素、無機鹽等。核心探討突破重難強化素養(yǎng)結(jié)合提供的資料和教材中的“表1－1

1000mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成”，分析并回答下列問題：1.按物理性質(zhì)劃分上述兩種培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基的種類。提示由于瓊脂是凝固劑，所以培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基未加凝固劑，是液體培養(yǎng)基。2.分析上述兩種培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成。提示都含有水、碳源、氮源、無機鹽和維生素等，其中培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基中主要由糖類提供碳源，蛋白質(zhì)提供氮源，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中主要由牛肉膏提供碳源，主要由蛋白胨提供氮源。3.為什么培養(yǎng)基需要氮源？提示培養(yǎng)基中的氮元素是微生物合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)所必需的。4.下表是某微生物培養(yǎng)基的成分，請分析該培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)哪種微生物？若除去①，此培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)圓褐固氮菌嗎？編號①②③④⑤成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量/g0.44.00.50.5100mL提示此培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物。圓褐固氮菌雖可以固氮，但其同化作用類型為異養(yǎng)型，培養(yǎng)基中必須提供含碳有機物，所以該培養(yǎng)基不能用來培養(yǎng)圓褐固氮菌。1.培養(yǎng)基的成分及功能核心歸納營養(yǎng)要素來源功能碳源無機碳源CO2、CO、HCO等含碳無機物①構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；②有機碳既是碳源又是能源有機碳源糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機酸、石油等氮源無機氮源銨鹽、硝酸鹽等將無機氮合成含氮的代謝產(chǎn)物有機氮源牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物水外界攝入①良好的溶劑；②維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定無機鹽無機物①提供無機營養(yǎng)；②調(diào)節(jié)pH；③維持滲透壓2.幾種微生物的營養(yǎng)和能量來源微生物碳源氮源能源藍細(xì)菌CO2光能硝化細(xì)菌CO2NH3NH3的氧化根瘤菌糖類等有機物N2有機物大腸桿菌糖類、蛋白質(zhì)等有機物蛋白質(zhì)等有機物3.培養(yǎng)基的類型標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基特點作用物理性質(zhì)固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂微生物的分離與鑒定，活菌計數(shù)，保藏菌種半固體培養(yǎng)基容器放倒不致流出，劇烈震動則破散觀察微生物的運動、分類鑒定液體培養(yǎng)基不加凝固劑常用于工業(yè)生產(chǎn)功能選擇培養(yǎng)基根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求配制選擇分離鑒別培養(yǎng)基加入能與目的菌的代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑鑒定來源天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基用已知的化學(xué)物質(zhì)配制分類鑒定1.關(guān)于微生物的營養(yǎng)，下列說法正確的是A.同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外的無機物僅提供無機鹽D.無機氮源也可能提供能量典題應(yīng)用及時反饋知識落實√解析對一些微生物來說，含C、H、O、N的有機化合物可以既是碳源，又是氮源，A錯誤；CO2是光能自養(yǎng)型細(xì)菌的碳源，但不能提供能量，B錯誤；除水以外的無機物種類繁多、功能多樣，如CO2可作自養(yǎng)型微生物的碳源，C錯誤；硝化細(xì)菌所利用的氮源是無機氮源——氨，同時氨的氧化過程也為硝化細(xì)菌提供用以化能合成作用的能源，D正確。2.下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述，正確的是A.微生物的培養(yǎng)都需要提供水、碳源、氮源、無機鹽，缺一不可B.微生物在固體培養(yǎng)基上生長時，可以形成肉眼可見的單個細(xì)菌C.培養(yǎng)細(xì)菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性D.培養(yǎng)基只能培養(yǎng)細(xì)菌√解析并非所有微生物的培養(yǎng)基中都必須含有碳源、氮源，自養(yǎng)微生物不需要碳源，固氮微生物不需要氮源，A錯誤；微生物在固體培養(yǎng)基上生長時，可以形成肉眼可見的單個菌落，肉眼不能觀察到單個細(xì)菌，B錯誤；培養(yǎng)基能培養(yǎng)細(xì)菌，也能培養(yǎng)真菌，D錯誤。二、無菌技術(shù)教材梳理預(yù)習(xí)新知夯實基礎(chǔ)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，主要包括消毒和滅菌。1.消毒(1)概念：指使用較為

