2016_2017學年高中生物第1章無菌操作技術實踐第2節(jié)分離特定的微生物并測定其數(shù)量學案蘇教版.doc

第二節(jié)分離特定的微生物并測定其數(shù)量1認識各種微生物形成的菌落特征。2學會利用涂布平板法分離、培養(yǎng)微生物，并測定其數(shù)量。(重難點)3掌握利用選擇培養(yǎng)基分離特定微生物的方法。(重點)微 生 物 的 分 離1分離原理在實驗室中利用選擇培養(yǎng)基可以篩選和分離出某種微生物，然后在高度稀釋的條件下，在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)該微生物形成的單個菌落，即為純培養(yǎng)物。2分離方法(1)平板分離法：包括涂布平板法和混合平板法。能將單個微生物分離和固定在固體培養(yǎng)基表面或里面，每個孤立的活微生物體經過生長、繁殖均可形成單個菌落。(2)選擇培養(yǎng)分離：科學家針對某種微生物的特性，設計一個特定的環(huán)境，使之特別適合這種微生物的生長，而抑制其他微生物的生長。這種通過選擇培養(yǎng)進行微生物純培養(yǎng)分離的技術，稱為選擇培養(yǎng)分離。(3)根據(jù)菌落特征初步分離：菌落的含義：是指單個微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內部生長、繁殖到一定程度，形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結構的子細胞生長群體。菌落特征：不同微生物在特定培養(yǎng)基上生長形成的菌落一般都具有穩(wěn)定的特征，如菌落的大小、形狀、邊緣特征、隆起程度、顏色等，這些可以成為對微生物進行分類、鑒定的重要依據(jù)。合作探討探討1：在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個菌落含有多種細菌嗎？提示：標準的單個菌落中只含有一種細菌。探討2：如果要分離厭氧菌，應在什么條件下培養(yǎng)？提示：在無氧條件下培養(yǎng)。探討3：在選擇培養(yǎng)分離微生物的過程中，“選擇培養(yǎng)”的培養(yǎng)基按物理性質劃分屬于什么培養(yǎng)基？為什么？提示：固體培養(yǎng)基。便于選擇、分離所需要的微生物。思維升華1涂布平板法與混合平板法的比較比較操作特點結果涂布平板法取一定稀釋度的樣品涂布平板用無菌玻璃刮鏟將樣品涂布均勻先制作瓊脂平板后加入菌液細菌菌落通常僅在平板表面生長混合平板法取一定稀釋度的樣品與熔化的瓊脂混合將與樣品混合后的瓊脂倒入無菌培養(yǎng)皿菌液與瓊脂混合，共同倒平板細菌菌落出現(xiàn)在平板表面及內部2.選擇培養(yǎng)基的選擇作用(1)原理：根據(jù)不同微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性不同而制備培養(yǎng)基。(2)方法：在培養(yǎng)基中加入某種化學物質。例如，加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌；加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。例如，缺乏氮源時可以分離固氮微生物；石油作為唯一碳源時，可以分離出能消除石油污染的微生物；用含無機碳源的培養(yǎng)基分離自養(yǎng)型微生物。改變微生物的培養(yǎng)條件。例如，將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)可以得到耐高溫的微生物；用普通培養(yǎng)基在無氧條件下分離厭氧型和兼性厭氧型微生物。1微生物的接種方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，關于兩者的區(qū)別下列說法正確的是()比較方面平板劃線法稀釋涂布平板法需在無菌條件下操作不需無菌操作培養(yǎng)基中不加瓊脂培養(yǎng)基中加有瓊脂不可計算菌液中的活菌數(shù)可計算菌液中的活菌數(shù)需要接種環(huán)需要玻璃刮鏟A.、B、C、 D、【解析】平板劃線法和稀釋涂布平板法都需要進行無菌操作，避免雜菌污染；平板劃線法和稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中都加有瓊脂；平板劃線法采用接種環(huán)或接種針進行接種，而稀釋涂布平板法采用玻璃刮鏟進行接種；稀釋涂布平板法可計算菌液中的活菌數(shù)，平板劃線法不能計算出菌液中的活菌數(shù)。【答案】B2下面是本課題將用到的培養(yǎng)基配方，請根據(jù)下表回答下面的問題： 【導學號：67850009】編號成分含量KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖10.0 g尿素1.0 g瓊脂15.0 g將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL(1)在該培養(yǎng)基的配方中，為微生物提供碳源的是_，提供氮源的是_。(2)絕大多數(shù)微生物都能利用_，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解_。(3)分析該培養(yǎng)基的配方，該培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用？如果具有，又是如何進行選擇的？【解析】碳源是提供碳元素的物質，氮源是提供氮元素的物質。