廣西《水稻品種抗南方水稻黑條矮縮病人工接種鑒定技術(shù)規(guī)范》編制說明

廣西壯族自治區(qū)地方標準《水稻品種抗南方水稻黑條矮縮病人工接種鑒定技術(shù)規(guī)范》(征求意見稿)編制說明2022年04月一、任務(wù)來源和起草單位“水稻品種抗南方水稻黑條矮縮病人工接種鑒定技術(shù)規(guī)范”于2015年4月被列入廣西壯族自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局2015年第三批廣西地方標準制定（修訂）項目計劃，項目編號為2015-0378。本標準由廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出，廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所和江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所負責(zé)起草編寫。按推薦性廣西地方標準制定。二、目的意義南方水稻黑條矮縮病是我國新發(fā)現(xiàn)的水稻病毒病，其病原南方水稻黑條矮縮病毒(Southernriceblack-streakeddwarfvirus,SRBSDV)是呼腸孤病毒科斐濟病毒屬的一個新種。該病主要由遷飛性害蟲白背飛虱持久性傳毒，在水稻各生育期均能感染為害，水稻苗期、分蘗前期發(fā)病后基本絕收，拔節(jié)期發(fā)病產(chǎn)量損失50%左右，孕穗期發(fā)病產(chǎn)量損失約30%。南方水稻黑條矮縮病具有流行擴散快、監(jiān)測防控難、為害損失大等特點。據(jù)統(tǒng)計，2009年全國發(fā)生面積約33.33萬ha，基本失收面積0.67萬ha，其中，廣西發(fā)生面積高達11673.33ha。南方水稻黑條矮縮病的發(fā)生流行對水稻生產(chǎn)和糧食安全構(gòu)成了嚴重威脅。推廣種植抗(耐)病品種是經(jīng)濟有效的防治措施之一，但由于該病毒出現(xiàn)時間不長，研究基礎(chǔ)薄弱，缺乏統(tǒng)一的抗病性鑒定技術(shù)操作規(guī)程，水稻品種對病害的抗病性缺乏有效評價。研究制定“水稻品種抗南方水稻黑條矮縮病人工接種鑒定技術(shù)規(guī)范”，有利于開展水稻品種抗病性鑒定工作，為進一步挖掘抗病基因、抗病育種和病害綜合防控奠定基礎(chǔ)。對貫徹以利用抗病品種為基本手段的南方水稻黑條矮縮病綜合防治策略，保障我國水稻高產(chǎn)和優(yōu)質(zhì)、實現(xiàn)糧食安全生產(chǎn)和農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。三、國內(nèi)外標準對比情況據(jù)查閱，目前國內(nèi)外還沒有關(guān)于南方水稻黑條矮縮病人工接種鑒定技術(shù)國家標準和行業(yè)標準的編制，該廣西地方標準《水稻品種抗南方水稻黑條矮縮病人工接種鑒定技術(shù)規(guī)范》的編寫對水稻品種抗病性鑒定的規(guī)范操作有重要的指導(dǎo)作用。四、編制過程1、組成編制小組，制訂工作計劃項目下達后，成立了編制工作小組，制定編寫計劃，并進行人員分工（表1）。表1主要編制人員與責(zé)任分工秦碧霞女研究員植物病理學(xué)廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所主持,重要指標確定，編寫規(guī)程李戰(zhàn)彪男副研究員植物病理學(xué)廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所資料收集、編寫謝慧婷女副研究員植物病理學(xué)廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所數(shù)據(jù)收集、驗證周彤男研究員植物病理學(xué)江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所接種方法研究黃所生男副研究員植物病理學(xué)廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所技術(shù)指標驗證崔麗賢女農(nóng)藝師農(nóng)學(xué)廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所試驗條件研究李丹婷女研究員作物遺傳育種廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所數(shù)據(jù)收集、驗證蔡健和男研究員植物病理學(xué)廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所數(shù)據(jù)收集、驗證農(nóng)保選男副研究員農(nóng)學(xué)廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所指標驗證蘭瑩女副研究員遺傳學(xué)江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所資料收集2、收集整理資料收集整理國內(nèi)、區(qū)內(nèi)已頒布的相關(guān)標準、國內(nèi)公開發(fā)表的相關(guān)技術(shù)性資料。