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北京大學(xué)1991年攻讀碩士學(xué)位研究生入學(xué)試題生物化學(xué)

一.名詞解釋

1.拼接體2.復(fù)制子3.反饋調(diào)節(jié)4.別構(gòu)效應(yīng)5.抗體酶

二.英譯漢

1.THF2.ddTPP3.ACTH4.Hbs5.tRNAm6.micRNA7.ACP8.NADPH9.AGo;10.Cotl/2

三.填空

1.NAD+和NADP+還原時(shí)在______增加一個(gè)吸收峰.

2.常用的DNA超螺旋結(jié)構(gòu)的嵌合劑是

3.在癌變過(guò)程中同工酶譜發(fā)生______

4.哺乳動(dòng)物的必須脂肪酸為和

5.某些蛋白質(zhì)前體都具有它的肽,它們大都相當(dāng)于______左右氨基酸的長(zhǎng)度.殘基側(cè)鏈

一般是,位于肽鏈的末端.

6.糖蛋白中糖基與蛋白質(zhì)肽鏈之間可通過(guò)酰糖昔鍵相結(jié)合,即和

7.DNA序列的末端終止法所用的工具酶是

8.E.ColiRNA聚合酶的亞基組成為,沒(méi)有______亞基的酶稱(chēng)為核心酶,該亞基的功能為

9.線粒體DNA的復(fù)制為方式,大腸桿菌染色體的復(fù)制為方式,0X174環(huán)狀染色體

和噬菌體XDNA后期復(fù)制為方式,真核生物染色體DNA復(fù)制為方式

10.呼吸鏈電子傳遞速度受濃度控制的現(xiàn)象稱(chēng)為

H.膽固醇合成的限速酶是,濃度升高其活性下降

12.喀咤環(huán)由和合成的

13.丙酮脫氫酶系統(tǒng)受和.______三種調(diào)節(jié)控制

14.神經(jīng)遞質(zhì)5-羥色胺是由衍生而成

15.乙酰輔酶A進(jìn)入三竣酸循環(huán),還是形成酮體,由細(xì)胞中濃度決定

16.生物固氮是微生物利用轉(zhuǎn)變成氨的作用

四.是非題

1,編碼區(qū)的翻譯效率彼此不同()

2,酶的Kcat型抑制劑比Ks型抑制劑專(zhuān)一性更強(qiáng)()

3,紫外線照射可使DNA互補(bǔ)雙鏈間形成T'T()

4,一個(gè)氨基酸殘基就是一個(gè)肽單元()

5,DNA復(fù)制需要RNA引物,RNA復(fù)制則不需要引物()

6,蛋白質(zhì)進(jìn)化過(guò)程中構(gòu)象是易變的()

7,由于遺傳的密碼兼并性,一個(gè)氨基酸可以有幾種tRNA,但常只有一種氨酰-tRNA合成酶()

8,蛋白質(zhì)在熱力學(xué)上最穩(wěn)定的構(gòu)象是自由能最低的結(jié)構(gòu)()

9,當(dāng)一種大腸桿菌突變型為DNA聚合酶III的3'-5'外切酶缺陷時(shí),該突變型表現(xiàn)的特征為對(duì)紫外線

敏感()

10,在酸性條件下,DNA分子上的喋吟不穩(wěn)定,易被水解下來(lái)()

11,嚴(yán)重糖尿病患者因其糖異生作用加強(qiáng)血酮癥()

12,殺鼠藥氟乙酸的毒性是由于其抑制了順烏頭酸酶從而阻斷了三竣酸循環(huán)()

13,無(wú)糖膳食中用含有奇數(shù)碳脂肪酸比含有偶數(shù)脂肪酸作為食物更好()

14,高膽固醇血患者因服用B-谷固醇而引起血漿膽固醇水平升高,增加動(dòng)脈硬化危險(xiǎn)()

15,若amytal和抗霉素A阻斷呼吸鏈的抑制百分?jǐn)?shù)相同,amytal的毒性更大()

五,分析與計(jì)算

1,當(dāng)谷氨酸C3上標(biāo)記C14,氨基標(biāo)記15N,在肝臟中氧化降解,同位素將出現(xiàn)在下列代謝物的哪個(gè)原

子上,(1),琥珀酸,(2),天冬氨酸,(3),精氨酸,(4),尿素

2,今有以下四種蛋白質(zhì)的混合物:(1)分子量為15,000,pI=10;(2),分子量為62,000,pI=4;(3),分

子量為28,000,pl=8;(4),分子量為9,000,pl=6;若不考慮其它因素,當(dāng)(A)用CM-纖維素層析柱分

離時(shí),(B)用SephadexG50凝膠層析柱分離時(shí),試寫(xiě)出這些蛋白的洗脫順序

3,在以下修飾堿基中,何者在形成雙鏈時(shí)氫鍵結(jié)合的性質(zhì)不同于和它相關(guān)的普通堿基

(1)2-甲基腺嘿吟⑵5-甲基胞喀咤⑶5-羥甲基胞喀咤(4)1-甲基鳥(niǎo)喋吟

4,假定下面的DNA雙鏈分子是從右向左進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,寫(xiě)出RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的序列

5'——ATTCGCTTAAGCAA——3'

3'——TAAGCGAATTCGTT——5'

5,某酶制劑的比活力為42單位/mg蛋白質(zhì),每ml含12mg蛋白質(zhì),

(1)計(jì)算1ml反應(yīng)液中含5u1酶制劑時(shí)的反應(yīng)初速度

(2)若1ml反應(yīng)液內(nèi)含5tli酶制劑,在10分鐘內(nèi)消耗底物多少?為保證測(cè)定酶的初速度,所需要的

最低底物濃度是多少?

6,有一酶分子使其變性后,用澳化氟降解,在降解產(chǎn)物種得到一個(gè)未知氨基酸順序的九肽,試根據(jù)以

下實(shí)驗(yàn)結(jié)果,推斷出此九肽的氨基酸順序

(1)氨基酸分析表明,它含有Ala,Arg,Cys,Glu,Lys,Met,Pro,Phe2,

(2)用Edman法降解得到一個(gè)Pro的衍生物

(3)用胰蛋白酶水解得到一個(gè)游離Arg,一個(gè)二肽和一個(gè)六肽,此六肽在PH6.4時(shí)呈電中性狀態(tài)

(4)用胰凝乳蛋白酶降解得到一個(gè)二肽,一個(gè)三肽和一個(gè)四肽

A,二肽在PH6.4時(shí)呈負(fù)電荷

B,分析三肽發(fā)現(xiàn)里面含有硫

C,在PH6.4時(shí)分析四肽,靜電荷為+2,在280nm分析表明不含有芳香氨基酸

六.第一題非生化專(zhuān)業(yè),第二題生化專(zhuān)業(yè)。

(一)1.如何判明DNA制劑的純度和是否為天然雙鏈分子

2.如果細(xì)菌環(huán)狀染色體的復(fù)制是雙向的,并且從固定的復(fù)制起點(diǎn)開(kāi)始,每個(gè)復(fù)制叉以16um

/min的速度移動(dòng),細(xì)菌染色體長(zhǎng)1280um,完成整個(gè)染色體復(fù)制所需的時(shí)間是多少?當(dāng)細(xì)菌在營(yíng)養(yǎng)

豐富的培養(yǎng)基中每20分鐘分裂一次,也就是說(shuō)第一輪復(fù)制尚未完成就開(kāi)始第二輪復(fù)制,此時(shí)染色

體有幾個(gè)復(fù)制叉?

