生物制藥工藝學(xué)

1、.,生 物 制 藥 工 藝 學(xué),生 物 制 藥 工 藝 學(xué) 主講教師：吳梧桐教授,.,生物制藥工藝學(xué)主要參考書,1吳梧桐 主編 生物制藥工藝學(xué)第二版，北京，中國(guó)醫(yī)藥科技出 版社，2006. 2王志軍 主編生物技術(shù)藥物研究開發(fā)和質(zhì)量控制，北京，科學(xué)出版社，2002. 3吳劍波 微生物制藥，北京，化學(xué)出版社，2002 . 雜志期刊： 1. 中國(guó)抗生素雜志. 2. 藥物生物技術(shù). 3. 中國(guó)生物工程學(xué)報(bào). 4. 中國(guó)生化藥物雜志. 5. 中國(guó)天然藥物. 6. 中國(guó)醫(yī)藥工業(yè).,.,生物制藥工藝學(xué) Biopharmaceutical process,一、學(xué)習(xí)本課程的目的： 1、培養(yǎng)自己掌握扎實(shí)的專業(yè)知識(shí)

2、，具有創(chuàng)新、創(chuàng)業(yè)能力的高素質(zhì)人才，按聯(lián)合國(guó)科教文組織對(duì)世界大學(xué)生的要求： （1）Learn to know. (2) Learn to do. (3) Learn to be. (4) Learn to together. 2、培養(yǎng)自己成為藥物研究、生產(chǎn)、流通、應(yīng)用與管理的專門人才。為人民的防病、治病、保健、康復(fù)提供療效好，副作用少，價(jià)格便宜，使用方便的生物藥物。,.,二、本課程的性質(zhì)： 是生物技術(shù)、生物工程、海洋藥學(xué)、生化制藥、微 生物制藥、生物技術(shù)制藥的專業(yè)必修課，也是藥學(xué)專 業(yè)的重要選修課。 三、 本課程研究?jī)?nèi)容 是從事各類生物藥物的研究，生產(chǎn)和制劑工藝過程 的一門綜合性應(yīng)用技術(shù)科學(xué)。

3、（1）生化與微生物藥物制造工藝。 （2）生物技術(shù)藥物與生物制品制造工藝。 （3）其它生物醫(yī)藥產(chǎn)品（康復(fù)保健品）制造工藝。 四、學(xué)習(xí)任務(wù)與要求： （1）掌握制造工藝基本原理及相關(guān)基礎(chǔ)理論。 （2）熟練制造技術(shù)過程及制劑技術(shù)。 （3）熟悉生物藥物的來源、結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及臨床用途。,.,第一章 生物藥物概述 Introduction of Biopharmaceutics,1藥物 Medicine(remedy) 藥物是用于預(yù)防、治療或診斷疾病與調(diào)節(jié)機(jī)體生理功能、促進(jìn)康復(fù)促健的物質(zhì)，有4大類： （1）預(yù)防藥物：如疫苗、卡介苗、艾滋病疫苗、SARS疫苗、腫瘤疫苗。 （2）治療藥物：如抗生素、INS、尿激酶

4、。 （3）診斷藥物：如肝腎功能檢查試劑盒、免疫診斷試劑盒。 （4）康復(fù)保健藥物：如維生素、氨基酸、葉酸。,.,2藥品 Drug 直接用于臨床的藥物制劑產(chǎn)品，是特殊商品。 藥品特點(diǎn)：有固定組成，明確規(guī)定有適應(yīng)癥、用法與用量，療程，并說明可能存在的毒副反應(yīng)。還規(guī)定使用有效期。 藥品有3大類：（1）化學(xué)藥品，（2）生物藥品，（3）中藥（藥材，飲片，中成藥）。,.,生物藥物 Biopharmaceutics,是以生物材料（生物體、生物組織或其成分：組織、細(xì)胞、細(xì)胞器、細(xì)胞成分、代謝物、排泄物）為原料，綜合應(yīng)用生物學(xué)、物理化學(xué)與現(xiàn)代藥學(xué)的原理與方法加工制成的藥物。通常有5類： （1）生化藥物 Bioch

