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文檔簡(jiǎn)介
1、,考點(diǎn)互動(dòng)探究教師備用習(xí)題,考試說(shuō)明,1.植物的組織培養(yǎng)()。 2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆()。 3細(xì)胞融合與單克隆抗體()。,知識(shí)梳理,1.細(xì)胞工程概述,考點(diǎn)一植物細(xì)胞工程,分子生物學(xué),細(xì)胞器水平,細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì),細(xì)胞產(chǎn)品,植物,動(dòng)物,2.植物細(xì)胞的全能性 (1)概念:具有某種生物_的任何一個(gè)細(xì)胞,都具有發(fā)育成完整生物體的_,也就是說(shuō),每個(gè)生物細(xì)胞都具有_的特點(diǎn)。 (2)原因:細(xì)胞內(nèi)含有本物種的_。 (3)表現(xiàn)條件:具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu),處于_狀態(tài),提供一定的_和其他適宜的外界條件。 3.植物組織培養(yǎng) (1)原理:植物細(xì)胞的_。 (2)條件:_和人工控制、人工配制的_、適宜的_。,全部遺傳信
2、息,潛能,全能性,全部遺傳信息,離體,營(yíng)養(yǎng)、激素,全能性,無(wú)菌,培養(yǎng)基,培養(yǎng)條件,(3)過(guò)程 4.植物體細(xì)胞雜交技術(shù) (1)概念:指將不同種的植物體細(xì)胞在一定條件下融合成_,并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。 (2)原理:細(xì)胞膜的_和植物細(xì)胞的_。,離體,脫分化,激素,圖12371,再分化,無(wú)菌,雜種細(xì)胞,流動(dòng)性,全能性,(3)過(guò)程 (4)意義:克服_的障礙,培育作物新品種。 5.植物細(xì)胞工程的應(yīng)用 (1)植物繁殖的新途徑 微型繁殖:用于_優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)。,圖12372,纖維素酶、果膠,原生質(zhì)體,物理,聚乙二 醇(PEG),細(xì)胞壁,遠(yuǎn)緣雜交,快速繁殖,作物脫毒:選取作物_等無(wú)毒組
3、織進(jìn)行組織培養(yǎng),獲得脫毒苗的技術(shù)。 人工種子:以植物組織培養(yǎng)得到的_、不定芽、頂芽、腋芽等材料,經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子,可以解決某些植物結(jié)實(shí)率低、繁殖困難等問(wèn)題。 (2)作物新品種的培育:?jiǎn)伪扼w育種和_的利用。 (3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn):即利用_技術(shù)生產(chǎn)蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料和生物堿等。,莖尖、根尖,胚狀體,突變體,植物組織培養(yǎng),核心講解,12017江蘇鹽城二模 擬采用“取材消毒愈傷組織培養(yǎng)出芽生根移栽”的方法繁殖一種名貴花卉。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 () A消毒的原則是既要?dú)⑺啦牧媳砻娴奈⑸?,又要減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害 B在愈傷組織培養(yǎng)基中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑,可獲得染色體加倍
4、的細(xì)胞 C出芽是外植體經(jīng)細(xì)胞脫分化后再分化的結(jié)果,受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控 D誘導(dǎo)叢芽分化生根時(shí),培養(yǎng)基中通常含有NAA等植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,題組訓(xùn)練,答案 B,解析消毒指用比較溫和的物理或化學(xué)方法清除或殺滅除芽孢外的所有病原微生物,使其數(shù)量減少達(dá)到無(wú)害化,A正確;愈傷組織細(xì)胞含有細(xì)胞壁,加入細(xì)胞融合誘導(dǎo)劑不會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞融合,因此不會(huì)得到染色體加倍的細(xì)胞,B錯(cuò)誤;愈傷組織再分化形成胚狀體后,一般先形成芽,再形成根,而分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),C正確;誘導(dǎo)叢芽分化生根時(shí),培養(yǎng)基中通常含有NAA等植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,D正確。,22017西安一模 白菜、甘藍(lán)均為二倍體,體細(xì)胞染色體數(shù)目分別為20、18?!鞍?/p>
5、菜甘藍(lán)”是用細(xì)胞工程的方法培育出來(lái)的蔬菜新品種,它具有生長(zhǎng)期短、耐熱性強(qiáng)和易于儲(chǔ)藏等優(yōu)點(diǎn)。如圖12373是“白菜甘藍(lán)”的雜交過(guò)程示意圖,回答以下問(wèn)題: (1)為了得到原生質(zhì)體需先用_ 和_來(lái)處理白菜細(xì)胞和甘藍(lán)細(xì)胞。 (2)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有多種, 常用的物理方法是_,融合完成的標(biāo)志是_。由雜種細(xì)胞得到“白菜甘藍(lán)”還需要經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù),其中需要避光培養(yǎng)的步驟是_。,圖12373,(3)如圖通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的“白菜甘藍(lán)”植株體細(xì)胞的染色體數(shù)為_;通常情況下,白菜和甘藍(lán)有性雜交是不能成功的,原因是_;若對(duì)白菜和甘藍(lán)采用雜交育種方法能成功的話,得到的后代應(yīng)含_條染色體。 (4)植
