食品衛(wèi)生微生物學檢驗技術(shù)課件

引言中國工程院院士陳君石在2021年12月6日召開的中國工程科技論壇十周年座談會上作上述表示：人們對于食品平安問題尚缺乏科學、正確和客觀的了解，所以我們需要傳播一些基于科學的認識和一些應該采取的措施?！氨确较M者普遍關(guān)心的是食品當中存在的化學性污染，像農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、重金屬以及環(huán)境污染物等，對〞真正第一號的食品平安問題“由致病性微生物引起的食源性疾病反而比較無視。〞陳院士說，這說明老百姓對食品平安缺乏科學、客觀的認識。

食品衛(wèi)生微生物學檢驗方法國家標準的演變

菌落總數(shù)、霉菌酵母菌計數(shù)、商業(yè)無菌

大腸菌群計數(shù)

沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌檢驗方法

其他致病菌及檢測方法簡介內(nèi)容提要

食品衛(wèi)生微生物學檢驗技術(shù)基礎(chǔ)知識一、食品微生物學檢驗根底知識1微生物的概念微生物是指那些個體微小，結(jié)構(gòu)簡單，肉眼看不到必須借助顯微鏡才能觀察得到的一群微小生物。2微生物的種類廣義的微生物包括細菌、病毒、立克次體、放線菌、衣原體、真菌〔霉菌、酵母菌〕、藍藻、支原體等。3微生物的特點個體微小、結(jié)構(gòu)簡單、代謝能力強、繁殖速度快、種類繁多、分布廣泛、容易發(fā)生變異。一、食品微生物學檢驗根底知識一、食品微生物學檢驗根底知識5微生物的形態(tài)與結(jié)構(gòu)微生物是一個很大的生物群體，通常按照細胞結(jié)構(gòu)的差異劃分為三類，即原核細胞型、真核細胞型、非細胞型。微生物原核細胞生物：細菌真核細胞生物：霉菌、酵母菌非細胞型生物：病毒一、食品微生物學檢驗根底知識5.1細菌細菌屬于單細胞的原核細胞型微生物，僅有原始的細胞核而無核膜與核仁，細胞器也不完整。細菌的外形通常有球狀、桿狀、螺旋狀〔包括弧菌〕三大類。細菌的個體微小通常以微米來表示，必須借助光學顯微鏡才能觀察到，細菌是食品中最常見的微生物。一、食品微生物學檢驗根底知識細菌的根本結(jié)構(gòu)有細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、核質(zhì)、質(zhì)粒等，某些細菌還具有一些特殊結(jié)構(gòu)，例如鞭毛、莢膜、菌毛、芽孢等。一、食品微生物學檢驗根底知識5.2真菌真菌屬于真核細胞型微生物，真菌在進化水平上較細菌高，個體也比細菌大。真菌分為單細胞和多細胞兩大類。常見的單細胞型真菌是酵母菌。多細胞型真菌能夠形成菌絲和孢子，菌絲伸長分支，交叉糾纏成團狀，稱之為絲狀菌或霉菌。還有一類大型真菌，可以形成體積巨大的子實體，可以供食用或藥用，例如蘑菇、木耳等食用菌。一、食品微生物學檢驗根底知識一、食品微生物學檢驗根底知識5.3病毒病毒屬于非細胞型的微生物，比細菌還要小得多。病毒沒有完整的細胞結(jié)構(gòu)，不能獨立生活，只能寄生在活的細胞內(nèi)。所有病毒的結(jié)構(gòu)都是蛋白質(zhì)外殼和核酸，。病毒形態(tài)多樣，常見的有棒狀、彈狀、球狀、蝌蚪狀等形態(tài)，其大小也從10nm到200nm不等。一、食品微生物學檢驗根底知識6.1有害微生物對人類和生產(chǎn)的影響：引起食品變質(zhì)引起食物中毒導致人體患病一、食品微生物學檢驗根底知識是衡量食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標,也是判定被檢食品能否食用的科學依據(jù)可以判斷食品加工環(huán)境及食品衛(wèi)生的情況,為衛(wèi)生管理工作提供科學依據(jù)可以有效地防止或減少食物中毒和人畜共患病的發(fā)生保證產(chǎn)品的質(zhì)量,防止不必要的損失生產(chǎn)環(huán)境的檢驗原輔料的檢驗食品加工、儲藏、銷售儲環(huán)節(jié)的檢驗食品的檢驗一、食品微生物學檢驗根底知識一、食品微生物學檢驗根底知識一、食品微生物學檢驗根底知識8常用設(shè)備光學顯微鏡培養(yǎng)箱水浴箱一、食品微生物學檢驗根底知識超凈工作臺：側(cè)流式、直流式和外流式枯燥箱高壓蒸汽滅菌器一、食品微生物學檢驗根底知識離心機濾菌器均質(zhì)器〔勻漿器〕冰箱一、食品微生物學檢驗根底知識玻璃器材及其他試管三角燒瓶燒杯玻璃棒培養(yǎng)皿接種環(huán)涂布棒酒精燈移液管移液器剪刀、鑷子試管架一、食品微生物學檢驗根底知識10培養(yǎng)基10.1培養(yǎng)基中的主要成分及其作用營養(yǎng)物質(zhì)：N源、C源、無機鹽、生長因子、水水：用蒸餾水，不能用自來水凝固劑:瓊脂、明膠、血清等抑制劑:鑒定細菌、抑制雜菌的生長繁殖，增加待檢菌的檢出率指示劑:用于指示鑒別細菌可否利用分解糖醇類物質(zhì)和含氮化合物，產(chǎn)酸產(chǎn)堿的能力一、食品微生物學檢驗根底知識10.2培養(yǎng)基的類型在實驗室中配制的適合微生物生長繁殖或累積代謝產(chǎn)物的任何營養(yǎng)基質(zhì)，都叫做培養(yǎng)基(Media)。由于各類微生物對營養(yǎng)的要求不同，培養(yǎng)目的和檢測需要不同，因而培養(yǎng)基的種類很多。我們可根據(jù)某種標準，將種類繁多的培養(yǎng)基劃分為假設(shè)干類型。一、食品微生物學檢驗根底知識根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來區(qū)分固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基根據(jù)培養(yǎng)基的用途來區(qū)分增殖培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基