5、emical medicine （2）微生物藥物 Microbial medicine （3）海洋藥物 Marine medicine （4）生物制品 Biologics(biologicals) （5）生物醫(yī)藥產(chǎn)品 Biological medicinal products,.,隨著生物技術(shù)藥物的快速發(fā)展，現(xiàn)代生物藥物已形成4大類： （1）重組DNA藥物（包括基因工程和蛋白質(zhì)工程藥物） （2）基因藥物genetic medicine（核算類藥物，以遺傳物質(zhì)DNA、RNA為治療物質(zhì)基礎(chǔ)的藥物），如核算疫苗、反義藥物。 （3）天然生物藥物 （4）合成或半合成藥物。,.,第一節(jié) 生物藥物的研究與發(fā)

6、展前景,一、生物藥物研究發(fā)展現(xiàn)狀 生物藥物的發(fā)展已走過傳統(tǒng)生物制藥技術(shù)和工業(yè)化生物制藥時(shí)代，從1982年10月rhIns上市，正式步入現(xiàn)代生物制藥階段。 1、世界現(xiàn)狀：已上市200多種生物技術(shù)藥物，已進(jìn)入其臨床400種；其中200種進(jìn)入FDA審批，還有700多種進(jìn)入-期臨床，在各個(gè)不同臨床前研究的有2600多種。,.,二、生物藥物的發(fā)展與展望,1生物技術(shù)藥物研究已進(jìn)入蛋白質(zhì)工程藥物時(shí)代 第一代重組藥物時(shí)代 ：一級(jí)結(jié)構(gòu)與功能和天然活性蛋白質(zhì)完全一樣； 第二代重組藥物時(shí)代：對(duì)天然產(chǎn)物表達(dá)物進(jìn)行簡(jiǎn)單修飾，如PEG化或糖基化； 第三代重組藥物時(shí)代：蛋白質(zhì)工程藥物，在DNA水平上，合理設(shè)計(jì)、改造、創(chuàng)制新

7、型治療蛋白。目的： （1）提高活性； （2）減少或消除毒副作用； （3）提高體內(nèi)外穩(wěn)定性； （4）產(chǎn)生新的功能特性。 如：快速Ins，B9-SerB9-Asp, B27-Thr B27-Glu 長(zhǎng)效Ins, B21-AsnB21-Gly, B-C末端加入2個(gè)Arg PI由pH5.4pH6.8,.,2. 中國(guó)現(xiàn)狀： （1）生產(chǎn)生化藥物100多種，抗生素近100種； （2）已批準(zhǔn)生物技術(shù)藥物30多種：如INF-1b,INF-2a,INF2b,INF-,IL-2,IL2-ser125,IL-11,G25F,GM-CSF,-SK，GH，EPO，TPO，EGF，EGF衍生物，bFGF，Ins，TNF衍生

8、物，腦鈉素，心鈉素，抗IL-8單抗乳膏劑，胸苷激酶基因工程細(xì)胞制劑，CHO乙肝疫苗，痢疾疫苗，WuT3單抗（抗CD3CMAb，抗腎移植排斥），131I-chTNT人鼠嵌合型單抗（治肺癌），P53腺病毒抗癌注射劑，葡激酶等，已進(jìn)入臨床的有SARS疫苗，禽流感疫苗，艾滋病疫苗。 中國(guó)生物制藥企業(yè)近代生物制藥企業(yè)通過GMP的廠家已近200家，年產(chǎn)值400多億元，僅占全國(guó)醫(yī)藥產(chǎn)值7.5%發(fā)展空間可觀（美國(guó)400多億美元/年），已開始進(jìn)入自主創(chuàng)新階段。如：（1）-bFGF(全球首家上市)； （2）思凱通（注射SK，1997年上市）； （3）注射用重組葡激酶（2003年上市）； （4）今又生Gendici

