6 食品添加劑 阿力甜.doc

食品添加劑 L-天冬氨酰-N-（2,2,4,4-四甲基-3-硫化三亞甲基）-D-丙氨酰胺（阿力甜）1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品添加劑L-天冬氨酰-N-（2,2,4,4-四甲基-3-硫化三亞甲基）-D-丙氨酰胺(阿力甜)。食品添加劑L-天冬氨酰-N-（2,2,4,4-四甲基-3-硫化三亞甲基）-D-丙氨酰胺(阿力甜)為白色結(jié)晶粉末，無味或略有特殊性氣味。2 分子式、結(jié)構(gòu)式和相對(duì)分子質(zhì)量 2.1 分子式C14H25N3O4S2.5H2O2.2 結(jié)構(gòu)式2.3 相對(duì)分子質(zhì)量376.5 3 技術(shù)要求應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1 技術(shù)要求項(xiàng) 目指 標(biāo)檢驗(yàn)方法阿力甜（以干基計(jì)），w /%98.0101.0附錄A 中A.3-異構(gòu)體（以干基計(jì)），w/% 0.3附錄A中A.3丙氨酸酰胺（以干基計(jì)），w/% 0.2附錄A中A.3水分，w/% 1113GB/T 6283比旋光度m(25,D)/( )dm2 kg-1+40+50附錄A中A.4灼燒殘?jiān)?，w/% 1.0GB/T 9741（80025）鉛(Pb)/（mg/kg） 1GB 5009.12附錄A檢驗(yàn)方法A.1 一般規(guī)定除非另有說明，在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑和GB/T 6682中規(guī)定的三級(jí)水。試驗(yàn)方法中所用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、雜質(zhì)測(cè)定用標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑及制品，在沒有注明其他要求時(shí)，均按GB/T 601、GB/T 602和GB/T 603之規(guī)定制備。試驗(yàn)中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時(shí)，均指水溶液。A.2 鑒別試驗(yàn)A.2.1 溶解性易溶于水和乙醇。A.2.2 紅外譜圖對(duì)照紅外譜圖與附錄B圖B.1給出的阿力甜紅外標(biāo)準(zhǔn)譜圖一致。A.2.3 pH50g/L樣品溶液的pH為5.06.0。A.2.4 顯色反應(yīng)A.2.4.1 稱取300mg茚三酮加入100mL正丁醇和2mL冰乙酸中配置成溶液，取此溶液5mL，加入10mg樣品，加熱至緩慢回流，應(yīng)出現(xiàn)亮藍(lán)紫色。A.2.4.2 取5mL新鮮制備的c(1/5KMnO4)=0.001mol/L高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液，加10mg樣品并充分混合，溶液由紫色變成棕色。A.3 阿力甜含量、-異構(gòu)體含量和丙氨酸酰胺含量的測(cè)定A.3.1 方法提要用反相離子對(duì)高效液相色譜測(cè)定法，在選定的工作條件下，通過色譜柱使樣品溶液中各組分分離，用紫外吸收檢測(cè)器檢測(cè)，用外標(biāo)法定量，計(jì)算樣品中阿力甜、異構(gòu)體和丙氨酸酰胺的含量。A.3.2 試劑和材料A.3.2.1 甲醇。A.3.2.2 乙腈：色譜級(jí)，在210nm透光率大于90%。A.3.2.3 -異構(gòu)體：標(biāo)準(zhǔn)樣品。A.3.2.4 丙氨酸酰胺：標(biāo)準(zhǔn)樣品。A.3.2.5 阿力甜：標(biāo)準(zhǔn)樣品。 A.3.2.6 緩沖溶液：稱取0.69g磷酸一鈉（一水合物）和4.32g 1-辛基硫酸鈉，精確至0.0001g，置于1000mL容量瓶中。加入200mL水使其溶解，用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.5，加水稀釋至刻度。經(jīng)孔徑為0.22m微孔濾膜或相當(dāng)?shù)臑V膜過濾。A.3.3 儀器和設(shè)備A.3.3.1 高效液相色譜系統(tǒng)(HPLC)A.3.3.1.1 恒流泵。A.3.3.1.2 紫外吸收檢測(cè)器。A.3.4 色譜分析條件推薦的色譜柱及典型操作條件見表A.1。其他能達(dá)到同等分離程度的色譜柱和色譜操作條件均可使用。表A.1 色譜柱和典型色譜操作條件色譜柱15 cm x 0.4 cm NovaPak C18 柱溫室溫流動(dòng)相見A.3.5.1流動(dòng)速度/( mL /min)1.0檢測(cè)器檢測(cè)波長/nm217A.3.5 分析步驟A.3.5.1 流動(dòng)相的制備準(zhǔn)確量取乙腈和緩沖溶液，體積比為1:3，充分混合。經(jīng)真空脫氣。A.3.5.2 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的制備A.3.5.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液A1：稱取異構(gòu)體和丙氨酸酰胺各約25mg，精確至0.0001g，移入500mL容量瓶中。