6、物體細(xì)胞雜交技術(shù)和傳統(tǒng)雜交技術(shù)相比的優(yōu)點(diǎn)是_。,答案 (1)纖維素酶果膠酶 (2)離心、振動(dòng)、電激再生出新的細(xì)胞壁脫分化 (3)38存在生殖隔離19 (4)克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,培育作物新品種,解析 (1)植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,根據(jù)酶的專一性原理,可采用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。(2)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法包括:物理方法(離心、振動(dòng)、電激)和化學(xué)方法(聚乙二醇);融合完成的標(biāo)志是再生出新的細(xì)胞壁;將雜種細(xì)胞培育成雜種植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),包括脫分化和再分化兩個(gè)階段,其中脫分化過(guò)程要避光,再分化過(guò)程需要光。(3)如圖通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的“白菜甘藍(lán)”體細(xì)胞染色
7、體數(shù)為201838;通常情況下,由于白菜和甘藍(lán)之間存在生殖隔離,因此,白菜和甘藍(lán)有性雜交是不能成功的;若對(duì)白菜和甘藍(lán)采用雜交育種方法能成功的話,得到的后代應(yīng)含19條染色體。(4)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)和傳統(tǒng)雜交技術(shù)相比的優(yōu)點(diǎn)是克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,培育作物新品種。,知識(shí)梳理,1動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段: _、_、 _、_等, 其中_技術(shù)是其他工程技 術(shù)的基礎(chǔ)。 2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) (1)原理:_。 (2)過(guò)程,考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),動(dòng)物細(xì)胞核移植,動(dòng)物細(xì)胞融合,生產(chǎn)單克隆抗體,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),細(xì)胞增殖,圖12374,剪碎,胰蛋白酶,貼壁,接觸抑制,胰蛋白酶,1050,核型,(3)培養(yǎng)
8、條件 營(yíng)養(yǎng):除糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素之外,通常還需加入_等一些天然成分。 適宜的溫度:36.5 0.5 ;適宜的pH:7.27.4。,抗生素,培養(yǎng)液,血清、血漿, (4)應(yīng)用 生產(chǎn)_,如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。 應(yīng)用于_。 檢測(cè)_,判斷某種物質(zhì)的毒性;用于_等方面的研究。,細(xì)胞代謝,pH,生物制品,基因工程,有毒物質(zhì),生理、病理、藥理,1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中兩組概念的辨析 (1)細(xì)胞貼壁和接觸抑制:懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。 (2)
9、原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng) 原代培養(yǎng):細(xì)胞懸液第一次在瓶中培養(yǎng),沒(méi)有分瓶培養(yǎng)之前的細(xì)胞培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞核型正常。 傳代培養(yǎng):原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖一定時(shí)間后,由于空間不足或細(xì)胞密度過(guò)大導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)枯竭,影響細(xì)胞的生長(zhǎng),因此需要重新用胰蛋白酶等處理,進(jìn)行分瓶擴(kuò)大培養(yǎng),即傳代培養(yǎng)。一般情況下,細(xì)胞傳至1050代后,出現(xiàn)核型異常,細(xì)胞增殖會(huì)明顯減緩,甚至完全死亡。,核心講解,2植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較,2017四川南充一診 科學(xué)家利用基因工程和細(xì)胞核移植技術(shù)培育了綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬?;玖鞒蹋簭?熒光水母中獲取目的基因,與有關(guān)載體重組,將其導(dǎo)入豬胎兒的成纖維細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后再將成纖維細(xì)胞核植入
10、去核的卵母細(xì)胞中,最后培養(yǎng)出轉(zhuǎn)基因克隆豬。 (1)成纖維細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)分裂到表面相互接觸時(shí),就會(huì)停止分裂,這種現(xiàn)象叫作細(xì)胞的_。若將成纖維細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng),操作時(shí)首先用_處理成細(xì)胞懸液。,題組訓(xùn)練,(2)作為核移植受體細(xì)胞的去核卵母細(xì)胞一般處在_期。供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中,常通過(guò)_ (物理方法)激活重組細(xì)胞,使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。 (3)培養(yǎng)重組細(xì)胞時(shí),將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類、數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為_培養(yǎng)基,但通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量的_等天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的主要作用是_。為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適