9、ne（P53腺病毒注射劑）； （5）TNF衍生物,.,2. 哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物所占比重快速增加 2000年已批準(zhǔn)創(chuàng)新生物技術(shù)藥物：酵母表達(dá)產(chǎn)品2種，E.coli表達(dá)產(chǎn)品4種，分子量均在3.5KDa6KDa,表示它表達(dá)多肽有優(yōu)勢(shì)，而通過動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)22種（包括抗體、酶、凝血因子）如：TNKase(t-pA突變體)；（58KDa）；AlsuraZyme（laromidase）(58KDa治療粘多糖病)Fabrazyme （Algasidasebeta,100KDa,治療Fabrys病） 3. 治療性抗體發(fā)展迅猛 FDA已批準(zhǔn)17種治療性抗體，在抗腫瘤、治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，防止感染、抗血小板凝集

10、等方面療效突出。在369種進(jìn)入臨床試驗(yàn)的生物技術(shù)藥物中有75種是抗體類產(chǎn)品，預(yù)計(jì)2008年會(huì)有17種上市。如抗TNF嵌合抗體，TNF-R-Fc融合蛋白。 抗體人源化分為 （1）嵌合抗體：用人源抗體恒定區(qū)替換鼠源抗體恒定區(qū)，保留抗體可變區(qū)。 (2)人源化抗體:可變區(qū)中僅CDR（輕鏈可變區(qū)）為鼠源，其FR及恒定區(qū)均來自人源。,.,4、干涉RNA（RNAi）RNA interference，是細(xì)胞內(nèi)外源性或內(nèi)源性雙鏈RNA，可引起與其同源的mRNA特異性降低，抑制基因表達(dá)，是抗病毒、抗腫瘤治療劑的重要設(shè)計(jì)方向。 5、基因治療劑：DNA疫苗與基因藥物發(fā)展迅速，將功能基因與表達(dá)載體重組，導(dǎo)入人體細(xì)胞，使

11、其在體內(nèi)表達(dá)活性蛋白，產(chǎn)生免疫或治療作用。已研究成功乳腺癌DNA疫苗（可能對(duì)病毒性腫瘤均可獲得成功），還有黑色瘤基因治療也取得突破（使病人晚期腫瘤消失），將病人的T-cell分離出來，用腫瘤抗原受體基因改造T-cell，再注入人體，可以對(duì)黑色素瘤產(chǎn)生有效清除作用。,.,第二節(jié) 生物藥物的性質(zhì)與類別,一、生物藥物的特性 （Characterization of Biopharmaceutics） （一）生物學(xué)特性： 1、組成、結(jié)構(gòu)與天然活性物質(zhì)一致，是生物進(jìn)化與自然選擇 的結(jié)果。 2、具有調(diào)節(jié)、控制生物功能，戰(zhàn)勝疾病的物質(zhì)基礎(chǔ)。 3、對(duì)人體進(jìn)行補(bǔ)充、調(diào)整、增強(qiáng)、抑制，替換或糾正代謝失調(diào)更為合理和

12、有效。 4、活性強(qiáng)，毒副作用一般較少，針對(duì)性強(qiáng)，療效確切，還有營(yíng)養(yǎng)作用。 5、是創(chuàng)新藥物的優(yōu)良先導(dǎo)物，通過分子設(shè)計(jì)可以研制新型有效藥物，如從抑長(zhǎng)素研制環(huán)己肽（環(huán)6肽）。 28肽 環(huán)6肽 Pro-Phe-D-Trp Pe-Thr-Lys,.,(二)、化學(xué)特性： （1）含量低、雜質(zhì)多、工藝復(fù)雜、收率低、技術(shù)要求高； （2）組成結(jié)構(gòu)復(fù)雜，具嚴(yán)格空間結(jié)構(gòu)，才有生物活性。對(duì)多種物理、化學(xué)、生物學(xué)因素不穩(wěn)定，故研究時(shí)要執(zhí)行GLP規(guī)范，生產(chǎn)時(shí)要求GMP管理。 （3）活性高，有效劑量小，對(duì)制品的有效性，安全性要嚴(yán)格要求（包括標(biāo)準(zhǔn)品的制訂）。,.,二、生物藥物的類別：共分4大類 （一）天然生物藥物 1微生物藥物