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。絕大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以這種培養(yǎng)基對微生物有選擇作用。選擇的原則是只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長?！敬鸢浮?1)葡萄糖尿素(2)葡萄糖尿素(3)具有。以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可以分離到產生脲酶的微生物(即分解尿素的微生物)。土 壤 微 生 物 的 分 離 、 培 養(yǎng) 與 數(shù) 量 測 定1涂布平板法培養(yǎng)和計數(shù)土壤微生物(1)過程：(2)計數(shù)：每克土壤樣品的細菌數(shù)某一稀釋度幾次重復培養(yǎng)后的菌落平均數(shù)稀釋倍數(shù)(涂布所用稀釋液為1 mL)2顯微鏡直接計數(shù)法(1)原理：利用血球計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。(2)血球計數(shù)板：血球計數(shù)板是一塊特制的載玻片。其上有特定面積為1 mm2、高為0.1 mm的計數(shù)室，一個計數(shù)室又被分成25個(或16個)中方格，每個中方格再被劃分成16個(或25個)小方格，每個計數(shù)室都由400個小方格組成。(3)操作過程：將清潔干燥的血球計數(shù)板蓋上蓋玻片，用無菌的毛細滴管吸取搖勻的土壤微生物懸液，在蓋玻片的邊緣滴一小滴，讓菌液沿著縫隙靠毛細滲透作用自動進入計數(shù)室。加樣后靜止5 min，然后在顯微鏡下計數(shù)45個中格中的細菌數(shù)，并求出每個小格所含細菌的平均數(shù)，再按計算公式求出每毫升樣品中所含的菌體總數(shù)。(4)計算公式：1 mL懸液所含菌體總數(shù)每小格平均菌體數(shù)400104稀釋倍數(shù)。3分離土壤中能分解纖維素的微生物(1)實驗目的：分離以纖維素為唯一碳源的微生物。(2)培養(yǎng)基配方特點：纖維素是唯一的碳源。(3)基本步驟：制備培養(yǎng)基制備土壤懸液接種培養(yǎng)觀察。合作探討探討1：你認為涂布平板法計數(shù)的菌落數(shù)與實際活菌數(shù)之間存在什么樣的關系？提示：實際活菌數(shù)大于計數(shù)的菌落數(shù)目。原因是有的菌落不只由一個細菌生長而成。探討2：常見的菌數(shù)計數(shù)的方法有哪些？它們所利用的原理分別是什么？提示：(1)顯微鏡直接計數(shù)法。其原理：利用特定的血球計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。(2)間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)。其原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。思維升華1直接計數(shù)法與間接計數(shù)法的比較微生物生長量的測定有計數(shù)法、重量法、生理指標法等，但是一般使用計數(shù)法，計數(shù)法可分為直接計數(shù)法和間接計數(shù)法。二者比較如下：項目直接計數(shù)法間接計數(shù)法主要用具顯微鏡、細菌計數(shù)板培養(yǎng)基計數(shù)依據(jù)菌株本身培養(yǎng)基上菌落數(shù)優(yōu)點計數(shù)方便、操作簡單計數(shù)的是活菌缺點死菌、活菌都計算在內操作較復雜，且有一定誤差計算公式每毫升原液含菌株數(shù)400104每小格平均菌株數(shù)稀釋倍數(shù)每毫升原液含菌株數(shù)培養(yǎng)基上平均菌落數(shù)稀釋倍數(shù)(涂布所用稀釋液為1 mL)2.篩選能分解纖維素的微生物流程圖1某同學在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上測得平板上的菌落數(shù)的平均值為215，那么每毫升樣品中菌落數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1 mL)()A2.15108B2.15109C215 D21.5【解析】稀釋倍數(shù)為106,0.1 mL稀釋液的菌落數(shù)的平均值為215，則每毫升樣品中菌落數(shù)就為2150.11062.15109?！敬鸢浮緽2(2016四川高考)圖甲是從土壤中篩選產脲酶細菌的過程，圖乙是脲酶基因轉錄的mRNA部分序列。(1)圖中選擇培養(yǎng)基應以_為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加_作指示劑，產脲酶細菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成_色。(2)在5個細菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1 mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的細菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過程采取的接種方法是_，每克土壤樣品中的細菌數(shù)量為_108個；與血細胞計數(shù)板計數(shù)法相比，此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)較_。