中藥新制劑工藝研究(全).ppt

1、中藥新制劑工藝研究,一、新藥的含義,2002年9月15日起施行了中華人民共和國藥品管理法實施條例 對新藥作出權(quán)威界定： 新藥：是指未曾在中國境內(nèi)上市銷售的藥品。,中藥新藥研究的技術(shù)要求 國家藥品監(jiān)督管理局1999.11.12 頒布,針對中藥的特點制定了制備工藝研究的技術(shù)要求,中藥新藥制備工藝研究的技術(shù)要求,制備工藝是中藥新藥研究的一個重要環(huán)節(jié)。中藥制備工藝研究應(yīng)以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)，對方劑中藥物進行方藥分析，應(yīng)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)和方法進行劑型選擇、工藝路線設(shè)計、工藝技術(shù)條件篩選和中試等系列研究，并對研究資料進行整理和總結(jié)，使制備工藝做到科學(xué)、合理、先進、可行，使研制的新藥達到安全、有效、可控和穩(wěn)定。

2、制備工藝研究應(yīng)盡可能采用新技術(shù)、新工藝、新輔料、新設(shè)備，以提高中藥制劑研究水平。,中藥新藥制備工藝研究,劑型選擇,提取工藝研究,分離、純化、濃縮 與干燥工藝研究,制劑成型性研究,中試研究,研究資料的整理,劑型是藥物使用的必備形式。中藥劑型的選擇應(yīng)根據(jù)臨床需要、藥物性質(zhì)、用藥對象與劑量等為依據(jù)，通過文獻研究和預(yù)試驗予以確定。應(yīng)充分發(fā)揮各類劑型的特點，盡可能選用新劑型，以達到療效高、劑量小、毒副作用小，儲運、攜帶、使用方便的目的。,劑型選擇,劑型選擇,一、劑型與藥物療效的關(guān)系,（一）劑型對中藥制劑穩(wěn)定性的影響,（二）劑型對中藥制劑有效成分的溶出和吸收的影響,二、劑型選擇的原則和依據(jù),（一）根據(jù)臨床

3、防治的需要,（二）根據(jù)藥物及其有效成分的性質(zhì),神家本草經(jīng)序列中記載：“藥有宜丸者、宜散者、宜水煎煮、宜酒漬者、宜煎膏者，也有一物兼宜者，亦有不可入湯酒者，并隨藥性，不得違越”。,梁.陶弘景指出“疾有宜服丸者，宜服散者，宜服湯者，宜服酒者，宜服膏者，亦兼參用所疾之源以為其制者耳”。,劑型選擇,二、劑型選擇的原則和依據(jù),（三）根據(jù)藥物生物藥劑學(xué)和藥物動力學(xué)特性,（四）根據(jù)處方規(guī)定的日服劑量,（五）根據(jù)生產(chǎn)條件和五方便的要求,劑型選擇,劑型選擇,功能主治 清熱解毒，瀉火利咽。用于小兒外感高熱，頭 痛，咽喉腫痛，鼻塞，流涕，咳嗽，大便干結(jié)，舌質(zhì)紅，舌苔薄白或黃，脈數(shù)或指紋浮紫等癥。,處方 柴胡、黃芩、

4、葛根、金銀花、連翹、大黃,劑型選擇,處方 葛根、鮮石斛、三七,功能主治 益氣養(yǎng)胃，清熱解酒，生津止渴的功能。用于胃陰不足，口干咽燥，饑不欲食，舌紅少津，酒后津枯虛熱， 酒醉煩渴等癥,劑型選擇,方解 甘遂功效逐水、消痰、破積、通便，為方中君藥，主瀉腹水。三七功效活血化癖、消腫止痛，肉桂功效補元陽、暖脾胃、補中益氣、除積冷、通血脈，二者為方中臣藥，對肝硬化腹水之氣、血兩虛，氣、血、水互結(jié)停滯之“本虛”起到補益之效。,處方 甘遂，三七，肉桂。,原劑型：糊劑 用法：外敷腹部,劑型選擇,處方 黃芪，苦參。,方解 黃茂益氣健脾升陽，斂瘡生肌，治脾虛中氣下陷、久瀉久痢為君藥，苦參清熱燥濕，治熱痢，便血為臣，

5、,黃芪中甲苷、多糖；苦參中苦參堿、氧化苦參堿等成分對潰瘍性結(jié)腸炎具有的藥理作用。,提取工藝研究,由于中藥新藥的研制一般以中藥材(飲片)為起始原料，為了達到療效高、劑量小的要求，除少數(shù)情況可直接使用藥材粉末外，一般藥材都需要經(jīng)過提取。針對影響提取效果的多種因素，可從三方面進行提取工藝研究。,提取工藝研究,(一) 藥材的鑒定與前處理,中藥材的鑒定與前處理是保障制劑質(zhì)量的基礎(chǔ)，投料前原藥材必須經(jīng)過鑒定，符合有關(guān)規(guī)定與處方要求者方能使用。此外，還應(yīng)根據(jù)方劑對藥性的要求，藥材質(zhì)地、特性和不同提取方法的需要，對藥材進行凈制、切制、炮炙、粉碎等加工處理。凡需特殊炮制的藥材，應(yīng)說明炮制目的，提供方法依據(jù)。,提

6、取工藝研究,(二) 提取工藝路線的設(shè)計,提取工藝路線是以保證實現(xiàn)處方的功能主治為目的，緊緊圍繞功能主治的要求，對藥物的處理原則、方法和程序所作的最基本的規(guī)定。它直接決定著提取物的種類、存在的形式、提取物與功能主治間的吻合程度，決定著制劑質(zhì)量的優(yōu)劣，也決定著制劑大生產(chǎn)的可行性和經(jīng)濟效益。,中藥復(fù)方制劑的工藝路線是工藝科學(xué)性、合理性和可行性的基礎(chǔ)與核心,中藥成分復(fù)雜、藥效各異，組成復(fù)方并非藥物簡單相加，因此對復(fù)方中藥一般應(yīng)復(fù)方提取。在工藝設(shè)計前應(yīng)根據(jù)方劑的功能、主治，通過文獻資料的查閱，分析每味中藥的有效成分與藥理作用；結(jié)合臨床要求與新藥類別、所含有效成分或有效部位及其理化性質(zhì)；再根據(jù)提取原理與預(yù)

7、試驗結(jié)果，選擇適宜的提取方法，設(shè)計合理的工藝路線，并應(yīng)提供設(shè)計依據(jù)。,提取工藝路線設(shè)計的依據(jù),（一）藥物的性質(zhì),（二）劑型的需要,制劑的工藝路線應(yīng)考慮不同劑型的特殊要求，以四君子湯為例，分別制備固體劑型（片劑、顆粒劑）和液體劑型（口服液）。,提取工藝研究,固體劑型（片劑、顆粒劑）,人參,茯苓、甘草,白術(shù),粉碎,極細(xì)粉,水煎,水煎液,除雜 濃縮,稠膏,制粒 干燥,顆粒,液體劑型（口服液）,人參,茯苓、甘草,白術(shù),水煎,水煎液,除雜 濃縮,濃縮液,水蒸氣蒸餾,藥液,藥渣,揮發(fā)油,藥液,輔料,提取工藝路線設(shè)計的依據(jù),（三）新藥類別的要求,（四）生產(chǎn)可行性及成本核算的需要,1. 應(yīng)具可行性 工藝路線越