13、 microbil medicine 由微生物產(chǎn)生的生理活性物質(zhì)：包括初級(jí)及次級(jí)代謝產(chǎn)物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。 （1）抗生素：抗菌、抗腫瘤抗生素，如青霉素，鏈霉素，紅霉素，四環(huán)素，多粘菌素，兩性霉素B，氯霉素，利福霉素，磷霉素等。 （2）酶抑制劑：如克拉維酸，-內(nèi)酰胺酶抑制劑(青霉素增效劑) （3）免疫抑制劑:如環(huán)孢霉素A,.,2生化藥物（含海洋藥物）：Bio chemical medicine 用生物化學(xué)的原理與技術(shù)從動(dòng)植物、海洋生物和微生物制取的生化活性物質(zhì)。 （1）氨基酸類藥物 amino Acid 如胱AA、色氨酸、精氨酸等。 （2）多肽類藥物 Poly peptide如縮宮素、加壓素等。 （3

14、）蛋白質(zhì)類藥物 如人血白蛋白，r-球蛋白 （4）酶類藥物 如胃蛋白酶，尿激酶 （5）輔酶類藥物 如CoQ10,CoASH （6）核苷酸與核酸類藥物 如RNA注射液：PolyI:C （7）多糖類藥物（polysaccharide）:如肝素、玻璃酸。 （8）脂類藥物：如去氫膽酸，膽紅素、PGE1、PGE2。,.,（二）生物技術(shù)藥物（新生物制品）Biotech-drugs 1. DNA重組藥物（DNA recombinant medicine）基因工程與蛋白質(zhì)工程藥物 （1）細(xì)胞因子干擾素類藥物:IFN,IFN-,IFN （2）細(xì)胞因子白介素類和腫瘤壞死因子:IL-2,IL-6,IL-11;TNF-

15、,TNF -R （3）造血系統(tǒng)生長(zhǎng)因子類： G-CSF,GM-CSF,EPO,TPO,SCF （4）重組蛋白和多肽類激素藥物：Ins，rHGH,FSH,LH,HCG （5）生長(zhǎng)因子類藥物:EGF，PDGE，TGF，NGF （6）心血管病治療劑與酶制劑:水蛭素，t-PA，尿激酶，門冬酰胺酶 （7）重組蛋白疫苗與基因工程治療性抗體：乙肝疫苗、丙肝疫苗、對(duì)淋巴瘤CD3單抗（OKT3）抗排斥。HER-2（表皮生長(zhǎng)因子受體抗體），抗乳腺癌轉(zhuǎn)移（人源化抗體）,.,2. 基因藥物（核酸類藥物） (1)核酸疫苗：將目的基因與表達(dá)載體構(gòu)建成重組體導(dǎo)入人體，使其表達(dá)免疫蛋白，呈遞免疫應(yīng)答，如乳腺癌疫苗。 (2)反

16、義藥物ISIS2900，用于治療巨細(xì)胞病毒性視網(wǎng)膜炎。 （三）合成或半合成生物藥物： 如催產(chǎn)素，降鈣素，PEG-腺苷脫氨酶，PEG-門冬酰胺酶,.,第二章 生物制藥工藝技術(shù)基礎(chǔ) Basis of biopharmaceutical technology 第一節(jié) 微生物制藥工藝技術(shù)基礎(chǔ),一、菌種的選育與保芷 1自然選育 是一種純種選育方法，依據(jù)自發(fā)突變?cè)?，通過不斷分離篩選，除去衰變型菌落，選擇高產(chǎn)菌，達(dá)到強(qiáng)化、復(fù)壯、穩(wěn)定生產(chǎn)目的。 操作：?jiǎn)捂咦討腋∫悍蛛x及單菌落培養(yǎng)篩選 純培養(yǎng)：從一個(gè)單細(xì)胞微生物取得的后代培養(yǎng)稱純培養(yǎng) 方法：（1）平板劃線法 （2）稀釋平板法,.,2誘變育種 （1）誘變處理：