11、量的_。,答案(1)接觸抑制胰蛋白酶 (2)M中(減數(shù)第二次分裂中)電脈沖(電激) (3)合成血清(血漿)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH抗生素,解析 (1)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)分裂到表面相互接觸時(shí),就會(huì)停止分裂,這種現(xiàn)象叫作細(xì)胞的接觸抑制。若將成纖維細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng),操作時(shí)首先用胰蛋白酶處理成細(xì)胞懸液。(2)選取處在M中(減數(shù)第二次分裂中)期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞,通過(guò)電脈沖(電激)激活重組細(xì)胞,使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育進(jìn)程。(3)將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類、數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為合成培養(yǎng)基。動(dòng)物細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5
12、%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的主要作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH。為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素。,知識(shí)梳理,1.理論基礎(chǔ):動(dòng)物_。 2.概念:將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的_,移入一個(gè)已經(jīng)去掉_的_中,使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的_,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為_。 3.核移植類型:_移植和體細(xì)胞核移植。,考點(diǎn)三動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物,細(xì)胞核的全能性,細(xì)胞核,細(xì)胞核,卵母細(xì)胞,胚胎,克隆動(dòng)物,胚胎細(xì)胞核,4.過(guò)程 5.應(yīng)用 (1)加速家畜_, 促進(jìn)_。 (2)保護(hù)_物種。 (3)生產(chǎn)_。 (4)作為異種移植的_。 (5)用于組織器官的_。
13、,體細(xì)胞,體細(xì)胞細(xì)胞核,圖12375,去核卵母細(xì)胞,細(xì)胞融合,胚胎移植,遺傳改良進(jìn)程,優(yōu)良畜群繁育,瀕危,醫(yī)用蛋白,供體,移植,6.存在問(wèn)題 (1)克隆動(dòng)物存在_、_、生理缺陷。 (2)克隆動(dòng)物食品的_也有爭(zhēng)議。,健康問(wèn)題,遺傳缺陷,安全性問(wèn)題,1.關(guān)于核移植技術(shù)的幾個(gè)問(wèn)題 (1)選M中期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因:此類細(xì)胞體積大,易于操作;卵黃多,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富,可為發(fā)育提供充足的營(yíng)養(yǎng);卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中存在激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。(2)克隆動(dòng)物是由重組的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)而來(lái)的,該重組細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)源于受體細(xì)胞,細(xì)胞核基因來(lái)源于提供細(xì)胞核的親本,其遺傳物質(zhì)來(lái)自兩個(gè)親本。(3)核移植中供體動(dòng)物
14、、提供卵母細(xì)胞的動(dòng)物、代孕動(dòng)物和克隆動(dòng)物之間的關(guān)系:克隆動(dòng)物絕大部分性狀與供體動(dòng)物相同,少數(shù)性狀與提供卵母細(xì)胞的動(dòng)物相同,與代孕動(dòng)物的性狀無(wú)遺傳關(guān)系。(4)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)(克隆)從生殖方式的角度看屬于無(wú)性生殖,重組細(xì)胞相當(dāng)于受精卵,需要?jiǎng)游锛?xì)胞培養(yǎng)和胚胎工程技術(shù)的支持。,核心講解,科學(xué)家通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長(zhǎng)激素基因的奶牛,如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育,可以對(duì)此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克隆(如圖12376所示),請(qǐng)結(jié)合圖示回答下列問(wèn)題: (1)在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),要對(duì)取自轉(zhuǎn)基 因奶牛的組織細(xì)胞進(jìn)行分離,形成單 個(gè)細(xì)胞,這個(gè)過(guò)程中需要利用_酶處理。 (2)形成重組細(xì)胞時(shí)應(yīng)選用_期的卵母細(xì)胞,并去
