微載體細(xì)胞培養(yǎng)工藝技術(shù)平臺(tái)的建立.ppt

1、微載體培養(yǎng)技術(shù)平臺(tái)建立,技術(shù)管理,吳炳元,2,研發(fā),產(chǎn)品注冊,產(chǎn)品投放市場,產(chǎn)業(yè)化,目標(biāo),種子構(gòu)建平臺(tái),發(fā)酵平臺(tái),純化平臺(tái),制劑平臺(tái),質(zhì)檢平臺(tái),質(zhì)保注冊,項(xiàng)目目標(biāo)及技術(shù)支持,產(chǎn)品目標(biāo)及技術(shù)平臺(tái),3,內(nèi)容介紹,4,發(fā)酵技術(shù)平臺(tái)的構(gòu)成要素,發(fā)酵培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn) 建立技術(shù)平臺(tái)的意義 平臺(tái)構(gòu)成要素,5,發(fā)酵培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn),6,建立技術(shù)平臺(tái)的目的,基礎(chǔ)研究 建立工藝 中試生產(chǎn) 放大工藝 工藝優(yōu)化 完善工藝 工業(yè)化生產(chǎn) 工藝成熟,7,發(fā)酵技術(shù)平臺(tái)的構(gòu)成要素,廠房及試驗(yàn)室 發(fā)酵設(shè)備及輔助設(shè)施（發(fā)酵系統(tǒng)） 適宜細(xì)胞基質(zhì) 微載體的類型 適宜的培養(yǎng)方法 培養(yǎng)基及添加劑 培養(yǎng)參數(shù)的調(diào)控 相關(guān)的檢測技術(shù) 人員素質(zhì)及技術(shù) 標(biāo)準(zhǔn)操

2、作程序 資金投入,8,平臺(tái)構(gòu)建流程,確定項(xiàng)目目標(biāo)（需求） 可行性分析（商業(yè)論證、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估） 系統(tǒng)設(shè)計(jì)（溝通） 制定計(jì)劃 (創(chuàng)造條件) 方案實(shí)施 （控制） 系統(tǒng)驗(yàn)證 （確認(rèn)） 系統(tǒng)評(píng)估驗(yàn)收（標(biāo)準(zhǔn)）,9,發(fā)酵培養(yǎng)工藝,研究內(nèi)容 工藝放大方式,10,研究內(nèi)容,符合藥典規(guī)定 符合注冊標(biāo)準(zhǔn) 建立種子庫 建立工藝路線 確定生產(chǎn)規(guī)程 建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 建立質(zhì)量檢驗(yàn)方法 建立標(biāo)準(zhǔn)操作程序,11,工藝放大方式,工藝路線不同 系統(tǒng)配置不同 技術(shù)管理不同 同級(jí)放大 逐級(jí)放大,12,工藝技術(shù),反應(yīng)器操作技術(shù) 細(xì)胞傳代技術(shù) 微載體處理技術(shù) 細(xì)胞消化技術(shù) 細(xì)胞計(jì)數(shù)技術(shù) 系統(tǒng)維護(hù)保養(yǎng)技術(shù),13,放大培養(yǎng)工藝路線,攪拌瓶,14L

3、 生物反應(yīng)器,75L生物反應(yīng)器,14,病毒培養(yǎng)條件研究,不同的維持液 不同培養(yǎng)溫度比較 不同pH比較 不同MOI 比較 不同 病毒接種方法 不同病毒接種時(shí)間 不同的收獲時(shí)間 不同的收獲方法 收獲液穩(wěn)定性研究,15,發(fā)酵系統(tǒng)的工藝設(shè)計(jì),發(fā)酵系統(tǒng)的結(jié)構(gòu) 發(fā)酵培養(yǎng)的參數(shù)控制,16,發(fā)酵系統(tǒng)的結(jié)構(gòu),罐體 滅菌系統(tǒng) 通氣(汽)系統(tǒng) 補(bǔ)料系統(tǒng) 攪拌系統(tǒng) 溫控系統(tǒng) 控制系統(tǒng) 液位控制 收獲系統(tǒng) 稱重系統(tǒng) 清潔 泵,17,發(fā)酵系統(tǒng)結(jié)構(gòu),控制系統(tǒng),供應(yīng)系統(tǒng),服務(wù)單元,培養(yǎng)系統(tǒng) （罐體）,排放系統(tǒng),取樣,手動(dòng),保溫,輔助系統(tǒng),18,工業(yè)發(fā)酵系統(tǒng),氣,氣體過濾器,冷凝器,氣體過濾器,溫控系統(tǒng),軸封,取樣,收獲,純蒸

4、汽,進(jìn)料,pH,O,T,電極,灌流管,19,發(fā)酵培養(yǎng)控制參數(shù),溫度 PH 溶氧 攪拌 葡萄糖、滲透壓 其他輔助參數(shù)：液位、罐壓、等,: 純蒸汽、電加熱等 : 冷卻水,: NaHCO3 : CO2,: 氧氣 空氣 : 氮?dú)?攪拌速度： 攪拌方式,20,控制系統(tǒng),1.溫度控制 2.pH控制 3.溶氧控制 4.轉(zhuǎn)速控制 5.壓力控制 6.重量控制 7.液面控制 8.培養(yǎng)狀態(tài)顯示 9.參數(shù)設(shè)置和存儲(chǔ)打印信息,21,細(xì)胞質(zhì)量控制,細(xì)胞來源清楚 建庫規(guī)范 復(fù)蘇操作正確 細(xì)胞消化技術(shù)可靠 細(xì)胞培養(yǎng)條件標(biāo)準(zhǔn)化 細(xì)胞檢查技術(shù)穩(wěn)定 參數(shù)調(diào)整合理 培養(yǎng)基適宜,22,培養(yǎng)方法設(shè)計(jì),培養(yǎng)方法分類 批培養(yǎng)（batch c

5、ulture） 加量批培養(yǎng)（feeding culture) 罐流培養(yǎng)(perfusion culture) 再循環(huán)培養(yǎng)(recirculation culture) 換液培養(yǎng)(semi- continuous cultue),設(shè)計(jì)依據(jù) 1. 培養(yǎng)目的 2 培養(yǎng)規(guī)模 3. 發(fā)酵培養(yǎng)量 4. 細(xì)胞濃度 5. 病毒培養(yǎng)時(shí)間 6. 原材料消耗 7. 操作簡便,23,應(yīng)用控制,細(xì)胞培養(yǎng)的流程 過程控制標(biāo)準(zhǔn) 培養(yǎng)參數(shù)調(diào)節(jié) 細(xì)胞繁殖特性 病毒繁殖特性 各種因素的相對(duì)平衡,24,Vero細(xì)胞生長曲線,3g/l微載體細(xì)胞生長曲線,6g/l微載體細(xì)胞生長曲線,25,BHK-21細(xì)胞,第1天,第2天,第3天,第4天,26,Vero細(xì)胞培養(yǎng)倍增數(shù),27,乙腦病毒引起的細(xì)胞病變,(+),(+),(+),(+),28,狂犬病病毒引起的細(xì)胞病變,4d,6d,10d,8d,16d,14d,12d,29,工業(yè)化生產(chǎn)工藝設(shè)計(jì),1設(shè)計(jì)規(guī)模及產(chǎn)品方案 2生產(chǎn)工藝流程及工藝描述 3. 物料平衡與物料流程圖 4. 生產(chǎn)組織及人員 5.