DB23-T2488-2019-土壤硝基芳烴的測定高效液相色譜法-黑龍江省

ICS13.080Z18DB23地方標(biāo)準(zhǔn)DB23/T2488—2019土壤硝基芳烴的測定高效液相色譜法（報(bào)批稿）黑龍江省市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB23/T2488—2019目??次前言.....................................................................................................................................................................II1范圍.................................................................................................................................................................12規(guī)范性引用文件.............................................................................................................................................13方法原理.........................................................................................................................................................14試劑和材料.....................................................................................................................................................15儀器和設(shè)備.....................................................................................................................................................26樣品.................................................................................................................................................................27分析步驟.........................................................................................................................................................3結(jié)果計(jì)算和表示.............................................................................................................................................3精密度和準(zhǔn)確度.............................................................................................................................................4質(zhì)量保證與質(zhì)量控制...................................................................................................................................5891011注意事項(xiàng).......................................................................................................................................................5附錄A（規(guī)范性附錄）方法的檢出限和測定下限.......................................................................................6附錄B（資料性附錄）目標(biāo)物的基本信息和保留時(shí)間...............................................................................7附錄C（資料性附錄）方法的精密度和準(zhǔn)確度...........................................................................................8IDB23/T2488—2019前??言本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)GB/T1.1-2009給出的規(guī)則編寫。本標(biāo)準(zhǔn)由黑龍江省生態(tài)環(huán)境廳提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)參與起草單位：哈爾濱市環(huán)境監(jiān)測中心站，黑龍江科瑞檢測技術(shù)有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)起草人:王偉華、陳瑩、王娜、劉蕊、張萬峰、白昕、騰世長、陳姝蓉、張京、孟冰冰、張景欣、王雅輝、屈紅艷、張立彬。IIDB23/T2488—2019土壤硝基芳烴的測定高效液相色譜法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測定土壤中硝基芳烴的高效液相色譜法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于土壤中硝基苯（NB）、1,3-二硝基苯（1,3-DNB）、1,3,5三硝基苯（1,3,5-TNB）、鄰硝基甲苯（2-NT）、間硝基甲苯（3-NT）、對硝基甲苯（4-NT）、2,4-二硝基甲苯（2,4-DNT）、2,6-二硝基甲苯（2,6-DNT）、4-氨基-2,6-二硝基甲苯（4-Am-DNT）、2-氨基-4,6-二硝基甲苯（2-Am-DNT）等10種硝基芳烴的測定。