15、掉其細(xì)胞核的原因是_。,題組訓(xùn)練,圖12376,(3)如果重組細(xì)胞為貼附性細(xì)胞,則在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí),會(huì)表現(xiàn)出_和_等特點(diǎn)。 (4)圖中犢牛并非是對(duì)體細(xì)胞核供體母牛100%的復(fù)制,其原因主要有_。 (5)圖中所示的生物技術(shù)整體被稱為_,其包括的具體生物技術(shù)有_、_等。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功,說(shuō)明了動(dòng)物_具有全能性。,答案 (1)胰蛋白(膠原蛋白)(2)M中(減數(shù)第二次分裂中)使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自供體細(xì)胞(避免卵細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)對(duì)后代造成干擾) (3)貼壁生長(zhǎng)(細(xì)胞貼壁)接觸抑制 (4)生物的性狀受細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同控制;生物的性狀受環(huán)境因素的影響 (5)核移植(體細(xì)胞核
16、移植)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)胚胎移植體細(xì)胞的細(xì)胞核,解析 (1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,一般用胰蛋白酶將細(xì)胞分散開,獲得細(xì)胞懸液。(2)在細(xì)胞核移植形成重組細(xì)胞的過(guò)程中一般選用處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞,去除其細(xì)胞核是為了保證克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自供體細(xì)胞。(3)如果重組細(xì)胞為貼附性細(xì)胞,在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí),會(huì)表現(xiàn)出貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制等特點(diǎn)。(4)克隆出的個(gè)體細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來(lái)自卵母細(xì)胞,并且生物性狀的表達(dá)還受到環(huán)境因素的影響,所以題圖中犢牛并非是對(duì)體細(xì)胞核供體母牛100%的復(fù)制。(5)題圖中所示技術(shù)為動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù),其中應(yīng)用到的生物技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、胚胎移植等
17、。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功,說(shuō)明了動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。,知識(shí)梳理,1.動(dòng)物細(xì)胞融合,考點(diǎn)四動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體,滅活的病毒,流動(dòng)性,有性雜交,圖12377,2.單克隆抗體的制備 (1)過(guò)程,圖12378,骨髓瘤,體外,體內(nèi),(2)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):_、_,并可大量制備。 (3)單克隆抗體的應(yīng)用:作為診斷試劑,具有準(zhǔn)確、_、簡(jiǎn)易、_的優(yōu)點(diǎn);用于治療疾病和_。,特異性強(qiáng),靈敏度高,高效,快速,運(yùn)載藥物,1.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較,核心講解,2單克隆抗體制備過(guò)程中兩次篩選的方法及目的,1.圖12379為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖回答: (1)植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有_。動(dòng)物
18、細(xì)胞工程的各技術(shù)手段中的基礎(chǔ)是_。 (2)若圖中A、B是植物細(xì)胞,在細(xì)胞融合之前應(yīng)用 _處理,除去_;A、B到 細(xì)胞C的過(guò)程中,常用的化學(xué)方法是 _;融合完成的標(biāo)志是_。 (3)與植物細(xì)胞相比,動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)融合的 方法是用_處理。,題組訓(xùn)練,圖12379,(4)若利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體,應(yīng)采用_和_進(jìn)行融合,融合后需經(jīng)多次篩選,以得到能產(chǎn)生特異抗體的雜交瘤細(xì)胞,第一次篩選一般利用_進(jìn)行,第二次篩選需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行反復(fù)的_,以篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。 (5)少量生產(chǎn)單克隆抗體時(shí),可將篩選得到的雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)進(jìn)行增殖,該方法的優(yōu)點(diǎn)是_。,答案 (1)植物組織
19、培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) (2)纖維素酶、果膠酶細(xì)胞壁PEG誘導(dǎo)再生出細(xì)胞壁 (3)滅活的病毒 (4)經(jīng)免疫的B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞選擇培養(yǎng)基克隆化培養(yǎng)和抗體陽(yáng)性檢驗(yàn) (5)節(jié)約培養(yǎng)基(成本),易于控制培養(yǎng)條件等,解析 (1)植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交。動(dòng)物細(xì)胞工程的各技術(shù)手段中的基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。(2)植物體細(xì)胞雜交前,先采用酶解法去除細(xì)胞壁,即采用纖維素酶、果膠酶處理除去細(xì)胞壁;誘導(dǎo)細(xì)胞融合常用的化學(xué)方法是PEG誘導(dǎo);原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志是再生出細(xì)胞壁。(3)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有物理法(離心、振動(dòng)、電激等)、化學(xué)法(聚乙二醇),誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法