(3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UAA)。突變基因轉錄的mRNA中，終止密碼為_，突變基因表達的蛋白含_個氨基酸?！窘馕觥?1)脲酶能夠催化尿素水解釋放出氨和二氧化碳，因此選擇培養(yǎng)基中應以尿素為唯一氮源。挑取單菌落接種到加有酚紅指示劑的鑒別培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，菌落周圍的氨增加，pH升高，酚紅指示劑將變紅。(2)該過程采取的接種方法為稀釋涂布平板法。利用稀釋涂布平板計數(shù)法對細菌進行計數(shù)時，應選擇菌落數(shù)在30300的平板，因此平板上長出的細菌菌落平均數(shù)為(156178191)3175個。每克土壤樣品中的細菌數(shù)為1750.11051.75108。血細胞計數(shù)板計數(shù)法能將死細胞計算在內，而稀釋涂布平板計數(shù)法只能計數(shù)活細胞(只有活細胞才能在平板上生長)，故一般血細胞計數(shù)板計數(shù)法要比稀釋涂布平板計數(shù)法的結果大。(3)箭頭處插入70個核苷酸，箭頭后密碼子的解讀方式為*AG，UGA，GAA對比3種終止密碼可發(fā)現(xiàn)，此處的終止密碼為UGA。從起始密碼到終止密碼之前共有27372個堿基，因此突變基因表達的蛋白含115個氨基酸?！敬鸢浮?1)尿素酚紅紅(2)稀釋涂布平板法1.75少(3)UGA1151(2016徐州高二檢測)下列關于微生物分離和培養(yǎng)的有關敘述，錯誤的是()A微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進行消毒B測定土壤樣品中的細菌數(shù)目，常用菌落計數(shù)法C分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度D分離能分解尿素的細菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源【解析】微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進行滅菌，而不是消毒；測定土壤樣品中的細菌數(shù)目，常用菌落計數(shù)法而一般不用活菌計數(shù)法；分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度以便能從中選擇出菌落數(shù)在30300間的平板進行計數(shù)；分離能分解尿素的細菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源?！敬鸢浮緼2分離土壤中分解尿素的細菌，對培養(yǎng)基的要求是() 【導學號：67850010】加尿素不加尿素加瓊脂不加瓊脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸鹽不加硝酸鹽ABC D【解析】要分離土壤中分解尿素的細菌，培養(yǎng)基中尿素應是唯一的氮源，不能加硝酸鹽；在固體培養(yǎng)基上形成菌落，要加瓊脂作凝固劑；分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物，要加有機碳源(如葡萄糖)?！敬鸢浮緾3用涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)時，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中的活菌數(shù)，原因是()A平板上的一個菌落就是一個細菌B菌落中的細菌數(shù)是固定的C此時的一個菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個活菌D此方法統(tǒng)計的菌落數(shù)一定與活菌的實際數(shù)相同【解析】當稀釋倍數(shù)適宜時，培養(yǎng)基上的一個菌落可能來源于樣品稀釋液中的一個活菌，但也可能由2個或2個以上活菌生長而成，因此菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)低。【答案】C4(2016全國乙卷)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下：配制培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；制作無菌平板；設置空白對照組和若干實驗組，進行相關操作；將各組平板置于37 恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)?；卮鹣铝袉栴}：(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于_。若要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分X通常是_。(2)步驟中，實驗組的操作是_。(3)若在某次調查中，某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板，而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落，這種結果說明在此次調查中出現(xiàn)了_現(xiàn)象。若將30(即366)個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法_(填“正確”或“不正確”)。