一、食品微生物學檢驗根底知識10.3培養(yǎng)基制備的根本方法和本卷須知培養(yǎng)基的制備記錄培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正培養(yǎng)基的過濾澄清培養(yǎng)基的分裝培養(yǎng)基的滅菌培養(yǎng)基的質(zhì)量測試培養(yǎng)基的保存一、食品微生物學檢驗根底知識一、食品微生物學檢驗根底知識10.5培養(yǎng)基的保存根底培養(yǎng)基不能超過兩周生化試驗培養(yǎng)基不宜超過一周，選擇性或鑒別性培養(yǎng)最好當天使用，傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過3天一、食品微生物學檢驗根底知識培養(yǎng)基、玻璃器皿天平秤、藥匙培養(yǎng)基配製–儀器殺菌鍋

(Autoclave)無菌操作臺

(Laminarflow)培養(yǎng)基的配制

–裝水以量桶裝取適當量蒸餾水於玻璃容器中於玻璃容器上標示培養(yǎng)基名稱培養(yǎng)基配製–秤藥培養(yǎng)基配製–溶解培養(yǎng)基傾倒培養(yǎng)基時小心不要沾到玻璃壁上注意事項–配藥結(jié)束清理配藥桌面與天平清洗秤藥匙，擦乾放回藥品放回藥品櫃培養(yǎng)基配製–分裝調(diào)整分注器(Dispensette)

刻度分裝試管蓋上試管蓋放入殺菌鍋

(Autoclave)

滅菌培養(yǎng)基配製–滅菌加水蓋過鐵板放東西關(guān)門調(diào)整溫度時間關(guān)緊洩壓閥注意事項–殺菌鍋的使用注意事項–殺菌釜使用滅菌結(jié)束後，等壓力降回零時才可打開門進入殺菌釜之物品，蓋子不可關(guān)太緊或太鬆培養(yǎng)基配製–平板培養(yǎng)基滅過菌之固態(tài)培養(yǎng)基於無菌操作臺(Laminarflow)內(nèi)倒製平板培養(yǎng)基(Plate)日光燈UV燈風扇一、食品微生物學檢驗根底知識一、食品微生物學檢驗根底知識一、食品微生物學檢驗根底知識無菌室無菌室的結(jié)構(gòu)：更衣間、緩沖間、操作間更衣間操作間緩沖間無菌室的消毒和防污染每日〔使用前〕紫外線照射〔1~2小時〕.每周用甲醛、乳酸、過氧乙酸熏蒸〔2小時〕.每月用新潔爾滅擦拭地面和墻壁一次的方式進行消毒。一、食品微生物學檢驗根底知識超凈工作臺超凈臺的使用與保養(yǎng):〔1〕風速保持在米/秒;〔2〕使用前開啟紫外燈照射30分鐘以上;〔3〕讓超凈臺預工作10－15分鐘;〔4〕使用完畢后，用70%酒精將臺面和臺內(nèi)四周擦拭干凈.一、食品微生物學檢驗根底知識11.3無菌器材滅菌器材：玻璃器皿、培養(yǎng)基、無菌衣等.消毒器材：無菌室內(nèi)的凳子、試管架、天平、工作臺、手等一、食品微生物學檢驗根底知識11.4無菌操作目的：是保證待檢物品不被環(huán)境中微生物的污染；是防止被檢微生物在操作中污染環(huán)境或感染操作人員。一、食品微生物學檢驗根底知識11.5進入無菌室前的準備定期檢查無菌環(huán)境的空氣是否符合規(guī)定；用紫外線滅菌處理30~60分鐘；檢查無菌器材是否完備；洗手消毒；手部消毒后，再穿戴無菌工作服一、食品微生物學檢驗根底知識無菌操作–取菌技巧1無菌操作–取菌技巧16.接種環(huán)燒紅滅菌無菌操作–取菌技巧1(方法二：plate反面拿起)無菌操作–取菌技巧22.打開試管蓋無菌操作–接菌技巧試管直放，空氣中菌體容易掉入無菌操作–錯誤示範一、食品微生物學檢驗根底知識11.7別離純化傾注平板法涂布平板法平板劃線法一、食品微生物學檢驗根底知識11.8微生物的培養(yǎng)方法一般培養(yǎng)法〔需氧培養(yǎng)〕厭氧培養(yǎng)法CO2培養(yǎng)法一、食品微生物學檢驗根底知識11.9微生物培養(yǎng)特性觀察與記錄在固體培養(yǎng)基上，觀察：菌落大小、形態(tài)、顏色、光澤度、透明度、質(zhì)地、隆起形狀、邊緣特征及遷移性等；在液體培養(yǎng)中：外表生長情況〔菌膜、環(huán)〕混濁度及沉淀等。半固體培養(yǎng)基穿刺接種：觀察運動、擴散情況。一、食品微生物學檢驗根底知識一、食品微生物學檢驗根底知識12.1物理滅菌法物理滅菌的方法有光、熱和機械等，按照不同需求采用不同的方式。培養(yǎng)基和器械采用加熱滅菌，但某些不耐熱的液體培基那么采用過濾除菌法。加熱滅菌是最常用的滅菌方法，通過加熱產(chǎn)生高溫使得菌體蛋白質(zhì)變性凝固，酶失活，從而到達滅菌目的。加熱滅菌又可分為濕熱和干熱兩種，同一溫度下，濕熱的滅菌效果比干熱好。一、食品微生物學檢驗根底知識干熱滅菌法：通過使用干熱空氣殺滅微生物的方法稱為干熱滅菌法。通常把待滅菌的物品包裝好放入枯燥箱中烘烤，加熱至160℃~170℃維持2個小時。該法可用于玻璃器皿、金屬器械的滅菌，但凡帶有橡膠的物品、液體及固體培養(yǎng)基等均不可以用此法滅菌。一、食品微生物學檢驗根底知識物品在滅菌前須正確包裹和加塞，以保證滅菌后的物品不在被污染。平皿應用紙包扎或放入金屬平皿筒內(nèi)；移液管的頂端應用少量脫脂棉塞住，并燒掉露在外面的多余棉絮，然后集中放入金屬筒中或用紙條單獨包裹后滅菌。包裹好的物品放入枯燥箱中不應放得過于密集，以免阻礙空氣流通。待滅菌的物品不得與枯燥箱的內(nèi)層地板直接接觸。160℃恒溫干烤2個小時后即可完成滅菌過程，待溫度降至50~60℃時方可翻開箱門防止玻璃器皿因驟冷而破裂。一、食品微生物學檢驗根底知識高壓蒸汽滅菌法用途最廣，效率較高，是微生物實驗中最常見的滅菌方法。這種方法的原理是水的沸點隨著蒸汽壓力的升高而升高，當蒸汽壓力到達103.4kPa的時候，水蒸氣的溫度升高到121℃，經(jīng)過15~20分鐘，可以全部殺死滅菌物品中的各種微生物及其孢子和芽孢。此法適用于耐高溫而又不怕蒸汽的物品。所用的設(shè)備稱為高壓蒸汽滅菌器。手提式高壓蒸汽滅菌鍋的使用方法關(guān)好排水閥門放入清水至標度為止。將要滅菌的物品用牛皮紙蓋好后放入滅菌鍋中，關(guān)上器蓋。通電加溫，同時翻開排氣閥門，排盡鍋內(nèi)的空氣，再關(guān)閉閥門。當?shù)竭_所需溫度時開始計時，并在此溫度下保持所需的時間。稍微翻開一點排氣閥門，使鍋內(nèi)蒸氣緩慢排除。當壓力表指針降到零、鍋內(nèi)蒸氣完全排盡時，立即翻開鍋蓋取出物品。最后將高壓滅菌器內(nèi)的剩余水排出。一、食品微生物學檢驗根底知識過濾除菌法：凡不能耐受高溫或化學藥物滅菌的藥液、毒素、血液等可用濾菌器機械除菌。4、紫外線滅菌法：波長為253.7nm的紫外線殺菌效果最正確，但是紫外線的穿透力不夠強，只能用于空氣或物體外表消毒。距離紫外燈1.5~2.0m以內(nèi)的1平方米范圍內(nèi)經(jīng)照射30分鐘可以形成無菌區(qū)域。一、食品微生物學檢驗根底知識12.2化學滅菌法一般化學藥劑無法殺死所有的微生物，而只能殺死其中的病原微生物，所以是起消毒劑的作用，而不是滅菌劑。能迅速殺滅病原微生物的藥物，稱為消毒劑。能抑制或阻止微生物生長繁殖的藥物，稱為防腐劑。常用的化學消毒劑有：石碳酸、來蘇水〔甲醛溶液〕、氯化汞、碘酒、酒精等。