20、有物理法(離心、振動(dòng)、電激等)、化學(xué)法(聚乙二醇)和生物法(滅活的病毒),故與植物細(xì)胞相比,動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)融合的方法是用滅活的病毒處理。,(4)若利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體,應(yīng)將經(jīng)免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,融合后需經(jīng)多次篩選,以得到能產(chǎn)生特異抗體的雜交瘤細(xì)胞,第一次篩選一般利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行,第二次篩選需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行反復(fù)的克隆化培養(yǎng)和抗體陽(yáng)性檢驗(yàn),以篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。(5)少量生產(chǎn)單克隆抗體時(shí),可將篩選得到的雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)繁殖,該方法的優(yōu)點(diǎn)是節(jié)約培養(yǎng)基(成本),易于控制培養(yǎng)條件等。,22017沈陽(yáng)示范協(xié)作校一模 如圖123710為制備多克隆抗體
21、和單克隆抗體的示意圖,回答下列問(wèn)題: (1)將抗原注射到小鼠體內(nèi)時(shí),小鼠體內(nèi) 發(fā)生了_免疫過(guò)程。圖中選用經(jīng)免 疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì) 胞,與植物體細(xì)胞雜交相比,其特有的融 合方法是_。,圖123710,(2)圖中兩次篩選的目的不同,其中篩選過(guò)程需進(jìn)行_和_,目的是篩選出_。將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)時(shí),需將其置于_的混合氣體培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。 (3)與多克隆抗體相比,單克隆抗體突出的優(yōu)點(diǎn)在于其_,并能大量制備。從目前臨床試驗(yàn)來(lái)看,單克隆抗體主要用于治療癌癥,例如可以將抗癌細(xì)胞的單克隆抗體與放射性同位素、藥物等結(jié)合,制成“生物導(dǎo)彈”,利用單克隆抗體的_作用,在原位殺死癌
22、細(xì)胞,這樣既不損傷正常細(xì)胞,又減少了用藥劑量。,答案 (1)體液用滅活的病毒處理 (2)克隆化培養(yǎng)抗體檢測(cè)能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞含95%的空氣和5%的CO2 (3)特異性強(qiáng)、靈敏度高導(dǎo)向,解析 (1)將抗原注射到小鼠體內(nèi)時(shí),小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了抗體,屬于體液免疫過(guò)程。題圖中選用經(jīng)免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞,與植物體細(xì)胞雜交相比,其特有的融合方法是用滅活的病毒處理。(2)題圖中兩次篩選的目的不同,其中篩選過(guò)程需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),目的是篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)時(shí),需將其置于含95%的空氣和5%的CO2的混合氣體培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。(
23、3)與多克隆抗體相比,單克隆抗體突出的優(yōu)點(diǎn)在于其特異性強(qiáng)、靈敏度高,并能大量制備。從目前臨床試驗(yàn)來(lái)看,單克隆抗體主要用于治療癌癥,例如可以將抗癌細(xì)胞的單克隆抗體與放射性同位素、藥物等結(jié)合,制成“生物導(dǎo)彈”,利用單克隆抗體的導(dǎo)向作用,在原位殺死癌細(xì)胞,這樣既不損傷正常細(xì)胞,又減少了用藥劑量。,12017海南卷 甲、乙兩同學(xué)分別以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料,利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物?;卮鹣铝袉?wèn)題: (1)以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體,在一定條件下進(jìn)行組織培養(yǎng),均能獲得試管苗,其原理是_。 (2)甲、乙同學(xué)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培養(yǎng)基中,均加入了一定量的蔗糖,蔗糖水解后可得到_
24、。若要用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培養(yǎng)獲得幼苗,該細(xì)胞應(yīng)具備的條件是_(填“具有完整的細(xì)胞核”“具有葉綠體”或“已轉(zhuǎn)入抗性基因”)。,歷年真題明考向,(3)圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果,該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由于培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的,這兩種激素是_。A中的愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng)_形成的。 (4)若該種植物是一種雜合體的名貴花卉, 要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都 相同的該種花卉,可用組織培養(yǎng)方法來(lái) 繁殖,在培養(yǎng)時(shí),_(填“能”或 “不能”)采用經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉作為外植體,原因是_ _。,圖123711,答案 (1)綠色葉片和白色花瓣的細(xì)胞具有全能性,在一定條件下能發(fā)育成完整植株