8、單純、簡單、無交叉、基生產(chǎn)可行性越大，如當(dāng)歸補血口服液，處方藥物為黃芪、當(dāng)歸。,2. 應(yīng)具可操作性、安全性高 工藝路線制訂要與工廠生產(chǎn)條件緊密結(jié)合，要把生產(chǎn)每個環(huán)節(jié)的實際情況考慮進去，如果工藝路線脫離實際，輕則操作困難，重則可能發(fā)生安全事故。,go,提取工藝研究,工藝路線一,工藝路線二,輔料,當(dāng)歸、黃芪,多功能提取灌水提,藥液,藥渣,揮發(fā)油,配液,除雜 濃縮,濃縮液,back,清熱解毒口服液工藝路線,黃芩,方中其他藥物,加水浸泡 加熱煮沸,煎煮3次,清熱解毒口服液正確工藝路線,黃芩,用開水彈分鐘,彈藥水,彈黃芩,方中其他藥物,加水浸泡,煎煮3次,藥液,back,提取工藝路線設(shè)計的依據(jù),（四）生

9、產(chǎn)可行性及成本核算的需要,3. 消耗少、成本低,提取工藝研究,提取工藝研究,鼻炎通竅噴霧劑,處方 麻黃 辛夷 白芷 薄荷 黃芩,功能主治 通利鼻竅，臨床用于鼻塞不通、流黃稠涕、急慢性鼻炎、副鼻竇炎。,提取工藝研究,鼻炎通竅噴霧劑,方解 麻黃辛、微苦，溫，歸肺經(jīng)，有溫通之功，善能開宣肺氣及利水消腫而通竅，為君藥； 辛夷性味辛、溫，歸肺、胃經(jīng)，具有良好的通透鼻竅之功，善治鼻病，尚能引中焦清陽之氣上達頭面而止頭痛，為臣藥； 白芷，味辛、溫，歸肺、胃經(jīng)，可祛風(fēng)、通竅.治療陽明經(jīng)頭痛，為臣藥； 佐以薄荷芳香開郁而通竅; 黃芩入肺經(jīng)，為使藥，引諸藥直達病所。,提取工藝研究,鼻炎通竅噴霧劑,藥物研究 麻黃莖

10、主要含有生物堿，麻黃的成分隨種而異。草麻黃莖中生物堿中1一麻黃堿占60%以上，其次為d一偽麻黃堿、微量的1一N一偽麻黃堿、麻黃次堿、麻黃惡烷、2、3、4一二甲基苯惡唑烷、3，4一二甲基苯惡唑烷、 L一去甲基麻黃堿、D一去甲基偽麻黃堿、芐甲胺及麻黃惡唑酮。麻黃藥理作用廣泛，有發(fā)汗、抗過敏、抗病毒作用。 。,提取工藝研究,鼻炎通竅噴霧劑,藥物研究 辛夷含有揮發(fā)油和木脂素類化合物等成分，有收縮鼻粘膜血管及抗組胺作用及改善微循環(huán)、Ca離子拮抗及PAF拮抗等藥理作用。,提取工藝研究,鼻炎通竅噴霧劑,藥物研究 白芷主要化學(xué)成分是香豆素類化合物2一異歐前胡素、水合氧化前胡內(nèi)酯；別歐前胡素、歐前胡素等。在消炎

11、、鎮(zhèn)痛方面作用顯著。白芷的鎮(zhèn)痛部位能有效地預(yù)防化學(xué)組織損傷誘致的持續(xù)自發(fā)痛，對原發(fā)性熱和機械痛敏也有抑制作用。,提取工藝研究,鼻炎通竅噴霧劑,藥物研究 薄菏主要成分有揮發(fā)油、黃酮類化合物、有機酸、氨基酸等.鮮莖、葉含揮發(fā)油約l%，干莖、葉約含1.3-2%.揮發(fā)油中含左旋薄荷腦(L一Menthol)約77%一87%。、L-薄荷酮(L一Menthone)8%一12%及醋酸薄荷酯約3%等。薄荷中Al、Fe、Na、Zn等元素含量較高。薄荷醇局部應(yīng)用可治頭痛、神經(jīng)痛、瘙癢等。,提取工藝研究,鼻炎通竅噴霧劑,藥物研究 黃芩中主要含有黃酮類化合物，已發(fā)現(xiàn)有41種黃酮類化合物，其中V苷、黃芩苷元、漢黃芩素、漢

12、黃芩苷為其特征性化學(xué)成分。黃芩苷、黃芩素及其他黃酮類化合物對多型變態(tài)反應(yīng)有不同程度的抑制作用，尤其對型變態(tài)反應(yīng)作用強。對多種球菌、桿菌、皮膚真菌、賴藥性鏈球菌有抑制作用。,提取工藝研究,鼻炎通竅噴霧劑,提取工藝路線設(shè)計 處方中辛夷、薄荷、白芷主要含揮發(fā)性成分。采用水蒸氣蒸餾法提取，由于是液體制劑，所以不直接提取揮發(fā)油而提取芳香水，以揮發(fā)油提取率為評價指標(biāo)，篩選芳香水提取工藝。水提部分麻黃主要有效成分為麻黃堿.黃芩主要有效成分為黃芩苷。為保證制劑質(zhì)量及臨床療效，以麻黃堿、黃芩苷含量及干膏率作為評價指標(biāo)，采用正交試驗優(yōu)選水提工藝條件。,黃芪、麻黃,辛夷、薄荷、白芷,水煎,水煎液,除雜 濃縮,濃縮液

13、,配液,提取工藝研究,鼻炎通竅噴霧劑工藝路線,補元膏,處方藥物黨參、生地、熟地、肉桂、火麻仁、沙參、 黃精、大棗、阿膠,劑型：煎膏劑,藥物性質(zhì)：火麻仁含干性脂肪油； 肉桂含揮發(fā)油； 其他藥物為水溶性成分,提取工藝研究,補元膏工藝路線,火麻仁,炒后壓 榨提取油,火麻仁油,藥渣,黨參、沙參、生地 熟地、黃精,肉桂,水煎,水煎液,除雜濃縮,清膏,大棗,阿膠,水煮制泥,棗泥,烊化,膠液,成品,提取工藝條件的研究,在提取工藝路線初步確定后，應(yīng)充分考慮可能影響提取效果的因素，進行科學(xué)、合理的試驗設(shè)計，采用準(zhǔn)確、簡便、具代表性、可量化的綜合性評價指標(biāo)與方法，優(yōu)選合理的提取工藝技術(shù)條件。在有成熟的相同技術(shù)條件

14、可借鑒時，也可通過提供相關(guān)文獻資料，作為制訂合理的工藝技術(shù)條件的依據(jù)。合理的提取工藝，應(yīng)達到同類研究先進水平（提供相應(yīng)文獻資料）。,一、工藝條件研究的原則,（一）研究工作要有系統(tǒng)性,1. 要按工藝路線確定的順序,依先后次序逐一進行,不可遺漏,也不可顛倒；,2. 對每個環(huán)節(jié)的主要影響因素進行全面研究；,3. 對每個影響因素要進行三個水平或更多水平的比較研究。,提取工藝條件的研究,一、工藝條件研究的原則,（二）試驗研究用原料要保持一致性,一般情況下供篩選研究用中藥材最好一次購足，分次使用較好。若研究工作進展較慢，前后相距時間較長，各實驗數(shù)據(jù)是零星積累起來的，最好系統(tǒng)地作一次重復(fù)實驗。,提取工藝條件

