內(nèi)包裝材料微生物檢驗(yàn)規(guī)程

1、內(nèi)包裝材料微生物檢驗(yàn)規(guī)程1 目的為內(nèi)包裝材料微生物檢驗(yàn)提供書面規(guī)范的檢驗(yàn)操作程序。2 范圍本程序適用于微生物檢驗(yàn)人員在對內(nèi)包裝材料取樣和檢驗(yàn)時(shí)使用。3 職責(zé)：3.1 微生物檢驗(yàn)人員負(fù)責(zé)按此規(guī)程進(jìn)行操作。3.2 質(zhì)量部QC主管負(fù)責(zé)檢查檢驗(yàn)過程是否符合本規(guī)程。4 定義:（薄膜類）內(nèi)包裝材料: 直接接觸藥品的各種片材、薄膜類包裝材料，如鋁箔、PVC 、空膠囊、紙鋁膜、塑料瓶等。 5 程序：5.1 取樣5.1.1 微生物檢驗(yàn)用的樣品，取樣必須在取樣間內(nèi)進(jìn)行，待檢驗(yàn)的內(nèi)包裝材料放置無菌塑料袋內(nèi)。5.1.2 薄膜類包裝材料: 鋁箔、PVC、噴鋁復(fù)合膜等，隨機(jī)打開三個(gè)單獨(dú)的包裝單位，用已滅菌的剪刀剪取所需樣

2、品放于無菌塑料袋中并注意及時(shí)封口。檢驗(yàn)量為200cm2,常規(guī)取樣量為檢驗(yàn)量的3倍。如有特殊原因，檢驗(yàn)量不能滿足，應(yīng)如實(shí)記錄實(shí)際的檢驗(yàn)量。5.2 檢驗(yàn)5.2.1 樣品準(zhǔn)備以無菌操作法從所取樣品中等分地剪取共計(jì)100 cm2 大小的薄膜加入到100 ml無菌的生理鹽水中，充分振搖，得100 ml 樣品供試液。5.2.2 操作1）用無菌吸管各取2ml均勻水樣，分別置于4個(gè)無菌干燥的平皿中，其中2個(gè)平皿注入約45的營養(yǎng)瓊脂，另2個(gè)平皿注入約45的玫瑰紅鈉瓊脂，混勻，待凝固。2）倒置營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板于 30-35中至少培養(yǎng) 2 天。3）倒置玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基平板于 25-28中至少培養(yǎng) 3天。4）計(jì)算

3、菌落數(shù)：菌落數(shù)（個(gè)）/100cm2 = 2個(gè)平皿菌落數(shù)之和 x 25 ，將結(jié)果記錄在實(shí)驗(yàn)記錄上。5.2.3 陰性對照微生物計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)中，每個(gè)樣品所使用的每瓶營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基都必須做陰性對照。5.2.4 檢驗(yàn)限度細(xì)菌總數(shù) 1000 個(gè)/100 cm2；霉菌總數(shù) 100 個(gè)/100 cm2。如果在平皿上沒有發(fā)現(xiàn)菌落，將檢驗(yàn)結(jié)果記錄為 10個(gè)/100 cm25.3 大腸桿菌檢驗(yàn)5.3.1 增菌培養(yǎng) 在無菌操作條件下剪下約100cm2薄膜類包裝材料, 加入100 ml BL培養(yǎng)基中。混勻后置361培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至少24小時(shí)。以上目的是盡可能使微生物在增菌培養(yǎng)基BL中恢復(fù)增長。5.3.2 分離培養(yǎng)搖勻增菌培養(yǎng)基后，用無菌接種環(huán)種沾取少許，接種劃線在MacC平板上，倒置培養(yǎng)MacC平板于30-35培養(yǎng)箱中至少24小時(shí)。培養(yǎng)結(jié)束后，檢查MacC平板上有無菌落生長。如果生長的菌落符合以下特征，則需進(jìn)一步鑒別。a)MacC平板上菌落外觀：玫瑰紅色菌落，有時(shí)周圍有膽鹽析出。b)鏡檢：G球桿菌。c)氧化酶試驗(yàn)：陰性。5.3.3 鑒別大腸桿菌使用無菌接種環(huán)，接種可疑菌落于營養(yǎng)瓊脂平板上。倒置培養(yǎng)營養(yǎng)瓊脂平板于30-35培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至少24小時(shí)。通過IMVIC實(shí)驗(yàn)進(jìn)行大腸桿菌鑒別。5.3.4 檢驗(yàn)結(jié)果判定如果檢品中沒有發(fā)現(xiàn)符合大腸桿菌特征的菌落，即結(jié)論為檢品中未檢出大腸桿菌。如果檢品中發(fā)現(xiàn)