整理總結(jié)編制團隊成員相關(guān)試驗研究成果。3、確定編寫原則根據(jù)南方水稻黑條矮縮病的發(fā)生危害特點，結(jié)合本所主持及參加的國家重點研發(fā)計劃項目、國家國際科技合作專項、廣西科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計劃項目、國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系廣西創(chuàng)新團隊建設(shè)專項、廣西作物病蟲害生物學(xué)重點實驗室基金項目、廣西農(nóng)科院基本科研業(yè)務(wù)專項、水稻生物學(xué)國家重點實驗室項目等與南方水稻黑條矮縮病相關(guān)的研究內(nèi)容及試驗數(shù)據(jù)為制定依據(jù)，以及從2014年起承擔(dān)區(qū)試品種南方水稻黑條矮縮病抗性鑒定工作的技術(shù)積累，本著品種抗性鑒定“簡便、實用、準確、規(guī)范”的要求，就水稻品種抗南方水稻黑條矮縮病鑒定方法進行了規(guī)范。4、編寫修改，形成征求意見稿參照廣西地方標準編制的基本格式，按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定，起草了該標準的征求意見稿，并通訊征求區(qū)內(nèi)外有關(guān)領(lǐng)域研究、推廣、使用等不同類型單位專家的意見，修改形成征求意見稿，發(fā)送給廣西興桂質(zhì)量標準化認證咨詢服務(wù)事務(wù)所進行了格式的校驗。五、標準關(guān)鍵技術(shù)指標依據(jù)和來源本標準為推薦性廣西地方標準。依據(jù)GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定編制，參考NY/T

2631-2014

《南方水稻黑條矮縮病測報技術(shù)規(guī)范》、NY/T2918-2016《南方水稻黑條矮縮病防治技術(shù)規(guī)程》、NY/T2955-2016《水稻品種試驗水稻黑條矮縮病抗性鑒定與評價技術(shù)規(guī)程》等相關(guān)標準，并根據(jù)編制小組前期研究成果、參考國內(nèi)文獻資料并經(jīng)反復(fù)試驗驗證，確定了白背飛虱的飼毒時間、傳毒時間和接種苗齡、有效接種蟲量等關(guān)鍵技術(shù)指標，并對廣西45個主栽水稻品種、53份市售水稻品種及地方稻種資源等進行抗南方水稻黑條矮縮病鑒定評價和遺傳分析，驗證了人工接種方法的可行性，已發(fā)表相關(guān)論文8篇（秦碧霞等，2014；黃所生等，2017；農(nóng)保選等，2019，2篇；崔麗賢等，2019；農(nóng)保選等，2021，2篇；秦碧霞等，2021），獲授權(quán)實用新型專利2件（ZL202122741492.8，ZL202122744411.X），已受理發(fā)明專利2件（202111072981.7，202111543463.9），實用新型專利1件（202220293686.8）。白背飛虱飼毒時間的確定曹楊等（2011）研究結(jié)果表明，白背飛風(fēng)三齡若蟲最短獲毒時間為6min，最長獲毒時間為12min；五齡若蟲最短獲毒時間為3min，最長獲毒時間為9min；長翅型成蟲和短翅型成蟲的最短獲毒時間和最長獲毒時間相同，分別為2min和8min。為確定白背飛虱飼毒時間，試驗設(shè)白背飛虱取食時間5min和15min、1、6、12、24、48h共7個處理，到設(shè)定時間后把白背飛虱轉(zhuǎn)移到健康水稻苗上度過循回期，用于接種2葉期TN1水稻苗，接種2d后將水稻苗移栽至防蟲網(wǎng)室觀察，正常水肥管理，20d后開始調(diào)查發(fā)病率，每7d調(diào)查一次，連續(xù)調(diào)查3次，統(tǒng)計每個處理的發(fā)病率。發(fā)病情況見表2，隨著白背飛虱飼毒時間加長，水稻發(fā)病率不斷增高。