食品衛(wèi)生微生物學檢驗方法國家標準的演變

菌落總數(shù)、霉菌酵母菌計數(shù)、商業(yè)無菌

大腸菌群計數(shù)

沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌檢驗方法

其他致病菌及檢測方法簡介內(nèi)容提要

食品衛(wèi)生微生物學檢驗技術(shù)基礎(chǔ)知識不斷修訂和完善階段1985年至今方法標準化形成階段1977～1984年方法逐步建立統(tǒng)一階段1949～19761964年衛(wèi)生部印發(fā)了?食品衛(wèi)生檢驗方法〔細菌學局部〕?1976年,?食品衛(wèi)生檢驗方法微生物學局部?GB4789-84增加了總那么、耶爾森氏菌、空彎、抗生素殘留，共28項。大腸菌群由6管法改為9管法。方法內(nèi)容簡練，檢驗步驟條理化，簡明易懂。GB4789-94：菌落總數(shù)的培養(yǎng)時間由24h改為48h；對耶爾森菌、空彎、副溶血性弧菌進行了補充和改進；增加了李斯特氏菌、椰毒假單胞菌、商業(yè)無菌、金葡腸毒素，沙門菌、志賀菌和致瀉大腸的噬菌體檢驗，共31項。食品衛(wèi)生微生物學檢驗方法國家標準的演變微生物學檢驗方法國家標準的演變GB4789.2008目前，GB/T4789-2003的修訂工作已經(jīng)接近完成。大部分標準已經(jīng)制修訂完畢。已于2008年11月1日正式實施的有

GB/T4789.4-2008沙門氏菌檢驗GB/T4789.7-2008副溶血性弧菌GB/T4789.36-2008腸出血性大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗。

2008年11月21日正式公布的有14個。

GB4789-20032003年8月頒布了GB/T4789-2003GB/T4789－2003由計融、李鳳琴、付萍、楊寶蘭、姚景會等負責修訂。主要修改了文字和文本格式。

現(xiàn)行有效的GB4789系列標準GB4789.1-2010總則GB/T4789.14-2003蠟樣芽胞桿菌檢驗GB/T4789.27-2008鮮乳中抗生素殘留檢驗GB4789.2-2010菌落總數(shù)測定GB4789.15-2010霉菌和酵母計數(shù)GB/T4789.28-2003染色法、培養(yǎng)基和試劑GB4789.3-2010大腸菌群計數(shù)GB/T4789.16-2003常見產(chǎn)毒霉菌的鑒定GB/T4789.29-2003椰毒假單胞菌酵米面亞種檢驗GB4789.4-2010沙門氏菌檢驗GB/T4789.17-2003肉與肉制品檢驗GB4789.30-2010單核細胞增生李斯特氏菌檢驗GB/T4789.5-2003志賀氏菌檢驗GB4789.18-2010乳與乳制品檢驗GB/T4789.31-2003沙門氏菌、志賀氏菌和

致瀉大腸埃希氏菌的腸桿菌科噬體檢驗方法

GB/T4789.6-2003致瀉大腸埃希氏菌檢驗GB/T4789.19-2003蛋與蛋制品檢驗GB/T4789.32-2002大腸菌群的快速檢測GB/T4789.7-2008副溶血性弧菌檢驗GB/T4789.20-2003水產(chǎn)食品檢驗GB/T4789.34-2008雙歧桿菌檢驗GB/T4789.8-2008小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗GB/T4789.21-2003冷凍飲品、飲料檢驗GB4789.35-2010乳酸菌檢驗GB/T4789.9-2008空腸彎曲菌檢驗GB/T4789.22-2003調(diào)味品檢驗GB/T4789.36-2008大腸埃希氏菌O157：H7/NM檢驗GB4789.10-2010金黃色葡萄球菌檢驗GB/T4789.23-2003冷食菜、豆制品檢驗GB/T4789.38-2008大腸桿菌計數(shù)GB/T4789.11-2003溶血性鏈球菌檢驗GB/T4789.24-2003糖果、糕點、蜜餞檢驗GB/T4789.39-2008糞大腸菌群計數(shù)GB/T4789.12-2003肉毒梭菌及肉毒毒素檢驗GB/T4789.25-2003酒類檢驗GB4789.40-2010阪崎腸桿菌檢驗GB/T4789.13-2003產(chǎn)氣莢膜梭檢驗GB/T4789.26-2003罐頭食品商業(yè)無菌的檢驗