15、的研究,小兒宣肺顆粒劑除雜工藝研究,試驗內(nèi)容：比較自然沉降、醇沉、離心、大孔樹脂吸附幾種除雜方法。,評價指標(biāo)：固形物收率；主藥黃芩中黃芩苷含量。,處方藥材 1000g,水提液 8000ml,A 1000ml,B 3000ml,B1 1000ml（60%乙醇沉淀 ）,B2 1000ml（70%乙醇沉淀 ）,B3 1000ml（80%乙醇沉淀 ）,靜置24小時,C 3000ml,C1 1000ml（3000r/min離心 ）,C2 1000ml（14000r/min離心 ）,D 1000ml,大孔樹脂吸附,一、工藝條件研究的原則,（三）試驗操作應(yīng)規(guī)范化,提取工藝條件的研究,提取工藝條件的研究,二、

16、工藝條件研究的方法,1. 全面試驗,2. 多次單因素試驗,3. 正交設(shè)計,4. 均勻設(shè)計,提取工藝條件的研究,試驗的因素和水平,乙醇回流法,因素: 乙醇濃度、乙醇用量 回流次數(shù)、回流時間,因素的水平: 乙醇濃度（60%、70%、80%） 乙醇用量（8倍、10倍、12倍） 回流次數(shù)（1次、2次、3次） 回流時間（1 h、1.5h、2h）,篩選因素,滲漉法：溶媒濃度、溶媒用量、滲漉速度,1. 影響滲漉的因素還有藥材粒度、藥粉潤濕程度以及裝筒技術(shù)，但根據(jù)多年經(jīng)驗，這些因素、水平值各藥、各方都很近似，將其列入基本操作規(guī)范中，統(tǒng)一要求，不再單獨考查。,2. 滲漉法尤其是重滲漉法即節(jié)約能源，提取又提取充分

17、，可使尾液持續(xù)到無色、無味、無滲出物。,提取工藝條件的研究,篩選因素,煎煮法：加水量、煎煮時間、煎煮次數(shù),1. 藥材的粉碎度。,2. 浸泡時間和吸水率。 吸水率=藥渣濕重-藥材干重/藥材干重*100%,提取工藝條件的研究,提取工藝條件的研究,試驗評價指標(biāo),浸出物（水浸出物、有機溶劑浸出物） 大類成分含量（總黃酮、總生物堿等） 指標(biāo)成分含量（黃芩苷、葛根素 等） 生理指標(biāo)（微生物如MIC、藥理學(xué)）,評價指標(biāo)的選擇,化學(xué)方法： 是利用提取物中成分含量多少來評價提取效果的好壞。此法量化程度高，表述清楚，研究時易于操作。一般采用多指標(biāo)評價。,評價指標(biāo)的選擇,化學(xué)方法：,1. 水浸出物,作選擇劑型的參考

18、指標(biāo),作考查工藝水平的評價指標(biāo),作固體制劑日服量、單服劑量及包裝規(guī)格確定的依據(jù),評價指標(biāo)的選擇,化學(xué)方法：,2. 有機溶劑浸出物,含雜質(zhì)少，有效成分多，與療效有直接關(guān)系,操作簡便，不需特殊儀器。,評價指標(biāo)的選擇,化學(xué)方法：,3. 大類成分 如總生物堿、總黃酮、總苷等,4. 指標(biāo)成分 應(yīng)選處方中“君藥、貴重藥、毒藥”的主要有效成分或指標(biāo)成分作為評價指標(biāo)。,評價指標(biāo)的選擇,生物學(xué)方法：,1. 微生物學(xué)方法 清熱解毒藥物、外用消毒殺菌藥物，可用最小抑菌濃度（MIC）來作提取效果的評價指標(biāo)。,2. 藥理學(xué)方法 根據(jù)處方的功能主治選擇主要藥效學(xué)指標(biāo)來評價提取工藝的優(yōu)劣。,評價指標(biāo)的選擇,有效浸出物綜合評

19、價法：,化學(xué)方法與生物學(xué)方法皆各有所長，但單獨使用皆不夠全面和理想，將化學(xué)方法與生物學(xué)方法結(jié)合起來，發(fā)揮各自優(yōu)點，可以找出產(chǎn)生復(fù)方功能主治作用的主要部分有效浸出物，用它作評價指標(biāo)，更具科學(xué)性和合理性。,評價指標(biāo)的選擇,有效浸出物綜合評價法：,研究要點：,將中藥復(fù)方藥物用系統(tǒng)溶劑法的各溶劑，以極性從小到大依次進行提取，制備出相應(yīng)的樣品；,根據(jù)復(fù)方的功能主治，選擇2-3個最具代表性的藥效學(xué)指標(biāo)，對上述各樣品作平行藥效試驗，篩選出作用最強的樣品；,對有效浸出物進行化學(xué)分析，找出代表性成分用含量測定方法。,樣品制備,提取工藝條件研究的方法,全面試驗,該方法將每一個因素的不同水平組合做同樣數(shù)目的試驗，例

20、如將每個因素的不同水平組合均作一次試驗。,水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油 影響因素：加水量、浸泡時間、蒸餾時間,因素的水平:加水量（8倍、10倍、12倍） 浸泡時間（1 h、2h、3h） 蒸餾時間（6h、8h、10h）,全面試驗至少做 3*3*3=27次試驗,提取工藝條件研究的方法,多次單因素試驗,以水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油為例,先固定浸泡時間和蒸餾時間，變化加水比例,再固定加水比例和蒸餾時間，變化浸泡時間,最后固定浸泡時間和加水比例，變化蒸餾時間,提取工藝條件的研究,辛夷、薄荷、白芷芳香水提取工藝研究,方法：多次單因素,評價指標(biāo)：揮發(fā)油提取率,提取工藝條件的研究,辛夷、薄荷、白芷芳香水提取工藝研究,按照中

21、國藥典2010年版一部附錄XD揮發(fā)油測定法甲法，分別測定辛夷、薄荷等單味藥材及混合后揮發(fā)油提取量。結(jié)果單味藥材揮發(fā)油含量均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)，混合提取揮發(fā)油收量為0.69%(mL/g)，后面考察以此為指標(biāo)。,辛夷、薄荷、白芷芳香水提取工藝研究,一、吸水率的考察,按處方量比例稱取辛夷、薄荷、白芷共200g，加水2000ml，浸泡24h，濾過.得到濾液1630ml，計算吸水率為185%，后面考察均補充吸水量。,辛夷、薄荷、白芷芳香水提取工藝研究,二、加水量的考察,按處方量比例稱取辛夷、薄荷、白芷共500g，分別加入6、8、10、12、14、16倍水，在相同條件下蒸餾6小時，收集揮發(fā)油。,加水量的考察,辛

22、夷、薄荷、白芷芳香水提取工藝研究,三、提取時間的考察,按處方比例稱取辛夷(粗粉)、薄荷、白從共1000g，加10倍量水，蒸餾提取8小時，每小時收集藥材500ml芳香水，所得芳香水按照中國藥典2010年版一部附錄XD揮發(fā)油測定法“甲法”測定芳香水中揮發(fā)油含量。,提取時間的考察,辛夷、薄荷、白芷芳香水提取工藝研究,四、驗證試驗,按處方比例稱取辛夷、薄荷、白芷共1000g，共3份，分別加入10倍水，按照上述芳香水提取工藝條件蒸餾提取，重復(fù)三次試驗。驗證結(jié)果與試驗結(jié)果相接近，說明該提取條件穩(wěn)定可行，由此，辛夷、薄荷、白芷芳香水提取工藝條件確定為:辛夷(粗粉)、薄荷、白芷水蒸氣蒸餾提取6小時，共收集30

