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SZDB/Z深圳市市場監(jiān)督管理局發(fā)布I II 4植物種質(zhì)資源離體保存庫建設(shè) 1植物種質(zhì)資源離體保存庫建設(shè)規(guī)范驗(yàn)室設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)室管理、植物離體保存技術(shù)等相關(guān)GB2894-2008安全標(biāo)志及GB7000.2-2008燈具第2-22部分:特殊要求應(yīng)急照GB/T25915.1-2010潔凈室及相關(guān)GB/T25915.4-2010潔凈室及相關(guān)GB/T25915.5-2010潔凈室及相關(guān)GB50346-2011生物安全實(shí)驗(yàn)室建CNAS-CL05-2009實(shí)驗(yàn)室生物SN/T2294.5-2011檢驗(yàn)檢疫實(shí)驗(yàn)室管理第5部分:危險(xiǎn)化AQ3013-2008危險(xiǎn)化學(xué)品從業(yè)單位安全標(biāo)準(zhǔn)化通用規(guī)范DB33/T752-2009植物種苗組培快繁技術(shù)在物種繁衍過程中,從親代傳遞給子代的遺傳23.2植物種質(zhì)資源plantgermplasmr3.3種質(zhì)保存germplasmco其遺傳完整性,并且有高的生活力,能通過繁殖將其遺傳特性傳與“活體”(invivo)相對的意義,指器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)3.5植物組織培養(yǎng)planttissue3.8常溫保存roomtemperaturecon3.9低溫保存lowtemperaturecons3.10珍稀瀕危植物rareandendangered33.16誘導(dǎo)培養(yǎng)inductioncul3.18增殖培養(yǎng)multiplicationc3.19壯苗培養(yǎng)strongsee3.20生根培養(yǎng)rootingcu利用植物組織、器官、細(xì)胞等作為外植體,通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)產(chǎn)生的植物種4植物種質(zhì)資源離體保存庫建設(shè)本標(biāo)準(zhǔn)適用于離體保存庫采用常溫和低溫保存法保存植物種質(zhì)4.2設(shè)施、設(shè)備與環(huán)境4.2.1空調(diào)、通風(fēng)和凈化度減少室內(nèi)回流與渦流。離體保存庫空調(diào)系統(tǒng)應(yīng)符合GB19489的規(guī)定,有足夠的溫度和濕度控制能力。離體保存庫空調(diào)凈化系統(tǒng)應(yīng)符合GB50346的規(guī)定,有利于實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)設(shè)置和4.2.2照明系統(tǒng)44.2.3備用電源4.3.1實(shí)驗(yàn)區(qū)域4.3.2制備室防塵柜、冰箱、電子天平、pH酸度計(jì)、蒸餾水器、微波爐等。制備室要求寬敞明亮,通風(fēng)4.3.3洗滌室池和落水架。洗滌室要求通風(fēng)、防潮,地面應(yīng)耐濕并排水4.3.4滅菌室鍋和干燥滅菌器。針對滅菌室要求電源安全,設(shè)漏電保護(hù)4.3.5更衣室燈、衣柜和鞋柜。更衣室的建設(shè)和布局應(yīng)符合GB/T25915.4的4.3.6無菌操作室操作室室內(nèi)空氣潔凈度應(yīng)達(dá)到GB/T25915.1中ISO84.3.7培養(yǎng)室環(huán)境與設(shè)施5培養(yǎng)架溫度長的特定溫度要求而設(shè)定,各特定溫度的變化范圍為±2℃。濕度光照培養(yǎng)室空間不小于20m2,便于對條件進(jìn)行均勻控制。4.3.8觀察室室內(nèi)相鄰隔間之間設(shè)置透明玻璃窗,窗戶應(yīng)采用非4.3.9溫室4.3.10實(shí)驗(yàn)室布局障這兩個(gè)前提要求的情況下,實(shí)驗(yàn)室可視情況4.4人員管理離體保存庫要建立實(shí)驗(yàn)室人員工作職責(zé)和操作守4.5.1生物安全64.5.2化學(xué)安全4.5.3紫外線安全4.5.4設(shè)施安全4.5.5消防安全5.1整體操作流程國內(nèi)植物樣本采集程序應(yīng)參照HJ628的規(guī)定進(jìn)行。