【解析】(1)牛肉膏和蛋白胨中均含有氮元素，因此微生物所需的氮來源于牛肉膏和蛋白胨。若要完成步驟，需要進行倒平板操作，用到的是固體培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中要有瓊脂。(2)該實驗的空白對照組為不進行處理的無菌平板，實驗組的操作為將各無菌平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露相同時間。(3)若空白對照組的平板上出現(xiàn)了菌落，說明實驗過程中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象?？瞻讓φ战M的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落，導致實驗變量不唯一，不能確定實驗組平板上的菌落是否僅由教室內不同高度空氣中的微生物形成，因此不能求出實驗組的菌落平均數(shù)?！敬鸢浮?1)牛肉膏、蛋白胨瓊脂(2)將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間(3)污染不正確課堂小結：網絡構建核心回扣1.實驗室中分離微生物的方法有平板分離法和選擇培養(yǎng)分離，平板分離法常用的有涂布平板法和混合平板法。2.針對某種微生物的特性，設計一個特定的環(huán)境，使之特別適合這種微生物的生長，而抑制其他微生物的生長。這種通過選擇培養(yǎng)進行微生物純培養(yǎng)分離的技術稱為選擇培養(yǎng)分離。3.測定微生物數(shù)量的常用方法有涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)法。涂布平板法計數(shù)的結果與待測樣品中真正的含菌數(shù)量相比往往偏低。4.涂布平板法培養(yǎng)和計數(shù)微生物的流程為：準備實驗器材采集土壤，制備懸液選擇適于分離特定微生物的培養(yǎng)基接種培養(yǎng)與觀察計數(shù)菌落。5.涂布平板法計數(shù)微生物的公式：每克土壤樣品的細菌數(shù)某一稀釋度幾次重復培養(yǎng)后的菌落平均數(shù)稀釋倍數(shù)(涂布所用稀釋液為1 mL)學業(yè)分層測評(三)(建議用時：45分鐘)學業(yè)達標1下列關于微生物分離的敘述，錯誤的是()A平板分離法能將單個微生物經過培養(yǎng)形成便于移植的菌落B只有細菌才可以形成菌落，所以只有分離細菌時才可能獲得菌落C平板分離法有涂布平板法和混合平板法等D涂布平板法得到的菌落僅在平板的表面生長【解析】大多數(shù)細菌、許多真菌和單細胞藻類均能在固體培養(yǎng)基上形成菌落?！敬鸢浮緽2產生標準菌落的細菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是()A一個細菌，液體培養(yǎng)基B許多細菌，液體培養(yǎng)基C一個細菌，固體培養(yǎng)基D許多細菌，固體培養(yǎng)基【解析】菌落是指單個微生物的子細胞群體，在固體培養(yǎng)基上肉眼可見，是作為菌種鑒定的重要依據(jù)，若是多個細菌形成的菌落則不是標準菌落?！敬鸢浮緾3有關涂布平板法的敘述錯誤的是()A首先將菌液進行一系列的梯度稀釋B然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面C適宜條件下培養(yǎng)D結果都可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落【解析】涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)的過程。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落?！敬鸢浮緿4從土壤中分離能分解尿素的微生物與分離能分解纖維素的微生物時，所利用的培養(yǎng)基中最明顯的特點是()A前者尿素是唯一的氮源，后者纖維素是唯一的碳源B二者都具有瓊脂成分C二者的pH相同D以上均不正確【解析】由于分離微生物所利用的是選擇培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中有與其他培養(yǎng)基不同的某種成分，該種成分是由培養(yǎng)的目的微生物而定的。分離能分解尿素的微生物，所利用的培養(yǎng)基中尿素是唯一的氮源，凡是能分解尿素的微生物就能生存，否則就不能生存， 由相同的原理可知，分離能分解纖維素的微生物時，纖維素是唯一的碳源?！敬鸢浮緼5選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物，通過不含有機物的培養(yǎng)基、缺氮培養(yǎng)基；含尿素(不含其他氮源)的培養(yǎng)基，可從土壤中分離出的微生物依次是 () 【導學號：67850011】A硝化細菌、放線菌、根瘤菌B根瘤菌、青霉菌、固氮菌C異養(yǎng)型細菌、放線菌、硝化細菌D自養(yǎng)型細菌、固氮菌、分解尿素的細菌【解析】選擇培養(yǎng)基是根據(jù)不同微生物的代謝特點，通過改變培養(yǎng)基的成分，以達到選擇某種微生物的目的。不含有機物的培養(yǎng)基可以選擇自養(yǎng)型微生物，缺少氮元素的培養(yǎng)基可以培養(yǎng)固氮微生物，含尿素(不含其他氮源)的培養(yǎng)基可以選擇能分解尿素的微生物?！