23、0Oml 芳香水，將收集的芳香水重蒸餾，提取5小時，共收集300ml芳香水。,提取工藝條件研究的方法,正交試驗設(shè)計,特點：整齊可比、均勻分散 1）每個因素的水平都重復(fù)了3次試驗； 2）每兩個因素的水平組成一個全面試驗方案。,提取工藝條件研究的方法,正交試驗設(shè)計,1、確定試驗的影響因素及水平，并列出因素水平表；,2、根據(jù)因素水平表選擇正交試驗安排表（Ln(Km)表）；,3、根據(jù)正交試驗安排表進行試驗；,4、對試驗結(jié)果進行直觀及方差分析，得出優(yōu)化工藝條件；,5、對優(yōu)化的工藝條件進行驗證試驗。,正交試驗設(shè)計,因素水平表,丹參乙醇回流提取工藝研究,評價指標(biāo)：干膏收得率、丹參酮A含量,L9（34）正交試

24、驗與結(jié)果,方差分析,從以上方差分析結(jié)果可以看出：D因素有顯著的影響，影響因素DCAB；且D3、C3、A3、B1為佳，但考慮到工廠大生產(chǎn)需要節(jié)約時間和能源，降低成本，且C、A因素并無顯著影響，故兩者均選次佳水平C2、A2，所以工藝條件為D3C2A2B1，即加6倍量的70%乙醇，回流3次，每次1小時，其中第1次加8倍量的乙醇，回流1.5小時；第2次加6倍量的乙醇，回流1小時；第3次加4倍量的乙醇，煎煮0.5小時,驗證試驗,驗證試驗結(jié)果,驗證試驗結(jié)果表明：此工藝穩(wěn)定，具有重現(xiàn)性和可操作性。,提取工藝條件研究的方法,均勻設(shè)計,1、確定試驗的影響因素及水平，明確測試指標(biāo)；,2、確定或計算均勻試驗設(shè)計表（

25、Un(km)表）；,3、根據(jù)均勻試驗安排表進行試驗,獲取各試驗的測評值；,4、以數(shù)據(jù)殘差平方和或測評值對各因素的回歸方程建 立目標(biāo)函數(shù)；,5、對目標(biāo)函數(shù)，根據(jù)期望方向進行優(yōu)化計算，獲得最優(yōu)點。,U6(64),分離純化工藝條件的研究,分離與純化工藝包括兩個方面：一是應(yīng)根據(jù)粗提取物的性質(zhì)，選擇相應(yīng)的分離方法與條件，以得到藥用提取物質(zhì)。二是將無效和有害組分除去，盡量保留有效成分或有效部位，可采用各種凈化、純化、精制的方法，以為不同類別新藥和劑型提供合格的原料或半成品。方法的選擇應(yīng)根據(jù)新藥類別、劑型、給藥途徑、處方量及與質(zhì)量有關(guān)的提取成分的理化性質(zhì)等方面的不同而異。應(yīng)設(shè)計有針對性的試驗，考察純化精制方

26、法各步驟的合理性及所測成分的保留率，提供純化物含量指標(biāo)及制訂依據(jù)。對于新建立的方法，還應(yīng)進行方法的可行性、可靠性、安全性研究，提供相應(yīng)的研究資料。,分離純化工藝條件的研究,常用方法,除去固體雜質(zhì): 沉降法（自然沉降、離心沉降）； 濾過法,除去可溶性雜質(zhì): 水提醇沉法（醇提水沉法） 吸附澄清法 樹脂吸附法（離子、大孔） 超速離心法,分離純化工藝條件的研究,水提醇沉法,影響因素: 藥液濃度（相對密度） 乙醇濃度 醇沉溫度 醇沉?xí)r間,評價指標(biāo): 固形物收得率（收膏率） 指標(biāo)成分保留率,分離純化工藝條件的研究,吸附澄清法,吸附澄清劑：,凝聚劑：有機酸/鹽類（枸椽酸、海藻酸鈉等） 無機酸鹽類（碳酸鈣、硅

27、藻土等）,絮凝劑：殼聚糖、101果汁澄清劑、ZTC1+1天然澄清劑,吸附澄清劑：,影響因素:澄清劑（用量、濃度、加入順序等） 藥液濃度 體系pH 絮凝溫度,評價指標(biāo): 固形物收得率（收膏率） 指標(biāo)成分保留率,例:膠囊純化工藝研究,研究表明，提取液中主要雜質(zhì)有：淀粉、鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)、樹膠、多糖等。,采用水提醇沉法，有效成分損失大。,1、采用絮凝澄清技術(shù)除去淀粉、鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)、樹膠； 2、采用大孔吸附樹脂除去多糖。,例:膠囊純化工藝研究,ZTC1+1絮凝澄清純化工藝研究,ZTCI+1型天然澄清劑是一種新型食品添加劑，由A、B兩組份組成。第一組份加入后，在不同的可溶性大分子間“架橋”連接，使分子迅速增

28、大，第二組份在第一組份所形成的復(fù)合物基礎(chǔ)上再“架橋”，使絮狀物盡快形成，且第二組份的加入量為第一組份的一半，可以保證第二組份作用完全，在溶液中不殘留。,澄清劑溶液的制備： A組分:白色至微黃色粉末，用水配制成1%(gmL-1)黏膠液；配制方法:先用少量蒸餾水將A組分?jǐn)嚢璩珊隣?，然后加入需要量的蒸餾水，溶脹24h，攪拌，用雙層紗布過濾，即得1%黏膠液。,B組分:微黃色至淺黃色粉末。用1%醋酸配制成1%(gmL-1) 黏膠液；配制方法：先配制1%醋酸，然后用少量1%醋酸溶解B組分并攪拌成糊狀，加入需要量的1%醋酸，溶脹24h，攪拌，用雙層紗布過濾，即得1%黏膠液。,例:膠囊純化工藝研究,ZTC1+

29、1絮凝澄清純化工藝研究,ZTC1+1絮凝澄清純化工藝研究,體系pH的影響,試驗方法： 以稀鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)提取液pH值4、5、6、7、8，分別取以上pH值提取液各50 mL，加入6%B組分50保溫攪拌5min，每30min攪拌一次，室溫下加入3%A 組分，攪拌5min，溶液冷藏靜置12h，抽濾，測定指標(biāo)成分含量及固形物得率，并檢查鞣質(zhì)。,ZTC1+1絮凝澄清純化工藝研究,體系pH的影響結(jié)果,ZTC1+1絮凝澄清純化工藝研究,澄清劑用量的影響,ZTC1+1絮凝澄清純化工藝研究,藥液濃度的影響,例:膠囊純化工藝研究,大孔吸附樹脂純化工藝研究,濃縮干燥工藝條件的研究,濃縮與干燥工藝研究濃縮與干