以白背飛虱的飼毒時間為自變量(x)，水稻發(fā)病率為因變量(Y)，建立一元線性回歸方程，得到模型：Y=18.0363+0.02273x，(R2=0.9119)當(dāng)白背飛虱飼毒時間為60.179h時，水稻發(fā)病率達到100.00%。綜合參考文獻和試驗結(jié)果，確定白背飛虱飼毒時間為48h（2d）。表2白背飛虱不同飼毒時間接種的水稻品種TN1的發(fā)病率飼毒時間總株數(shù)病株數(shù)發(fā)病率（%）5min2414.1715min22313.641h26415.386h27933.3312h241250.0024h301860.0048h272074.072、白背飛虱傳毒時間的確定曹楊等（2011）研究結(jié)果表明，五齡若蟲、長翅型和短翅型成蟲在分蘗初期稻苗上的最短接毒時間分別是5min、7min和7min，最長接毒時間分別是10min、12min和12min。取已飼毒且度過循回期的白背飛虱，接種2葉期TN1水稻苗，傳毒時長設(shè)5、15、30min和1、6、12、24h7個時間段，到設(shè)定時間后移出白背飛虱，將水稻苗移栽至防蟲網(wǎng)室觀察，正常水肥管理，20d后開始調(diào)查發(fā)病率，每7d調(diào)查一次，連續(xù)調(diào)查3次，統(tǒng)計每個處理的發(fā)病率。發(fā)病情況見表3，結(jié)果表明，隨著白背飛虱傳毒時間加長，水稻發(fā)病率不斷增高。以白背飛虱的傳毒時間為自變量(x)，水稻發(fā)病率為因變量(Y)，建立一元線性回歸方程，得到模型：Y=21.1269+0.0499x,R2=0.9121當(dāng)白背飛虱傳毒時間為26.34h時，水稻發(fā)病率達到100.00%。綜合參考文獻和試驗結(jié)果，確定白背飛虱傳毒時間為48h（2d）.表3白背飛虱不同傳毒時間接種水稻品種TN1的發(fā)病率傳毒時間總株數(shù)病株數(shù)發(fā)病率（%）5m1915.2615m22313.3730m21419.051h24937.56h241354.1712h171164.7124h201785.0036h20201003、水稻接種苗齡確定試驗設(shè)1、2、3葉期和20、30、40、50、60、70d苗齡（品種：TN1）共9個處理，按有效接種蟲量2頭/苗接入度過循回期的白背飛虱，接種2d后移栽至防蟲網(wǎng)室觀察，正常水肥管理，20d后開始調(diào)查發(fā)病率，每7d調(diào)查一次，連續(xù)調(diào)查3次，統(tǒng)計每個處理的發(fā)病率。發(fā)病情況見表4，結(jié)果表明，1葉期至30d苗齡水稻發(fā)病率均為100.00%，40、50、60和70d苗齡水稻發(fā)病率依次為91.30%、4.17%、0.00%、0.00%。綜合考慮接種便捷性和接種工作效率，接種水稻苗齡確定為1.5葉-2.5葉齡期。表4白背飛虱接種不同生育期水稻品種TN1的發(fā)病率生育期總株數(shù)病株數(shù)發(fā)病率（%）1葉期2525100.002葉期2525100.003葉期2525100.0020天2020100.0030天2323100.0040天232191.3050天2414.1760天2300.0070天2100.004、有效接種蟲量的確定有效接種蟲量=接種蟲量×帶毒率，設(shè)有效接蟲量0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0頭/株10個處理，重復(fù)3次。于TN1水稻苗2.5葉齡期，接入度過循回期的帶毒白背飛虱成蟲，2d后移走白背飛虱，將水稻苗移栽至防蟲網(wǎng)室觀察，正常水肥管理。20d后開始調(diào)查發(fā)病率，每7d調(diào)查一次，連續(xù)調(diào)查3次，統(tǒng)計每個處理的發(fā)病率。發(fā)病情況見表5。隨著有效接種蟲量的增加，TN1的發(fā)病率有所提高，當(dāng)有效接種蟲量為0.9頭/株和1頭/株時，TN1的發(fā)病率為100%，因此，有效接種蟲量確定為1頭/株～2頭/株。表5不同有效接種蟲量下水稻品種TN1的發(fā)病率有效接種蟲量（頭/株）發(fā)病率（%）差異顯著性（1%）0.153.33A0.260.00B0.382.22C0.491.11D0.594.44DE0.695.56DE0.796.67DE0.898.89E0.91.0100100EE5、抗性評價標準確定抗性評價標準參考農(nóng)業(yè)行業(yè)標準《水稻品種試驗水稻黑條矮縮病抗性鑒定與評價技術(shù)規(guī)程》（NY/T2955-2016）。六、自我承諾編制的地方標準技術(shù)指標不低于強制性國家標準的相關(guān)技術(shù)要求，與有關(guān)的推薦性國家標準、行業(yè)標準