的物理、化學(xué)或

等方法殺死物體表面或內(nèi)部

微生物。(2)適用對象：操作的

、操作者的

和手等。(3)常用方法：

消毒、

消毒等。溫和生物一部分空間衣著煮沸巴氏2.滅菌(1)概念：指使用

的理化方法殺死物體內(nèi)外

的微生物，包括

和孢子。(2)適用對象：用于微生物培養(yǎng)的器皿、

用具和

等。(3)常用方法：

滅菌、干熱滅菌和

滅菌等。強烈所有芽孢接種培養(yǎng)基濕熱灼燒(1)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染(

)(2)滅菌相比消毒對微生物的殺滅更徹底(

)(3)無菌操作的對象只要是沒有生物活性的材料(如培養(yǎng)基、接種環(huán)等)都可采用干熱滅菌法進行滅菌(

)判斷正誤√√×探討點消毒和滅菌的比較及無菌技術(shù)的其他作用1.比較消毒和滅菌核心探討突破重難強化素養(yǎng)項目消毒滅菌作用強度較為____

的物理、化學(xué)因素消滅微生物的數(shù)量物體表面或內(nèi)部

微生物物體內(nèi)外的

微生物能否消滅芽孢、孢子消滅部分芽孢能消滅全部芽孢和孢子溫和強烈一部分所有適用對象操作空間、操作者的衣著和手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等常用方法

消毒法、

消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法

、

、________煮沸巴氏灼燒滅菌干熱滅菌濕熱滅菌2.無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么作用？提示無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。1.消毒和滅菌的主要方法及應(yīng)用范圍核心歸納項目主要方法應(yīng)用范圍消毒巴氏消毒法62～65℃消毒30min或80～90℃處理30s～1min牛奶、啤酒、果酒和醬油等不耐高溫的液體煮沸消毒法100℃煮沸5～6min家庭餐具等生活用品紫外線消毒30W紫外燈照射30min(損傷細(xì)菌的DNA)接種室、接種箱或超凈工作臺消毒化學(xué)藥劑消毒用體積分?jǐn)?shù)為70%～75%的乙醇、碘酒皮膚、傷口、動植物組織表面消毒、空氣、手術(shù)器械、塑料或玻璃器皿滅菌灼燒滅菌直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒涂布器、接種環(huán)、接種針或其他金屬用具，試管口或瓶口等干熱滅菌干熱滅菌箱中，160～170℃的熱空氣中維持2～3h耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金屬用具等滅菌高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)100kPa、121℃維持15～30min培養(yǎng)基等2.芽孢和孢子芽孢：有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個橢圓形的休眠體(不是繁殖體)，叫作芽孢。芽孢的壁很厚，對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強的抵抗力。例如，有的細(xì)菌的芽孢，煮沸3小時以后才死亡。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。當(dāng)環(huán)境適宜(如溫度、水分適宜)的時候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個細(xì)菌。孢子：細(xì)菌、原生動物、真菌和植物等產(chǎn)生的一種有繁殖或休眠作用的生殖細(xì)胞。孢子的特點是能直接長成新個體。3.下列有關(guān)無菌技術(shù)的說法，正確的是A.無菌技術(shù)的關(guān)鍵是殺滅實驗室中的所有的微生物B.培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進行濕熱滅菌C.經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底消滅，不能在常溫下長期

保存D.無菌技術(shù)中，若處理對象為液體，則只能消毒，不能滅菌典題應(yīng)用及時反饋知識落實√解析無菌技術(shù)的關(guān)鍵是防止雜菌的污染，A錯誤；培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般用濕熱滅菌法滅菌，微生物的接種工具，如接種針、接種環(huán)或其他金屬用具一般通過酒精燈火焰灼燒來滅菌，B錯誤；無菌技術(shù)中，若處理對象為液體，可以用高壓蒸汽滅菌法滅菌，D錯誤。4.(2021·四川成都外國語學(xué)校高二開學(xué)考試)關(guān)于消毒、滅菌的方法，下列描述錯誤的是A.接種用的無菌操作臺要進行滅菌處理B.用巴氏消毒法處理牛奶是因為高溫易破壞牛奶的營養(yǎng)成分C.煮沸半小時后的涼開水中可能仍含有部分芽孢和孢子D.先噴灑消毒液，再用紫外線照射可增強消毒效果√解析無菌操作臺常使用紫外線進行消毒，A錯誤；煮沸消毒不能殺死所有的芽孢和孢子，C正確；對于實驗室、接種室或接種箱等的消毒，先適量噴灑消毒液，再用紫外線照射可增強消毒效果，D正確。三、微生物的純培養(yǎng)1.概念：由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為