(二)1.利用標(biāo)記的16SrRNA和未標(biāo)記的細(xì)菌DNA進(jìn)行分子表明,在飽和時(shí)lOOugDNA能結(jié)合0.071ug

的16SrRNA(分子量為5.3x10s),該細(xì)菌Cell含有2.6x10,道兒頓DNA.試計(jì)算每個(gè)細(xì)菌基因組所含

16SrRNA基因的拷貝數(shù).

2.用瓊脂糖凝膠電泳分離制備質(zhì)粒,分出三條帶。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),判斷何者是開(kāi)環(huán)DNA,何者為線形

DNA,何者為閉環(huán)環(huán)DNA。

參考答案:

、

1.拼接體:也叫剪接體,由mRNA前體及多種其他組分如細(xì)胞核小分子RNA(SnRNA)和多種蛋白因

子組成。真核mRNA前體的剪接是在剪接體形成之后進(jìn)行的。

2.復(fù)制子:也叫復(fù)制單位。從一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)到一個(gè)復(fù)制終點(diǎn)所包括的DNA序列。

3.反饋調(diào)節(jié):一種作用的結(jié)果或起因?qū)@種作用的影響叫反饋,常見(jiàn)的反饋是作用結(jié)果對(duì)這一作用

的抑制一-負(fù)反饋。

4.別構(gòu)效應(yīng):也叫變構(gòu)效應(yīng)。酶和蛋白質(zhì)分子發(fā)揮生物活性時(shí)具有的一種構(gòu)象變化,常見(jiàn)于寡聚酶

或蛋白質(zhì)。由于一個(gè)或多個(gè)亞基受調(diào)節(jié)物作用構(gòu)象改變,進(jìn)而使其余亞基構(gòu)象改變,別構(gòu)效應(yīng)是可

逆的。

5.抗體酶:具有酶活性的抗體。

1.THF四氫葉酸;2.ddTPP2',3'-雙脫氧核甘三磷酸;3.ACTH促腎上腺激素

4.Hbs鐮刀形血紅蛋白;5.tRNAm蛋氨酸t(yī)RNA;6.micRNA干擾mRNA的互補(bǔ)RNA

7.ACP脂酰載體蛋白;8.NADPH還原態(tài)尼克酰胺二核甘酸磷酸9.AGo)標(biāo)準(zhǔn)自由能變化;

10.Cotl/2表示復(fù)性一半時(shí),DNA單鏈初始濃度與時(shí)間的乘積

--、

1.340nm;2.澳化乙咤;3.改變;4.亞油酸、亞麻酸;5.信號(hào)肽、20個(gè)、疏水性、N;

6.0-糖昔鍵,N-糖音鍵;7.Klenow;8.aBB'o,o,辨認(rèn)起始點(diǎn)

9.D-環(huán)復(fù)制,0,滾環(huán)復(fù)制,雙向復(fù)制;10.ADP,呼吸控制;ILHMG-CoA還原酶,膽固醇

12.氨甲酰磷酸,天冬氨酸;13.產(chǎn)物抑制,核甘酸的反饋調(diào)節(jié),可逆磷酸化的共價(jià)調(diào)節(jié)

14.色氨酸;15.草酰乙酸;16.其體內(nèi)固氮酶系的作用將分子氮

四、

1.V;2.V;3.X;4.X;5.V;6.X;7.V;8.V;9.X;10.V

11.X;12.V;13.V;14.X;15.V

五、

1.15N出現(xiàn)在尿素中,14C出現(xiàn)在琥珀酸中。

2.CM-纖維素是陽(yáng)離子交換層析樹(shù)脂,所以A的順序?yàn)?-4-3-1

當(dāng)用SephadexG50凝膠時(shí),為分子篩層析,分子量大的先下來(lái),B的順序是2-3-1-4

3.(4)1-甲基鳥(niǎo)喋吟,鳥(niǎo)嘿吟的第一位引入甲基后,不能和胞嚏咤形成3個(gè)氫鍵了。

4.根據(jù)題意,轉(zhuǎn)錄模板是上面的那條鏈,所以RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的序列是:

3'-UAAGCGAAUUCGUU-5,

5.(1)5)1含活力單位:5*10-3*42*12=2.52單位,初速度為2.52umol/(ml.min)

(2)10min消耗的底物是10*2.52=25.2umol/mb為保證測(cè)定酶的初速度,底物消耗要低于5%,

25.2*1O「7O.05=0.504,所以最低底物濃度為0.504mol/L.

6.(1)由CNBr降解,可知C末端是Met;(2)由Edman法可知N端是Pro;(3)由胰蛋白酶水解

得知C端三肽是Lys-Arg-Met;(4)由胰凝乳蛋白酶可知cC端含有Glu,含有S的氨基酸是Cys,

該四肽的順序是Tyr-Arg-Glu-Meto所以此肽的順序是:

Pro-Phe-Ala-Cys-Phe-Lys-Arg-Glu-Met

六、第一■組:

1.(1)可以測(cè)定該溶液在260nm和280nm處的光吸收,純DNA的0D260/0D280=l.8,

(2)可進(jìn)行堿基含量分析,當(dāng)為雙鏈時(shí)A=T,C=G

2.(1)完成復(fù)制所需的時(shí)間:1280/32=40min,(2)20/40=0.5,說(shuō)明前一輪復(fù)制一半時(shí),有開(kāi)始新

一輪的復(fù)制,第二輪的起始會(huì)有4個(gè)復(fù)制叉,所以染色體上有6個(gè)復(fù)制叉。

第二組:

1.0.071/100=X/⑵6*109)X=0.1846*107

16SrRNA拷貝數(shù)=0.1846*107/(503*105)=3048

2.一般情況下超螺旋DNA遷移率快,線性DNA其次,開(kāi)環(huán)DNA最慢。

§北京大學(xué)1992年攻讀碩士學(xué)位研究生入學(xué)試題生物化學(xué)

一.名詞解釋

1.ribozyme2.衰減子3.第二信使4.酮體5.鈉鉀離子泵

二.英譯漢

1.DHU2.GHS3.cccDNA4.NADP5.GH6.MSH7.cGMP8.LTR9.ATCase10.PRPP

三填空

1.DNA的合成方向,RNA的轉(zhuǎn)錄方向,蛋白質(zhì)合成方向

2.hnRNA經(jīng)過(guò)RNA拼接過(guò)程去掉留下

3.原核生物蛋白質(zhì)合成的起始tRNA是,它攜帶的氨基酸是而真核生物蛋白質(zhì)合

成的起始tRNA是,它攜帶的氨基酸是

4.將重組DNA引入受體細(xì)胞這一過(guò)程稱(chēng)為

5.tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)呈______形狀,它的3'末端為,5'末端為

6.胰島素受體蛋白存在于

7.胰凝乳蛋白酶的親和標(biāo)記試劑為,它作用于酶活性中心的

8.維持蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)最主要的作用是

9.高等動(dòng)植物含有一個(gè)不飽和鍵的脂肪酸,其雙鍵位置一般在第碳原子之間

10性激素與靶細(xì)胞受體結(jié)合后,進(jìn)入細(xì)胞核與作用從而調(diào)節(jié)基因表達(dá)

11.維生素D3的活性形式是

12.纖維素和淀粉分子結(jié)構(gòu)的區(qū)別在于,纖維素的葡萄糖分子是以連接而成,而淀粉是以

連接而成..

