DNA的粗提取與鑒定課件-高二下學期生物人教版選擇性必修3

刑偵破案DNA的應用基因組測序插入人胰島素基因的大腸桿菌基因工程親子鑒定那么，DNA能否像光合色素一樣可以被提取呢？如果成功提取，我們又如何去鑒定呢？第2節(jié)

DNA的粗提取與鑒定第3章基因工程010203關注基因工程的誕生和發(fā)展歷程，參與討論基礎理論和技術發(fā)展如何催生基因工程。（社會責任）探究DNA的物理與化學性質，進行DNA分子的提取與鑒定。（科學思維）學習目標運用結構與功能觀說明基因工程的各種工具的特點。（生命觀念）任務一粗提取DNA問題1：粗提取DNA可以選擇那些材料？為什么？問題2：DNA主要分布在哪里？如何從中提取DNA，有哪些困難？1628331238（一）選材原則：DNA含量高、材料易得、便于提取、新鮮的材料注意事項：（哺乳動物的成熟紅細胞）無細胞核和線粒體，幾乎不含DNA，不適合；雞血中紅細胞有核DNA。任務一粗提取DNA問題2：DNA主要分布在哪里？如何從中提取DNA，有哪些困難？細胞核核膜細胞質細胞膜細胞壁思考1：如何保護DNA?DNA酶Mg2+EDTA任務一粗提取DNA問題2：DNA主要分布在哪里？如何從中提取DNA，有哪些困難？細胞核核膜細胞質細胞膜細胞壁思考1：如何保護DNA?DNA酶Mg2+EDTA抑制思考2：DNA如何穿過核膜、細胞膜?膜成分：主要是脂質和蛋白質SDS：使蛋白質變性，瓦解生物膜任務一粗提取DNA問題2：DNA主要分布在哪里？如何從中提取DNA，有哪些困難？細胞核核膜細胞質細胞膜細胞壁思考3：DNA如何穿過細胞壁?成分：主要是纖維素和果膠機械外力破碎------研磨細胞外思考4：在細胞外要提供怎樣的環(huán)境?Tris-HCl緩沖液：維持PH環(huán)境，穩(wěn)定DNA任務一粗提取DNA思考5：在研缽中，可能存在哪些物質?細胞壁碎片、生物膜、DNA、蛋白質等其他細胞內容物思考6：如何將DNA與其他物質分離開?過濾高濃度NaCl溶液：溶解DNA，鹽析蛋白質任務一粗提取DNA（二）試劑及作用：試劑作用SDSEDTATris-HCl緩沖液NaCl溶液蛋白質變性，瓦解生物膜抑制DNA酶維持PH環(huán)境，穩(wěn)定DNA溶解DNA，鹽析蛋白質思考6：過濾可以分離不可溶性雜志，那么細胞中可溶性物質又該如何與DNA分離呢?蛋白質等溶解在酒精中，DNA不溶于酒精而析出；研磨液任務一粗提取DNA取材研磨過

濾DNA析出（三）實驗步驟：任務一粗提取DNA（四）注意事項：1、研磨不充分，會使DNA分子不能從細胞核中釋放出來，從而使研磨液中

的DNA含量較低，影響最終提取的DNA量。2、過濾不能否用濾紙代替紗布，因為DNA會被吸附到濾紙上而大量損失，影響最終提取的DNA量。3、4℃冰箱低溫放置，低溫抑制DNA水解酶的活性，進而抑制DNA降解4、離心轉速過低（過高）、時間不足（太長）：高速離心或長時間離心會導致DNA斷裂，使DNA也沉淀，低速離心或短時間離心使細胞碎片、多糖等未徹底去除。5、冷酒精作用①可抑制DNA水解酶的活性，進而抑制DNA降解；②抑制分子運動，使DNA易形成沉淀析出；③低溫有利于增加DNA分子的柔韌性，減少其斷裂6、攪拌時應輕緩、并沿一個方向目的：減少DNA斷裂，以便獲得較完整的DNA分子任務二鑒定DNA思考1：如何檢測白色絲狀物中含有DNA?二苯胺試劑設置對照：實驗組：加入白色絮狀物對照組：不加入白色絮狀物需要現用現配有毒，需通風任務二鑒定DNA實驗步驟：溶解DNA鑒定任務二鑒定DNA實驗結果及結論1號試管2號試管加入2mol/LNaCl溶液絲狀物/沉淀物（DNA）用玻璃棒攪拌加入二苯胺試劑沸水浴冷卻后，觀察現象變藍不加入加入5mL5mL4mL5min絲狀物溶解5min4mL無不變藍白色絲狀物中含有DNA二苯胺試劑鑒定呈現藍色說明實驗基本成功；如果不呈現藍色，可能的原因有所提取的DNA含量低，或者在實驗操作過程中出現了失誤等。1.提取出絲狀物或沉淀物一定是白色的嗎？用二苯胺試劑鑒定的結果如何？觀察提取的DNA的顏色，如果不是白色絲狀物，說明DNA中的雜質較多。

本實驗粗提取的DNA可能仍然含有核蛋白、多糖等雜質。2.你能分析出粗提取的DNA中可能含有哪些雜質嗎？3.本實驗的檢測結果藍色較淺的原因可能是什么？①材料中的核物質沒有充分釋放出來，如研磨不充分。②加入酒精后搖動或攪拌時過猛，DNA被破壞。③二苯胺最好現用現配，二苯胺易被空氣氧化，影響鑒定效果。結果分析與評價任務二鑒定DNA（1）DNA純度：看提取物顏色（2）DNA的量：看與二苯胺反應顏色的深淺任務四拓展與延伸如果選用雞血細胞該進行實驗呢？D沸水浴加熱5min以上，冷卻后可觀察到較為明顯的現象

隨堂檢測例2、2024·江蘇揚州高二下期中)某實驗小組進行了“DNA的粗提取與鑒定”實驗，實驗流程如圖所示。下列說法正確的是(

)A.溶液甲是NaCl溶液，加入它的目的是溶解DNAB.溶液乙在使用時需用50～60℃水浴加熱5minC.實驗也可用雞血、豬血等動物組織作為材料D.粗提取的DNA中含有RNA、蛋白質等雜質D解析：DNA不溶于酒精，但細胞中的某些蛋白質溶于酒精，可用酒精將DNA與蛋白質等初步分離，加入溶液甲后獲得白色絲狀物主要為DNA，故溶液甲為體積