，獲得純培養(yǎng)物的過程就是

。2.步驟微生物的純培養(yǎng)包括

、

、

、

等步驟。教材梳理預(yù)習(xí)新知夯實基礎(chǔ)純培養(yǎng)物純培養(yǎng)配制培養(yǎng)基滅菌接種分離和培養(yǎng)(1)倒平板后，待平板冷凝之后需將其倒置(

)(2)若皿蓋和皿底之間濺上培養(yǎng)基，這個培養(yǎng)基不可再用(

)(3)培養(yǎng)微生物的溫度因菌種不同而稍有差異(

)判斷正誤√√√探討點酵母菌的純培養(yǎng)(一)原理：微生物群分散或稀釋成單個細(xì)胞，單個細(xì)胞繁殖成單個菌落。菌落：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的

，這就是菌落。(二)方法：采用

法和

法將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。核心探討突破重難強化素養(yǎng)子細(xì)胞群體平板劃線稀釋涂布平板(三)步驟(1)制備培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基―→滅菌―→倒平板。倒平板注意事項：①溫度：50℃左右；②操作：在酒精燈火焰附近；③冷凝后平板倒置。(2)接種和分離酵母菌通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步___

到培養(yǎng)基表面。經(jīng)過數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落。稀釋分散(3)培養(yǎng)酵母菌完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板和一個未接種的平板倒置，放入28℃左右的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48h。請思考以下問題：1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。可用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？提示可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺溫度下降到剛剛不燙手即可。2.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？提示既可以防止水分過快蒸發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。3.下列接種過程正確的順序是

。baefcgd4.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？灼燒時期目的取菌種前殺死接種環(huán)上原有微生物每次劃線前殺死上次劃線時殘留菌種，使下一次劃線的菌種直接來源上次劃線的末端，從而使________________________

，直至得到單個細(xì)胞接種結(jié)束后殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者每次劃線時菌種數(shù)目逐漸減少5.若要按照如圖d進行劃線，那么在接種劃線的操作過程中，共灼燒了幾次接種環(huán)？提示圖中共劃了5個區(qū)域，在每次劃線前后均需要對接種環(huán)灼燒滅菌，因此共需要灼燒接種環(huán)6次。6.在第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的原因是：劃線后，線條末端酵母菌的數(shù)目比線條起始處要

，每次從上一次劃線的末端開始，能使酵母菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步

，最終能得到由

細(xì)胞繁殖而來的菌落。7.為什么最后一次劃線與第一次的劃線不能相連？少減少單個提示最后一次劃線已經(jīng)將細(xì)菌稀釋成單個的細(xì)胞，如果與第一次劃線相連則增加了細(xì)菌的數(shù)目，得不到純化的效果。8.設(shè)置未接種平板組的意義是什么？提示通過觀察未接種平板是否有菌落存在以確定培養(yǎng)基是否被污染或滅菌是否徹底。1.配制培養(yǎng)基的注意事項(1)如果需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，應(yīng)該在定容完成后，滅菌之前進行操作。(2)培養(yǎng)基滅菌后要冷卻到50℃左右時開始倒平板。其原因是瓊脂是一種多糖，在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，倒平板時高于50℃會燙手，低于50℃時，若不及時操作，瓊脂會凝固。(3)倒平板時，要使錐形瓶的瓶口迅速通過火焰。通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。核心歸納(4)平板冷卻凝固后，要將平板倒置。(5)在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，那么這個平板不能用來培養(yǎng)微生物，因為空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。2.平板劃線法接種菌種時，可防止雜菌污染的操作(1)接種前將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒。(2)劃線操作在酒精燈火焰旁進行。(3)接種環(huán)蘸取菌液前后，要將試管口通過火焰。(4)劃線時將培養(yǎng)皿的皿蓋打開一條縫隙，用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃線，劃線后及時蓋上皿蓋。3.實驗結(jié)果的分析(1)培養(yǎng)未接種的培養(yǎng)基的目的是檢測培養(yǎng)基是否被雜菌污染(或檢查培養(yǎng)基制備是否合格)。未接種的培養(yǎng)基表面若有菌落生長，則說明培養(yǎng)基被污染，應(yīng)該重新制備；若無菌落生長，則說明未被污染。(2)在接種酵母菌的培養(yǎng)基上可觀察到獨立的菌落，這些菌落在顏色、形狀和大小上相似，酵母菌菌落一般表面光滑，多呈乳白色。(3)若在培養(yǎng)基中觀察到不同形態(tài)的菌落，原因可能是菌液不純，混入其他雜菌，或在實驗操作過程中被雜菌污染。5.下列關(guān)于倒平板的敘述，錯誤的是A.待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時倒平板B.倒平板整個過程應(yīng)在酒精燈火焰旁進行C.完全打開培養(yǎng)皿皿蓋，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左