13.在脂肪酸生物合成中,?;妮d體為在脂肪酸氧化中?;妮d體為

14.氨基酸代謝的一碳單位由供給,核甘酸生物合成中的一碳單位由供給.

15.糖酵解過(guò)程在細(xì)胞的部位進(jìn)行,TCA循環(huán)在細(xì)胞的部位進(jìn)行,氧化磷酸化在細(xì)

胞的部位進(jìn)行.

四是非題

1.激素鳥(niǎo)二醇的原初作用在細(xì)胞核()

2.在細(xì)胞培養(yǎng)物由供氧條件轉(zhuǎn)為厭氧條件時(shí)葡萄糖利用速度增加()

3.氟化物引起缺氧是由于抑制底物磷酸化()

4.細(xì)胞液中脂肪酸的合成是需要線粒體產(chǎn)生乙酸,而乙酸是由乙酰輔酶A將它帶出線粒體膜()

5.所有蛋白質(zhì)的克分子消光系數(shù)都是一樣的()

6.促甲狀腺激素是由垂體前葉分泌的,含糖基的單鏈蛋白質(zhì)()

7.抑制劑對(duì)酶的抑制作用是酶變性失活的結(jié)果.()

8.糖昔鍵對(duì)堿穩(wěn)定,而易被酸水解.()

9.限制性?xún)?nèi)切酶的生物學(xué)作用是分解外源DNA()

10別構(gòu)酶的動(dòng)力學(xué)曲線特點(diǎn)是都為S型()

H.DNA是遺傳物質(zhì),而RNA不是遺傳物質(zhì)()

12.雙螺旋DNA復(fù)制后,子代DNA不含親代成分()

13.在蛋白質(zhì)合成中,起始合成時(shí)起始tRNA結(jié)合核糖體的A位()

14.每個(gè)原核細(xì)胞染色體上只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn),而每個(gè)真核細(xì)胞染色體是有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn).

15原核生物轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子有3個(gè)重要部位:-10區(qū),-35區(qū),SD序列()

五.分析計(jì)算

1.含有一個(gè)九肽,分別用(1)胰蛋白酶(2)胰凝乳蛋白酶(3)竣肽酶(4)澳化氟處理,試標(biāo)

出對(duì)肽鏈的作用部位LeuMetArgProAluLysTrySenTry

2.一個(gè)大腸桿菌中含有106個(gè)蛋白分子,假設(shè)每個(gè)蛋白分子,平均分子量為40000,并且所有分子都

處于a螺旋,試計(jì)算大腸桿菌中蛋白質(zhì)肽鏈的長(zhǎng)度.

3.lug純酶(分子量為92000).在最適條件下催化反應(yīng)速度為0.5umol/min,計(jì)算(1)酶的比活力(單

位/蛋白質(zhì))(2)轉(zhuǎn)換數(shù)

4.請(qǐng)分別指出(l)DNA復(fù)制(2)RNA復(fù)制(3)蛋白質(zhì)合成三個(gè)過(guò)程的忠實(shí)性如何保持的

5.用純化的脂肪酸合成酶進(jìn)行脂肪酸的合成(1)假設(shè)底物乙酰輔酶A的甲基為3H所標(biāo)記,那么形成

的軟脂酸(16:0)中哪些H原子將被3H標(biāo)記.(2)假設(shè)用底物為丙二酰輔酶A,其兩個(gè)H都被標(biāo)記呢?

六.附加題

1.E.Coli的一種體外蛋白合成系統(tǒng)中,由多聚核甘酸AUGUUUUUUUUUUUU指導(dǎo)fMETPhePhePhe

Phe合成,在某種抗生素存在下,這個(gè)多聚物只能指導(dǎo)合成fMETPhe,試問(wèn)1,這種抗生素抑制了多肽

合成的那一步.2,設(shè)有受抑制的寡肽或二肽,在合成終止時(shí)與什么tRNA相連?

2.假定有一只體重為250克的大白鼠,其呼吸強(qiáng)度為500vl02/g體重/小時(shí),請(qǐng)計(jì)算24小時(shí)能產(chǎn)生

多少克ATP(ATP分子量為507)

參考答案

、

1.核酶:具有酶活性的RNA。

2.衰減子:大腸桿菌色氨酸操縱子中一段DNA序列,既是終止信號(hào),也是調(diào)節(jié)信號(hào),只有當(dāng)缺少色

氨酸時(shí),該操縱子中的結(jié)構(gòu)基因才能通過(guò)衰減子而進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。

3.第二信使:激素和細(xì)胞膜受體結(jié)合,受體將激素信號(hào)通過(guò)細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)如cAMP、cGMP等傳遞到

細(xì)胞內(nèi)部,信號(hào)逐漸放大,引起細(xì)胞內(nèi)反應(yīng)。這些傳遞激素信號(hào)的物質(zhì)如cAMP、cGMP稱(chēng)為第二信

使。

4.酮體:乙酰乙酸、8-羥基丁酸和丙酮3種物質(zhì)的總稱(chēng),酮體過(guò)多會(huì)導(dǎo)致中毒。

5.鈉鉀離子泵:是跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)鈉鉀離子的膜蛋白,需要ATP,是四聚體蛋白質(zhì)。

-?、

1.DHU二氫尿喀咤;2.GHS還原型谷胱甘肽;3.cccDNA共價(jià)閉合環(huán)狀DNA

4.NADP尼克酰胺二核甘酸磷酸;5.GH生長(zhǎng)激素;6.MSH促黑素細(xì)胞激素

7.cGMP環(huán)鳥(niǎo)甘酸;8.LTR長(zhǎng)末端重復(fù)序列

9.ATCase天冬氨酸轉(zhuǎn)氨甲酰酶10.PRPP1'焦磷酸-5'磷酸核糖

--、

1.5'-3'5'-3'N-C;2.內(nèi)含子,外顯子;3.fMet,fMet,tRNAMet,Met

4.轉(zhuǎn)化/轉(zhuǎn)染;5.三葉草,CCA,多數(shù)為G;6.細(xì)胞質(zhì)膜;

7.DFP(二異丙基氟磷酸),Ser殘基;8.疏水作用力;9.9?10;10.染色體

11.1,25-二羥D3;12.0-1,4-糖昔鍵,a-1,4-糖昔鍵;13.ACP,CoA-SH;

14.S-腺昔蛋氨酸,四氫葉酸;15.細(xì)胞漿,線粒體,線粒體內(nèi)膜,葉綠體內(nèi)膜

四、

1.X;2.X;3.X;4,V;5.X;6.X;7.X;8.V;9.V;10.X;

11.X;12.X;13.X;14.V;15.X

五、

1.LeuMet--ArgProAlaLysTyrSerArg

澳化富胰蛋白酶胰蛋白酶胰凝乳蛋白酶竣肽酶B

2.此蛋白質(zhì)殘基數(shù)為:4000/110=363.6,以螺旋存在時(shí)的長(zhǎng)度為:363.6*0.15=54.54nm,106個(gè)蛋