17、化學(xué)誘變；物理誘變 （2）代謝調(diào)節(jié)選育 （3）基因重組技術(shù)改變代謝途徑 （4）原生質(zhì)體融合 突變株篩選一般進(jìn)程如圖所示 第三第四輪同第二輪,.,3菌種保存,（1）保存目的：防止退化 （2）菌種退化檢查方法 （3）菌種退化防止方法 （4）菌種保芷方法：斜面低溫保存 4，濕度105倍) 已有高溫DNA聚合酶，故操作已自動(dòng)化（PCR儀） （3）化學(xué)合成法 在已知DNA序列或多肽的一般結(jié)構(gòu)時(shí)，如鏈長(zhǎng)在 60bp100bp可用化學(xué)合成法直接合成DNA。,.,2DNA重組體的構(gòu)建 將目的基因與基因載體連接，構(gòu)成重組體 基因載體（Vector）有 （1）E.coli載體 如PBR322（非表達(dá)型載體） 表達(dá)

18、型：PUC質(zhì)粒，PKK233-3，P ET系統(tǒng)：PET28a，PET32 （2）芽孢桿菌載體 如PUB110 pE194和pC194 （3）鏈霉菌載體 如PIJ101 PSG5 （4）噬菌體載體 如gt10(非表達(dá)型) gt11(表達(dá)型) *非表達(dá)型用于構(gòu)建克隆基因擴(kuò)增與鑒定， 表達(dá)型用于構(gòu)建生產(chǎn)目的蛋白的工程菌。 一般目的基因10Kb，可選用噬菌體DNA為載體。,.,cDNA與載體連接方法 同聚尾連接法 用3-脫氧核苷末端轉(zhuǎn)移酶，使cDNA與載體DNA3末端帶上互補(bǔ)同型多聚體序列： 如質(zhì)粒-poly-C（或A） cDNA-poly-G(或T) 兩者退火后，經(jīng)T4DNA連接酶封口，構(gòu)建重組體。

19、,3脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶 cDNA cDNA-polyA(C ) dNTP 載體DNA-polyT(G) 人工接頭連接法 用T4DNA連接酶在平端上連接上人工接頭，再用工具酶切開成粘性末端。 目的基因 + cDNA 接頭 工具酶（內(nèi)限性內(nèi)切酶）,.,3重組體的表達(dá)系統(tǒng) 表達(dá)方式常用有胞漿內(nèi)表達(dá) 分泌表達(dá) 周質(zhì)表達(dá) （1）原核表達(dá)系統(tǒng) E.coli；芽孢桿菌Bacillus；鏈霉菌Streptomyces E.coli表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)：易大量生產(chǎn)，成本低，周期短，相對(duì)較安全，已公認(rèn)可供大量生產(chǎn)。 缺點(diǎn)：多為胞內(nèi)表達(dá)、純化困難，易生成包含體，復(fù)性困難，產(chǎn)物多為AuG(Met)起始密碼， 有內(nèi)毒素污染的可能

20、。,.,（2）真核表達(dá)系統(tǒng) 1） 酵母 屬單細(xì)胞真核生物 非分泌型載體如PA815,PPIc2,分泌型PHIL-S1 優(yōu)點(diǎn)：易培養(yǎng)無毒性可分泌表達(dá)產(chǎn)物可糖基化 常用酵母表達(dá)體系釀酒酵母（Saccharomyces coeviviae） 表達(dá)，畢赤酵母（pichia psatoris） 特點(diǎn)：?jiǎn)?dòng)子為AOX1,屬乙醇氧化酶I基因,受甲醇誘導(dǎo) 易高密度發(fā)酵,達(dá)100g/L(10%) 已成功用于表達(dá)INF,乙肝表面抗原疫苗,Ins,Aibumin 2）動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)體系 A哺乳動(dòng)物細(xì)胞CHO(病毒質(zhì)粒為載體) B昆蟲細(xì)胞家蠶細(xì)胞,如生產(chǎn)INF,.,4表達(dá)與表達(dá)產(chǎn)物的純化 （1）選擇高效表達(dá)工程菌，優(yōu)化