手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋D.為避免水滴滴入培養(yǎng)基，平板應(yīng)倒過來放置典題應(yīng)用及時反饋知識落實√解析C項應(yīng)是用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，而不是完全打開皿蓋，目的是防止雜菌污染。6.(2021·山東青島市高二期中)在分離、純化細(xì)菌的實驗中，劃線接種(甲)、培養(yǎng)結(jié)果(乙)如下圖，a、b、c、d是劃線的四個區(qū)域。下列敘述錯誤的是A.每次劃線前后都要對接種環(huán)灼燒滅菌B.連續(xù)劃線的目的是獲得單個細(xì)菌形成的菌落C.甲圖中的a區(qū)域為劃線的起始區(qū)域D.蘸取菌液和劃線要在酒精燈火焰旁進行√解析圖中a對應(yīng)的區(qū)域出現(xiàn)了單個菌落，d區(qū)域菌落最多，因此a區(qū)域應(yīng)該為劃線的最終區(qū)域，d區(qū)域為劃線的起始區(qū)域，C錯誤。網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建課時對點練題組一培養(yǎng)基的配制1.(2021·內(nèi)蒙古赤峰二中高二下月考)下列關(guān)于微生物營養(yǎng)物質(zhì)的描述，正確的是A.所有碳源都能為微生物生長提供能源B.蛋白胨主要提供氮源和維生素C.硝酸鉀只能為微生物生長提供無機鹽D.營養(yǎng)物質(zhì)越多，微生物生長繁殖越快對點訓(xùn)練√1234567891011121314151617解析有機碳源能為異養(yǎng)微生物提供碳源和能源，無機碳源只能為自養(yǎng)微生物提供碳源，不能提供能源，A錯誤；硝酸鉀能為微生物生長提供無機鹽和氮源等，C錯誤；培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)需要控制一定的含量和比例，營養(yǎng)物質(zhì)含量太多會導(dǎo)致培養(yǎng)基滲透壓過高，從而抑制微生物的生長，D錯誤。12345678910111213141516172.(2020·遼寧鞍山市高二月考)下列關(guān)于微生物培養(yǎng)基的說法，不正確的是A.牛肉膏主要給微生物提供碳源、磷酸鹽和維生素B.培養(yǎng)硝化細(xì)菌可以不加有機碳C.微生物都可以利用瓊脂作為碳源D.固體培養(yǎng)基常用于菌種的鑒定和分離1234567891011121314151617√3.(2021·四川成都月考)如表所示為某培養(yǎng)基的配方，下列敘述錯誤的是1234567891011121314151617成分NaNO3K2HPO4MgSO4·7H2O(CH2O)蒸餾水青霉素含量3g1g0.5g30g定容至1000mL0.1萬單位A.根據(jù)物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B.該培養(yǎng)基不能用于培養(yǎng)大腸桿菌C.根據(jù)培養(yǎng)基的配方可知，該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物的同化作用類型是異