白質(zhì)的總長(zhǎng)度為:54.54nm*106=5.5cm

3.已知此酶1ug催化反應(yīng)速度0.5umol/分,活力單位是0.5U,比活力是0.5U/1ug,

0.5*103U/mg,轉(zhuǎn)換數(shù)是0.5/60=0.0083umol/秒。

4.(1)DNA復(fù)制的忠實(shí)性保持機(jī)制是:以母鏈為模板,通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)合成新的DNA,修復(fù)機(jī)制

有光修復(fù)、切除修復(fù)、重組修復(fù)等。

(2)RNA合成的忠實(shí)性保持機(jī)制是:以DNA的一條鏈為模板,按照堿基互補(bǔ)配對(duì)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,順式作

用元件的作用,轉(zhuǎn)錄后加工中酶的作用。

(3)蛋白質(zhì)合成的忠實(shí)性保持機(jī)制是:mRNA自身序列的穩(wěn)定性(mG帽子、poly-A結(jié)構(gòu)等),密碼

子和反密碼子通過(guò)氫鍵配對(duì),氨酰-tRNA合成酶的選擇性,副密碼子的作用,翻譯后運(yùn)輸、分泌、

加工中信號(hào)肽、導(dǎo)肽及各種酶的作用。

5.(1)脂肪酸從左側(cè)開(kāi)始,奇數(shù)位上的碳原子帶有3H.

(2)標(biāo)記物為00C-C3H2-C0SCoA,合成的軟脂酸有14個(gè)3H,3H在奇數(shù)位上。

第一組

1.(1)抑制多肽合成移位這一步驟。

(2)和Phe-tRNA相連,在肽鏈合成終止前,肽鏈和最后一個(gè)加入的tRNA相連,當(dāng)tRNA和肽鏈分

離后才能離開(kāi)核糖體。

2.500*250*24*3/(22.4*106)=0.402mol,507*0.402=203.71

§北京大學(xué)1998年攻讀碩士學(xué)位研究生入學(xué)試題生物化學(xué)

一,填空題(應(yīng)該是選擇題,但是原題沒(méi)有收錄選擇項(xiàng),只有正確答案)。

1,用前三酮試劑確定氨基酸是靠它與下面()功能集團(tuán)起作用。

2,影響酶催化效率的因素是()?

3,在適當(dāng)條件下,鹽酸服變性球蛋白的可逆性,可證明()。

4,蛋白質(zhì)中形成肽鍵平面的原因是()。

5,三個(gè)氨基酸(Asp,Leu,Lys)的混合物,經(jīng)過(guò)一個(gè)sulphonotedpolysturene陽(yáng)離子交換樹(shù)脂粒,

用PH5的緩沖液洗脫,洗脫液中氨基酸出現(xiàn)的順序是()。

6,溶液A的PH為7.0,溶液B的PH為6.0的兩個(gè)溶液的體積相等,則其H+的含量()。

7,0.01N醋酸的PH為3.4,0.01NHC1的PH是2,用0.01NNaOH分別去中和15mL的以上醋酸和

鹽酸,試問(wèn)需用()NaOH。

8,酶活性的國(guó)際單位(I.U.)定義為在30。C下,將底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物,在()速度時(shí)的酶量。

9,在pH5.0的經(jīng)DEAE-纖維素柱純化酶,此酶的比活從2.2U/mg提高到303U/mg,表明()

10,10-5毫克分子的乳酸脫氫酶,每秒催化10微克分子丙酮酸的生成,此酶的turnovernumber是

()。

H,胰凝乳蛋白酶中電荷延遲系統(tǒng)是指()。

12,在整體代謝的調(diào)節(jié)環(huán)節(jié)調(diào)節(jié)中,別構(gòu)效應(yīng)可調(diào)節(jié)()。

13,A因子存在時(shí),一個(gè)酶的初速度對(duì)底物濃度曲線為S形,而當(dāng)A因子濃度增高時(shí),此線左移,

說(shuō)明A因子是()。

14,一個(gè)酶的Km為3X10-5M,Vmax為轉(zhuǎn)化8000克分子底物/分/克分子酶,底物濃度為3X10-5M時(shí),

初速度是()