食品衛(wèi)生微生物學檢驗方法國家標準的演變

總則、菌落總數(shù)、霉菌酵母菌計數(shù)、商業(yè)無菌

大腸菌群計數(shù)

沙門氏菌、志賀氏菌檢驗方法、金黃色葡萄球菌

其他致病菌內(nèi)容提要

食品衛(wèi)生微生物學檢驗技術(shù)基礎(chǔ)知識菌落總數(shù)的幾個概念菌落總數(shù)的意義菌落總數(shù)第一法操作流程圖友情提示：假設(shè)樣品中可能含有外表蔓延生長的菌落時，可在培基凝固后再覆蓋一薄層培基水產(chǎn)品置于30℃±1℃培養(yǎng)72h±3h。傾注平板計數(shù)法原理菌落計數(shù)方法有較大片狀菌落生長者不宜采用，假設(shè)片狀小于平板一半時且余部均勻分布，那么以半個平板菌落數(shù)2倍報告無明顯界限鏈狀菌落每條單鏈視為一個菌落選取菌落數(shù)在30~300cfu之間，無蔓延生長的平板計數(shù)低于30的記錄具體菌落數(shù)，大于300的可記錄為多不可計，每個稀釋度采用兩個平行的均數(shù)計數(shù)結(jié)果的表述假設(shè)只有一個稀釋度平板在30~300CFU，那么計算兩平行平板的均數(shù)，再乘以稀釋倍數(shù)報告之假設(shè)有連續(xù)兩個稀釋度符合計數(shù)要求那么按下公式例1：10-2=232，24410-3=33，35例2：10-1=232，24410-2=33，29

菌落總數(shù)所有符合計數(shù)要求的平板菌落數(shù)之和較低稀釋度有效平板數(shù)較高稀釋度有效平板數(shù)較低稀釋度的稀釋倍數(shù)N=(232+244+33+35)(2+2×0.1〕×10-2新計數(shù)公式的統(tǒng)計學依據(jù)平板菌落數(shù)越多，結(jié)果越具有代表性〔不考慮稀釋倍數(shù)和培養(yǎng)基的營養(yǎng)狀況等〕取樣量越大，結(jié)果越具有代表性〔同等取樣條件、排除其他方面的干擾因素〕不同的取樣量賦予不同的權(quán)重，而不是簡單的取平均值。新舊方法計算同一結(jié)果會有所不同結(jié)果表述10-1均數(shù)10-2均數(shù)描述最終結(jié)果25536均在30~300間則按計數(shù)公式2.6×103多不可計345各平板均>300，取稀釋度最高者報告，余計為多不可數(shù)3.5×104122均小于30則取稀釋度最低者報告1.2×10233029所有平板均不在30~300CFU且一部分<30或>300者以最接近30或300者報告2.9×10300所有平板均無菌落則記為<1乘以最低稀釋倍數(shù)報告<10Illusion:Howtocalculate?30cfu300cfu報告方式菌落數(shù)在100cfu內(nèi)時按四舍五入修約，采用兩位有效數(shù)字報告大于或等于100時，第三位數(shù)四舍五入修約，取前兩位數(shù)字，例：20504321000or2.1×105所有平板均為蔓延菌落而無法計數(shù)者報告菌落蔓延假設(shè)空白對照有菌落那么此次檢測結(jié)果無效固體樣品以cfu/g，液體以cfu/mL為單位GB4789.15-2021霉菌酵母菌計數(shù)根本過程類似菌落總數(shù)所用培養(yǎng)基為孟加拉紅、馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基〔PDA〕稀釋液為無菌水〔可以用生理鹽水嗎？〕培養(yǎng)溫度為25~28度，時間為5天計數(shù)方法：選擇10~150cfu的平板報告之，余規(guī)那么同GB4789.2-2021菌落總數(shù)，詳見GB4789.15-2021的規(guī)定霉菌和酵母菌的食品衛(wèi)生學意義霉菌酵母菌可使食品和糧食發(fā)生霉變，常在低pH、低濕度、高鹽、高糖含量食品中出現(xiàn)低溫貯存的或含抗生素的食品亦可出現(xiàn)霉菌酵母菌能合成有毒代謝物引起各種急慢性中毒，特別某些霉菌毒素強烈致癌作為評價食品衛(wèi)生質(zhì)量的指示菌，判定食品被其污染程度，便于對檢樣進行衛(wèi)生學評價典型霉菌酵母菌菌落形態(tài)欣賞酵母菌菌落多類似細菌菌落，但大而厚，濕潤、粘稠、易挑起，某些菌種長時間培養(yǎng)而呈皺縮狀。顏色多為乳白、少數(shù)紅色。霉菌菌絲粗長，其菌落疏松，呈絨毛狀、棉絮狀或蛛網(wǎng)狀。有的菌落呈圓形，有的無定形。由于其形成的孢子不同故其菌落常呈現(xiàn)肉眼可見的不同結(jié)構(gòu)和色澤特征。商業(yè)無菌

食品衛(wèi)生微生物學檢驗方法國家標準的演變

菌落總數(shù)、霉菌酵母菌計數(shù)、商業(yè)無菌

大腸菌群計數(shù)

沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌檢驗方法

其他致病菌及檢測方法簡介內(nèi)容提要

食品衛(wèi)生微生物學檢驗技術(shù)基礎(chǔ)知識GB4789.3-2021大腸菌群測定定義：Coliforms，一群在36℃培養(yǎng)48h可發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏染色陰性無芽孢桿菌。該菌主要來源自人畜糞便，作為糞便污染指標評價食品的衛(wèi)生狀況，推斷食品中腸道致病菌污染的可能。大腸菌群的食品衛(wèi)生學意義作為糞便污染食品的指標菌，MPN值愈低那么說明食品受糞便污染程度及對人體健康危害程度愈低作為腸道致病菌污染食品的指針，大腸菌群數(shù)量越多那么腸道致病菌存在的可能性就越高，但兩者之間并不總是呈平行關(guān)系要求食品中大腸菌群完全不存在是不可能的，重要的是其污染程度即菌量產(chǎn)氣克雷白氏菌ETEC