養(yǎng)型D.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可形成液體培養(yǎng)基√解析固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基的區(qū)別在于是否加入凝固劑(如瓊脂)，題表所示的培養(yǎng)基配方中沒有瓊脂，因此屬于液體培養(yǎng)基，A正確、D錯誤；1234567891011121314151617成分NaNO3K2HPO4MgSO4·7H2O(CH2O)蒸餾水青霉素含量3g1g0.5g30g定容至1000mL0.1萬單位加入青霉素會抑制細(xì)菌的生長繁殖，B正確；該培養(yǎng)基中的(CH2O)可作為有機碳源，因此其培養(yǎng)的微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型，C正確。題組二無菌技術(shù)4.接種環(huán)、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、實驗操作者的雙手所采用的滅菌、消毒方法依次是①煮沸消毒法②灼燒滅菌③干熱滅菌④化學(xué)藥劑消毒⑤高壓蒸汽滅菌A.①②③⑤ B.②③⑤④ C.②③④⑤ D.①②⑤④1234567891011121314151617解析根據(jù)分析，接種環(huán)可用灼燒滅菌達到迅速徹底的滅菌效果；培養(yǎng)皿能耐高溫，常用干熱滅菌；培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；實驗操作者的雙手用化學(xué)藥劑進行消毒，用酒精擦拭雙手?！?.防止雜菌入侵，獲得純凈的培養(yǎng)物，是研究和應(yīng)用微生物的前提。下列敘述錯誤的是A.實驗室里可以用紫外線或化學(xué)藥物進行消毒B.接種環(huán)、接種針等金屬用具，直接在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌C.在實驗室中，切不可吃東西、喝水，離開實驗室時一定要洗手，以

防止被微生物感染D.使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進行滅菌處理，以免污染環(huán)境1234567891011121314151617解析接種環(huán)、接種針等金屬用具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層即外焰部位灼燒滅菌，B錯誤。√6.(2021·夏津第一中學(xué)高二月考)下列關(guān)于無菌技術(shù)的敘述，錯誤的是A.紫外線照射30min是有效的滅菌方法B.滅菌所使用的物理、化學(xué)方法比較強烈C.消毒所使用的物理、化學(xué)方法比較溫和D.濕熱滅菌、干熱滅菌和灼燒滅菌有不同的適用條件1234567891011121314151617√解析不同的滅菌對象有各自最適用的滅菌方法，且紫外線照射30min是有效的消毒方法而非滅菌方法，A錯誤。題組三微生物的純培養(yǎng)7.(2021·遼寧葫蘆島市高二月考)如圖是倒平板的操作，下列相關(guān)敘述錯誤的是1234567891011121314151617A.正確的操作順序是丙→乙→甲→丁B.甲應(yīng)在酒精燈火焰附近進行C.此培養(yǎng)基不可能為液體培養(yǎng)基D.完成甲后應(yīng)快速進行丁操作√解析等到所倒的平板凝固后，再進行丁的操作，D錯誤。12345678910111213141516178.下列有關(guān)平板劃線操作的敘述，錯誤的是A.將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅B.接種環(huán)在平板上隨機劃線時不要劃破培養(yǎng)基C.在蘸取菌液前后均要將盛有菌液的試管口通過火焰D.平板冷卻后倒置，放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1234567891011121314151617√解析接種環(huán)在平板上劃線時采用分區(qū)劃線，每個區(qū)要劃3～5條平行線，而不是隨機劃的。9.如圖是平板劃線示意圖，劃線的順序為1→2→3→4→5。下列操作方法正確的是1234567891011121314151617A.操作前不用進行任何處理B.劃線操作必須在火焰上進行C.在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D.在1、2、3、4、5次劃線的前后都要對接種環(huán)滅菌√解析劃線之前應(yīng)對接種環(huán)灼燒滅菌；劃線操作在酒精燈火焰旁進行；從第1次劃線至第5次劃線菌落密度越來越小，因劃線所用菌種密度的不同，在第3、4、5次劃線中都可能得到所需菌落。10.(2021·河北邢臺期末)下列有關(guān)微生物的分離與培養(yǎng)的敘述，錯誤的是A.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B.倒置平板可防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落造成污染C.倒平板時將培養(yǎng)皿的蓋拿開，以便于將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿D.檢驗培養(yǎng)基是否被雜菌污染的最有效方法是將未接種的培養(yǎng)基放在

恒溫箱中培養(yǎng)1234567891011121314151617解析倒平板時用食指和拇指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，使其恰好能讓錐形瓶瓶口伸入，隨后倒入培養(yǎng)基，C錯誤?！?1.下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長繁殖；甲能在Ⅰ中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，甲、丙都不能。下列說法正確的是綜合強化1234567891011121314151617序號粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g(NH4)2SO40.4gH2O100mLMgSO49.25gCaCl20.5gⅠ＋＋＋＋

＋＋＋Ⅱ＋＋＋

＋＋＋＋Ⅲ＋＋＋＋＋＋＋＋A.甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物B.甲、乙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物C.甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物D.甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物1234567891011121314151617序號粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g(NH4)2SO40.4gH2O100mLMgSO49.25gCaCl20.5gⅠ＋＋＋＋