15,在一個(gè)2底物-2產(chǎn)物酶反應(yīng)系統(tǒng)中,對(duì)其中一個(gè)底物的Km值是()。

16,一氧化碳有毒是因?yàn)椋ǎ?/p>

17,膠原蛋白的特性是()。

18,a螺旋與B折疊的區(qū)別()。

19,促進(jìn)酶分子催化反應(yīng)的機(jī)制是()。

20,酶可以改變()。

21,轉(zhuǎn)化丁二酸根為反丁二烯酸根所需要的酶是()。

22,激素17雌二醇發(fā)揮效應(yīng)的位置在()o

23,3'-5'cAMP的性質(zhì)是()。

24,谷氨酸+丙酮酸=a酮戊二酸+丙氨酸,需要的輔酶為()。

25,細(xì)胞液中脂肪酸的合成需要線粒體產(chǎn)生乙酸,乙酸是由()帶出線粒體膜。

26,氨對(duì)哺乳類(lèi)細(xì)胞有害是因?yàn)椋ǎ﹐

27,U第一位上N原子來(lái)源是()。

28,嘿吟生物合成關(guān)鍵步驟是()o

29,當(dāng)一個(gè)蛋白質(zhì)樣品不純時(shí),要測(cè)定它的性質(zhì),可用的方法有()。

30,在同一細(xì)胞中,RNA和DNA雜交性質(zhì)是()。

31,DNA的Maxam-Gilbert化學(xué)法序列分析對(duì)底物的要求是()。

32,單鏈DNA分子溶液形成雙鏈的復(fù)性過(guò)程是()級(jí)反應(yīng)。

33,真核細(xì)胞中的RNA聚合酶III負(fù)責(zé)()的合成。

34,DNA和RNA的差別在于()。

35,一個(gè)操縱子的啟動(dòng)區(qū)產(chǎn)生一個(gè)降低的突變后會(huì)()。

36,一個(gè)B珠蛋白mRNA的cDNA克隆可以在大腸桿菌中正確的進(jìn)行肽的生物合成,而染色體基因的

克隆不能,這是因?yàn)椋ǎ?/p>

37,分析了一個(gè)細(xì)胞中的蛋白質(zhì)發(fā)現(xiàn)其lie少于正常的情況,這是因?yàn)橛泻枚郩e為Vai所代替,

這可能發(fā)生了()突變。

38,大腸桿菌核糖體的性質(zhì)()。

39,許多細(xì)胞含有一種酶,可以使DNA上少數(shù)C甲基化,產(chǎn)生5'-甲基-C,這種甲基化部位成為CG

轉(zhuǎn)變成AG的突變熱點(diǎn),這是因?yàn)椋ǎ?/p>

40,限制性?xún)?nèi)切酶的性質(zhì)()。

41,DNA生物合成的過(guò)程()。

42,如由5'-脫氧尿喀咤所引起的突變使一種喀咤為另一種喀咤所替換,這種轉(zhuǎn)變叫做()o

43,假如一個(gè)mRNA樣品,其G占29%,貝ijC為()。

44,在大腸桿菌中合成蛋白啟始過(guò)程()反應(yīng)是必需的。

45,遺傳密碼的兼并性是指()。

二,填空

1,蛋白質(zhì)的最低自由能構(gòu)型經(jīng)常為殘基之間的共價(jià)交連而加強(qiáng)。

2,非極性環(huán)境中,例如膜的內(nèi)部,蛋白質(zhì)可以折疊成側(cè)鏈向外側(cè)鏈彼此相互作

用。

3,糖原異生受抑制,被激活。

4,由于調(diào)控酶而加速脂肪合成。

5,維生素B12是,它是酶的輔基,其作用是。

6,尿素循環(huán)中的調(diào)控酶是,存在于中,是此酶的正調(diào)節(jié)物。

7,由于酶的遺傳缺陷使_______在尿中積累,加FeC13使尿變成橄欖色。

8,由于酶的遺傳缺陷使在尿中積累,見(jiàn)氧氣變成黑色。9,膳食中抑制

酶從而影響膽固醇酯的合成。

三,問(wèn)題

1,一個(gè)激素多肽鏈有29個(gè)氨基酸,順序?yàn)镚lu,Vai,Lys,Asn,Cys,Phe,Arg,Trp,Asp,Leu,

Gly,Ser,Leu,Glu,Ala,Thr,Cys,Arg,His,Met,Asp,Gin,Cys,Tyr,Pro,Gly,Glu,Glu,Lys,

a,若沒(méi)有二硫鍵存在,胰蛋白酶水解可有幾個(gè)肽。b,在pH7.5時(shí)激素凈電荷是多少,若PKa值已知。

c,提出一個(gè)設(shè)計(jì)方案證明上述激素有二硫鍵。

2,為什么SDS電泳中小分子遷移得最快?

3,如何解釋酶活性與PH的變化關(guān)系,假如其最大活性在pH=4或pH=ll時(shí),酶活性可能涉及那些

側(cè)鏈?

4,寫(xiě)出下列生化反應(yīng)式,并注明催化的酶及輔酶。

a,hydrolysisf,reductionofadoublebond

b,Oxidativedecarboxylation,g,isomerigation

c,phosphorolysish,dehydration

d,nonoxidativedecarboxy1ationi,condensation

e,thiolysisj,phosphorylation

5,胃液大約pH2而分泌H+到胃中,分泌細(xì)胞內(nèi)為pH7,假定H+梯度沒(méi)有膜電勢(shì)影響,計(jì)算形成梯度

的AG(RT=620卡/mol)。若ATP水解使H+分泌,計(jì)算每個(gè)ATP水解分泌的H+數(shù)目,若ATP水解為

-7.3千卡/克分子,細(xì)胞內(nèi)ATP濃度為10-3M,ADP為10-5M和磷酸為10-3M.

6.T1核糖核酸酶水解一個(gè)純的tRNA,得到一個(gè)寡聚核昔酸,再用蛇毒二脂酶水解此寡聚核昔酸,

產(chǎn)生pA,pC,pU和U,其比例是1:2:2:1,僅靠此以及tRNA分子3'端核甘酸序列的知識(shí),請(qǐng)寫(xiě)出

此寡聚核昔酸序列。

7,在設(shè)計(jì)測(cè)定酶活性實(shí)驗(yàn)時(shí),希望測(cè)得的最初速度對(duì)底物濃度的小量波動(dòng)并不敏感,S/Km應(yīng)該大

于多少才能使底物濃度有10%差別時(shí),所測(cè)得的初速度的誤差小于1%?(假定符合米氏公式)

8,你克隆了一個(gè)有機(jī)體的cDNA基因,并標(biāo)記此cDNA作為探針。此基因在基因組中只含有一個(gè),

并且基因上無(wú)插入序列,也無(wú)EcoRI位點(diǎn)。如用此探針去與EcoRI切割的基因組DNAsouthern轉(zhuǎn)

移膜雜交。那么你最可能找到幾條放射性條帶?如果你把此機(jī)體基因組DNA的一個(gè)BamHI片段克隆,

并能與你原有的cDNA探針雜交。現(xiàn)在你用這個(gè)標(biāo)記的BamHI片段去與剛才的southern轉(zhuǎn)移膜雜

交,你得到了幾條放射性條帶。請(qǐng)用圖示說(shuō)明EcoRI和BamHI位點(diǎn)與此基因末端的可能相互關(guān)系。

參考答案

一、1.氨基2.溫度、pH、底物濃度、酶濃度;3.蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)是靠次級(jí)鍵維持的;

4.肽鍵的偏雙鍵性質(zhì);5.Asp>Leu>Lys;6.氫離子濃度為10-7和10-6;

7.1分鐘轉(zhuǎn)化1微摩爾底物所需的酶量。8.初速度;9.酶的純度提高了137.7倍;

10.10/0.01=1000微摩爾/秒;11.Aspl02-His57-Serl9512.反應(yīng)的方向和速度;

13.激活劑;14.4000克分子底物/分/克分子酶;

15.遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于其底物濃度時(shí),這一雙底物反應(yīng)可以看做單底物反應(yīng);

16.一氧化碳可以使細(xì)胞色素c和血紅蛋白中的二價(jià)鐵氧化為三價(jià)鐵

17.耐水解;18.主鏈的彎曲不同;19.降低活化能;20.反應(yīng)速度,但不改變平衡點(diǎn);

21.差向異構(gòu)酶;22.細(xì)胞核中的DNA分子;23.第二信使;24.磷酸毗哆醛;25.檸檬酸;

26.中樞神經(jīng)系統(tǒng)中毒,機(jī)理是頭部氨和a-酮戊二酸結(jié)合生成谷氨酸,a-酮戊二酸減少,三竣酸

循環(huán)減弱,ATP減少,引起腦功能障礙。

27.天冬氨酸;28.第一步反應(yīng)和次黃口票吟之后的分支反應(yīng);29.抗原-抗體親和反應(yīng);

30.DNA的轉(zhuǎn)錄過(guò)程;31.需要大量的高純度的末端標(biāo)記的DNA樣品;32.一級(jí)反應(yīng);

33.5SrRNA、tRNA和多數(shù)小分子RNA組成;34.DNA中的核糖變?yōu)槊撗鹾颂牵琓變成U;

35.導(dǎo)致該操縱子內(nèi)結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄速度下降;

36.染色體DNA分子遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于一個(gè)珠蛋白基因,表達(dá)載體無(wú)法攜帶大的DNA片段;

37.He密碼子的一個(gè)堿基發(fā)生突變,使lie密碼子變成Vai的密碼子;38.70S

39.DNA分子中甲基化C在DNA復(fù)制時(shí)被誤當(dāng)作T,結(jié)果新合成鏈同一位置的G錯(cuò)誤變成A;

40.對(duì)自身DNA的標(biāo)記和限制外來(lái)DNA的作用。41.DNA的合成過(guò)程就是復(fù)制過(guò)程;

42.替換;43.29%;44.第一個(gè)進(jìn)入肽鏈的蛋氨酸甲基化;45.密碼子的第三位具有擺動(dòng)性。

-*、

1.半胱氨酸;2.a-螺旋或6-片層,前者更為普遍,疏水側(cè)鏈朝外,親水側(cè)鏈相互作用。

3.ATP,檸檬酸;4.胰島素,脂肪合成酶;5.鉆氨素,甲基丙二酸單酰CoA基團(tuán)變位;

6.氨基甲酰磷酸合成酶,肝線粒體,乙酰谷氨酸;7.苯丙氨酸4-單加氧酶,苯丙酮酸;