敬鸢浮緿6通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需要的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上，大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素，可以抑制細菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入10%的酚，可以抑制細菌和霉菌。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分離出()A大腸桿菌B霉菌C放線菌 D圓褐固氮菌【解析】固氮細菌的生長不需要從培養(yǎng)基中獲得氮源，可在缺乏氮源的培養(yǎng)基上正常生長，因此可分離出圓褐固氮菌；在加入青霉素的培養(yǎng)基上不能生長細菌和放線菌，可分離出霉菌；在加入10%的酚的培養(yǎng)基中，因該培養(yǎng)基能抑制細菌和霉菌的生長，所以可分離出放線菌。利用上述三種培養(yǎng)基無法分離出大腸桿菌。【答案】A7下列說法中不正確的是()A科學家從7080 熱泉中分離得到耐高溫的Taq DNA聚合酶B統(tǒng)計某一稀釋度的5個平板的菌落數(shù)依次為M1、M2、M3、M4、M5，以M3作為該樣品菌落數(shù)的估計值C設置對照實驗的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度D同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類最多【解析】Taq DNA聚合酶是從一種水生耐熱菌中分離提取的，這種耐熱菌能在7080 的高溫條件下生長。統(tǒng)計平板的菌落數(shù)時，應選擇菌落數(shù)在30300的平板，每個稀釋度至少取3個平板，為了提高準確度，應求其平均值。設置對照實驗的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度。土壤有“微生物的天然培養(yǎng)基”之稱，同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類最多。【答案】B8下列關于分離纖維素分解菌實驗的敘述，錯誤的是()A經選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上B選擇培養(yǎng)這一步可省略，但培養(yǎng)纖維素分解菌少C經稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色D對照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上【解析】經選擇培養(yǎng)后，再經稀釋，才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上；選擇培養(yǎng)可省略；經稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色；設置對照能證明經選擇培養(yǎng)的確得到了欲分離的微生物?！敬鸢浮緼9用涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)，在對應稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結果，正確的是()A涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是230B涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是215和260，取平均值238C涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、212和256，取平均值163D涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210、240和256，取平均值235【解析】在設計實驗時，一定要涂布至少3個平板，作為重復組，才能增強實驗的說服力與準確性，所以A、B兩項不正確。C項雖涂布了3個平板，但是其中1個平板的計數(shù)結果與另兩個相差太遠，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地用3個平板的計數(shù)值來求平均值?！敬鸢浮緿10(2016徐州高二檢測)在探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量變化的實驗中，需利用計數(shù)板對微生物細胞進行直接計數(shù)。計數(shù)板是一個特制的可在顯微鏡下觀察的玻片，樣品就滴在計數(shù)室內。計數(shù)室由2516400個小室組成，容納液體總體積為0.1 mm3。某同學操作時將1 mL酵母菌樣品加99 mL無菌水稀釋，蓋上蓋玻片，用無菌吸管吸取少許使其自行滲入計數(shù)室，并用濾紙吸去多余菌液，進行觀察計數(shù)。(1)在實驗中，某同學的部分實驗操作過程是這樣的：從靜置試管中吸取酵母菌培養(yǎng)液加入計數(shù)板進行計數(shù)，并記錄數(shù)據(jù)；把酵母菌培養(yǎng)液放置在冰箱中；第七天再取樣計數(shù)，記錄數(shù)據(jù)，統(tǒng)計分析繪成曲線。請糾正該同學實驗操作中的3處錯誤：_；_；_；(2)在實驗前應該對計數(shù)板、吸管等器具進行_處理。(3)如果一個小方格內酵母菌過多，難以數(shù)清，應采取的措施是_。