加50mL甲醇使之溶解，用水稀釋至刻度。存儲(chǔ)于冰箱中。A.3.5.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液A2：移取15mL0.02mL標(biāo)準(zhǔn)溶液A1至50mL容量瓶中，用水稀釋至刻度。A.3.5.2.3 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液W1：稱取約50mg阿力甜標(biāo)準(zhǔn)樣品，精確至0.0001g，移入10mL容量瓶中，加5mL標(biāo)準(zhǔn)溶液A2，用水稀釋至刻度。A.3.5.2.4 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液W2：移取5mL0.02mL標(biāo)準(zhǔn)工作溶液W1至50mL容量瓶中，用水稀釋至刻度。A.3.5.3 試驗(yàn)溶液的制備A.3.5.3.1 試驗(yàn)溶液S1：稱取約50mg樣品，精確至0.0001g，置于10mL容量瓶中，用水稀釋至刻度。A.3.5.3.2 試驗(yàn)溶液S2：移取5mL0.02mL試驗(yàn)溶液S1至50mL容量瓶中，用水稀釋至刻度。A.3.5.4 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)按高效液相色譜操作規(guī)程開機(jī)預(yù)熱,調(diào)節(jié)溫度及流量,達(dá)到分析條件并基線平穩(wěn)。重復(fù)3次分別注入100L標(biāo)準(zhǔn)工作溶液W1和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液W2，-異構(gòu)體、阿力甜和丙氨酸酰胺的近似保留時(shí)間如表A.2所示。峰面積的變化系數(shù)（100乘以標(biāo)準(zhǔn)偏差除以平均峰面積）不應(yīng)超過2%。表A.2 各組分的近似保留時(shí)間組分名稱近似保留時(shí)間/min-異構(gòu)體6阿力甜10丙氨酸酰胺15注：本近似保留時(shí)間為150.4cm NovaPak色譜柱得到。如果使用其他色譜柱或長度不同，應(yīng)調(diào)整流動(dòng)相中乙腈的比例，以獲得所需的保留時(shí)間。A.3.5.5 測(cè)定 將流動(dòng)相泵入色譜柱，至基線不再漂移。在系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)條件下分析標(biāo)準(zhǔn)溶液和試驗(yàn)溶液。分三次注入工作標(biāo)準(zhǔn)W1，計(jì)算-異構(gòu)體和丙氨酸酰胺的平均峰面積。分三次注入工作標(biāo)準(zhǔn)W2，計(jì)算阿力甜的平均峰面積。分三次注入試驗(yàn)溶液S1，計(jì)算-異構(gòu)體和丙氨酸酰胺的平均峰面積。分三次注入試驗(yàn)溶液S2，計(jì)算阿力甜的平均峰面積。A.3.5.6 結(jié)果計(jì)算阿力甜的含量以w1計(jì)，數(shù)值以%表示，按式（A.1）計(jì)算： （A.1）式中：RA試驗(yàn)溶液S2中檢出峰的響應(yīng)值；WS阿力甜標(biāo)準(zhǔn)樣品減去水分后的質(zhì)量，單位為克（g）；PS異構(gòu)體或丙氨酸酰胺標(biāo)準(zhǔn)樣品的純度，（%）； RS標(biāo)準(zhǔn)工作溶液W2中檢出峰的響應(yīng)值；WA樣品減去水分后的質(zhì)量，單位為克（g）。異構(gòu)體的含量以w2計(jì)，數(shù)值以 % 表示，按式（A.2）計(jì)算： （A.2）式中：RA試驗(yàn)溶液S1中檢出峰的響應(yīng)值；WS未除去水分的異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)樣品或丙氨酸酰胺標(biāo)準(zhǔn)樣品的質(zhì)量，單位為克（g）；PS異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)樣品的純度，（%）；RS標(biāo)準(zhǔn)工作溶液W1中檢出峰的響應(yīng)值；WA樣品未除去水分的質(zhì)量，單位為克（g）；DF稀釋因子，即0.003。丙氨酸酰胺的含量w3，數(shù)值以 % 表示，按式（A.3）計(jì)算： （A.3）式中：RA試驗(yàn)溶液S1中檢出峰的響應(yīng)值；WS未除去水分的異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)樣或丙氨酸酰胺標(biāo)準(zhǔn)樣的質(zhì)量，單位為克（g）；PS異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)樣品的純度，（%）；RS標(biāo)準(zhǔn)工作溶液W1中檢出峰的響應(yīng)值；WA樣品未除去水分的質(zhì)量，單位為克（g）；DF稀釋因子，即0.003。A.4 比旋光度的測(cè)定A.4.1 稱取10g樣品，精確至0.001g，加水溶解并轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，測(cè)定溫度為250.5。比旋光度m（25,D）數(shù)值以“( )