EIEC

陰溝腸桿菌EHEC

大腸菌群耐熱大腸菌群（糞大腸菌群）大腸桿菌產(chǎn)氣克雷白氏菌大腸埃希氏菌檸檬酸桿菌O157：H7大腸桿菌是人和溫血動物腸道內(nèi)普遍存在的細菌，是糞便中的主要菌種。一般生活在人大腸中并不致病，但它侵入人體一些部位時，可引起感染。大腸菌群并非細菌學分類命名，而是衛(wèi)生細菌領(lǐng)域的用語，它不代表某一個或某一屬細菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關(guān)的細菌，這些細菌在生化及血清學方面并非完全一致。一般認為可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。

總大腸菌群系指一群在37℃培養(yǎng)24小時能發(fā)酵乳酸、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。耐熱大腸菌群即糞大腸菌群，作為一種衛(wèi)生指標菌，耐熱大腸菌群中很可能含有糞源微生物，因此耐熱大腸菌群的存在說明可能受到了糞便污染，可能存在大腸桿菌。但是，耐熱大腸菌群的存在并不代表對人有什么直接的危害。致病性大腸桿菌能引起食物中毒。致病性菌株能侵入腸粘膜上皮細胞，具有痢疾桿菌樣致病力。腸致病性大腸桿菌〔EPEC〕、腸毒素性大腸桿菌〔ETEC〕和腸侵襲性大腸桿菌〔EIEC〕等。O157:H7〔EHEC)腸出血性大腸桿菌，感染性腹瀉是近年來新發(fā)現(xiàn)的危害嚴重的腸道傳染病，已逐漸成為威脅人群健康的重要公共衛(wèi)生問題。大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌的附屬關(guān)系第一法MPN法初發(fā)酵：月桂基硫酸鹽蛋白胨肉湯〔LST〕替代了乳糖膽鹽發(fā)酵培基確證實驗：煌綠乳糖膽鹽肉湯〔BGLB〕替代了乳糖復發(fā)酵培養(yǎng)基，取消了革蘭氏染色實驗培養(yǎng)時間：由24h延長至48h單位：由MPN/100g變?yōu)镸PN/g取樣量：由3.33g0.333g大腸菌群計數(shù)檢驗流程0將產(chǎn)氣的試管內(nèi)樣品接種到BGLB肉湯LST不產(chǎn)氣〔-〕小導管里無氣泡LST產(chǎn)氣〔+〕如何報告結(jié)果？根據(jù)經(jīng)確證后的對應濃度陽性管數(shù)查MPN表MPN：最可能數(shù)，基于泊松分布的一種間接計數(shù)方法陽性管數(shù)MPN95%可信限0.100.010.001下限上限000<3.0-9.50013.00.159.61003.60.1718333>1100420-理想與現(xiàn)實的差距新的方法更加嚴謹、合理、科學，與世界接軌然而老的衛(wèi)生標準仍然沿用MPN/100g〔mL〕0.3MPN/g=30MPN/100g？如何換算？30MPN/100g0.3MPN/g加樣量相應擴大10倍1g，0.1g，0.01g符合原方法的取樣量查表，結(jié)果相應縮小10倍統(tǒng)計學上并不一定成立，只是過度臨時采用仍然報告為0.3MPN/g，但要通知相關(guān)人員原因衛(wèi)生部關(guān)于菌落總數(shù)報告方式的16號公告第二法VRBA平板計數(shù)法選擇菌落數(shù)為15~150個的平板計數(shù)典型和可疑菌落36℃±1℃18h~24h挑選10個菌落接種到BGLB,37℃，24-48h典型菌落為紫紅色周圍有紅色膽鹽沉淀環(huán)，0.5mm如何寫出廠檢驗記錄和報告？

食品衛(wèi)生微生物學檢驗方法國家標準的演變

菌落總數(shù)、霉菌酵母菌計數(shù)、商業(yè)無菌

大腸菌群計數(shù)

沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌檢驗方法

其他致病菌及檢測方法簡介內(nèi)容提要

食品衛(wèi)生微生物學檢驗技術(shù)基礎(chǔ)知識致病菌的食品衛(wèi)生學意義微生物與食物中毒概念：指攝入了含有生物性、化學性有害物質(zhì)的食品或把有毒有害物質(zhì)當作食品攝入后出現(xiàn)得非傳染性的急性、亞急性疾病。特點：潛伏期短，來勢急劇，短時多人同時發(fā)??；臨床表現(xiàn)大致相同；與吃某種有毒食品有關(guān)；發(fā)病率高，人與人之間并不傳染。分類：微生物性〔細菌性、真菌性〕，化學性，動、植物性，以細菌性最常見。細菌性食物中毒概念：由于食入被病原菌或其毒素污染的食物后所引起的以急性腸胃炎為主的疾病。分類：感染型、毒素型、不定型病原菌常見食品潛伏期病程癥狀沙門氏菌肉乳蛋6~8h3~7d惡心嘔吐腹痛發(fā)熱冷汗頭痛副溶血性弧菌水產(chǎn)品腌制品8~24h1~3d惡心嘔吐腹痛腹瀉蠟樣芽孢桿菌米飯肉乳淀粉類30~60min1d惡心嘔吐腹痛腹瀉GB4789.4-2021沙門氏菌檢測方法本標準參考采用了AOAC/FDA的方法。本標準與GB/T4789.4-2003相比主要修改如下：——標準了樣品制備過程；——修改了原標準中前增菌和增菌局部?！薷牧嗽瓨藴手袆e離局部，增加了科瑪嘉顯色瓊脂?！獙υ瓨藴手猩囼灳植窟M行了修改。增加了API20E生化鑒定試劑盒或VITEKGNI+生化鑒定卡。于2021年11月1日開始正式實施。沙門氏菌食物中毒引起食物中毒最常見的沙門氏菌：鼠傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌易引起沙門氏菌中毒的食品：肉、蛋、乳類食品中毒原因：