＋＋＋Ⅱ＋＋＋

＋＋＋＋Ⅲ＋＋＋＋＋＋＋＋√12.下圖為實驗室培養(yǎng)和純化酵母菌過程中的部分操作步驟，下列說法不正確的是1234567891011121314151617A.①步驟使用的培養(yǎng)基是已經(jīng)調(diào)節(jié)過pH并滅菌的培養(yǎng)基B.①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行C.③到④的過程中，接種環(huán)共灼燒了5次D.④步驟操作時，不能將第1區(qū)和第5區(qū)的劃線相連√解析接種環(huán)在每次劃線前和接種結(jié)束后都要通過灼燒來滅菌，所以③到④的過程中5次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結(jié)束后還需灼燒滅菌1次，防止造成污染，由此可見，③到④的過程中共需灼燒接種環(huán)6次，C錯誤。123456789101112131415161713.(2021·山東膠州高二上期末改編)某研究小組用平板劃線法從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是A.培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌B.轉(zhuǎn)換劃線角度時不需灼燒接種環(huán)即可進行劃線C.接種時不能劃破培養(yǎng)基，否則難以達到分離單菌落的目的D.劃線操作時完全打開皿蓋，劃完立即蓋上1234567891011121314151617√解析培養(yǎng)基配制好后要先高壓蒸汽滅菌，后分裝到培養(yǎng)皿，A錯誤；轉(zhuǎn)換劃線角度后要對接種環(huán)進行灼燒滅菌，冷卻后再進行劃線，B錯誤；劃線時左手將皿蓋打開一條縫隙，右手于酒精燈火焰旁將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，不可完全打開皿蓋，D錯誤。1234567891011121314151617123456789101112131415161714.金黃色葡萄球菌有很強的致病力，常引起骨髓炎等，還可能引起食物中毒，實驗中下列做法錯誤的是A.對接種環(huán)進行灼燒處理B.將燒紅的接種環(huán)在酒精燈火焰旁邊冷卻C.帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)加熱后才能倒掉D.接種后雙手必須經(jīng)肥皂洗凈，再用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精棉球擦拭√解析帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)濕熱滅菌后才能倒掉，簡單的加熱達不到滅菌效果，C項錯誤。15.將大腸桿菌接種到適宜的細(xì)菌培養(yǎng)基上，加蓋后，以不同的方式處理，并放置在不同溫度的環(huán)境中，培養(yǎng)24小時后，所得結(jié)果如表：1234567891011121314151617編號abcdef處理方法接種大腸桿菌接種大腸桿菌，并覆一吸有抗生素X的圓紙片接種大腸桿菌，并覆一吸有抗生素Y的圓紙片接種大腸桿菌，表面全被醋覆蓋接種大腸桿菌無接種菌溫度40℃40℃40℃40℃0℃40℃觀察結(jié)果全表面呈渾濁紙片周圍呈現(xiàn)一片清晰區(qū)，其余表面呈渾濁全表面呈渾濁全表面清晰全表面清晰全表面清晰根據(jù)上述實驗結(jié)果所作出的判斷，錯誤的是A.編號a和f比較可知，有大腸桿菌培養(yǎng)基的表面會變渾濁B.根據(jù)編號b和c的觀察結(jié)果，可知抗生素Y比抗生素X的殺菌能力強C.將編號e和a的結(jié)果比較可知，0℃的環(huán)境不適合大腸桿菌生長D.若揭開編號f的蓋子，24小時后培養(yǎng)基表面會出現(xiàn)渾濁1234567891011121314151617解析將含有抗生素的紙片覆蓋在大腸桿菌的培養(yǎng)基上，可根據(jù)培養(yǎng)基表面的渾濁程度判定此種抗生素對大腸桿菌的殺菌能力，可知抗生素X的殺菌能力強于抗生素Y的殺菌能力，B錯誤?！?6.(2018·全國Ⅱ，37改編)在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題：(1)在實驗室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具_____(填“可以”或“不可以”)放入密閉容器如干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。1234567891011121314151617可以解析干熱滅菌是指將滅菌物品放入密閉容器如干熱滅菌箱內(nèi)，在160～170℃加熱2～3h。耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿等)和金屬用具等，可采用干熱滅菌的方法。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比