30、燥應(yīng)根據(jù)物料的性質(zhì)及影響濃縮、干燥效果的因素，優(yōu)選方法與條件，使達到一定的相對密度或含水量，并應(yīng)以濃縮、干燥物的收率及指標(biāo)成分含量，評價本工藝過程的合理性與可行性。,濃縮干燥工藝條件的研究,濃縮方法：,干燥方法：,濃縮干燥工藝條件的研究,例:膠囊噴霧干燥工藝研究,膠囊是根據(jù)臨床經(jīng)驗方研制而成的中藥新制劑，其提取浸膏吸濕性較強，且含有部分脂肪，采用傳統(tǒng)方法干燥，干燥時間長，制粒困難。為提高工藝水平，擬采用噴霧干燥的方法制備浸膏粉，,例:膠囊噴霧干燥工藝研究,正交試驗設(shè)計 在預(yù)試驗的基礎(chǔ)上，將浸膏濃縮至相對密度1.10（60），加入乙醇，使乙醇濃度達40%藥液溫度50，根據(jù)影響噴霧干燥的主要因素：

31、進風(fēng)溫度（A）、出風(fēng)溫度（B）、進料速度（C），分別選取3個水平，進行噴霧干燥，以噴霧粉的水分和干粉得率為指標(biāo)，采用L9（34）正交試驗表進行正交試驗,例:膠囊噴霧干燥工藝研究,膠囊噴霧干燥工藝因素水平表,例:膠囊噴霧干燥工藝研究,膠囊噴霧干燥工藝正交試驗結(jié)果,例:膠囊噴霧干燥工藝研究,膠囊噴霧干燥工藝正交試驗方差分析（水分）,例:膠囊噴霧干燥工藝研究,膠囊噴霧干燥工藝正交試驗方差分析（干粉得率）,注：F0.05(2.2)=19.00；F0.01(2.2)=99.00。,例:膠囊噴霧干燥工藝研究,各因素對浸膏粉水分影響程度依次為ACB，其最佳組合為：A3B1C3。各因素對干粉得率影響程度依次為

32、CAB，其最佳組合為：A2B3C3。考慮噴霧粉的水分均在合格范圍內(nèi)，初步確定最佳藝為A2B2C3，即進風(fēng)溫度135145、出風(fēng)溫度為6575、進料速度140150 ml/min。,例:膠囊噴霧干燥工藝研究,驗證實驗,膠囊噴霧干燥工藝正交試驗驗證結(jié)果,制劑成型性工藝的研究,制劑成型性研究應(yīng)在提取工藝技術(shù)條件穩(wěn)定與半成品質(zhì)量合格的前提下進行，包括制劑處方設(shè)計與制劑成型工藝研究兩方面。,（一）制劑處方設(shè)計是根據(jù)半成品性質(zhì)、劑型特點、臨床要求、給藥途徑等篩選適宜的輔料及確定制劑處方的過程。原則上，應(yīng)首先研究與制劑成型性、穩(wěn)定性有關(guān)的原輔料的物理化學(xué)性質(zhì)及其影響因素，然后根據(jù)在不同劑型中各輔料作用的特點

33、，建立相應(yīng)的評價指標(biāo)與方法，有針對性地篩選輔料的種類與用量。制劑處方量應(yīng)以1000個制劑單位（片、粒、克、毫升等）計，并寫出輔料名稱及用量，明確制劑分劑量與使用量確定的依據(jù)。最終應(yīng)提供包括選擇輔料的目的、試驗方法、結(jié)果（數(shù)據(jù)）與結(jié)論等在內(nèi)的研究資料。,制劑處方,某片劑，原方藥材4000g，提得揮發(fā)油5ml，浸膏粉200g。,浸膏粉 200 g 揮發(fā)油 5 mL -CD 45 g 羥甲基淀粉鈉 30 g 硬脂酸鎂 10 g 共制成 1000 片,（一）制劑處方設(shè)計,例:膠囊成型工藝研究,半成品性質(zhì)：中藥浸膏粉末易吸濕，吸濕后粘性大，流動性差。,解決方法：加入輔料改善浸膏粉吸濕性、流動性。為防止各

34、成分離析和進一步改善流動性，應(yīng)將浸膏粉與輔料混合后制粒。,例:膠囊成型工藝研究,一、輔料種類及用量的選擇,評價指標(biāo)：成型性；流動性；吸濕性,試驗方法：選用微晶纖維素、乳糖、淀粉、微粉硅膠、甘露醇為填充劑，噴干粉與輔料(1:1)，混合均勻，制粒，測定其成型性、流動性與吸濕性。,表 不同輔料與浸膏粉組成（單位：g）,例:膠囊成型工藝研究,成型性的測定,稱取規(guī)定量噴干粉與輔料，混合均勻，加入一定濃度的乙醇制粒，烘干，將制備好的顆粒稱重，先過40目篩，再過60目篩進行整粒，收集能通過40目篩但不能通過60目篩的顆粒，稱重。,過篩后的顆粒重量 成型率= XIOO% 過篩前的顆粒重量,成型性的測定,表 成

35、型性測定,成型性的測定,結(jié)果分析：未加入任何輔料的噴干粉的成型率明顯低于加入不同輔料后的藥粉，不同輔料對其成型性的改善結(jié)果是:(從強到弱)微粉硅膠淀粉甘露醇微晶纖維素乳糖。,流動性的測定,將3只漏斗串聯(lián)并固定于水平放置的坐標(biāo)紙上適宜高度(Icm)處，小心地將不同處方制成的顆粒分別沿漏斗壁倒入最上的漏斗中，直到坐標(biāo)紙上形成的顆粒圓錐體尖端接觸到漏斗口為止，測出圓錐底部的直徑，計算體止角tga=H/R(H為漏斗離桌面的高度，R為圓錐底部的半徑),流動性的測定,表 流動性測定,流動性的測定,結(jié)果分析:由表中可以看出，不同輔料對浸膏粉的流動性具有不同程度的改善，其改善效果的強弱是:(從強到弱)淀粉甘露

36、醇乳糖微晶纖維素微粉硅膠。,吸濕性的測定,將底部盛有氯化鈉飽和溶液的玻璃干燥器放入25生化培養(yǎng)箱內(nèi)，恒溫24h，此時干燥器內(nèi)的相對濕度為75%。在已恒重的稱量瓶底部放入29不同處方的顆粒，打開瓶蓋，在真空干燥箱中60千燥至恒重，取出(將瓶蓋蓋上)，干燥器中冷卻0.5h，準(zhǔn)確稱量后置上述相對濕度75%的玻璃干燥器內(nèi)(將瓶蓋打開)，于48h后稱量，按照下式計算吸濕百分率。共做兩組，計算平均值。,吸濕后顆粒重量一吸濕前顆粒重量 吸濕率(%)= xl00% 吸濕前顆粒重量,吸濕性的測定,表 吸濕率測定,吸濕性的測定,結(jié)果分析:由表中可以看出，各種輔料對噴干粉的吸濕性具有不同程度的改善，其改善效果的強弱

37、是:(從強到弱)微粉硅膠)甘露醇乳糖微晶纖維素淀粉。,由上述的試驗結(jié)果可知，對成型性改善較好的是微粉硅膠，對流動改善較好的是淀粉，對吸濕性改善較好的是微粉硅膠，考慮采用混合輔料進行制粒。根據(jù)表中數(shù)據(jù)綜合評分可以看出，微粉硅膠、甘露醇和淀粉的分值較高，故篩選出來的的混合輔料為微粉硅膠、甘露醇和淀粉。,混合輔料比例的篩選,根據(jù)以上輔料種類考察的結(jié)果，進一步考察微粉硅膠、甘露醇和淀粉的不同配比對顆粒成型性、吸濕性和流動性的改善情況，按比例稱取一定量的噴干粉和輔料，混合均勻，制成顆粒，測定。,混合輔料比例的篩選,表 混合輔料比例篩選,混合輔料比例的篩選,結(jié)果分析:根據(jù)表中數(shù)據(jù)綜合評分可以看出，輔料的最