1、食用病畜禽的肉制品食品

2、病畜禽、帶菌人和動物使食品受污染

3、用不潔凈水外理食品美國兩種花生醬含沙門氏菌沙門氏菌的附屬與分類歸于腸桿菌科沙門氏菌屬下設(shè)6個亞屬：I、II、IV、V、VI及III〔原亞利桑那菌屬〕常見的種：雞沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、傷寒沙門氏菌…形態(tài)與染色：革蘭氏染色陰性，無莢膜，無芽胞，多數(shù)有鞭毛，有動力，短小桿菌。培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧，最適溫度37℃，PH7.2~7.4。營養(yǎng)要求：不高，普通培養(yǎng)基生長良好。4.2GB/T4789.4－2021沙門氏菌檢驗流程前增菌：用無選擇性的培養(yǎng)基使處于瀕死狀態(tài)的細菌恢復活力;BPW選擇性增菌：使沙門氏菌優(yōu)勢繁殖，其它細菌變到抑制;SC+TTB選擇性平板分離培養(yǎng)：BS+XLD/HE/顯色培基生化試驗：鑒定分離出來的細菌是否符合沙門氏菌的生化譜，可采用API20E等成套生化試劑血清學鑒定：特異性診斷血清鑒定到種。沙門氏菌菌落形態(tài)BS