25、(2)葡萄糖、果糖具有完整的細(xì)胞核 (3)細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素脫分化 (4)不能對(duì)雜合體的植株來(lái)說(shuō),其體細(xì)胞的基因型相同,而花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同。用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)得到的花卉基因型不同于原植株,解析 (1)植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。(2)蔗糖是一種二糖,可水解成葡萄糖、果糖。細(xì)胞具有完整的細(xì)胞核即可作為材料進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得幼苗。(3)植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量比值高時(shí),有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低時(shí),有利于芽的分化、抑制根的形成;比例適中時(shí),促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)。(4)要用組織培養(yǎng)方法獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉,培養(yǎng)時(shí)不能采
26、用經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉作為外植體,因?yàn)閷?duì)雜合體的植株來(lái)說(shuō),其體細(xì)胞的基因型相同,而花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同。用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)得到的花卉基因型不同于原植株。,22016全國(guó)卷 圖123712表示通過(guò)核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物 (二倍體)的流程。 回答下列問(wèn)題: (1)圖中A表示正常細(xì)胞核,染色 體數(shù)為2n,則其性染色體的組成 可為_。過(guò)程表示去除 細(xì)胞核,該過(guò)程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行,去核時(shí)常采用_的方法。代表的過(guò)程是_。,圖123712,(2)經(jīng)過(guò)多次傳代后,供體細(xì)胞中_的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此,選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。 (3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全
27、相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是_。 (4)與克隆羊“多莉(利)”培育成功一樣,其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了_。,答案 (1)XX或XY顯微操作胚胎移植 (2)遺傳物質(zhì) (3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響 (4)動(dòng)物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性,解析 (1)二倍體哺乳動(dòng)物的性別決定方式為XY型,A的性別未知,其性染色體組成可能為XX,也可能為XY。核移植時(shí),要通過(guò)顯微操作去除卵母細(xì)胞中的核。早期胚胎可通過(guò)胚胎移植移入受體子宮中。(2)一般來(lái)說(shuō),細(xì)胞傳代培養(yǎng)至1050代左右時(shí),增殖會(huì)逐漸緩慢,以至于完全停止,這時(shí)部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化。目前使用的或冷凍保
28、存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi),以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。(3)克隆動(dòng)物的遺傳物質(zhì)主要來(lái)自于供體核,但卵母細(xì)胞的線粒體中也含有一部分遺傳物質(zhì)。(4)克隆動(dòng)物的成功獲得證明動(dòng)物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。,32014新課標(biāo)全國(guó)卷 某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如圖123713所示。 若要制備雜交瘤細(xì)胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條),并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色 體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中, 再加入、聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合, 經(jīng)