38、佳比例為微粉硅膠:甘露醇:淀粉(6:2:2)。,浸膏粉與混合輔料的比例篩選,表 浸膏粉與混合輔料比例篩選,結(jié)果分析:由上述數(shù)據(jù)看出，最佳輔料比例為噴干粉:混合輔料(1:1)。 結(jié)論:根據(jù)以上實驗數(shù)據(jù)，篩選出最佳輔料及其配比為:浸膏粉:微粉硅膠:甘露醇:淀粉(10:6:2:2)。,二、膠囊成型性研究,潤濕劑的選擇,乙醇濃度的篩選,取浸膏粉約10g，共4份，按既定比例加入輔料，混合均勻，分別用不同濃度的乙醇為潤濕劑濕法制粒，比較各種顆粒的制粒情況、外觀性狀和成型性，篩選最佳潤濕劑。,表 潤濕劑的選擇,乙醇濃度的篩選,結(jié)果分析:根據(jù)以上實驗，以90%的乙醇作為潤濕劑制軟材比較合適，其顆粒其粘附篩網(wǎng)的

39、現(xiàn)象、外觀性狀、顏色均勻性及成型性等均較好。最終選定潤濕劑為90%的乙醇,乙醇用量的篩選,取浸膏粉約10g，共4份，按比例加輔料，混合均勻，分別加入不同量的90%乙醇為潤濕劑濕法制粒，比較各種顆粒的制粒情況、外觀性狀和成型，篩選最佳潤濕劑的用量。,表 潤濕劑用量的選擇,乙醇用量的篩選,乙醇用量的篩選,結(jié)果分析:根據(jù)以上結(jié)果，隨著乙醇量的加多，軟材粘網(wǎng)嚴(yán)重，難于制粒，但乙醇過少又造成顆粒細(xì)粉率較高，所以以加入 6mL乙醇為佳，即乙醇浸膏粉輔料混合物的比例為61010。,干燥溫度的篩選,取噴干粉10g，共3份，按選定工藝制粒，于不同溫度下干燥，觀察顆粒干燥情況。,表 干燥溫度的選擇,干燥溫度的篩選

40、,結(jié)果分析:根據(jù)以上實驗可以看出，干燥溫度越高，顆粒結(jié)塊現(xiàn)象越嚴(yán)重，整粒越難，所以選定干燥結(jié)果為:6065,堆密度的測定及膠囊殼的選擇,測定方法:稱取一定量的顆粒，裝入50ml量筒中，以固定高度落在一塊橡膠上數(shù)次(每次保持實驗條件一致)使松緊適宜，以重量及容積計算堆密度，,表 堆密度測定結(jié)果,膠囊服用量的確定,膠囊日處方量的浸膏粉約為1.386g，制成顆粒后約為2.772g，顆粒堆密度約0.5505 g/ml ，故采用0號硬膠囊分裝，每粒膠囊的裝量約為0.3g，日處方量共裝膠囊9粒。所以確定為:每日服用3次，每次服用3粒,浸膏粉 154 g 微粉硅膠 92.4 g 甘露醇 30.8 g 淀粉

41、30.8 g 90%乙醇 92.4 mL 共制成 1000 粒 每粒重0.3g,膠囊制劑處方,顆粒臨界相對濕度(CRH)的測定,顆粒休止角的測定,包裝材料的確定,本品為膠囊劑，內(nèi)容物具有吸濕性，臨界相對濕度為63%，因此需密閉，防潮。試驗選擇藥品包裝用鋁箔和聚氯乙烯固體藥用硬片作為直接接觸藥品的包裝材料,膠囊制備工藝的確定及工藝流程圖,制法,處方: 黃芪 桂枝 夏枯草 水蛭,以上四味，水蛭粉碎成粗粉，用6倍量80%乙醇60回流提取，提取3次，每次lh，濾過，提取液回收乙醇后另器收集;黃芪、桂枝與夏枯草混合加8倍量水提取2次，每次lh，合并提取液；將水提液，濃縮成1.2g生藥/ml的藥液，加入比

42、例為10%(v/v)的5%101果汁澄清劑溶液，靜置12h以上，過濾。藥液濃縮至相對密度約為1.10的清膏，噴霧干燥得浸膏粉。取浸膏粉與輔料按比例(浸膏粉微粉硅膠 甘露醇 淀粉=10:6 2 2)混勻，加入乙醇浸膏粉輔料混合物(ml:g)為3:10的90%乙醇，制粒， 6065干燥，整粒，混勻，裝膠囊，即得。,膠囊制備工藝流程圖,舉例,腦欣康膠囊的制劑工藝研究,處方,制何首烏、 葛根、 丹參 、 黃精 、 海龍 、 菟絲子、 川芎,功能主治,補益肝腎，填精益髓，活血通脈，用于腦動脈硬化癥辨證屬肝腎精虧兼瘀血阻絡(luò)型，癥見頭暈頭痛，神疲健忘，胸悶或痛，口干目澀，腰膝酸軟，虛煩少寐等，舌紅苔薄，脈弦

43、數(shù)或澀。,方解,方中何首烏苦、甘、澀、微溫。歸肝腎經(jīng)，有補益精血功效。本草綱目謂“此物氣溫味苦澀，苦補腎，溫補肝，澀能收斂精氣，所以能養(yǎng)血益肝，固精益腎，健筋骨，為滋補良藥。不寒不燥，功在地黃、天門冬諸藥之上”。開寶本草謂“久服長筋骨，益精髓，延年不老”。葛根甘、辛、涼，傷寒論記載本品可治“項背強幾幾，無汗惡風(fēng)”，與何首烏共為君藥。,方解,黃精甘、平，補肺滋陰，補脾益氣，本草綱目推崇其“補諸虛，填精髓”，助君藥何首烏補腎益精；丹參苦、微寒，活血祛瘀，養(yǎng)血安神。滇南本草有“補心定志，安神寧心，治健忘怔忡，驚悸不寐”記載。日華子本草有“養(yǎng)神定志，通利關(guān)脈”。且有“一味丹參，功同四物”之說，二者共為

44、臣藥。,菟絲子辛、甘、平，補陽益陰，藥性論：“添精益髓，去腰痛膝冷”，為平補之藥但仍偏補陽；海龍咸、甘、溫，補腎壯陽，二藥既可助君藥何首烏補腎精，又可佐制臣藥黃精滋膩，共為佐藥。川芎辛、溫，歸肝膽經(jīng)，能活血行氣，祛風(fēng)止痛，有血中氣藥之稱，又性兼升散，能上行頭目，故為治療頭部疾病之要藥，本經(jīng)言其“主中風(fēng)入腦頭痛”。有引藥上行之功，為使藥。,方解,處方中藥物的現(xiàn)代研究情況,1.制首烏：制首烏所含蒽醌類化合物，主要有大黃素、大黃酚、大黃酸、大黃酚蒽酮、大黃素甲醚、大黃素8OD葡萄糖苷等和近年來發(fā)現(xiàn)二苯乙烯類化合物，如2、3、5、6四羥基二苯乙烯3D葡萄糖苷等對家兔、鴿、大鼠、鵪鶉等多種高脂動物模型都