8.尿黑酸氧化酶,尿黑酸;9.膽固醇,3-羥-3-甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶

--、

1.①3個(gè)片段,胰蛋白酶水解精氨酸、賴(lài)氨酸竣基參與的肽鍵。

②7個(gè)酸性氨基酸,4個(gè)堿性氨基酸,全分子靜電荷為3-。

③對(duì)角線電泳。

2.小分子進(jìn)入分子篩膠粒內(nèi)部,SDS電泳時(shí)移動(dòng)速度取決于分子的大小,分子越小移動(dòng)的速度越快。

3.酶活性和pH的關(guān)系在于:首先影響酶活性中心氨基酸殘基的R基團(tuán)的解離狀態(tài);其次影響酶的

空間構(gòu)象。在PH4時(shí)酶活性最大,有可能酶的活性中心包含天冬氨酸和谷氨酸;在pHH時(shí)酶活性

最大,有可能呢此酶的活性中心包含精氨酸、賴(lài)氨酸。

4.寫(xiě)出結(jié)構(gòu)式

a,hydrolysisf,reductionofadoublebond水解反應(yīng),比如降解一■個(gè)雙鍵

b,Oxidativedecarboxylation,g,isomerigation氧化脫竣,

c,phosphorolysish,dehydration磷酸水解

d,nonoxidativedecarboxylationi,condensation非氧化脫竣

e,thiolysisj,phosphorylation硫解作用

5.

AG=2.303*RT*logl0-2/10-7=2.303*620*5=7130卡/mol,7300/7130=lmol

6.T1核糖核酸酶切割RNA后,產(chǎn)生T-磷酸尿喀咤為末端的單核甘酸或寡核甘酸;

蛇毒磷酸二酯酶切割DNA/RNA,產(chǎn)生5'-單核甘酸

根據(jù)題意,所有tRNA3'末端堿基序列是3'-ACC,整體序列為3'-ACCUUU-5,

7.S/Km應(yīng)該大于50.

8.對(duì)于基因組中只有一個(gè)基因,且無(wú)插入序列和EcoRI位點(diǎn),此探針與EcoRI切割的基因組DNA進(jìn)

行Southern轉(zhuǎn)膜雜交,可能找到1條放射性條帶。

當(dāng)用標(biāo)記的BamHI作為探針與剛才的EcoRI切割的基因組DNA片段進(jìn)行Southern轉(zhuǎn)膜雜交,由于

此探針和原有的cDNA雜交,說(shuō)明BamHI片段探針的切點(diǎn)在這一基因序列之內(nèi),仍然可以得到1條

放射性條帶。

§北京大學(xué)1999年攻讀碩士學(xué)位研究生入學(xué)試題生物化學(xué)

一.名詞解釋

米氏常數(shù)(Km)磷酸戊糖途徑調(diào)節(jié)子酶輔助因子cori循環(huán)與巴斯德效應(yīng)滾動(dòng)環(huán)復(fù)制

—.結(jié)構(gòu)式

TPCK;尼克酰胺;GC配對(duì);IP3

三.填空

1,蔗糖是否為還原糖。

2,糖背鍵的兩種類(lèi)型________和o

3,DNA的一條鏈序列為GTCAATG,那么另一條鏈的序列為。

4,常數(shù)表征酶的催化效率。

5,P因子的催化活性是和o

6,常見(jiàn)的遺傳缺陷病有,,,;常見(jiàn)的放射性標(biāo)記的同位素

,,,o

7,DNA復(fù)制過(guò)程中動(dòng)物是以為能源,E.Coli以為能源。

8,生物體中產(chǎn)能最多的生化反應(yīng)過(guò)程是=

9,發(fā)現(xiàn)TCA循環(huán),發(fā)現(xiàn)化學(xué)滲透學(xué)說(shuō)。

10,真核生物rRNA拼接過(guò)程中左端的拼接點(diǎn)順序?yàn)椤叶藶榍谐Y(jié)構(gòu)。

11,生長(zhǎng)激素是由_______產(chǎn)生的。

12,E.ColiDNAPolI經(jīng)酶切,得到大小片段,其中大片段具有酶活性和酶活

性,小片段具有酶活性。

13,必需脂肪酸有和-

四.回答

1,作動(dòng)力學(xué)曲線區(qū)分酶的可逆性抑制與不可逆抑制?

2,比較ATP與ppi在磷酸鍵及生物學(xué)功能方面的異同。

3,真核生物至少需要31種tRNA才能識(shí)別61種密碼子,而線粒體中tRNA只有22種,為什么?

4,闡明衰減子對(duì)操縱子的調(diào)控。

5,糖酵解和糖異生過(guò)程中涉及的不可逆反應(yīng)和限速步驟。

五.計(jì)算

3,DNA半保留復(fù)制。15NDNA在14N培養(yǎng)基上培養(yǎng)一代后,14NDNA與14N-15NDNA雜交分子之比是

多少?

4,正常DNA的超螺旋密度為-0.05,在無(wú)拓?fù)洚悩?gòu)酶條件下當(dāng)復(fù)制到超螺旋密度為0.07時(shí),由于

正超螺旋的阻力而不能繼續(xù)復(fù)制,求此時(shí)的復(fù)制百分?jǐn)?shù)。

5,2ADP===ATP+AMP,已知[ADP][AMP][ATP]求:1,該反應(yīng)的能荷。2,Keq(各濃度為平衡態(tài)濃

度)。

6,L=T+W,若a=-0,05,則DNA可以復(fù)制的百分比。

參考答案:

1.米氏常數(shù):即Km,是酶的特征常數(shù),當(dāng)反應(yīng)速度達(dá)到最大反應(yīng)速度一半時(shí)底物的濃度。

2.磷酸戊糖途徑:糖分解代謝途徑之一,6-磷酸葡萄糖首先脫氫、脫竣轉(zhuǎn)變?yōu)?-磷酸核糖,經(jīng)過(guò)一

系列分子重排,產(chǎn)生不同的磷酸單糖,進(jìn)入糖酵解。

3.調(diào)節(jié)子:受一種調(diào)節(jié)蛋白控制的幾個(gè)操縱子構(gòu)成的調(diào)節(jié)系統(tǒng)。

4.酶的輔助因子:酶分子中非蛋白質(zhì)組成成分,包括維生素和無(wú)機(jī)離子等。

5.cori循環(huán)與巴斯德效應(yīng):在耗氧的同時(shí)葡萄糖消耗減少,乳酸堆積終止的現(xiàn)象稱(chēng)為巴斯德效應(yīng)。

肌肉厭氧分解產(chǎn)生的乳酸進(jìn)入血液,經(jīng)肝臟轉(zhuǎn)變?yōu)楸釁⑴c糖異生后再變?yōu)槠咸烟牵咸烟窃俅?/p>

經(jīng)過(guò)血液送回到肌肉的過(guò)程。

6.滾動(dòng)環(huán)復(fù)制:復(fù)制時(shí)首先形成共價(jià)閉環(huán)雙鏈,然后正鏈切開(kāi),產(chǎn)生游離的3'-羥基和5'-磷酸

末端,5,-磷酸末端細(xì)胞膜結(jié)合固定,DNA聚合酶以環(huán)狀負(fù)鏈為模板,從正鏈的3,-羥基末端加入

脫氧核甘酸,使新生鏈延長(zhǎng),通過(guò)滾動(dòng)合成新的正鏈。

二、TPCK:尼克酰胺:維生素pp;GC配對(duì):G和C形成3個(gè)氫鍵;IP3:肌醇三磷酸

三、1.不是還原糖;2.N-糖昔鍵,0-糖昔鍵;3.3'-CAGTTAC-5';4.米氏常數(shù);