21、發(fā)酵條件（培養(yǎng)基組成，接種量，溫度，溶氧，pH，誘導(dǎo)作用，發(fā)酵動(dòng)力學(xué)）進(jìn)行擴(kuò)大發(fā)酵. （2）分離純化要求： 技術(shù)條件要溫和 選擇性要高 收率要高 步驟要少，時(shí)間短E純度95%。,.,表達(dá)產(chǎn)物流程 *inclusion bodies 由表達(dá)產(chǎn)物重組蛋白,宿主蛋白和膜蛋白組成，以表達(dá)產(chǎn)物為主，其一級(jí)結(jié)構(gòu)正確，但空間結(jié)構(gòu)錯(cuò)誤，沒有活性，不溶于水，可低速離心收集包涵體，用變性劑SDS尿素，鹽酸胍溶解，再稀釋透析除去變性劑，使其復(fù)性。,.,為防止或減少包含體的形成常用方法： （1）降低培養(yǎng)溫度 從37降到30可顯著降低包含體形成率。 （2）以硫氧還原蛋白為載體進(jìn)行融合表達(dá)。 硫氧還原蛋白是E.coil的

22、一種同源蛋白，定位于粘附區(qū)，富含-SH,可保目的蛋白不發(fā)生分子錯(cuò)誤折疊，是一種熱穩(wěn)定蛋白，表達(dá)產(chǎn)物聚集于粘附區(qū)，通過振擾提取使產(chǎn)物進(jìn)入介質(zhì)中，再酶解就得到目的蛋白。,.,二、酶工程制藥技術(shù)基礎(chǔ) 1、什么是酶工程 （1）酶的發(fā)現(xiàn)，分離，純化與酶制劑的工業(yè)化應(yīng)用。 （2）酶與細(xì)胞的固定化技術(shù)與酶反應(yīng)器。 （3）生物酶工程：以基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)研究酶工程。 （4）酶工程技術(shù)的工業(yè)化應(yīng)用。 2、優(yōu)點(diǎn) （1）固定化穩(wěn)定性提高 （2）可重復(fù)使用，提高使用效率，降低成本 （3）提高強(qiáng)度，便于連續(xù)化，自動(dòng)化，規(guī)模化生產(chǎn) （4）便于產(chǎn)物的分離、純化,.,3、制備方法： 吸附法，包埋法、共價(jià)鍵結(jié)合法 、

23、 交聯(lián)法 （1）包埋法：將酶或細(xì)胞定位于凝膠高聚物網(wǎng)絡(luò)中，如卡拉膠，海藻膠，聚丙烯酰胺 如用卡拉膠固定L-蘋果酸合成酶生產(chǎn)L-蘋果酸，卡拉膠加水（加熱）溶解成5%（冷卻40）加入產(chǎn)酶菌體（攪拌均勻）冷卻（冷凍）切塊（1-2CM2）KCl固化裝柱 （2）共價(jià)鍵結(jié)合法：酶分子與載體分子，通過化學(xué)偶聯(lián)使酶與載體共價(jià)結(jié)合，一般純酶固定化，用此法適用批量小，附加值高的產(chǎn)品生產(chǎn)。如用CNBr活化纖維素載體再與酶蛋白共價(jià)結(jié)合。 利用固定化胰蛋白酶親和層析制備胰蛋白酶抑制劑 （3）交聯(lián)法：用雙功能試劑，將酶與載體交聯(lián)固定化 如用二醛和明膠交聯(lián)固定化前列腺素合成酶合成PGE1，PGE2,.,4 固定化酶性質(zhì)：