45、有明顯的降脂作用，能延長鵪鶉的生存時間，同時顯著增加血漿HDL-C和HDL-C/Tc比值，改善脂質(zhì)代謝，并降低血漿脂質(zhì)過氧化物含量，提高抗氧化能力；能與膽固醇結(jié)合，減少腸道膽固醇的吸收；所含卵磷脂、磷脂酸、磷脂酰山安等能阻止膽固醇在肝臟沉積，因此何首烏能防止動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展。,處方中藥物的現(xiàn)代研究情況,2.葛根：將葛根總黃酮，主要包括大豆苷元（大豆素、大豆黃素、黃豆苷元）、大豆苷、葛根素、葛根苷A、B、C等，注入頸內(nèi)動脈能使麻醉犬的腦血流量增加，腦血管阻力降低，顯示葛根有擴張血管的作用。臨床研究也證實葛根有改善腦循環(huán)的作用，如給高血壓動脈硬化癥患者肌注葛根總黃酮后，病人腦血流圖改善。,

46、處方中藥物的現(xiàn)代研究情況,3.丹參：實驗顯示，丹參中所含的酚性芳香酸，主要有丹參素、丹參酸丙、丹酚酸A、丹酚酸C、和丹參酸乙等和二萜化合物，如丹參酮、A、B,異丹參酮、隱丹參酮等通過增加毛細(xì)管開放，擴張微循環(huán)，增加微循環(huán)的血流量從而增加腦微循環(huán)的血液灌流量，同時，還能提高纖溶酶活性，促進纖維蛋白溶解，起到抗血栓形成作用 。,4.黃精：所含黃精多糖甲、乙、丙，由葡萄糖、甘露糖、半乳醛酸結(jié)合而成，此外尚含有3種低聚糖甲、乙、丙系由葡萄糖和果糖結(jié)合而成，這些成分具有增強免疫功能、增強代謝、強心等作用 。,處方中藥物的現(xiàn)代研究情況,5.海龍：主要含蛋白質(zhì)、表皮分泌粘液多糖、脂肪酸，尚含膽甾醇等成分，如

47、十二酸、十三酸、十四酸、十六碳三烯酸等。這些成分表現(xiàn)出一定的雄性激素樣作用 。,6.菟絲子：主要含黃酮和甾萜類化合物。黃酮類主要為山奈酚和槲皮素，甾類成分有豆甾醇、油菜甾醇等。這些成分對氫化可的松所致的小鼠“陽虛”模型有治療作用，并能增強非特異性抵抗力等 。,處方中藥物的現(xiàn)代研究情況,6.川芎：本品所含生物堿、酚性部分和揮發(fā)油有明顯的擴張冠脈、增加冠脈血流量、降低心肌耗氧量等作用，此外，川芎嗪能擴張血管，藥動學(xué)研究證明，它能夠迅速透過血腦屏障，在腦干分布較多，有利于在腦部發(fā)揮擴血管、改善微循環(huán)和抑制血小板聚集等作用 。,制備工藝研究,一、劑型篩選,本品處方為經(jīng)驗方，原方以湯劑形式用于臨床多年，

48、療效確切，但湯劑需臨用新配，口服劑量大，久置易發(fā)霉變質(zhì)，攜帶不方便，不適應(yīng)現(xiàn)代化生活的需要，故考慮改革劑型。根據(jù)本方的功能主治，其用藥對象主要是老年人，為便于攜帶和服用，首先考慮選擇制成固體制劑。鑒于本方日服劑量為原生藥材12.51克，服用量較小，可做成片劑或膠囊劑。而膠囊劑制備時不需加粘合劑和壓力，在胃腸道中崩解快，一般口服后310分種即可崩解釋放藥物，顯效較片劑快。同時，本品中有些成分易受空氣中光、濕、熱的影響，從而造成其含量降低，并最終影響療效，若制成膠囊劑，可保護藥物盡量不受這些因素的影響，從而提高穩(wěn)定性，保證療效。故最終選擇制成膠囊劑 。,制備工藝研究,二、工藝路線的初步擬定,（一）

49、 劑型,加輔料制粒干燥或加輔料一步制粒,檢驗 裝膠囊,藥材 提取液 濃縮液 浸膏粉,顆粒 成品,提取,分離、除雜、濃縮,制備工藝研究,二、工藝路線的初步擬定,（二） 文獻資料,資料表明：該方七味藥主要含脂溶性成分：如卵磷脂、丹參酮、丹參酮A、丹參酮B、異丹參酮、異丹參酮、隱丹參酮、二苯乙烯苷等、生物堿、揮發(fā)油、內(nèi)酯類；水溶性成分：如羥基蒽醌衍生物、大豆苷、葛根素、黃精多糖甲、乙、丙、原兒茶醛、丹參素等。另外，預(yù)試試驗時發(fā)現(xiàn)本方藥材經(jīng)提取所得的浸膏粉有一定吸濕性，需加入一定量的輔料，鑒于葛根為方中君藥，且含大量淀粉，故將其部分打粉作為賦形劑制粒 。,制備工藝研究,二、工藝路線的初步擬定,（二）

50、文獻資料,綜上所述，何首烏、丹參兩味藥材主要有效成分既有水溶性的，又有脂溶性的，故先用乙醇回流提取，藥渣再用水煎煮提??；川芎用水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油；而黃精、菟絲子、海龍、葛根等四味藥材則主要含水溶性有效成分，故與醇提后的藥渣及川芎藥渣一起用水煎煮提??；其中，部分葛根藥材粉碎成細(xì)粉，作為賦形劑制粒 。,制備工藝研究,二、工藝路線的初步擬定,（三） 藥效學(xué)試驗,由于肝腎精虧兼瘀血阻絡(luò)型腦動脈硬化癥主要是由于腦供血不足和高血脂造成的，因此選擇相關(guān)指標(biāo)進行了以下兩方面的藥效學(xué)試驗,制備工藝研究,二、工藝路線的初步擬定,（三） 藥效學(xué)試驗,1. 樣品對動脈粥樣硬化家兔血液流變性的影響,2. 樣品對犬腦血

51、流、腦血管阻力和血壓等的影響,供試樣品制備方法：按處方比例稱取生藥，其中，何首烏、丹參兩味藥材先用8倍量、6倍量80%乙醇提取兩次，每次1.5小時、川芎加水15倍量提取揮發(fā)油6小時，揮發(fā)油、藥液分別另器收集備用，上述三味藥材藥渣再與余下四味藥材用加12、10倍量水煎煮兩次，每次1.5小時，將醇提藥液回收乙醇后適當(dāng)濃縮、與適當(dāng)濃縮的水提藥液合并，再與部分葛根粉末混勻后制粒，噴入揮發(fā)油，密閉，備用。,藥效學(xué)試驗結(jié)果表明：樣品有降低全血粘度、全血還原粘度、紅細(xì)胞剛性指數(shù)的作用，能改善動物的血液流變性；同時能夠降低血壓，增加腦血流量，降低腦血管阻力和減慢心率等作用，其作用大小與用藥劑量有關(guān)，用藥劑量大