5.終止轉(zhuǎn)錄因子,NTPase活性;6.血友病,苯丙尿酮癥,白化病,糖尿病,3H,32P,32S,1311,14C;

7.三磷酸核昔,三磷酸核昔;8.氧化磷酸化;9.Krebs,Mitchell;10.GGAGGG,CUCUCU,內(nèi)含子;

11.垂體前葉;12.聚合酶,3,-5,外切核酸酶,5,-3,外切核酸酶;

13.亞油酸,亞麻酸

四、

2.ATP和ppi的比較:ATP含有3個(gè)磷酸酯鍵,ppi有一個(gè),ATP末端的2個(gè)磷酸酯鍵水解放出較多

的能量,生物需要能量時(shí)ATP水解,ppi為無(wú)機(jī)物,不具有生物功能。

3.(1)線粒體DNA編碼的蛋白質(zhì)數(shù)量少于核基因,大部分線粒體蛋白質(zhì)是由核基因編碼的。

(2)線粒體的遺傳密碼不同于細(xì)胞核。

4.衰減子:大腸桿菌色氨酸操縱子中一段DNA序列,既是終止信號(hào),也是調(diào)節(jié)信號(hào),只有當(dāng)缺少

色氨酸時(shí),該操縱子中的結(jié)構(gòu)基因才能通過(guò)衰減子而進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。

色氨酸操縱子mRNA的前導(dǎo)區(qū)編碼一個(gè)14肽,前導(dǎo)區(qū)的RNA以1、2和3、4配對(duì)的形式出現(xiàn),轉(zhuǎn)錄

停止在終止信號(hào)區(qū),。當(dāng)環(huán)境中缺少色氨酸,前導(dǎo)肽不能形成,但有其他氨基酸時(shí),Trp-tRNA不能

形成,前導(dǎo)肽翻譯到色氨酸密碼子時(shí)候停止,前導(dǎo)區(qū)的2、3配對(duì),終止信號(hào)不能形成,轉(zhuǎn)錄繼續(xù)。

當(dāng)色氨酸存在或者過(guò)量時(shí),前導(dǎo)肽正常合成,3、4配對(duì),使得核糖體在區(qū)段1、2之間結(jié)合,轉(zhuǎn)錄

終止。

5.糖酵解不可逆有3個(gè)步驟:(1)丙酮酸一磷酸烯醇式丙酮酸;

(2)1,6-二磷酸果糖——6-磷酸果糖;(3)6-磷酸葡萄糖一一葡萄糖

五、

3.14N和14N-15N的比值為0:2

4.復(fù)制百分?jǐn)?shù)=(0.07+0.05)/0.02=0.024=2.4%

§北師大2000年攻讀碩士學(xué)位研究生入學(xué)試題生物化學(xué)

一.名詞解釋(2/20)

1.亞基;2.酶的必須基團(tuán);3.修飾核昔;4.酵解;5.氧化磷酸化

6.DNA的半不連續(xù)復(fù)制;7.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);8.核酸雜交;9.分子伴侶;10.增強(qiáng)子

二.填空(1/20)

1.穩(wěn)定蛋白質(zhì)膠體狀態(tài)的因素是蛋白質(zhì)分子上的及.

2.氫鍵有兩個(gè)主要特征__________和.

3.兩條相當(dāng)伸展的肽鏈或同一條肽鏈的兩個(gè)伸展的片斷之間形成氫鍵的二級(jí)結(jié)構(gòu)稱(chēng)為.

4.使酶具有高催化效應(yīng)的因素有,,和.

5.tRNA的分子3'端的堿基序列是.

6.酵母DNA按摩爾計(jì)含有32.8%的T,則A為,G為和C為.

7.真核細(xì)胞核小體的組成是和

8.核酸變性后可發(fā)生_________效應(yīng).

9.破壞a-螺旋結(jié)構(gòu)的氨基酸是

10.與mRNA密碼子ACG相對(duì)應(yīng)的tRNA的反密碼子是

11.內(nèi)含子是指

12.有機(jī)體的代謝和代謝是密切聯(lián)系在一起的

13.ATP在細(xì)胞的產(chǎn)能和煦能過(guò)程中起著重要的作用

14.電子傳遞鏈在原核細(xì)胞存在于______上,在真核細(xì)胞存在于內(nèi)膜上

15.磷酸果糖激酶是酵解過(guò)程最關(guān)鍵的酶

16.TCA循環(huán)是生物體內(nèi)糖,脂,蛋白質(zhì)代謝的

17.生物體內(nèi)卵磷脂合成的兩種不同途徑是和

18.在靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物中,喋吟分解代謝的最終產(chǎn)物是

19.脫氧核甘酸的生物合成是在___________的基礎(chǔ)上還原生成的

20.在真核生物中DNA復(fù)制的主要酶是

21.酶的磷酸化和脫磷酸化作用是共價(jià)修飾調(diào)節(jié)酶活性的一種重要方式.

22.操縱子包括,和.

23.所有原核生物的終止子在終止點(diǎn)之前均有一個(gè),其產(chǎn)生的RNA可形成.

24.在轉(zhuǎn)錄過(guò)程中RNA聚合酶全酶的a-因子負(fù)責(zé),核心酶負(fù)責(zé).

25.DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶是與有關(guān)的酶

三.問(wèn)答題(40分)

1,用Imol酸水解五肽,得兩個(gè)谷氨酸,一個(gè)賴(lài)氨酸;用胰蛋白酶裂解成兩個(gè)碎片,在Ph=7時(shí)電泳,

碎片之一向陽(yáng)極,另一個(gè)向陰極;碎片之一用DNP水解得DNP-谷氨酸;原五肽用胰蛋白酶裂解產(chǎn)生

兩個(gè)二肽和一個(gè)游離的谷氨酸,寫(xiě)出五肽順序(5分)

2.簡(jiǎn)述如何用酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑的理論來(lái)尋找或合成控制代謝的藥物(5分)

3.什么是遺傳學(xué)中心法則?為什么說(shuō)阮病毒的發(fā)現(xiàn)是對(duì)此法則提出了挑戰(zhàn)?(5分)

4.在動(dòng)物體內(nèi)脂肪酸能轉(zhuǎn)變成糖嗎?為什么?(4分)

5.簡(jiǎn)述原核生物與真核生物蛋白質(zhì)合成的區(qū)別(6分)

6.簡(jiǎn)述真核生物的基因表達(dá)調(diào)控(6分)

7.ImolC6=C714碳不飽和單烯酸徹底氧化分解生成C02和H20共產(chǎn)生多少molATP?(5分)

8.大腸桿菌僅在有充足的丙氨酸提供能量的情況下能存活嗎?為什么?