29、篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè),得到不斷 分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。,圖123713,回答下列問(wèn)題: (1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí),所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16 000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)_ 次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是_小鼠,理由是_。 (2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有_,體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是_。 (3)雜交瘤細(xì)胞中有_個(gè)細(xì)胞核,染色體數(shù)目最多是_條。 (4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是_。,答案 (1)四YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高 (2)B淋
30、巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100% (3)1100 (4)不能無(wú)限增殖,解析 (1)據(jù)圖分析,第四次免疫后小鼠Y的血清抗體效價(jià)達(dá)到 16 000 以上。達(dá)到要求后的 X、Y、Z 這3只小鼠中,小鼠 Y 的 B 淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體效價(jià)最高,最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外,還有骨髓瘤細(xì)胞和 B 淋巴細(xì)胞的自身融合產(chǎn)物,由于細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%,故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。(3)雜交瘤細(xì)胞形成后,由于核膜具有流動(dòng)性,故小鼠的免疫B淋巴細(xì)胞細(xì)胞核與其骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞核會(huì)融合形成一個(gè)
31、雜交的細(xì)胞核,因此染色體數(shù)目最多是100條。(4)未融合的 B 淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后,仍然是不能無(wú)限增殖的細(xì)胞,同時(shí) B淋巴細(xì)胞不可能渡過(guò)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過(guò)程中的兩次“危機(jī)”而達(dá)到細(xì)胞系水平。,12017天津六校高三期中 在現(xiàn)代生物科技的應(yīng)用中,不需要進(jìn)行檢測(cè)與篩選的是 () A對(duì)植物的離體組織進(jìn)行培養(yǎng),大規(guī)模培育優(yōu)良品種 B將鼠的骨髄瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合,制備單克隆抗體 C利用植物細(xì)胞工程技術(shù)培育“白菜甘藍(lán)” D將抗蟲基因?qū)胫参锛?xì)胞,培育具有抗蟲特性的新植株,答案 A,解析對(duì)植物的離體組織進(jìn)行培養(yǎng),大規(guī)模培育優(yōu)良品種,不需要進(jìn)行檢測(cè)與篩選。細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞不一定是所需要的,需
32、進(jìn)行篩選。植物細(xì)胞工程培育的雜種植株不一定能表達(dá)出相應(yīng)的性狀,需進(jìn)行檢測(cè)。轉(zhuǎn)基因植株不一定能表現(xiàn)出所需要的性狀,需進(jìn)行檢測(cè)與篩選。,22017江蘇常州模擬 下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是 () A動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中往往使用液體培養(yǎng)基 B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是為了培養(yǎng)動(dòng)物個(gè)體 C在培養(yǎng)過(guò)程中通常要通入5%的CO2刺激細(xì)胞呼吸 D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中可用胃蛋白酶將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞,答案 A,解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基,A正確;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得細(xì)胞和細(xì)胞產(chǎn)物,通過(guò)核移植技術(shù)才能獲得克隆動(dòng)物,B錯(cuò)誤;CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH,C錯(cuò)誤;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中常要用到胰蛋白酶或膠原蛋白酶,用來(lái)分散細(xì)胞,D錯(cuò)誤。,32017天津紅橋區(qū)一模 從同一頭牛中取多個(gè)供體細(xì)胞培養(yǎng)出多頭克隆牛,這些牛在性狀上卻并不完全相同,下列有關(guān)其原因的敘述,錯(cuò)誤的是 () A基因可能發(fā)生變異 B核基因發(fā)生基因重組 C受體細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因不同 D性狀變異可由環(huán)境條件引起,答案 B,解析克隆牛在性狀上卻不完全相同的原因可能有基因可能發(fā)生變異,受體細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因不同,性狀變異可由環(huán)境條件引起等,A、C、D正確;克隆屬于無(wú)性生殖,該過(guò)程中核基因不會(huì)發(fā)生基因重組,B錯(cuò)誤。,42017北京西城區(qū)
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