52、則作用強。說明初步擬定的工藝路線合理可行,濃縮液,制首烏、丹參,乙醇回流,藥渣,藥液,回收乙醇,川芎,水蒸氣蒸餾,藥液,藥渣,揮發(fā)油,其余四味,水煎,水煎液,除雜 濃縮,濃縮液,葛根,粉碎,細(xì)粉,一步 制粒,顆粒,環(huán)糊精包合,工藝路線,制備工藝研究,三、提取工藝條件的篩選,（一）藥材的鑒定與前處理,（二）粉碎工藝研究,葛根粉末用量根據(jù)本品服用量確定以100g、75g、50g分別進行篩選，其結(jié)果為：以75g或50g葛根粉為賦形劑制成的顆粒仍有一定的吸濕性，而以100g葛根粉為賦形劑制成的顆粒其流動性好，吸濕性小，故選擇用100g葛根進行粉碎 。 將葛根凈藥材打粉，過100目篩，得細(xì)粉，其收粉率考

53、察結(jié)果見表,表 葛根打粉收率考察結(jié)果,（二）粉碎工藝研究,上述結(jié)果表明：葛根收粉率應(yīng)不低于90%,制備工藝研究,三、提取工藝條件的篩選,（三）揮發(fā)油提取工藝研究,1. 川芎揮發(fā)油提取工藝研究,稱取川芎藥材1000g兩份，分別加入12倍量、16倍量水，在相同條件下提取揮發(fā)油，記錄不同時間揮發(fā)油收量。,1. 川芎揮發(fā)油提取工藝研究,表 川芎揮發(fā)油提取考察結(jié)果,時間(h),加水量 (倍),收量(ml),1,2,3,4,5,6,7,8,9,12,16,0.1,0.1,0.3,0.3,0.7,0.8,1.1,1.2,1.7,1.8,2.2,2.3,2.5,2.6,2.8,2.8,2.8,2.9,揮發(fā)油最

54、佳的提取工藝為加水12倍量，提取8小時,揮發(fā)油的提出率為0.28%，累積收油率為965%。由于目前我國藥廠揮發(fā)油提取一般都采用多能提取罐，其油水分離結(jié)構(gòu)不合理，提油率較低，故對川芎的揮發(fā)油提取工藝進行中試試驗 。,1. 川芎揮發(fā)油提取工藝研究,表 川芎中試提取揮發(fā)油考察結(jié)果,根據(jù)中試試驗結(jié)果暫定川芎揮發(fā)油的收油率不得低于0.11%。,制備工藝研究,三、提取工藝條件的篩選,（三）揮發(fā)油提取工藝研究,2. CD包合揮發(fā)油工藝研究,2. CD包合揮發(fā)油工藝研究,試驗方法:取一定量的CD，加入一定量的蒸餾水，制成飽和水溶液后，滴加精密量取的川芎揮發(fā)油無水乙醇溶液(體積分?jǐn)?shù)為50)，攪拌混勻，超聲一定時

55、間,后置冰箱中冷藏24h，抽濾，用少量蒸餾水及石油醚洗滌包合物，至無揮發(fā)油氣味，放入干燥器中，30干燥24h至恒重，得到白色粉狀的CD揮發(fā)油包合物。,2. CD包合揮發(fā)油工藝研究,揮發(fā)油測定器的空白回收率測定,精密量取1ml川芎揮發(fā)油，加入200 ml水，按中華人民共和國藥典（2000版一部）附錄X D揮發(fā)油測定法提取揮發(fā)油，計算空白回收率為81.33(n3)。,2. CD包合揮發(fā)油工藝研究,包含物中揮發(fā)油包結(jié)率的測定,采用水蒸餾回收的方法。精確稱取川芎揮發(fā)油CD包合物，置于500 mL圓底燒瓶中，加入200mL水和幾粒玻璃珠，按實驗的方法，連接揮發(fā)油測定器，微沸1.5h至油量不再增加為止，停

56、止加熱，放置1h，讀取油的體積，計算包合物中油的包結(jié)率。 包結(jié)率=包合物中提出的油量（ml）/揮發(fā)油投入量（ml）*空白回收率,2. CD包合揮發(fā)油工藝研究,包合物得率的計算,包合物得率=包合物的質(zhì)量（g）/CD投入量（g）+揮發(fā)油投入量（g）,評價指標(biāo)：綜合評分,包合物得率評分=包合物得率/最大包合物得率*0.4*100,包結(jié)率評分=包結(jié)率/最大包結(jié)率*0.6*100,綜合評分=包結(jié)率評分+包合物得率評分,2. CD包合揮發(fā)油工藝研究,表 實驗因素水平表,表 正交試驗結(jié)果,2. CD包合揮發(fā)油工藝研究,2. CD包合揮發(fā)油工藝研究,表 方差分析表,F0.05(2,2)=19 F0.01(2,

57、2)=99,從表中可見,各因素影響大小順序為:BACD,其中B有顯著性，故確定最佳工藝為A2B2C3，即每1ml揮發(fā)油用6gCD，80ml水超聲40分鐘進行包合。,2. CD包合揮發(fā)油工藝研究,表 驗證試驗結(jié)果,驗證試驗結(jié)果表明：該工藝合理可行，具有重現(xiàn)性和可操作性。,制備工藝研究,三、提取工藝條件的篩選,（四）何首烏、丹參兩味藥材醇提工藝的研究,采用乙醇回流提取方法，選擇乙醇濃度、乙醇用量、提取時間、提取次數(shù)四個因素，每個因素選擇三個水平，按L9（34）正交表安排試驗。每份試驗取何首烏、丹參共100g，共計9份進行回流提取試驗。由于丹參為方中主藥，丹參酮A是其主要有效成分，故以丹參酮A含量、

58、干膏收得率為指標(biāo)進行綜合評分，根據(jù)實際情況并參照常用比例將丹參酮A含量和干膏收得率的權(quán)重系數(shù)分別定為0.6、0.4，從而篩選出最佳工藝 。,（四）何首烏、丹參兩味藥材醇提工藝的研究,表 因素水平表,表 正交試驗設(shè)計及結(jié)果,表 方差分析表,F0.05(2,2)=19 F0.01(2,2)=99,（四）何首烏、丹參兩味藥材醇提工藝的研究,（四）何首烏、丹參兩味藥材醇提工藝的研究,從以上方差分析結(jié)果可以看出：D因素有顯著的影響，影響因素DCAB；且D3、C3、A3、B1為佳，但考慮到工廠大生產(chǎn)需要節(jié)約時間和能源，降低成本，且C、A因素并無顯著影響，故兩者均選次佳水平C2、A2，所以工藝條件為D3C2A2B1，即加6倍量的75%乙醇，煎煮3次，每次1小時，其中第1次加8倍量的乙醇，煎煮1.5小時；第2次加6倍量的乙醇，煎煮1小時；第3次加4倍量的乙醇，煎煮0.5小時,（四）何首烏、丹參兩味藥材醇提工藝的研究,驗證實驗,為了驗證上述結(jié)果的準(zhǔn)確性，以保證提取工藝的合理可行，按上述確定的工藝條件，安排重復(fù)實驗,表 驗證實驗結(jié)果,驗證試驗結(jié)果表明：此工藝穩(wěn)定，具有重現(xiàn)性和可操作性。根據(jù)丹參藥材含量為27172mg/g,可以計算出丹參的提取率為60%左右。,制備工藝研究,三、提取工