參考答案:

、

1.具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)中的每一個(gè)具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈。

2.酶活性所必須的氨基酸殘基的基團(tuán)。

3.除了5種正常的核昔酸之外,有些核昔分子發(fā)生甲基化、環(huán)上原子取代后形成的核普。

4.糖無(wú)氧代謝途徑,葡萄糖變成丙酮酸,并釋放能量合成ATP。

5.是生物儲(chǔ)存能量的方式之一,伴隨呼吸鏈上的電子傳遞給氧并生成水,合成ATP。

6.DNA復(fù)制時(shí),前導(dǎo)鏈的合成是連續(xù)的,后隨鏈的合成是先合成岡崎片段,然后在連接酶的作用下

連接成完整的DNA鏈。

7.以單鏈DNA為模板,在Taq聚合酶作用下,在引物后快速合成DNA過(guò)程。

8.分為DNA-DNA、DNA-RNA二種,不同來(lái)源的核酸單鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)形成雙鏈的過(guò)程。

9.蛋白質(zhì)折疊過(guò)程中協(xié)助蛋白質(zhì)折疊成正確構(gòu)象的蛋白質(zhì)或酶。

10.增強(qiáng)子首先發(fā)現(xiàn)于真核生物DNA中促進(jìn)DNA轉(zhuǎn)錄的局部序列,屬于基因轉(zhuǎn)錄的順式元件。

-?、

1.靜電荷、水化層;2.方向性,飽和性;3.0-片層;4.底物和酶的靠近和定向,酶使底物發(fā)生形

變,共價(jià)催化,酸堿催化;5.3'-ACC-5';6.32.8%,38.6%,38.6%;

7.DNA,組蛋白;8.增色效應(yīng);9.甘、脯氨酸;10.CGA;ll.mRNA翻譯后要除去部分在DNA中對(duì)應(yīng)的

序列;12.分解代謝,合成代謝;13.中介作用;14.胞漿,線粒體,葉綠體;

15.調(diào)節(jié)酶;16.樞紐;17.從頭合成,節(jié)約利用途徑;18.尿酸;19.二核甘酸;

20.DNA聚合酶a;21.高等動(dòng)物;22.調(diào)節(jié)基因,結(jié)構(gòu)基因,調(diào)節(jié)元件;

23.回紋結(jié)構(gòu),發(fā)夾結(jié)構(gòu);24.識(shí)別啟動(dòng)子,合成RNA;25.DNA復(fù)制時(shí)雙鏈解開(kāi)

--、

1.賴(lài)-賴(lài)-谷-精-谷

2.酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制是抑制劑和底物相似,或者與酶誘導(dǎo)底物形變的結(jié)構(gòu)相似,增大酶的Km。

應(yīng)用這個(gè)原理人們發(fā)現(xiàn)磺胺藥,磺胺藥和維生素BH相似。

3.中心法則:DNA自我復(fù)制,轉(zhuǎn)錄成RNA,RNA指導(dǎo)翻譯蛋白質(zhì)合成。阮病毒的出現(xiàn)挑戰(zhàn)了這個(gè)原則,

因?yàn)槿畈《臼堑鞍踪|(zhì)發(fā)生傳染,將正常的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)槿畈《尽?/p>

4.動(dòng)物體內(nèi)脂肪酸不能轉(zhuǎn)變?yōu)樘?,?dòng)物體內(nèi)不存在乙醛酸循環(huán)。正常情況下,乙酰CoA進(jìn)入三竣酸

循環(huán)產(chǎn)生二氧化碳和水。

5.

原核生物真核生物

核糖體70S,轉(zhuǎn)錄和翻譯同時(shí)進(jìn)行80S,轉(zhuǎn)錄和翻譯分開(kāi)

底物20種氨基酸20種氨基酸

搬運(yùn)tRNAtRNA

模板和起始密碼mRNA,AUG,mRNA,AUG

SD-序列無(wú)SD-序列,掃描尋找AUG

能量ATP,GTPATP,GTP

起始氨基酸甲酰蛋氨酸蛋氨酸

輔助因子少多

后加工有信號(hào)肽有信號(hào)肽,多種修飾

6.(1)轉(zhuǎn)錄前水平;(2)轉(zhuǎn)錄水平;(3)轉(zhuǎn)錄后水平;(4)翻譯水平;(5)翻譯后加工、運(yùn)輸和

分泌等

7.經(jīng)過(guò)6次B氧化,產(chǎn)生7分子乙酰輔酶A,能量為:7*12+6*4-1*1.5-2=104.5

8.能存活,因?yàn)楸彼崦摪鄙杀?,丙酮酸?jīng)過(guò)三較酸循環(huán)產(chǎn)生能量,丙酮酸可以經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)化變

成其他的酮酸,和氨結(jié)合后又可以變成其他的氨基酸,供給機(jī)體進(jìn)行代謝。

§北師大2001年攻讀碩士學(xué)位研究生入學(xué)試題生物化學(xué)

一.名詞解釋?zhuān)?0分)

1.蛋白質(zhì)前體;2.分子??;3.核糖體;4.酶的催化基團(tuán);5.核酶

6.順式作用元件;7.增強(qiáng)子;8.受體;9.分子篩層析;10.PCR

二.填空(30分)

1.血紅蛋白與氧結(jié)合是通過(guò)效應(yīng)實(shí)現(xiàn)的.由組織產(chǎn)生的C02擴(kuò)散到細(xì)胞,從而影響Hb和02

的親合力,這稱(chēng)為效應(yīng)

2.賴(lài)氨酸帶三個(gè)可解離基團(tuán),它們Pk分別為2.18,8.95,10.53,其等電點(diǎn)為

3.糖肽連接的鍵是鍵,而脂質(zhì)與蛋白質(zhì)以鍵結(jié)合而成.

4.測(cè)定蛋白質(zhì)中二硫鍵位置的經(jīng)典方法是.

5.破壞a-螺旋結(jié)構(gòu)的氨基酸是和

6.蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)之間還存在_____和兩種組合體

7.DNA變性后,子外吸收能力,黏度

8.tRNA的反密碼子為UGC,它識(shí)別的密碼子為

9.染色體中DNA的構(gòu)型主要是______型

10.競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑使Vmax,Km.

11.生物氧化主要是通過(guò)代謝物反應(yīng)實(shí)現(xiàn)的,生物氧化產(chǎn)生的水是通過(guò)

形成的

12.磷酸戊糖途徑的生理意義是和

13.糖原合成的關(guān)鍵酶是糖原分解的關(guān)鍵酶是.

14.一分子脂肪酸活化后需經(jīng)轉(zhuǎn)運(yùn)才能由胞漿內(nèi)進(jìn)入線粒體內(nèi)氧化,線粒體內(nèi)的乙酰CoA

需經(jīng)才能將其帶出線粒體參與脂肪酸的合成

15.催化IMP轉(zhuǎn)變?yōu)锳MP的酶有和

16.DNA復(fù)制,引發(fā)前體加構(gòu)成

17.氨酰Trna合成酶既能識(shí)別又能識(shí)別

三.問(wèn)答題(50分)

1.某九肽組成為兩個(gè)Gly,兩個(gè)Phe,Tyr,Met,Asp,Arg和Pro,經(jīng)胰凝乳蛋白酶水解得五肽和四肽,

四肽組成為Phe,Tyr,Gly和Pro.此九肽的CNBr處理產(chǎn)物經(jīng)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂層析并洗脫得一組成為

Arg,Phe和Gly的三肽.此九肽經(jīng)胰蛋白酶水解得Phe,如用FDNB反應(yīng)后在水解測(cè)得DNP-Tyr.請(qǐng)寫(xiě)出

此九肽順序及解析過(guò)程(6分)

2.簡(jiǎn)述血紅蛋白的結(jié)構(gòu)及其結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系(6分)

3.簡(jiǎn)述酶活性的的調(diào)節(jié)方式有那些?(6)

4.簡(jiǎn)述tRNA的結(jié)構(gòu)特征及其作用與作用機(jī)制(6)

5

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