本標(biāo)準(zhǔn)中，當(dāng)取樣量為20.0g時(shí)，10種硝基芳烴的方法檢出限為0.01mg/kg～0.06mg/kg，測定下限為0.04mg/kg～0.24mg/kg，具體結(jié)果詳見附錄A。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。HJ/T166土壤環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范HJ613土壤干物質(zhì)和水分的測定重量法土壤中的硝基芳烴用乙腈或甲醇萃取后，取上清液用高效液相色譜分離，紫外檢測器檢測，根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。4.3硝基芳烴標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ=1000mg/L。使用有證標(biāo)準(zhǔn)溶液（硝基苯、1,3-二硝基苯、1,3,5三硝基苯、鄰硝基甲苯、間硝基甲苯、對硝基甲苯、2,4-二硝基甲苯、2,6-二硝基甲苯、4-氨基-2,6-二硝基甲苯、2-氨基-4,6-二硝基甲苯），于-10℃下冷藏、避光保存，或參照標(biāo)準(zhǔn)溶液證書進(jìn)行保存。使用時(shí)應(yīng)恢復(fù)至室溫并搖勻。4.4硝基芳烴標(biāo)準(zhǔn)使用液：ρ=10.0mg/L。4.5石英砂：300～830μm（50～20目）。1DB23/T2488—2019在馬弗爐中400℃下灼燒4h，置于干燥器中冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至磨口玻璃瓶中保存。5儀器和設(shè)備5.1高效液相色譜儀：配套紫外檢測器，具有梯度洗脫功能。5.2色譜柱：填料為ODS（十八烷基硅烷鍵合硅膠），填料粒徑5μm，柱長250mm，內(nèi)徑4.6mm的反相色譜柱或其它性能相近的色譜柱。5.3采樣瓶：具聚四氟乙烯內(nèi)襯蓋的250ml螺紋棕色玻璃瓶。5.4提取瓶：100ml，具聚四氟乙烯-硅膠襯墊螺旋蓋的玻璃瓶。5.5水平振蕩器：振蕩頻率50～250次/min左右。5.6超聲波提取器：35Hz，有效高頻功率至少為140W，水浴溫度能控制在30℃±5℃及50℃±5℃。5.75.8玻璃注射器：可裝0.45μm濾膜。離心機(jī)：轉(zhuǎn)速1000～3000r/min。5.9便攜式冷藏箱：控溫4℃以下。5.10天平：感量為0.01g。5.11一般實(shí)驗(yàn)室常用儀器和設(shè)備。按照HJ/T166的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行土壤樣品的采集和保存。用鐵鏟或不銹鋼勺將樣品盡快采集至采樣瓶（5.3）中，并填滿?？焖偾宄魳悠菲柯菁y及外表面上黏附的樣品，密封樣品瓶，避光保存。如不能及時(shí)分析，于4℃以下冷藏，避光保存，在5d內(nèi)完成提取。除去樣品中的枝棒、葉片、石子等異物，稱取20g（準(zhǔn)確至0.1g）均質(zhì)化土壤鮮樣于提取瓶（5.4）中，加入40ml乙腈（4.1）或甲醇（4.2）后，蓋上蓋子，密封。經(jīng)短暫手搖后，將提取瓶置于水平振蕩器（5.5）上，振蕩18h后，靜止沉降30min，取上層清液待測。如有必要，上層清液可經(jīng)0.45μm濾膜（5.7）過濾或離心機(jī)（5.8）離心后待測。也可以采用超聲波（5.6）提取，在30℃±5℃下超聲提取18h，或在50℃±5℃下超聲提取5h，靜止沉降30min，取上層清液待測。在提取過程中，水浴的水位應(yīng)至少比提取瓶中的溶劑位高出1cm。提取后的目標(biāo)物如不能及時(shí)分析，可于4℃條件下暗處冷藏存放，保存7d。6.4干物質(zhì)含量的測定2DB23/T2488—2019按照HJ613測定土壤樣品干物質(zhì)含量。7分析步驟7.1色譜參考條件進(jìn)樣量：10μl；柱溫：30℃；流速：1.0ml/min；流動相A：甲醇；流動相B：水；檢測波長：254nm。梯度洗脫程序見表1。表1梯度洗脫程序時(shí)間（min）A%58B%4252400030353840454860100584242587.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立分別量取5μl、10μl、20μl、50μl、100μl的硝基芳烴標(biāo)準(zhǔn)使用液（4.4），用乙腈（4.1）或甲醇（4.2）稀釋，制備5個濃度點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)系列，硝基芳烴的質(zhì)量濃度分別為0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.20μg/ml、0.50μg/ml和1.00μg/ml（此為參考濃度），由低濃度到高濃度依次對標(biāo)準(zhǔn)系列溶液進(jìn)樣，以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中目標(biāo)物組分濃度為橫坐標(biāo)，以其對應(yīng)的峰面積（峰高）為縱坐標(biāo)，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。在推薦的儀器條件下，10種硝基芳烴目標(biāo)物在C18柱上的色譜圖保留時(shí)間見附錄B。按照與標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立（7.2）相同的步驟進(jìn)行試樣（6.2）的測定。根據(jù)樣品中目標(biāo)物與標(biāo)準(zhǔn)系列中目標(biāo)物的保留時(shí)間進(jìn)行定性，可采用標(biāo)準(zhǔn)添加法、不同波長下的吸收比或掃描紫外吸收光譜等方法輔助定性。土壤樣品中硝基芳烴的含量（mg/kg），按照公式（1）進(jìn)行計(jì)算。................................................................................(1)3DB23/T2488—2019式中：i—樣品中組分i的含量，mg/kg；i—標(biāo)準(zhǔn)曲線中所得組分i的濃度，μg/ml；v—提取液體積（乙腈或甲醇體積+樣品含水量），ml；m—樣品量（濕重），g；wdm—土壤樣品干物質(zhì)含量，%。wdm和w土壤樣品中干物質(zhì)含量2，分別按照式（2）和（3）進(jìn)行計(jì)算：(m2m0)100........................................................................