XLD

DHL

海博第二代顯色培基

HE

SS

XLT4前增菌BPW〔堿性蛋白胨水〕：用于修復受損傷的沙門氏菌，但由于其不具有選擇性，因此增菌時間過長會導致雜菌生長過多干擾鑒定結(jié)果，故建議最好控制在4h為好。經(jīng)前增菌后的樣品與選擇性培養(yǎng)基按1：10參加，例如1mL樣品參加10mLSC中未經(jīng)前增菌而直接進行選擇性增菌的樣品最好與增菌液按1：1稀釋，而不可按1：10稀釋，因為食品中沙門氏菌數(shù)量較少，1：10稀釋將降低檢出率。常用選擇性培養(yǎng)基比較SCTTBMM亞硒酸鹽抑菌胱氨酸促生長四硫酸鈉和煌綠抑菌氯化鎂和孔雀綠抑菌適合傷寒沙門菌和甲型副傷寒沙門菌生長，37度適合其他沙門菌生長，42度，18~24hr為防漏檢宜SC+TTB/MM主要雜菌為大腸埃希氏菌，而兩者區(qū)別在于是否發(fā)酵乳糖，故參加乳糖、酸堿指示劑兩個指針來判斷可疑菌落參加硫化氫是因為第III屬產(chǎn)硫化氫而緩慢發(fā)酵乳糖BS選擇性最強，可延長時間以免沙門菌生長亦被抑制多采用BS搭配DHL/SS/HE/WS，互補防漏檢指示系統(tǒng)指示效果及可疑菌落特點BS葡萄糖+H2S黑色有金屬光澤、棕褐或灰色，周圍培基黑或棕色，或不產(chǎn)硫化氫而呈灰綠色DHL乳糖+H2S乳糖（+）：粉紅色，（-）：無色半透明無色半透明，產(chǎn)硫化氫者中心黑色SS乳糖+H2SHE乳糖+H2S乳糖（+）：黃色，（-）：藍色藍綠色或藍色，產(chǎn)硫化氫者中心黑色WS乳糖+H2S克氏三糖鐵〔TSI〕反響原理葡萄糖（1g/L）蔗糖（10g/L）乳糖（10g/L）TSI三糖鐵原理：三糖利用培養(yǎng)基：干粉或生化管接種方法：穿刺劃線結(jié)果：產(chǎn)酸／堿，產(chǎn)氣，硫化氫注意：高層斜面三糖鐵〔TSI〕反響模式及意義葡萄糖乳糖蔗糖說明+++分解糖類產(chǎn)酸→pH↓→指示劑變黃→斜面底層均產(chǎn)酸變黃記為A/A模式+--斜面因葡糖含量少故分解完后利用蛋白胨產(chǎn)堿且大于酸量故由黃而深紅，記為K，底層無氧故緩慢分解葡糖而產(chǎn)酸變黃記為A，K/A模式++-由于乳糖或蔗糖量大故斜面和底層均產(chǎn)酸變黃，亦為A/A模式+-+假設(shè)分解硫化氫那么產(chǎn)生黑色FeS沉淀，假設(shè)分解糖類產(chǎn)氣那么可見氣泡或裂縫只有斜面和底層均產(chǎn)酸，且賴氨酸脫羧酶陰性者才可排除為沙門菌的可能性其余情況既可能是也可能不是沙門氏菌屬的細菌生化實驗原理-硫化氫實驗目的：檢測細菌對含硫化合物的分解能力原理：細菌分解含硫氨基酸生成硫化氫與培養(yǎng)基中的鐵或者鉛離子生成黑色化合物。方法：接種三糖鐵瓊脂或懸掛醋酸鉛試紙。結(jié)果：培養(yǎng)基出現(xiàn)黑色為陽性生化實驗原理-動力試驗原理：在半固體上穿刺接種后，細菌因具有鞭毛擴散生長結(jié)果：陽性——擴散生長陰性——沿穿刺線生長注意：培養(yǎng)基溫度；劇烈運動可能出現(xiàn)假陽性結(jié)果生化實驗原理-糖苷醇類發(fā)酵試驗不同細菌含發(fā)酵各種糖類的酶不同，分解糖類〔糖醇類〕的能力亦不同，根據(jù)分解不同糖類后產(chǎn)物的差異，來鑒定細菌。結(jié)果：假設(shè)細菌分解糖類產(chǎn)酸，使培養(yǎng)基中的指示劑顯酸性反響，顏色發(fā)生變化，假設(shè)產(chǎn)氣可使培養(yǎng)基中的導管或者瓊脂出現(xiàn)氣泡，無變化那么說明陰性。說明：指示劑：酚紅〔黃紅〕、溴甲酚紫〔黃紫〕、溴麝香草酚藍〔黃藍〕注局部糖類滅菌需防止高溫破壞。生化實驗原理-賴氨酸脫羧酶試驗生化實驗原理-尿素酶試驗目的：通過檢測尿素酶來進行腸桿菌科細菌的鑒定原理：細菌產(chǎn)生的尿素酶分解尿素產(chǎn)生大量的氨，使培養(yǎng)基PH值升高，用酚紅指示劑測出。結(jié)果：培養(yǎng)基變紅為陽性，不變?yōu)殛幮浴Ｉ瘜嶒炘?氧化酶實驗生化實驗原理-靛基質(zhì)實驗(靛基質(zhì)試驗)生化實驗原理-氰化鉀實驗原理:氰化鉀是細菌呼吸酶系統(tǒng)的抑制劑,可與呼吸酶作用使酶失去活性,抑制細菌的生長,但有的細菌在一定濃度的氰化鉀存在時仍能生長,以此鑒別細菌.試驗方法:取培養(yǎng)20～24h的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)液或菌落1環(huán)，接種至對照培養(yǎng)基及氰化鉀培養(yǎng)基內(nèi)，立即以橡膠塞塞緊，36±1℃培養(yǎng)24～48h，觀察結(jié)果。結(jié)果記錄:對照管有菌生長，試驗管有菌生長為陽性。對照管有菌生長，試驗管無菌生長為陰性。生化實驗原理-β-半乳糖苷酶試驗(ONPG實驗)目的：迅速及緩慢分解乳糖的細菌陽性，而不發(fā)酵乳糖的沙門氏菌為陰性。原理：細菌迅速分解乳糖是有β-半乳糖苷滲透酶和β-半乳糖苷酶，但ONPG分子與乳糖相似且分子較小，故不需β-半乳糖苷滲透酶也可分解乳糖。結(jié)果：呈現(xiàn)黃色為陽性反響，通常20-30min內(nèi)顯色注意：為提高陽性反響速度，需大量接種培養(yǎng)物。過酸出現(xiàn)假陰性，過堿那么出現(xiàn)假陽性。商品化的成套生化試劑盒API生化鑒定系統(tǒng)是法國梅里埃生物公司出品的微生物生化檢測系列產(chǎn)品，原理是利用細菌對于各類化學物質(zhì)〔碳水化合物、氨基酸及蛋白質(zhì)、無機鹽類等〕的代謝能力以及酶類的存在與否等生化特性來鑒定細菌的一種方法，當反響能夠?qū)е路错戵w系的PH值變化或產(chǎn)生顯色物質(zhì)，參加適宜的酸堿指示劑或顯色劑就可以反映出來。API試驗的本質(zhì)就是利用生化試驗的方法，檢測細菌對各種物質(zhì)的代謝作用及其代謝產(chǎn)物，常用于細菌的鑒別。1.別離單個菌落2.調(diào)制菌液3.將菌液接種到小杯中4.試條放進孵育箱內(nèi)，35–37度，18-24h5.附加試劑加進適當小孔內(nèi)7.將反響結(jié)果輸入數(shù)據(jù)庫軟件中得到生化譜代碼8.軟件自動查詢報告最符合的菌名6.根據(jù)標準色卡判讀反響結(jié)果梅里埃Vitek-2和其它國產(chǎn)成套試劑血清學實驗原理什么是血清學反響？血清學反響是指相應的抗原與抗體在體外一定條件下作用，可出現(xiàn)肉眼可見的沉淀、凝集現(xiàn)象。在微生物檢驗中，常用血清學反響來鑒定別離到的細菌，以最終確認檢測結(jié)果。什么是抗原？是指能刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應答而生成抗體和致敏淋巴細胞等免疫應答產(chǎn)物，并能與之發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)。產(chǎn)生的相應抗體與抗原結(jié)合，形成抗原—抗體復合物，產(chǎn)生免疫反響，從而保護機體不受抗原侵害而造成破壞。一般抗原都是外來物體，如細菌、病毒、寄生蟲等。血清學實驗原理什么是抗體？機體受外來抗原物質(zhì)刺激后，產(chǎn)生的一種與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白(Ig)被分為G，A，M,E,D等幾類.最典型的抗體是IgG,有Y型三維結(jié)構(gòu),包含兩套重鏈和輕鏈?？贵w攻擊抗原〔居中者〕血清學實驗原理何謂凝集反響？顆粒性抗原〔細菌、紅細胞等〕與相應抗體結(jié)合，在電解質(zhì)參與下所形成的肉眼可見的凝集現(xiàn)象，稱為凝集反響〔Agglutinationreaction〕。其中的抗原稱為凝集原，抗體稱為凝集素。何謂直接凝集反響？顆粒性抗原如細菌和細胞與相應抗體直接結(jié)合所出現(xiàn)的反響玻片凝集法原理何謂玻片凝集法？是一種常規(guī)的定性試驗方法。用抗體來檢測未知抗原。常用于鑒定菌種、血型。如將含有白葉枯病菌抗體的血清與待檢菌液各一滴，在玻片上混勻，數(shù)分種后假設(shè)出現(xiàn)肉眼可見的凝集塊，即為陽性反響，證明該菌是痢疾桿菌。此法快速、簡便，但不能進行定量測定。玻片凝集法原理單價血清：含單一抗體的血清多價血清：含多種抗體的血清如A~F多價步驟：先多價后單價，先常見的后不常見的，先O后H，根據(jù)結(jié)果查表得到鑒定菌種抗原準備：多采用15g/L瓊脂斜面培養(yǎng)物假設(shè)O血清不凝集可轉(zhuǎn)種至高含量〔2.5~3%〕瓊脂培基上，枯燥利于O-Ag發(fā)育沙門氏菌的抗原類型O抗原〔菌體〕：O1…O67共58種，一種菌可能含1種或多種O-Ag，含相同O-Ag的歸為一個血清群。有A、B、…Z、O57~63，O65~67，多為A~F群，故先要用此多價血清初篩H抗原〔鞭毛〕：特異相〔a~z，z1~z55〕，非特異性相〔1，2…l，w〕，多為雙相菌，可發(fā)生相位變異Vi抗原〔外表〕：可阻止O與抗體反響，加熱可消除H抗原菌體抗原〔O抗原〕外表抗原〔Vi抗原〕玻片凝集法操作先應在玻片上滴加1滴生理鹽水，參加菌苔做陰性對照并觀察是否自凝，假設(shè)有那么說明該菌株發(fā)生S-R變異失去了O抗原成為粗糙型，故不能進行血清學分型。菌體抗原〔O抗原〕的檢測A-F多價血清凝集O4O3,10O7O8O9O2O11O19O34O15O10B群？C1/C4群？C3群？E3群？E2群？E1群？E4群？D群？A群？F群？A-F多價血清不凝集A-F多價血清不凝集采用9種多價血清逐一排查O多價1O多價2O多價3O多價4O多價5O多價6O多價7O多價8O多價9A~F群包括6，14群13，16，17，18，21群28，30，35，38，39群40，41，42，43群44，45，47，48群50，51，52，53群55，56，57，58群59，60，61，62群63、65，66，67A~F群常見菌型鞭毛抗原〔H抗原〕表O群ABBC1C2D不產(chǎn)氣D產(chǎn)氣E1E4E4第一相ag,f,si,b,dk,v,r,cb,d,rdg,m,p,qh,vg,s,tI第二相//25,Z152,5//6,w,x/血清學實驗原理不常見的菌型，先用163種沙門菌血清中的8種多價血清排查，假設(shè)其中任一種或兩種凝集那么再用其所包含的各種H因子逐一檢查H多價1：a,b,c,d,IH多價2：eh,enx,enz15,fg,gms,gpu,gq,mt,gz51,H多價3：k,r,y,z,z10,lv,lv,lz13,lz28,lz40H多價4：1，2；1，5；1，6；1，7；z6H多價5：z4z23,z4z24,z4z32,z29,z35,z36,z38H多價6：z39,z41,z42,z44H多價7：z52,z53,z54,z55H多價8：z56,z57,z60,z61,z62志賀氏菌簡介志賀氏菌屬為埃希氏桿菌，包括痢疾志賀氏菌、福氏志賀氏菌、鮑氏志賀氏菌和宋內(nèi)氏志賀氏菌四群，是引起人類細菌性痢疾的病原菌。它們主要通過食品加工、集體食堂和飲食行業(yè)的從業(yè)人員中痢疾患者或帶菌者污染食物，從而導致痢疾的發(fā)生，是一種較常見的、危害較大的致病菌。志賀氏菌的鑒定主要根據(jù)血清學反響，再以生化反響證實。志賀氏菌檢驗流程志賀氏菌屬生化特性試驗挑取平板上的可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂和半固體瓊脂各一管。志賀氏菌在三糖鐵瓊脂內(nèi)的反響結(jié)果為底層產(chǎn)酸而不產(chǎn)氣(福氏志賀氏菌6型可微產(chǎn)氣)，斜面產(chǎn)堿，不產(chǎn)生硫化氫，無動力，在半固體管內(nèi)沿穿剌線生長。然后再做V-P/苯丙氨酸脫氨酶、賴氨酸脫羧酶、西蒙氏檸檬酸鹽和葡萄糖銨試驗，結(jié)果均應陰性反響。葡萄糖半固體〔無動力〕志賀氏菌菌落形態(tài)志賀氏菌在SS和Mac上形成較小的，無色半透明不發(fā)酵乳糖的菌落在HE上形成不發(fā)酵乳糖的深綠色菌落HE上不發(fā)酵乳糖的腸道菌，可能就是志賀氏菌SS上無黑色中心很可能是志賀氏菌了MacMacGB4789.10－2021金黃色葡萄球菌檢驗計數(shù)標準第一法：BairdParker增加了計算公式第二法：MPN法〔新增加〕致病性：金黃色葡萄球菌在自然界中無處不在，因而食品受其污染的時機很多。金黃色葡萄球菌腸毒素是個世界性衛(wèi)生問題，我國每年發(fā)生的此類中毒事件也非常多。中毒食品種類多，如奶、肉、蛋、魚及其制品。此外，剩飯、油煎蛋、糯米糕及涼粉等引起的中毒事件也有報道?？赏ㄟ^以下途徑污染食品：食品加工人員、炊事員或銷售人員；食品在加工前本身帶菌，或在加工過程中受到了污染，產(chǎn)生了腸毒素，引起食物中毒；熟食制品包裝不嚴，運輸過程受到污染；奶牛患化膿性乳腺炎或禽畜局部化膿時，對肉體其他部位的污染。檢測流程計數(shù)及血漿凝固酶實驗接種BHI肉湯及營養(yǎng)瓊脂斜面金黃色葡萄球菌菌落形態(tài)金葡在Baird-Parker平板上菌落直徑2~3mm，灰色到黑色，邊緣淡色，周圍有一渾濁帶，外層有一透明圈。接種針接觸有奶油至樹脂硬度。偶見非脂肪溶解的類似菌落耽誤渾濁帶和透明圈。觸媒實驗↓電鏡下的金葡