24、（1）通過固定化酶活一般下降，因酶的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，或酶與底物結(jié)合時(shí)有空間位阻，因此要測(cè)定固定化酶的表現(xiàn)活力，再計(jì)算總活力，并與使用半衰期的延長(zhǎng)時(shí)間，統(tǒng)計(jì)分析固定化工藝的有效性 （2）提高穩(wěn)定性，因固定化酶表現(xiàn)活力下降，但穩(wěn)定性提高，因此其穩(wěn)定性和測(cè)定對(duì)評(píng)價(jià)工藝效益十分重要，半衰期t1/2=0.693KD KD=2.303lg(ED) /(E) 為起始活力，E為時(shí)間t后殘留活力。故常常要研究E的操作，儲(chǔ)存穩(wěn)定性或?qū)H對(duì)熱的穩(wěn)定性和對(duì)蛋白酶的穩(wěn)定性。通過E一般可以提高穩(wěn)定性（包括對(duì)溫度，pH，蛋白酶，變性劑和抑制劑的耐受程度）因此有利工業(yè)化的連續(xù)化與自動(dòng)化應(yīng)用。所以在生物工藝中就得到廣泛應(yīng)用

25、。如制造r-氨基丁酸，天冬氨酸，L-蘋果酸，丙氨酸，色氨酸，苯丙氨酸等。還用于從丙烯氰生產(chǎn)丙烯酰胺,.,第四節(jié) 生物制藥工藝中試放大設(shè)計(jì) 一、中試放大目的與規(guī)模 1目的：（1）建立穩(wěn)定工藝、大批量制備足量合格產(chǎn)品，供應(yīng)臨床前與臨床研究； （2）研究工藝參數(shù)制定工藝規(guī)程和檢定規(guī)程，為正式生產(chǎn)提供工藝參數(shù)，保證能在以后生產(chǎn)中應(yīng)用。 二、規(guī)模： 中試是由小試轉(zhuǎn)入工業(yè)化生產(chǎn)的過渡性研究，是取得成功產(chǎn)業(yè)化的關(guān)鍵。,.,三、中試放大特點(diǎn) 1、改進(jìn)小試操作，穩(wěn)定工藝 2、提高收率，提高產(chǎn)品質(zhì)量 3、降低消耗，確定原輔料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn) 4、形成批量生產(chǎn)，制定制造規(guī)程和檢定規(guī)程 四、中試放大時(shí)應(yīng)具備的條件 （1）有穩(wěn)

26、定的工藝：收率，質(zhì)量可靠 （2）操作條件基本確立 （3）已建立中間品和成品分析方法 （4）生物材料已鑒定 （5）物料平衡、三廢處理已基本解決 （6）中試規(guī)模、產(chǎn)品產(chǎn)量，規(guī)模已確定 （7）安全生產(chǎn)已有方案,.,五中試放大要解決的問題 （1）原輔材料規(guī)格 （2）設(shè)備選型與材質(zhì)選用 （3）反應(yīng)條件 （4）原輔料中間品、產(chǎn)品質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)與檢定方法 （5）下游工藝優(yōu)化與穩(wěn)定制造規(guī)程的制定 六中試放大方法與總結(jié)內(nèi)容 1、放大方法（1）經(jīng)驗(yàn)放大 （2）相似放大 （3）數(shù)學(xué)模型放大 2、總結(jié)內(nèi)容： （1）確定工藝路線，優(yōu)化工藝條件，制定制造規(guī)程。 （2）制定崗位操作、投產(chǎn) （3）進(jìn)行材料衡算 （4）安全生產(chǎn)與處理 （5）原輔料及產(chǎn)品質(zhì)控方法與標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定。 （6）產(chǎn)品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)制定 （7）消耗定額，成本核算，工時(shí)，生產(chǎn)周期計(jì)算。 中試完成進(jìn)行總