(2)wdm(mm)10(m1m2)100.......................................................................(3)w2(mm)20式中：wdm—土壤樣品中的干物質(zhì)含量，%；w2—土壤樣品中的含水量，%；m0—帶蓋容器的質(zhì)量，g；m1—帶蓋容器及新鮮土壤試樣的總質(zhì)量，g；m2—帶蓋容器及烘干土壤的總質(zhì)量，g。測定結(jié)果精確至0.1%。測定結(jié)果小數(shù)位數(shù)與方法檢出限保持一致，最多保留三位有效數(shù)字。9.1六家實(shí)驗(yàn)室的精密度統(tǒng)計(jì)結(jié)果對濃度為0.50mg/kg、40.0mg/kg的實(shí)際土壤加標(biāo)樣品進(jìn)行6次平行測定，目標(biāo)物的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為：2.6%～10%，2.2%～10%；實(shí)驗(yàn)室間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為：7.7%～16%，5.1%～16%；重復(fù)性限范圍分別為：0.09mg/kg～0.12mg/kg，5.45mg/kg～8.12mg/kg；再現(xiàn)性限范圍分別為：0.12mg/kg～0.22mg/kg，7.93mg/kg～17.4mg/kg，具體結(jié)果詳見附錄C。9.2六家實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)確度統(tǒng)計(jì)結(jié)果對濃度為0.50mg/kg、40.0mg/kg的實(shí)際土壤加標(biāo)樣品進(jìn)行6次平行測定，目標(biāo)物的加標(biāo)回收率分別為：74.0%～115%，74.2%～115%，具體結(jié)果詳見附錄C。4DB23/T2488—201910質(zhì)量保證與質(zhì)量控制空白測定10.1本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每20個樣品或每批次（少于20個樣品/批）應(yīng)至少測定一個實(shí)驗(yàn)室空白樣品，目標(biāo)物濃度應(yīng)小于方法檢出限。如果目標(biāo)物有檢出，需查找原因。10.2校準(zhǔn)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)曲線至少需5個濃度點(diǎn)，校準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)應(yīng)大于等于0.995，每20個樣品或每批次（少于20個樣品/批）分析1次標(biāo)準(zhǔn)曲線中間點(diǎn)，其測定結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)曲線相應(yīng)點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)值的相對誤差不超過20%，否則應(yīng)查找原因或重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。10.3平行樣測定本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每20個樣品或每批次（少于20個樣品/批）至少分析一個平行樣，單次平行樣測定結(jié)果相對偏差應(yīng)小于等于30%。10.4加標(biāo)樣測定每20個樣品或每批次（少于20個樣品/批）至少分析1個基體加標(biāo)樣，樣品中目標(biāo)物加標(biāo)回收率應(yīng)在60%～120%之間。11注意事項(xiàng)11.2為了防止采樣工具污染，在使用前要用甲醇、純凈水充分洗凈。在采集其它樣品時(shí)，要注意更換采樣工具和清洗采樣工具，以防止交叉污染。在分析過程中必要的器具、材料、藥品等應(yīng)事先分析測定有無干擾目標(biāo)物測定的物質(zhì)。器具、材料可采用甲醇清洗，盡可能除去干擾。5DB23/T2488—2019AA附錄A（規(guī)范性附錄）方法的檢出限和測定下限A.1目標(biāo)物的檢出限和測定下限當(dāng)土壤取樣量為20.0g時(shí)，10種目標(biāo)物的方法檢出限和測定下限見表A.1。表A.1方法的檢出限和測定下限序號1目標(biāo)物中文名稱檢出限（mg/kg）測定下限（mg/kg）硝基苯0.010.020.020.060.050.060.020.020.020.020.040.080.080.240.200.240.080.080.080.0821,3-二硝基苯31,3,5-三硝基苯2-硝基甲苯453-硝基甲苯64-硝基甲苯72,4-二硝基甲苯2,6-二硝基甲苯4-氨基-2,6-二硝基甲苯2-氨基-4,6-二硝基甲苯86DB23/T2488—2019BB附錄B（資料性附錄）目標(biāo)物的基本信息和保留時(shí)間B.1目標(biāo)物的基本信息和保留時(shí)間目標(biāo)物的CAS號、英文名稱、簡稱及保留時(shí)間見表B.1。表B.1目標(biāo)物的CAS號、英文名稱、簡稱及保留時(shí)間中文名稱1,3,5-三硝基苯1,3-二硝基苯CAS號99-35-4英文名稱1,3,5-Trinitrobenzene1,3-Dinitrobenzene4-Amino-2,6-dinitrotoluene2-Amino-4,6-dinitrotolueneNitrobenzene簡稱1,3,5-TNB1,3-DNB4-Am-DNT2-Am-DNTNB保留時(shí)間（min）6.43999-65-08.6414-氨基-2,6-二硝基甲苯2-氨基-4,6-二硝基甲苯硝基苯19406-51-035572-78-298-95-39.1719.59510.73911.5062,6-二硝基甲苯2,4-二硝基甲苯2-硝基甲苯606-20-2121-14-288-72-22,6-Dinitrotoluene2,4-Dinitrotoluene2-Nitrotoluene2,6-DNT2,4-DNT2-NT11.75614.13215.79417.0927DB23/T2488—2019CC附錄C（資料性附錄）方法的精密度和準(zhǔn)確度C.1方法的精密度和準(zhǔn)確度方法的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差、實(shí)驗(yàn)室間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差、重復(fù)性限、再現(xiàn)性限和加標(biāo)回收率等精密度和準(zhǔn)確度指標(biāo)見表C.1。表C.1實(shí)際土壤樣品加標(biāo)精密度和準(zhǔn)確度匯總表加標(biāo)回收率加標(biāo)濃度