海博顯色培基血漿凝固酶實驗目的：常用于鑒別葡萄球菌。原理：金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生凝固酶，使血漿中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白附著于細菌外表產(chǎn)生凝固。分為與細胞壁結(jié)合的凝固酶〔玻片法〕與菌體生成后釋放在培養(yǎng)基中的游離凝固酶〔試管法〕。試管法：三只含1：4血漿0.5ml的試管各接種待檢菌、陽性菌株和肉湯陰性菌株，待檢菌出現(xiàn)凝固且陰性對照不凝固為陽性。細菌的溶血現(xiàn)象根據(jù)細菌對紅細胞的溶解能力可分為以下三種溶血類型及現(xiàn)象：α〔甲型〕溶血:產(chǎn)生溶血素，不完全性溶血，在血瓊脂平皿上菌落周圍有1～2mm，較窄半透明的草綠色溶血環(huán)。β〔乙型〕溶血:呈完全性溶血，在血平皿上菌落周圍有2～4mm寬、界限清楚、無色透明的溶血環(huán)。γ〔丙型〕溶血:不產(chǎn)生溶血素，在血瓊脂平皿上的菌落周圍無溶血環(huán)。

食品衛(wèi)生微生物學檢驗方法國家標準的演變

菌落總數(shù)、霉菌酵母菌計數(shù)、商業(yè)無菌

大腸菌群計數(shù)

沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌檢驗方法

其他致病菌及檢測方法簡介內(nèi)容提要

食品衛(wèi)生微生物學檢驗技術(shù)