(4)如果觀察到如圖所示a、b、c、d、e 5個大格共80個小室內共有酵母菌48個，則上述1 mL酵母菌樣品中約有酵母菌_個；要獲得較為準確的數(shù)值，減少誤差，你認為該怎么做？_。【解析】(1)在從試管中吸取酵母菌之前，應將試管輕輕振蕩幾次，目的是使酵母菌在培養(yǎng)液中均勻分布。酵母菌的培養(yǎng)液應置于適宜條件下，并且每隔24小時就要統(tǒng)計一次菌落數(shù)目。(2)為了避免雜菌污染，實驗中所用吸管、計數(shù)板等器具需進行滅菌處理。(3)(4)解答時要注意以下兩點：統(tǒng)一單位；注意體積的變化。400個小室共容納液體總體積為0.1 mm3，則80個小室容納體積為：2102mm3，含酵母菌48個，又因酵母菌培養(yǎng)液總體積為100 mL，統(tǒng)一單位后即可求出酵母菌個數(shù)?！敬鸢浮?1)應將試管輕輕振蕩幾次再吸取酵母菌培養(yǎng)液進行計數(shù)應將酵母菌培養(yǎng)液放置在適宜溫度下培養(yǎng)應連續(xù)七天觀察、取樣計數(shù)并記錄數(shù)據(jù)(2)滅菌(3)適當稀釋(4)2.4108多次計數(shù)，求平均值能力提升11下列關于分離與培養(yǎng)土壤微生物的操作，敘述錯誤的是() 【導學號：67850012】A制備土壤懸液時，應依此配制成濃度分別為102、103、104、105、106、107、108g/mL的土壤懸液B制平板時，應將熔化的培養(yǎng)基冷卻到4550 后再倒入培養(yǎng)皿中，并迅速蓋好培養(yǎng)皿蓋C接種時應從最低的土壤懸液開始，并且每個濃度設置3個重復組D計數(shù)菌落時，應選取菌落數(shù)為100300的一組為代表進行統(tǒng)計【解析】分離與培養(yǎng)土壤微生物的操作過程中，對土壤懸液應進行10倍濃度梯度差的稀釋，并稀釋至108g/mL。制平板時應防止雜菌的污染，接種時應從最低的土壤懸液開始，并且每個濃度設置3個重復組。計數(shù)時應選取菌落數(shù)為30300的一組為代表進行統(tǒng)計?！敬鸢浮緿12現(xiàn)有兩種固體培養(yǎng)基，已知其配制時所加的成分和含量如下表，用這兩種培養(yǎng)基分別去分離土壤中的兩種微生物，你認為它們適于分離()A.甲培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌；乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌B甲培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌；乙培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌C甲培養(yǎng)基適于分離酵母菌；乙培養(yǎng)基適于分離真菌D甲培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型共生固氮菌；乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型共生固氮菌【解析】固氮菌中能獨立生存的是自生固氮菌，甲培養(yǎng)基中含有的葡萄糖和淀粉是有機物，由此推出該培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型的自生固氮菌；乙培養(yǎng)基中不含有機碳源，所以可用來分離自養(yǎng)型的自生固氮菌?！敬鸢浮緽13實驗測定鏈霉素對3種細菌的抗生素效應，用3種細菌在事先準備好的瓊脂塊平板上畫3條等長的平行線(3條線均與圖中的鏈霉素帶接觸)，將平板置于37 條件下恒溫培養(yǎng)3天，結果如圖所示。從實驗結果分析，下列敘述不正確的是() 【導學號：67850013】A鏈霉素能阻止結核菌的生長B鏈霉素對結核菌比對霍亂菌更有效C鏈霉素對結核菌比對傷寒菌更有效D鏈霉素可以用于治療傷寒【解析】鏈霉素能阻止霍亂菌和結核菌的生長繁殖，不能阻止傷寒菌的生長繁殖，鏈霉素對結核菌比對霍亂菌更有效，所以A、B、C正確。鏈霉素不能用于治療傷寒菌感染的傷寒病人?！敬鸢浮緿14尿素是一種重要的農業(yè)肥料，但若不經細菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類、數(shù)量繁多，某生物小組試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示，實驗步驟如下圖所示。請分析回答：KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O葡萄糖尿素瓊脂1.4 g2.1 g0.2 g10 g1 g15 g(1)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選_，這種培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的_和_，實驗中需要振蕩培養(yǎng)，目的是_。(3)轉到固體培養(yǎng)基上時，常采用_法接種，獲得單個菌落后繼續(xù)篩選。(4)下列材料或用具中，需要滅菌的是_；需要消毒的是_(填序號)。培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管實驗操作者的雙手【解析】(1)培養(yǎng)基中加入尿素為唯一氮源能夠篩選出能分解尿素的細菌，此培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)