若采集國家重點(diǎn)保護(hù)野生植物的樣生動(dòng)植物種國際貿(mào)易公約》CITES附錄進(jìn)行報(bào)關(guān)5.3外植體的選擇、消毒與接種7器官和目的來確定,一般葉片和花瓣面積為0.5cm2,莖尖、莖段、根、子葉、鱗莖和胚珠等其它培養(yǎng)材料的面積為0.5cm2-1.0cm2,如果是胚胎培養(yǎng)或脫毒消毒前先對植物組織進(jìn)行修整,去掉不需要的部分。然后將外植體流水下沖洗30min。消毒時(shí)在超凈工作臺上操作,75%酒精表面消毒10-30s,無菌水洗消毒的最佳效果應(yīng)以最大限度地殺死材料上的微生物,而又對材料的損5.3.3接種每份種質(zhì)保存10瓶以上,每瓶1-10個(gè)溫度25℃±2℃,相對濕度適宜,光照強(qiáng)度1500lx-3000lx,光照時(shí)間每天10h-16h。5.5低溫保存8將試管苗轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基上,于25±2℃溫度培養(yǎng),常溫培養(yǎng)條件,即可恢復(fù)生長。5.6保存信息登記植物離體保存庫中保存的種質(zhì)資源材料應(yīng)進(jìn)行詳細(xì)的檔案記錄,記錄的內(nèi)容應(yīng)至少包5.7包裝與運(yùn)輸組培材料的包裝運(yùn)輸應(yīng)符合DB33/T7并根據(jù)不同工作人員的職責(zé)設(shè)置相應(yīng)的權(quán)限進(jìn)行記錄和修改,確保信9A表B.1給出了植物種質(zhì)資源樣本采集信息表B.1植物種質(zhì)資源樣本采集信息單樣本類型(TypesofSamples)科學(xué)分類(Scientificclassif□平地Flatarea□山坡Hillside□山頂Hill-top□山脊Mountainridge□粘土Clay□粘壤土Clayloam□壤土Loam□沙壤土Sandyloam采集者信息(Collectorinformati科屬種溫度(℃)濕度(RH)溫度(℃)濕度(RH)Email[5]劉進(jìn)平,莫饒,吳繁花,韓平原,莫廷輝,賴杭桂.組培工廠及植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室[6]周紅玲,鄭加協(xié),陳石頭.植物種質(zhì)資[14]國家環(huán)境保護(hù)局,中國科學(xué)院植物研究所編.中國珍稀瀕危保護(hù)植物名錄[M].科學(xué)出[15]瀕危野生動(dòng)植物種國際貿(mào)易公約(CITES)./en[16]瀕危野生動(dòng)植物種國際貿(mào)易公約附錄./en[17]Normah,M.N.,Kean,C.W.,Vun,Y.L.&Mohamed-Hussein,Z.A.2011.InvitroconservationofMalaysianbiodiversity-achievements,challengesandfuturedirections.InvitroCellularandDevelopmentalBiology-Plant47:26-36.[18]ReedB.M.,F.Engelmann,E.Dulloo&J.M.M.Engeforthemanagementoffieldandinvitrogermplasmcollections.IPGRI/FAO/SGRP,Rom[19]IUCNRedListofThreatenedSpecies./Rodrigues,A.S.L.,Pilgrim,J.D.,LvalueoftheIUCNRedListforconservation.TrendsinEcology&Evolution21(2):71-76.[20]Chin,H.F.1996.StrategiesforconservaConservationofPlantGeneticResources,edsNormah,M.N.,M.K.NarimahandM.M.Clyde,KualaLumpur,Malaysia:PercetakanWatanSdnVariabilityinstorageresponsewithinacoffee(Coffeaspp.)corecol[22]Engelmann,F.1991.Invitroconservationoftropicalplantgermplasm-areview.[23]Engelmann,F.2011.Biotechnologiesforconservingbiodiversity.InvitDevelopmentalBiology-Plant47:5-16.[24]George,
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